prezentare doctorat
TRANSCRIPT
UNIVERSITATEA DE MEDICINĂ ŞI FARMACIE“GRIGORE T. POPA” IAŞI
FACULTATEA DE MEDICINĂ
Doctorand, ELENA HATNEANU (POPA)
Conducător ştiinţific, Prof. Univ. Dr. RODICA
PETROVANU
Iaşi - 2014
ROLUL RECEPTORILOR ACTIVAŢI DE
INDUCTORII
PROLIFERĂRII PEROXIZOMILOR - ALPHA
ÎN SINDROMUL METABOLIC
TEZĂ DE DOCTORAT
1
SINDROMUL METABOLIC
rezistenta la
insulina/hiperinsulinemie
obezitate de tip central
diabet zaharat/scaderea tolerantei
la glucoza
dislipidemie aterogena)
hipertensiune arteriala
status protrombotic
disfunctie endoteliala
hiperuricemie
status proinflamator
“CLUSTER” DE ALTERARI METABOLICE SI FACTORI DE RISC CARDIOVASCULARI
2
3
conditie clinica prediabetica
alterari metabolice independente
risc cardiovascular crescut prin initierea si
perpetuarea procesului aterosclerotic si
degenerativ inflamator
insulinorezistenta si hiperinsulinemia compensatorie
reprezenta elementul patogenic central
Sindrom metabolic - status- proinflamator
4
Relatia inflamatie sistemica -boli cronice
5
Receptorii activaţi de către inductorii proliferării peroxizomilor (Peroxisome proliferator- activated receptors-PPARs)
receptori nucleari, de tip proteic, similar cu receptorii pentru hormonii steroidieni sau tiroidieni 6
PPAR - alpha acţionează ca un factor de transcriere
ligand activat. Dupa stimularea de catre ligand, se
uneste cu receptorul RXR (Retinoid Receptor X )si
regleaza actiunea genelor implicate in metabolismul
acizilor grasi, inflamatie cr.
7
Studiul sindromului metabolic din punct de vedere al prevalenţei si status-ului proinflamator.
Investigarea prezenţei și a nivelului de expresie relativă a receptorilor PPARα în leucocitele circulante
8
Studiul sindromului metabolic s-a desfăşurat în două etape:
1. studiul epidemiologic transversal,2. studiul status-ului proinflamator la
pacienţii cu sindrom metabolic (studiu-caz martor)
9
Lotul de studiu
• 1530 subiecti (815 femei si 715 barbati) cu vârsta cuprinsă între 18 şi 91 ani, înscrisă pe lista medicului de familie •Dr. Popa Elena
Perioada de desfăşurare
• 01.01.2013– 31.12.2013• Subiecţii au fost programaţi să participe la studiu în luna naşterii.
10
Criterii de includere : vârsta peste 18 ani, capacitate de decizie, participare pe baza consimţământului
liber informat domiciliul stabil în România.
Criterii de excludere: vârstă sub 18 ani, femei gravide sau care alăptează, bolnavi în faza terminală, subiecţi care au refuzat semnarea
consimţământului informat.
11
IDFCriteriu obligatoriu: -Obezitate abdominală (CA ≥ 80 cm la femei, respectiv ≥ 94 cm la bărbaţi sau IMC≥30 kg/m2
+ minim două criterii din
următoarele: TAS ≥ 130 mmHg şi/ sau TAD ≥85 mmHg sau tratament antihipertensiv instituit anterior;Glicemie ≥ 100mg/dl sau DZ diagnosticat anterior;Trigliceride ≥150 mg/dl sau tratament specific pentru hiperTG;HDL-col <40 mg/dl la bărbaţi, respectiv < 50 mg/dl la femei sau tratament specific pentru această dislipidemie.
