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1. Introducción. Según ODEPA, (2004) el palto (Persea americana Mill) es, la especie frutal que mayor incremento ha tenido en superficie plantada en Chile durante los últimos cinco años, y su cultivo continúa en expansión. Por este motivo es necesario incentivar su industrialización para darle un uso alternativo a los descartes de exportación y evitar una sobre oferta en el mercado nacional e internacional. Además su fruto posee valiosas propiedades aprovechadas en la alimentación humana, entre ellas se destacan su alta concentración de proteínas, su alto contenido en aceites insaturados y la ausencia de colesterol. A nivel mundial se ubica en países con climas subtropicales, dónde se destacan diferentes variedades de frutos, a su vez obtenidos de tres diferentes razas de palta, como la Mexicana, la Guatemalteca y la Antillana (Vidales, 2005). En cuanto a su composición química se caracteriza por ser rica en proteínas, minerales, vitaminas y los aceites insaturados ácido oleico, ácido palmítico, ácido linoleico y compuestos no saponificables, a ellos pertenecen el ß-sitoesterol y el Campesteol. Dichos compuestos se destacan por una serie de beneficios como la disminución del riesgo de sufrir enfermedades cardiovasculares, al disminuir los niveles de colesterol LDL en la sangre, por su uso en la prevención de la hiperplasia prostática benigna, o por sus propiedades cosmetológicas (Licata, 2007). A pesar de la importancia de los compuestos no saponificables en la palta, no se cuenta con información acerca de su evolución durante el desarrollo de frutos de palto en las variedades Hass, Fuerte e Isabel. Se pretende demostrar que existe evolución a lo largo del desarrollo del fruto en las variedades Hass, Fuerte e Isabel en el perfil lipídico y en el contenido de los compuestos no saponificables ß-sitoesterol y Campesterol . Para ello se realizó el siguiente estudio, cuyos objetivos son:

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Page 1: PONTIFICIA UNIVERSIDAD CATÓLICA DE VALPARAÍSOucv.altavoz.net/prontus_unidacad/site/artic/...La palta se ubica como uno de los productos con más demanda en las ferias libres y centrales

1. Introducción.

Según ODEPA, (2004) el palto (Persea americana Mill) es, la especie frutal que mayor

incremento ha tenido en superficie plantada en Chile durante los últimos cinco años, y su

cultivo continúa en expansión. Por este motivo es necesario incentivar su industrialización

para darle un uso alternativo a los descartes de exportación y evitar una sobre oferta en el

mercado nacional e internacional.

Además su fruto posee valiosas propiedades aprovechadas en la alimentación humana,

entre ellas se destacan su alta concentración de proteínas, su alto contenido en aceites

insaturados y la ausencia de colesterol. A nivel mundial se ubica en países con climas

subtropicales, dónde se destacan diferentes variedades de frutos, a su vez obtenidos de

tres diferentes razas de palta, como la Mexicana, la Guatemalteca y la Antillana (Vidales,

2005).

En cuanto a su composición química se caracteriza por ser rica en proteínas, minerales,

vitaminas y los aceites insaturados ácido oleico, ácido palmítico, ácido linoleico y

compuestos no saponificables, a ellos pertenecen el ß-sitoesterol y el Campesteol. Dichos

compuestos se destacan por una serie de beneficios como la disminución del riesgo de

sufrir enfermedades cardiovasculares, al disminuir los niveles de colesterol LDL en la

sangre, por su uso en la prevención de la hiperplasia prostática benigna, o por sus

propiedades cosmetológicas (Licata, 2007).

A pesar de la importancia de los compuestos no saponificables en la palta, no se cuenta

con información acerca de su evolución durante el desarrollo de frutos de palto en las

variedades Hass, Fuerte e Isabel.

Se pretende demostrar que existe evolución a lo largo del desarrollo del fruto en las

variedades Hass, Fuerte e Isabel en el perfil lipídico y en el contenido de los compuestos

no saponificables ß-sitoesterol y Campesterol . Para ello se realizó el siguiente estudio,

cuyos objetivos son:

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Objetivos generales:

Determinación del perfil de ácidos grasos para las variedades Hass, Fuerte e Isabel.

Cuantificar la evolución de los compuestos no saponificables ß-sitoesterol y Campesterol

a lo largo del desarrollo del fruto en cada una de las variedades analizadas.

Objetivos específicos:

Determinar la relación existente entre la evolución del contenido de aceite y la evolución

del perfil lipídico, en cada una de las variedades analizadas.

Determinar la relación existente entre la evolución del contenido de aceite y la evolución

del contenido de los compuestos no saponificables ß-sitoesterol y Campesterol, en cada

una de las variedades analizadas.

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2. Revisión bibliográfica.

2.1 Antecedentes generales del palto.

La palta (Persea americana Mill) es una dicotiledónea perteneciente al orden de las

Ranales y la familia de las Laureáceas. Originaria de Mesoamérica, que abarca las

regiones de México y Guatemala (Maldonado, 1990).

La información más reciente de FAO y del USDA señala que la superficie mundial de

paltos, continúa en expansión y supera en la actualidad las 380 mil ha, cifra que

representa un incremento significativo en la década de los 90 y comienzos de los años

2000. En Chile para el 2006 los huertos comerciales de paltos alcanzarían una superficie

del orden de 23.500 ha, de las cuales sobre 20.000 ha serían de la variedad Hass (FAO,

2006).

La palta se ubica como uno de los productos con más demanda en las ferias libres y

centrales de abastecimiento del país, el consumo per-cápita a nivel nacional alcanza

4kg/habitante/año. Así, Chile queda como el primer productor de paltas en el ámbito

sudamericano y principal mercado de exportación de este producto en la zona, ocupando

el tercer lugar en el mundo luego de México y Estados Unidos (Mancini, 2002).

Características que influyen directamente en la demanda de este fruto son su agradable

sabor, alto valor nutritivo, siendo una fruta que contiene todos los elementos nutritivos

tales como: hidratos de carbono, proteínas, vitaminas, minerales, y lípidos (Agrobit, 2005).

Los lípidos de la palta son fácilmente digeridos por el hombre, además se ha encontrado

que el aceite de palta contiene ácidos grasos insaturados, los cuales son importantes por

su acción anticolesterol, ya que el consumo de ácidos grasos insaturados retarda o

previene la formación de placas que producen las enfermedades coronarias. Junto con

esto se debe señalar que los ácidos grasos constituyentes del aceite de palta en su

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mayoría corresponden a los denominados esenciales (Torres, 2005).

2.2 Composición química del fruto.

La composición química de todas las variedades es similar como así también su

biodisponibilidad nutricional, y es aquí donde se destaca este vegetal, ya que su fácil

preparación y su estado natural sin necesidad de cocción hacen que permanezcan

intactas todas las concentraciones de vitaminas, minerales y nutrientes que contiene

(Vidales, 2005).

Posee un alto contenido de potasio y bajo contenido de sodio, contiene además ácido

ascórbico, cobre, manganeso, magnesio, hierro y también calcio. La palta contiene todas

las vitaminas liposolubles en cantidades muy significativas respecto de los requerimientos

diarios de las mismas, lo cuál la transforma en un alimento de altísimo valor biológico.

Esto representa un hecho trascendente desde el punto de vista nutricional ya que en

general, los alimentos que poseen una proporción de vitaminas y minerales equivalentes,

tienen colesterol en su composición. Lo mismo ocurre cuando se balancea cantidad y

calidad de vitaminas y minerales en detrimento de otros, al preparar una dieta, el

colesterol y los ácidos grasos saturados están siempre presentes (Vergara, 2005).

Contiene sustancias que mejoran la salud y previenen enfermedades.

Destacándose entre ellas el glutatión, poderoso antioxidante que previene enfermedades

degenerativas, cardiovasculares, reduce el daño que los radicales libres ocasionan a las

células, como el envejecimiento prematuro. Además posee Luteína que es un carotenoide

que protege contra enfermedades de los ojos, como la degeneración de la mácula,

vitamina E que es también un antioxidante, fibra soluble e insoluble, que favorecen la

disminución de colesterol y el tránsito gastro intestinal, es rico también en Fitoesteroles,

que previenen algunos tipos de cáncer (Torres, 2005).

Con un consumo diario de apenas 100 g de palta, se obtienen prácticamente el 20% de

todas las necesidades de minerales y proteínas, aunque en algunos casos como el de la

vitamina D, ese requerimiento es cubierto en un 100%. Para dejar claro el valor nutricional

de la palta comparemos su composición con la del aceite de oliva (recomendado para los

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problemas cardiovasculares e hipercolesterolemias y displisemias en general); mientras

que 100 g de aceite de oliva contienen 14 g de ácidos grasos saturados, 72 g de ácidos

grasos monoinsaturados y 9 g de ácidos grasos polinsaturados, la palta tiene 10 g, 78 g y

10 g respectivamente, lo que la coloca en mejor posición que aquel, ya que además tiene

valores nutritivos que ni el aceite de oliva ni la propia aceituna poseen. En base a lo

expuesto anteriormente, podemos afirmar que la palta no sólo carece de colesterol, sino

que su consumo regular favorece el descenso del mismo y aporta minerales, vitaminas y

calorías suficientes como para constituirse en un alimento de elección en la composición

de una dieta natural. Realmente la palta ha sido dotada de una composición química

notable y de ello están dando cuenta numerosos países del mundo que comienzan a

adoptarla en sus programas de alimentación (Vidales, 2006).

2.3 Desarrollo del fruto.

La palta es clasificada como un fruto climatérico, por lo tanto en su evolución la baya

presenta un peack respiratorio, una fase preclimatérica, una crisis climatérica y un

período postclimatérico. Es por ello que presenta ciertas características que la hacen algo

diferente de los demás frutos. La curva de crecimiento es sigmoidea, presentando una

rápida división celular en los primeros estados. Esta no cesa como en otras especies, sino

que continúa mientras permanece la fruta en el árbol. El contenido de aceite es bajo al

comienzo del desarrollo del fruto y aumenta con gran rapidez próximo al momento de

cosecha (Agrobit, 2005).

2.4 Breve descripción de las variedades analizadas.

La variedad Hass posee un fruto de alta calidad con un contenido de aceite entre 15 y

20%, pesa entre 180 a 360 g. El mínimo contenido de aceite aceptado para su cosecha

es un 9%. En la V región se cosecha generalmente a partir del mes de julio. La buena

calidad de la fruta permite que la variedad Hass sea la más comercializada, tanto a nivel

de mercado nacional como internacional, no existiendo hasta el momento una que la

reemplace (Esteban, 1993).

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La variedad Fuerte corresponde a un híbrido de mexicano por guatemalteca, produce

fruta de muy buena calidad. El mínimo contenido de aceite aceptado para un nivel de

palatabilidad aceptable es un 10,36% (Latorre, 1994). En la V región suele cosecharse

desde el mes de mayo a fines de noviembre (Esteban, 1993).

La variedad Isabel surge de manera espontánea producto de la polinización cruzada de

las variedades Hass y Bacon, la posibilidad de tener porcentajes adecuados de aceite

para su cosecha antes que Hass, hacen que sea considerada una variedad atractiva. La

temporada de cosecha es prolongada y se inicia aproximadamente a finales del mes de

julio, un poco más temprano que Hass, y termina a finales del mes de enero (Guajardo,

2002). El mínimo contenido de aceite para un nivel de palatabilidad aceptable es un

11,8% (Bontá, 2006).

2.5 Aceite de palta y su contenido en ácidos grasos.

A medida que el fruto se desarrolla, existe un incremento significativo en el contenido de

aceite y a su vez cada cultivar presenta curvas características. (Saavedra, 1995). La

madurez durante la última etapa de desarrollo del fruto, cuando baja la tasa de

crecimiento, se caracteriza por la acumulación de aceites y materia seca con disminución

de agua (Caro, 1998).

En Chile Olaeta (1991) y Undurraga et al. (1987), estudiaron el nivel mínimo de madurez

requerido para diversos cultivares de palta producidos en el país, medido según

porcentaje de aceite, además se estableció un modelo que permite estimar el porcentaje

de aceite.

Según Olaeta et al. (1999). en relación a los ácidos grasos determinó que es el oleico el

predominante, superando el 50%. Con niveles cercanos al 10% y 8% se presentan los

ácidos palmítico y linoleico, respectivamente, en tanto que el ácido esteárico aparece solo

en determinados momentos de la evolución de la palta. Otro aspecto de gran interés, es

que se detecta una disminución de los contenidos de ácido oleico a medida que la fruta

sobrepasa su nivel óptimo de madurez de cosecha.

