patulina ppt2003

Upload: adalgisa-balan

Post on 08-Apr-2018

297 views

Category:

Documents


1 download

TRANSCRIPT

  • 8/7/2019 patulina ppt2003

    1/16

    Master: Igiena alimentelor de origine animala si sanatate publicaFacultatea de Medicina Veterinara Bucuresti

    DETERMINAREA PATULINEI DIN SUCUL DE MERE, PRINCROMATOGRAFIE LICHIDA DE NALT PERFORMAN

    MASTERAND: ANA-MARIA GOLOBORODCO

  • 8/7/2019 patulina ppt2003

    2/16

    PATULINA, MICOTOXIN CU RISC PENTRU SNTATEA CONSUMATORILOR

    Micotoxinele sunt produi metabolici ai fungilor, care sunt capabili s produc efecte

    toxice acute sau cronice (cancerigene, mutagene, teratogene) asupra animalelor i asupra

    oamenilor.Patulina este o micotoxin produs n special de mucegaiurile Penicillium patulum,

    Penicillium expansum, Penicillium claviforme, Aspergillus clavatus,

    cu efecte toxice asupra organismului uman i animal.

    P

    atulina este stabil, n special, n produsele procesate din mere: suc de mere, succoncentrat de mere, nectar de mere, nectar de fructe (care are ca ingredient i sucul de

    mere), piure de mere, compot de mere etc.

    Facultatea de Medicina Veterinara Bucuresti Master: Igiena alimentelor de origine animala si sanatate publica

  • 8/7/2019 patulina ppt2003

    3/16

    Fermentaia alcoolic distruge patulina i, prin urmare, produsele fermentate,cum sunt cidrul de mere i cidrul de pere, nu conin patulin.

    Patulina a fost descoperit n produsele fermentate crora li s-a adugat suc de

    mere contaminat cu patulin, dup fermentare.

    Patulina este relativ termostabil, n mod special, la pH acid. Tratamentele la

    temperaturi nalte (150rC) duc la o reducere cu 20 % a concentraiei de patulin.

    Procesarea termic nu este suficient pentru a asigura obinerea unui produs liber

    de patulin.

    Patulina apare n principal n fructele mucegite. n anumite situaii, dezoltarea n

    interior a mucegaiurilor are drept cauze atacul insectelor sau altor invadri ale

    esuturilor sntoase, determinnd apariia patulinei n fruct, care la exterior apare

    ca fiind neafectat.

    Facultatea de Medicina Veterinara Bucuresti Master: Igiena alimentelor de origine animala si sanatate publica

  • 8/7/2019 patulina ppt2003

    4/16

    Din punct de vedere chimic, patulina este o furopiranon, cu masa molecular

    154, stabil n mediu acid, dar instabil n mediu alcalin. Se prezint sub form de

    cristale incolore, rombiforme sau prismatice, cu punct de topire de 110,5rC, cu

    maxim de absorie la 276 nm, n soluie alcoolic

    FORMULA STRUCTURAL A PATULINEI

    Facultatea de Medicina Veterinara Bucuresti Master: Igiena alimentelor de origine animala si sanatate publica

  • 8/7/2019 patulina ppt2003

    5/16

    Pentru evaluarea riscurilor pe care le prezint patulina asupra organismului, au

    fost ntreprinse studii, pe o perioad de peste cincizeci de ani.

    Simptomele acute determinate de consumul unor produse contaminate cu patulin,pot fi: agitaie, convulsii, dispnee, congestie pulmonar, edem, ulceraii, hemoragie

    intestinal, degenerarea celulelor epiteliale, inflamaie gastrointestinal, stare devom.

    Consumul frecvent al unor produse contaminate cu patulin, peste limitele maxim

    admise, poate determina n timp, urmtoarele efecte asupra organismului uman:

    efecte neurotoxice,

    hepatotoxice,imunosupresive,

    teratogene,

    cancerigene.

    Facultatea de Medicina Veterinara Bucuresti Master: Igiena alimentelor de origine animala si sanatate publica

    DETERMINAREAPATULINEI DIN SUCUL DE MERE,PRIN CROMATOGRAFIE LICHIDA DE NALTPERFORMAN

  • 8/7/2019 patulina ppt2003

    6/16

    Limitele maxim admise pentru coninutul n patulin al unor alimente(Ordin nr. 530/2007)

    Nr.crt.

    Produs Nivel maxim alpatulinei (ppb)

    1. Suc de fructe i nectar de fructe, n special suc de mere i sucurilede fructe utilizate ca ingrediente pentru alte buturi 50

    2. Suc de fructe concentrat dup reconstituire, conformspecificaiilor productorului

    50

    3. Buturi spirtoase, cidru i alte buturi fermentate derivate dinmere sau coninnd suc de mere

    50

    4. Produse solide din mere, inclusiv compot de mere i piure de mere,

    destinate consumului direct

    25

    5. Suc de mere i produse solide din mere, inclusiv compot de mere ipiure de mere pentru sugari i copii de vrst mic

    Alte alimente pentru copii altele dect cele pe baz de cerealeprocesate

    10

    DETERMINAREAPATULINEI DIN SUCUL DE MERE,PRIN CROMATOGRAFIE LICHIDA DE NALTPERFORMAN

    Facultatea de Medicina Veterinara Bucuresti Master: Igiena alimentelor de origine animala si sanatate publica

  • 8/7/2019 patulina ppt2003

    7/16

    Specialitii din cadrul Institutului de Bioresurse Alimentare, au elaborat i validato metod de determinare a patulinei din sucul de mere, prin lichid cromatografie de

    nalt performan.