NCEP ATP IIIAsocierea a minimum trei din următoarele criterii:
Obezitate abdominală: (CA ≥ 102 cm la bărbaţi, respectiv 88 cm la femei);TA≥130/85mmHg sau tratament antihipertensiv anterior;Glicemie ≥ 110 mg/dl;Trigliceride ≥150 mg/dl;HDL-col < 40 mg/dl la bărbaţi, respectiv < 50 mg/dl la femei
Harmonised IAsocierea a minimum trei din următoarele criterii:Obezitate abdominală (CA ≥ 80 cm la femei, respectiv ≥ 94 cm la bărbaţi;TAS ≥ 130 mmHg şi/ sau TAD ≥85 mmHg sau tratament antihipertensiv instituit anterior;Glicemie ≥ 100mg/dl sau DZ diagnosticat anterior;Trigliceride ≥150 mg/dl sau tratament specific pentru hiperTG; HDL-col <40 mg/dl la bărbaţi, respectiv < 50 mg/dl la femei sau tratament specific pentru aceasta dislipidemie
12
Program de diagnostic al SM
încadrarea pacienţilor funcţie de componentele SM în SM3, SM4, SM5
editarea şi arhivarea unei fişe de observaţie
monitorizarea evoluţiei pacienţilor
compatibil cu softurile Microsoft Office Excel , SPSS şi Medcalc Statistical Software .
13
Sex Clasificarea subiecţilor conform Harmonized
Total
non SM SM3 SM4 SM5
F 611 118 63 23 815 (53,3%)
M 530 123 41 21 715 (46,7%)
1141 241 104 44 1530
74,60% 15,80% 6,80% 2,90%
Tabel X: Repartiţia subiecţilor conform criteriilor Harmonized I
Prevalenţa brută SM - 25,42 % (95%CI: 22,96-28,08)Prevalenţa standardizată a SM de 27,32 % (95% CI: 24,60-30,03).
14
ORa ORb Bărbaţi vs femei 1,04 0,95 Grupa 35-54 ani 7,21 7,16Sindrom metabolic
vs 20-34 ani
Grupa 55-69 ani 24,29 23,1 vs 20-34 ani Grupa 55-59 ani ani
vs 35-54 ani3,45 3,09
a -OR calculat pentru prevalenţele brute;
b - OR calculat pentru prevalenţele standardizate ajustate pentru vârsta şi sex
Comparaţii în lotul studiat ale prevalenţelor SM conform Harmonised
I
15
Sex Clasificarea subiecţilor conform criteriilor IDF
Total
Non SM SM3 SM4 SM5F 640 91 61 23 815 (53,3
%)M 565 92 37 21 715 (46,7
%) 1205 183 98 44 1530
78,80% 12,00% 6,40% 2,90%21,25%
(B – 20,98%; F- 21,47 %)
Sex Clasificarea subiecţilor conform ATP III
Non SM SM3 SM4 SM5F 682 86 39 8 815 (53,3%
)M 619 69 21 6 715 (46,7%
)1301 155 60 14 1530
85,00% 10,10% 3,90% 0,90%14,97%
(B – 13,43%; F- 16,32 %)
16
Populatia studiata
1530 subiecti (815 femei si 715 barbati) recrutati pentru studiul epidemiologic
Perioada de desfăşurare• 01.01.2013 – 31.12.2013
•.
Studiu de tip caz-martor
Au fost comparate doua loturi:
Lot cu sindrom metabolic Lot SM – 389 subiecti
Lot Control –Lot fara SM – 1141subiecti
17
Lot Control Număr 1141Mediana 40,0
0Percentila 25 29,0
0Percentila 75 57,0
0Lot SMNumăr 389Mediana 63,0
0Percentila 25 52,0
0Percentila 75 70,0
0
Figura 4.17: Comparaţie între cele două loturi referitoare la vârsta subiecţilor studiaţi
Var
sta
(ani
)
40
45
50
55
60
65
Lot Control Lot SM
P < 0,0001
18
LD
L- c
ol (m
g/dl
)
120
125
130
135
140
145
Lot Control Lot SM
P = 0,0002
LDL-col
Non
-HD
L-c
ol (m
g/dl
)150
155
160
165
170
175
180
185
Lot Control Lot Non-HDL-col
P < 0,0001
Non-HDL-col
19
Lot Control
Număr 1141
Mediana 3,97
Percentila 25 3,37
Percentila 75 4,82
Lot SM
Număr 389
Mediana 4,87
Percentila 25 3,84
Percentila 75 6,36
Rap
ort C
ol to
tal/H
DL
-col
4,2
4,4
4,6
4,8
5,0
5,2
5,4
5,6
5,8
Lot Control Lot SM
P < 0,0001
Raport Col total/HDL-col
20
Lot Control