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La formación de aceite se lleva a cabo en el mesocarpio, en células especializadas, y

depende del rompimiento del material hidrocarbonado a acetato, seguido de una síntesis

de ácidos grasos desde el acetato, de tal manera que disminuyen los azúcares

almacenados en la pulpa de la palta y aumenta el contenido de aceite durante el

crecimiento y desarrollo del fruto (Cummings y Schroeder, 1942).

El mínimo contenido de aceite aceptado den Chile para la variedad Hass es de un 9%

(Esteban, 1993).

Según su nivel de palatabilidad, el mínimo contenido de aceite aceptado en Chile en las

variedades Fuerte e Isabel es el siguiente:

Fuerte: 10,36% de aceite (Esteban, 1993).

Isabel: 11,8% de aceite (Bontá, 2006).

Los ácidos grasos presentes en la palta son ácidos carboxílicos con cadenas laterales

hidrocarbonadas, raramente se encuentran libres en la naturaleza, ya que más bien se

hayan en forma esterificada. En las plantas superiores y en los animales, los restos de

ácidos grasos predominantes son los de las especies de C16 y C18, los ácidos palmítico,

oleico, linoleico y esteárico pertenecen a esta clasificación (Nelson et al., 2001).

La palta contiene un contenido lipídico muy bajo en ácidos grasos saturados, y muy rico

en insaturados que inhiben la absorción del colesterol. Los monoinsaturados están

representados mayoritariamente por el ácido oleico, y los poliinsaturados están

representados casi en su totalidad por el ácido linoleico. (Zamora, 2005). Posee entre un

70 y un 77% de grasas monoinsaturadas que ayudan a disminuir el colesterol “malo” LDL

depositado en las arterias (Vergara, 2005).

Según Inoue (1995), el mayor porcentaje de ácidos grasos en el mesocarpio del fruto está

representado por el ácido oleico, seguido por el ácido palmítico, ácido linoleico, ácido

palmitoleico y ácido linolénico.

2.6 Lípidos no saponificables.

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Los lípidos no saponificables, corresponden a aquellos lípidos que no poseen ácidos

grasos en su estructura, y no producen reacciones de saponificacción (reacción que da

lugar a moléculas de jabón al reaccionar los acilglicéridos frente a bases). Entre los lípidos

insaponificables encontramos terpenos, prostaglandinas y esteroles. A estos últimos

pertenecen el ß-sitoesterol y el Campesterol, cuya estructura se presenta en la Figura 1

(Licata, 2007).

En el aceite de palta o aguacate el residuo insaponificable, rico en ß-sitosterol,

Campesterol y Stigmasterol, puede alcanzar hasta 11% (Razeto et al., 2005). Sin

embargo, según Gonzalez de Pedro (2005), la fracción insaponificable en la palta alcanza

sólo un 0,5 a un 2,5%. Cabe destacar que dependiendo de la zona y de la variedad

estudiada, los valores pueden oscilar (Astiasarán, 2006).

Los esteroles se presentan en cantidades pequeñas en las grasas y aceites en forma

libre, como ésteres de ácidos grasos y como glucósidos. Los esteroles de origen vegetal

se conocen como Fitoesteroles y comprenden el ß-sitoesterol, Stigmastrol y

Brassicasterol. El colesterol se encuentra también en concentración baja en las fracciones

de esteroles de algunos aceites y grasas vegetales (Egan et al., 1988).

La literatura científico-médica describe para los Fitoesteroles una gran variedad de

efectos fisiológicos. Se les atribuye propiedades antiinflamatorias, antitumorales,

bactericidas y funguicidas. Sin embargo el efecto mejor caracterizado y científicamente

demostrado, es elefecto hipercolesterolémico, tanto a nivel de colesterol total como de

colesterol-LDL. Dicho efecto ha motivado a diferentes empresas en el desarrollo de

productos enriquecidos con estos esteroles vegetales. En Europa, Estados Unidos y en

algunos países Latinoamericanos se están elaborando bebidas, jugos, leches y yogurt

adicionados con Fitosteroles (Valenzuela y Ronco, 2004). La primera publicación que

describe el efecto hipocolesterolemiante de los esteroles vegetales data de 1953. El

interés científico continuado por esta acción de los esteroles vegetales ha motivado desde

entonces un centenar de trabajos científicos, entre los que figuran más de 60 estudios

clínicos publicados que han sido objeto de diversas revisiones bibliográficas (Astiasarán,

2006).

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Los esteroles vegetales se encuentran en aceites vegetales de girasol, maíz, oliva, palta,

legumbres, cereales, frutas, verduras y algunos frutos secos. Poseen una estructura

similar a la del colesterol y en las plantas desempeñan un papel parecido al del colesterol

en los humanos, es decir, el mantenimiento de la estructura y función de la membrana

celular. Se han identificado más de 40 esteroles vegetales, siendo los más abundantes el

ß-sitoesterol Campesterol y Stigmasterol (Todos presentes en la palta) (Hendriks et al.,

1999).

Desde hace varias décadas se sabe que ciertos tipos de esteroles vegetales, pueden

disminuir las concentraciones plasmáticas de colesterol. Los esteroles vegetales, al ser

más hidrofóbicos que el colesterol, pueden desplazarlo de las micelas de absorción. De

esta forma, y por un fenómeno de competición, disminuye la incorporación del colesterol a

las micelas y, por consiguiente, su absorción intestinal. En el intestino delgado, los ésteres

de esteroles vegetales son sometidos a hidrólisis y se convierten en esteroles vegetales

libres y ácidos grasos. Parte de los esteroles vegetales libres y del colesterol coprecipitan

y forman partículas no solubles que se excretan a través de las heces (Hendriks et al.,

1999).

El ß-sitoesterol, el campesterol y el stigmasterol, en su conjunto constituyen el 95 al 98%

de los Fitoesteroles identificables en extractos vegetales (Valenzuela y Ronco, 2004).

Figura 1: Estructura química del ß-sitoesterol y Campesterol

La palta es rica en ß-sitoesterol (0,45-1%) que es probablemente el esterol de plantas

más abundante y ampliamente distribuido. Diversos estudios han demostrado su

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efectividad en el tratamiento de la hiperplasia prostática benigna. Varios estudios han

demostrado la efectividad clínica de la fitoterapia basada en Fitoesteroles (principalmente

ß-sitoesterol) en el tratamiento de las patologías antes mencionadas, dando así soporte

científico al uso tradicional y de larga data que se le ha dado en algunos países europeos.

Los vegetales de la dieta constituyen una fuente diaria de ß-sitoesterol. Los esteroles de

plantas, incluyendo los sitoesteroles, son constituyentes de creciente importancia en

nuestra dieta. Este esterol, relacionado estructuralmente con el colesterol, contiene un

grupo ß-etilo en el C-24 del esqueleto del colesterol, lo que lo hace más lipofílico (Fierro et

al., 2005).

Según De Girolami (2004), de acuerdo con una investigación realizada por la Universidad

de California en Los Angeles (UCLA), la palta es un alimento que contiene micronutrientes

que ayudan a combatir enfermedades cardíacas y algunos tipos de cáncer. La

investigación reveló que 100 g de palta contienen alrededor de 76 mg de Fitoestreoles,

cuatro veces más que la cantidad presente en otras frutas como los plátanos, las

manzanas, las uvas, las ciruelas o las cerezas. Según los especialistas, estos

compuestos pueden inhibir la absorción del colesterol del intestino, reduciendo el nivel de

colesterol en la sangre.

Estudios concluyen que el consumo de alimentos enriquecidos con esteroles vegetales

puede formar parte de la estrategia dietética para el tratamiento de la hipercolesterolemia

tanto en los sujetos diabéticos como en los no diabéticos (Hendriks et al., 1999).

En las dietas de países occidentales, con poco consumo de verduras y frutas, los

Fitoesteroles representan menos del 50% de la ingesta diaria del total de esteroles y

donde el porcentaje restante corresponde a colesterol que se encuentra sólo en alimentos

de origen animal. Las dietas occidentales contienen diariamente entre 100 a 300 mg de

Fitoesteroles (Castillo, 2005).

En septiembre del año 2000 la FDA autorizó el rotulamiento de los alimentos con

Fitoesterol declarando el beneficio en la salud en relación a un menor riesgo de

enfermedad coronaria (Bernabo y Dominelli, 2001).

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La palta además tiene gran importancia en la industria cosmética por poseer Fitoesteroles

los que poseen las mismas habilidades de penetración que la lanolina. Esta particularidad

es muy apropiada para la piel y cremas de masaje. Además, la calidad del aceite es ideal

para adicionar otras sustancias incapaces de penetrar por sí sola a la piel (Olaeta, 1991).

En cosmetología se recomienda su uso en pieles deshidratadas y maduras por ser un

excelente antiarrugas, ya que es muy nutritivo, hidratante y emoliente penetrando la piel

fácilmente y en profundidad, actúa además como estabilizador de la piel.

Dermatológicamente se utiliza en el tratamiento de afecciones cutáneas, desde granos

hasta eccemas y psoriasis. Lucha eficazmente contra las estrías por su excepcional

capacidad de penetración. Contiene Fitoesteroles y vitaminas A, D ,E (aproximadamente

2.5 mg a 5.0 mg/100 mg ). (Nugent, 2007). El aceite de palta es un componente ideal para

la elaboración de ungüentos, bálsamos y lociones para el cuidado de la piel cuando se

está bajo el sol. Existen numerosos reportes del desarrollo de una muy buena textura de

la piel observada en los trabajadores que manejan este aceite (Maldonado, 1990).

Lenta pero paulatinamente la producción de aceite de palta se incrementa en respuesta a

una demanda centrada en el mercado de la producción farmacéutica, de cosméticos y

nutracéuticos, pero con un incremento en la industria alimenticia y como aceite para

cocinar (Maldonado, 1990).

2.7 Estimación del porcentaje de aceite mediante el método gravimétrico.

Un buen método para determinar aceite es el Soxhlet, ya que mide en forma directa el

porcentaje de aceite, sin embargo, esto es lento y difícil de realizar (Lee, 1981), por lo que

habitualmente se utiliza un método indirecto como lo es el porcentaje de materia seca de

la pulpa. Este método se utiliza basado en la relación existente entre la disminución de la

humedad, aumentos de materia seca e incrementos en el contenido de aceite de los

frutos (Arpaia, 1990).

La ventaja de estimar el contenido de aceite en base a la humedad, a través de una

ecuación de regresión simple, es que en forma rápida, práctica y fácil se puede estimar

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una variable que experimentalmente requiere de una metodología sofisticada para hacerlo

(Esteban, 1993).

2.8 Extracción del aceite.

La extracción de aceite se lleva a cabo por medio de procesos de prensado de la pulpa, o

por medio de centrifugación (Costa, 2001). La extracción de lípidos requiere la utilización

de disolventes orgánicos. Los lípidos neutros triacilgliceroles, ceras y pigmentos se

extraen fácilmente de los tejidos con eter etílico, cloroformo, o benceno (Nelson et al.,

2001).

Para la extracción del aceite, variados métodos han sido publicados con los años, de los

cuales unos pocos pueden ser mencionados. Rosental et al. (1985) sugirieron secar

rodajas de palta sin calor y luego con presiones de 3000 a 4000 Libras por pulgada

cuadrada extraer el aceite de palta. Además propusieron un proceso para calentar la

pulpa bajo presión de vapor y luego con una prensa de diseño especial, extraer el aceite.

Describieron luego un proceso de presión hidráulica presionando las rodajas secas de

palta, seguido de una extracción de solvente de la palta. También mencionó tratar la pulpa

con cal para liberar el aceite. Rosenthal et al. (1985) describieron también un proceso de

centrifugación, extracción solvente, secado- congelamiento de la pulpa y presión

hidráulica como métodos de extracción de aceite. Describieron el método Gerber

modificado, el cual consiste en el uso de varias concentraciones de ácido sulfúrico

combinadas con distintas temperaturas, pero no todas las combinaciones de ácido y

temperatura se ajustan a esta fruta. Bergh et al. (1989) describieron un nuevo método, el

llamado Resonancia magnética nuclear. Es un método bastante sensitivo para mostrar

diferencias de porcentaje de aceite entre las diferentes partes de la misma fruta. Esta

nueva técnica tiene la gran ventaja de la simplicidad de la operación, velocidad de

determinación y precisión de la medición. La gran desventaja es el alto costo del equipo,

pero se están haciendo los esfuerzos para desarrollar equipos de bajo costo para

aplicaciones agrícolas.