    Principiul metodei: Extracia n acetonitril a patulinei din proba de analizat i

    purificarea extractului obinut, utiliznd coloane C.U. Patulin (MycoSep228).Eluatul obinut este evaporat pn la sec i reconstituit. Patulina este separat pe

    coloan cromatografic C18 - Hypersil Gold (cromatograf lichide de nalt

    performan Thermo - Finnigan), eluat n faz mobil i detectat la o lungime de

    und de 276 nm, utiliznd un detector UV-VIS cu ir de diode ,,DIODE ARRAY.

    DETERMINAREAPATULINEI DIN SUCUL DE MERE,PRIN CROMATOGRAFIE LICHIDA DE NALTPERFORMAN

    Facultatea de Medicina Veterinara Bucuresti Master: Igiena alimentelor de origine animala si sanatate publica

  • 8/7/2019 patulina ppt2003

    8/16

    Pregtire eantionpentru analiz

    Extracie patulin

    Purificare extract

    Evaporare extract

    Redizolvare reziduu

    Detecie HPLC apatulinei

    Etapele metodei de determinare a patulinei din sucul de mere

    DETERMINAREAPATULINEI DIN SUCUL DE MERE,PRIN CROMATOGRAFIE LICHIDA DE NALTPERFORMAN

    Facultatea de Medicina Veterinara Bucuresti Master: Igiena alimentelor de origine animala si sanatate publica

  • 8/7/2019 patulina ppt2003

    9/16

    Metoda de prelevare a probelor pentru controlul oficial al nivelurilor de patulin n

    anumite alimente este prezentat n Anexa IV a Normei sanitare veterinare i pentru

    sigurana alimentelor privind anumii contaminani din alimentele de origine animal i

    nonanimal, aprobat prin Ordinul 530/2007.

    Proba global trebuie s fie reprezentativ pentru lotul supus analizei i trebuie s

    cntreasc cel puin 1 kg.

    Probele elementare trebuie s aib mas similar. Masa unei probe elementare

    trebuie s fie de cel puin 100 grame, rezultnd o prob global de cel puin 1 kg.Abaterea de la aceast regul trebuie s fie consemnat n procesul verbal de

    prelevare.

    DETERMINAREAPATULINEI DIN SUCUL DE MERE,PRIN CROMATOGRAFIE LICHIDA DE NALTPERFORMAN

    Facultatea de Medicina Veterinara Bucuresti Master: Igiena alimentelor de origine animala si sanatate publica

  • 8/7/2019 patulina ppt2003

    10/16

    MOD DE LUCRU

    1. Extracia patulinei din sucul de mere, se realizeaz n acetonitril

    Omogenizare suc de mere cu solventProbe de suc de mere

    DETERMINAREAPATULINEI DIN SUCUL DE MERE,PRIN CROMATOGRAFIE LICHIDA DE NALTPERFORMAN

    Facultatea de Medicina Veterinara Bucuresti Master: Igiena alimentelor de origine animala si sanatate publica

  • 8/7/2019 patulina ppt2003

    11/16

  • 8/7/2019 patulina ppt2003

    12/16

    3. Evaporarea extractului de patulin purificat:

    Se realizeaz cu ajutorul unui bloc de nclzire cu sistem de concentrare a probei natmosfer de azot.

    Evaporarea extractului de patulin purificat

    DETERMINAREAPATULINEI DIN SUCUL DE MERE,PRIN CROMATOGRAFIE LICHIDA DE NALTPERFORMAN

    Facultatea de Medicina Veterinara Bucuresti Master: Igiena alimentelor de origine animala si sanatate publica

  • 8/7/2019 patulina ppt2003

    13/16

    4. Detecia patulinei prin cromatografie de lichide de naltperforman

    S-a utilizat un cromatograf Thermo Finnigan cu detector UV-VIS cu ir de diode,,DIODE ARRAY.

    DETERMINAREAPATULINEI DIN SUCUL DE MERE,PRIN CROMATOGRAFIE LICHIDA DE NALTPERFORMAN

    Facultatea de Medicina Veterinara Bucuresti Master: Igiena alimentelor de origine animala si sanatate publica

  • 8/7/2019 patulina ppt2003

    14/16

    Spectru al patulinei

    DETERMINAREAPATULINEI DIN SUCUL DE MERE,PRIN CROMATOGRAFIE LICHIDA DE NALTPERFORMAN

    Facultatea de Medicina Veterinara Bucuresti Master: Igiena alimentelor de origine animala si sanatate publica

    Curba de calibrare

  • 8/7/2019 patulina ppt2003

    15/16

    n intervalul de concentraii 10 g/l 400 g/l, recuperarea medie este 89,64%.

    n cazul metodei propuse pt. determinarea patulinei prin lichid cromatografie de naltperforman, limita de detecie (LOD) este 3,71 g/l, iar limita de cuantificare (LOQ)

    este 7,42 g/l.

    Metoda prezentat pt. determinarea patulinei din sucul de mere prin cromatografiede lichide de nalt performan este acreditat de RENAR.

    DETERMINAREAPATULINEI DIN SUCUL DE MERE,PRIN CROMATOGRAFIE LICHIDA DE NALTPERFORMAN

    Facultatea de Medicina Veterinara Bucuresti Master: Igiena alimentelor de origine animala si sanatate publica

  • 8/7/2019 patulina ppt2003

    16/16

    V mulumesc pentru atenie !