Număr 1141
Mediana 4,10
Percentila 25 3,84
Percentila 75 5,80
Lot SMNumăr 389Median 5,29
Percentila 25 4,50
Percentila 75 6,20
Aci
d u
ric
mg/
dl
4,4
4,6
4,8
5,0
5,2
5,4
5,6
Lot Control Lot SM
P < 0,0001
Acid uric
21
Leucocite totale
Eozinofile Limfocite
Monocite PMN
Leu
coci
te/m
m3
6750
6800
6850
6900
6950
7000
7050
7100
7150
Lot Control Lot SM
P = 0,7565
Leucocite
Eoz
inof
ile/m
m3
160
170
180
190
200
210
220
230
240
Lot Control Lot SM
P < 0,0001
Eozinofile
Lim
foci
te/m
m3
2220
2240
2260
2280
2300
2320
2340
2360
2380
2400
Lot Control Lot SM
P = 0,8652
Limfocite
Mon
ocite
/mm
3
450
455
460
465
470
475
480
485
490
495
500
Lot Control Lot SM
P = 0,340
Monocite
PM
N/m
m3
3750
3800
3850
3900
3950
4000
4050
4100
4150
4200
Lot Control Lot SM
P= 0,0864
PMN
22
Comparaţie între valorile fibrinogenului
în cele două loturi
Fib
rin
ogen
(m
g/d
l)
290
300
310
320
330
340
Lot Control Lot SM
P < 0,0001
Fibrinogen
0
50
100
150
200
250
300
350
400
Fibr
inog
en (m
g/dl
)
non SM SM3 SM4 SM5
Fibrinogen
23
24
0 20 40 60 80 100
0
20
40
60
80
100
100-Specificitate
Sens
ibili
tate
Non-HDL-CCol T/ HDL-CAcid uricFibrinogenEozinofile
AUC 95% CI
Non-HDL-Col 0,605
0,580 - 0,630
Col total/HDL-col
0,607
0,642 - 0,691
Acid uric 0,655
0,630 - 0,679
Fibrinogen 0,690
0,658 - 0,720
Eozinofile 0,589
0,564 - 0,615
AUC 95% CI
Scor SM Harmonised I
1,000
0,997 - 1,000
CA 0,804
0,781 - 0,825
TAD 0,666
0,639 - 0,692
TAS 0,757
0,732 - 0,780
Glicemie 0,742
0,717 - 0,766
TG 0,756
0,732 - 0,780
HDL- Col 0,636
0,609 - 0,662
Scor Harmonised I
0 20 40 60 80 100
0
20
40
60
80
100
100-Specificitate
Sens
ibili
tate
Criterii diagnostic SM
0 20 40 60 80 100
0
20
40
60
80
100
100-SpecificitateSe
nsib
ilita
te CATADTASGlicemieTriglicerideHDL-C
Studiu de tip caz-martor
Au fost comparate doua loturi:› Lotul cu sindrom
metabolic – Lot SM(26 pacienti
› Lotul normal - Lot Non-SM)(31pacienti)
Material și metodă – studiu PPARα
Perioada de desfasurare 1.01.2014-28.02.2014
Candidatii au fost selectati si recrutati din populatia prezentata la consultatie la cabinetul medicului de familie
25
Lot SM vârsta peste 18 ani recrutarea pe baza semnării
Consimţământului liber informat,
SM nou-diagnosticat conform Harmonised I
fără istoric de diabet zaharat si/sau boală cardio-vasculară constituita
absenta tratamentului cu agonisti PPAR α (fibrati)
Lot Non-SM vârsta peste 18 ani recrutarea pe baza
semnării Consimţământului liber informat
absenţa diagnosticului de SM,
fără istoric de diabet zaharat si/sau boala cardiovasculara constituita
26
Studiul componentelor sindromului metabolic conform criteriilor Harmonised I› - evaluarea clinica - s-a desfăşurat în cadrul
Cabinetului de Medicină de Familie› - determinările hematologice şi biochimice
s- au efectuat în Laboratorul Ambulatorului Spitalului „Sf. Spiridon ” Iaşi
Evaluarea în citometrie de flux a nivelului relativ de expresie a PPARα prin metoda citometriei în flux in leucocitele circulante.- s-a desfăşurat în Laboratorul de Biologie Moleculară al Institutului Regional de Oncologie Iaşi
27
28
29
metodă convenţională pentru marcare de suprafaţă şi evaluare pe bază de citometrie în flux (cu focalizare pe monocite şi utilizând CD14 ca marker specific pentru monocite).