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Sin embargo, Lee (1981), señala que el método estándar para analizar el contenido de

aceite, está basado en la extracción con éter de petróleo en un extractor Soxhlet, el cual

fue diseñado por Horwitz (1970), presentando las desventajas de ser un método caro,

lento y no estar al alcance de los productores, ya que requiere de equipos, laboratorios y

mano de obra especializada.

Olaeta (1991), señala que los distintos métodos de extracción de aceite persiguen obtener

el mayor rendimiento sin dañar su calidad. La extracción por solvente puede dar los

mejores resultados, pero resulta demasiado costoso y peligroso de utilizar por su

inflamabilidad, además la remoción de todo el solvente desde el aceite es dificultoso y

pequeñas trazas pueden ser detrimentales para la calidad de dicho aceite.

A pesar de ello, para los fines de la presente investigación la extracción con solvente

resulta ser la mejor opción. Además por ser el éter de petróleo un solvente orgánico, no

altera mayormente las propiedades del aceite para su posterior análisis cromatográfico.

2.9 Cromatografía de gases.

La espectrometría de masas revela completamente la estructura lipídica. Para establecer

sin ambigüedad la longitud de una cadena hidrocarbonada o los dobles enlaces, es de

gran valor el análisis por espectrometría de masas de los lípidos o de sus derivados

volátiles (Nelson et al., 2001).

Se ha definido la cromatografía como un método físico de separación en el cual los

componentes a separar se distribuyen entre dos fases, una de las cuales constituye la

fase estacionaria, de gran área superficial, y la otra es un fluido (fase móvil) que pasa a

través o a lo largo de la fase estacionaria. En términos generales, moléculas diversas

tienen masas diversas, hecho utilizado por un cromatógrafo de gases para determinar qué

moléculas están presentes en una muestra, y en que cantidad (Cortéz, 2005).

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4. Materiales y métodos.

3.1 Localización:

El presente estudio se llevó a cabo en la Facultad de Agronomía de la Pontificia

Universidad Católica de Valparaíso, ubicada en la localidad de La Palma, comuna de

Quillota, V Región, a 32º 54’ latitud sur y 71º 12’ longitud oeste. Durante los meses de

marzo del año 2006 a enero del año 2007. Para ello se utilizaron las instalaciones de

Laboratorio de Poscosecha e Industrialización, las muestras de frutos fueron tomadas de

la Estación Experimental de la PUCV. El proceso de cromatografías para la cuantificación

de la materia insaponificable y el perfil de ácidos grasos fue realizado en el Laboratorio de

Servicios Analíticos de la PUCV.

3.2 Selección de árboles:

En el mes de mayo del año 2006, se procedió a marcar en el huerto de la Estación

Experimental de la Facultad de Agronomía de la PUCV, cuatro árboles escogidos al azar,

de cada una de las variedades a analizar (Hass, Fuerte, e Isabel). Correspondientes a

cada uno de los tres ensayos que formaron parte de este estudio. De los cuales

posteriormente se tomaron los frutos para la extracción de aceite.

3.3 Estimación del porcentaje de aceite:

A partir de finales del mes de mayo cada 15 días se estimó el porcentaje de aceite de

cada una de las variedades a través del porcentaje de humedad de la pulpa (método

gravimétrico). Para lo cual se muestreo cuatro frutos (uno por cada árbol) de cada una de

las variedades analizadas, completando un total de 12 frutos, los cuales fueron tomados

al azar de la periferia del árbol a una altura de un metro a un metro y medio, medidos

desde el suelo, seleccionando frutos con un peso entre 200 y 250 g. Posteriormente cada

uno de los frutos fue pelado, trozado y puesto en cápsulas debidamente identificadas, las

que fueron colocadas en un horno secador a 100º C durante 24 h, al cabo de las cuales

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se determinó el porcentaje de humedad y materia seca, estimando el porcentaje de aceite

para cada una de las variedades.

Las fórmulas que fueron utilizadas en la estimación del porcentaje de aceite, son las

siguientes:

% de Materia seca: peso seco-peso del pocillo x 100

peso húmedo-peso del pocillo

% de Humedad: 100 - % (Materia seca)

Las relaciones utilizadas en cada una de las variedades para estimar el porcentaje de

aceite son las siguientes:

Porcentaje de aceite en la variedad Hass: 53.484 – 0,576 x % de Humedad (Esteban,

1993).

Porcentaje de aceite en la variedad Fuerte: 92,338 – 1,052 x % de Humedad (Esteban,

1993).

Porcentaje de aceite en la variedad Isabel: 89,0104 -1,01018 x % de Humedad (Bontá,

2006).

Cuando la variedad Hass alcanzó el mínimo porcentaje de aceite aceptado en Chile para

su cosecha, que según Esteban (1993), es un 9%, y las variedades Fuerte e Isabel

alcanzaron el mínimo porcentaje de aceite para un nivel de palatabilidad aceptable

10,36% para Fuerte (Esteban, 1993) y 11,8% para Isabel (Bontá, 2006). Se comenzó con

la extracción de aceite para cada una de las variedades. A partir de este momento y

hasta que las variedades se aproximaron a su máximo nivel de aceite alcanzado, 19%,

22% y 20% para Hass, Fuerte e Isabel respectivamente, se muestrearon tres frutos por

cada uno de los árboles (12 frutos por cada variedad), de los cuales uno fue utilizado en la

estimación del porcentaje de aceite, y los otros dos en la extracción del aceite.

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3.4 Extracción de aceite:

La extracción de aceite se llevó a cabo cada 15 días, y para realizarla se utilizó los dos

frutos de cada uno de los árboles marcados en la Estación Experimental de la PUCV,

contando así con cuatro repeticiones por variedad en cada fecha de muestreo (Cada una

formada por dos frutos).

Para ello los frutos fueron llevados al laboratorio de Poscosecha e industrialización de la

Facultad de Agronomía para ser procesados. Allí fueron pelados, los frutos fueron

descarozados y luego triturados. Las muestras fueron puestas en cápsulas debidamente

identificadas, y puestas en el horno secador durante 24 h a 80º C. Al cabo de los cuales

fueron sacadas del horno. Cada una de las muestras de materia seca fue mezclada en

vasos precipitados con 200 ml de éter de petróleo, dejándose macerar por

aproximadamente 2 horas, agitando cada media hora. Transcurridas las 2 horas las

muestras fueron pasadas por papel filtro y llevadas al rotavapor, en el cual se utilizó una

temperatura de 80º C para lograr la condensación del éter de petróleo y separarlo del

contenido de aceite.

Posteriormente cada una de las muestras fue depositada en tubos de ensayo

debidamente rotulados, los que fueron llevados nuevamente al horno secador por

aproximadamente tres horas para lograr retirar las trazas de éter que aún pudieran

permanecer en las muestras. Cada muestra consistió en aproximadamente 20 ml de

aceite. Luego las muestras fueron almacenadas en frío a 6º C. Todo el procedimiento

definido se realizo en cada una de las variedades, en cada una de sus correspondientes

fechas de muestreo.

La metodología definida fue realizada hasta el momento en que cada una de las

variedades se aproximó a su máximo porcentaje de aceite, definido en trabajos anteriores

como, 22% para Fuerte (Esteban, 1993), 19% para Hass (López, 1998), y 20% para

Isabel (Bontá. 2006).

La variedad Fuerte fue la primera en alcanzar el mínimo contenido de aceite para un

nivel de palatabilidad aceptable (10,36%), el día 12 de julio, fecha a partir de la cual se

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comenzó con la extracción de aceite. La variedad Hass alcanzó el mínimo contenido de

aceite aceptado para su cosecha (9%) el día 30 de Agosto y la variedad Isabel alcanzó el

mínimo contenido de aceite para un nivel de palatabilidad aceptable (11,8%) el día 27 de

septiembre. Comenzando con ambas el proceso de extracción de aceite en las fechas

señaladas.

3.5 Perfil de ácidos grasos:

Posteriormente las mustras fueron llevadas al Laboratorio de Servicios Analíticos de la

PUCV. Donde se sometieron a análisis cromatográfico. La cuantificación de ácidos grasos

comenzó con la extracción de la materia grasa y posterior hidrólisis y transformación por

medio de la esterificación de Fisher en los ésteres metílicos de los respectivos ácidos

grasos para su posterior separación e identificación por cromatografía gaseosa, su

contenido se expresó en porcentaje relativo, y se trabajó con un límite de detección <

0,0012. (Límite por debajo del cual el cromatógrafo no detectó porcentaje relativo de

ácidos grasos, por el nivel de sensibilidad del equipo).

El proceso se comenzó derivatizando cada una de las muestras de aceite para lograr

hacer visible cada compuesto presente en ellas, para lo cual se pesó aproximadamente

100mg de aceite de cada una de las muestras en un tubo de ensayo con tapa rosca.

Luego se agregó 2.0ml de Hidróxido de Sodio Metabólico con ayuda de una micropipeta,

se agitó vigorosamente durante 1 minuto y se colocó a baño maría por 10 minutos, al

cabo de los cuales se dejó enfriar las muestras y se aplicó 2.0 ml de BF3 /Metanólico, se

agitó vigorosamente, y se volvieron a colocar a baño maría por 10 minutos más. Se dejó

enfriar y se agregó 2.0 ml de NaCl saturado, se agitó y se colocó por 5 minutos más a

baño maría, luego de los cuales se dejó enfriar y se agregó 1.0 ml de Hexano, se tapó,

agitó vigorosamente y se colocó nuevamente a baño maría por 5 minutos más (Egan et

al., 1988).

Una vez completado el proceso de derivatización de las muestras, éstas fueron inyectas

en el cromatógrafo de gases, para obtener el correspondiente perfil de ácidos grasos de

cada una ellas. Posteriormente los resultados fueron expresados como el porcentaje

relativo (porcentaje en relación a la totalidad de compuestos presentes en la muestra) de

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cada ácido graso metil ester tratado en el cromatograma, según su tiempo de retención,

de acuerdo con la identificación realizada con estándares puros.

3.6 Cuantificación de compuestos no saponificables:

Por medio del método de cuantificación de esteroles se determinó el contenido de ß-

sitoesterol y de Campesterol expresado en porcentaje relativo. Para ambos se utilizó un

límite de detección < 0,0012 (Límite por debajo del cual el cromatógrafo no detectó

porcentaje relativo de materia insaponificable, por el nivel de sensibilidad del equipo).

El método se basó en la extracción de la materia insaponificable y posterior derivatización

de los esteroles a su metil-silil derivados para su posterior separación e identificación por

cromatografía gaseosa con detector selectivo de masas (AOAC, 1990)

El procedimiento comenzó pesando aproximadamente 2 a 2,5 g de aceite de cada una de

las muestras en un matraz erlenmeyer de 250 ml con cuello esmerilado. Luego se agregó

25 ml de solución alcohólica de NaOH, se conectó un refrigerante y se saponificó en un

baño a 100º C por 60 minutos agitando ocasionalmente. Luego se transfirió el jabón a un

embudo de separación de 250 ml mientras todavía la solución estaba caliente, usando un

total de 50 ml de agua. Luego se enjuagó el matraz de saponificación con 50 ml de éter y

se transfirió al embudo. Se agitó cuidando de liberar la presión y se dejó separar las

fases. Posteriormente se traspasó la fase etérea a otro embudo con 20 ml de agua. Luego

se repitió la extracción del jabón dos veces más con porciones de 50 ml de éter y se

transfirieron al embudo con los 20 ml de agua. Luego se agitó el embudo de manera de

evitar la formación de emulsiones. Se dejó que las fases se separaran y se descartó la

fase acuosa, se repitió este paso dos veces más usando cada vez porciones de 20 ml de

agua. Finalmente se lavó la fase etérea tres veces con 20 ml de agua y KOH 0,5N

alternando ambos reactivos. Después del último lavado con KOH se lavó la fase etérea

con diferentes porciones de agua de tal forma que el agua residual no presentó reacción a

la fenolftaleína. Luego se traspasó la fase etérea a un balón de 250 ml, se evaporó en el

rotavapor a sequedad y se determinó luego la cantidad de materia insaponificable

obtenida (AOAC, 1990)

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Una vez completado el proceso de derivatización de los esteroles de las muestras a su

metil-silil derivados, éstas fueron inyectadas en el cromatógrafo de gases, separando e

identificando los esteroles presentes y posteriormente cuantificándolos según su tiempo

de retención, en base a porcentajes relativos, usando estándares puros.