Intensitatea Medie a Fluorescenţei (MFI) a anticorpilor anti-CD36 a fost utilizată ca măsură a nivelului de expresie relativă a CD 36.
30
Au fost comparate doua loturi: Lot Non-SM (31 subiecti) si Lot SM (26 subiecti)
Tabel XXV. Comparaţie între criteriile de diagnostic ale SM în cele două loturi
Lot SM Lot Non-SM Valoarea P
Circumferinţa abdominală*(cm) 99,18 ± 10,75 79,38 ± 9,38 P < 0,001Glicemia (mg/dl) 118,93 ±
49,5790,14 ± 8,82 P < 0,01
Trigliceride (mg/dl) 189,47 ± 79,20
87,66 ± 27,79 P < 0,001
HDL-colesterol (mg/dl) 46,57 ± 10,26 57,71 ± 13,52 P = 0,001
Tensiunea arterială sistolică (mmHg)
132,50 ± 11,15
111,93 ± 13,64
P < 0,001
Tensiunea arterială diastolică
(mmHg)81,73 ± 9,48 72,09 ± 7,93 P < 0,001
Hipertensiunea arterială 69,23% 16,12% P < 0,001Tulburări ale metabolismului glucidic
19,23% 3,22% P < 0,001
Hipertrigliceridemie 80,76% 12,90% P < 0,001HDL-colesterol scăzut 65,38% 16,12% P < 0,001* -
31
Lot Non-SM Lot SM Valoarea P(t-Student)
Colesterol total(mg/dl)
199,94 ± 36,81 223,75±40,54 P = 0,02*
Non-HDL-col (mg/dl)
144,28 ± 37,73
178,84 ± 39,11 P = 0,002
LDL-col (mg/dl) 119,35 ± 27,46 145,109 ± 36,11
P = 0,005*
Acid uric (mg/dl)
4,60 ± 1,26 5,78±1,39 P = 0,001
Monocite/mm3 521,03 ± 188,55
579,60 ± 228,81
P = 0,3
Limfocite/mm3 2082,00 ± 576,10
2450,00 ± 952,91
P = 0,09
PMN/mm3 3946,00 ± 1482,68
4141,92 ± 1362,85
P = 0,61
Eozinofile/mm3 148,10 ± 90,26 210,73 ±127,10
P = 0,03
Fibrinogen (mg/dl)
234,00 ± 41,55 318, 50 ±35,68 P < 0,0001*
CRP (mg/dl) 1,59 ± 1,09 2,12±1,29 P = 0,14ASAT (U/l) 21,29 ±17,64 21,26 ± 5,99 P = 0,99ALAT (U/l) 23,33 ± 21,49 28,396 ± 9,95 P = 0,24Creatinina (mg/dl)
0,85 ± 0,20 0,91 ± 0,19 P = 0,27
Tabel XXVI. Comparaţie între caracteristicile loturilor
32
Tabel XXVII. Indicatori statistici calculaţi pentru toţi subiecţii investigaţi în
populaţia de monociteN 57Media 232,102SD 68,6704Mediana 226,000Minimum 78,600Maximum 379,000Percentila 25 183,00 Percentila 75 279,50
33
1 6 11 16 21 26 31
0
50
100
150
200
250
300
350
400
450
MF
I an
ti-P
PA
Ra
228,2
110,6
345,8
51,8
404,6
Media
LCI
LCI
50 100 150 200 250 300 350 400 450
0
5
10
15
20
25
30
35
MFI anti-PPAR a
Frec
vent
a rela
tiva (
%)
Lot SM
0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 5000
5
10
15
20
25
30
35
MFI anti-PPAR a
Frec
vent
a re
lativ
a (%
)
Lot martor
1 6 11 16 21 26 31 36
-100
0
100
200
300
400
500
MF
I an
ti-P
PA
Ra
235,4
81,0
389,7
3,9
466,9LCS
LCI
Media
34
Tabel XXVIII. Statistica descriptivă a nivelului de expresie relativă a
PPARα în monociteLot SM Lot Non-SM
N 26 31Media 228,19 235,38
SD 58,19 77,17Mediana 224,00 226,00Minimum 128,00 78,600Maximum 358,00 379,00Percentila
25183,00 183,00
Percentila 75
262,00 303,50
200
210
220
230
240
250
260
270
Lot SM Lot Non-SM
P= 0,69
35
AHC HTA prezente
Număr 22Mediana 199,50Percentila 25 178,00Percentila 75 227,00
AHC HTA absenteNumăr 35Mediana 248,00Percentila 25 190,25Percentila 75 317,00
Figura 5.15. Comparaţie între expresia PPARα în Mo funcţie de AHC de HTA
.).