3.7 Diseño experiemental:

Para el análisis de la cuantificación de cada ácido graso, en cada uno de los ensayos,

correspondiente a cada una de las variedades analizadas, se realizó un análisis de

regresión lineal simple, entre la variable independiente X (porcentaje de aceite) y la

variable dependiente Y (porcentaje relativo de cada ácido graso). Calculando en cada

caso el correspondiente coeficiente de correlación.

Se realizó el mismo análisis ahora considerando la variable independiente X como

porcentaje de aceite y la variable dependiente Y como el porcentaje relativo de ß-

sitoesterol o de Campesterol en cada uno de los ensayos. También se calculó en cada

caso su coeficiente de correlación.

El modelo utilizado fue el siguiente:

Y = a + b X

Siendo:

X: Porcentaje de aceite.

Y: Porcentaje de ácido graso o de compuesto no saponificable.

Luego se realizó un análisis de varianza para comprobar la representatividad del modelo

con el test de Fischer en el cual se trabajó con un 5 % de significancia.

Cada uno de los ensayos consistió en cada una de las variedades analizadas, contando

así, con tres ensayos (Hass, Fuerte e Isabel). El número de tratamientos correspondió al

número de fechas en que se extrajo muestras de aceite en cada una de las variedades.

Se trabajó con cuatro árboles por cada variedad, por lo que se contó con cuatro

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repeticiones en cada tratamiento. La unidad experimental consistió en tres frutos,

recolectados para cada variedad, en cada fecha de muestreo.

La realización del Análisis Estadístico anteriormente mencionado, se llevó a cabo

mediante el Software Estadístico STATGRAPHICS Plus versión 5.1, además de la planilla

de cálculo MS OFFICE EXCEL 2003.

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4. Presentación y discusión de resultados.

4.1 Evolución en el porcentaje de materia seca, humedad y aceite durante el desarrollo de

frutos de palto la temporada 2006.

En forma complementaria a la información entregada y, a que corresponde a información

utilizada en esta investigación, se presentan las gráficas de la evolución del contenido de

materia seca, humedad y aceite (Anexos 1, 2 y 3), durante el período que duró el estudio

en cada una de las variedades (Figuras 2, 3 y 4)

30,3730,4128,3326,2725,7825,0924,2022,9722,47

69,6369,5971,6773,7374,2274,9175,8077,0377,53

8,83 9,11 9,82 10,34 10,74 11,02 12,20 13,40 13,37

0,00

10,00

20,00

30,00

40,00

50,00

60,00

70,00

80,00

90,00

30-08-2006 13-09-2006 27-09-2006 11-10-2006 25-10-2006 08-11-2006 22-11-2006 06-12-2006 20-12-2006

Fecha de muestreo.

Por

cent

aje.

% Materia seca

% Humedad

% Aceite

Figura 2: Evolución el en porcentaje de aceite, materia seca y humedad, en frutos de palta

de la variedad Hass, medidos desde el 30 de agosto al 20 de diciembre del 2006

, en la localidad de La Palma, Quillota.

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31,3833,39

29,8327,9427,5827,80

22,7724,04

68,6266,6170,17

72,0672,4272,20

77,2375,96

20,1422,2718,5216,5317,1916,39

11,0912,43

0,00

10,00

20,00

30,00

40,00

50,00

60,00

70,00

80,00

90,00

12-07-2006 26-07-2006 09-08-2006 23-08-2006 06-09-2006 20-09-2006 04-10-2006 18-10-2006

Fecha de muestreo.

Por

cent

aje.

% Materia seca

% Humedad

% Aceite

Figura 3: Evolución en el porcentaje de aceite, materia seca y humedad, en frutos de palta de la variedad Fuerte, medidos desde el 12 de julio al 18 de octubre del 2006, en la localidad de La Palma, Quilota.

24,22 23,92 24,3522,34 24,28 24,14

28,3330,41

69,5971,6775,8675,7277,6675,6576,0875,78

18,7217,66

12,3812,5210,5612,5912,1512,46

0,00

10,00

20,00

30,00

40,00

50,00

60,00

70,00

80,00

90,00

27-09-2006 11-10-2006 25-10-2006 08-11-2006 22-11-2006 06-12-2006 20-12-2006 03-01-2007

Fecha de muestreo.

Por

cent

aje. % Materia seca

% Humedad

% Aceite

Figura 4: Evolución en el porcentaje de aceite, materia seca y humedad, en frutos de

palta de la variedad Isabel, medidos desde el 27 de septiembre al 03 de enero del 2006, en la localidad de La Palma, Quilota.

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El contenido de aceite se debe a la presencia de los ácidos grasos que se ubican entre

las vacuolas del endocarpio y mesocarpio. Al ir aumentando de volumen provocan el

desplazamiento del agua de las células. Ello permitió en 1930, determinar que existía una

relación inversa entre el contenido de aceite y de agua en la palta y ambos podían ser

utilizados como criterio de madurez, con lo cual en California, se determinó que sus

productores debían cosechar su fruta con un porcentaje de aceite igual o superior al 8%.

Sin embargo, a fines de la década de 1950 y principios de la década de 1970, varios

autores han confirmado que el contenido de aceite en palta varía según la variedad, el

clima, manejo cultural (Fichet, 1995). El contenido de humedad resulta ser un buen

estimador del contenido de aceite, debido a que la correlación entre estos dos parámetros

en todas las variedades resulta ser superior a un 95% (Esteban, 1993).

La relación inversa entre el contenido de aceite y el de agua (humedad), a la que se hace

alusión el párrafo anterior, queda corroborada, a través, de cada una de las figuras

expuestas para la evolución del porcentaje de materia seca, humedad y aceite durante el

período que duró este estudio para cada una de las variedades. En las tres variedades, se

aprecia claramente una disminución en el contenido de humedad, con aumento en el

contenido de materia seca, y a su vez un aumento en el contenido de aceite.

Existe diferencia en los niveles de materia seca, humedad y aceite, detectados, los cuales

varían dependiendo de la ubicación geográfica en que se haya realizado el estudio, lo

corrobora por ejemplo el estudio realizado por Esteban (1993), o el realizado por López

(1998).

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4.2 Evolución en el porcentaje de ácidos grasos durante el desarrollo de frutos de palto la

temporada 2006.

13,09

12,7412,2411,3911,54

12,8812,4311,82

12,83

2,75 2,61 2,73 2,981,82

2,84 2,913,58 3,50

0,000,000,000,000,000,000,000,000,00

66,46 66,82 67,1766,12

64,2363,02 62,74

48,4049,67

6,05 6,28 5,79 6,234,56

6,34 6,75 6,94 7,0110,96 11,45 11,06

12,14

17,77

12,20 13,01 12,84

13,08

1,890,89 0,99 0,82 0,85 1,11 0,87 0,79 0,590,00

10,00

20,00

30,00

40,00

50,00

60,00

70,00

80,0030-08-2006 13-09-2006 27-09-2006 11-10-2006 25-10-2006 08-11-2006 22-11-2006 06-12-2006 20-12-2006

Fecha de muestreo.

Por

cent

aje

rela

tivo.

Ac. Palmítico

Ac. Palmitoléico

Ac. Esteárico

Ac. Oléico

Ac. Elaidico

Ac. Linoléico

Ac. Linolénico

Figura 5: Evolución en el porcentaje ácidos grasos, en frutos de palta de la variedad Hass, medidos desde el 30 de agosto al 20 de diciembre del año 2006, en la localidad de La Palma, Quillota.

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71,5972,18

73,93 73,44 73,78

72,2272,97

11,81 11,6910,35 10,22 9,76 9,45 10,12 10,70

2,29 2,16 2,14 1,97 1,90 2,27 2,30 2,44

0,550,680,69 0,580,57 0,60 0,60 0,59

73,36

3,94 3,96 4,41 4,22 4,25 4,45 4,60 4,44

8,90 8,758,12

8,96 9,08 9,01 8,88

8,02

0,65 0,58 0,53 0,62 0,66 0,55 0,54 0,460,00

10,00

20,00

30,00

40,00

50,00

60,00

70,00

80,00

12/07/2006 26/07/2006 09/08/2006 23/08/2006 06/09/2006 20/09/2006 04/10/2006 18/10/2006

Fecha de muestreo.

Por

cent

aje

rela

tivo.

Ac. Palmítico

Ac. Palmitoléico

Ac. Esteárico

Ac. Oléico

Ac. Elaidico

Ac. Linoléico

Ac. Linolénico

Figura 6: Evolución en el porcentaje de ácidos grasos, en frutos de palta de la variedad Fuerte, medidos desde el 12 de julio al 18 de octubre del 2006, en la localidad de La Palma, Quillota.

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0,74 0,82 0,77 0,65 0,78 0,97 0,79

9,769,149,14

9,28

7,73

9,089,119,02

1,171,161,021,111,201,000,921,10

0,310,390,530,400,280,150,390,28

74,1574,1674,7175,99

77,7776,8676,41

62,56

3,693,743,743,643,743,653,643,90

10,1410,459,98

8,81

8,64

8,498,687,59

0,890,00

10,00

20,00

30,00

40,00

50,00

60,00

70,00

80,00

90,00

27-09-2006 11-10-2006 25-10-2006 08-11-2006 22-11-2006 06-12-2006 20-12-2006 03-01-2007

Fecha de muestreo.

Por

cent

aje

rela

tivo.

Ac. Palmítico Ac. Palmitoléico

Ac. EsteáricoAc. Oléico

Ac. ElaidicoAc. Linoléico

Ac. Linolénico

Figura 7: Evolución en el porcentaje de ácidos grasos, en frutos de palta de la variedad Isabel, medido desde el 27 de septiembre al 03 de enero del 2006, en la localidad de La Palma, Quillota.

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Como se aprecia en las figuras 5, 6 y 7, expuestas para el perfil de ácidos grasos

correspondiente a cada una de las variedades analizadas, el ácido graso que se presenta

en un mayor porcentaje relativo en el aceite de palta corresponde al ácido oleico, lo cual

se aproxima a lo expuesto por Vergara (2005), quien plantea que el aceite de palta tiene

un contenido lipídico muy bajo en ácidos grasos saturados y muy alto en monoinsaturados

de los cuales en un 96% aproximadamente esta compuesto por ácido oleico y el 4%

restante llamados polinsaturados, están representados casi en su totalidad por el ácido

linoleico. Queda además corroborado por lo señalado por Inoue et al. (1995), quien afirma

que la mayoría de los ácidos grasos presentes en el mesocarpio de frutos de palto

corresponden a ácido oleico, seguido por ácido palmítico, ácido linoleico, ácido

palmitoleico y ácido linolénico.

Según Inoue et al. (1995) el porcentaje de ácido oleico aumenta hasta junio y el

porcentaje de ácido linoleico disminuye hasta ese momento. Estos mismos cambios

ocurren en paltas cultivadas en California y en Sudáfrica. Pequeños cambios se observan

en la composición de ácidos grasos durante y afines de junio.

El ácido oleico varía entre un 48, 4 y un 66, 8% en la variedad Hass (Anexo 10), en la

variedad Fuerte entre un 71,5 y un 73,9% (Anexo 11), en la variedad Isabel varía entre un

62,5 y un 77,7% (Anexo 12), alcanzando en esta el mayor porcentaje. Lo que se aproxima

a lo expuesto por Human (1987), el que señala que el porcentaje relativo de ácido Oleico

en palta Hass, se encuentra alrededor de un 70,5%. Sin embargo, Olaeta et al. (1999),

señala que es el ácido oleico el predominante superando el 50%. Las diferencias en los

porcentajes se deben seguramente a las diferencias entre cada una de las zonas de

cultivo de las que fueron tomados los frutos para su posterior análisis.

Los ácidos palmítico y linoleico se presentan como los segundo en importancia según

porcentaje relativo en las tres variedades. En la variedad Hass varían entre un 11 un 13%

y un 10 a un 13% respectivamente , en la variedad Fuerte entre un 9 a un 11% y un 8 a

un 9% respectivamente, y en la variedad Isabel entre 7 a un 9% y un 8 a un 10%

respectivamente. Según Human (1987), los ácidos Palmítico y Linoleico se presentarían

en un 11,8 y un 9,45%, respectivamente, esto para palta Hass. Mientras Olaeta et al.

(1999) señala que el ácido palmítico se presenta en un 10% y en un 8% el linoleico.

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Además el ácido linoleico en la variedad Hass presenta un peack en su evolución el día

25 de octubre coincidente con un 10,4% de aceite dicho peack no se observó en las otras

dos variedades analizadas.