MFI
ant
iPPA
Ra_
Mo
190
200
210
220
230
240
250
260
270
280
DA NU
AHC HTA
P=0,06
36
AHC DislipidemieNumăr 20Mediana 197Percentila 25 182,00Percentila 75 243,00
AHC Dislipidemie absenteNumăr 37Mediana 230,00Percentila 25 189,00Percentila 75 300,50
Figura 5.16. Comparaţie între expresia PPARα în Mo
funcţie de AHC de dislipidemie
MFI
ant
i-PP
ARa
Mo
190
200
210
220
230
240
250
260
270
280
DA NU
P = 0,20
AHC DISLIPIDEMIE
37
Tabel XXIX :Variabila MFI anti-PPARα Ly- statistica descriptivă
N 57Media 180,58SD 56,00Mediana 167,00Minimum 74,80Maximum 314,00Percentila 25 139,50Percentila 75 218,25
38
50 89 128 167 206 244 283 322 361 400
0
5
10
15
20
25
30
35
MFI anti-PPAR a
Frec
vent
a re
lativ
a (%
)
Lot SM
1 6 11 16 21 26 31
-50
0
50
100
150
200
250
300
350
400
MF
I an
ti-P
PA
R a
181,8
59,5
304,1
-1,7
365,3
Media+2DS
Media- 2DS
0 50 100 150 200 250 300 350
0
5
10
15
20
25
30
35
40
MFI anti-PPAR a
Frec
vent
a re
lativ
a (%
)
Lot Non-SM
1 6 11 16
21
26
31
36
0
50
100
150
200
250
300
350
MF
I an
ti-P
PA
R a
179,6
75,0
284,1
22,7
336,4
Media+2DS
Media
Media- 2DS
39
150
160
170
180
190
200
210
Lot SM Lot Non-SM
P = 0,88
Tabel XXX: Statistica descriptivă - nivelul de expresie relativă a
PPARα în limfociteLot SM Lot Non-SM
N 26 31Media 181,781 179,574SD 61,16 52,29Mediana 165,000 168,000Minimum 81,300 74,800Maximum 314,000 301,000Percentila 25
134,00 145,750
Percentila 75
218,00 217,00
40
AHC HTA prezente
Număr 22Mediana 160,00Percentila 25 127,00Percentila 75 171,00
AHC HTA absente
Număr 35Mediana 187,00Percentila 25 149,00Percentila 75 231,75
Figura 5.22. Comparaţie între expresia PPARα în Ly funcţie de AHC de HTA
MFI
ant
i-PP
ARa L
y
130
140
150
160
170
180
190
200
210
DA NU
AHC HTA
P=0,09
41
AHC Dislipidemie prezenteNumăr 20Mediana 158,00Percentila 25 135,00Percentila 75 186,50
AHC Dislipidemie absenteNumăr 37Mediana 179,00Percentila 25 148,75Percentila 75 224,25
Figura 5.23. Comparaţie între expresia PPARα în Ly funcţie de AHC de dislipidemie
MF
I an
ti-P
PA
RaLy
140
150
160
170
180
190
200
210
DA NU
AHC DISLIPIDEMIE
P=0,51
42
Analiza nivelului de expresie relativă a PPARα în neutrofile
(PMN)
Tabel XXXI . Variabila MFI anti-PPARα PMN statistica descriptivă
N 55Media 263,927SD 70,6493Mediana 255,000Minimum 163,000Maximum 419,000Percentila 25 196,500 Percentila 75 312,750
43
50 100 150 200 250 300 350 400 450 500
0
5
10
15
20
25
30
35
MFI anti-PPAR a
Frec
vent
a re
lativ
a (%
)
Lot SM
50 100 150 200 250 300 350 400 450 500
0
5
10
15
20
25
30
MFI anti-PPAR a
Frec
vent
a re
lativ
a (%
)
Lot Non-SM
1 6 11
16
21
26
31
0
50
100
150
200
250
300
350
400
450
500
MF
I an
ti-
PP
AR
a
262,7
124,4
401,0
55,3
470,2
Media + 2DS
Media - 2 DS
Media
1 6 11
16
21
26
31
36
0
50
100
150
200
250
300
350
400
450
500
MF
I an
ti-P
PA
Ra
264,8
123,0
406,6
52,2
477,4
Media+ 2DS
Media - 2DS
Media
44