Lo expuesto en los dos párrafos anteriores concuerda además con lo expuesto por

Razeto et al. (2005) quienes señalan que el ácido oleico es el principal, el cual presentó

en las selecciones, porcentajes que fluctuaron entre 62,7 y 78,3% seguido por el ácido

linoleico que varió entre 9,8 y 15,6% y el ácido palmítico entre 8,5 y 15,5%.

Los ácido palmitoleico y elaídico se presentan en una posición intermedia en cuanto a

porcentaje relativo. En la variedad Hass se presentaron entre un 1,8 a un 3,5% y entre un

4,5 a un 7% respectivamente. En la variedad Fuerte entre 1,9 a un 2,4% y un 3,9 a un

4,6% respectivamente. Y en la variedad Isabel entre un 0,9 a un 1,0% y un 3,6 a un 3,9%

respectivamente. Human (1987), afirma que el porcentaje relativo del ácido palmitoleico

sería de un 3,98% en el caso de la variedad Hass.

El ácido linolénico se presenta en forma de trazas en las tres variedades, variando entre

un 0,5 y un 1% en la variedad Hass, entre un 0,4 y un 0,6% en la variedad Fuerte y entre

un 0,6 y un 0,9% en la variedad Isabel. Este estudio señala un porcentaje algo menor que

el expuesto por Human (1987), para el ácido Linolénico, Human señala un porcentaje de

0,87% para la variedad Hass. El porcentaje algo menor de ácido linolénico detectado en

este estudio en comparación al citado por Human (1987), se debe seguramente a que

ambos estudios fueron realizados en diferentes condiciones edafoclimáticas, por la

diferencia en la ubicación geográfica en que se realizó cada uno de los estudios, o por el

estado de madurez de frutos de palto, en que se midió el contenido de este ácido.

El ácido esteárico también presenta sólo trazas en las variedades Fuerte e Isabel,

variando entre un 0,5 a un 0,6% y entre un 0,1 a un 0,5%. Llama la atención que en el

caso de la variedad Hass, no se detectó su presencia en ninguna de las muestras

analizadas, lo que se atribuye a que el cromatógrafo con el que se analizaron las

muestras cuenta con un nivel de detección de 0,0012%, lo que quiere decir que

contenidos inferiores a este porcentaje no son detectados en la lectura cromatográfica,

seguramente el porcentaje relativo de ácido esteárico presente en las muestras de la

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variedad Hass, es menor a dicho nivel de detección, encontrándose fuera del rango de

sensibilidad del equipo, no siendo detectado por este. Por otro lado estudios anteriores como el realizado por Human (1987), no evidencian la presencia de este ácido en frutos

de palto.

Según Kikuta y Erickson (1963), el contenido de lípidos del mesocarpio aumenta

rápidamente durante el desarrollo de los frutos y lentamente una vez alcanzada la

madurez. Otros estudios han determinado un continuo y rápido aumento de aceite desde

los primeros estados de desarrollo, hasta la madurez (Appleman et al., 1941). El perfil

lipídico expuesto para cada una de las variedades se realizó a partir del momento en que

la variedad Hass alcanzó su madurez de cosecha, y las variedades Fuerte e Isabel

alcanzaron el porcentaje de aceite mínimo para un nivel de palatabilidad aceptable. A

partir de aquí el contenido de cada ácido graso se mantiene más menos constante a lo

largo del tiempo. A excepción de lo que ocurre con el ácido oleico en la variedad Isabel,

en la que se aprecia un alza notoria en este ácido. En el caso de la variedad Hass se

observa una caída brusca en el contenido de ácido oleico, la cual no ha sido citada por

otros autores, pero se puede atribuir a que según Appleman et al. (1941), el estado de

desarrollo del fruto, implica una variación del contenido lipídico, o simplemente a

diferencias en la composición nutricional de los frutos muestreados.

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Cuadro 1: Resumen de relación existente entre la evolución del % de aceite y la evolución de cada ácido graso en cada una de las variedades de palta (Hass, Fuerte e Isabel).

VARIEDAD HASS Cometario.

Acido Graso R2 R Relación entre la evolución del % de aceite y cada ácido graso.

Palmítico 7,213% 0,268 Relativamente débil. Palmitoleico 39,028% 0,624 Moderadamente fuerte. Esteárico No se detectó presencia del ácido graso. Oleico 0,342% -0,058 Relativamente débil. Elaídico 29,033% 0,538 Moderadamente fuerte. Linoleico 9,800% 0,313 Relativamente débil. Linolénico 66,270% -0,258 Relativamente débil.

VARIEDAD FUERTE Comentario.

Acido Graso R2 R Relación entre la evolución del % de

aceite y cada ácido graso. Palmítico 49,881% 0,650 Moderadamente fuerte. Palmitoleico 8,031% 0,283 Relativamente débil. Esteárico 43,917% -0,662 Moderadamente fuerte. Oleico 21,222% 0,460 Relativamente débil. Elaídico 88,972% 0,243 Relativamente débil. Linoleico 2,484% -0,157 Relativamente débil. Linolénico 30,072% -0,548 Moderadamente fuerte.

VARIEDAD ISABEL Comentario.

Acido Graso R2 R Relación entre la evolución del % de

aceite y cada ácido graso. Palmítico 41,954% 0,647 Moderadamente fuerte. Palmitoleico 14,546% 0,381 Relativamente débil. Esteárico 0,287% 0,053 Relativamente débil. Oleico 0,426% -0,065 Relativamente débil. Elaídico 0,257% -0,050 Relativamente débil. Linoleico 51,590% 0,718 Moderadamente fuerte. Linolénico 30,248% 0,549 Moderadamente fuerte.

En la variedad Hass, en el caso del ácido palmitoleico, en el cual el coeficiente de

correlación es igual a 0,62 (Cuadro 1) se observa una relación directa y moderadamente

fuerte entre la evolución del contenido de aceite y la evolución del ácido graso en cuestión

(Anexo 15), lo que indica que el contenido de ácido palmitoleico experimenta la misma

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tendencia que la experimentada por el contenido de aceite, lo mismo ocurre en el caso

del ácido elaídico, en el cual el coeficiente de correlación es igual a 0,53 (Cuadro 1).

Entonces a medida que aumenta el contenido de aceite aumenta también el contenido de

ácido palmitoleico. La relación anterior no se observa para el resto de los ácidos grasos

presentes en la variedad Hass. Con respecto a lo anterior, Human (1987), comprobó que

los aceites linoleico, palmítico, y linoleico, aumentan lentamente, mientras que el mayor

cambio se produce en el ácido oleico, que experimenta un gran aumento. El lento y el

gran aumento en los ácidos grasos mencionado no tienen relación con el aumento

sostenido que experimenta la evolución del contenido de aceite en cada una de las

variedades.

En la variedad Fuerte se observa una relación moderadamente fuerte y directamente

proporcional entre la evolución del contenido de aceite y la evolución en el contenido de

ácido palmítico debido a que el coeficiente de correlación es 0,65 (Cuadro 1) la evolución

del ácido esteárico también presenta una relación moderadamente fuerte aunque

inversamente proporcional con la evolución en el contenido de aceite (Anexo 16), entre

ellos el coeficiente de correlación es igual a –0,66 (Cuadro 1), o sea, a medida que

aumenta el contenido de aceite en esta variedad, disminuye el contenido de ácido

esteárico, en el caso del ácido linolénico se observa la misma relación que en el ácido

esteárico, debido a que el coeficiente de correlación es igual a –0,54 (Cuadro 1).

En la variedad Isabel se observa una relación directa y moderadamente fuerte entre la

evolución del contenido de aceite y la evolución del contenido de ácido palmítico, linoleico

y linolénico. Con coeficiente de correlación de 0,64; 0,71 y 0,54, respectivamente (Cuadro

1).

El resto de los ácidos cuantificados en cada una de las variedades presenta una relación

relativamente débil (Anexo 14) con la evolución del contenido de aceite. Lo que estaría

indicando que no existe una relación entre la formación y posterior evolución de estos

ácidos grasos con la evolución en el contenido de aceite.

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4.3 Evolución del porcentaje de compuestos no saponificables durante el desarrollo de

frutos de palto la temporada 2006.

0,0957

0,19640,1719

0,2320

0,1719

0,3412

0,2436

0,0804

0,1776

0,0030930,0054380,0160830,0085310,0207110,0063860,0123260,0090240,005195

0,0000

0,0500

0,1000

0,1500

0,2000

0,2500

0,3000

0,3500

0,4000

30-08-2006 13-09-2006 27-09-2006 11-10-2006 25-10-2006 08-11-2006 22-11-2006 06-12-2006 20-12-2006Fecha de muestreo.

% d

e ß-

sito

este

rol Y

Cam

pest

erol

. % Betasitoesterol

% Campesterol

Figura 8: Evolución en el porcentaje de ß-sitoesterol y Campesterol, en frutos de palta de

la variedad Hass, medidos desde el 30 de agosto al 20 de diciembre del 2006,

en localidad de La Palma, Quillota.

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0,1001

0,1729

0,1256

0,1040

0,1638

0,1954

0,1446

0,1126

0,0024580,0035400,0054760,0018970,0047290,0026210,0050130,007834

0,0000

0,0500

0,1000

0,1500

0,2000

0,2500

12-07-2006 26-07-2006 09-08-2006 23-08-2006 06-09-2006 20-09-2006 04-10-2006 18-10-2006

Fecha de muestreo.

% d

e ß-

sito

este

rol Y

Cam

pest

erol

.

% Betasitoesterol

% Campesterol

Figura 9: Evolución en el porcentaje de ß-sitoesterol y Campesterol, en frutos de palta de la variedad Fuerte, medidos desde el 12 de julio al 18 de octubre del 2006, en la localidad de La Palma, Quillota.

0,2457

0,1314

0,2361

0,2694

0,1779

0,30010,3193

0,2772

0,0174090,0227160,0165030,0086280,0173910,0135210,0058570,0083160,0000

0,0500

0,1000

0,1500

0,2000

0,2500

0,3000

0,3500

27-09-2006 11-10-2006 25-10-2006 08-11-2006 22-11-2006 06-12-2006 20-12-2006 03-01-2007

Fecha de muestreo.

% d

e ß-

sito

este

roL

y C

ampe

ster

ol.

% Betasitoesterol

% Campesterol

Figura 10: Evolución en el porcentaje de ß-sitoesterol y Campesterolen, en frutos de palta

de la variedad Isabel, medidos desde el 27 de septiembre al 03 de enero del 2006, en la localidad de La Palma, Quillota.

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La variedad Hass presentó el mayor porcentaje relativo de ß-sitoesterol este varió entre

un 0,08 y un 0,34% (Figura 8), en la variedad Fuerte este se presentó de un 0,10 a un

0,19% (Figura 9), y en la variedad Isabel de un 0,13 a un 0,31% (Figura 10). Según Fierro

et al. (2005) la palta es rica en ß-sitoesterol y su contenido en la variedad Hass varía

entre un 0,45% y un 1%.

El menor porcentaje relativo ß-sitoesterol observado en este estudio (Anexos 4, 5 y 6), en

comparación al contenido de ß-sitoesterol citado por Fierro et al. (2005) se atribuye a que

existe diferencia en la ubicación geográfica en que se realizó ambos estudios, lo que

produjo diferencias en las condiciones climáticas y edáficas en ambos estudios. Además

se debe destacar estado de madurez de los frutos con que se trabajó en ambos estudios,

debido a que Fierro et al. (2005) no hacen alusión al estado de madurez al que

corresponden los porcentajes de ß-sitoesterol mencionados.

Las diferencias en los porcentajes de ß-sitoesterol detectados en este estudio, en relación

a los citados por Fierro et al. (2005) se atribuyen también a que las diferencias en los

valores en el nivel nutricional de la palta, dependen de la variedad y el suelo en el que se

cultivan (Torres, 2005).

En las tres variedades el ß-sitoesterol presentó un primer peack, en el caso de las

variedades Fuerte e Isabel este se presentó después de alcanzado el mínimo porcentaje

de aceite en el cual se consigue el mínimo nivel de palatabilidad aceptado para su

cosecha y en la variedad Hass, después de alcanzado el mínimo porcentaje de aceite

aceptado para su cosecha. La variedad Hass presentó un marcado peack de 0,34% en el

contenido de ß-sitoesterol, dicho peack se produjo el 22 de noviembre fecha en la cual el

porcentaje de aceite en esta variedad alcanzó un 12,20%. En cuanto a al variedad Fuerte,

esta también presentó un notorio peack de 0,19% en el contenido de ß-sitoesterol,

aunque menor que el presentado por las variedades Hass e Isabel. El peack en el

contenido de ß-sitoesterol en la variedad Fuerte coincidió con 18,52% de aceite alcanzado

el 20 de septiembre. La variedad Isabel también presentó un peack notorio en el

contenido de ß-sitoesterol de 0,31%, algo menor que el presentado por Hass, dicho peack

se presentó el 12 de diciembre y coincidió con un 17, 66% de aceite. Cabe destacar que

en las tres variedades analizadas se observó un segundo peack en importancia el cual en

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la variedad Hass fue de un 0,23% coincidente con un 10,74% de aceite alcanzado el 25

de octubre, dicho peack coincide con el peack detectado en la evolución de ácido linoleico

en la variedad Hass, lo que nos podría estar señalando algún tipo de relación entre el

contenido de ß-sitoesterol y el contenido de ácido linoleico en esta variedad, sin embargo

el coeficiente de correlación entre amba es solo 0,32 lo que corresponde a una relación

relativamente débil entre ambas variables, en la variedad Fuerte el segundo peack fue de

un 0,17% coincidente con un 11,09% de aceite alcanzado el 27 de julio en la variedad

Isabel fue de un 0,26% coincidente con un 10,56% de aceite alcanzado el 8 de

noviembre.

Se confirma además lo señalado por Gonzalez de Pedro (2005) quien afirma que la

fracción insaponificable en la palta alcanza un 0,5 a un 2,5%.

En cuanto a la cuantificación de Campesterol (Anexos 7, 8 y 9), en las tres variedades

presentó porcentajes relativos bastante inferiores a los detectados para el ß-sitoesterol.

La variedad Isabel presentó el mayor contenido de Campesterol. En dicha variedad su

porcentaje varió entre un 0,005 y un 0,22% (Figura 10). La variedad Hass presentó el

segundo mayor porcentaje relativo en Campesterol, el cual varió entre un 0,0030 y un

0,020% (Figura 8). Mientras en la variedad Fuerte varió entre un 0,001 y un 0,007%

(Figura 9). Las tres variedades no presentaron peack notorios en el porcentaje de

Campesterol, como los que se observaron para el ß-sitoesterol, todo lo contrario su

contenido se presentó relativamente estable a lo largo del tiempo en el que transcurrió el

estudio. Lo que nos indica que el contenido de dicho compuesto, no presenta una

marcada evolución como la observada en el caso del ß-sitoesterol.

La importancia de determinar los peack de materia insaponificable en cada una de las

variedades, radica en que en explotaciones con fines de extracción de dicha materia,

queda establecida la fecha óptima de cosecha en cada una de las variedades en estudio.

Lo que cobraría bastante más importancia para el caso del ß-sitoesterol, debido a que

para el Campesterol como se mencionó con anterioridad, no se no se detectó un

momento en particular en el cual su contenido haya presentado un alza, todo lo contrario,

su contenido se presentó estable en las tres variedades a lo largo del desarrollo del

estudio, por lo que no tendría mayor incidencia cosechar frutos con fines de extracción de

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Campesterol en una fecha determinada. En el caso de la variedad Hass, para lograr

extraer el mayor porcentaje de ß-sitoesterol la cosecha de frutos en la localidad de La

Palma, Quillota V Región, deberá realizarse a fines de noviembre, en el caso de la

variedad Fuerte a fines de septiembre, y en la variedad Isabel a mediados de diciembre,

logrando así obtener los mejores resultados.

Cuadro 2: Resumen de la relación existente entre la evolución del % de aceite y la evolución de la materia insaponificable, en frutos de palta de las variedades Hass, Fuerte e Isabel.

VARIEDAD HASS

Compuesto R2 R Comentario.

ß-sitoesterol

6,5106%

0,2551

Relación relativamente débil entre la evolución

del porcentaje de aceite y ß-sitoesterol.

Campesterol.

1,98866%

-0,14102

Relación relativamente débil entre la evolución

del porcentaje de aceite y Campesterol.

VARIEDAD FUERTE

Compuesto R2 R Comentario.

ß-sitoesterol.

0,000097

%

0,000986

Relación relativamente débil entre la evolución

del porcentaje de aceite y ß-sitoesterol.

Campesterol.

26,569%

-0,515

Relación moderadamente fuerte entre la evolución

del porcentaje de aceite y Campesterol.

VARIEDAD ISABEL

Compuesto R2 R Comentario.

ß-sitoesterol.

19,936%

0,446

Relación relativamente débil entre la evolución

del porcentaje de aceite y ß-sitoesterol.

Campesterol.

29,921%

0,547

Relación moderadamente fuerte entre la evolución

del porcentaje de aceite y Campesterol.

Para las variedad Hass el coeficiente de correlación entre la evolución del contenido de

aceite, y la evolución de materia insaponificable representa da por el ß-sitoesterol y el

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Campesterol, indica una relación relativamente débil entre ambos, debido a que el

coeficiente de correlación para el ß-sitoesterol es 0,25 y para el Campesterol –0,14

(Cuadro 2) lo que está indicando que el contenido de materia insaponificable en ambas

variedades no guarda relación con la evolución del contenido de aceite.

En el caso de la variedad Fuerte se observa una relación relativamente débil entre la

evolución del contenido de aceite y la evolución del contenido de ß-sitoesterol, debido a

que el coeficiente de correlación es de 0,000986 (Cuadro 2). En del caso de Campesterol

ocurre todo lo contrario, el coeficiente de correlación de –0,515 (Cuadro 2) por lo que

existe una relación inversa y moderadamente fuerte entre la evolución del contenido de

aceite y la evolución del contenido de Campesterol, lo que nos está señalando que a

medida que aumenta el contenido de aceite, disminuye el contenido de Campesterol.

La variedad Isabel experimentó la misma tendencia que la variedad Fuerte, presentando

una relación relativamente débil entre la evolución del contenido de aceite y la evolución

del contenido de ß-sitoesterol, respaldada por un coeficiente de correlación de 0,446

(Cuadro 2). Para el Campesterol se observó también una relación moderadamente fuerte

entre su evolución y la evolución del contenido de aceite, pero en este caso corresponde

a una relación directa entre ambos con un coeficiente de correlación de 0,547 (Cuadro 2)

lo que quiere decir, a medida que aumente el contenido de aceite, aumenta también el

contenido de Campesterol.

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4.4 Relación entre la evolución de materia insaponificable y la evolución de ácidos grasos

en cada variedad.

Cuadro 3: Relación entre la evolución de materia insaponificable y la evolución de ácidos grasos, en frutos de palta de las variedades Hass, Fuerte e Isabel.

VARIEDAD HASS.

VARIABLES R2 R Relación entre variables. Mat.insaponificable v/s ac palmítico 15,193% -0,390 Relación relativamente débil. Mat.insaponificable v/s ac pamitoleico 4,928% -0,222 Relación relativamente débil. Mat.insaponificable v/s ac esteárico No se detectó su presencia. Mat.insaponificable v/s ac Oleico 1,451% -0,120 Relación relativamente débil. Mat.insaponificable v/s ac Elaídico 1,093% -0,105 Relación relativamente débil. Mat.insaponificable v/s ac linoleico 12,283% 0,350 Relación relativamente débil. Mat.insaponificable v/s ac linolénico 9,298% 0,305 Relación relativamente débil.

VARIEDAD FUERTE.

Mat.insaponificable v/s ac palmítico 14,067% -0,375 Relación relativamente débil. Mat.insaponificable v/s ac pamitoleico 1,095% -0,105 Relación relativamente débil. Mat.insaponificable v/s ac esteárico 0,887% 0,094 Relación relativamente débil. Mat.insaponificable v/s ac Oleico 4,750% -0,218 Relación relativamente débil. Mat.insaponificable v/s ac Elaídico 1,543% 0,124 Relación relativamente débil. Mat.insaponificable v/s ac linoleico 16,579% 0,407 Relación relativamente débil. Mat.insaponificable v/s ac linolénico 0,014% 0,012 Relación relativamente débil.

VARIEDAD ISABEL. Mat.insaponificable v/s ac palmítico 0,701% -0,084 Relación relativamente débil. Mat.insaponificable v/s ac pamitoleico 36,078% 0,601 Relación moderadamente fuerte. Mat.insaponificable v/s ac esteárico 0,557% 0,075 Relación relativamente débil. Mat.insaponificable v/s ac Oleico 1,111% -0,105 Relación relativamente débil. Mat.insaponificable v/s ac Elaídico 18,285% 0,428 Relación relativamente débil. Mat.insaponificable v/s ac linoleico 33,621% 0,580 Relación moderadamente fuerte. Mat.insaponificable v/s ac linolénico 9,807% 0,313 Relación relativamente débil.

En las tres variedades predomina relaciones relativamente débiles entre la evolución en el

contenido de materia insaponificable y la evolución de cada ácido graso. Lo que indica

que no existe relación entre la evolución en el contenido de ambos.

Lo anterior nos está indicando que la evolución en el contenido de materia

insaponificable cuantificada como ß-sitoesterol y Campesterol, la mayoría de las veces no

guardó relación con la evolución de cada uno de los ácidos grasos cuantificado en cada

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una de las variedades analizadas. La excepción la marcó el ácido palmitoleico y el ácido

linoleico en la variedad Isabel, en ambos según los coeficientes de correlación

determinados 0,601 y 0,508 respectivamente (Cuadro 3), se observó una relación directa

y moderadamente fuerte, entre la evolución de la materia insaponificable y cada ácido

graso, por lo tanto sólo para estos dos ácidos y sólo en la variedad Isabel existe evidencia

estadística, para señalar que su evolución guarda relación directa con la evolución de la

materia insaponificable, y que ambos aumentan o disminuyen a la misma vez, siguiendo

una misma tendencia.

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5. Conclusión.

Durante el desarrollo de palta en los cv. Hass, Fuerte e Isabel, desde el momento en que

se alcanzó en mínimo contenido de aceite aceptado para un nivel aceptable de

palatabilidad, hasta que cada una de las variedades se aproximó al máximo porcentaje de

aceite alcanzado, existe evolución de ácidos grasos y de materia insaponificable medida

como ß-sitoesterol y Campesterol.

En fruta de cv. de palta Hass, Fuerte e Isabel, durante su desarrollo el ácido oleico

constituye el mayor porcentaje relativo, seguido del ácido linoleico, palmítico, elaídico y

palmitoleico. Se presentaron además trazas de ácido esteárico y linolénico. Predominaron

las relaciones relativamente débiles entre la evolución del contenido de aceite y la

evolución de los ácidos grasos mencionados.

Durante el desarrollo de palta en los cv. Hass, Fuerte e Isabel, el porcentaje relativo de ß-

sitoesterol, se presenta siempre mayor que el de Campesterol. Presentando la variedad

Hass, el mayor contenido de ß-sitoesterol, y la variedad Isabel el mayor contenido de

Campesterol.

Las tres variedades presentan notorios peack en el contenido de ß-sitoesterol. El

contenido de Campesterol se presentó estable en las tres variedades. La evolución entre

el contenido de aceite y la evolución del contenido de ß-sitoesterol presentó en las tres

variedades una relación relativamente débil, mientras la evolución de Campesterol

presentó una relación relativamente débil con la evolución del contenido de aceite en la

variedad Hass, y una relación moderadamente fuerte en las variedades Fuerte e Isabel.

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6. Literatura citada.

Agrobit, 2005. Cultivo de palta: Aspectos técnicos. Disponible en www.agrobit.com/Microemprendimientos/cultivos/Frutales/palta/MI000002pa.htm. Leído el 21 de julio del 2007.

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Anexos.

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Anexo 1: Evolución del contenido de aceite en la variedad Hass.