Tabel XXXII . Statistica descriptivă a nivelului de expresie relativă a
PPARα în PMN
Lot SM Lot Non-SMN 26 31Media 262,73 264,80SD 69,15 70,88Mediana 259,00 255,00
Minimum 172,00 163,00
Maximum 395,00 419,00
Percentila 25 198,00 196,00
Percentila 75 305,00 315,00
230
240
250
260
270
280
290
300
Lot SM Lot Non-SM
P=0,90
Comparaţie între nivelul de expresie a PPARα în PMN- lot SM vs Lot Non-SM
45
AHC HTA prezenteNumăr 22Mediana 224,00Percentila 25 194,00Percentila 75 279,50
AHC HTA absenteNumăr 35Mediana 273,00Percentila 25 205,50Percentila 75 336,75
Figura 5.29. Comparaţie între expresia PPARα în PMN
funcţie de AHC de HTA
MFI
ant
i-PPA
Ra
PM
210
220
230
240
250
260
270
280
290
300
310
DA NU
AHC HTA
P = 0,13
46
AHC Dislipidemie prezente
Număr 20
Mediana 225,00
Percentila 25 193,50Percentila 75 274,50
AHC Dislipidemie absente
Număr 37
Mediana 280,00
Percentila 25 222,00Percentila 75 325,50
Figura 5.30. Comparaţie între expresia PPARα în polimorfonucleare
funcţie de AHC de dislipidemie
MFI
ant
i-PP
ARa
PM
210
220
230
240
250
260
270
280
290
300
DA NU
AHC DISLIPIDEMIE
P = 0,17
47
Analiza nivelului de expresie relativă a PPARα în eozinofile
Tabel XXXIII :Variabila MFI anti-PPARα Eo
statistica descriptivăN 57
Media 1595,98SD 431,571
Mediana 1638,00Minimum 350,00Maximum 2506,00
Percentila 25 1379,50Percentila 75 1759,00
48
0 500 1000 1500 2000 2500 3000
0
10
20
30
40
50
MFI anti-PPAR a
Fre
cven
ta r
elat
iva
(%)
Lot SM
400 800 1200 1600 2000 2400 28000
5
10
15
20
25
30
35
40
45
MFI anti-PPAR a
Fre
cent
a re
lativ
a (%
)
Lot Non-SM
1 6 11 16 21 26 31
-500
0
500
1000
1500
2000
2500
3000
MF
I an
ti-P
PA
Ra
1410,6
476,5
2344,7
9,4
2811,7
Media + 2DS
Media- 2DS
LCI
LCS
1 6 11 16 21 26 31 36
500
1000
1500
2000
2500
3000
MF
I an
ti-P
PA
Ra
1722,1
970,8
2473,4
595,1
2849,0
LCI
Media-2DS
Media
Media +2 DS
LCS
49
Comparaţie între nivelul de expresie a PPARα în Eo- lot SM vs Lot Non-SM
1200
1300
1400
1500
1600
1700
1800
1900
Lot SM Lot Non-SM
P=0,0072
Tabel XXXIV: Statistica descriptivă a nivelului de expresie relativă a PPARα în
EoLot SM Lot Non-SM
N 26 31Media 1410,57 1722,09
SD 476,04 375,65Mediana 1424,50 1713,00Minimum 350,00 685,00Maximum 2337,00 2506,00Percentila
251193,00 1532,25
Percentila 75
1697,00 1995,50
50
AUC 0,663
Eroarea standard 0,0805
Interval Confidenţă 95%
0,515- 0,790
Z statistic 2,021
Valoarea P (Aria = 0.5)
0,0433
Criteriu asociat ≤1533
Interval Confidenţă 95%
≤1314 - ≤1711
Sensibilitate 56,52
Specificitate 77,78
Curba ROC MFI anti-PPARα Eo
51
AHC HTA prezenteNumăr 22Mediana 1488,00
Percentila 25 1164,25
Percentila 75 1707,50AHC HTA absente
Număr: 35Mediana 1708,50Percentila 25 1437,00
Percentila 75 1950,00
Figura 5.37. Comparaţie între expresia PPARα în Eo funcţie de AHC de HTA
MFI
ant
i-PP
AR
a Eo
1000
1100
1200
1300
1400
1500
1600
1700
1800
1900
DA NU
AHC HTA
P=0,0023
52