Nº muestra Fecha % mat seca % humedad % aceite 1º 30-08-2006 22,94 77,06 9,10 30-08-2006 23,20 76,80 9,25 30-08-2006 20,57 79,43 7,73 30-08-2006 23,16 76,84 9,22

2º 13-09-2006 22,22 77,78 8,68 13-09-2006 21,74 78,26 8,41 13-09-2006 23,42 76,58 9,37 13-09-2006 24,49 75,51 9,99

3º 27-09-2006 24,87 75,13 10,21 27-09-2006 22,67 77,33 8,94 27-09-2006 21,91 78,09 8,50 27-09-2006 27,35 72,65 11,64

4º 11-10-2006 27,69 72,31 11,83 11-10-2006 19,38 80,62 7,05 11-10-2006 26,72 73,28 11,27 11-10-2006 26,57 73,43 11,19

5º 25-10-2006 26,63 73,37 11,22 25-10-2006 25,00 75,00 10,28 25-10-2006 25,93 74,07 10,82 25-10-2006 25,58 74,42 10,62

6º 08-11-2006 25,78 74,22 10,73 08-11-2006 25,66 74,34 10,66 08-11-2006 27,01 72,99 11,44 08-11-2006 26,63 73,37 11,22

7º 22-11-2006 29,63 70,37 12,95 22-11-2006 24,66 75,34 10,09 22-11-2006 31,94 68,06 14,28 22-11-2006 27,10 72,90 11,49

8º 06-12-2006 31,98 68,02 14,30 06-12-2006 28,44 71,56 12,27 06-12-2006 28,05 71,95 12,04 06-12-2006 33,19 66,81 15,00

9º 20-12-2006 32,43 67,57 14,57 20-12-2006 27,86 72,14 11,93 20-12-2006 28,78 71,22 12,46 20-12-2006 32,39 67,61 14,54

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Anexo 2: Evolución del contenido de aceite el la variedad Fuerte.

Nº muestra Fecha % mat seca % humedad % aceite 1º 12-07-2006 22,18 77,82 10,47

12-07-2006 24,23 75,77 12,62 12-07-2006 25,59 74,41 14,05 12-07-2006 24,17 75,83 12,56

2º 26-07-2006 22,91 77,09 11,24 26-07-2006 22,98 77,02 11,31 26-07-2006 24,88 75,12 13,31 26-07-2006 20,31 79,69 8,51

3º 09-08-2006 25,14 74,86 13,59 09-08-2006 29,71 70,29 18,40 09-08-2006 23,82 76,18 12,19 09-08-2006 32,54 67,46 21,37

4º 23-08-2006 24,64 75,36 13,06 23-08-2006 34,38 65,62 23,31 23-08-2006 26,65 73,35 15,18 23-08-2006 24,63 75,37 13,05

5º 06-09-2006 26,06 73,94 14,55 06-09-2006 28,50 71,50 17,12 06-09-2006 31,49 68,51 20,27 06-09-2006 25,70 74,30 14,17

6º 20-09-2006 25,44 74,56 13,90 20-09-2006 30,61 69,39 19,34 20-09-2006 34,97 65,03 23,93 20-09-2006 28,30 71,70 16,91

7º 04-10-2006 32,98 67,02 21,83 04-10-2006 35,06 64,94 24,02 04-10-2006 32,00 68,00 20,80 04-10-2006 33,54 66,46 22,42

8º 18-10-2006 28,50 71,50 17,12 18-10-2006 32,00 68,00 20,80 18-10-2006 34,38 65,62 23,31 18-10-2006 30,61 69,39 19,34

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Anexo 3: Evolución del contenido de aceite el la variedad Isabel.

Nº muestra Fecha % mat seca % humedad % aceite 1º 27-09-2006 29,32 70,68 17,61

27-09-2006 23,84 76,16 12,07 27-09-2006 22,61 77,39 10,83 27-09-2006 21,11 78,89 9,31

2º 11-10-2006 26,27 73,73 14,53 11-10-2006 22,72 77,28 10,94 11-10-2006 25,30 74,70 13,55 11-10-2006 21,38 78,62 9,59

3º 25-10-2006 25,81 74,19 14,06 25-10-2006 25,00 75,00 13,25 25-10-2006 24,12 75,88 12,36 25-10-2006 22,47 77,53 10,69

4º 08-11-2006 28,66 71,34 16,94 08-11-2006 19,28 80,72 7,47 08-11-2006 22,97 77,03 11,20 08-11-2006 18,46 81,54 6,64

5º 22-11-2006 24,85 75,15 13,09 22-11-2006 18,00 82,00 6,18 22-11-2006 27,44 72,56 15,71 22-11-2006 26,83 73,17 15,09

6º 06-12-2006 23,60 76,40 11,84 06-12-2006 19,07 80,93 7,26 06-12-2006 28,00 72,00 16,28 06-12-2006 25,88 74,12 14,14

7º 20-12-2007 29,63 70,37 17,92 20-12-2006 24,66 75,34 12,90 20-12-2006 31,94 68,06 20,26 20-12-2006 27,10 72,90 15,37

8º 03-01-2007 31,98 68,02 20,29 03-01-2007 28,44 71,56 16,73 03-01-2007 28,05 71,95 16,33 02-01-2007 33,19 66,81 21,52

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Anexo 4: Evolución en el contenido de ß-sitoesterol en la variedad Hass.

N º Muestra Fecha N º repetición % ß-sitoesterol 1 30-08-2006 1 0,2241 30-08-2006 2 0,1076 30-08-2006 3 0,0232 30-08-2006 4 0,0279 2 13-09-2006 1 0,1852 13-09-2006 2 0,0751 13-09-2006 3 0,2796 13-09-2006 4 0,1704 3 27-09-2006 1 0,2760 27-09-2006 2 0,1259 27-09-2006 3 0,1698 27-09-2006 4 0,2137 4 11-10-2006 1 0,1284 11-10-2006 2 0,0745 11-10-2006 3 0,1540 11-10-2006 4 0,3305 5 25-10-2006 1 0,0076 25-10-2006 2 0,1684 25-10-2006 3 0,4145 25-10-2006 4 0,3376 6 08-11-2006 1 0,0388 08-11-2006 2 0,2048 08-11-2006 3 0,2721 08-11-2006 4 0,1719 7 22-11-2006 1 0,4218 22-11-2006 2 0,3670 22-11-2006 3 0,3320 22-11-2006 4 0,2441 8 06-12-2006 1 0,3120 06-12-2006 2 0,4599 06-12-2006 3 0,0772 06-12-2006 4 0,1253 9 20-12-2006 1 0,1735

20-12-2006 2 0,0269 20-12-2006 3 0,0407 20-12-2006 4 0,0803

Límite de detección utilizado < 0,0012.

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Anexo 5: Evolución en el contenido de ß-sitoesterol en la variedad Fuerte.

N º Muestra Fecha N º repetición % ß-sitoesterol 1 12-07-2006 1 0,1260 12-07-2006 2 0,0808 12-07-2006 3 0,1478 12-07-2006 4 0,0456 2 26-07-2006 1 0,1348 26-07-2006 2 0,4190 26-07-2006 3 0,0836 26-07-2006 4 0,0542 3 09-08-2006 1 0,0385 09-08-2006 2 0,1846 09-08-2006 3 0,2114 09-08-2006 4 0,0680 4 23-08-2006 1 0,1983 23-08-2006 2 0,1760 23-08-2006 3 0,0160 23-08-2006 4 0,0256 5 06-09-2006 1 0,1221 06-09-2006 2 0,2385 06-09-2006 3 0,1856 06-09-2006 4 0,1089 6 20-09-2006 1 0,2426 20-09-2006 2 0,0721 20-09-2006 3 0,1874 20-09-2006 4 0,2795 7 04-10-2006 1 0,1385 04-10-2006 2 0,2071 04-10-2006 3 0,1513 04-10-2006 4 0,0816 8 18-10-2006 1 0,2154 18-10-2006 2 0,1068 18-10-2006 3 0,1151 18-10-2006 4 0,0129

Límite de detección utilizado < 0,0012.

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Anexo 6: Evolución en el contenido de ß-sitoesterol en la variedad Isabel.

N º Muestra Fecha N º repetición % ß-sitoesterol 1 27-09-2006 1 0,3216 27-09-2006 2 0,1320 27-09-2006 3 0,1730 27-09-2006 4 0,3562 2 11-10-2006 1 0,1680 11-10-2006 2 0,2000 11-10-2006 3 0,0457 11-10-2006 4 0,1118 3 25-10-2006 1 0,3663 25-10-2006 2 0,2631 25-10-2006 3 0,1005 25-10-2006 4 0,2146 4 08-11-2006 1 0,3286 08-11-2006 2 0,1489 08-11-2006 3 0,3295 08-11-2006 4 0,2705 5 22-11-2006 1 0,3073 22-11-2006 2 0,0285 22-11-2006 3 0,2598 22-11-2006 4 0,1160 6 06-12-2006 1 0,4370 06-12-2006 2 0,3232 06-12-2006 3 0,2817 06-12-2006 4 0,1585 7 20-12-2007 1 0,4681 20-12-2006 2 0,2226 20-12-2006 3 0,2494 20-12-2006 4 0,3371 8 03-01-2007 1 0,3999 03-01-2007 2 0,3063 03-01-2007 3 0,1255 02-01-2007 4 0,2772

Límite de detección utilizado < 0,0012.

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Anexo 7: Evolución en el contenido de Campesterol en la variedad Hass.

N º Muestra Fecha N º

repetición %

Campesterol1 30-08-2006 1 0,012620 30-08-2006 2 0,005760 30-08-2006 3 0,001200 30-08-2006 4 0,001200 2 13-09-2006 1 0,010314 13-09-2006 2 0,002851 13-09-2006 3 0,013111 13-09-2006 4 0,009820 3 27-09-2006 1 0,013168 27-09-2006 2 0,013604 27-09-2006 3 0,012326 27-09-2006 4 0,010206 4 11-10-2006 1 0,001200 11-10-2006 2 0,001200 11-10-2006 3 0,007481 11-10-2006 4 0,015663 5 25-10-2006 1 0,001200 25-10-2006 2 0,007010 25-10-2006 3 0,041024 25-10-2006 4 0,033609 6 08-11-2006 1 0,001200 08-11-2006 2 0,011358 08-11-2006 3 0,013034 08-11-2006 4 0,008531 7 22-11-2006 1 0,018841 22-11-2006 2 0,018654 22-11-2006 3 0,014365 22-11-2006 4 0,012473 8 06-12-2006 1 0,013914 06-12-2006 2 0,001200 06-12-2006 3 0,001200 06-12-2006 4 0,005438 9 20-12-2006 1 0,005676

20-12-2006 2 0,001200 20-12-2006 3 0,001200 20-12-2006 4 0,004294

Límite de detección utilizado < 0,0012. (Las muestras que se señalan con este valor,

presentaron un contenido menor o igual a 0,0012).

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Anexo 8: Evolución en el contenido de Campesterol en la variedad Fuerte.

N º Muestra Fecha N º

repetición %

Campesterol1 12-07-2006 1 0,026680 12-07-2006 2 0,001200 12-07-2006 3 0,002254 12-07-2006 4 0,001200 2 26-07-2006 1 0,003138 26-07-2006 2 0,014512 26-07-2006 3 0,001200 26-07-2006 4 0,001200 3 09-08-2006 1 0,004241 09-08-2006 2 0,001998 09-08-2006 3 0,003045 09-08-2006 4 0,001200 4 23-08-2006 1 0,010034 23-08-2006 2 0,006480 23-08-2006 3 0,001200 23-08-2006 4 0,001200 5 06-09-2006 1 0,003292 06-09-2006 2 0,001200 06-09-2006 3 0,001897 06-09-2006 4 0,001200 6 20-09-2006 1 0,008048 20-09-2006 2 0,001200 20-09-2006 3 0,005182 20-09-2006 4 0,007473 7 04-10-2006 1 0,003559 04-10-2006 2 0,005622 04-10-2006 3 0,003779 04-10-2006 4 0,001200 8 18-10-2006 1 0,005660 18-10-2006 2 0,001200 18-10-2006 3 0,001773 18-10-2006 4 0,001200

Límite de detección utilizado < 0,0012. (Las muestras que se señalan con este valor,

presentaron un contenido menor o igual a 0,0012).

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Anexo 9: Evolución en el contenido de Campesterol en la variedad Isabel.

N º Muestra Fecha N º

repetición % Campesterol 1 27-09-2006 1 0,020451 27-09-2006 2 0,002457 27-09-2006 3 0,009156 27-09-2006 4 0,001200 2 11-10-2006 1 0,010059 11-10-2006 2 0,010968 11-10-2006 3 0,001200 11-10-2006 4 0,001200 3 25-10-2006 1 0,020522 25-10-2006 2 0,014623 25-10-2006 3 0,005419 25-10-2006 4 0,013521 4 08-11-2006 1 0,023572 08-11-2006 2 0,009135 08-11-2006 3 0,032402 08-11-2006 4 0,004453 5 22-11-2006 1 0,018457 22-11-2006 2 0,001200 22-11-2006 3 0,013656 22-11-2006 4 0,001200 6 06-12-2006 1 0,025735 06-12-2006 2 0,018597 06-12-2006 3 0,016286 06-12-2006 4 0,005392 7 20-12-2007 1 0,038884 20-12-2006 2 0,013238 20-12-2006 3 0,015756 20-12-2006 4 0,022984 8 03-01-2007 1 0,026532 03-01-2007 2 0,020312 03-01-2007 3 0,005384 02-01-2007 4 0,017409

Límite de detección utilizado < 0,0012. (Las muestras que se señalan con este valor,

presentaron un contenido menor o igual a 0,0012).