AHC DislipidemieNumăr 20Mediana 1632,0000Percentila 25 1372,5000
Percentila 75 1735,7500AHC Dislipidemie absente
Număr 37Mediana 1682,0000
Percentila 25 1394,0000
Percentila 75 1950,0000
Figura 5.38. Comparaţie între expresia PPARα în PMN funcţie de AHC de dislipidemie
MFI
ant
i-PPA
RaE
o
1400
1450
1500
1550
1600
1650
1700
1750
1800
1850
DA NU
P = 0,67
AHC DISLIPIDEMIE
53
Analiza nivelului de expresie relativă a receptorilor CD36
Tabel XXXVI. Variabila MFI anti-CD36: statistică descriptivă.
N 57Media 3971, 33Deviatia standard 1209,02Mediana 3811,00Minimum 877,00Maximum 6933,00Percentila 25 3231,25Percentila 75 4650,50 54
1000 2000 3000 4000 5000 6000 7000 8000
0
5
10
15
20
25
MFI anti-CD36
Frec
vent
a re
lativ
a (%
)
Lot SM
0 1778 3556 5333 71110
5
10
15
20
25
30
35
MFI anti-CD36
Fre
cven
ta r
elat
iva
(%)
Lot Non - SM
1 6 11 16
21
26
31
0
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
Pacienti
MF
I an
ti-C
D3
6
4290,3
2109,3
6471,4
1018,8
7561,9
LCI
Media
LCS
1 6 11 16 21 26 31 36
-1000
0
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
MF
I an
ti- C
D3
6
3703,8
1193,5
6214,1
-61,6
7469,2Media + 2 DS
Media
Media - 2 DS
55
Comparaţie între nivelul de expresie a CD36 - lot SM vs Lot Non-SM
Tabel XXXVII : Statistica descriptivă a nivelului de expresie relativă a CD36 în
monociteLot SM Lot Non-SM
N 26 31Media 4290,34 3703,77Deviatia Standard
1090,51 1255,14
Mediana 4110,00 3628,00Minimum 2664,00 817,00Maximum 6933,00 6168,00Percentila 25 3462,00 2737,50Percentila 75 4690,00 4533,00
3200
3400
3600
3800
4000
4200
4400
4600
4800
Lot SM Lot Non-SM
P = 0,0676
56
AHC HTANumăr 22Mediana 4428,00
Percentila 25 3552,75
Percentila 75 5194,75
AHC HTA absenteNumăr 35Mediana 3774,00Percentila 25 3169,00
Percentila 75 4434,00Figura 5.45. Comparaţie între expresia CD36 în Mo
funcţie de AHC de HTA
MFI
ant
i-C
D36
3400
3600
3800
4000
4200
4400
4600
4800
5000
DA NU
AHC HTA
P = 0,08
57
AHC Dislipidemie prezenteNumăr 20Mediană 4089,00Percentila 25 3503,50Percentila 75 4991,00
AHC Dislipidemie absenteNumăr 37Mediană 3785,00Percentila 25 3230,00Percentila 75 4634,00
Figura 5.46. Comparaţie între expresia CD36 în Mo funcţie de AHC de dislipidemie
MF
I an
ti-C
D36
3600
3800
4000
4200
4400
4600
4800
5000
5200
DA NU
P = 0,31
AHC DISLIPIDEMIE
58
Corelatii dintre receptorii PPARα în SM
59
Figura 5.48. Corelaţii între receptorii PPARα în lotul martorA. Mo vs PMN; B. Mo vs Ly;C. PMN vs Ly;
60
Figura 5.49. Corelaţii între expresia receptorilor PPARα în Eo şi alte tipuri de receptori investigaţi A.PPARα Eo şi CD 36 (Lot SM)
61
Figura 5.50.Corelaţii dintre receptorii
PPARα şi CA: A. Mo; B. Ly; C. PMN
62
Figura 5.54. Lot SM: Corelaţiiîntre expresia PPARα şi HDL-col
Figura 5.51. Lot SM: Corelaţii între expresia PPARα şi TG
63
Figura 5.55. Lot SM: corelaţia dintre expresia PPARα în Eo şi acidul uric (A), respectiv PPARα
şi fibrinogen (B)
B.
0 500 1000 1500 2000 2500200
250
300
350
400
450
PPARα Eo
Fib
rin
ogen
mg/
dl
r =- 0,36; P = 0,08
64
Aplicarea scorului de SM, alături de implementarea algoritmului electronic de diagnostic contribuie la o prelucrare rapidă, eficientă și standardizată a informaţiilor, la nivelul medicinei primare
Prevalenţa SM, calculată astfel în cadrul studiului, este crescută (27,32%), în concordanţă cu datele raportate.
Sindromul metabolic se caracterizează printr-un status inflamator cronic.
Prin metoda citometriei în flux, am demonstrat prezenta Receptorilor Activaţi de Inductorii Proliferării Peroxizomilor – Alpha (PPARα) în toate populaţiile de leucocite studiate (monocite, limfocite, polimorfonucleare, eozinofile), atât în lotul pacienţilor cu sindrom metabolic, cât şi în lotul martor.
65
Acest studiu este primul care a demonstrat existenţa unei scăderi statistic semnificative a nivelului de expresie relativă a receptorilor PPARα în eozinofilele pacienţilor cu sindrom metabolic.
confirmând cercetările recente care au evidenţiat rolul eozinofilelor şi al receptorilor PPARα în obezitate, reglarea inflamaţiei cronice şi aterogeneza.
În populaţiile de monocite, limfocite şi polimorfonucleare, am observat corelaţii puternice, semnificativ statistic între expresia PPARα în aceste tipuri celulare, sugerând existenţa unui mecanism unic de control al inflamaţiei cronice la nivelul acestor celule, probabil diferit de cel din eozinofile.
66
67
•La subiecţii cu sindrom metabolic, expresia relativă a PPARα în Eo este invers asociată cu expresia receptorului CD36 (receptor al particulelor de ox - LDL şi propus ca un marker precoce al aterosclerozei), dovedind rolul antiinflamator al receptorilor PPARα la nivel endotelial.•La pacienţii cu antecedente heredo-colaterale de hipertensiune arterială, nivelul de expresie al receptorilor PPARα în eozinofile şi monocite este diminuat comparativ cu subiecţii fără antecedente familiale de hipertensiune arterială. Putem spune că studiul efectuat de noi, aduce informaţii importante legate de geneză aterosclerozei şi hipertensiunii arteriale.•Prin studiul asocierilor dintre receptorii PPARα şi componentele clinice ale sindromului metabolic am arătat rolul acestor receptori în determinismul obezităţii de tip central, nivelul expresiei relative a receptorilor PPARα fiind invers proporţional cu circumferinţa abdominală.
În acelaşi timp, nivelul de expresie a PPARα în sindromul metabolic este asociat pozitiv cu concentraţia serică a HDL-colesterolului şi invers asociat cu nivelul trigliceridelor serice, dovedind rolul acestor receptori în diminuarea procesului inflamator cronic de la nivel vascular.
La pacienţii cu sindrom metabolic, scăderea expresiei receptorilor PPARα în eozinofile este corelată cu creşterea unor markeri ai sindromului inflamator cronic cardiometabolic (acid uric, fibrinogen), ilustrând importanta receptorilor în reglarea status-ului inflamator cronic din sindromul metabolic
68
69