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Anexo 10: Evolución de ácidos grasos en la variedad Hass.

Nº Muestra

Fecha

Acido Palmítico

Acido Palmitoléico

Acido Esteárico

Acido Oleico

Acido Elaidico

Acido Linoleico

Acido Linolénico

1 30-08-2006 11,99 2,76 0,00 65,49 6,48 12,30 1,16

30-08-2006 13,45 2,69 0,00 66,49 6,22 10,12 0,58

30-08-2006 13,83 3,29 0,00 65,76 5,99 10,36 0,77

30-08-2006 12,05 2,26 0,00 68,10 5,50 11,05 1,03

2 13-09-2006 10,86 2,54 0,00 67,53 6,51 11,44 1,13

13-09-2006 12,13 2,33 0,00 66,61 6,04 11,71 1,01

13-09-2006 11,54 2,53 0,00 66,66 6,41 11,84 1,02

13-09-2006 12,76 3,02 0,00 66,46 6,16 10,81 0,78

3 27-09-2006 12,98 2,99 0,00 67,30 5,82 10,20 0,7

27-09-2006 11,66 2,35 0,00 68,85 5,82 10,49 0,83

27-09-2006 12,07 3,01 0,00 66,93 6,10 11,09 0,79

27-09-2006 13,01 2,58 0,00 65,60 5,40 12,46 0,95

4 11-10-2006 13,40 3,29 0,00 64,30 6,13 12,15 0,74

11-10-2006 11,62 2,52 0,00 66,92 6,13 11,87 0,95

11-10-2006 13,04 3,10 0,00 64,92 6,21 11,85 0,86

11-10-2006 13,45 3,01 0,00 63,57 6,44 12,69 0,84

5 25-10-2006 13,31 2,92 0,00 64,18 6,37 12,35 0,87

25-10-2006 12,76 2,80 0,00 66,24 6,12 11,35 0,73

25-10-2006 10,90 0,00 0,00 30,20 2,69 26,87 3,41

25-10-2006 9,19 1,56 0,00 38,04 3,07 20,5 2,53

6 08-11-2006 10,93 2,82 0,00 66,97 6,37 11,78 1,13

08-11-2006 11,65 2,87 0,00 65,93 6,21 12,20 1,12

08-11-2006 10,96 2,96 0,00 65,95 6,54 12,46 1,13

08-11-2006 12,00 2,71 0,00 65,62 6,24 12,35 1,07

7 22-11-2006 11,46 3,15 0,00 64,71 7,08 12,80 0,81

22-11-2006 13,41 3,01 0,00 62,47 6,59 13,66 0,87

22-11-2006 12,16 2,86 0,00 64,45 6,85 12,82 0,88

22-11-2006 11,94 2,63 0,00 65,29 6,49 12,74 0,91

8 06-12-2006 11,76 3,6 0,00 63,60 7,31 12,55 0,80

06-12-2006 13,62 3,47 0,00 62,55 6,76 12,84 0,76

06-12-2006 13,38 3,78 0,00 62,58 6,81 12,76 0,68

06-12-2006 12,20 3,48 0,00 63,33 6,88 13,21 0,90

9 20-12-2006 12,18 3,47 0,00 64,88 7,69 11,78 0,00

20-12-2006 14,07 2,95 0,00 60,93 6,39 14,84 0,82

20-12-2006 13,02 4,06 0,00 61,53 7,28 13,37 0,74

20-12-2006 13,09 3,53 0,00 63,61 6,68 12,31 0,79

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Anexo 11: Evolución de ácidos grasos en la variedad Fuerte.

Nº Muestra

Fecha

Acido Palmítico

Acido Palmitoléico

Acido Esteárico

Acido Oleico

Acido Elaidico

Acido Linoleico

Acido Linolénico

1 12-07-2006 11,03 1,54 0,75 74,10 3,44 7,95 0,58

12-07-2006 12,35 2,68 0,64 69,79 4,36 9,49 0,71

12-07-2006 11,42 2,40 0,67 72,14 3,72 9,02 0,62

12-07-2006 12,43 2,52 0,68 70,33 4,22 9,15 0,67

2 26-07-2006 12,32 1,75 0,84 72,95 3,31 8,23 0,59

26-07-2006 11,76 2,65 0,66 70,99 4,11 9,19 0,64

26-07-2006 10,90 2,36 0,51 72,73 4,75 8,21 0,55

26-07-2006 11,76 1,87 0,69 72,06 3,68 9,38 0,55

3 09-08-2006 9,35 1,91 0,39 76,42 4,02 7,44 0,47

09-08-2006 11,18 2,03 0,60 72,69 4,37 8,57 0,55

09-08-2006 10,75 2,43 0,68 73,27 4,27 8,11 0,50

09-08-2006 10,10 2,20 0,52 73,35 4,98 8,34 0,60

4 23-08-2006 10,00 1,96 0,54 72,79 4,26 9,68 0,76

23-08-2006 9,53 1,87 0,54 74,62 4,44 8,42 0,58

23-08-2006 10,85 2,09 0,58 73,29 3,97 8,69 0,52

23-08-2006 10,49 1,95 0,60 73,07 4,22 9,04 0,62

5 06-09-2006 10,43 2,03 0,56 71,46 4,59 10,18 0,75

06-09-2006 10,21 2,03 0,54 72,40 4,35 9,75 0,73

06-09-2006 9,75 1,94 0,58 74,20 4,14 8,79 0,60

06-09-2006 8,65 1,61 0,63 77,06 3,91 7,60 0,55

6 20-09-2006 12,82 2,03 0,75 71,39 3,77 8,73 0,51

20-09-2006 10,30 2,46 0,49 71,48 5,15 9,53 0,59

20-09-2006 11,04 2,49 0,66 71,68 4,30 9,34 0,49

20-09-2006 9,45 2,08 0,51 74,33 4,58 8,45 0,59

7 04-10-2006 9,75 1,59 0,62 74,72 3,92 8,85 0,55

04-10-2006 9,20 1,93 0,53 73,54 4,65 9,54 0,61

04-10-2006 11,41 3,08 0,66 71,45 4,86 8,11 0,43

04-10-2006 10,13 2,61 0,58 72,15 4,95 9,03 0,55

8 18-10-2006 10,68 2,18 0,63 74,07 4,32 7,66 0,46

18-10-2006 11,96 2,9 0,58 70,55 4,99 8,53 0,5

18-10-2006 10,9 2,74 0,64 72,86 4,28 8,13 0,44

18-10-2006 9,24 1,94 0,51 75,95 4,16 7,77 0,44

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Anexo 12: Evolución de ácidos grasos en la variedad Isabel.

Nº Muestra

Fecha Fecha

Acido Palmítico

Acido Palmitoléico

Acido Esteárico

Acido Oleico

Acido Elaidico

Acido Linoleico

Acido Linolénico

1 27-09-2006 8,98 1,25 0,51 76,55 4,07 7,93 0,72

27-09-2006 8,64 1,24 0,00 77,26 4,23 7,92 0,70

27-09-2006 10,13 0,96 0,62 77,27 3,40 6,94 0,67

27-09-2006 8,33 0,93 0,00 78,42 3,91 7,57 0,85

2 11-10-2006 8,36 0,98 0,48 76,69 3,77 8,96 0,77

11-10-2006 9,33 0,85 0,48 75,92 3,74 8,77 0,91

11-10-2006 9,01 0,77 0,61 76,65 3,19 8,78 0,99

11-10-2006 9,72 1,07 0,00 76,39 3,86 8,21 0,60

3 25-10-2006 9,36 0,96 0,00 74,76 3,70 10,22 0,97

25-10-2006 9,67 1,01 0,00 76,50 3,85 8,22 0,75

25-10-2006 8,02 0,96 0,00 78,81 3,50 7,97 0,73

25-10-2006 9,25 1,06 0,58 77,38 3,54 7,55 0,64

4 08-11-2006 7,13 1,05 0,00 78,54 3,66 8,84 0,77

08-11-2006 7,11 1,08 0,00 76,86 4,21 9,76 0,98

08-11-2006 8,44 1,08 0,52 77,38 3,56 8,20 0,83

08-11-2006 8,25 1,60 0,59 78,28 3,53 7,76 0,00

5 22-11-2006 9,22 1,22 0,47 75,18 4,05 9,10 0,75

22-11-2006 10,12 1,42 0,00 75,27 3,82 8,65 0,72

22-11-2006 8,13 0,82 0,56 79,93 3,12 6,86 0,59

22-11-2006 9,64 0,97 0,57 73,58 3,57 10,63 1,05

6 06-12-2006 8,59 1,08 0,49 74,59 3,90 10,45 0,91

06-12-2006 10,05 1,15 0,59 73,05 3,87 10,38 0,92

06-12-2006 8,28 0,87 0,50 77,31 3,50 8,78 0,76

06-12-2006 9,65 0,98 0,53 73,90 3,70 10,29 0,96

7 20-12-2007 8,89 1,18 0,00 74,38 3,72 10,79 1,04

20-12-2006 9,04 1,12 0,48 73,44 3,88 10,99 1,05

20-12-2006 9,48 1,21 0,51 74,35 3,65 9,94 0,86

20-12-2006 9,13 1,11 0,57 74,48 3,69 10,07 0,93

8 03-01-2007 9,19 1,12 0,00 72,83 4,11 11,78 0,98

03-01-2007 10,26 1,15 0,00 73,94 3,81 10,01 0,82

03-01-2007 9,11 1,02 0,63 76,83 3,22 8,53 0,64

02-01-2007 10,46 1,38 0,59 73,00 3,60 10,25 0,73

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Anexo 13: Ejemplo de tabla ANOVA utilizada en el diseño estadístico, de cada compuesto y de cada ácido graso cuantificado.

Análisis de regresión - Modelo lineal Y = a + b X

---------------------------------------------------------------------------------------------------------------

Variable dependiente: % de ß-sitoesterol

Variable independiente: % de aceite.

---------------------------------------------------------------------------------------------------------------

Parámetro Estimación Error estándar Estadístico T p-valor Ordenada 0,0603908 0,187703 0,321736 0,7570 Pendiente 0,01181 0,016915 0,698197 0,5076

Análisis de la varianza.

--------------------------------------------------------------------------------------------------------------- Fuente Suma de cuadrados GL cuadrado medio Coeficiente-F p-valor --------------------------------------------------------------------------------------------------------------- Modelo 0,00320666 1 0,00320666 0,49 0,5076 Residuo 0,0460463 7 0,00657804 -------------------------------------------------------------------------------------------------------------- Total (Corr). 0,04925298 Coeficiente de correlación = 0,255159 R – cuadrado = 6,51050 R – cuadrado (ajustado para g.l.) = -6,84504 porcentaje Error estándar de est = 0,08111051 Error absoluto medio = 0,0524682 Estadístico de Durbin – Watson = 1,68224 Autocorrelación residual en Lag 1 = -0,099242

La ecuación del modelo ajustado es. % ß-sitoesterol = 0,0603908 + 0,01181(% de aceite)

Dado que el p-valor en la tabla ANOVA es mayor o igual a 0.01, no existe relación

estadísticamente significativa entre % ß-sitoesterol y % de aceite en la variedad Hass

para un nivel de confianza del 90% o superior. El estadístico R-cuadrado indica que el

modelo explica un 6,51059% de la variabilidad en % ß-sitoesterol. El coeficiente de

correlación es igual a 0,255159 indicando una relación relativamente débil entre las

variables.

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Anexo 14: Ejemplo de gráfico de dispersión para una correlación estadística relativamente débil, entre la evolución del porcentaje de aceite y la evolución del porcentaje de ácido palmítico en la variedad Hass.

Coeficiente de correlación = 0,268

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Anexo 15: Ejemplo de gráfico de dispersión para una correlación estadística directa y moderadamente fuerte, entre la evolución del porcentaje de aceite y la evolución del porcentaje de ácido palmitoleico en la variedad Hass.

Coeficiente de correlación = 0,624

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Anexo 16: Ejemplo de gráfico de dispersión para una correlación estadística inversa y moderadamente fuerte, entre la evolución del porcentaje de aceite y la evolución del porcentaje de ácido esteárico en la variedad Fuerte.

coeficiente de correlación = -0,662