optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · martínez,...

179
Dirección: Dirección: Biblioteca Central Dr. Luis F. Leloir, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Universidad de Buenos Aires. Intendente Güiraldes 2160 - C1428EGA - Tel. (++54 +11) 4789-9293 Contacto: Contacto: [email protected] Tesis Doctoral Optimización de métodos de Optimización de métodos de criopreservación de embriones criopreservación de embriones bovinos y ovinos bovinos y ovinos Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales y de maestría de la Biblioteca Central Dr. Luis Federico Leloir, disponible en digital.bl.fcen.uba.ar. Su utilización debe ser acompañada por la cita bibliográfica con reconocimiento de la fuente. This document is part of the doctoral theses collection of the Central Library Dr. Luis Federico Leloir, available in digital.bl.fcen.uba.ar. It should be used accompanied by the corresponding citation acknowledging the source. Cita tipo APA: Martínez, Alejandro Gustavo. (2006). Optimización de métodos de criopreservación de embriones bovinos y ovinos. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Cita tipo Chicago: Martínez, Alejandro Gustavo. "Optimización de métodos de criopreservación de embriones bovinos y ovinos". Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. 2006.

Upload: others

Post on 02-Jan-2021

0 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

Page 1: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

Di r ecci ó n:Di r ecci ó n: Biblioteca Central Dr. Luis F. Leloir, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Universidad de Buenos Aires. Intendente Güiraldes 2160 - C1428EGA - Tel. (++54 +11) 4789-9293

Co nta cto :Co nta cto : [email protected]

Tesis Doctoral

Optimización de métodos deOptimización de métodos decriopreservación de embrionescriopreservación de embriones

bovinos y ovinosbovinos y ovinos

Martínez, Alejandro Gustavo

2006

Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales y de maestría de la BibliotecaCentral Dr. Luis Federico Leloir, disponible en digital.bl.fcen.uba.ar. Su utilización debe seracompañada por la cita bibliográfica con reconocimiento de la fuente.

This document is part of the doctoral theses collection of the Central Library Dr. Luis FedericoLeloir, available in digital.bl.fcen.uba.ar. It should be used accompanied by the correspondingcitation acknowledging the source.

Cita tipo APA:

Martínez, Alejandro Gustavo. (2006). Optimización de métodos de criopreservación deembriones bovinos y ovinos. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de BuenosAires.

Cita tipo Chicago:

Martínez, Alejandro Gustavo. "Optimización de métodos de criopreservación de embrionesbovinos y ovinos". Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires.2006.

Page 2: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

����������������������

���������������������������

������������ ���������� �

������ � ������� � ����� ��

���������������

������������������������������������ �������

���!�����������������������"��������� �������#$� ��

����%��&����'�����(��)��*

���� ���%��+(���������������,���

�����-�������������%��+(�)�������(''���

���������������'��������.���������

./��*��(.��

����������01223

Page 3: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

������������ ���������� �

������ � ������� � ����� ��

���������������

�����������������������������������������������������������

�����������������������������������������������������������

���� �!�!�"#���������������������������������������������

�����������������������������������������������������������

�����������������������������������������������������������

���� �!�!�"#���������������������������������������������

�����������������������������������������������������������

�����������������������������������������������������������

���� �!�!�"#���������������������������������������������

Page 4: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

������������ ���������� �

������ � ������� � ����� ��

���������������

�� ���������!� �#����45��������6������7��4����������" �� ��4��������

�������� ���48������� ������� �#� �������� ����!����� ���� ������4����+

�� �����5������ �� ��� �45������ � �� ���������!� �#� ��7���� �� � ����� �

!����5���0����� �4������� ��0���������������������9�����$������45��#�+

���5-���!���������������5�-�6����������������8 �� ���� ���������!� �#�

���"��������������������45������5�!����9�!��������� ������!�!����

!����+ .��� ���� �� �����:���� �!���� ����� ���� ���������!� �#� ����!���� ���

�45������+ ��� �����4������ ;��4��������4�-���� ���������� �� !���� 7�����

���� ���������������!���� �����4������������7���� ���+

��� ����������4�������;��%<= ��� ���� ������� ���������!� �#� 7��4������

�� ������$�� �� ������ 4�9�� 6�5������ ���� �����!�� ��� �45������ ;��

�;������ ;�� �������� $�� ���� � ��������$�� ��0 1= �� �$��$��� �� 5�-��

�� ����� ����� �� �� ����� �� ��� ���� ����� �� �� ������ �#� 9 �� ��� ��

��4� �#� ��� �������� ��� �� 5���7� ����0 >= �� �����7���� �� ���� �� ��

�45������5�!��������� ������!�!����4����� ��:���������8?�����4�������

��� 48����� ;�� ��!��� ��� !����� ����� �� ��4� �#�0 ����0 ��4��� � ��

��4��� ����0 �� 6� � �� 48���� ��" �� � ���� ��� ���� ��� �� ���� ����� ��

�4��0@=��!����7� � �#�����48����� ����5�� ������������ �4����5�����

��$���4����� �����0A= ����45����������� ���� ��!���� ������ �������8?���

4������;�� �������� ������!�!�03=�����������9 ��� ����������!��������

���45����������� ������!���������������������� �4�����0�������!� ���

Page 5: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��4�������������������# � ��+��4����������8?���9�������������� ��0

��4�������4����������45����������� ������!�����������4������� ��!��+

�� �!���� �� �5������ �� ���� ���5�-� ��� ���4���# ������� ��� ����� ���� ��

���������!� �#� ���� ��� ���� �� 9 ���� �� �45��#� ���������0 �5�������� ��

4"?�4� �7� ��� �� �� �� ��� ��� �� ���������!� �#� �� ��� 6����4������

�������5�������� ��������+

����$��%� !��&'� ��!����0 �!����0 ��$���4����� �����0 !����7� � �#�0 $�� ����0

������$�� ��0��������$�� ��0�� �����07������:� �#���!����

Page 6: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

������������������� � �������� �(������������� ������� � �������

�45�9� �9�������!�����6��5� �4����4��������� 6��;��B��6���6�4��6���

�7 �������� ������� ���� �� ��!���� ���4�� ��� ���+ �45�9� �������!��9 ��

�9�������!�������77���� �����$ ����!����!����5���0�� 6���6���� ���0 �6�

���$��7��!����4���0����6��45�9����$��+

�6� ��4 �7 �6�� ����9 B�� �� ����� �������� �9�������!����� ����� ��� �� ��

!�!�C ��� �� !����C����� �� 5�!��� ��� �!��� �45�9��B�������D �� �6�� ���0

����C �9�������!����� ������4���� B��� 4��� 59 �������$ �6� �45�9��+ �6�

�����4���� �6�� 9������ �6� 5��� ������� �� !���� B��� ���� ��� 7�� �!��������

�6���$6�����7��+

�6� ������� �6�B �6��% <= �9�������!����� ��������� ��������$ ��69���� $�9 ��

6�!� � $������ �5����9 �� ������!� �45�9�� �6�� �6��� ��������$ $�9 ���� ��

����9���� $�9 ��0 1= �������� �7 �� ���� �� � ��B �� ��������� �� 5��6

�9������ ���� �������� ��� ��4�!�� ��������� 6�� � 5���7� ��� �77� �0 >= ���� �

�����7���7��!�!�C����� ��5�!����45�9��� 6��!���� ����������4�������6�

4��6����6�� ��!��!���!������4�!����������6���5������90B6� 60����$B��6

��� ��4��� ��904�E�� �� � ��� �� ��4��6�� �� 5� ������� �� 7���� ���������0 @=

!����7� ����� �� �� � ����5��4��6�� �4����5�� �� ��!�������� ���B 7���:��$0

A= �� !����C����� �� �45�9�� 6�!� ��B�� �� ��� ����� �6�� �� !�!�C ����� ��

�45�9��03= ��!�������45�7��4��!����C����� ���45�9��6�!��6�$65���6

B��$6�0B6� 6 ������� �� ����� ���9��� �������������������+���6 ���������0

��B ���$��� 9 ����� ��� 6�$6 5���6 B��$6��0 ��4�� �6� ��� �7 �6��� �9�� �7

�45�9��������� �����9���4�+

Page 7: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

�6� ������� �7 �6� ������� ����9 6�!� ����B�� �� �� ����� �9�������!�����

����� ��� 7���� 6 ��� ������ �9���7�45�9��������0 ������� ��� 6��!� �6�

6�$6��� �77� � 9 �� �6� �9�������!����� ��� ��� ����$ �6� �������9 �!����5��

�����+

)'*�+���%���!���0�!���0���B7���:��$0!����7� �����0$�9 ����0��69����$�9 ��0

����9����$�9 ��0�� ����0��!����7������:�����

Page 8: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

�,��� ���� ����

������ �� ���� 4�4���� ;�� 4�� ��4��� ����� �4� �� ����� �� 4� �4�����

�?������ �� 7��4� �5�� 4� �$���� �4����� � ������ �� ��� 7��4� � ����

����!�������!��� ����������������!�����;�����4������������������ �#�

���������5�-�+

�����4����$��;������$���� ���(�4"9.��"0���;������ �������4�$���0

9���;��$�� ��������7���:�9�����9�6������� �� ����������4����$���+

F������$���� ������ ���4�����(�� ��������,����04����� ����������0���

���0���4"�����$����4�$�0$���9 ����-���+

4�G6��4���H����5����$���5������� "� ��0�����������4���-�����4�9

6�5�� �4��������� ����5���6���������5�-�+

��� �� ����� �������� (�$$��� 9 '�� ���� '�������0 ���;��4� �5������ ���

������������5�����������45�����$����4������ � ����������� ����?� ���

9���������0�"���4�4����4����$�������5�-�+

�� ���� �#�(��$�����.8��:��4��� 0���;������� ������� �����9 ����

���9�7���� ����7����������:��������������������;�� �4���������������

���5�-�+

��� �� ����� �� ���� ����� 9 ������ �� (���� ��� 6�5�� ���!��� � �5� ��

7��4��������������������� �#���!�������45������+

����� �����'������4����$������9'�5���������;����������!������ ��$���

���5��� �#�9���������7���� ��������45������+

��� �� ����� ������ (���� 9 (���� (��E�!� ;������ ���5������ �� ��

����������������?����4�����+

�� ;����� ��!���� �4�� 6��4����0 ���� 9 �4�$�� ���;�� �� ����� ����� �I��

���4���4��������������;����$���������+

Page 9: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

�� 7��4� 4�9 ���� ��� ;����� �$���� ���� � ������ ���;�� 4"� ;�� 4�

�4��I���0����7�������� �������������!�$��+������9�����������;��

6�6� 6�6�5������������5��+

.�� J���4� ;����� �$���� �� � &������: 9 �����0 ���;��$�� ���� ����� ���$�

���� 9 �� 6�� �� ��� �� 4� ����+ ����� ��� ��� ������������� �� ����� 4��

��7���:��+

�����(��,�'����0

'����!�

Page 10: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��J����� ����;�����������

���#�����$������0������!����9��D

�����I���6� ��4���9������4���

�����������!���� ��!��-��5��9��+++++

���!�������$��:

Page 11: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

-��� �

�$�'&��.���% ."$+<

/���#.����!!�"#�0'#'����

<+<+����45������ ."$+>

<+<+<+ ������$����������������45�������� ."$+>

<+<+1+(������� �#����45�������������4������� ��!�� ."$+<@

<+<+>+�5��� �#����45������ ."$+<K

<+1+�� ���������!� �#� ."$+>2

<+1+<+'������������ ."$+>2

<+1+1+.��� ������� ���5����$�� ."$+>>

<+1+>+��� � ��������� ���������!� �#����45������ ."$+@>

1���$2'.�&�%��'����3�'%'#.'��#&'%.�0�!�"# ."$+@3

4����.'����'%�*��5.���%�

>+<+���$��9��� ��!�� ."$+@L

>+1+�5��� �#����45������ ."$+@K

>+1+<+.���� �#����45������5�!�����5���������!�!� ."$+@K

>+1+1+.���� �#����45������5�!�����5���������!���� ."$+A2

>+1+>+.���� �#����45�������!�����5���������!�!� ."$+A1

>+1+@+.���� �#����45�������!�����5���������!���� ."$+A>

>+>+.���� ������ ���������!� �#� ."$+AA

>+>+<+.���� ������ ��$���4���������� ."$+AA

>+>+1+.���� ������!����7� � �#� ."$+AM

>+@+�!���� �#�������5��!����45������������ ��$���4����� ."$+AL

Page 12: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

>+@+<+�!���� �#���!��������������4�������� ���������!� �#�

���45������5�!����9�!���� ."$+AL

>+@+1+�!���� �#���!�!�����������4�������� ���������!� �#�

���45������5�!���� ."$+AK

>+@+>+�!���� �#���!�!�����������4�������� ���������!� �#�

���45�������!���� ."$+32

>+A+�"�������������� � ."$+3<

6������3�'%'�&�!�"#��'�'�$���#'%�$�&�#�%��$.'#���%��#�&�&��

@+<+������� �#� ."$+3>

@+1+���������� ."$+3@

@+1+<+���$���4�������������45������5�!�����5���������

!�!� ��$�� ����9������$�� �� ."$+3@

@+1+1+�7� ��������4�����;����5������� �������� �������

����� ����������7���� ������ �� ."$+3A

@+1+>+.���� ������ ��$���4����� �������7���� ������ ��0

�4�������������$�� �����������$�� ��+0 �45������

����7������� �� ����� ��������� ����� ."$+33

@+>+��� ���#� ."$+M<

7������3�'%'�&�!�"#��'�'�$���#'%�$�&�#�%��$.'#���%��#�&�.���

A+<+������� �#� ."$+M@

A+1+���������� ."$+MA

A+1+<+�7� ����� ��$���4���������� ��$�� ������� ������

��<91�����������5��!�����!�������45������

5�!�����5���������!���� ."$+MA

A+1+1+�7� ������!����7� � �#� ��������� �����.$N'��9� �

������5��!�����!�������45������5�!�����5�������

��!���� ."$+M3

Page 13: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

A+1+>+�7� ������!����7� � �#� ��������� ������ �0� �49

�$N'��������5��!�����!�������45������5�!����

�5���������!���� ."$+M3

A+1+@+�7� ������7������� �� ����� ��������� ���������

!����7� � �#���5���45������5�!�����5���������!���� ."$+MM

A+1+A+�7� ����� ��$���4����������9����!����7� � �#�����

��5��!������$����������7���� �����45������5�!����

�5���������!���� ."$+MM

A+>+��� ���#� ."$+K2

8������3�'%'�&�!�"#��'�'�$���#'%��&�#�%��$.'#���%��#�&�&��

3+<+������� �#� ."$+K@

3+1+���������� ."$+KA

3+1+<+�7� �����$�� ����9���������$�� �� �4� �������� �����

���� ��$���4�������������45�������!�����5�������

��!�!� ."$+KA

3+1+1+�7� ������ ������������������4� �#����������$�� ��

���� ��$���4�������������45�������!�����5�������

��!�!� ."$+K3

3+1+>+�7� ����������� �������!����7� � �#�������5��!���

���45�������!�����5���������!�!� ."$+KM

3+>+��� ���#� ."$+<2@

9������3�'%'�&�!�"#��'�'�$���#'%��&�#�%��$.'#���%��#�&�.���

M+<+������� �#� ."$+<2M

M+1+���������� ."$+<2L

M+1+<+�7� ����� ��$���4���������� ��$�� ����9������$�� ��

��5���45�������!�����5���������!���� ."$+<2L

M+1+1+�7� ������!����7� � �#� ��������� �����.$N'��9� �

Page 14: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

������5��!�����!�������45�������!�����5�������

��!���� ."$+<2L

M+1+>+�7� ������!����7� � �#� ��������� ������ �9�$N'��

������5��!�����!�������45�������!�����5�������

��!���� ."$+<2K

M+1+@+�7� ������7������� �� ����� ��������� ���������

!����7� � �#���5���45�������!�����5���������!���� ."$+<2K

M+1+A+�7� ����� ��$���4����������9����!����7� � �#�����

��5��!������$����������7���� �����45�������!����

�5���������!���� ."$+<<2

M+>+��� ���#� ."$+<<L

:����#!��%��#'%�0'#'���'% ."$+<11

;����$��!�!��#'% ."$+<1@

/<����$���0�� =� ."$+<1A

�35#��!' ."$+<A3

Page 15: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

������

�����������

��������������� �����������

������������������������ ����

���������������� ������ ����� ��� ������������������������ ����

! ���� ��"��#�� ��u�u��!������

%&��������u����u��������� ���� ��� ����%u������

%����%���'�������� ��

������������������

��!���!�� ��( �����u��� ��" � �� �������� ����

��)���)����� ����'�u��������u� ����

*�����*��������

*�+)���)����� ����� ��� ������� �������� ��

�,�,���-��� �u��u� ��

�,�,���-��� �������

- �-���-�.���������� ����"� ������ ������"��� ��(������

-������ �u� �������������

/)���)����� ��u�����( ����

/01���0���������'2u����

��&������� �����������3�"���������� �

Page 16: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��1���

��������������������������� ����

"��)�����)�"����� �

&����&��"�����������

&��*���*�� �������� ������ ����.��u �"��4 � �

� ����� � ��� �

�������u������� ��������

�!������.��5�����!���u�����u������������

6 ���77���6���u�� u��u�������u���77�

8-���8��� ���������� ���� ����

Page 17: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��9���

��� ��������� �� ����

������������ �

�������� �2u�� ��������������� ���������u� �5��� ����� �u����� �"������u��

"�������� ��� �:;<;;;� ���'�u���� "������� ���� =%� ���u��� .� ���,<� �779>,� �u�2u��

� � � u��� ��� ����� ���'�u���� ������ ��������� "������ �� ��� ������������ �u� ���� � �

��� � ��"���u���� � ���� ��� �� �u���� .� � � ���� � "������� �� ��� ����� �� u��

������������� ��� � � ��"����<� � � � .��' � ��� ������ ������� � =77<7?>,� ���� u��

������������ ��������������'�u������� ���������u� ��<�������������( ���.�"���u�����

u�������,� ��� "��� ����� 2u����� � ������� ����� � �����5 ����� ����� ���� �� ��

������ ��" � �"������ ��� �� " ��� ����"���u���� ������� ����"������ ��� ��������

u�������������������������������� " ������������ ��u� ���' ,�

������������������������������ !���"����

�#"$�%"�&'��$�

/ �"�����" �� �u����������� ������� ����� �'������������u� �����u������ � ������� �

��� �������� 5 �� � �u� ��� ������,�%�� ��� � � �� � ���� ���'�u���� ��� �����������<�

���� u���� "����� ���� ���� � � � ��u� ���� =���� ���� ��� � � � ��� � ������� >�

������ ��2u��� �� .��' ������ �� � ����� ,�

!�� ��u����������� �������������"��" � �����������" � �������� ���������u� ����

� � ��"� �� ���<��� �� �� � � � �� ������ �������� ���'�u�����u� ���������u���u��"��

�����,�������5 .� �������( ������� �u��"�� �������u���� ��������<� � � �u ��������u�� �

"���������������������u���u�������'�u�����u� ������.�u� ��u�� ���u� ���,�

�������������u� ����u� ������ ��� � 4�<�������� � ������ ���������� <�5��5��2u��

"����� ��u���� ����"������� ���� � �����u� ����� � ��� �u��� �2u�� ������� ��" � �

� ���� �����u����2u������������u����� ���,�

Page 18: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��@���

/ �� ���u� �� ������ ���� "������� ���� �� ���������� ��� ��������� �� ���"� � ������

�u� ���������� ������������� ����.������ �� �� �(�� ���������� ��������� ���,�

������.������������"�����������" � ����� ��������� �<����u� ��2u��"������ ��u��

�� ���������.�"��������"� �� ���� " ������ ��� �u� �,���� �"������� �������u� ��

��� ��3�� � ��� � � �� " � ���� � ��� � � ��� � ��� �<� ������ ���� �u���� 5 �� � ���

� ��������,� / � � � ����'���� � ����� ������� ��� � ��������� �� ��� � � "������� � ���

"u����������"� �����������������u� ����2u��"��������� ����u��� ������������� �<�

. �2u���3�����������u�� ������"� ������ ,�

/ ��������� ��������( �� ��� ����� ����" � �� �� �u� �� �������������"��� ����A�

�u���� �� �u� � � 4�<� ��� �u�u� � � ���(� ����"� ������ � .� ��� ��� �,� ��� �

�� ������ ������u�������� �� .��' ��������� �'�������u� ����� ���� ���� �,�

����������"��� ������ ��( �� �"����� ��������������� <��u�������� ��u ���u��������

����� ������ " � � ���� �� ��� u� � �� " � ��� ��� ������ �� ���� � "��� ����"��

���������� ��,�/ ��������������� ��������� �u� ���5 �� � �� �( �� � �� �u��(�

��3u �,� ��� ������� ��� ��"���� "������ � u�� �� �� ������� �3��������,� %u� ���� �����

"��'���� ���u�� ��� u������ ��� ��� ������� .� � � ���"��#�� �� ��� � �� ��� ��� ��

����"� ������ �,�

u ��������������������� ����"��� ������������u� �������u� ���<��u��u"�����������

5 ��� ���� �����u� �� ������ � 2u�� ������( � � ���� �� "������ ������� 5 �� � � ��

���u� �� �����u� ���� ����� �� .� " ������ ������������� ���,� / �� ���� � �� ����

������� .� ��� � �� ���u� �� �����u� ���� ��� ���u���� �� �u.� "�3�� �� �� ����u��� ���

�������� "u����� "u����� ����� ���� ������ �������� 2u�� " ������ u���� �,�

�����( � �"������������������ � � � ������5 �����u� ����������������� .� ���u� ��

�����u� ����2u��������� ���� �������( ����� �������,�

��� ��� �������� ��� � � � �u��(� ��3u �� � � )����� � ���'�u��� �����u� ���� =��)>�

������ ��� ����"����������� �u� ���������������.��������'�u���"������� �,�������

� �� ���� � �� "� ������ �� ���� ������� .� ��� � �� ���u� �� �����u� ���� ������( � �

���� ���� � � (�� �"������ <� � � �u ������� ���"u��� �"��������"����'� �<�.������ � �

��� �� � ����� ����"�������� �������"����� ��"�����������������( ���,�

Page 19: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��:���

u ���� ��� ���'�u��� "��� ���� ��� �� ����� � ��� ���'�u��� ���u�� ���� ��� ���"��� � � �

���� ���� ��� � � (�� � "������ ,� /��� � ����� ����"� ��������� ��� ��� ������� ����

"������ ������ �u���<� "���� ������� ���� ������� ��� �� �u��� � � "����� � ��������

������ <������������u���� ����� ��u ������������"��� ��������� ����� �����������

���u�� ���������� �������"���������"���u���"�� �<�2u��"��� ��������������������

� ����� � �"� ������ �.�� �(�� �"������ ,�

��� ���� ������������������� ���u� ���� " ������������ ����� � �"� ������ �

�����������.�� �(�� �"������ �u����" ����2u��������� ����u���'2u��������# ���� ��

������ �����u� �A� / � � ��� �� "���������� ,� ������<� ��� " ������ � ��

������������� ������� � ����� � �"� ������ �.�����"������������"� ������������

� �����u� �������u� ���,�

��� ���'�u�������"�2u�4��2u��������u���� ��������� ���������� ���'�u���"������� �<�

���� ��� "��� ��� ������� ���� ��� "��� ���u� �� ��� � � �� �u��� � "� � � �,� u ����

����� �2u����� u� � � " � ���"��� � ��� ���u� �� ���� �� ��������� ���� ������<� ���

�� ������ ������������� ���<�.���� ����������u�����'�u���"��� ���,�/ � " ���������

u� � ���u�� �� " ���� ���u� ����� � ��� �u��� � � � �����( � �� ���'�u��� ���u�� ���,�

/��� ���'�u���� "������� ���<� ��������� ����� .� "��� ����� ���� ���� ���"�������� ����

�� ��� ���������������2u�������u� �������� �����u� ����� ���� ,�

��� u�� ���'�u��� ���u�� ���� �� ���<� ��� "u���� ������ �� � � ���� ���� ��� � � (�� �

"������ � �������������������,� u ����"u���������� ���� � � ��� � ������ � ���� � �

"������u� ���"����� ���<�������'�u������u�� ��������� ������ ����"�� ��� �,���������

��� ���<� ���"u������������u��� ���� ����"��������� � �)����� �/u�����( ���� =/)>�.�

��)���� � ���� �.� � ��� �u��� <����"����� �����,�&��� ���� ���� � ����� �������� ��

. �"u��������u� ���u������������,�

/ � �� ������ ���� ���� ���'�u��� ���u�� ���� ��� ��� �� ����� �������� � � "��� � �

���� �������� ���u�<�� ��� �� ���� ���� �'2u���������u� ��2u���������������������.�

� �� ���u� �� �����u� ���,� ��� ���'�u��� ��� �� "����� ��� � � "������� � � � ��� � �3���� � .�

5 �� �������������� ���� ������� ������ ������ � � ���������'���������� ��� �u��� ,�

+��� ���� �� ������� ��� ���u���� � u�� ��u"�� ��"��� ��( ��� ��� ���u� �� ��� � �

�� �u��� � ������� � �� ���u� �� ���� ���u�u�,� ��� ������� 2u�� � ���� ��� "��� u� �

Page 20: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��B���

���� � � � " � ��� ���u� �� �����u� ���<� � � ����� � � �� � <� u���������

�3������� ��������������������'�u���.� ��� ��� �� �" ���������������u��"u���<����

���u�u����"5��u��=���u� ��>,�

���u� ��,����'�u��� ��� �������������������������"��� �����u���������� �5������ �� ��

���u� ������ ��� �u��� �=���*�����<��77B>,�

�&#��$�%"

��� ��� �������� ��� � � ��u� ���� ��� �u��� .� � �� ���u� �� ��� � � ����� � � �� � � ���

���"������� ��� � � " ���� ���� ���'�u��<� ������ �� 2u�� ��� �'2u���� 2u�� ��� " � ����

���u�� �� ��� �����u��� �� ��u"�������������� ���,�������������������� "�u� ���

"���� ������ ��������3���������� �����" �.�������( ����� ����� ����� �������� �

���� �5 �� ���������,�

8� ���(���� � � ����" �������( ��������������� ����"��" � ������" � � � ����u�� �

�������� ������ <� 2u�� ��� ���"��� � �u� ���� � � �������( ���� .� 2u�� ���� � � � �

�"������������� ��

6�� ��3���� �

6�� ������� �

��u� ������ ��� �u���

��u�u����"5��u�

��u���������u� ��

Page 21: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��C���

�3"u������������u�������"���u���"�� �,�/�����������������'�u��<����u� �������u� ����

.� ��� � � ��� � ��� ��������� �� "��� ����� ��� � � /)� .� ��� �� ����� �� ��� ���u� ��

�u��'��� �<� �������u.����� ��� �u��"�� ������ �� � �����<� ������ ��������� ��� � �

"���������� � 2u�� .u� � � � ������� ��� �� � (�,� ��� � ��� ��� ��� 5 ���

��"� �� ���<����"���u���� ���������������u��"�������,�

&��� �������� � �/)<� � �����u� ������ ���'�u���� �u��������� ��"���������� ,���� �

��� � ��u���(� �����������������������A�

��� �������������� ��������� ���� ��3���� ������u� ����� ���������������(�� ��

"������'��� ��2u��"����� ��� ���� ���������.�� ������u���������u��"���� �������,�

1�� ���������� ��������<������� ����u� ��� ������ �� ����5��� ��� ��u.���������

� ����� � ���� ��� ������� �� .� ������������ ������� � u� � u�� �� �� u������ ��� � �

"���������� � "�� ��2u������ � �u����� ������5�"����� ,�

����� ��������� ����u���� � u� � "����� � ��� �� ������ �� ���� ���'�u��<�

���" 4 � � ��� ��u#�� ��� "� �� � 5 �� � �u� ��������,� u ���� ��� u������ ��� ���

���u���� ���� �����u� �� ���"u���� ���� ����������"��� � �" �������� ���'�u��<���� � ���

���"��.�"������� �'�� ��3��u���������u���� �u��,�

&��� ��� � " ���<� � � /)� ���u��� �� ���� ���� ��� "� ��������� . "����� ���� � �

���� ���� ��� "� ���� <� ��(�� � "������'��� � 2u�� ���"�� � ��� ���� "�������� �'������

������� ���,�

��� ������<� .� � �����"��� �������� � � /)<� ��� �������( �� "���� �� ���� �� ��� ���

�� ���<�2u��� ��������� ������ ��������� �����u� ���u��u� �������� ���� ��3���� <�

�������� � ��2u����������������3"u�� ���"��� � �(�� ���������� ���������� ���� � �

" ���������u� �<�. ������� � �"���� � ����������(�� ���'��� �,�

���(���)�$�%"

������ ��2u������������"��� ������� ��������������������������� ���u� ����.����

���� ��� "��� � � �������( ���� " � � ���"��� �� �u� ���u�� � �������� ������ <� ���

Page 22: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��D���

��"��� ��(������. �u� ��������u������������ ��������u� �����u����������"�������

�� ��������� ��������������2u�����"�����������������( �� ��������,������"����������

������� ���E� " ��� ���E,�

/ �� " ��� ������u���������� �������"��� ��(�������������� �� ��� ��u����� �.����

����u���<����� � �"��� � � �3������� � ��� � ������� ��"��'������u�������� .� �u ����,�

%����������"����������� " ��� ����"���������������������� ���A�/ � ���� ����.�

� ��� ����� ������� ,�

/ � ���� ����������������������� ������� � �������� ��������"��� ��(�����2u��

��u���� �u� ���� �u� ��������� "��� ��� " � ��� ����� �� ��������,� ��� ��"��� ��(�����

���� ��� "������ � � .��� ������� �� 2u�� ��� ��"��� ��(����� �. �u� ��,� �����

�����������"���u����� �� �� ������ ��������� �"���� ���� ������ ����� � �

������"��� ��(�����.� �� u���������� ����� � ���� 1F� ��u����������=�� �G����.�

Hu��G�<��779>,�

/ � �� ����� ������� � ��u���� �u� ���� � � � ��� ��� �� ��� � � � " ��� ���� ��� � �

������ �� ���� ������,� ����� "������� ��������� ��� � � "����� � ��� � � ���� � �

"� ������ � .� � ����� � � ������� � �3���� � �u. �����<� ����� ���u�� ��� ���

���� ������� ��� � � ���� � � "� ������ � ="����� � ��� "����'� �� ��� �u"�������<�

���� ����������������������"��� ���������������" � �<�������u������������������>�

2u�������� ���( �� �u�����u��u� � =& ����5�.� ���,<��7D7>,������u����� �� ����u#�����

1F� �������� � � � �u���� ��� � �� ���� � �� "� ������ � .� ������� � �3���� <�

�������� ����������'�u� ��2u��������"�������������"��� ��(����,�

/ � �� ����� ������� � ������ "��� �#���� "�������� � � ���� ���� ��� � �� ��(�� ��

�������� �� ��� ��� ������ <� "�����" ������� � � 5� �u����� � <� � � �u �� �u�"��� � �

�u����� ��� ���"��� �� � �� ���u� �� ���� ���u�u�� ��"5��u�<� .� ��� �3"����� � �

���� � � ������� � ������ ,� ��� ��� � ���� � � ��� ��� ��( � � � ������ <�

"�"��� � � ���"��� ��� ��� 5 ���� "������ � � "����� ���� ���� ��"��� ��(����� �

�� �������� �(�� �"������ ,�

��� ��u����� ��� � �� ����� ������( �� � "������� ��� #u���� ���� ��� ������� ���

������������������� ��� ��2u���������� ��� ���"�������� ������ ��������( ���,����

��"��� ��(����� ��� u��� � � � (�� � "������ � "��� �u� ������ ������� <�

Page 23: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��7���

"���u���������2u�������� ������� ��( ���������������������������<������� ��2u��� �

�u���� ��� � � ���� � � ������� � ���� ������� ���� � � ���� � � "� ������ � ����

��"��� ��(����� ������ �u� �� "��� � � ������ "�� ������� � ��� � � � �( � ����

��"��� ��(�����=� �(�� �������� � �"�����������������u ���� ��.�����u����>,�

%����������"�����������������( ����"������������������������ " �A�

�>�+�������������� .�u���� ��� � �� � ��� �A� / �u������� ��"�� �.� ���"���u��� �

�� ���� ��� � � (�� � "������ � .� � � ������ ������� ,� ��� ��� ��� � �( ��� ���

"������ ������ ������������ .� �u.� ��"��'��� ,� ��� "������� ��� ���� ��� "��� � �

����� ����� ���� ��"�� I����"������� ���J� ������ ����u��u� �� "��������� ��� � ��

���u� �<� � � ����� ����� ���� � ����� ��� � � (�� � "������ � ���� ��� ����"���� ����

��"��� ��(�����.� � �������u��������5���������"������ �����u������ ������������

������,�

1>� �u���� ��� ���� � �� .� "����� ���A� ��� ��"��� ��(����� �� ���� � � � (�� �

"������ � "��� � � ����� ����� � � ��� �u� ������� �� .� ��� � � ������ � .� 5 ���

���� ���� ���� � ����� � � ������� ,� / ��������������� ���� ���� ������� ���� �� � �

� �( �������"��� ��(�����.� ��� ����� � � � �u����"���������������"�� ���������

��� � � ���� � � "� ������ � ���� ��"��� ��(����,� ��"��� ��� ����� "������<� ���

���u���� �����������������"��� ��(��������� ���"����������"� �� �������� ����

���I���������������( ���E,�

9>� +� �������� ��� "��������� ��� � � "����"���� A� 8� ���(� 2u�� ��� ������� 5 � �����

"����� ���"���u����"��� ��(����<���������� ��� ��u� ������������ ��������2u��

������� "��� �#���� ��"����� � � ���� � � ��� ������ ��"��� ��(�����<� . � 2u�� � �

"����"���� ����5 ��u ���������� ��" � ����������,�

��� ��� ������ ��� "��������� ��� � � "����"���� � ��� ����� � ���� ���� � � �� �����

������ �<� ����� ������u���� � ��� � � �u �� ��� "���u���� � �� �� �������� ��� (�� � .�

������� ,�

/ ��� ����������� �������������� � ��3������������ ��������u���������� ����u�� ����

"��� �� #�� ��� � ����� � � ������� <� � ���� ����� ���u�� ��� � � �3"u����� ��� �u�

���������� ���3�������.���� ���� �������u������ � �� �� ����� � �������� ,����

Page 24: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���;���

���������� ��� ���� ����u���� ������ ���� ��� ����� ��� ���"�������� ���� ������ ��

��(������ ������ �� �� ����"��� ,�/ �"����������"���u��� � ���� �� �������"����'� ��

���� �(�� �"������ <�������� ������������"������" � ���"��� ��(�����,�

��� ���#u���� ��� ������� ������� ��� � � (�� � "������ <� ����� ���u�� ��� ��� � �

�3��������� ��� ���� ����u���� ������ ���� ��� ������� � E�� ����� ��� (�� E,� / � �u ��

��u���� "��3�� � ������ ������:��������"���u��� �� ��������( ���,�

/ �������������� ����� � ������������u���������� �������� ����� � �������� �

"���u��� u� � ������u���� ��� � � ��u���(� ��� � � ���� ,� �� ������ � ����� ��� � �

���"������� .� � � ����'���� �� ��� � � ���� � � ��� ��� �u� � ��� ������� ��� � ��

��(�� �� "������'��� �� ���� � �� "��� ���� ����u���� ������ ���� 2u�� ���� �� � ��

"����'� ������u"�������<�������� ���u �������5 �� ������� �������������������������

" � ������"��� ��(����,���������#u�������������� ����������������� �E�� �����

������� E�.��������u� ��������1�.�9�5����"u������� ��������( ���,�

����������� !���"�����

��� $���(�� ���� ��� �u���� ��� � � �������( ���� ��� ������� ��� 1� � ����� ��

�����( ���� � � ������� ���<� � � �u �� ������u � �u� ���� ��� ��������� ���� ������

���������������u����.����"u��������������,���������� �������D����u� ������ � 4��

���� ��� ����� ��������( � �������u��,�

��� " � #������ �������������������u���� �������� ������ �u� �� � ����@��' ����� � �

" ������ ���� �����<� ��� ��� ��� ���� ��� �B�91� ���u� �<� ������� ��� %�#�� �"

$� *�$(�$�%",��2u'� � ��� ����� ���������u �����������'������������������ ��u� �

������ �.�� �� � ����u� ����u" �� �� .���" ����������" ����"�����������,�

���:K��' <� � ��� ����� �����������u��������=�������@D����u� �>�.��� �����<�

���� ���� u� � � � � ���" �� <� ����� ��� ��� ��� ���� ������� ��� %�#��

$� *�$(�,���� ��������u" ����B;�C;?�������" ����"������������.��u����������

"��3�� �������:;�L�,�

Page 25: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

�������

���BK��' ������������� ��������"������u� ���A�/ �����u� ������ �� � ����u� ��2u�����

u�� �u�u��� ��� ����� ���� ��� ����� .� � �� ���u� �� ���� ������ ���� 2u�� ���� �� � �

����"������ � ��� �� ��� ���� ���A� ��� � �������,� ��� ������ ��� ���������� ���

!���(�$��(�(� *��"��.�"����� �������������;;����u� �,�

��� � � 4�� ���� � �������� ������( � � u���� �<� ��� �u �� ��� ���" 4 ��� "��� ���

���� ( ������� ��� � � (�� � "������ ,� ��� "���u��� � � ��� " ������ ���� ��" ����

"������������ .� u�� u������ �� ������� ���� ��������� ���� ������ =�<1��<:� 3>� 2u��

���� � ������� 1;;�19;�L��.�"�����u� ��1;;����u� �<� �� �( ������� ��� �������

!���(�$��(� �+*�"����,� ��� ����� ��� ���<� � �� ���� � �� ���� ������ ���<� 2u��

"���u������ ���"u��� � �� ���� � �� ��� ���� ��� � � "� ���� <� ��� ���� �� ��� � �

"������� ������ �������,�/ �� � ����u� ��������� ����u����������"���������������

" � � �������u��� ��� ���� ������ ���,� ��� ������� ��� ����� ��� ���u� �� ��� � �� � �

���u� �������� ��������"����� �� �����u� ������������ ����������u���� ������� ����

�A1�=�G�(.�(�M�G �.����� �<��7D7>,�

��� ��� ��( �� � � � �������3" ����� =DK��' ><� ���"���u��������� ��������"������ ��

��� ��� � ��������<� � � (�� � "������ � �u.� ������ � � ��� ���u� � .� "������� ��� ����

��������� �� ��� ����������,�

%��"u�������������� ������� �(�� �"������ <����������"�����u� ��:;;����u� ��.�

u���� ����� � 4��" � � ���� �� �u����������� "��3�� ������:;;�L��������7K�

�' N� ���u�� ������ ���� � ��� u� � � ��� ��� ����� ���,� ��� ����� ��� ���� ���

������ ���� "���u��� �u����� �� "����'� �<� ������ ��� �� � � ������ ���� � 2u�� ���

�"���� �� � ������ ���u����'��� ����� �"���� �� ���� ��1 �� ,����� ���������������

� � ������������"���������� �"��� ��� �u��"�� ������"��������� � � ������u�� ����� � �

���� ���� =����������� .� ����5��<� �7DDN� /����� �<� �771N� � �� ����<� �7DBN�

8�5�#�� �.����,<��7DD>,�

�� ������u ���� ��� ����� �u� � ������ ���������� � ���� ���� ����������� ��� ����� "���

����2u�� �� ���� �������������� �'����� ��������� ���"� �� ����=���u� �1>,�

Page 26: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���1���

���u� �1,�%�� ������������� ��������������������� �u���5 �� ����� ����������������� ��,�

�������O�!������� �u��� �����1�O�!�������������( ���

� �

�����9�O����������D����u� �� �����@�O���u� ����" �� �

� �

�����:�O��� ������������"� ��� �����B�O��� ����������3" ������

� �

�����C�O��� ����������������� ���� �����D�O��� ����������������� ���

Page 27: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���9���

� *��"(�$�%"�

� #�� � �����u���� �������� ����������������"���������� <��u� ����� �� ������� �����

������ �������<� ������u.��� � �� ����� �������� u����� �,� ����� "������� 2u�� ���

� ��������� ��� �5��� � � � � �u"�������� ���� ����������� =�������������� u������>,�

%��"u������ ����� ��� ������ ���� ������"������ �������2u�� ��� ������� �����������

"��������������(������ ����������#��������u�� ����� "������ ��u'����=���u� �9>,�

/u���<� � ����� � 2u�� ��� ���������� ��� u��� ���� ��� ������ ���� " � � ���� �� ���

������<���� ����� �u�������� ��� ������ ���,������������������(������ �" ������� ��

��� � � "� ���� <� 2u�� "��"������ � �u��������� " � � ��� ������ .� "������� � �

������ ������������5���5 �� �� �����u� ����� ���� ,�&������ �" ���<�� �"� ���� �

"���u���� ��5����� ������� �� ��" � �� �������� �������������������������,�

/��� ��#����� � ������� �� ����� �� � � � ��"� �� ���� ���� ������ ���� ���� u� �

���� � ��� �"����� ���� � ������ ��� ������ �� ��� ���,� ��� ����������� ������� � ���

��� �����������u�������u� ��.��u�����u� ������������������ �(�� ������������� �

���� �����,� ��� "���u��� � ����� u�� u������ ��� ��� � � 4�� .� "������ � ��� � ��

��� ���u��u� ���,���� ����������� ������������u.���� �������u����� ���� � �� �

"� ���� ,�

���u� �9,�%����������� �������� ���"� �� ����=���65� u���.����,<��779>�

�"�������u������

�����

�������� &������� ���� �"������� ��5�����

-�� ����

Page 28: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���@���

/ � ��"� �� ����.� � � ���� ������� � �"� ���� �����"�����������������������2u��

5 � ����� "��" � ��<� "������� "��� ���������� .� ���"u��� "��� "���������� ,� ���

� ������������ ���� �� � (�� � ����� ��2u����� � � "���u����� ��������u�"�� ����

��� �� 5����� �<� " ����u� ������� "���������� <� ��� �u �� �������� � 2u�� ��� �u��"��

������������� �� ������.�2u�������u�������� ��u�����" � �"���u�����5����� �,�

��� ������� ������ u�� "�����"��� ������ � ��� �����"�� �� 2u�� ������� �� � �

�����u� ���� ���� �u��"�� �����<� . � 2u�� ��� ��� � �"�� � ��� �� ��� �������� ���

"�����5�"���� �������/),�

����,���"�*#��$�%"��� !���"���"���(� ��*���#$(�&��

/���"���������������������� ��������������������� �'�������u������� ��( �������

*� ������ 4 �"���*������+�� ����=�D@DO�D7@>�.�P �����)� "��=�D::O�717>,�

����<� �����u�� ���� ��� u� � � ���� � "��� ������u��� ��� �3���<� u����( ���� �����

��������3"������� �� ������#�,�

��� ������<��u��)� "������D7;�2u���������� �"����� ��� ��������� ������� �� �

�3���� ���� � �5������ <������ ����2u������������������#�����u� ��������� � �

� ( �"��' ���������� ������������ ������"���u���������5��� �������� �� ( �����

���� ���� ����"������ �������u�������=)� "�<��D7�<��D7C>,�

��� "������ ��������� ��� u� � �� ��������� � ������ �� � ��� ��"������ ��� ��������

���"��u ���� �u�� 5��5�� ��� ��� ������� ��� �����u��u� � ��� 6�3 �<� "��� P �M��G<�

����.� .� )��� �5��� 2u�����<� ��� �791� .� �799<� u� ���� ��� � ������ � ��� ������� .�

� "������" � ��������� ��� ��� u� ��2u��"���u�' ��� �"����� ���� �����5'���������

�� ����"������=P �M��G�.����,<��79@N�P �M��G�.�����.<��7@7>,�

/u�������� ����u�� �*u��� ��u��� �<����� �����" '�������������'������������� ����

� � ����u��u� � �����( ���� � "��� �� ���� ������ ��� ��� u��� ��� � � �� ��������� �

������ �� � " � � "���� � �� ��� ��#�� ������� ��� ������,� ��� �� � �"�� � � �

������� ���� ������� �� ������ ��3" �������� ��"�� ������ ��������������u����

�����u�������� � ���.������������� � �������������#�� ������������������� ����

������,� ���� ���� ����� ������� ��� "��' � 5 ���� u��� ��� ����� ��� "������ �� ��� � ��

Page 29: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���:���

� ��� �� ��� � �5��� ������� ������ �u"�������<� ����� ����� � "��� �� ��� � �

"������� �� ��� �� ��( �� ��� ������ ��� � �� 5��� �� ��"�� ���� � � �� ��������� �

������ �� ,�

6 � ��,�&����� ���� ��������� ���3���� ����������� ����"�����A�

�-���� � ���������� �.�

���#�� )� "�� �D7;�

"����� P �M��G�.�����.� �791�

!����� P �M��G�.����,� �799�

+ � � 0��5�� �� �799�

+ ��� ��G����.�/������ �7@1�

������� P�������.����,� �7:��

&������� Q� �����G�� �7:��

�2u���� !�u���.�6�u��u��� �7C@�

)u� ��� ���"����.���M ���� �7CD�

+������1:� 4������"u���������� ����������� �������� ���� ������� ���������������

����� ��� �3���� ���� � � �� ��������� � ������ �� ,� ����� �u�� �� ��( ��� "��� ��M.��

P������� ��� �7:;<� 2u���� �� # � " � � � � ������ �� ��u�� ����� ���� �5����u�.����

*������������ �����<�P���������=P�������.����,<��7:�>,�&���<�"���� ������"�� ��<�

����� ��� "������ u�� �� �� ��� ������� ��� � � ������ �<� . � 2u�� � � ������ � ���

������� � ���� � � ����� ���� ��� ������� �� � � �� ��������� � 2u������� � ��� ����

��������,� ���� �� ���<� � ���� ���� ��� ���� 4��� C;<� � ����� ��u"��� ���

�������� ���� 5 ' �� ��� ����� ��� � � ���u"�� ���� .� �� ��������� � ��� ���������

���2u������� ��=����������<�1;;9><�"����� ����u� ��3" ������������� ��� ���� � �

�� ��������� ������� �� ,�

Page 30: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���B���

��� � ������� �� �������� � ��5 ���������� ����� � ��� �� �� ������ �� ��� ���� � ��

���� � � �� ��������� � ������ �� � 2u�� "�������� ��������� �� ��� "������ ��

��"���u����������������������"�����,���������� ��� �"�����" ��5 ������� �"���u�����

��������������������,�%��������������(���������u�������� ����� ������������������

��"������ ��� ���� .� ��� 5u� ���� � ��5 ���� � � � " �� =�������<� �7D@><� ����

�� ���<���������"��������2u��5 ' �������� ��( ������ ��� �����u������"� ������

�7CB�"������� ������������/�u�������M�<����"������I������"���� J�=���"����.�

��M ���<� �7CB>,� ����� � ��������� �� �� � � ������� "���� � ����� ������ ����

�"��������������� #����������������' �������u�� � ����<�����������u���� ��

2u����� �' �5�.�"��������,�

!�� ������� ���� ������" ������������� ����� ��� ��������� ������� �� �5 ������� �

����"������ ���,�*� �� �� � ��� � ��� 5 �� "������ ���� �� ����� ��� ��������� ���

�����5u� ��������� ��� ��������������� ���"��u ���������� ����������"���������

"������� ��� �3������,� 8� � ��(� ����"������ ���� ��� "u���� �������� ��� ��� ����"�� � �

�� ��������� �������������������"u����������� ��"��� ���� ��u �2u��������������,�

��� ������<� "������� ��u��� �� ��u� �� ������ �� 2u�� 5 �� �� �( ��� ������

�� ��� ��� � ���<� . � �� � "��2u�� �u ���� �u����� ��� � �� ��� ���� ���� ���u����

� ��� ���"��2u��������u���� �� ��u ������������� ������,�

/ �"����� ������� ��� ���������������������"��������� ��"u� ����=P��� ����<�

�7C7>,���� ������� � ��� � �"u��� ���� � ���� � ���� ���� 4���D;� � � ���"�� ����

� ����� ��" � ������3 ���=&�� ���.����,<��7D:>,�

��������� ���������������� ��"u� �����u�� "��� ���� ��������� �"���u��������

2u���� �<� ��� ���� �� ���������� �<� ����u����<� ������� ���� ���� �� ��������� �

�u��� ��.��� ��������� ����� ���� ��=&� �5���.����,<��7DCN�&� �5���.����,<��7D7N�

������.�+��<��7DDN�P��� ����<��7DB>,�

%������ ���� � �"�� ��� � � ������ ��"u� ���<� ��� �77;<� �u�� ��� ����� � � � �

��.���������� ����"� ������ ������"��� ��(������=- �->,���� ������� �������������

�"�� ������ ��"�� � � ��� � � ��"���u����� ������ � ��� 5u� ���� ��� 2u������

� ����������� �� u� ����� ����������� ������ �" ��# ��������������� ��u����,�

Page 31: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���C���

����� ��� ��- �-<�������u���� �� �"���u�������������������3 ������"�� ����� �

��" � ���� ��� ��"��� ��(������ R� �� S<� " � � � � �u �� ��� ��"�� �u�� ������������

��u#��=����������<�1;;9>,�

&������� ������5������ ����� ��� ��������� ������� �� ������� �' ����"��� �������

���5 ���������� ��������� ������������������� �� ��"��� ��� ������� ���� A����

� ������������%���.������� 4���77B�.<��u�������u���� ������� � <��������� �����

u������� �����u� �������� �� ������"������ ����=����������>,�

�u�5��5 �������������� ���� �������" ������������������������������- ��P���u��.�

Q���5� �"���<� ��"���u���� �%���.,������� ���<����� ��������"��������2u�������

�� #����� � �"���u����� ��� �<�5�.���� ������"� ���" � �� ����u��� �� �� ���<�

�������������� ���� <������������ ��� ���������� ����u���� �� �� ��u��� ,�

/ ��� ��������� ������� �� �"������� u���� ��� �� ���� �������������������2u��

u� � 5��� � "u���� "���u���� ��� u�� 4�,� ��� ����������� ���� ������� ���

��������������"���5��� �"���������u�� �����u������������������ � ����" � � � �

��� ���� ��� �'�� �� ������� �� ����� " � � � � ���u�������� "�������� ��������,� �����

������� "��� � "��� ��� � " ���� u� � ���u���� �� "����� � ��� � � "��������� ���

������"��� ��� ( ��������3������,�

������ ���� ���� "�������� ��������A� / � �� ��������� � ������ �� � ��� 5 �

�� ������ ��� ��� u� � 5��� ����� � �u.� ��"�� � � " � � �� ��( �� �� #��� ���

��#�� ������� ��������� ��� ����������� ��"������ ��� ���,� / � "������� �� ���

u���� �����������������������������"���5��� ���������<���������� ������ # �<�

� �"������� ������� ��( ��� ����������������u�u������"���u������������u���������

� .������ ��� ���<�"������2u�����"u���� "��� ��u� �� .���"�����������������,�

&������ �" ���<� � �"���u��������u������ ���������������������������������� � �

�"���u��� ������������ ���������������� � ��5��� ��"������������ � ��� �u ����

����������u�� �������������"����u��5�# ��������u�� ���������������� �������,�

&��� ������<� � � "������� �� ��� ������� �� ��"�� ������ � � ����������� � ��� � ��

5��� �� #������ "������� ���u���� ��� ������ ��� ������ ����� ������� .� "�����5 ��

��� ����� # �" � ����u�����������"�� ��������"���u���������� ����� ������������,�

Page 32: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���D���

%��u�������� ���#�� �������� A������� ����������� �������� ���� ������� ��"�������

u� � �"�� ����u������� � ���#�� �������� ������"����' �" ���� ,������� ��2u�����

�� ��"� �����������������������u������������ (�" � ���������� ���������������

� ����u��������"������ �������������� ����"�����������<� u���� ���� � ��u� ��

����� �����5�#���� ������������ �"���������5��� ����� ����� ������������,�

&��������� ��� ��"������ ��� "������� ��� �3������A� 8�� ������� ������� ��� ��"������

����� ��� ( ��� ��� �3������� � ������ �� ���� ��� "� (�,� ��� � ������������ ����

������� �'����� ��� ��"���u������� ����� ����� " � � � � ������� ���� ��� � �

���������� �� ��� ����� ��������u.� �������� .� 2u�� � �u"���� ��� � ����� ��� ��

� ��� �� �,�

�3������������u����u�������������������������� ������"���� � �����"������ ����

��� ��"������ .� � ( �� ��� "������� ��� �3������,� ������"���� � �� ��� ���� ����u.���

��"������ � �� #��� ����� � ����� � ( �� ��� ��"������ ��� ��"��� ��� � ���"��u �� ,�

/ �� ������ �� ��� "���u����� ��� ������ "���' �� ���� ��"�� � �� " � � "������ �� � ��

����������� � ( �� ���� "���u� �� �u� ������ � �u� �� ��� ��"���u����<� ��� ���������

���������������.�������( ���� � ��"����� ��� u� � ��"��� � � � ���' ����u�����

� �u� �,�

���u���� #��"u��� �������779<�) ���.�+u ��<������ ����2u������ ��9D9��� ( ��

.� � ���� ���� ��� u����<� �� ���<� � � �<� � � �<� � ����<� ������� .� ���# ��

�3���������������������1;<�B�D�=�B?>���� �' ���3����u�����" � ���� 4��1;;;,�&���

����<� � � ��!� ������� ��� ������ C� � ����� +����� ���� ��� *������ � ���� �� " � �

"������ �� � ��������� ��������� ���� � ( ��� ��� �� =*�����<��77C>,�%�����������

������u�����u�� ��������u� ����� �=�������� �.��� ���><�1��������� �=����"' �.�

����� �><�1������� �= 5�� ���-��� >�.��������3����=�u������������� ���������� �

���� �� .� ��� ���>,� / � ����� ��� � ��� � � ��!� ����u.�� � � ���"�� ���� ��� u��

������ ���� �u��� �� ��� � ( �� � ��� �� .� "��"���� � � ������� ���� ��� ����� ���

������.���������������� �������� ��� ( �������� �,�

* � ��' � � ��� �� A� �� "�� �� ��� � �� ����� �� � ��� �� �� ��������� ��� ��� ������

������ ���� �<� � � "��" � ���� ��� �������� ���� ��������� �� ����� ��� �' � ��� � �

��u ��� �� ���� � � �� ������ ������� ��� ���������,�0u�����������u����<�5 ��

Page 33: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���7���

������� ��� 2u�� ��� �� �"� ���� ��� ��������� �������� � u� � ���� � " � � � �

�� �������� ��� ������� ��� ���� �� ����� ���� ���������<� =�����������M�.�*�����<�

1;;;><�� ���2u��� �(�� �"������ ���������� �����������u� � ���� �"�������� �

� �u� �� 2u�� '�� � � �� ���u� �� ������ �� �� ��� � � � .��� " ���� ��� ���� �������

������������2u��"u��������� ��� �� ��������u������,�

����� #����� ��( �������� � ��= 5����� u�.����,<��7DB>�.�������# ��=) ���.�

���,<� �7DD>� ��� �������� 2u�� ��� �� �"� ���� ��� ��������� "���� ������ � � ���<�

������ ��������5��� ������"������ ��" � �������u������ �����u � (u����������������

=�,6,�,>�"�������� ���� ��������� 4��������������� ��������� �,�

8���� ������� ���A� / �"������� ������u���"��� �� � ������������ � ���5��� �����

���� � ���� ��������� ��� �� �� �"� �����������������u����u�����"������� ����

"u� ������������� ���,�%��5��5������������ �������� ��� ���������� ����������

������� � ��� ���� 2u�� �����u�� �<� ������ ��u ������� ����� ���� "��� ��� ������ ����

�� ��"����� �� �� ����� ��� <�"���� �"u��� �����u ������ �.�"���� �������u�� �������

� "� ���� ��� ���� ��� ���� ��� ��� ������ ��� �������� =������������ �������� �<�

������ �� �� .� � ��� �� �>,� / � ������� ��( ���� ������������ ��� "������ � �����

u� � ���� � � ��� �� ������ � ���� ����� � .� �� ������ ����"�� ������� ������

���� ����u ��������� � ���������� �������� ���� ����������,�

����/��!(�"$�%"��� !���"��

� #�� ��� �'�u��� ��� �� ��������� � ������ �� � ��� ������� ���� " ���� ��� "���u����<�

�� ��� �������.�u������ ������������� �'��������������� ��� ���� �������� ��

5 �� �������� ��������<��u� �������"��'����2u��"������� �� ���"� �� ���,��������

�������� 4��� � �� ��"������ "�����" ������� ���u�� � �� 5 �� ����� ���� ������<� ����

�������.������ "�����,�

%����� � �u� ���"��#�� �� .� � �u�� ����� ������� ������ �� .� ��������� �<� � �

�� ��������� ������� �� ����'�������������"� ��� �� � ������� ���� ������� �,�����

�� ���<� ��� ��� u� � � ��� ���� � "��"� � � ��� ��� ���� ��������� ���<� "u����

Page 34: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��1;���

�������� u�� �3�������� ������ ��� "�������� � �� ���� ��� � � ���"������ ���� ��#���

� ���� ����������,�

-���#$$�%"��� !���"���"&�&�

& � � �� ��( �� u� � ���u � � "���u����� ��� ��������� �� ���������� ����� ��� ��

#��������������" �����u�� ���� ���A�/ ��u"����u� ����.�� ��������( ���,�

��� �#������ ��� � � �u"����u� ���� ��� ��������� �� ��� ��� ������� ��� ���'�u���� ���

������������" � �������u� ���,��������� ���� ����� �������u������ ��.������������

��� �������� ���u� ���� � � � ��� ���� ��������������� ����� ������������������� ��� ��

���� �� � ������� ����"���������������� �����������.� ����� "�����,�& � � ���� �� � ��

������������"��� ������������������������ � ���u � �� ����� ������� ���"�� ��

��������������������.���������"����' ����� �2u����� �������u������� � �= 5u"��<�

�7DDN�65�����.�*u����<�1;;;N����� �/"�(�.����,<�1;;:>,�

��� ���� ������<� � � "���u����� �� �( � ��� "�������� u���� :� ���������

�� ���������,������� ���<��3�����u� ��� ��� �� ���� ������ ����"u��� ������� <�

. � 2u�� ��� 9;?� ��� � �� ��� ����� ��� "���u��� ��������� �� ���������<� .� ���� ���

@:?�"���u���@�������=* ����.����,<�1;;9>,�/ �� u� ������� �� �� ���� ������������

���"�������,� &��� u�� � ��� � �� ��������� �� ������ ��� ���� ��� � � � ���� �� ���

���'�u���� .� � � ��������� �� �� �� � ������<� .� "��� ��� ����� � �� � �� ������� ��� � �

��������� ������������������������������ ��"��" � �������5����� ���,�

/ � /)� ��� �3����� �� ��� �������� ���u��� � � ���"u��� � �u"����u� ���� ,� *� �� �� �

� ��������u������� ��( ����5 ������"��������������u� ���� ����"��� ���)A/)<�� �

�u �� �������� ��� �u����� � � �� ����������� ��"������ .� � ( �� =��� ���.� ���,<� �77�N�

5u"��<� �7D:>,� �� " ����� ��� ������ ���u����� ��� 5 � ���� ��� �� ��� ������� ��� u� �

"��" � ���� 5����� �<� ��� "��u�� �� � "����� <� 2u�� "������ � ��)� .� /)� ��� ����

�"��� �� ����������� " � � � "� �� �� � ���� ��2u����������� ��� � � � � ��� ���

" ����u� �,���� �"������ �������5 �5��5����������� �� � u��������2u�����u�����

�� ��( ��������������.�� "������������� ����2u�����"��������#�� ��� ���������� �

Page 35: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��1����

���� �� � ������� �������� ���� ���u���� ������� ������ ������������� ��� ��)� .�

��������������/)�=Q� ����<��7D7>,�

��� ������ ��� � � ���"u��� � ������ ���"��������� ������� .� � � 4����� ���� ���'�u����

"��������� �� ������(�� ��� � � �����u� ���,� / � "������� � ��� u��� �� ���� ���'�u����

�� �����=�;������������������� ����������<�.�B��������������.�� "�����>����

"��#u���� �� " � � ��� �� � ������� =%�� ���u��<� 1;;�>,� &���� ��� ��� �������� ��

������ �����*�+)��u� ����u��"��'����� ����"������ ���� � ������������u� �����<�

������ ���'�u���� �� ����� ��� " �����,� %�� ��� �� ��� � ��� ���� � 2u�<� �u� ���� ���

�� � ������<� ������ ���� ���'�u���� ��� � � 4�� "�2u�4�� �� �� �����u� ���<�

����u������� � u�� ����������� ��� � � � � � ��� ��u� ���� .� ������������ � �

� �� ���� ������ ����"u��� �=�� ��<�1;;9>,�

��� ������� .� � "������ ���� �� � �������� "u����� ���� ��"������� � � � B� ��� � �,�

&���� ��� 5 � ����� ��� 2u�<� ��� ����� �<� � �� ��� ����� �3"������� �� u� �

������u���� ��� � � ���"u��� � �u"����u� ���� � � ����� � 2u�� ��� � �� ����� � �

�u����� �� � �������� =%�� ���u��<� 1;;�>,� ��� � "�����<� ��� 5 �� ������ ����

����u��"��� ������)� ���"u��� ��� ��"������� �� � �������N� ������������ u� �

������ ������� ��� ���������������������� ����u��"���.�� ����"u��� ������� �=� ����

.����,<��7DD>,�

/u���������� � ���������������u� ����5����� �<�� ����u� ����������"���u�������

u��� �������� �� ��5�� �A�B����� ����# <��1����� �� � �.�1@����� �� � �=� ����.�

���,<� �77;N� 5u"��<� �7D:N� Q� ����<� �7D7>,� & � � ������� � � � .��� � � � ���

�������( ���� �������� ���� ��������"����� �������������������� � ���u� ���,� / �

���� � � ��� ����� ��� ����� ������� ������ ��� ���� � � ���� ��� �������� ��� � �

��u� ����.�� ����������������������"u��������u� � ������������������������" � �

"���� � ����������������� �������� ���,�

%����� �2u����� ������ ������������"�������/)�.� � ���u� �������������� �� ��<�

�������� ����� "���� ��� u� � u�� � ���� � ��� ����� �� ����������� ��� � � ��u� ����

=� ����.����,<��77;N� 5u"��<��7D:N�Q� ����<��7D7N���u( �.����,<��77C>,�

8� ���(� � ��u� ����������������� � ���u� ���� ��� �� ��( � � � ������� ������� � �

��� ���,� / � �u �� "u���� ���� �� ��( � � ���� ���� � � �"u� � ���� u�� � �5��

Page 36: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��11���

��������� ��������� ����������� ���� ������� ��=� �� � ����.����,<��771N� 5u"��<�

�7D:N�Q� ����<��7D7>,�

!�u���� �� ��������( ���<��������������"���u������ � �( �� ����� ������������u����

5 �� � �� �( �� ��� �����<� ������ ������ ��� ���u"�� �� "��� � � ��� ��� � � � ��� ��

u����� <� ����� ��� 2u�� ��� "���u(� � � � ��"� �� ���,� ��� ���� ������� ��� �

���u"�� ���� ��� �� ��( � ��� ���� � ��� 2u������� <� ��"�� ���� u�� � ������ 2u�� ���

������u��� ��� ���������u����<�.� ��� ���������u ��������� �.����� �' ��������������

u� ����u�������� � ���=*�����<��77B>,�

��� �����������.�� "�����<�������"u������"�� �� � ��' ������� �������� � � ����'����

� ���' � ���� �u����<� "��� ����� � � ���� � "������� �� ��� �� ��( �� � � ���u"�� ����

2u������� ,� & � � ����� ��� ����� �3"����� ���� �u������ u�������� " � � "�����

�� ��( �� ��� " � #�� ��� ���u���� ��� � � ��� ��"�� ���� #����� �� .� � �������� ����

���� ����2u��������"�� �������������������=*�����<��77C>,�

��� ���� ������� ��� "u���� ��"����� ��� � �� �� �"���u��� ���� � � ���u"�� ����

�� �������� �������������,��������� ���<�����������.�� "�����<� � ����u"�� ����

2u������� � "���u��� �5������ �<� 2u�� ����� �� � � "������� �� ��� ��"����� ���

�� � ������,���� � ����u"�� ��������������������� ��( � �"����' � � " ����"�� �

��� ���� �������� �5������ �<� ��� 2u�� "������� � ��"����� ��� �� � ������� 5 �� � C�

������������������ ��� ��=� �� � ����.����,<��771>,�

/��� ��������� ���u"�� ���� ���� "�������������� �� ���������� � u� � 5��� �

����"��� ,� ��� ������<� � � "������ � ���� �3������ � ��� � � �� ��������� �

�� �������� �<�. �2u����������������������������.��������2u�������������� � �����

"��4�(� 2u�� ����� �� ������ ��� :;� .� B;?,� ��� � � �� ��������� � 2u������� � ���

�������� � � �����"��4�(� ���� �u"�������<�"���<������� ��u����"��#�� �����5 �

��# ��� ��� �� ��( �� =����������<� 1;;9>,� ��� ������� .� � "�����<� ��� �� ��( � � �

�� ��������� �2u������� ������ � ������3����2u������� �����������:;�.�B;?�=� ����.�

���,<� �7DDN� Q� ����<� �7D7N� 65����� .� *u����<� 1;;;>,� ��� ������ ���� � ���� ����

��������� ����� ���� ��"���� ���� ��� ��� �u����� u������� "�3���� �� �� ���� ��� ���

2u��������u���� �����u��"���������u����� �,�

Page 37: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��19���

/�������������������������.�"��" � �������� ������"��� ���������A�/ �"������� �.�

" ������ � ���� �u��"�� ������ ��� ��� �������� ��� � � �� ��������� � .� ��� �� ��� ���

�������' ������������� ��������������.������� ����������"����� ���������������� �

����"��� �=��� �����.����,<��77�N�&��������.�/��<�1;;9>,�

-���#$$�%"��� !���"���"&�(��

/ � "���u����� ��� ������ ��� ��������� ��"������ � u� � ����� ��� � ������� ��� � ��

������ �� ��� ��"���u����� " � ���#�� �� � � "����� ���� ��"���u���� � .� ��� � ����

������������ ��� ��������������� ���"��u ���,���� ������� �"��������� ��������u��

�� ������������������������" �������������� ���<����u���� ����"����� �����

�������� �� .� �3" �������� ��� "������ �� ��"���u������ ��� � �� ��� ����� =Q #�5 � � .�

���,<��77�>,�

���"����������"������ �����" ���� �u�� ���� ���A� >�� �u� ������� �����������<�

>�� " ��� �������������"��� ��(������.��������( ������������������<�.��>��u������

�����������������������,�

/ �� �u� ���������� � �����( � �"������������������� ���������.�� ��3��u��������

"������ �u��"��"�� �� "��� " ���� ���� ������,� / �� ����������������u��������"�� � ��

" � � � � � �u� ���� ��� ������ "u����� ����u��� �������� ��� ������ ��� ��� �3���� ��� � �

�������( �������������.������� ������������� ����"���������=+����.�� ������<��771>,�

8��"u������ ���" � ���� �3������� � �"���u����������������� �������������� ��( ��

u� � "��"� � � ��������� ��������� � ��� ���� �������� � ��"�� �� ��� ��� "�������

= ��(��<��77�>,�8���������������"� �� �5��������.����� u�� ��������u� ������

���u�u�� ����������<� ��� ��� ��#��� ����� ���� ��� � � � " ��� �� ��� � �u� �� .� ���

��� ����� ��u��������=�� �G����.�Hu��G�<��779N�%��/����.����,<��7D7N��uGu��.�

� Gu� <� �7D;N� /�������� .� �����<� �7C7N� S�u���� .� ���,<� �7D7>,� / �� ���u� �� ����

���u�u�� ���� ����� �� �� " � � ��� �� ��"����� ��� �u��������� .� ��4 ���� 2u'��� ��

�������.��u�� ����������������=�����.��� � �G<��7DB>,�

Page 38: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��1@���

/ � ���������5����� ��� �����������)<�/)�.����� ����� ������������ �u� ����

���������������� �� ��������( ����.������� ������������� ����=�� �G���.����,<��7D7N�

S�u����.����,<��7D7N�Hu��G��.��� �G���<��77;>,�

& � �2u��� ��������( ����������������� ��3����������������"���u����� ��������������

2u�������"��� ��(��������u���� ��������� ������������<�. �2u������������ �u� ��

������ ��� ��"��� ��(����� �u���� ���� "�������� ��� � " ��� ���� .� �� �����

������� ,�

���u ������� ��� u� �� ������� ���� 5�" ��� � " � � � " ��� �� ��� ������ � ����

��"��� ��(������ ��� ����� =*�����.� ���,<� �779 N� /u� .����,<� �7DCN� & ����5� .� ���,<�

�7DD><������� ��2u�������"��� ��(��������� ������������u ������u������������

)�&��� ����� ��� ���� �u���� ��� ���# � ��� ������ " � � ���5�� "������� =)u�� u� .�

��(��<��7D7>,�

/ ��u���� �������������� � � �.�������"��� ��(�������������������" � �������

����������������� �����M���u"�=& ����5�.����,<��7DB>������� ������ �����������

������ �� =� �� ����� .� ���,<� �771>,� ��� ������<� " � � ���� �� � � �������( ���<� ���

���u � �����������������u� �� ���� ���������� � ������"��� ��(���������������

����������( ����=�uGu��.����,<��7DD>,�

/��� "�������� �3"���������� ��� �������( ���� ��� ������ ��� ���� �� �� �( �� ���

��� ���������� ������������ ���u�� �������� ����������� �������D� ��B����u� �,����

�������� �������"���u�' �u����2u�����"�������������" � ���������u���������������

��������������<�"�������������"�� �����u���������������������u��������� � <����# �

������# �=�.�������.������<��7D7N�*������.�/u<��77;N�/u�.����,<��7DCN���� ���.�

/ ����<��7D:N�Ru�.����,<��7DCN>,�+���������������� ���������������� ������u������

����������������"��#������ ����� �� �( �� ������� ����������u� �.T��� ���������

�����3����=�u��u��.����,<��77D>,�&������ �" �������5 �������� ���2u������������

�u������ ����������� �� ����������� �u"��������� "��������� ��� ������ �������

��������� �� ��� ���� ��������� "���u������ ��� ������ � � � " ��� �� ��� ����� �� � �

����"������ ����=-� ��.����,<�1;;1N�/ ���.����,<�1;;9N�0�� � ���.����,<�1;;@N�

+�(���.����,<�1;;9N�S���u�5�� �.����,<�1;;@>,�

Page 39: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��1:���

/��� ������ ����� �u���������"������� ��� � � ��u ��� �� ����u.��� ���� ���u������<� ����

������� ��������� ���� .� ����������� ����������,� ��� ���� ���u������<� ���� ���������

���� ���u ���� ��� ���� ���� ���� ���u� �� ������� �,� & � � ����� ��� u����( �� ���u� ��

�"����� ���<� ���u� �� ���� ���u�u�� u� ������ ��"��� ���u� ���� = ��u�� .� ���,<� �7D@N�

�.������� .� �����<� �7D7N� �uGu� � .� ���,<� �77;N� �uGu�� .� ���,<� �7D7N� )�.� �� .�

����(�<� �7DCN� & ���G� .� ���,<� �7D7N� 6 G � � .� ���,<� �77;N� 65���� u3� .� ���,<�

�771>,�/������������������� ������"�� ��u��"���u������������u� ���������u�u��u�

����u�� ����" � ��u�����u���� �������������������������������2u���������u�� ����

=Q� . �5�� .� ���,<� �771N� ���������� .� ���,<� �779>,� ��� ���"����� � ���� �������

����������<� ���� ��������� ���� �u���� ���� ��� ���u������� 2u'��� ������ ������� ��

�u.��� ���"�������� ��� ���u���� �� ��� �������� ������� 2u�� ����� �� ����

�������� ����u�� �� .� u������� ������� �� ��� ���� ��� ��� ������� ���� ������

=� �������.�+����)����G ��<��771N����� ����.����,<��77BN��uGu��.����,<��77�N����

/ u�5����.����,<��7D7>,�

��0���"$����"�� ��0������1��!��2#� �$������� !���"���!(�"����

�"&�&���"&�(��

6�� ���� ����� ������� �� ������ "���u����� ��� ����� .� ���" �������� ���� ���

"���u����� ��� �����<� "������� ��� ������ u� � ������ ��� ��������� �� � ����

��������� �� ����� ��2u'��� �,� ��� �� ��������� �� ���� "���u���� ��� � � ����u���� �

2u�� �#����� ��� ������� ��� ��� 2u�� ��u����� � � � �u� ���<� � � �������( ���� .� ���

��� ������������� ��������� ������"���������������=6 � �1>,�&�������<�"����

�2u�����"u����"���u������������������������� " ������u�� �� ��� �� �" ��������

����������� �u���<�� ��� � ����"��4�(��������������u��1;?�������2u��� ������u�

����� " ���������������������=�� �G���.�Hu��G�<��779N�*�����.�� �����<��77�N�

) ����<�1;;9N�Q ��<�1;;9N�� ���"�.����,<��77:N�+���5�� �5�.����,<��771N�� ��

�����.����,<��77@N�Pu��5�.����,<��77@>,�&������ �" ���<�����������������������

�������������������������� �� �����"������ ����=) ����<�1;;9N�Q ��<�1;;9N�/����

.�/��Gu����<��779N�Pu��5�.����,<��77@>,�

Page 40: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��1B���

6 � �1,� ��" � �������� ����������2u�������� ����� ��������������������������������

�� ��� ������ �u� ���� ���� ��� ����� "����"� �� ������� =������� ��� ��� +������ .� ����������<�

�7D7>,�

� ���� � �����

U�6��"�� �u� ����"�� ������� ���� U��5��G�����������

U�!��u��� �����"��� �U��3"������� �� ��u(����� �������.�����

��������"���

U�6���������!1�.� !1�������� � � U��3"������������� � ��� �� �����������

U�&�2u�4�����u����������������������� �

"������� U�*� �����u����"���������

U�-����� �������������"��� ������������

���������.�� �� ����

U� ���������������u������������� ������

���� ������� �������

%u� ����� �� �u� ����.�� ��������( ������������<����5 ������� ��� ���� ��� ����

u��� ����u��u� ���� ��� ���� �������<� 2u�� "���' �� ��� �� ��� ���� � �� ���� � � # �

� " ��� �� ��� ��� ����� �� 5 �� � ��� ��� ���� ��� � ��������� u� � ��(� �������( ����

=������ u�*��������.�& ���5<�1;;1N�).�����.����,<��7D7� <N�Q���5��<�1;;@N�0 � �<�

1;;�>,� �� �� ���� ��� ���� ����u.��� � � � �� � ��� ���"������ ��� ���� ����u����

������ ����.�� �� �� ����u�� ���u ���������� ����������������� �,�

���u����� ���" � ������ ������ ��������� ��������� ��� ����� �� ��� ������ ����� ����

��� ���� ������' �� ��� � � � " ��� �� ��� ��� ������� ������ �����<� �����# ����

��������� �� ��� �u���������' � = ������<� 1;;;N� � �� ����� .� ��� Q�u��<� �771>,� /���

��������������������������������u���� ����" ����"�����������<�����������������D�

���u� �� "������ � ����� �� u��������� .� ���� ���<� � �� ��u� �� ������� u�� �

���" �� ���� .� ���� � ���������� "������u� �� � � ���u� �� ������ ������������ ,�

��� ����� ���<� ��� ���� ��������� ��������� ��� �����<� ��� ��" ���� "������������ ����

��� �������u� ����u� �����u.�"�2u�4�<���������� �������D����u� ������� ����� ��

���� �����u� ���<� � � ���" �� ���� ��� � �� ��u� �� ��� ��� �u.� ��������<� .� ����

� ����������"������u� � " ������ ����u� �.�u������ ��������u� �,�

Page 41: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��1C���

� ��������u���������� ����2u�� ����� �������������������������� ��������� ���' ��

������ ������� ��� ���u� �<� "��"������ ������� u� �������� � � ���u� �� ������ <�

u����������������� �� ���� ������ �u�� ������������"� �� �.�������� ���� �����

���"��#���I�����#u������J�������� ����� ��=-M � G��.����,<��77;N�&� �5���.������<�

�779N� �5 ��u����� .� ���,<� �771>,� &� ���� .� Q���� =�77:>� ��"��� ���� 2u�� � ��

���������� �� �u����� � �� ��� ��� �� 2u�� ����� ���� � �� � .����� ������� �������

�u� ���������� ������� ���������������������������,�������� ����u� � ���� ����

������������� �����.���������������������� ������������������������<�����u ��

��������# ����u�� u���������� ��� � ���������u������!1�.����"���u�������� !1,�

��� 5 �� ������ ��� ��� �' �� ��������� �� ="�����" ������� ��u"����' �>� ���

� ����� ��� ����� ���u� ���� ��� ���� ��������� ��������� ��� �����<� ������ ��� �������

5 �� � ��� � ��������<� � �� �u ���� ���� ���"��� ���� ��� � � �������( ���� .� ��� ���� #��

���� �<�.����� ����� ��� �������� �� �=-M � G��.����,<��771N�Q���<��77� >,�/ �

��������� ���� ��� �' ����������� ������������������������������������������

����� ����� � � ��� u�� � ���� ��� 1� � �C?<� ������ �� 2u�� ������ ���� ���������

��������� ������������ �� �u"�� �� �"�� ���������:;?�=�� u��.� .� ���,<�1;;9>,�

&��� ��� � " ���<� ��� u�� ���u���� ��������� ��� 5 � ����� ��� 2u�� ���� ��������� ���

�2u����<�"�������<�������<�� "������.��������������������������"������ ����u� �

� .��� ��������� � ��� � � � � � ��� "�"������ ��� ���" � ���� ���� �u� ����� " ����

�����������������=+u���&�� ��.����,<�1;;:>,�

��� �u ���� � � �� ��������� �� ��2u'��� �� ������ ���� ��"��� ��� ��������<� ���

������������� ��u ����� ����� ��,�8��������� ��"��� ����������"��'������������ #��

��� � � �� ������� ���� �������� � ������ ���� ��� ������� �� �������� "��� " ���� ����

�����<�� ������� � ��� ���� ������������� ������� ���,��������u����������

��� ���� ��� D� ���u� �� =� ����� .� �����<� �77�N� ��u��.� ���,<� �7DBN� Q���� .� ���,<�

�7D7N�&� ����.����,<��77@>,������� �� ���������� ��������������������u���� ��� �

� ������� �������<�.�������"����� �u����2u�������������u ����� �����������������

�u������ ���� �� ���u � �� =)���� .� ���,<� �777N� Q5u� � � .� 0��� ��<� 1;;;>,� / �

���� ������������� ������� ���������"��� ���������� �2u������������( ��

� �3"��� ���� "��"� � ������ ���� ������ �����u�� ���� ��� ��� ���� #�<� � �

���" �� ����.�� ����� ��������� ��������,�

Page 42: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��1D���

� ��������u�����5 ��� � �����( ��������� ����������������������������������

"���u��������������=Q5u� � <��771N�+�����<��771N�+������.����,<��771>,�%������ �

� �u� ���� ���� ������� 5 �� � ��� ��� ���� ��� �1� ���u� �<� ��� ��� ������� �u��

����� ��<� ��������� �� "��u� ��� ����� �u��� ��� "��������,� %u� ���� � �

���" �� ����.�� ����� ��������� �������<�� ��3�� �������� �� ���.�"��u� ����u��

����������9� �@������,�%������������" ������������ �����<��������������������

�u�� � � � "� ���� ��� �u��� ���,� / � � "� ���� ��� ��u��� � ��� ����������

����� ��������� 5 �� � ��� ��� ���� ��� � ��������,� ��� � ���� ���� � ������� ����

��� ������� ��� � � ��u��� � ��� ���� ��������� ��� ������ �u�� u� � �� � � � � ���

��u������� ���� <����" � � � �� �����u������ " �����������,�/ �� � ���3�� ����

�3�� ���������u��� �" � � ������������� ����������u�� �� �( � ���������� �������

��u� <������� ��2u���������������������������������������u����������� �������

� ��������,� ��� ��� ������� ��� � � ��u� ��� � ��� ���� ��� ����� ���"� ���� ���

��� ��� ������ ���� ���" � ��� ���� ��� ��� � ����u� �� .� � ���������<� �u���������

2u�� � � ���"������� ���� ������ ��� �u������ ��� ��"��� ���� .� ���� ���� #u�� � �

"��"� � ������ � ����� ����������� ���������� ���� ����������������,����

�� ��� � ����� 2u�� ��� ��� ������� ��� ���� ��������� ��"����� ���� ������ � ���

�u������.����������u� ���=+������.����,<��77@>,�

!�� � ��������� � ��� ��� ������ ���� ���� ��"��� ��� ��������� ��� ����� � ��� � �

������ �� ��� ���� ���,� /��� ��������� ��������� ��� ����� ��� 5u����� ��� u� �

���u���� ��� � � ��� � 1<9:� �� ="���� ��"��'����� �� �<9;�� �T��><� ��� ����� ���� ����

��������� ��������� ��� ������ ���� �� ��� ���u������� ��� � � ��� � �<B� �� =/���� .�

/��Gu����<� �779>,� / ������������� ����� ���� ��������� ��������� ��� ������ ��� ���

���u�� ������u� �"��"�������'"����A"����'� ���������� � ,�

&���������<�"���� �2u�� � � (�� �"������ ���� ���������������������� ������������

���u��� � ���� ����������� "��� ��(�� �<� �u���� � ���� ���������� � � � � �u"�u� �

�u ������������������������� ������u���������" � � ������ �(�� �"������ ����

�����������������������������,�6 ����������� � ���� �� �"���� ���� ������ �(�� �

"������ � �� �u �.� ���������"����������,�

��� ����������� ����������� �� ��������� ��������������� � �����"������ ���������

������"��������������,�

Page 43: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��17���

�&��#�$�%"��� !���"��

& � � �� �( �� � � �� ��� "��4�(� "��� �� ��� � � ������ �� ��� �� ��������� �

������ �� ���������� �����"�������������� ��������������� ������������������.�

��������������������,�/ �"����� �������"�����u���� ��( � �"���) ��� ��.����,�

=�79�><� �u�����u����������u"������ �������� ���� "��� ����������������������

������ ,� �������������������� 4���5 ���������"��� �����u����������������" � �

�� �u ��� ����� ��� ��.�� ��� ���� ������������ ��������"� �������������������,�

�u�5��� ��� ����� �������� ��� 5 �� ����� ��� ��� ���� �"������ ������������ ����

�����<�� ���������� �u�������� ������u�����u� �<�� ����� ����������<��u�������

.��u�������������,�

u ���� ��� �� �� �� ���u ������� ���� ��������� ������� ��� �������� ��

"�����" ������� ���� � ������A� �u� " ������ � ����� �<� ����� ���� �"������ � ����

������ �"������� �������u� �������u� ������������� � ��.������� ���������� �������

���������������� ���������u��� ������� � ,�

��������� ������ ����� ��������������������u����( ������� � ��u ��� ��������2u��

��� ����� ����/�������.�P���5��=�7D9>�" � ����������������������� � ������

� � ��������' ,� ����� ������ � 5 � ������� �� �� ��"� ���� .� ��� u����( ��� ����

"�2u�4 �� � �� ������� ������ �� ��"������ � ���� �����������<� � "�����<� �2u����� .�

"�������<� . � 2u�� 5 � ������� ��� ������ ���� ���� � �� � � �� ��� "��4�(� =) ����� .�

���,<��7DCN�/�������.�P���5�<��7D9>,�/��� u�������� ����� ��������������������:�

� �����' �A��3�������<�u���<����u� �<�� ���.�������� ���=6 � �9>,�

Page 44: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��9;���

6 � � 9,� � ����� ���� ��� ��������� ������� ��� �u����� � �u� ��������' � =/������� .�

P���5�<��7D9>,�

����� ������� ����$(����(�$��(�*�$������ !��%"

�� �3�������� ������ "������ ������ ���������<� ���� ��� � � �� �u� ���<�

��������� ���� ��������N� ���� � ����� �� �3��u'� �,� %���

��� ����������� ���������� ���������"�� ���" � ��u��� �,�

1� �u���� ������ ���� �� �u� ��<� ���� ��������� ���� ��������N� ����

��u� � �3��u���� ��� � ����� �<� .� u�� �� ��� �'����� ���

������� ���,� !� ���� ������� ��� ��������� ��� ����

���������,�

9� +��u� �� ������ ��� ���� "���� ��� ��������� �����u� �N� ���������

" ������� ������ � ���� ����� ���u� �� �3��u'� �<� ���'�u� � .�

��u� ��� ����� ��������� � �,�

@� � ��� ����������u.��� �u� ����.�������������������u� �N��u�5 ��

� ����� ���3��u'� ��.�������� ������������,�

:� %������ ��� %������ ���� � �� "���u��� � � 2u�� ��� ��"������ �������� ��

������ �����3 ���������� ������,�

��,�������-���������

��,�����"����������

/ � ������ � ��� � � ���������' � ��� ��� ���u���� ��� ���� "���u����� � ����� �'������ .�

2u'������2u���u������ �����u� �������������� �����u� �����u ���������3"u������ �

���"�� �u� ������������� �����;K ,����������������u���� ����� �������5��������� �

.��3�� ���u� �<� ����u ��"����� �u� ����"u��� �"�����" ������� �'��� �"���" �������

� �����u� �,�

Page 45: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��9����

��� �u � �'2u�� � #u�� � u�� ���� �u�� ���� �� ��� � � ����u��u� � .� �u����� ��� ����

������ �� �����<� .� ��� � ���� ���� ����� 2u�� ��� "���u��� ��� ��� "������� ���

������ ����������2u��� �� ���� ������'2u����� ����u���������"�������� ������.�

�����u ���������� " ����,�/���� ��������� �"��"��������� �u ��'2u�� ��#������

u� � �u����� ����u���� � ����� � � ����u��u� � ��� � ��� ��������u� �� ���u� ���<� .� �

�� ���� ��� ��� �� ����� ��� ����u��u� � ���u� �� ��� ��,�&���<� ��� ��� � �� ����� ��������

�u � →� � ��������u� �� →� ����u��u� � ���u� �� ��� �u�� �� ���� � �� "��� ���

������ ������<�� ����"������u��������� ��������� ������� �u ��'2u�� �������u���

u���� ������2u��������������� ���u ��� �����u� ����������"�����,�

/ � ������ � ��� � � ���������' � ���� �u�� ������(��� "���� ���"u��� ��� � � ���u�� �

*u��� � �u��� �<� 5 �� � ��������<� � � �������� ���� ����� ���� �������� 2u��

������' �� ����"�� �u� ��"����� #���������;K ��� �������������� ��'��� ,�

�u�5��� ��� ���� "�������� �������� ������ �� �� ������� ���������� 2u�� ��� ���' ��

�������������� ����� �'��� ,� ��� �� �� ����u��� ��� �� � �� "����� �� "u��� �������

����������' ����� �� # �����"�� �u� ���u���������������"�����,�6 ��������� ���

���� �� #�� I/���<� ���%� �5� ��/�M�6��"�� �u���J�"u��� �������7@;�"���� ����

/u.���=/u.���.�*�5����<��7@;><�2u��������������� ������" �������� ����������' ,�

��� ���� �� #�� /u.��� ������ u�� "u���� ��� ���� � ����� � � �������� ����

���"������������������� �� ��������"������<�������������� ����� ����*�� ������ �

���������' ,�

&���� ��� ��� ������� 2u�� ���� ��� ���� ����� ��"u���� � � � ���������' � �u�� � �

����"������ ���������"��� ��(��������"�� ������������� ��"��� � �����7@7�"���

&����� =&����� .� ���,<� �7@7>� .<� u�� 4������ � ���<� � � ������� ���� �� ��( � � "���

����5� =����5<� �7:;>� ����� � � ��������� �� ���� ��������� " � � ������ �� ��u����

��#��,� ����� ����u���������� �u����� ��"'�����<� . � 2u�� ��� ���� ��������� ���

��������' �� �� �u� ��( ��������� 4���� u� ����"������������ ������,�

�u�5��� ������� ��"��� ����� �� �( ���� ��� 4��� ���u������� ��� � ���� ��� ����

"����������.� � �������� ��"����� ����� ����� � ��"���&�����.��u����� �������� � �

��� � � ��� ���� 4��� :;,� ���� ��� 4��� ���������� ��� 5 �� �� ��( ���� � �����

�� �������� ����2u��5 ���� ������ �������������� �"������� ����������' �.�2u��

Page 46: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��91���

5 ����������"�� ���<�"�������������������� �����<���������� #������&����,�������

������ ��� "u����� ������� �� ��� ��� ������� ���� ������ ������� ��� "� 2u�� ��

��"�� ���� ��� ��� � =P��G���� .� ���,<� 1;;�><� .� � � �������� ���� ��� ��#����

�����������������"� �� �����"�� ����� ���������� � � � �=65��5�.����,<��777>,�

�������u������������� ��"��"��� ��������"�������� ���������������u��3�����u�����

"��������� ������� � ������u� �"��������� � ���� ��=/������G�.����5�"<��7:7>,�

������ ��2u��&������ (u���u�����"�������2u����"���� �� ������� �.�� ��'��� ����

��� � �"�� ��� � � ���������' <� "��� ���� �������� ���u������ " � � ����"� ( �� � �

� �� � ���� � ��� �� #��� �3"������� ���� ���� �������� .� "� � ���� ��� ���������� ���

������ �� �� ��( ���� ������ ���� ������(��,� �u�� �� #��� 5 �� �����u� ��� ���

���������������������� 4���"����� ����"������������ ������,�

/ �5�"��������� �������� � �������"��"u��� �"���� (u��=�7B:><����� 4�����������

"����� ��� "��� ��� 5����� ���� ���u� �� �u� ���� ��� ������ ������� ��"���� .� ��� � 4��

"����� ��� "��� � � ���5��� � ���� 2u�� ��� "���u��� � " ����� ���� 5����� �3�� ���u� ��

�u� ������������� ������������<��u��u��5���<� u�2u��������� �������"������������

� 4��"���u�����"������������ ������������� ��������������' �,�

/����������������u������� ��( ����"��� ��M��.����,�=1;;�>������� ����5��� � ����

��� � �� ���� � �� 5 �� "��������� ���"������� ��� ���� ��� � � ���5��� � ���� .� ���

�� ��� ��� ����� ��� � 2u�� ���u� �� .� ��#����� "������ �� � ����� � ����� �u� ���� ���

������ ������,� / � ���� �u� ��( ���� ��� � � "����'� �� "��� ��� ��'�� �u�� "�����5��

����� ������� "��� �� ����� =�7B@>� .� "�������������� �u�� ������� ���"���6������.�

)���5� =1;;;>,� &���<�"���� �2u�� ������������ �����"���������� �����u�� ����������

� 4�� "����� ��� "��� ��� ������ ������<� .� 2u�� "������� ���� 2u�� ����� ��� u��

"����������"��#�<������ ��� ��������5 ��5��5���� ��������u��(������������������

@;� 4��� " � � ������ �� ��� �� �� ����� ���"��#�� ���"�� �( �� ��� ��������

��������� � # �����"�� �u� �,�

8��� ����"���u����2u�����"���u#������ ������� ����� � ��5 ������� ��������� � �

����"� ( �� � � �������� ���� ��� ���������' � ���� � "��� ���u����� ��� ���������' �

"��� � ,�/���u ��5 ����� ��� �u� �"���u��������� #��������'��������� "��� ����

Page 47: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��99���

"������ � "����� ���� u�� ������ � ���� ��� ��� ����u��������� ��� ���� ��������

���'��������� ���� �� �����"������ ����������u� ��.���#�����=���.� �<�1;;@>,�

��,�,�-��"$�*�����$���!�������

�� � �u �� �u���� ���������� ��"�� ��� � � ����"������ ���� �����u�� � � � �3"�������

����� �� ��� � �� �u���� �� �� ����"��������<� ��� ������ ������� � ���"�� �u� �� "���

�� #�� ��� ����<� ��� �� ��� ������<� ��� ��������� ������<� .� ��� ������<� � �

�������� ���� ����"��������<� ���� ��� �������� �� ������� ����������<� ��� 2u��

"��������� ��� ��� ������� "��������,� / � ��������� �u�� ���� �� ��� 2u�� � �� ���u� ��

� ����� ���u��������� ������u��u� �� ����� ���������������"������������,�

���"�����"������� ��"��� ������� � ����������' �������u�������� 4��� u� ���"��� � �

���� �������� ���u� �����5����,���������������u������ ����� ����5��� � �������� �

���u� � ����� �� �u� ���� ��� "������� ��� ����"������ ���,� ��� � � ���5��� � ���� ���

�� ���u � <� ��� ���� ���� �� ����� ����� ���� ���� ���u� ���<� ���� �u ���� � 4 ���� � �

���u� �������� ������������,�

!����� � �������2u�� ����u.����������3��������"��������������"������ ���� ����u.���

� � ��"����<� ��� ��� ��� ��� ��� ������<� ��� ����"��������� .� ��� ������� ���

����"������ ���,�

��"���� ��"(���"(���� !���"��

%u� ���� �u�5��� 4��� �u�� ��"������ ������ �� ���� �3���� ���� ��������� ���

� �'����<�. �2u���u��� ��� � 4����"��' �2u�����������������"�����������������

������ ������� "u���� �� ���� �� � � ���� ���� ��� ����� ���� ��� 5����� ���� ���u� ���<�

���� �u ���� ���u�� �� ��� ���,� ��� �3���� ��� �� �(� �� �� �� � 2u�� ��� ���� ����

���"������� ��u����"u������� ���A�

�� / � ��������� � ������ � �� � � �� ��� ����� ������� .� � ���� ������� ���� ��

=V�K T���>�.���"�� �,�

Page 48: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��9@���

�� /��� ����������� � � ���u����� ��� � � �u��� ���� =I�������J>� � ���"�� �u� ��"���

�� #�����;W ,�

���������������������"����������,�

���/ ������ ����������"�� ��.����������������"��������,�

& � �� � ���"�����u� �<�5 .�u� �� � ��������� �������"��� ,�/ �� � ���3�� ����

����� ������� " � � ����������� ���u� �� "���' � � �� �� ��� �u�5��� �������� ���

� ����u�� =��5M��������5� .� � �� ��<� �7D;N� ������� .� P5�� �<� �7CCN� ��������� .�

���,<��7DD>,�&����#��"��<� � �������� ���������� ����������� � �2u����� �� �( � � �

� � �"��� ����������� �" � � ���������������� ������ ������������1;;;�������

������ 2u�� " � � ���� ��u���� ��#��� 5u� ���,� ��� 5 �� ��� ����� ��� ��u����

�������� � ���������� " � � �3"��� �� .T�� "�������� � �� � � �� ��� ����� �������

"��� ��=X �G�M�G��.����,<��7D;N�/����.����,<��7CDN�/���<��7D;N�� (u��.����,<�

�7D@>,���������������5 �������" ����u� ��������3������������������������ ��,�

/ � � � � ��� ���u���� ��� �u � � �� ���� ��� � � ���� � � ���u� �� ��� ��� � �����

����� �������� ��"��� ������� ����"����������������� ������ ������� �����<�.������

��"�������A�

��/ ����"�������.�"���� ���� ��� � ����'���� ������ ����� � ����u� �,�

��/ �� (���u"�������T���u�������� ����u� ,�

���/ ����"�� �u� ,�

���/ ���������� ����"������������ � � ����� �������� ����� � ����u� �,�

��������������� ������� ���� ������u��� ��u� ��������"��������������5��� � ����

.���5��� � �������u� ��=X �G�M�G��.����,<��7D;N�/���<��7D;>,�/ �����u� ��2u������

����� � �� ��� ���� � �3���� � ������ ���� � ��� ���������� � �� ���� ������ ��

�� � ��� I������� ���u���J<� � u� ��� "��� � � �3"������� "������ � � ��� � � ���u� � �

�� �� �������� ������� ��� � ���� .� ������ ���u���� ��� �u������� �������� =��5M����

����5�.�� �� ��<��7D;N��������.�P5�� �<��7CC>,�

Page 49: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��9:���

&���� � 2u�� �3������ ��u���� ��"��� ���u� ���� " � � ���� 2u�� ��� ��� ����� �� � � �

���u����� � �u �� ��� � � ���� ���� ��� 5����� ��� � � ���u���� �3���� � =I�������J><�

�u ����� �����u� ����������� ��� � 4������u.���"��� ������ ��( �������"�������

" � � ������� u�� �� � � �� ��� ������� ,� %�� ��� � ���� � ��� ���� � ���

�u"�������� �������.�������( ����"�������������5��� � ���,�

��� � � ���u� � �� ��� ��u��� �� ���� � ����� ��� ���"�� �u� � ����� ���� �u� ���� ���

������ ����������u� ����u���� �u�� ,���� �u �.� � ����u���� �u�� ��������u� �

�������� � � ������ �� "��� �� #�� ��� �u� ���"�� �u� � ��� �u���� ���"u��� ��� 2u��

��u���� � � �u��� ���� ���� 5����A� ����� �������� ��� ��������� �����

�u"�������� ������,�&����#��"��<������� ��� ����"�� �u� �����u��������5��������

;K <� � � ���"�� �u� ����� �u �"u�������� ���u��� ��������� ��� ������"����� #��

��� ;K � ���"u��� ��� � � ���� ���� ��� 5����<� .� ��� ������������ �u�� ��� ������

������� � ����� �u �"u�������������� � � � "��3�� � ������O@;K ,�

��� � "��"��� �� ��� ��"��� ���� " � � ��� ������ ������� ��� ��������� "��2u�� � �

���� ���� ��� 5����� ����� ���� � � ���� u�� ���������� � � ���"�� �u� � �u �������

���� ������ � ���� � ��������� �u���<�.������� � � ����� �������5�������� �u ����

������� � � ���� ������ � � ���u���� ����� ������ ��� �����,� u ���� ��� ����� � � �

���� �������5����� � �� �����"�� �u� ���u����<����5�����������u�������� ������

� �� ���� ��� � � ���u���<� .� ��� "���u��� u� � "�2u�4 � ���� ���� ��� � ���� � �����,�

��������� 4 � �� �����,� u ���� � � ���� �������5����� ��u�������u� ����u����

"���u�� ������ �u"�������� � <� ���� �� ���<� ��� 5����� ��� "��" � � �u.�

��"�� ������ ��� �������� ����u���,���������"��#u���� ��" � ���������������� �

2u�� 2u�� � ���"��� ������ 5��� � ��� �u ���� ������( � � � ���� ���� ��� 5����<�

��������� ����� �"�� ���� �����2u�����������5��������� ���u� �,�������<�5 �' �

u�� u������ ��� ���"�� �u� � �������� ����� ������� ��� � � ���u���� 2u�� ���� ��� � �

� � ���������� ������,�

Page 50: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��9B���

� ���,���O� �����������"�� �u� ��u� ������������� ����������u� �

���u���� �u�� �=���������.�% ��<�1;;;>�

;K � � �

�1K � � �

�@K � � �

�BK � � �

�DK � 6���"�� �

/ � ���� ����������� � ����5��������u�� � ������� ���2u���������� � � ��� ���� ��

��� ���� ��������� �u���� ���� ������ ������� .� ��������� ������� =P5������5 �<�

�7CC>,� ��� u� � ������ ��� �3"���������� ��� ������ 2u�� � �� �u���� �� ������ ���

���u#�� � � �u��� ���� "��� �� #�� ��� ���� O7K � �u������� # � �� ���� �<������� ��

2u�� ��� ��� "������� ��� �� ��( � � ���"�� �u� ������ �� �� =�:� � OC<:K >� �������

��������u�� ���u� ��� ���� ���u�5���������� � �=���u� �1>,�

8�� �������� ���� ���"��� ������� ��� � � �u��� ���� ��"������ � ��� � �� ���u�������

�������� 2u�� ��� � � ���u����� ��� ��� �� ��( � ��� ���� � ������� � � � � �� ���� ��

"�����������������������������u.� # ������� ��� 4��2u���3"������� �,�/ �

��� �'��� � ��� ���� � 4�� ��� �3"��� � �� � ������ �u ���� ��� �3 ��� � � � 5������ �

������ � ��� � �� ���u������� �u"������� � �,� / � "������ � ���� �� ��� ����� �� � �

���u���� 5 �� � ���"�� �u� �� ��������� ��� OCK <� � ������� ��� � ���"�� �u� �

����� ���� 5 �� � ��� �2u������<� .� ��������� ���u���� � � ���� ���� ��� 5����,� / �

���"�� �u� �������� �5 �� ����"u��������u�������� ����u���<�.�u� ���(����� ���

���5����������� � �����OCK � �u� �������� �����1<:K T���,�������������"���u���� �

Page 51: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��9C���

���5��� � ���� ���u� �� �u� ���� ��� ����� ������� ������ �u���u�����,� ��� ����� ���<�

���u� ����u������������� � � �O�:K ��u������� � ����� ������� � ����"�� �u� �

���u�� ������� � � ���� �������5����<� ���"���u���u����"������������� � � (�����

�;K T����5 �� �����O�:K ,�/ ������ �������� ���"�� �� � ��������� �������.�� �

�� �����u��������� ����"�� �u� ���"������ ����5��� � �������u� �<�"������2u��� �

���� �������5��������� ���u� ����������� ��,�

;

�;

1;

9;

@;

:;

B;

C;

D;

7;

������� �=?

>

���,�1���������� ����������������� ����u���������������� ���������������"�� �u� ��=���P5������5 �<��7CC>

& � � � �� .��' ��������"������������������� ������������<�� ����� �������5�����

��� ����� � � � �u ������� � ���"�� �u� �� ���� � �� �� �u"�������� ������� ="���

�#��"��� O:� � O� CK >,� ��� "������������� u�u �� ��� "����� �� 2u�� u� � "�2u�4 �

"������ ��� � � ���u���� ��� ����'�� u�� ���<� "��� �#��"��<� ��� ���� � � " ���� ����

�@K � �:K � �BK � �CK � �DK � �7K � ��;K � ���K � ��1K �

Page 52: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��9D���

���������������u���#��������� ��� �O�7BK �=I�������J>,�%��"u�������� ��( �����

I�������J����u��"u���<����5��������u���� ��� ���������� �� ����u���,�

u ������� ���u��� � ��u��� ������� � �� ���u������� �O:� �OCK <� ���� ����� �������

5����� ��� ���u����� ������� ��� � � ���u� � ���� ������ ������ � � � ����� ��� ��

� ���� ������� ���� �� � ��� �u� ������� ���� ���u� �,� /u���� ���� I�������J<� � �

�������� ���� ��� ���� ���u���� ��� � � �� ����� ��� ������ � � ��� ��������� � ��� � �

����� � 2u�� ��� �u � ��� �����"�� � � � ���� ����� ���� ��� 5����� �3�� ���u� ���,� ���

����������� ��� � � �������� ���� ��� ���u���� �3�� ���u� ���� ����� � u�� �� �������

�������� � �� ���� ��� � ����� � � ���u� �<� � � �u �� ���u���� �u � ��� � � ���u� �

� u� ����� ����5��� � �������u� �,�

������������ ����������"���u���������� ��u������������������ <�� ������ ���� �u �

���"������ "u���� ���� ������� � ������ ��� ��������� ��� � � ���u� <� � ���� �����

���u�� ���2u�� � ����u� ������ �� 4 � ��u ������������ � ��������������'2u���,�

�u�2u�� ����� ���� � � � ���� ���� ��� 5����� ���� ���u� �<� � � ���5��� � ���� ����� �

"u���� ���� "��#u���� �<� ��"��� ������� ��� � �� ���u� �� ���� ��������� � ��

��"�� �����,���������<���� � �"������ <����"�������������5��� � ����������������

����� ��� ���� "u���<� .� ��� ������ ������� ���� ���u� �� ��� ���u����� ���� ���� � �

��������� ���� ����������� ������ ������ ��� ��������� �'2u���,� � #�� �� ��

�����������<� ��� ���� ��"�2u�4��� ����� �������5��������� 4����,� / � ���"�� �u� �

�������������������������'2u����u�u ����������������O9;�.�OD;K <�.���"�����

��� u�� ������� ��� � ������<� ��"��� ������� � �� . � ���� � �� � � �� ���

��������� ������,�

/ �������� ����� � ���� ������������'��� �" � �����3������� ����"�����������������

������ ������� �����<������� �2u���������� � � �������� ������������������������

����� ���,� / �� ������� ���� "��� �� ��� � ���� ������<� ��"������ ���� ��"�� ���u� ��

������ ��� .� ��� � � � ���� �� ��� �u � ������� ��� � � ���u� � ��� ��� �������� ����

������ ������� ���� ���u� �� =��5M��������5� .� � �� ��<� �7D;N� ������� .� P5�� �<�

�7CC>,����2u�� �u� �"�2u�4 �� ���� ����� �u ����� ���u� ���u ��������� ��( �� �

��������� ��� ��������� �'2u���<� "u����� ���� ���� "�2u�4��� ����� ���,� � #�� �� ��

����u��� ��� �<����������� ����������� ���������������� ���������"���<�. �2u�����

���� ���� ��� �� ����"�� � ����"�2u�4��� ����� ����" � � �������.� �� ������ �������

Page 53: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��97���

����� �������� �� ����� 2u�� "u����� � 4 �� � � � ���u� ,� ����� "������� ��� ���������

������������ ��( ���,�

��� � �� ���u� �� ���� ����� � �� ���� ������ 5 �� � ���5��� � �� �� "������ ������ "���

���"����� ����� ��� ���� �u������ �� ��� ��������� �'2u���<� � � ������� ��( ���� ���

��u���� �� ����u.� ����� � � u�� ��� ��� � ���� ������� ��� �����,� ���� �� ���<� �� ��

���u� �� "���' �<� ���� � 4 � �� "��� ��� � ���� ������� ��"���� ������ � ���� ��"�����

� ����� ��� � � ����� ��� �� ������� ��� � �� ���u� �� ���5��� � � �,� ���� ���

� ���� �������������� ���������"�� �� �����u� ��" � ���5��� � ���<����u���������

���� "��"� ��� " � � � �� ���u� �� 2u�� 5 �� �u������ u� � ���5��� � ���� ����� ,�

��������<� � � ������� �� "��� � ��� � ���� ������� ��"����� ������ �������� ����

"��������������������� ������,�

������������������"��������������"�������� �� ����u� ����� ����� ������������ ����.�

��� � � �� � �������� ���� ��� ���u���� =��5M��������5� .� � �� ��<� �7D;N� ������� .�

P5�� �<� �7CC>,� /��� ����"����������� "u����� ���� ���������� ��� ���� ��u"��A�

&���� ����= 2u������2u�������� �� �� ������������� ����u� >�.����"���� ����=����

2u�� ��� ������ �>,� �#��"���� ��� ���� ����"����������� "���� ���� ���� ��� ��������<�

%��!<� ������������<� "��"����������<� ������ ���� "���������u� �� ��������� ��;;,� /���

���"�������� 2u�� ������ � �u� � � 4�� �� "�� ��� �� 2u�� �� ��� � � ���u����

�3�� ���u� ������u.��� (�� ��������� ��"���������u� �������� �� � ��� <��������.�

� ����� <� �'������"����'� ��.���"�"����'� �,�����u���������<�� �.�� ����5u���<�

� � ���5�<� .� ��� �u���� � ��u'���� ���� u� ���� ��� ����� ���� ���� ������

����"�����������. �2u������������������� ���������u� ��=Q � ��.����,<��7D�>,�

��� ����� ��� ����� ��� ���� ����"����������� ��� ���"��#�,� / � ������ ��� u��

����"���������� u� �u��������������������"u������������� ����������� ����u���<�

"���� �� ���������� �������u� � ���������"����������������������� ������������<�

���"u������������� ���������������������������1�.�9K ,��u��������"������������

�������� ��u��"��"��� ��������� ��� �<����� <�� �� " ��� ����������"������������

u������ �� �u � .� �u� 5 ���� �� " � � ���u���� ��� ������� �3���� ��� � �� �� ��

�������� ������� ��� ������ ���"�������� =� 5.<� �7D7>,� / � � .��' � ��� ����

����"����������� "���� ���� �����u.� ���u���� �� �u �.� ���� � " ������� ���� ��

"u���������5������������� �������u� ����� �u ,�

Page 54: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��@;���

&��� ����� � ��� �u ���� � � ���u� � ������u.� ���5��� � � � .� ����� ���� � � ��� � ����

�u.��������� � �<���������"��������������u�������� 4���u� ������������� �������

.� ��������� ������� "��2u�� ���"�������� ��������� �� ��� ���u���� ��� � � � ���

�����u �� ��� ������ � ,� ����� ���u��� � � ���"������� ���� � ��� � � ���u���� �

�u �2u�������"�� �u� �"����� #�����;K ,�������������������������u��� �2u��

����������������" ������������� ����u����������������� �<��������������� ����

.�")�� �� ���u�������� ����� �������5����,�

& � � ���� "�������������� ��� ������ ������� �����<� � �� �������� ������� ���

����"��������� ��� ���u���� �� ����� ������� ��������� ��� �<:� �,� /���

����"�����������"����� �� �������������� � � ���u� �"���������<�"������� �u �� ���

��� ��� � ��� ���� � u������ �����<� ��� �u �� "u���� � ��� �� �������� "����� �,� / ��

���u� ������� � �����u� ����u��������"�������� ��������� ��������� � � ���"�� �

� ��� ����� �u �� ������� ��"���� � �� ��������� �����3�� ���u� ��������u���,�����

�� ���<�������������"������������� � �� ����u� <�������� �����u���2u�������.�� �

���u� ������� ��� ��u�� � 4�������� �,�

8��"����� � u��� .������"���u����u �������������� ����������������"���������

"���� ��,� u ����� ����u� ��������� � ����u� ����u��������u� ��������� ����

��� ����"��������������� � � � ���� ���u� �<� ��� �u � �3�� ���u� �� ���� � � � � ���u� �

������"����������2u���������"������������� �� ���������� ,������� u� �2u��� ����u� �

u������ �u� ���u���� �� 2u�� ��� ���,� ����� "����� � "u���� ���� ���u�����

������������������"������������u� ����������" ��������������� ����������������

="����#��"����<:<��<;<�;<:<�;<1:��>,������������ ���� u������������u������� � �

���u� � "���� ��� ���u��� � � � ����u�� ��� ���� u�����,� u ���� � � ���u� � 5 �

���u"�� ����u�� � 4������ �����u� ����u����=���� ����5 ��2u���� ��>���������

����� � ����� ����u�������u������=�����������9� ��;�����"���" ��>,�

/ � ����� ��� �2u�� ��u ������� ���u� ���� ��� �� � �����u���������� ������������

����"��������� ��� ��� ���� ��� ��� �� �� �������� ������� ��� u� � � � ��� ,� ��� �

�����u� � ��� "���� ��� "���u��� u�� ����� � ���� ��� � � �� � �������� ���� ���

����"��������� ��� ��� ��������� ��� � � ���u� <� ��� �u �� ���u��� � � ��������� � ���

����� ��� �������������������������.��3�����,����u������ �� ���������� ����������

� � ��� �"�������u�u ����������������������"������������u��" ��N����2u��5 ��� �

Page 55: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��@����

����� "����������������� ��"���� .� ���"��� 2u�� ���� "�������������� ��� ���� 2u�� ���

���u�����������"������������� �����" ��������"������u����=0��� ��<��77�>,�

6�� ���� ��� �u��� � ����� ������� ��� 5 � ��� ����� ��� u� �� �� ���<� �������������

������ ������� " � � �� ��������� � ������ � =I�������"J><� ��� �u �� ��������� ���

������ �� ���� ��������� ��� u�� ������ 5�"�������� ������������ u�� ���u��� ���

"���� ��<�� �������� �� � ��� �=/���<��7D@>,������ ��( �������������� ����������

����"��������� ���� ���u� �����u���� ��"�� ������ �u�� ����� ������" � �� �������

��� �2u������� �������,� %�� �� � ���� <� ���� ��������� "u����� ���� ������ ������

�� ��������� � u� � ����"��� ,� %����� u�� "u���� ��� ���� � "�������<� ��� ������� ���

������ �������" � ��� ��������� ������� ������� �� �������� ������ �"������� ����

u�� ��������� �u� ���� � � �� ��������� � ������ �� ,� &��� ����<� u�� ������� ����

�3"������� ��<� ���� ��� ������ ������� "��"� ��<� "u���� ���� �� � � ��

������� ������� ���� ��������� �,����������� �' � �� ��� ��������� ������� �� ����

��� ������ ������ ��� ���"��#�� �� 2u�� � � ������� ���� ���� ������ ������ ���

=����G���.�)u<��771>,�

��(��0�$�$�%"��� !���"��

) ��� � ��� C;� 4��� /u.��� =�79C>� u����(� "��� "����� � ��(� � � �������� ���<�

"������ ������"��� ���� � � ,���� 4���"����������������������������"�������

�����������<���#�����.��� ���,�&���������������7D:������������ ����� ��� �"����� �

���u���� ��� �������� ���� ���� � � 2u�� ��� "u��� ����"������ �� ��������� ���� �3����

=+ ���.�� 5.<��7D:>,�

/ ��������� ����"u��������������� ������u��"��������'�����"�������u ��u� ����u����

�� ������ �������� � � ��������� � �u� ���� ��� ����� ������� ���� � � ���� ���� ���

5����,������ ������ �������� � �������u���������u� ��.� ���� ����� ����������� ���

�'2u���� .� "u���� ���� �������� ��� ����� u�� �'2u���� �u"�������� ���

�3���� � ������ �������� =� 5.� .� ���,<� �7D@N� � 5.<� �7D7N� � (u�<� �77;N� + ��<�

�7DCN�+ ���.�� 5.<��7D:>,�

Page 56: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��@1���

/ �����u������������������ ����������������� � ����'���� �����u���A�

• / ����u�����������"������ �����������������u� � �� ��������� �������u�����

��������"�����������"���� ���,�

• � ����u������2u��������u�����"�������� ���������������,�

• ��� ����� ���� �� � ��������u� �� " � � ��������� �� � � � " ��� �� ��� � �

���u��������u"�������� ��.��������� �,�

������ �� 2u�� ��� ������ ������� ������ ��� �� ��( ��� ��"�� ���� # ��

�������� ������� ��� ����"��������� .� # �� � � �� ��� ����� ������<� ����

"������������������������� ����u� ���u.� �� ���������� ��������������"���������.�

�� ��������� ������������ ������<�����u ��"����� �2u��� ����u����" ��� ����� ���

�'����,������������ ���������� �u� � � ������� ������ �� ������������ �u� ����� ����

����� �������5��������� ���������������� �������=� 5.<��7D7N�Q � ��.����,<��7D�>,�

/ ��������� ��������������� ������ # ���������������� �������. �2u������ ����� 4��

� u� ���"��� � � ���� ���� ���� ���u� �����5�����.� ���������������������� u� ����

"���� ����� �����3�� ���u� �����5����,�/ �����' ��������� ������� �������������

��� ����"������ ���� 5 � ����� ������"� � ��� � ����� �� #��� =� 5.<� �7D7N� � (u�<�

�77;N�+ ��<��7DC>,�

8� � ���u���� ��� �������� ���� ��������� ��� u��� �� ���� ����"����������� ���

�������� ���������� ������������@;?�=�T�>,�/ ����u���������� �<�2u���������' ����

u�� 1;<:?� ��� %��!<� �:<:?� ��� ��� ��� <� �;?� ��� "��"����������� .� B?� ���

������������<� "������� � � ����"������ ���� �3���� � ��� ��������� ��� � ��� ��� D�

���u� ��=+ ���.�� 5.<��7D:>,������� ���<���� ����u���� ����"�� �u� � �������

��� �3�� � " � � � �� ���u� �<� "��� ����� ���� ��������� ����� ���� �3"u������ � � �

�������� ������� ������ ����u���� � # �����"�� �u� ��=;� �@K >,�/ ������������

� � ���"������������� �� ��� ��� � ���u����5 � ���u����� �u� ��3���� ��.�5 �5��5�� �

������������u��"�����������������u� ��=Q � ��.����,<��77;>,�

���� �����#�� ������������<� ��� � � ���"����������u� ����u��������������� ����

5 .� �� ���������� �����������"�����������.� �������,�/��� ���������u�"����� �� ��

Page 57: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��@9���

�u�������N� � ���� ������������� ���������������u� �����"���� ����� ���������

� � ��� <��������.�"���������������� ���u�������������������� �u ����� ����u� <�.� � �

��� ��� � ��� ������ � ���� ��� �#������ ��� ���u���� � � ��3���� �� ��� �������

����"������������ ������������%��!,�/ �� �� ���������� ��������������"�����������

"���� ����� u� ��������������� ����5��� � �������� ���u� �<�. �2u���u����� � �

� � � ���u� � ��� ���� ���� � 2u�� � � � ��� � ��� �u � ������ ��� ��������,� / �� �� ��

�������� ������� ��� ����"��������� ���� "������ ������� �3�� �� " � � � � ���u� <�

" ����u� ������� � �� �� ���"�� �u� �,� 8� � ������u���� ��� � � ���"�� �u� � ���

�3"����������� �����u� �� �� ���������� ���� �;K <�������u.�������������3����.�

5 ��� ���� ���� � � � ���u���� ���� ����"��������� � �� ���� ��� � ����� � � ���u� �,�

���� ����u� ��u�� ��� �������������� ��u� �������� ��3"������� �� ����u�������

����"��������<� ��� � � ���"������� ���� ����"��������<� �� #u�� ���� � � ���"�� �u� �

��� �3"������<� ��� "������ ��������� �� � � I���� � J� ��� ������ ��3���� �<� � � �u ��

u���� ���� �������� ����� ����u� �2u��5 ����������"������ � ,�

��,�/��*��$�$��"������$���*�����&�$�%"��� !���"��

/��� "�������� ��������� ��� ������ �� ��������� ���� �'������ ��� �u����� �3�������

=*����� .� ���,<� �7:BN� & �����<� �7B;>,� +������ ��� �7C1� ��� ����� ��� "������

������ ������� �3������ ��"�� ���� ��������� ��� � ��� =P5������5 �� .� ���,<�

�7C1N�P���u�<��7C1>,�& � ������ ��� �� ��(�u����������� ��������� � � ���"�� �u� �

=�K T�����������>�5 �� �u� ����"�� �u� ��u.� # �= ������������OD;K >� �����

�������� �� ������������������������� �'2u���<�"������2u����� ����"��2u�� ���� �

���"��� �� ��� "������� �� � �u.� � ���,� /��� ��������� ������� �� ����

��������� �������� ������.��������"�����������' ����� ������ ���.�������������

� �����" ���,�

��� � � ��u ��� �� ��� 5 �� �������� �������������� ��� 11� ��"������ � " ����� ��� � �

�� ��������� � ��� ��������� ����"������ ���� =+ ��<� 1;;�>,� 6 ����� 5 �� � �����

�������� ��� ��4��� �u���� ��� ��"�� �� � ��� �� .� ��������� 5u� ����

����"������ ���,� & � � ����� ���� "���������� ��� ������ ������� ������ 5 �� �����

���"����� ���<� .� ��� ������� � ������ ����"�� " � � ���"��� ����� =��������� .� ���,<�

Page 58: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��@@���

�7DDN� � (u�<� �77;<�P5������5 �<� .� ���,<� �7C7N�P��� ����<� �7CC>,����� ��� ���

5 ����� ����� ���u� ����������"������������������� ���������"�������������� ���<�

��� ���� 2u�� ���� ��������� "u����� ���� �u��������� ������ ������ ��� ��� ���������

�'2u���� �u���� ��� � � ���5��� � ���� ��"�� ���� ���u������� ��� ����"���������

�� ������ �������� � �� =����.� .� ���,<� �7DBN� �������.� ���,<� �7DDN���. ����� ��

��5� �5�<��7DBN�+ ���.����,<��7DCN�+ ��<��7DCN�+����5 �����.����,<��7DDN��5 M�.�

���,<��77� N��5 M�.����,<��77�N��(����.��5�����<��7DBN��(����.��5�����<��7DCN�

6 G 5 �5�� .� Q � � M <� �77;N� 6��u����� .� ���,<� �7DCN� 6��u����� .� ���,<� �7DDN�

6��u����<��77;N�� �������uM�� �.����,<��77;N�P������.�Yu���<��7D7>,�

/ � ����"������ ���������������� ���5 � �����"�� ��������u��"����������������

�u��� � ��� ���� ������ �� ��� "���u����� ��� ��"������ ��� �������� ���"��u ����

=��������� .� ���,<� �7DDN� /���<� �7D7N� ��5������� .�� (u���77;>,� ��� ��� ������� ���

u� ������� �����������" � �� �����"������ ����������������������5 ������u��" ���

�u�� ���� �� " � � �u� �3"��� ���� ������� �,� ��� � � ��u ��� �� . � ��� 5 ��

����"������ ��� ���� ���������� �� ��� ��� �3���� ��������� ��� ��"������ � ���� �����

������<� ������<� �2u����<� � "������ .� "�������,� ������� ���� ��� ���#u���<� 5 ��

� ������ ������ ��� �������������� ��� �� �� ��"������ � " ����� ��� ���������

������ ���,�

/������u����������� ����������' �����������"��������������5 ������������u� ����

"��� ����������� �#������,� ��� u��� ��� ��������� ����"������ ���� "������� =/����

�7D7N�������<��77�<�P���u��.����,<�1;;;>A�

�,� ������ ���������������"���� ��������"���u �����u���������3������������ ��

����"��� �� ���"������� �� �u ���� ���� � ���������� ����� ���� ���������� ��� ���

����"�,�

1,� /������������������ ����"u�� ��������"�� ������� ���� ������ �� ��������

������ ��<� "����������� 2u�� "u�� � ������� ���� ��� "��'���� ��� " ��������<�

�"����( ��������� ����� ����� ��#�����������������,����� u�������� ����������

u������������������ �������.��� ��������� ������� ������������������� �� �

������� �� ���� �� u�� ��������� �u� ���� ��� "������������<� . � 2u�� u��

Page 59: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��@:���

������� �����3"������� ��<�������������� ������� "��"� ��<�"u���� ���� �� �

� ��������� ������� ���� ��������� �����u����� ����������,�

9,� /��� ��������� ����"������ ���� "u�� �� ���� ���� ���� ��� u�� �u� �� � �����

����������,�������<���� ����"u����� ���������� �� ��� ������������� �����

�� �� � ��� ��� ��� � ��� ���� ��� �u�� " ����,� �3����� �� �� � ���� ����� �������� �

2u�� � � ������"�������� ��� ��������� ������������������� ����" � ����� ��

� ����"����������������� �������� ������� ���� � �����������������������

��� �������������u��" '�� ������=�����������M�.�*�����<�1;;;>,�

@,� / � ������ ��"u� ���� ��� ��������� .� � � �� ��������� � ��� ������ 5 ��

�����( ��� � u� ���� ��� ���� � ������� �<� � � ����"������ ���� ��� ������

��������� "������� 2u�� ��� �� ������ �� �u ������� ����� ������ ���������

5��� ���,�

:,� ��� ��� �������������� ����� ����������� ���� � ( �����"���������� �3������,�

��� ��� �#������ ��� ��������� �� � � "���u������ �<� ��� ��u���� " '���� ���

��� ������<������"�� ��� ( ���3��� ��" � ��� ��( ����u( �������<������� ����

�� ��� ( �����'��� �� �� ��3������,�8� ����� ����"������ ��� ��������� �����

��� �� ��������������.���������������� �������� ( ����� �������"����������

�3�������=*�����<��77C>,�

Page 60: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��@B���

,���3���������-��� ��� ���������

��� �� ���� u� � ������ � ��� ����"������ ����"������ � .� ���������� ��� �u�� ���� ��

" � �� ����u�������� ��� ��������� ������������,�%�������� 4���7C9����2u�����

����� ��� � ��������� ���� "������ �������� "���u����� � " ����� ��� u�� ������

������ ��� =P���u�� .� +�M���<� �7C9><� 5 �� ����� ��"��� ���� �u�5 �� ������ �� .�

"���������� ��� ����"������ ���� ��� ��������� ��� ��� ���� ��� ��������

���"��u ���,�/ ��������� ����5 ����������� � �"�����" ���������������������

������<� ������ �� 2u�� � � ����"������ ���� ��� ���� ��������� ��� ��� �� ��"������

� ���������������<�"�������<��2u�����.�� "��������������� u�� ����=� ���"�.�

���,<�1;;@>,�

/ ��� � ������3�������������� �������������������"u����� u���� ���� ��� ����

������� ��� #��A�

��&���u������������������#���� ��� ��2u��"u�� �������������#���� ��������������

�3���� �� �� ��2u�����������������������"���������������"������ ���,�& � ������

��� 5 � �� � ��� ��� ��#�� �� ��� ������ � ��� �������� .� �� ��������� � ��� ����

������������������ ��������.����5 ��� � ��������#�� �� ���������� ������u������

" � ��������������������������������=*�����.����,<��779N�� ���"�.����,<��77:>,�

��� �� "� �� � �� ������ �� ��� ����"������ ���� ������ �� �� ��"�� ��� ������ �

����"������ �� =*�����<� �77B<� � ���"� .� ���,<� �77:N� � #� <� �77C>,� ����� ��� ���

�#������ ����� �� ���� "�������� �� #�,� & � � ���� �� ����� ��� 5 �� �� ��( ���

������������� �u �������.����" � ������,�

��� �� �u� � � �����"�� ���� .� �������� ��� ����"����������� ��� � �� ���u� �� ���� ���

�#������������u�� ��� �5 ���� �����������" � � �� ��� ��� ����� � �"� ������ �

�u� ���� ��� "������� ��� ����"������ ���,� & � � ����� ��� 5 �� ��"�� ��A� ��������<�

�������������.�"��"����������,�

Page 61: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��@C���

������u����������������� �� � ��� �����������������������"�� ����.������������

���� ����"����������,� ��� � ��( ���� "���������� ��� �� ��������� � ������ � ���

��������,�

��� �� �u� ��� ������� 2u�� ������ ��� ������ ������� ����� ��������� ��� ���������

������A�!����������������.������������������,�

������" ��������"��� ���������������������"������������������� �������������

.� �������� ���� �� ��( ���� ������� ������<� ��� � � ��2u�� � ��� ���� �� � � � .���

��������� ����� �����"������ ��������������������������.�������,�

& � � ���� �� � � �� ������ ������ ���u����� ��� �� ��( ���� �� �u ������� ��� �����<�

�u���� ���� ������������� �u������� � � ����"������ ���<�.��� �u ������� �������� �

�� ��������� ��������� �,�

Page 62: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��@D���

/����������4������

/��������4��������

/ ������ �<�5����� �<� �� �������.�������"���u�������"�� ������� ���������������

�3"�����������u������������������������u�������"����������A�

• �C��� ����� ����A�/ �� ������+'�����X �����<�� �� ���<��������� �

• ������������ �A�/ �� �������&5 ����<��u����������<��������� �

• ���� ��� ��� �����3�"���������� A� / �� ������� * ���<� �u����� �����<�

�������� �

• ���������� ����������� =��>� .� ���u���� u����� ���� ��� � ��� � ��� %u������

=%&��>A�*���<�*� ���-�� ��<�0S<��8�,�

• %��"�������� ���� � ��� �� ��� "���������� � =� �.� ������ �� -%+>A� -������<�

) ������<�0�M�H� � ��,�

• ��)�=�������"����>A������"5 ���-��<�/�����<�!0<� � � �

• ��)� "����� � ="��)>� .� ��"��������� O� ����u� ��A� ��5������ / �� ������<�

!� 5 <�0�<��8��

• *�+)�=+���"� �>�/ �� ������)���5��<��u���5<����� �� ,�

• *�� �������� ������ ����.��u �"��4 � �=&��*>A�/ �� ��������.���3<��u�����

�����<��������� �

• /)����� �"u����� � �-��u��� 5���� ��&���u���<��u�G� ��<�0�M�H� � ��,�

��� ��������� ����"���u�����u����( ����" � � � �"��" � ��������������.����u�������

�u����������������� � 5���� �� �<���,�/�u��<��!<��8�,�

Page 63: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��@7���

��� ������ ���� � ���� ��� u����(� �u � u��� "u����� � ����� ���� u�� ������� 0 ��&u���

=�Q �-��,<����5�.���u�<�&�<�8��>,�

/�,����� ��� �������� �

/�,���-���#$$�%"��� !���"��!�&�"���!(�"�����"&�&�

#*���&#��$�%"��"�� �"�$�%"�������"�"(��

������� ����������������������"�� ����� � ��)�������� �u�� ��=�� �A�@� �D�

4��N� "���� ���"�� �� "�������� Z� %�A� :C@� Z� @;� G�>,� / �� ��� ����� �u�����

���������������u"������@� ��� ���,����� � ���u"�<�����������u����������( ���"���

���������u�����"�������� ���� � ��� ��= -%+>��������������<7������"���������� �

=������������%' �;�����' ����� �������������� -%+>�.�:��������C����� ����<��,�,�

�1�5����"u������� �������������� -%+,�

��� �� � ������� ��� �u"�������u� ���� �u�� ����� ��� ��� %' � @� u����( ���� ��)�

=�������"����>����������u�� �������� ������� �����������"���������.���� �u����� ��

���u��������2u�� A�

%' �@A�1<:����"���� �� 4 � <�1�����1�5����"u��,�

%' �:A�1����"���� �� 4 � <��<:�����1�5����"u��,�

%' �BA��<:����"���� �� 4 � <�������1�5����"u��,�

%' �CA������"���� �� 4 � <�;<:�����1�5����"u��,�

������%' �B<� � ����� ����� ���������� � �����1���� ��� ��"��������� = ����������

"���� �� ���� ��1 �� ><��,�,<�.���� -%+��u������� ������� �� ���������������' ,����

%' �D<���� �������� ����1<:�������*�+)�=+���"� �><��,�,����� �� 4 � �.�� �� ����

��� ���� %' �� C<� D� .� 7� ��� �� ��(� � � ��������� ��� ����� �u� ���� 9;� ���� "���

Page 64: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��:;���

����� ���� ��� � � ����u�� � ��� ���� ,� �2u������ ��� ���� 2u�� ����� ���� �����

����������������� ���� ������� ���1�5����"u��,�

��$���$$�%"1�&��#�$�%"������ !���"��

/������������ �u������������� ������� ���� ����2u������� �������' �����"u������

� ������������������,�& � ������"��"����<��u������ � ���� �����u������u��������

���� %&��� ����� ��� ���� �?� ��� ���� .� �?� ��� ��,� /��� ��������� �u�����

u�� ���� #�� �u" � �� ������ � ������ ����� ���� ��� ������ ��� � �����������<�

���������������%&�������� ��������;?��������.��?������,�

/��� ��������� �u����� �� ����� ���� ��� �u����� � �u� ��� ���� ��� ��� ������� .� �u�

��������' �=/�������.�P���5�<��7D@>,�������u�������"�� ������������3"����������

2u��� �� ��u� �� ���" �� �� �� � ���������� ��� � ��� �� u�� � �� �3�������� =����

� "'�u��� �,�,9,@>,� /��� ��������� �������� ���� � � � �' � =u�u ������� 1;� � 9;>�

�u����� ���� ���� �� ���� ������ � ���� ����������� �� � �������� ������� ��� � � �

�3"��������,�

/�,�,�-���#$$�%"��� !���"��!�&�"���!(�"�����"&�(��

��*���$�%"0���$#����������"�"(��

���� ��� ����� ��� �������� ��� ��"�� ���� � � �� )�������� �u�� �� =�� �A� @� � D�

4��N�"�������"�� ��"��������Z�%�A�:C@�Z�@;�G�>,�/ �"u���������������'�u�������

�� ��(���"�� ����u� � �u# �����D�*�3�@:���������� � � �u� ��� ����� �'�,�

/ � �"�� �����u���u� � ����� ����u������ ������G �:;;�=���G <�6�G.�<�X " �>�

����u���� ���u��������� �����C<:��)(�=�����.����,<��77: >,�

����������" � �� � �"�� ������������������������"���6 ���77������ �������

;<;:���T������5�" ��� <��;;�8-T������"�������� <�;<����T�����������"������� <�

;<;:���T������G � ����� <�.�;<:?�����������,�

Page 65: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��:����

���#��$�%"�"&�(��

8� � ��(� �3�� '���� ���� �'2u���� ��� �"�� ���� #�� �u" <� ���� �������� �u�����

�� ���������� ������������ ���������������"u�����"���6 ���77������ �������

)�&��� �:���� =��"�� ��� ����� u����>� .� �;?� ��� ���,� & � � � �� �u� ���� ���

������ =-��>� ������������ �u����� � � �������� ������������������� ������������.�

�������������u�����������"u�����"���6 ���77��� ��� �������� ��������;?�

��� ���<� �;� L�T��� ��� /)� ���� � "u����� � � =0-)��/)���><� �� L�T��� ��� "��)<�

��L�T��� ��� �C[����� ����� .� ����� ��� � �;;� L�� =��� � ���� .� ���,<� �77:>,� /���

���"��#��� ���u�u���������� = ! �>� �u����� �u���� �����u� ���� 1@� 5� ��� ��� �� ���

:;� L�� ��������� ��� -��� #�� ����������� �� � 97K � ��� ������ � ��� :?� !1<�

C?�!1�.�DD?�01<������ �u� �������5u��� �,�

���(���)�$�%"�"&�(��

/u������� � �� �u� ���<� ���� ! �� �u����� ���u �����u� ����11�5� ������ �����

:;�L���������������������( ������������� #�� ����������� �<�����u� ��������� ����

��� �3�;BT��� ��� ��"��� ��(�����<� ��������� ���� ���� ���� ��� "������������� ���

&�������=& ����5�.����,<��7DB>� ��������������������( ������������������"���6�/&�

����� �������B���T�������������<�"������ ��� 1;�L�<�5�"�� u��� ��;�L�<�.�

�;�L�T������5�" ��� ,����������6�/&� �u�����"u����������� �u�� �������"���"���

& ����5�.����,�=�7DB>,�

�#�(�&��"&�(��

/��� �u"u������ �������� �u����� �� ���������� �� ������ �.��5����� !���u��� ��u���

������� ��� =�!��N� 6������ .� ���,<� �7C1N� ��M ���� .� ���,<� �77C>� ����� ��� ����

��u� ��� �����<�1?� =�T�>� ������<��?� =�T�>� �������.�@���T��������������

=1C@� � 1CB��!��T�>� .� �u���� �����u� ����@D�5<������� �����@;�L�� #�� ������

����� ��=�;����������"������ ><� �97K ���� ������ ����:?� !1<�C?�!1�.�DD?�

01<� ���� � �u� ���� ��� 5u��� �,� ��� � �� ��� @D� 5<� ���� ��������� �u�����

Page 66: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��:1���

�� ���������� �������������� "���� ������������ ��u��� � �<:���� =�u��u�� .� ���,<�

�77C>������u �������� ������ ���������������u� ����:��' �,��������������u������

�u��� �� ���� � �@D�5,�

/��� ��������� �u����� �� ����� ���� ��� �u����� � �u� ��� ���� ��� ��� ������� .� �u�

��������' � =/������� .� P���5�<� �7D@>,� ���� ��� ��"�� ���� ��� ���� �3"����������

� ���������� ��� �3" ����� .� �3" ������� ��� � ��� �� �3�������� .� u�� ,� /���

�������������������������%' ��B�.�C�=����� ��������;� �1;����������"����' >�

�u����� ���� ���� �� ���� ������ � ���� ����������� �� � �������� ������� ��� � � �

�3"��������,�

/�,�/�-���#$$�%"��� !���"���&�"���!(�"�����"&�&�

#*���&#��$�%"��"�� �"�$�%"�������"�"(��

���� ��� ����� ��� ��������� ��� ��"�� ���� ���# �� ��u( �������� �u��� �� ��� 3�

������ ��� �u�� �� =�� �A�@� �B� 4��N�"�������"�� ��"��������Z�%�A�:B<@�Z�:�

G�>,� / �� ���# �� �u����� ������� �� ��� ��u"��� ��� B� ��� ���,� ��� � � � ��u"�<� ���

��������(� ��� ������ ��"�� ���� ��"��# �� ���� � ��� ���� ������������ B;� ��� ���

��&� �u� ���� �@� �' �� =%' � ;� �� %' � ��� ��������� ��� � � ��"��# >,� / �� ��� �����

�u������u"����u� � ������u� ���������� �����1:;�8-����"��)� �������� � ����B�

������������������� ������� ��������1�5<������( ����@D�5� ��������� ���������

��� � � ��"��# � =0 �� � � .� ���,<� �77:>,� ��� ��� �������� ��� � � �������� ��� � �

��"��# <� � �����# �� �u���������� � ������u��� �5������������� ��"�� � ��������

"��5�� "��� ���" � �"����� ������ �� 2u��� ��� �� 2u��5 ' � ��������� ��<� .� ���

��������� � " ���������� �� �� � ��1�5��u� ����1��' �,�

��$���$$�%"1�&��#�$�%"������ !���"��

����� �' �� ���"u��� ��� � � ��������� ���� ������ ���� ��������� �u����� ������ ����

2u������� ������ =� �� �� ���� .� ���,<� �771>,� & � � ����<� � �� ��� ����� �u�����

�� � � �� ���� ;<9���� ��� ���"�� � �?<� �,�,� .� �u���� ������� � �� ���� ;<C���� ���

Page 67: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��:9���

3�� (�� � 1?<� �,�,<� .� :� ���� ���� � ���� �<:� ��� ��� ����5��� ��� ��� G�� ��� � =:;�

��T��><� �,�,� ����� �u������ u�������� �u����� �3"u������ .� �u� ��������� �u�� � � ���

���� %&��� ����� ��� ���� �?� ��� ���� .� �?� ��� ��� =9;���� � � � �u����>,� /���

����������u�������� ��( ���� #���u" ��������� � ����������� ����������������

� �����������<�����u ��������������%&�������� ��������;?��������.��?����

��,�

/��� ��������� �u����� �� ����� ���� ��� �u����� � �u� ��� ��� ��� ��� ������� .� �u�

" ������ ���������� �=P�����������6������.����,<��7DC>,�& � ������3"����������

���� ��� ��"�� ���� ��u� �� ���" �� �� .� � ���������� ��� � ��� �� �3�������� .�

u�� ,�/�������������������� �������� � ��' �=u�u �������1;� �9;���������>�

�u����� ���� ���� �� ���� ������ � ���� ����������� �� � �������� ������� ��� ����

�3"���������,�

/�,�5�-���#$$�%"��� !���"���&�"���!(�"�����"&�(��

��*���$�%"0���$#����������"�"(��

���� ��� ����� ��� �������� ��� ��"�� ���� ���# �� �u�� �� ��� ��u( � �������

�u��� �� ���3� ������ ���=�� �A�@� �B� 4��N�"�������"�� ��"��������Z�%�A�:B<@�

Z�:<;�G�>,�/������������u����� �"�� ����"��������u�������������"�� ����u� � �u# �

����D�*�3�1;���������� � � �u� ��� ����� �'��=� �� �� ����.����,<��77B>,�/ �

�"�� �����u���u� � ���"�� ����u��� " �����"��������(�=Q ��������(�*��\� �,<�

Q*<�6u��������<����� �� >,�

����������" � �� � �"�� ������������������������"���6 ���77������ �������

;<;:���T������5�" ��� <��;;�8-T������"�������� <�;<����T�����������"������� <�

;<;:���T������G � ����� <�.�;<:?�����������,�

Page 68: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��:@���

���#��$�%"�"&�(��

8� � ��(� �3�� '���� ���� �'2u���� ��� �"�� ���� #�� �u" <� ���� �������� �u�����

�� ���������� ������������ ���������������"u�����"���6 ���77������ �������

)�&����:����=��"�� ��������u����><��;?�������,�& � �� �� �u� �������������

=-��>� ���� �������� �u����� � � ���� ���� ������ ��������� ���� ������������ .� ����

������������������� �u� �������"u�����"���6 ���77��� ��� �������� ���

���� �;?� ��� ���<� �;� L�T��� ��� /)� ���� � "u����� � � =0-)��/)���><� �� L�T��� ���

"��)� .� �� L�T��� ��� �C� [� ���� ����,� & � � � � -��� ���� ���"��#��� ���u�u���������

= ! �>��u������u���� �����u� ����1B�5<������� �����:;�L��������������-��� #��

����������� �� �97W ����u� ����u ��� �� �� � �����:?� !1<�C?�!1�.�DD?�01<�

���� �u� �������5u��� �,�

���(���)�$�%"�"&�(��

/u������� � �� �u� ���<� ���� ! �� �u����� ���u �����u� ����11�5� ������ �����

:;�L���������������������( ������������� #�� ����������� �<���������������3��;B�

��"��� ��(�����<� �����u �����u�������������� �������� ����� ������� ����&�������

=& ����5�.����,<��7DB>,�

�#�(�&��"&�(��

/��� �u"u������ �������� �u����� �� ���������� � ������ �!�� ������� ��� =�!��N�

* ������.����,<��77@N�6������.����,<��7C1>������u �����u� ����B��' �,����������

����u�������u��� �� ���� � �@D�5,�

/��� ��������� ��������� �u����� �� ����� ���� ��� �u����� � �u� ��� ���� ���

��� �������.��u���������' �=P�����������6������.����,<��7DC>,����������"�� ����

��������3"����������� ��������������3" �����.��3" ����������� ��� ���3��������

.� u�� ,� /��� ��������� ��������� ��� ���� %' �� :� .� B� =����� ������� �;� � 1;�

��������� "��� �' >� �u����� ���� ���� �� ���� ������ � ���� �����������

�� � ������������������� � ��3"��������,�

Page 69: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��::���

/�/�-��������������-���������

��� ������ ���� �� � �������� ���� ��������� �u����� � �� ���� �������u ������� ���

" #u�� �����;<1:���� =-��<�/]�����<��� ��� >,���� 2u������ �� � �������������� ����

��������� �u����� ������ ���� ��� ��"��� u� � ������ ��� � ��� ��� ���� =�6��

�.�����<�������+����<�0�M�S��G<��8�>,�8� ���(�����"������ ���� �������������

�u����� �� ��� ���� ��� ��������� �'2u���� �u� ���� B� � �1� ������ 5 �� � � �

�� ��������� ,�

/�/���-��(�$������$�"���� ��"(���"(�

��"���� ��"(�$�"���$����6�"$��*���$�%"�"�*���7���8�-9

�����"������"������������������ �������������"���"����������.����,�=�7D1>�����

������� ������� =���� �"������>,� ����� "��������� ��"�� � ��� ��������� �����

����"��������<� ��� �u �� ��� �����"�� ��� ��� u�� " ��� =��������� �;?>,� /u���� ����

��������� ������� ��� �� ��( � � � �������� ���� ����"��������� ��� ����� " ���� ����

�������� ��������������������������������.� � � ���������� � ��� �;<9������� � �

" ��,�

��"���� ��"(�$�"���$����6�"$��*���$�%"�",*����7���8,-9

���"����������u������� �� �� �������<��3��"���"���� ������"�� ������������"��������<�

� � �u �� ��� �� ��(��������" ���� =�����"������>,��2u'� ��� �����u��"������" ���

������������ ��� u� � ���u���� ��� ��������� :?,� / � �������� ���� ����"��������� ���

�� ��(����� ����� ����� �2u��������"��������� �������,�

Page 70: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��:B���

��"���� ��"(�$�"�(���"���$��6�"$��*���$�%"�"�*���1(��"�0���"$��

����$(�7��8�����9

�����"������"������������������ �������������"���"�������G���.�)u�=�771>,����

�����"��������������"�� ����������"��������� ��������������<�����u ����������"�� ���

���u��" ���=��������������<:��<������"������>,�S �2u�������������������2u������ �

�������� ���� ����"��������� �u���� ���� ��������� ������<� ���� ��������� ����

�� ���������������� ������������� �" #u�� ����� �2u���u����������� ���,�

��"���� ��"(� $�" *��*���"���$�� 6 �"$��*���$�%" �" � *��� 1

(��"�0���"$������$(�7-�8�����9

��� �� ��(� u� �������� ���� ��� ��� "��������� ������"��� ��� � � ������� �������<� ���

�u �� ��������� ��� ��� ��"���� ��� "��"����������� ��� ����"� (�� ���� ������������� =����

�"������>,��������"����������"�� ������������"����������u�����:����,�/ ��u�� ����

������ �������.������������� ������������ ��( �������� ����� ����� �2u��������

"��������� �������,�

��"���� ��"(�$�"���$����6�"$��*���$�%"�"/*����7���8/-9

�����"��� ��� "��������� ������"���"��� &� �5��� .� ���,� =�7DC>� ����������� ������,�

����� "��������� ��"�� � ��� ��������� ����� ����"��������<� ��� �u �� ��� �����"�� ������

����� " ���� =��������� ;<:� �<� �<;� �� .� �<@� �<� ���� �"������>,� /u���� ����

��������� ������� ��� �� ��( � � � �������� ���� ����"��������� ��� ����� " ���� ����

�������� ������������������������������� .� � � ���������� � ��� �;<:������� � �

" ��,�

��"���� ��"(�$�"�(���"���$��6�"$��*���$�%"�"/*����7��8/-9

��� ��"��� ��� "��������� ������"��� "��� 6������ .� *���� =�7D@>� ����������� ������,�

����� "��������� ��"�� � ��� ������������� ����� ����"��������<� ��� �u �� ��� �����"�� ���

Page 71: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��:C���

��� ����� " ���� =������������� ;<:� �<� �<;� �� .� �<:� �<� ���� �"������>,� /u���� ����

��������� ������� ��� �� ��( � � � �������� ���� ����"��������� ��� ����� " ���� ����

�������� ������� ������������� ��� ������������� .� � � ������ ��� � � ��� � ;<:��� ���

� � �" ��,�

��"���� ��"(� $�" �(���"���$�� 6 �"$��*���$�%" �" / *���� ���0�$���

7��8/- 9

���"����������u������� �� �� �������<��3��"���"���� �����������������"��������<� � �

�u ������� ��(����u��" ���=� � ��� �;<:��<������"������>,�

/�/�,�-��(�$������&�(��0�$�$�%"

��(��0�$�$�%"$�"*��*���"���$��:���$����7-�:���9

��� ��"��� ��� "��������� ��� �������� ���� ������"��� "��� ��5������ .� ���,� =�7DB>� .�

� ���"� .� ���,� =�7DB><� ���� ������� ������,� ����� "��������� ��"�� � ��������� .�

"��"����������� ����� ����"����������� " � � ���"����� � � ���u���� ��� �������� ����

=��������� 1:?� F� "��"����������� 1:?<� ���� �"������>,� ������ ��� �u������� ����

������������� ����u��������������� ������������������� �������u� ����u�������

�2u���� ��,� / � �������� ���� ����"��������� ��� �� ��( � ��� ���� " ���� ��"�� ����

� � ��� ,�

��(��0�$�$�%"$�"�(���"���$��:��$���;<:��$�����7��9

��� ��"��� ��� "��������� ��� �������� ���� ������"��� "��� Q � �� .� ���,� =�77;><�

������� ���"���H5u�.����,�=�779>,������"�����������"�� �������������<��������C;�.�

� � ��� � ����� ����"����������� " � � ���"����� � � ���u���� ��� �������� ����

=������������� @;?�F� ������� C;� �D?�F� � � ��� � ;<9��<� ���� �"������>,� ������ ���

�u������������������������ ����u��������������� ������������������� �������u� �

Page 72: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��:D���

���u���� ��� �2u���� ��,� / � �������� ���� ����"��������� ��� �� ��( � ��� u�� " ���

��"�� ����� � ��� ,�

��(��0�$�$�%"$�"�����#$�%"�� ���0�$���7�� 9

����� ��(�u� �������� ��������"�������������������"������� �������� �������,�/ �

� �� ���� ��������� ��� �2u���� �� ���� ��������� ��� ���� " ���<� ����� ��� ����

�������� ����=�����"������>,�

��(��0�$�$�%"$�"�(���"���$��:���$����7��:���9

�����"��<������������ ������<����"�������������������� ����������"���"���S ���.�

���,�=�771>�����u ���u����� ����� ��������u� �������� ��������"���������&�F*��,�

�����"�����������"�� ��������������.�������������������"�����������" � ����"�����

� � ���u���� ��� �������� ���� =��������� 1:?� F� ������������� 1:?<� =���� �"������>,�

������ ��� �u������� ���� ��������� ��� � � ���u���� ��� �������� ���� ������ ����

����� ���� ��� ���� ���u������� ��� �2u���� ��,� / � �������� ���� ����"��������� ���

�� ��( ���������" ������"�� ������������ ������������������������ � ��� ,�

/�5� ��������� �� �� �������� ������ ����

���������� ������� ��

/�5��� �&��#�$�%" �" &�(�� �� ��� (��(� ��"(�� �� $���*�����&�$�%" ��

� !���"��!�&�"��1�&�"��

/ � �� �u ���� ��� ������ ��� ���� ��������� ��������� ���� ��� �� ��(<� �u���� ��� � �

����������������"��������<����� ��������u�������������������������� �����:;�L��

Page 73: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��:7���

����!��� � "� ������ �u����� ����������"������� ������������9,1,1�.�9,1,@�=:� �

C���������T��� >,�

������ ������<�������������� � ���� �������� ��������=��� � ����u� �>���� ����

�3" ���������������=��� ����� ���������><�.� � ��������<��u������� �u ����� � �

1@�5�5 �� �� ��C1�5�" � ������ ��� ��� ���� �������� �� ,�/ �� � ������� �������

�u�� � ��u� � � ����� ��� ��������� ������ ��� ������� ��� ��������� 2u�� ���� ���� ��

�3" �������� ��� � �������� .� ��� ������� ��� ��������� ����� ���� ��� �u�����<�

������ ��2u��� �� � �������������u��� ��u� � ����������������������������2u��

�������� ������������������������������������ ��������u�����,�

��� ������<� ��� ���� �3"���������� ������ ��� �� ��(� ��� ���u����� ���� ������� ���

����������� 2u������� ����������2u��������������� �u�������C1�5���� �u�����<����

��"��� " � �� �� �� ���� �������� ��� � �� ���� ��u���������� ��"��'����� " � � �%0�

)���5��� 999@1<� ������������� ���� ���� u�� ��������"��� ��� �"���u��������� �

0�G���!"��"5���=0�G��� �,<�6�G��<�X "�N����� ����.����,<��77:>,�

/�5�,� �&��#�$�%" �" &�&� �� ��� (��(� ��"(�� �� $���*�����&�$�%" ��

� !���"��!�&�"��

/ � �� �u ���� ��� ���� �� � �������� ��� ����"������ ���� � ����� ��� �� ��(� "���

�� ��������� � �����"��� �,������"�� ����" � ������� � �� �u�� ��&������)��������

=�� �A� @� � B� 4��N� "���� ���"�� �� "�������� Z� %�A� 97D� Z� 9;� G�>,� ��� ����� �u��

��������( �����"�� ����u� ����� ��������,�,����1������� ��"��������,��������' ��

���"u������� �������������������<���������������u������� ����������������� ����

2u������� � =�� ������ "��� ����"��� >� ��� ��� �u����� u������� �"��� ��� �� �� �u��"��

������u� ����u��� ��������� �� ��������� �������������������� =-,�,�,<�/]�����<�

�� ��� >,�

/ �"��4�(� �u���� ������� � �9;��' �����"u������ � � �� ��������� <����� ����u� �

����� �' ��� ������ ����"�� ����u������ ������G �:;;�=���G <�6�G��<�X "�>�����

u�� �� ���u����� ���� �� ��� C<:� �)(,� Yu����� �' �� ����� ��� � � ���5 � ����� � � ���

" ���<� � �� ����"��� �� "��4 � �� �u����� ��" � � �� .� � ������ �� ��� ���� ���,�

Page 74: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��B;���

%u� ���� ��� "��'���� ��� � ���������<� ��� ��u"�� �u�� ������� ��� ���� ������ "��� �' �

" � �������� ������" �������������,�

��� ������� � � � � � ��� "��4�(� "��� ��������� ��� ���� ����� ��� ��������� ������ ���

���������� ����"��� ��"��4 � �� .� ��� ������� ��� ��������� ��"�� ������� � � �

�� � ������<�� �� � ����"��4�(�"�������������� ���������������������������������

��� ������� ��� ����"��� �� "��4 � �� .� ��� ������� ��� ����"��� �� 2u�� ����������

�����<�� �� � ����� ����������"��������������� ������������������������������

������� ��� ��������� � ������ .� ��� ������� ��� ��������� ��"�� ���� ��� � � �

�� � ������� .� � � ����� ����������"������������ �� ������������������ ���������

������ ��� ���������� ��������� � ������ .� ��� ��������������"��� ��2u�� ����������

�����,� / � � � � ��� " ����� ���������� �u�� � ��u� � � ����� ��� ��������� ������ ���

����������" ���������������.�������������� �����" ����,�/ ���� ���������3����u��

� ��u� � �������������������������������������� �5���.�5��� ��� ��� �<�.� � �

������u�� ��� � � ���� ���� ����� ��� ������ ��� ��� ����"�� ������ � �� ���5 �� ���

�� ��������� �.�� ��������<�����B��' ��=�������� � �� ��� �������� �� >,�

/�5�/� �&��#�$�%" �" &�&� �� ��� (��(� ��"(�� �� $���*�����&�$�%" ��

� !���"���&�"��

& � � � � �� �u ���� ��� ����� ��� ��������� ������� ���� ���� �� ��������� <� ���

��"�� ���� ����� ����"��� �� ���# �� ��� ��u( � ������� �u��� �� ��� 3� ������ ���

�u�� ��=�� �A�@� �B� 4��N�"�������"�� ��"��������Z�%�A�@C<;�Z�:<;�G�>,���������

�u����������( �����"�� ������"��# �� ���� � ��� ������"���� � ������B;�������

��&�2u������ ��u��������u� �����@��' �,������������������ � ������������ � �

��"��# ������.��� ����9;;�8-����&��*,�������' �����"u������������ �����������<�

���� ��������� �u����� �� ���������� 2u������� ������ =�� ������ "��� ����"��� >�

#�� ������� � =������� 9,1,9>� ��� ��� �u����� u������� �"��� ��� �� �� �u��"�� �����<�

��"�� ���� u�� � ������ 6��� �� =�5��M���� ����� �<� ��,� /�u��<� �!<� 8��>�

������ ��� � u� � #����� � ��� �� ��,� /u���� ��� � � �� ��������� <� ��� �� � �� ���# ��

����������u� ���"��# � ���� � ��� �� ����B;���������&<� � ��u ��2u�������� � �

�u� �����@��' �,�

Page 75: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��B����

/ �"��4�(��u���� ������� � �@:��' ���u�������� ��� ��������� ����� ��������� �' �

�� ��� ����� �<���"�� ����u������ ������G �:;;�=���G <�6�G��<�X "�>�����u��

�� ���u��������� �����:<;��)(,�Yu������' �� ��������� ����5 ������ � ����" ���<�

� ������"��� ��"��4 � �� �u�������" � � ��.�� ������ ��������� ���,�%u� �������

"��'�������� ���������<������u"���u��������� �������������"����' �" � �������� ��

����" ��������������,�

��� ������� � � � � � ��� "��4�(� "��� ��������� ��� ���� ����� ��� ��������� ������ ���

���������� ����"��� ��"��4 � �� .� ��� ������� ��� ��������� ��"�� ������� � � �

�� � ������<�� �� � ����"��4�(�"�������������� ���������������������������������

��� ������� ��� ����"��� �� "��4 � �� .� ��� ������� ��� ����"��� �� 2u�� ����������

�����<�� �� � ����� ����������"��������������� ������������������������������

������� ��� ��������� � ������ .� ��� ������� ��� ��������� ��"�� ���� ��� � � �

�� � ������� .� � � ����� ����������"������������ �� ������������������ ���������

������ ��� ���������� ��������� � ������ .� ��� ��������������"��� ��2u�� ����������

�����,� / � � � � ��� " ����� ���������� �u�� � ��u� � � ����� ��� ��������� ������ ���

����������" ���������������.�������������� �����" ����,�/ ���� ���������3����u��

� ��u� � �������������������������������������� �5���.�5��� ��� ��� �<�.� � �

������u�� ��� � � ���� ���� ����� ��� ������ ��� ��� ����"�� ������ � �� ���5 �� ���

�� ��������� �.�� ��������<�����B��' ��=�������� � �� ��� �������� �� >,�

/�=�� >�������?����

/ ����������� ������ ��� � �������� ������<��������<�"��4�(<�� ����������.�" �����

����������.� � ����� ������������3��� �u����� � ��( � ����"�� �������������3 ����

������5��,�

/ �� ��������� �� ��� ��� ������� ��� �������<� ������u�� ��� � � ���� ���� .� "���� ��

� ��������� �u����� � ��( ���� ���� ���� ��� ����� ��� 6� �� �0!��<� ������

������"������ ,�

Page 76: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��B1���

/��� � ������ ��� "�� ���� �� �������� 2u�� ;<;:� �u����� �������� ���� �����

�������� �����,�

6����� ���� ������ �u����� �� ��( ���� ��"�� ���� ��� "���� � � �� ������ � " � �

P����M��=�� �������-��,<��777>,�

Page 77: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��B9���

5�����-��������� �������� ����� �

���� ���� ����

5���� ���������

%u� ���� ���� ����� �� ��� � �<� � � ����"������ ���� ��� ��������� ������� �u��

��#�� � � �u�� ��� ������� ������ � � ������� � ���� ����� u�� ����������� ��� � �

� ��� �� ������ �� <� u� � ��������� ���u � � ��� � �� ����"��� �� .� u� �

��������( ���� "��"� � � ������ � � ��� ���� .� � � ����"��� � =*�����<� �77B>,� &���

��� �" ���<������#�� ��������������"�����������������"������ ����5 �������u����

�������� ��� ������ �� �3���� ���� ������ ������� ��� ��������� =� 5����� .� * ��' <�

�771>,�/ ��� � �����"��4�(� �� �( � ����"�� ������������������� ������� �� �

� ��� �� ���� ���� u�� �;?� ����������� � � �� ������ �� u� ���� ��������� ��������

=0��� ��<��77�>,�

���� � ��u ��� �<�� ������� ����� �"�� ������u� � �" � � � �����"������ �������

���������������������������� �������������=� 5�����.�* ��' <��771<�0��� ��<�

�77�>,� +������������� ��� ��� ������ � � ������ � ��� �� ��������� � ������ <� 2u��

"������� �� �������� ��� ������ ������ � ����� � " #u�� � ��� � � 2u�� �u�� ������ ���

=/���<��7D@N�� ���"�.����,<��7DCN�+�� ���.����,<��7D9N�����G���.�)u<��771>,�

/ �� ������������ ��� � �"�� ��2u������ 2u�� � �� ������ �� ��� ��������� ������� .�

�� ��������� � �� �� ������� ���"���� "�����<� ������3�� � ��������� � ��� �u ���� ��

������ .� ��� �� #�� ����� ����,� ��� ������u���� <� ��� ���� �������� 4��� � �

�������� ���������������� ��������������������������5 ������������� ��������

� �� �( �� �� �� � � �� ��� � ���������<� ����� � ����� � ���"����� �� ������������

�����u�� ����=& � �(�.�� "������<��77B>,�/ � ������ � ��� ����������� �� ����

� ������,�

��� �#������ ��� ����� � "'�u��� 5 � ����� �� �u �� ����������� ������ �� ���

����"������ ���� ��� �u� � " ��� �� " � �� ������� � � �� ���� ����� �������������

�������������������������u����������������� ���,�������" � ����������������

Page 78: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��B@���

��������� ������� �������������������.�u���������" � � �� ��������� ������� �����

������������,� ��� ��� ������� ��� �����<� ��� �� �u ���� ����������� ����"��� ���

�����"�� ���� ���� ����"��������,� ��� ������<� ��"�� ���� ��� ������� ���

�� ��������� � ������ � ��� ���" � ���� ���� ����"����������<� ������������� .�

"��"����������<������ ��������������������� ����������� � ��� ,�

5�,���������

��� ���u"��� u�� ��� �� ��� �B@:� ��������� "���u������ "��� 1�:� ��� ����� =C<C�

��������T��� ���><���������u �����@�9��u�����u� ��������������3"����������.�

191�����u������������� ���������� ��u� # �� ��� �,�

5�,�����"���� ��"(� ��"(���� !���"��!�&�"���!(�"�����"&�&�$�"

���$����1�(���"���$���

�����"�� ����@�7���������������������������������<���������u �����;:��u�����

������ ���� ���� ��� "��������� *����&<� �;:� ���� ��� "��������� *���1&<� �;:� ���� ���

"������������6�%��,� �������������u������� ���������������������;@���������,�

u ���� ��� � ��( �� � �� � � �� ��� "��4�(� .� � ���������� "��� ��������� ��� ����

��"�� ���� ��� ��� ����� �� ��������� �� ������ ���� ����������� �� � �������� ���

����"������ ���,����� �����"� ����������������������������������� ����������� ��

�������� ��� ��"�����" ������� ���� �u ������� ����������=6 � ��>,�

/��� �� � ��������*���1&�.����6�%��� �u����� ��u ����������������<����������� ����

��������� �� �������� ��� �� ���" � ���� ���� ��� �������� ��� � �� � � �� ��� "��4�(� ���

� ���������� "��� ��������� �� ���������,� &��� ��� ����� ���� *����&� ������ 2u�� � �

� � � ��� "��4�(� ��� � ���������� ��� ���� � ���������� .� ��� � � �u� � �����u� �� .�

� �����������u������������� ��� ���������� # ��2u�������������=6 � ��>,�

Page 79: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��B:���

u ����������" � ����� ����u� ����������� �������������� � ��� � ������������

���������� ������������� ���������� ��� �����*����&,�

�� " ����� ��� ������ ���u�� ���� ��� ������� u����( �� ���6�%��� " � � ��� ���u������

�3"��������,�

5�,�,��0�$(����(�� *����2#���!�������$���*��(�$(���"��*��(�$���

��(��"�0���"$������$(�

��"�� �������"������������������ ����������6�%��<�������" � ������������"���

��� �����"�� ���� ���� ����"��������<� :� .� 1;� ���,� & � � ����� ��� ��"�� ���� 11@�

��������<� ��� ���� �u ����C:� �u������2u���� ���� ������ ����"��������� �u� ����1;�

���<�C:��u������2u���� �����u� ����:�����.�C@�����������u������� �������������

�������������������,�

u ���� ��� ��������� � � �u� � ��� ��u� �� .� � ���������<� ��� ��� ������� ����

��������� ���������� ��� ������ �� � ����"��4�(������������u"���������������������

2u��� � �����"�� �������������������������� ��(��u� ����:����u����.���������������

�� ������������� ������,��������� ���<� � � � � ����"��4�(����� ��u"����� ���������

2u�� �u�� �3"u����� �� ������������� �u� ����1;����u���� �u�� �������� ��� ����������

# � 2u�� ��� �������,� u ���� ��u� �� .� � ���������� �u����� �������� ���� "���

��" � ��<� � ��3"��������u� ����1;����u���� �������������������������"��#u���� ��

" � � � ����u� �� =���� � � �� ��� "��4�(����� # �� 2u�� ���� ���������><������� ��

2u��� ��3"��������u� ����:����u������� ����u�,�����������������u������� ������

����� ����������=6 � �1>,�

��� � � � ������<� ��� ��� ����� ���� ��������� �� �������� ��� �� ��� � �� � � �� ���

"��4�(�.�� ���������� �����" � ����u� ����,��� ����������=6 � �1>,�

/ � � � ����� ����������������u"���������������2u���� ����u� ����1;����u����

�u����u �� �� �������u"���3"u������u� ����:����u���<�"�����u���������� ��� ������

���� # �2u��� ��������������������=6 � �1>,�

Page 80: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��BB���

��" �����������������u�� ���������#����������"����������"�� ����:����u����.����

����������" � ���������" � ��� ��������� ������� �����u� ���������������������.�

"��"����������,�

5�,�/�-��(�$������$�"���� ��"(�$�"(��"�0���"$������$(�@� *���"��

�(���"���$���*��*���"���$��@$� !�"����$�"��0���"(��$�"$�"(��$��"��

����$�����

/ �����u����������6�%���.�&��6�%���=����� ���� ����.��������>��u���������� � ��

���� ����� �������� ��������������������� � � ��� � =;<� ;<�� ��;<9��>� ���"��������

������������������������������ ������������������ ������� �u ���,�

�����"�� ����CC;����������2u�����������u.��������� ����u������� ��� A���;�

�u����������� �����������6�%��<���;��������6�%���F�� � ��� �;<���<���;��������

6�%���F�� � ��� �;<9��<���;�����&��6�%��<���;�����&��6�%���F�� � ��� �;<���<�

��;�����&��6�%���F�� � ��� �;<9��<�.���;������������������������������,�

/ ��� � �����"��4�(������� ������� ����u� �� .������� �� ������������������2u��

��� "��"����������� " � � � � ����"������ ���� ��� � ���������<� ��������� � 2u�� ��� ���

��������� � ����u� �,� / � � � ����"��4�(���� � ����u� �� ����"������ � �� ����

������������� �u�� ��#�� � � "��� � � ������ ��� � � ��� � ;<�� �� ��� � � ���u���� ���

����"������ ���<� "���� ����� ������� ��� �u�� ����� ��� �u���� ���� ���� ��� ���

� � ��� � ;<9,� ��� u��� ��� ������������� ���� � � ��� � ;<�� �� ��� ������ ��������� ��

�������� ��� �����"�����������������������,�������� �������"��"����������<�� � ������

���� � ��� ��u����������� ���"��#u���� ��=6 � �9>,�

u ���� ��� ���" � ���� ��u� �� .� � ���������� ������� ��� � � � �� � ������<� ���

����� ���� ��������� �� �������� ��� �� ��� ��� �� � ������� ��� ������������� ����

� � ��� �;<9���.�"��"���������������� � ��� �;��,�

/ ������ ������������������������� � ��� �;<���� �� �(�� ��� � �����"��4�(�.�

� ���������� ���� �� <� ��� ����� ���� ��������� �� �������� ��� �� ���"����� ����

���������������=6 � �9�.�@>,�

Page 81: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��BC���

��!�����6� ��������� �������������������������� ��������*����&<�*���1&������6�%���

� � 6� � ��������

� � *����&� *���1&� ���6�%��� �������

�� 1�T::�=9D<1?> U� 1�T::�=9D<1?> � 1@T::�=@9<B?> � 9�T:@�=:C<@?> �

�� DT:;�=�B<;?> U� �:T:;�=9;<;?> � �BT:;�=91<;?> � 1CT:;�=:@<;?>�

6 � ����"��4�(�"���

������������ ����

=+���"��� ��"��4 � ��T�

��� �������������>� ��F��� 17T�;:�=1C<B?> � 9BT�;:�=9@<9?> � @;T�;:�=9D<�?> � :DT�;@�=::<D?>�

�� 1�T:;�=@1<;?> U� 1�T@@�=@C<C?> � 1@T@B�=:1<1?> � 9�T:@�=:C<@?> �

�� DT@1�=�7<�?> U� �:T@;�=9C<:?> � �BT@1�=9D<�?> � 1CT:;�=:@<;?>�

6 � ����"��4�(�"���

����������� ����������

=+���"��� ��"��4 � ��T�

����������� ���������>� ��F��� 17T71�=9�<:?> � 9BTD@�=@1<7?> � @;TDD�=@:<:?> � :DT�;@�=::<D?>�

�� 1;T::�=9B<@?> U� 1;T::�=9B<@?> � 19T::�=@�<D?> � 9�T:@�=:C<@?>�

�� CT:;�=�@<;?> U� �:T:;�=9;<;?> � �BT:;�=91<;?> � 1BT:;�=:1<;?>�

6 � ����� ����������"���

������������ ����

=6��������� ������T���� ��

�����������>� ��F��� 1CT�;:�=1:<C?> � 9:T�;:�=99<9?> � 97T�;:�=9C<�?> � :CT�;@�=:@<D?>�

�� 1;T:;�=@;<;?> U� 1;T@@�=@:<:?> � 19T@B�=:;<;?> � 9�T:@�=:C<@?> �

�� CT@1�=�B<C?> U� �:T@;�=9C<:?> � �BT@1�=9D<�?> � 1BT:;�=:1<;?>�

6 � ����� ����������"���

����������� ����������

=6��������� ������T�

����������� ���������>� ��F��� 1CT71�=17<9?> � 9:TD@�=@�<C?> � 97TDD�=@@<9?> � :CT�;@�=:@<D?>�

������u� �<������� ���������<���F�������u� ��F��� ����������

/���� �����������u"��'���������������������������� ����� ��.����� �������������������� �����u�� ������������������� ��� ������=&V;<;:>,�

Page 82: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��BD���

��!��,��6� ��������� �������������������������� �����������6�%������" � ����1;�������:���������3"������� ������"���������

� � 6� � ��������

� � 1;����� :����� �������

�� �CT@:�=9C<D?> � 1;T@:�=@@<@?> � 1CT@@�=B�<@?>�

�� �1T9;�=@;<;?> � �1T9;�=@;<;?> � �BT9;�=:9<9?> �

6 � ����"��4�(�"���

������������ ����

=+���"��� ��"��4 � ��T���� ��

�����������>� ��F��� 17TC:�=9D<C?> � 91TC:�=@1<C?> � @9TC@�=:D<�?>�

�� �CT@9�=97<:?> � 1;T@@�=@:<:?> � 1CT@@�=B�<@?>�

�� �1T17�=@�<@?> � �1T1D�=@1<7?> � �BT9;�=:9<9?> �

6 � ����"��4�(�"���

����������� ����������

=+���"��� ��"��4 � ��T�

����������� ���������>� ��F��� 17TC1�=@;<9?> � 91TC1�=@@<@?> � @9TC@�=:D<�?>�

�� �CT@:�=9C<D?> � 1;T@:�=@@<@?> � 1CT@@�=B�<@?>�

�� �1T9;�=@;<;?> � �1T9;�=@;<;?> � �:T9;�=:;<;?> �

6 � ����� ����������"���

������������ ����=6��������

� ������T���� �����

��������>� ��F��� 17TC:�=9D<C?> � 91TC:�=@1<C?> � @1TC@�=:B<D?>�

�� �CT@9�=97<:?> � 1;T@@�=@:<:?> � 1CT@@�=B�<@?>�

�� �1T17�=@�<@?> � �1T1D�=@1<7?> � �:T9;�=:;<;?> �

6 � ����� ����������"���

����������� ����������

=6��������� ������T�

����������� ���������>� ��F��� 17TC1�=@;<9?> � 91TC1�=@@<@?> � @1TC@�=:B<D?>�

������u� �<������� ���������<���F�������u� ��F��� ����������

/���� �����������u"��'���������������������������� ����� ������������������� ��� ������=&V;<;:>,�

Page 83: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��B7���

��!�� /�� 6 � �� ��� "��4�(� �u���� ��� � � �� ��������� � ��� ��������� ������� ������ ���� ����������������� �� "��"����������� ����� ���� ����

� � ��� �;<�;<����;<9��,�

� 6� � ��������

� � � ���6�%��� � � � � &��6�%��� � � �������

� � ��� � ;��� ;<���� ;<9��� ;��� ;<���� ;<9��� ����

�� 1;TB;�=99<9?> �� 91TB;�=:9<9?>� ��TB;�=�D<9?>�U� 1@TB;�=@;<;?> U� �;TB;�=�B<C?>�� :TB;�=D<9?>�� 9:TB;�=:D<9?>�

�� �1T:;�=1@<;?> �� 1;T:;�=@;<;?> � �7T:;�=9D<;?> U� 9T:;�=B<;?>�U� 7T:;�=�D<;?>��� 9T:;�=B<;?>�� 1CT:;�=:@<;?>�

6 � ����

"��4�(�"���

���������

��� ����

=+���"��� ��

"��4 � �T�

��� �����

��������>���F��� 91T��;�=17<�?> � :1T��;�=@C<9?>� 9;T��;�=1C<9?> � 1CT��;�=1@<B?> � �7T��;�=�C<9?> � DT��;�=C<9?>�� B1T��;�=:B<@?>�

�� 1;TB;�=99<9?> �� 91T:7�=:@<1?>� ��TB;�=�D<9?>�U� 1@T:7�=@;<C?> U� �;T:D�=�C<1?>�� :T:D�=D<B?>�� 9:TB;�=:D<9?>�

�� �1T@D�=1:<;?> �� 1;T@7�=@;<D?> � �7T@C�=@;<@?> U� 9T@D�=B<9?>�U� 7T@:�=1;<;?>��� 9T@D�=B<9?>�� 1CT:;�=:@<;?>�

6 � ����

"��4�(�"���

���������

�� ����������

=+���"��� ��

"��4 � �T�

���������

�� �����>���F��� 91T�;D�=17<B?> � :1T�;D�=@D<1?>� 9;T�;C�=1D<;?> � 1CT�;C�=1:<1?> � �7T�;9�=�D<:?> � DT�;B�=C<B?>�� B1T��;�=:B<@?>�

������u� �<������� ���������<���F�������u� ��F��� ����������

/���� �����������u"��'���������������������������� ����� ��.����� �������������������� �����u�� ������������������� ��� ������=&V;<;:>,�

Page 84: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��C;���

��!��5��6 � ����� �����������u�������� ��� ��������� �������������������������� �����������������������"��"���������������� ��������

� � ��� �;<�;<����;<9��,�

� 6� � ��������

� � � ���6�%��� � � � � &��6�%��� � � �������

� � ��� � ;��� ;<���� ;<9��� ;��� ;<���� ;<9��� ����

�� �7TB;�=9�<C?> � 91TB;�=:9<9?>�� ��TB;�=�D<9?>��U� 1�TB;�=9:<;?> �U� �;TB;�=�B<C?>��� @TB;�=B<C?>�� 9@TB;�=:B<C?>�

�� �1T:;�=1@<;?> �� 1;T:;�=@;<;?> � �7T:;�=9D<;?> U� 1T:;�=@<;?>�U� 7T:;�=�D<;?>��� 1T:;�=@<;?>�� 1CT:;�=:@<;?>�

6 � ����

� ����������

"���

���������

��� ����

=6��������

� �����T�

��� �����

��������>�

��F��� 9�T��;�=1D<1?> � :1T��;�=@C<9?>� 9;T��;�=1C<9?> � 19T��;�=1;<7?> � �7T��;�=�C<9?> � BT��;�=:<:?>�� B�T��;�=::<@?>�

�� �7TB;�=9�<C?> �� 91T:7�=:@<1?>�� ��TB;�=�D<9?>��U� 1�T:7�=9:<B?> �U� �;T:D�=�C<1?>��� @T:D�=B<7?>�� 9@TB;�=:B<C?>�

�� �1T@D�=1:<;?> �� 1;T@7�=@;<D?> � �7T@C�=@;<@?> U� 1T@D�=@<1?>�U� 7T@:�=1;<;?>��� 1T@D�=@<1?>�� 1CT:;�=:@<;?>�

6 � ����

� ����������

"���

���������

�� ����������

=0 ��������

�T���������

�� �����>���F��� 9�T�;D�=1D<C?> � :1T�;D�=@D<�?>� 9;T�;C�=1D<;?> � 19T�;C�=1�<:?> � �7T�;9�=�D<:?> � BT�;B�=:<C?>�� B�T��;�=::<@?>�

������u� �<������� ���������<���F�������u� ��F��� ����������

/���� �����������u"��'���������������������������� ����� ��.����� �������������������� �����u�� ������������������� ��� ������=&V;<;:>,�

Page 85: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��C����

5�/�������

/��� ���u�� ���� ���� �3"��������� �� ������� ���� 2u�� �u ���� ��� �������� ��

��u� ��.�� ����������������#u���� ������ � ��������*����&<�*���1&�.����6�%������

�u����� ����������� ��� �u ���� � �u� � � � ��� "��4�(,� ���� �� ���<� ����� *����&�

������u��������� ����������������� �������������" ����u� �<�������������������

�������� ��� " � �"��"������ "��������,� ����� ����������� � ���� ��� ��������

� � 4����� � �����u� ����� ����� ���������<� ����u �����u�� ����u� ���������� ����

�u"�������T���u���<� ���" � ���� ���� � �� ��u� �� =�(���� .� ���,<� �7D7>,� ��� �

��������� � 5 ��� 2u�� ��� ����"��������� ������ ��� ������ "��"������ �� ������

���� ���u� �<� ���� � � ������u������ ���������� � ��� � � ����"��������,� ������<� u��

����"������3"����������� � ���� ������������������� � �������*���1&�=������ ���;�

���>� ���" � ��� ����*����&� =��� ��� �� :����>���#��� � � � � ����"��4�(<� "��2u��

���"��� ���� ���������� ��������� � � 4�����u� ������u�� u���������� ����"�����

�3"������,� &��� ����� ��� ��� ���u���� �� ��������� �� �������� ��� �� ��� � �� � � �� ���

"��4�(���������u� ��.�� �����������u �������u� �*���1&�=�(����.����,<��7D7>,�&���

������ ��<�������������� �"������������ ��u �������u� �������������<�2u����������

u� �� .���"���� ���� �� ��� �������� ����� � ����u� ��2u��������������=�(����.�

���,<��7D7>,�

%����� �2u�����6�%������"���������������� ���������� ��� �����*���1&�.�2u�<�"���

��� �" ���<����������������� "��� ��������������������� �"�<��u�������������" � �

�� ��( �� ��� " ��� ���u�����,� %��5�� " ��� ��������� ��� #u�� �� ��� ����"�� ���

�2u���� ��� ���� ����"��������,� & � � ����� "��"����� ��� ��������� � � �� � � � � ���

"���� ���� ������������������<�"���������������3"���������1�������" � ����:�.�1;�

��������3"������,�0���������� ������������� ������ � � � ����"��4�(�������1;�

����.�:����<�� ����������� ����u� ������������������ ���������,������� ���<�

� �� � � �� ��� "��4�(� ��� � ����u� �� �3"u��� �� �u� ���� 1;����� �� ����"���������

�u��������� # ��2u��� ��������������������<���� ���������� �����u������������u����

��� :� ���� ��� �2u���� ��,� 8� � "������ �3"��� ���� " � � ��� � ��������� � ��� �' �

� � � ��� ��� ����"�� ��� �3"������� ���� ������ =0��� ��<� �77�N� ����G��� .� )u<�

�771>,�0u�� �����<� ������������3"����������<�������� ������ ����� ���������<�

2u�� ������� u� ������� ��� ���� �u"�������T���u���� 2u�� � ����u� �<� � � ���u����

Page 86: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��C1���

���� ����"��������� �� ��������� ��� � � ���u� � ���' � ��� ������ � ����u�� 2u�� ��� � ��

��u� �N�"������ � � (�<����5 �' ���������� �������� ���� ����"�������2u���� ���

������ ����� � �( ����������� ������������� ����=����G���.�)u<��771>,�

��� 5��5�� ��� 2u�� � � �����"�� ���� ���� ������������� �u� ���� :� ���� ��� ����� � �

��������� �� �������� ��� �� ���� ���"����� � ���� ���������� =��� ����� ���� ���� ���

����� ��� ��� ���� 1;� ���� ��� �����"�� ���>� "���' � ������� � 2u�� � � ���� �

�3"�������"�����������"������ ����������3����2u���������� � �����"���� .����,�

u ��������� �u �������������������� �������������������������"��"���������������

� � ��� �=�3"���������9><����������2u�������������������� � ��� �;<�������u���

���� ��� � �����"��4�(����� �� �<�� ���u �����u���������� ���� � 2u��� �������� ��

� ���� "��� � �� ��u� �� ����� "��� ���� � ���������� �� ���������� ��� ������,� ���

�������������� ���<����u������"��"�������������� �u�������������" � ���� ���#u����

���������������<�.�"���� �2u��� � ���������� � ��� � ����������������� �������

������������������u����������� <��������u���u ��������������������"��"����������,�

��� u��� ��� u� � �������� ���� � .��� ��� � � ��� � =;<9� �>� ���u��� ��� � � �� ���

"��4�(� ���� # �,� ����� 5��5�� ��������� ���� ���u����� "������� =/���<� �7D@N�

����� ����.����,<��77:N��(����.��5�����<��7DB>�2u���u�������2u�����u������ �� ��

�������� ����������� � ��� ������u�������������������u��������� ������������

������������������� ���<�����u ��"���' ���� ����� ��"����� �����"���� ���� ��

������� � ,�

/��� ���u�� ���� ��������� ��� ����� ���" � ���� ������������� .� "��"�����������

���������� ���� ���� ���u�� ���� ��������� ��� ������ "��� ����G��� .� )u� =�771>,� ������

u����������� ����2u����������������������������������2u�����"��"�����������" � �

� � ����"������ ���� ��� ��������� ������� �u ���� ��� ��"�� � ��� ������� ���

�� ��������� � ������ ,� ��� ����� ���<��u(uG�� .� ���,�=�7D7>� ��"��� ���� �� �� � � ��

��� "��4�(� �u���� ��� �� �������� ��������� ������� 2u�� 5 ' �� ����� ������ ����

��"�� ����"��"������������<B���" � ��� ��������� ������� ,�

���� �����u���� ��� ����� � "'�u��<� ��� ������� ���� � � �� ��� "��4�(� ����� ����

�u���� ��� �� �������� ��������� ��"�� ���� ���� �������� ��� " ���� �����"���� ��

�� ��������� ������� ,���������������� ��������� ������� ����"��������������� ��u�

Page 87: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��C9���

���"����� �N� ����� ������� �u�� �������� " � � ������u �� ��� ���u���� . � 2u�� ������

� .����� ���� # �� " � � ���� "��� ��� ��� ������������ ��� � �"�,� ��� �2u���� ���

�u� ���� :� ���� ��� ������������� ���u��� ��� � � �� ��� "��4�(� ����� ���� � 2u��� ��

������ ���u�������� ��� ��������� ����������������������,�����������������"���

�����������������2u�����"��"�����������" � ���������������� ��������� ������� <�.�

���u������u� � # ��������� �������� � ��� ��u����������� ,�

��������������� ��������� ������� ��������u� ���� ����� # �����u� �������������

������"������� � �� ���� � ������� ���u � �,� �����u���u�������"�������G���.�)u�

=�771><� ���������� ��� �� ��������� � ������ � ������� � � ������� �� ��� ���� �� ����

"����� �� ��"��� ��( ��� �u� ���� � � �� ��������� � ������ �� <� � � �u �� "u���� ����

�� ��( � � "��� u�� �������� "��"� � ������ ������ ��,� ����� "����' � � � �

�� ��������� ������� �� �������������������������"��#�� ��2u��� �������� ����

������� ������������������ ���=*�����@��77B>,�

Page 88: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��C@���

=�����-��������� �������� ����� �

���� ���� �����

=���� ���������

%�����2u�<�����7C9<��u����"��� ������� �������������"�������������� �" ��������

u�� ������ ������ ��� =P���u�� .� +�M���<� �7C9><� ��� 5 �� �� ��( ��� "���������

�������� ����2u��5 ������u����� ���#�� ��������������������"������ ����" � �

��������������������������=� 5�����.�* ��' <��771N�0��� ��<��77�>,���� 4���

���������<� ���� � .����� ���u��(��� 5 �� ����� ���������� � ��#�� �� � � � � � ���

������� � ��� ���� ��������� ��������� ��� ������ �u���� ��� � � ����"������ ����

=) �����.����,<��77:N�Q ����.����,<�1;;;N�/����.�/��Gu����<��779N�� 5��u�( ��5�

.����,<��77@N�� ���"�.����,<��779N�& � �(�.����,<��77CN������������.�0���� �<�

�777N��u(uG��.����,<��779N�� #� �.����,<��77BN�Pu��5�.����,<��77@>,�& � ���������

5 �� ��"�� ��� ���� ����2u��A� ������� �� ���� ������ �� ��� �u������ ��� ������ .�

��� ����� �������� ���������"������ ������"��� ������� � "� ���� ��������"�����

���������=*�����.����,<��779N�� ���"�.����,<��77:N�� #� <��77C>,�

/��� ����������� "�������������� ��� ����"������ ���� ��"�� ���� ���� ���������

���������������� ������������5 ����� ����������� # ��.�������� # ����������� ��

��� � � ���" � ���� ��� � � �������� ���� ���� ��� ������ ������� �����,� ��"�� ����

������������������������� ��������<�/�u�.����,�=�77B>�.�� 5��u�( ��5�.����,�

=�77@>� ��u������� ��#����� ���u�� ���� �u ���� ��"�� ���� � � �������� ���� 2u��

�u ���� ��"�� ���� ��� ������ ������� �����<������� �� 2u��%���.^�� .� ���,� =�77B>�

������� ���� u�� ������� �������� ��� � � �������� ���� ����� ��� ��� ������� "���� ���

����� � � �������� "���� ��������� ������,� u ���� ��� �� �u ���� � �� � � �� ���

������� � �u���� ��� � � �� ��������� � ��� ��������� �������� ���� �� ������ ���<� ���

�� �( ���� ���u�� ���� ����� ���������� =��� � .� ���,<� �77BN�Pu��5� .� ���,<� �77@>,�

& � ����u��� ����� ������������ <����������� ���� ����� �������������� ���,�

Page 89: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��C:���

��� �#������ ���� � "'�u��� 5 � ����� �� �u �� ������ �� ��� ����"������ ���� ��� �u�

� " ��� �� " � � � ������� � � �� ���� �� ��� ���� ��������� ������� ��������� ���

������ �u���� ��� ���� ����"������ ���,� ��� �� �u� � � ������� � ��� ������ ��� ����

����������u���������������"������ ��������"������������������� �������������.�

��� �������� ���,� /u���� ��� �� �u� � � ������� � ������ �� � �u���� ��� � �

����"������ �������� ������ ��������� �,�

=�,���������

��� "������ u�� ��� �� ��� �;�C;� �������<� ��� ���� �u ���� ���� ���� �u���� ��� � �

�������( ����C:DC� =C@<B?>�.�1�91���� ������ �� �( ������� ��� ���� ���� ���������

=1D<�?>,���������3"���������������"���u����� ������CD@�� ���������<�.�9@D����

�u���������u�������������3"��������������������u�� � �� ��� �,�

=�,��� �0�$(� ��� $�"���� ��"(� ��"(� $�" ���$���� ���$��"��� �" � 1 ,

*�����"����!��&����"&�(����� !���"��!�&�"���!(�"�����"&�(��

��� ��"�� ���� 7;� ��������� " � � ���" � �� � � ������� � ��� ������ �u���� ����

������ �������������������������,�%�������<�@:��u����������� �����������"���������

*����&�.�@:��������"���������*���1&,���� � ��(�� �� " ��� ���������� �������������

�' �B�.��' �C�" � ����������� ���,�

0�� ��� ������� ���� ��������� �� �������� ��� �� ��� � �� � � �� ��� ��� ������� ��� ����

����������u�������������� ����������� ����"����������=6 � ��>,�6 �"�������

������� ������������� �������� �����������������' �B�.��' �C<����������"��������

������������������������� 2u���������������2u���������������=6 � �1>,�

Page 90: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��CB���

=�,�,� �0�$(� �� �� &�(��0�$�$�%" $�" ��� ���#$��"�� -�:��� 1 �� �" ��

��!��&����"&�(����� !���"��!�&�"���!(�"�����"&�(��

��� ��"�� ���� 1@@� ��������� " � � ���" � �� � � ������� � ��� ������ �u���� ��� � �

�������� ���<� �1;� ��� ���� �u ���� �u������������� ���� ���� � � ���u����&�F*��� .� �1@�

�������,�

/�������������������� ������������ �� �( ����� � �������� �������.�������������

�� ��2u�� 2u�������������� ��������&�F*���� ������������u"������' �B������������

��� �' � C,� 6 ����� �u����� �������� ��� �� � �� ��������� �� �u ���� ��� ���" �� � �

�u� � ��� ���� ���u�� ���� ��� ���� ��������� ���%' � B�F�%' � C,�0�� ��� ����� ����

��������� ���������� ��� ��� �������� ��� � �������� ��������������������������� �

�������� ��������������������' �B�.��' �C������������ � ������������������� ����

=6 � �9>,�

6 ��������������� ������������� ���������� ��� ��������"����������������������

����������� 2u���������������2u��������������� �� ��������� ����=6 � �@>,�

=�,�/��0�$(�����&�(��0�$�$�%"$�"������#$��"����@�� 1��:����"

����!��&����"&�(����� !���"��!�&�"���!(�"�����"&�(��

��� ��"�� ���� 9C;� ��������� " � � ���" � �� � � ������� � ��� ������ �u���� ��� � �

�������� ���<��19���������u �����u������������� �����������<��19����������.��1@�

������F*��,�

0��5u����������� ���������� ��� ������ ��� � �������� �������������� �����u������,�

��� ���"����� � � �� � � �� ��� �������<� ����� .� ��F*��� �� �( ���� � ������ ����

�����2u���������� ��� �u �����������������������%' �B<�%' �C�.�%' �B�F�%' �C,�

�u����� � ����� �������� ��� �� � �� ��������� �� ������ ���� ��������� ��� %' � B�

�������� ������������.���F*��,������� ���<����5u����������� ������ ��� � �����

��� ������� .� �������� ������ ����������������������������� ������������%' �B�.�

%' �C������������ � ��� � �������=6 � �:>,�

Page 91: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��CC���

&��� ��� � " ���� � �� ���u������� ����� .� ��F*��� �u������� u�� ������� "�������� ���

���������������� ��� ������� .���2u��� ����u��������=6 � �B>,�

=�,�5� �0�$(� �� ��0���"(�� $�"$�"(��$��"�� �� ��$����� �" ��

&�(��0�$�$�%"��!��� !���"��!�&�"���!(�"�����"&�(��

����� �u� � �������� � ������������ ������������� �u������� � ��������� �������� � �

���u���� ��F*��<� � � �u �� �u�� ����� � � ���� ����������� �������� ������� ���

� � ��� ,�

�����"�� ����@D;���������<��1;���� �����u ���� �u������������� ����������F*��<�

�1;�������F*�������� �������� � ��� �;<���<��1;�������F*�������� �������

� � ��� �;<9���.��1;�������F*�������� �������� � ��� �;<:��,�

0��5u����������� ���������� ��� ������ ��� � �������� �������������� �����u������,�

/ � � � � ��� �������� ������ 2u�� ��� ���� ��� ��� � � ��� � ;<�� � ;<9� �� ���u���

��������� <� ������� 2u�� ��� �������� �u ���� � � �������� ���� ��� � � ��� � �u��

� .��� =;<:��>,�0��5u����������� ����� � �� � � �������� �������.������������ � �

���" � ���� ������ ���� ������������%' �B�.�%' �C����������� � � � �� � �������

=6 � �C>,�

u ���� ��� � ��(� ��� ������� ��� �������<� ��� ������ u�� ������� �����������

�3"������� ��� "��� ��� ��u"�� ��� ��� 2u�� ��� ����� � � ��� � ;<���� � � � ���u����

��F*���=6 � �D>,�

=�,�=��0�$(����$�"���� ��"(���"(�1����&�(��0�$�$�%"�"����!��&���

�#�������(��"�0���"$����� !���"��!�&�"���!(�"�����"&�(��

��� ��"�� ���� B;;� ��������� ��������� ��� �����<� �;;� ��� ���� �u ���� �u�����

������ ���� ���� ��� "��������� *����&<� �;;� ���� ��� "��������� ���6�%��<� �;;� �u�����

�������� ��������� ����u��������<��;;�������F*�������� �������� � ��� �;<���<�

�;;�������F*�������� �������� � ��� �;<9���.��;;��u�����u� �����������������

Page 92: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��CD���

������,� ������<� �;;� ��������� ��������� ��� ����� �u����� �� ���������� �����

�������,�

6 ���� � �� � � �� ��� "��4�(<� ����� � �� � � �� ��� � ���������� �u�����

�������� ��� ������ � .����� " � � ���� ��������� ��������� ��� ����� 2u�� " � � ����

��������� ��� ������ �u �2u��� � �u�� � ��� �� � ������,� / �� � � �� ��� "��4�(� .�

� ���������� "��� ������ �� ��������� ��� ���� ��������� ��������� ��� ������

�� ���������� ��� ������� �u����� ��u ���� � � �� ��� ���� ��������� �������� ���,�

��� ������<� � � � � � ��� � ���������� "��� ������ �� ��������� ��� ���� ���������

������ �����������"������������6�%����u���������� ��� ������������2u��� ��������

����������������������������� ��������������������.� 2u�������������� ��������� ��

���u���������F*���F�� � ��� �;<����.���F*���F�� � ��� �;<9���=6 � �7>,�

0��5u����������� ���������� ��� �������� ������u����� � ����� ����.� � �"��"������

�����3��������� ���� �� � �������,�)u����������� ���������� ��� �����������"���� ��

� ��������� ��� ���� ��������� ��������� ��� ����� ���� ���"����� � ���� ��������� ���

������=6 � ��;>,�

)u��u� ���������� ��������� ��� ������� .������" ��������������������������u"��

��� ����"��� �� 2u�� ���������� ��������� ��������� ��� ������ =6 � � ��>,� 0�� ���

������� �����u�����������������,�

Page 93: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��C7���

��!�����6 � �������� �������.������������������������������������������������������� ������������"����������*����&�.�*���1&�

� 6� � �������� %' �B� %' �C� %' �B�F�%' �C�

*����&� 7T1B�=9@<B?> � :T�7�=1B<9?> � �@T@:�=9�<�?> �%�� �������

*���1&� �;T1B�=9D<:?> � CT�7�=9B<D?> � �CT@:�=9C<D?> �

*����&� DT1B�=9;<D?> � :T�7�=1B<9?> � �9T@:�=1D<7?> ���������

*���1&� :T1B�=�7<1?> � @T�7�=1�<�?> � 7T@:�=1;<;?> �

/��� � ������ ������ �3"��� ���� ����� ��� ��������� ������ ���� ��������� 2u�� ����3" �������� ��� � �������T��� �� ��� ���� ��������� ����"������ ���� .� ���� ��������� 2u��

�������� ���T��� ����������������������"������ ���,�� �����������u"��'���������������������������� ����u�� ������������������ ��� ������=&V;<;:>,�

Page 94: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��D;���

��!��,��0������������������������������������������������������������ ������������"����������*����&�.�*���1&�

6� � �������� 0� 0�����������������

*����&� �@� �;D<7Z1C<;� �

*���1&� �C� �;1<7Z�@<�� �

/���� �������������3"��� ������������"�����������������������������<������������'�������� �,�/���

� �����������u"��'���������������������������������� ��� ������=&V;<;:>,�

Page 95: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��D����

��!��/��6 � �������� �������.��������������������������������������������������������� ��������&�F*���.�����

� 6� � �������� %' �B� %' �C� %' �B�F�%' �C�

&�F*��� �@T@@�=9�<D?> � 1BTCB�=9@<1?> � @;T�1;�=99<9?> �%�� �������

���� 1DT@B�=B;<D?>� @1TCD�=:9<D?>� C;T�1@�=:B<@?>�

&�F*��� BT@@�=�9<B?> � �;TCB�=�9<�?> � �BT�1;�=�9<9?> ���������

���� �DT@B�=97<�?>� 1BTCD�=99<9?>� @@T�1@�=9:<@?>�

/��� � ������ ������ �3"��� ���� ����� ��� ��������� ������ ���� ��������� 2u�� ����3" �������� ��� � �������T��� �� ��� ���� ��������� ����"������ ���� .� ���� ��������� 2u��

�������� ���T��� ����������������������"������ ���,�/���� �����������u"��'���������������������������� ����u�� ������������������ ��� ������=&V;<;:>,�

Page 96: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��D1���

��!��5��0�������������������������������������������������������������� ��������� �����u�������&�F*���.�����

6� � �������� 0� 0�����������������

&�F*��� @;� 7D<@Z9;<@� �

���� C;� ��7<CZ@1<:��

/���� �������������3"��� ������������"�����������������������������<������������'�������� �,�/���

� �����������u"��'���������������������������������� ��� ������=&V;<;:>,�

Page 97: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��D9���

��!��=��6 � �������� �������.��������������������������������������������������������� �����������<����������F*���

� 6� � �������� %' �B� %' �C� %' �B�F�%' �C�

���� 1@T@D�=:;<;?> � @CTC:�=B1<B?> � C�T�19�=:C<C?> �

����� 91T@7�=B:<9?> � :;TC@�=BC<:?> � D1T�19�=BB<B?> �%�� �������

��F*��� 99T@7�=BC<9?> � @DTC:�=B@<;?> � D�T�1@�=B:<9?> �

���� �@T@D�=17<�?> � 9;TC:�=@;<;?> � @@T�19�=9:<C?> �

����� 1:T@7�=:�<;?>� @BTC@�=B1<�?>� C�T�19�=:C<C?>���������

��F*��� 9�T@7�=B9<1?>� @9TC:�=:C<9?>� C@T�1@�=:7<B?>�

/��� � ������ ������ �3"��� ���� ����� ��� ��������� ������ ���� ��������� 2u�� ����3" �������� ��� � �������T��� �� ��� ���� ��������� ����"������ ���� .� ���� ��������� 2u��

�������� ���T��� ����������������������"������ ���,�/���� �����������u"��'���������������������������� ����u�� ������������������ ��� ������=&V;<;:>,�

Page 98: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��D@���

��!��A��0�������������������������������������������������������������� �����������<����������F*���

6� � �������� 0� 0�����������������

���� @@� ��:<�Z9:<C� �

����� C�� �9�<DZ@D<;��

��F*��� C@� �99<9Z@;<���

/���� �������������3"��� ������������"�����������������������������<������������'�������� �,�/����

� �����������u"��'���������������������������������� ��� ������=&V;<;:>,�

Page 99: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��D:���

��!�� ;�� 6 � � ��� ��� ������� .� �������� ��� ��������� ������� ��������� ��� ������ �������� ���� ���� � � ���u���� ��F*��� ����� ��� ����

������������������� ����������� � ��� �

������� �������� � ��� � %' �B� %' �C� %' �BFC�

;��� @1TB1�=BC<C?> � @:T:D�=CC<:?> � DCT�1;�=C1<:?> �

;<���� @1TB@�=B:<B?> � @@T:B�=CD<B?> � DBT�1;�=C�<B?> �

;<9��� @BTB1�=C@<1?> � 9BT:D�=B1<�?> � D1T�1;�=BD<9?> �

%�� �������

;<:��� 9BTB1�=:D<�?> � 9CT:D�=B9<C?> � C9T�1;�=B;<D?> �

;��� 17TB1�=@B<C?> �� 1BT:D�=@@<D?> � ::T�1;�=@:<D?> �

;<���� @1TB@�=B:<B?>� 9DT:B�=BC<D?>� D;T�1;�=BB<B?>�

;<9��� @;TB1�=B@<:?> � 91T:D�=::<�?> � C1T�1;�=B;<;?>�

��������

;<:��� 1DTB1�=@:<�?>�� 1BT:D�=@@<D?> � :@T�1;�=@:<;?> �

/��� � ������ ������ �3"��� ���� ����� ��� ��������� ������ ���� ��������� 2u�� ����3" �������� ��� � �������T��� �� ��� ���� ��������� ����"������ ���� .� ���� ��������� 2u��

�������� ���T��� ����������������������"������ ���,�� ����������������������u"��'������������������ �����u�� ������������������� ��� ������=&V;<;:>,�

Page 100: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��DB���

��!��B��0�������������������������������������������������������������� ����������F*�������� �������������������������� ����������

� � ��� �

������� �������� � ��� � 0� 0�����������������

;��� DC� 71<CZ9B<;� �

;<���� DB� �1C<@Z@7<@��

;<9��� D1� ���<@Z@D<@� �

;<:��� C9� 77<BZ97<@� �

/���� �������������3"��� ������������"�����������������������������<������������'�������� �,�/����

� �����������u"��'���������������������������������� ��� ������=&V;<;:>,�

Page 101: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��DC���

��!��C��6� ��������� ���������������������� ��������������������������"������ ����

� 6� � ��������

� ��������������� ���������������� *����&� ���6�%��� �����

��F*���F�

� � ��� �;<����

��F*���F�

� � ��� �;<9���

6 � ����"��4�(�"���

������������ ����

=+���"��� ��"��4 � ��T�

��� �������������>�

C:T�;;�=C:<;?> � :�T�;;�=:�<;?>� �CT�;;�=�C<;?>�� 1DT�;;�=1D<;?>��� 91T�;;�=91<;?>�� @;T�;;�=@;<;?>�� @�T�;;�=@�<;?>��

6 � ����"��4�(�"���

����������� ����������

=+���"��� ��"��4 � ��T�

����������� ���������>�

C:T�;;�=C:<;?> � :�T�;;�=:�<;?>� �CTC:�=11<C?>�� 1DTC7�=9:<@?>�� 91TD;�=@;<;?>� @;TD��=@7<@?>� @�TD1�=:;<;?>�

6 � ����� ����������

"��������������� ����

=6��������� ������T�

��� �������������>�

C:T�;;�=C:<;?> � @7T�;;�=@7<;?>� �BT�;;�=�B<;?>�� 1@T�;;�=1@<;?>�� 1DT�;;�=1D<;?>��� @;T�;;�=@;<;?>�� 9DT�;;�=9D<;?>��

6 � ����� ����������

"������������

�� ����������=6��������

� ������T����������

�� ���������>�

C:T�;;�=C:<;?> � @7T�;;�=@7<;?>� �BTC:�=1�<9?>�� 1@TC7�=9;<@?>��� 1DTD;�=9:<;?>�� @;TD��=@7<@?>� 9DTD1�=@B<9?>��

� ����������������������u"��'������������������ ����� ������������������� ��� ������=&V;<;:>,�

Page 102: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��DD���

��!�� �<�� /�����u�� ��� � � ���� ���<� "���� �� � ��������� .� "��"������ ��� ��3��� ���"u��� ��� � � �� ��������� � ��� ��������� �������

�������������������� ��������������������������"������ ���<�.�������������������������������� ��������������������

6� � �������� /�����u������ ����� ����=�' �>� &���� ��� ���������=G�>� &��"�����������3���=�A5>�

��������������� 1D@<;Z�<:� � 9:<:Z9<;� � @;A9:� �

���������������� 1D9<�Z�<9� � 97<�Z1<;�� 1:A1@� �

*����&� 1D@<�Z1<�� � @;<�Z1<C�� BA�;� �

���6�%��� 1D;<7Z1<;� � 97<:Z9<��� �9A��� �

����� 1D:<�Z9<9� � 97<�Z1<;�� �@A�@� �

��F*���F�� � ��� �;<���� 1D1<DZ�<@� � @�<1Z9<D�� 11A�D� �

��F*���F�� � ��� �;<9��� 1D9<;Z�<@� � 97<�Z1<1�� 1�A�C� �

/���� �������������3"��� �������������"�������������������u������ ����� ����.�"���� ��� ��������<������������'����� �� �,�/���� ����������������������u"��'��������������

���� ����u�� ������������������ ��� ������=&V;<;:>,�

Page 103: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��D7���

��!������& ����������������u�������� ��� ��������� ������������������������������������������������

!���������������������� & ���������������

!���������������� 9TC:�=@<;?> �

!����������������� :CT�7:�=17<1?>�

/���� �������������3"��� ���������������������������" ����� ��������T��� �����" ����,�/����

� ����������������������u"��'������������������������ ��� ������=&V;<;:>,�

Page 104: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��7;���

=�/�������

�������3"������������������������ ������������� ����� � ��� � ������������ � ���

������ ��� ��� ��� ������� "�������� ��� �������� ��� 2u������ ��������� 2u��

������������� �� ������ ������� ������ �u ���� ��� ������� ��� " ���� ���

�����"�� �����u�� u���� �������� �1,�

u ���� ��� ��������� ���� � � ���u���� ���� � ���� � ���������� ��������� ��� ������

=�3"��������� 1><� ��� ��u������� ��#����� ���u�� ���� 2u�� �u ���� ��� ��"��� � �

���u��������������� ����&�F*��<�� �������� ��� �u �������� ��� � �������� �������

.� ��� �������� ����� ��� ��� ������� "�������� ��� �������,� ����� 5��5�� "u���� ����

�3"��� ���"���� �� .���"���� ���� ����������������������� ����� � ����u� �����

������������� ���" � ����������"��"����������� .������������� =& � �(�.�� "������<�

�77B>,� ������<� � � � � ��� � .� ��� ������� C;� =����"����������� ��� "���� ���>�

����������u���������"��������� ������ �� �� ����u�������<������� ��2u��&�F*������

"����� ����"����������� ��� "���� ���� ��� �u� ����u� ���,� / � � � ��� � � u� � � �

���5��� � �������� �����<� ���� ��� �u �� ���u��� � �"�� ���� ����� ���� �������

5����� ���� ���u� �� .� u���� � � � �������� ���� ��� � ��������u� �� ��� ���

����"� �� <� � ����� ���� ��� �� � ���� � � � �������� ���� ���� ���u� �� =+ ��<� �7DC><�

������ ��2u�����u�������������C;������u� �� ��������u� �� ����� �� ��������� ����.�

"��������� ����� �������5������3�� ���u� ���u� ����� ��������� ����.����"����������

��������� ������� =� 5.� .� ���,<� �7D@N� Q � �� .� ���,<� �77;>,� ������ ���u�� ����

������� ��5 �� (����"������������� �����u ���� � � ��������� (�� ����� ���������

� � ��� <���3���� ������ ��� <�.�� ��������u� ��� ���������"���������������<��������

C;� .� "��������"��������� � ��#�� �� � � ������� � ��� ������ ��� ���� � ����������

���"u������� ��������� ����=!5��5��.����,<��77CN�� 5 �.����,<��77BN�� ����.����,<�

�77@>,�

����3"���������9�������2u�����5u����������� ������ ��� � �������� �������������

� ����������u������������������ ����u����( � �<����<������.���F*��,������� ���<�

� �� � ������������.�����������"������������������������������������������� ����

���� � � ���u�������� =��" �������2u���� ��>� �u�������������2u�� � ���� 2u������

�������� ���� ���� � �� ���u������� ����� .� ��F*��� = � �� ��"�� ���� 1� " ���� ���

Page 105: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��7����

�2u���� ��>,�8� ���������� ������� ����������� ����� ���� � ������������������

" ����.T��� ��������� ������������"����������������" ���� ��������� ��������� ����

���� 2u�� ���� � � ����� ���� ��� ���� ����"����������,� ������ ���u�� ���� ����

����� ���� � 2u������ ��"��� ���� ��� �� #��� "������<� ������ ��� ������ 2u�� u��

���������������������������" ��������2u���� ��� ��������� ������������� �����

� � ���u���� ��� �������� ���� �u�� ���" 4 ��� "��� u�� ����������� ��� � � ������� �

������ �� � �u���� ��� � � �������� ���� ����"��������� =% ������� .� ���,<� �77@N�

QuM . � �.����,<��771N�� 5��u�( ��5�.����,<��77:N�!5��5��.����,<��77C>,�

��� ��� �3"��������� @� ��� ��� ������� ���� ��������� �� ��� � �� � � �� ��� ��� �������

������ ���� �� � �������� ��� ���� 2u�� ��� � ��� � � �������� ���� ��� � � ��� �

������ � � � � � ���u���� ��F*��,� ���� �� ���<� ��� u��� ��� � � ���u���� ��F*���

����� ��� ���� � � ��� � ;<�� .� ;<9��������� � � ������������� .�"������������

������� ��� �������� � .����� 2u�� � �� ���u������� ��F*��� ���� � � ��� � .� ����

� � ��� �;<:��,�/ �� � ��� ����������u���������"��������� ������ �������� �2u��

����� ����"��������� ��� "���� ��� "����� � � � ���5��� � ���� ���� �����<� ���� ���

�u �� ���u��� � � "�� ���� �� ��� ���� ���� ��� 5����� ���� ���u� �� .� "����� � u� �

�������� ���� ��� � �� � ��������u� �� ���� ����"� �� <� � ����� ���� � � �������� ����

���� ���u� ��=+ ��<��7DC>,����������u�� ����������� ������5 �� (����"������������

u� ���#�� � ��� � � ������� � ��� ������ ��� ���� � ���������� �u���� ��� � ��������� ����

���� ��������� (�� ����� ���������� �� � ��� <���3���� �.���� ��� �=� ����.����,<�

�77@>,������� ���<��������u������ # ���������� ����������� � ��� �=;<��.�;<9�

�>� ������ u�� ������� "�������<� "��� �u ���� u� � �������� ���� ���� �� � =;<:� �>�

���u��������������� � ������������,����������������������u�����"�������=/���<�

�7D@N���P���� ���.����,<��77�N������ ����.����,<��77:N��(����.��5�����<��7DB>�

2u�� �u������� 2u�� ��� u��� ��� �������� ������� �� �� ��� � � ��� � ����� u�� u�����

�������� ������ �������� �������� ����� ���� ��������� ������ ���� .�

��������� ���<������u ����"���' ������"���� ���� ��������u���,�

��� ����u��� ��� ���� �u ���� �3"���������� � ��( ���� 5 �� � 2u'� ��� ������� ����

��������� �� �������� ��� �� �� ���" � �� � �� � � �� ��� ������� � ��� ���� ���������

������������%' �B�.�%' �C,�&������� ���<�"������������u���2u�<����� ��"��� �����

�' �����u�����<�����u������������ ����"���u����� ���������������������������<�

Page 106: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��71���

��� ���"��� ������� ��� ���� � ���������� ��� "������� � ��� � � ���u������� ���

�������� ���� �u�� ����� �,� �u�5��� ���u����� 5 �� ��"��� ��� ��������� �� ��� � �

����"������ ���� ��� � ���������� ��������� ��� �����������' � ��� �u������ =) ����� .�

���,<� �77:N� ) ����� .� ���,<� �77CN� � 5��u�( ��5� .� ���,<� �77:N� � ���"� .� ���,<�

�77:N�!5��5��.����,<��77CN�� 5 �.��u(uG���77CN�� #� �.����,<��77B>,����u������

����������������� ������u������"��������������������"��'��� ������� �� ��" � � � �

"���u��������������,���������<�� ��� � ����'���� ����������� ��.���2u'��� ��

���� ������ ���"u��� ���� �u������ ������ ��������� � �� "��� ��� ������ � ��� �u������

��"�� ���=Q ����.����,<��77DN�� ���"�.����,<��77:N�!5��5��.����,<��77CN�&u�5�.�

���,<��77DN�S � �5�� �.����,<��777><�.������"���' ��3"��� ���u�5 ����������� �����

�������u�� �������������������u�����"������,�

�������3"���������:� �����������2u�� � �� � � �����"��4�(� .�� ������������� ����

��������� ��������� ��� ����� �u����� � .����� 2u�� � �� ��� 2u������ ��������� ���

�����<� ����u ������� ��� ���� ������� � ���������u���(������������������=*�����.�

���,<��779N�� ���"�.����,<��77:>,�

������" � ���������'������� � ��������2u�������u�� ���� �����������������������

������������������2u��� ���� 2u������2u���u������� �����������������������������

2u�� �u������������� ���� ������u������� .������ � ������3���<������ ����2u�� ����

��������� ��������� ��� ������ ���� " ����u� ������� ��������� �� ������ �������

�����,� ������ ���u�� ���� ���������� ���� �� #��� "������� �� ��( ���� � ����� ����

��������� ������� "���� ���� ������ "���������� ��� ������ ������� =� ���"� .� ���,<�

�77:N�6 �5�G M �.����,<��779>,�

0��5u����������� �������������� � �����������������������u������ ����� ����������

� � "��"������ ��� ��3��,� ��� "���� �� � ���� ��� ���� ��������� ��������� � " ����� ���

��������� ��������� ��� ������ �u��� .��� 2u�������� ������������� �" �������� ����

�������������������������,���� �����������������"��������u#�� �u�������������

�������� ����� ���� ������� ��� " ����� ���������,� ����� 5��5�� 5 � ����� ��"��� ���

"���� ������=� ����.�� �����77CN�P �G���.����,<��77B>,�/ ���������������������

��u�u ��������� ����� �" ���������������������������������������"���' �����u��

� ���������� ����" � ����u�������������"�����������������"���� � ��������� ���,�

Page 107: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��79���

0u����������u�� ��������������" ��� �����������u����"��� �������u�������� �"��

=� �� P �������G�%�� /��uM� .� ���,<� �77D>� ������ ��� ���" � ���� ���� ���������

����������u������� � ��� ��������� ������������������������������������������

2u������ ��������� "��� ������� ���� ������� �,� ��� ���5�� ���u���� ��� ��u�������

����� �5��� �" �������������������������� ���������.���� � ������� � ����� ����

�u��� .��<���� ����� ���� ���� �������� ���������"�����������u���,������� ����

�������u������������������2u������������������������ �" ���������������������

�������������������u���������"�� ����2u�� 2u����������������������,�

��� u�� ���u���� "������ �� ��( ��� "��� �u������ ��u"�� =��� � ���� .� ���,<� �77:>� ���

�������� 2u�� ���� � ���������� ��� %' � B� ������ ���� ���� ��������� ����� ����

� .����� � � �� ��� ������� � ��� ������ "���� ��������� ������� 2u�� 2u������

��������� ��� ��� %' � C,� ��� ��� "�������� ���u���<� � � �� �� ��� ���� ��������� ��� ���

�������� ��� � � �������� ���� ��� �u�� ������� ��� � � ������� � ��� �����<� �u���������

2u�� � ��������� ����"���' ��������� ���u � �2u����������� ������� ������" � � � �

����"������ ��������������������������������������������,�

Page 108: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��7@���

A� ����-��������� �� ������ � ��� �

���� ���� ����

A���� ���������

�3������ �u�������� ��"������ ��� ������ �� .� "���������� ��� ����"������ ���� ���

��������� ��� ��� ���� ��� �������� ���"��u ���,� / � �������� ���� 5 � �����

����� � � "�����" ������� ����� ��������� ������� =��M ���� .� ���,<� �77CN�

0��� ��<� �77�><� ������ �� 2u�� � � ����"������ ���� ��� ���� ��������� ��� ��� ��

��"������ � ���� ����� ������ =) . �5�� .� ���,<� �7D7N� Q �5�M ( G�� .� ���,<� �77�><�

� ����=)��5��.����,<��77@N��G�������.����,<��77�N��� ���.����,<��7D:>�.�� � �

=� ���� .� ���,<� �7DDN� ������� .� �����<� �7CBN� 5����� u� .� ���,<� �7DBN� /�� .� ���,<�

�77;>���������� u�� ���,�����7CB<��u����"��� ������"������� ������������u��

�������� � " ����� ��� u�� ������ ������ ��� =P��� ����� .� ���,<� �7CB><� .�

"�������������� ��� �� ��( ���� ���� �������� ������� �����u�� ���� ������ �������

������ ���� ����������� ����"����������� � ���� ����� ��������� = ������ .� ���,<� �7DDN�

(���G�M�G � .� ���,<� �771N� ����.� .� ���,<� �7D@N� 0��� ��<� �7DBN� � Gu�� .� ���,<�

�779N���5��M��.����,<��77�N��5�����<��771N�����5�.����,<��77@N�6������.�*���<�

�7D@N�P ���.���� ��<��7DC><�"��"�����������=��5��M��.����,<��77�N������ ����.�

���,<� �77:N� 6������ .� *���<� �7D@><� %��!� =0��� ��<� �7DBN� ����� ���� .� ���,<�

�77:N�P��� ����<��7CC><��������������= ������.����,<��7DDN�)�.� ��.����,<��7DCN�

���*������.����,<��779N������ ����.����,<��77:N�6������.�*���<��7D@><���� ����

= (���G�M�G � .� ���,<� �77�>� .� ��������� ����� ��� ���� � � ��� � =%�� & (� .� ���,<�

�77@N��5�����<��771>,�����77;<������"�������"������� ������������u���������� �

" ����� ��� u�� ������ �������� ��� =�(���� .� ���,<� �77;>,� ��� 5 �� �������� u�����

���u�� ������"�� �������������=��5��M��.����,<��77�>�����(�� �����"��"�����������

.����������=%��& (�.����,<��77@N��(����.�P������<��77@N��(����.����,<��77;><����������

.�������������� =����.��5�����<��779 N�����.��5�����<��779N�0 �� � �.����,<��77:N�

�(���� .�P������<� �77@>� .� ��������� .� � � ��� � =���� .� �5�����<� �779>,� 8� ���� � ��

����� �� ���u������� ��� �������� ���� ��� ����� � � 5 � ����� ���<� � � �u �� 5 � �����

Page 109: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��7:���

"��� � ������3������������������� � ���=Q � ��.����,<��77;><�����#��=Q � ��.�

���,<��771>�.�� � ��=� 5��u�( ��5�.����,<��779>�"���� u�����5 ������ "��� � � �

���������������,�

����#����������� "'�u���5 �������� �u ��� �� �������� ���������"������ ��������u�

� " ��� ��" � �� �������� ��� ���� ������������������������������������������

�u���� ��� ���� ����"������ ���,� ��� "������ �������� ��� ���" � ���� "���������� ���

������ �������������.��������� �������� �����u��������������<�.��u��������� �u ����

��� ��������� ���� �� ��������� �,� ��� ���" � ���� ���� ����"����������� =��������� .�

������������>� .� ���� �������� ��� �������,� 6 ����� �u����� ���" � � �� ����

���u������������������ ���,�

A�,���������

��� ���u"��� u�� ��� �� ��� �C@D� ��������� ��� 1CD� ��� ����� =B<9�

��������T��� ���><���������u �����91;��u�����u� ��������������3"����������.�

@1D�����u������������� ���������� ��u� # �� ��� �,�

A�,��� �0�$(� ��� ���$���� 1 ��� �(���"���$�� $� � $���*��(�$(���� �" ��

$�"���� ��"(���"(���� !���"���&�"���!(�"�����"&�&�

��� ��"�� ���� 1;;� ��������� " � � ���" � �� ���� ���� �u������ ��� ������ � �

������� ������� �� <��;;���������u �����u����������� �����������"���������*���

9&�.��;;��������"������������9&,������"�� ����1@;����������" � ����" � ��� ��

� � �� ��� "��4�(� .� ��� � ���������<� D;� ��� ���� �u ���� �u����� ������ ���� ���� ���

"��������� *���9&<� D;� ���� ��� "��������� ���9&� .� D;� �u����� �� ���������� ��� �������

������������,�

0�� 5u�� ��������� �� �������� ��� �� ������ ���� �� � ��������*���9&� .� ���9&� ��� � ��

� � �������� �������.������������� ����u� ��.������ ����������������� ��u� ����

Page 110: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��7B���

���� ��� ����,� 6 �"���� 5u�� ��������� �� ��� � � ���" � ���� ��� ��u� �� .�

� ��������������������� � ��� � �������=6 � ��>,�

/��� ��������� ����"������ ���� �� �( ���� � � �� ��� "��4�(� .� � ����������

�������� 2u�� 2u������ �� ���������� ��� ������,� ��� � � ���" � ���� ������ ���� ����

����"����������<� � �� ��u� �� ������ � �� ���� � � ���u���� ���9&� ����� ����

� .������ � �����"��4�(�.�� ����������2u�� 2u��� �������� � ������*���9&<������

�����������u������� ����������� ���������,�

0�� 5u�� ��������� �� ��� � � ���" � ���� ��������u� �� .� � ���������� ������� ���

� � ��� � �������=6 � �1>,�

A�,�,��0�$(��� �� $�"(������*������ �� �$�%"����(���"���$���"��

$�"���� ��"(���"(���� !���"���&�"���!(�"�����"&�&�

8����� �����1;;���������� �u����"�� ���" � ����" � �� � �������� �����u������

��������<�����;;���������u �����������"����������u��������������9�" ����=���9&>�.�

��� �;;� ��� �� " ��� =���9&�>,� &��� ��� � " ���<� 1@;� ��������� �u����� ��"�� ����

" � � ���" � �� � �� � � �� ��� "��4�(� .� � ���������<� ��� D;� ��� ���� �u ���� ���

����"��������� �u�� ��������� ��� 9� " ���� =���9&>� .� D;� ��� �� " ��� =���9&�>N� D;�

����������u������� ��������������������������������,�

0�� 5u�� ��������� �� �������� ��� �� ��� � �� � � �� ��� ��� ������� .� ��� �������� ��

���" � �� � �����������������"������������9�" ����.������" ��,�6 �"����5u��

��������� �� ��� � � ���" � ���� ������ ��u� �� .� � ���������� ������� ��� � � �

�� � �������=6 � �9>,�

/ �� ��u� �� .� � � �u� � ��� ��u� �� .� � ���������� ����"������ ���� ��� ����

�� � ������� ����� ���� � � �� ��� "��4�(� .� � ���������� �������� 2u�� 2u��� ��

�� ���������� ��� ������,� ������ �� 2u�� ��� ���� � ���������� ��� ������� ����

��������� ���������� ��� ������ �� � ����"��4�(�"����������� �� � ����� ����������

�������"����� ���������,�

Page 111: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��7C���

0�� ��� ������� ���� ��������� �� ��� � � ���" � ���� ������ ��u� �� .� � ����������

����������� � ��� � �������=6 � �@>,�

A�,�/� �0�$(� �� ��� ���#$��"�� �� &�(��0�$�$�%" �" �� ��!��&��� ��

� !���"���&�"���!(�"�����"&�&�

8����� �����1;;���������� �u����"�� ���" � ����" � �� � �������� ����� ����

�u������ ��� �����<� �;;� ��� ���� �u ���� �u����� �������� ���� ��"�� ���� � � ���u����

&�F*���.��;;��������,������"�� ����1@;������������������ ����" � ����" � ��

� ��� � �����"��4�(�.����� ���������<�D;���������u �����u������������� ��������� �

���u����&�F*��� .�D;����� � � ���u�������N�D;���������� �u����� �� �������������

�������������������,�

0�� 5u�� ��������� �� �������� ��� �� ��� � �� � � �� ��� ��� ������� .� �������� ��� � ��

��u� �� .� ���� � ���������� ������ ���� �� � �������� ��� �������� ���� &�F*��� .� ���,�

6 �"���� ��� ������� ���� ��������� �� �� ���" � ����u� �� .� � ���������� �������

���� � ��� � �������=6 � �:>,�

/ � ���u���� ���� �u������ ������� � ��� � � ����"������ ���� ��� � ����u� �� 2u�� � �

���u���� &�F*��<� �� �( ���� � ������ ��� "��4�(� .� � ���������� ���" � ���� ����

2u������ �� �( ���� "��� � ����u� �� �� ������� �� ��� ������,� ����� ������� ��� �u��

����� ��� ��� ���� � ���������� ��� ��� � � �u� � �����u� �� .� � ���������<� ��� ����

�u ���� &�F*��� .� ���� �u����� ��u ������� ���������� .� �� �( ����� ��������������

2u���������������"�������� ������������ ��������������������=6 � �B>,�

Page 112: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��7D���

��!�����6 � �������� �������.���������������������������������� ������������"����������*���9&�.����9&,�

� � 6� � ��������

� � *���9&� ���9&�

�� 9;T:;�=B;<;?> � @;T:;�=D;<;?> �

�� @;T:;�=D;<;?> � 9BT:;�=C1<;?> �%�� �������

��F��� C;T�;;�=C;<;?> � CBT�;;�=CB<;?> �

�� 1;T:;�=@;<;?> � 1BT:;�=:1<;?> �

�� 1DT:;�=:B<;?> � 1BT:;�=:1<;?> ���������

��F��� @DT�;;�=@D<;?> � :1T�;;�=:1<;?> �

������u� �<������� ���������<���F�������u� ��F��� ����������

/���� �������������3"��� ����������������������������������������2u������3" ������������ �������T��� ��������������������

����"������ ����.��������������2u���������� ���T��� ����������������������"������ ���,�� �����������u"��'������������������

���� ����� ���� ������������������ ��� ������=&V;<;:>,�

Page 113: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��77���

��!��,��6 � �����"��4�(�.�� ����������������������������<����������������� ������������"����������*���9&�.����9&,�

� � 6� � ��������

� � *�������� ������������� ��������

�� ��T@;�=1C<:?> � 11T@;�=::<;?>� 9DT@;�=7:<;?>��

�� �DT@;�=@:<;?> � �CT@;�=@1<:?> � 99T@;�=D1<:?>�

6 � ����"��4�(�"���

������������ ����

=+���"��� ��"��4 � ��T���� ��

�����������>� ��F��� 17TD;�=9B<9?> � 97TD;�=@D<D?> � C�TD;�=DD<D?>�

�� ��T9C�=17<C?> � 11T9C�=:7<@?>� 9DT@;�=7:<;?>��

�� �DT9:�=:�<@?> � �CT97�=@9<:?> � 99T@;�=D1<:?>�

6 � ����"��4�(�"���

����������� ����������

=+���"��� ��"��4 � ��T�

����������� ���������>� ��F��� 17TC1�=@;<1?> � 97TCB�=:�<9?> � C�TD;�=DD<D?>�

�� �;T@;�=1:<;?> � 1�T@;�=:1<:?>� 9:T@;�=DC<:?>��

�� �CT@;�=@1<:?> � �:T@;�=9C<:?> � 9;T@;�=C:<;?>�

6 � ����� ����������"���

������������ ����=6��������

� ������T���� �������������>���F��� 1CTD;�=99<D?> � 9BTD;�=@:<;?> � B:TD;�=D�<9?>�

�� �;T9C�=1C<;?> � 1�T9C�=:B<C?>� 9:T@;�=DC<:?>��

�� �CT9:�=@D<:?> � �:T97�=9D<@?> � 9;T@;�=C:<;?>�

6 � ����� ����������"���

����������� ����������

=6��������� ������T�

����������� ���������>� ��F��� 1CTC1�=9C<:?> � 9BTCB�=@C<9?> � B:TD;�=D�<9?>�

������u� �<������� ���������<���F�������u� ��F��� ����������

� �����������u"��'��������������������� ����� ���� ������������������ ��� ������=&V;<;:>,�

Page 114: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���;;���

��!��/��6 � �������� �������.���������������������������������� ����������������������u�������� �����������������"���������������9�

" ����

� � 6� � ��������

� � ���9&� ���9&��

�� 9CT:;�=C@<;?> � 17T:;�=:D<;?> �

�� 9@T:;�=BD<;?> � 9DT:;�=CB<;?> �%�� �������

��F��� C�T�;;�=C�<;?> � BCT�;;�=BC<;?> �

�� 1�T:;�=@1<;?> � �:T:;�=9;<;?> �

�� 1BT:;�=:1<;?> � 1:T:;�=:;<;?> ���������

��F��� @CT�;;�=@C<;?> � @;T�;;�=@;<;?> �

������u� �<������� ���������<���F�������u� ��F��� ����������

/���� �������������3"��� ����������������������������������������2u������3" ������������ �������T��� ����������������������"������ ����

.��������������2u���������� ���T��� ����������������������"������ ���,�� �����������u"��'��������������������� ����� ���� ����������

�������� ��� ������=&V;<;:>,�

Page 115: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���;����

��!��5��6 � �����"��4�(�.�� ����������������������������������� ����������������������u�������� �����������������"��������������" ���

�����9�" ����

� � 6� � ��������

� � ���9&� ���9&�� ��������

�� 1CTB;�=@:<;?> � 1BTB;�=@9<9?> � @;TB;�=BB<C?>�

�� �DT@;�=@:<;?> � �DT@;�=@:<;?> � 9;T@;�=C:<;?>�

6 � ����"��4�(�"���

������������ ����

=+���"��� ��"��4 � ��T���� ��

�����������>� ��F��� @:T�;;�=@:<;?> � @@T�;;�=@@<;?> � C;T�;;�=C;<;?>�

�� 1CT:D�=@B<B?> � 1BT:C�=@:<B?> � @;TB;�=BB<C?>�

�� �DT9B�=:;<;?> � �DT9B�=:;<;?> � 9;T@;�=C:<;?>�

6 � ����"��4�(�"���

����������� ����������

=+���"��� ��"��4 � ��T�

����������� ���������>� ��F��� @:T7@�=@C<7?> � @@T79�=@C<9?> � C;T�;;�=C;<;?>�

�� 1BTB;�=@9<9?> � 1:TB;�=@�<C?> � 97TB;�=B:<;?>�

�� �DT@;�=@:<;?> � �CT@;�=@1<:?> � 1:T@;�=B1<:?> �

6 � ����� ����������"���

������������ ����=6��������

� ������T���� �����

��������>� ��F��� @@T�;;�=@@<;?> � @1T�;;�=@1<;?> � B@T�;;�=B@<;?>�

�� 1BT:D�=@@<D?> � 1:T:C�=@9<7?> � 97TB;�=B:<;?>�

�� �DT9B�=:;<;?> � �CT9B�=@C<1?> � 1:T@;�=B1<:?> �

6 � ����� ����������"���

����������� ����������

=6��������� ������T�

����������� ���������>� ��F��� @@T7@�=@B<D?> � @1T79�=@:<1?> � B@T�;;�=B@<;?>�

������u� �<������� ���������<���F�������u� ��F��� ����������

� �����������u"��'��������������������� ����� ���� ������������������ ��� ������=&V;<;:>,�

Page 116: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���;1���

��!��=��� � �������� �������.������������������������������������ ��������� �����u�������&�F*���������

� � 6� � ��������

� � &�F*��� ����

�� 1DT:;�=:B<;?> � 1@T:;�=@D<;?> �

�� 9;T:;�=B;<;?> � 9;T:;�=B;<;?> �%�� �������

��F��� :DT�;;�=:D<;?> � :@T�;;�=:@<;?> �

�� �DT:;�=9B<;?> � �BT:;�=91<;?> �

�� �BT:;�=91<;?> � �@T:;�=1D<;?> ���������

��F��� 9@T�;;�=9@<;?> � 9;T�;;�=9;<;?> �

������u� �<������� ���������<���F�������u� ��F��� ����������

/���� �������������3"��� ����������������������������������������2u������3" ������������ �������T��� ����������������������"������ ����

.��������������2u���������� ���T��� ����������������������"������ ���,�� �����������u"��'��������������������� ����� ���� ����������

�������� ��� ������=&V;<;:>,�

Page 117: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���;9���

��!��A��6 � �����"��4�(�.�� ������������������������������������� ��������� �����u�������&�F*���������

� � 6� � ��������

� � &�F*��� ���� ��������

�� ��T@;�=1C<:?> � 11T@;�=::<;?>� 1BT@;�=B:<;?>�

�� ��T@;�=1C<:?> � ��T@;�=1C<:?> � 99T@;�=D1<:?>�

6 � ����"��4�(�"���

������������ ����

=+���"��� ��"��4 � ��T���� ��

�����������>� ��F��� 11TD;�=1C<:?> � 99TD;�=@�<9?> � :7TD;�=C9<D?>�

�� ��T97�=1D<1?> � 11T97�=:B<@?>� 1BT@;�=B:<;?>�

�� ��T9C�=17<C?> � ��T9D�=17<;?> � 99T@;�=D1<:?>�

6 � ����"��4�(�"���

����������� ����������

=+���"��� ��"��4 � ��T�

����������� ���������>� ��F��� 11TCB�=17<;?> � 99TCC�=@1<7?> � :7TD;�=C9<D?>�

�� ��T@;�=1C<:?> � 11T@;�=::<;?>� 1@T@;�=B;<;?>�

�� �;T@;�=1:<;?> � �;T@;�=1:<;?> � 1DT@;�=C;<;?>�

6 � ����� ����������"���

������������ ����=6��������

� ������T���� �����

��������>� ��F��� 1�TD;�=1B<9?> � 91TD;�=@;<;?> � :1TD;�=B:<;?>�

�� ��T97�=1D<1?> � 11T97�=:B<@?>� 1@T@;�=B;<;?>�

�� �;T9C�=1C<;?> � �;T9D�=1B<9?> � 1DT@;�=C;<;?>�

6 � ����� ����������"���

����������� ����������

=6��������� ������T�

����������� ���������>� ��F��� 1�TCB�=1C<B?> � 91TCC�=@�<B?> � :1TD;�=B:<;?>�

������u� �<������� ���������<���F�������u� ��F��� ����������

� �����������u"��'��������������������� ����� ���� ������������������ ��� ������=&V;<;:>,�

Page 118: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���;@���

A�/�������

) �� ����"��������5 ������������� ����.��������� ����������� ��3���� ���u� ��.�

� ���������� ������<� .� ��� 5 �� �������� ��������� ���� ���� �u���� ��� � �

�� ��������� <�"�����3������"�������"���������� � �����"��4�(�.�� �������������

"���� � �� ��� �� ��������� � � �� �� ��� � � =)�.� �� .����,<� �7DCN� � Gu�� .� ���,<�

�779>,� ��� ����� ���u���<� u� ������� �u������ ��� ������"������������� ������� �����

������� " � � �� �u �� � � ������� � ������ �� ,� ��� ������������� ������ ���� ����

���������2u��������������" � �� �����"������ ���������u� �,�/ ��� � �����"��4�(�

.� ��� � ���������� ������� �� ������ 5 �� (���,� ����� ������� ��� ��� �������� ���

� ���������,�

%�� �u����� � �u������� ���u�� ���<� ��� ������������� ������ ���� �u"������ �� ���������

����� ����"��������� " � � ��� ������ ������� ��� ��������� ��� ���# ,� �(���� .� ���,�

=�7D7>� .� ����� ���� .� ���,� =�77:>� ������� ���� u� � � .��� "���� ���� �� ����

����������������" � ������� � �����"��"����������<����������.�%��!,����� u�<�������

������� ����u� ���#�� ����� �������� �"������������� �����������������������

�� � ��������������������,�0u����������u�� ���� "�. ��������5 �� (���� ���������,�

+��u�� ���� ����� ���� �u����� ����� ���� ��� ��������� ������� =����G��� .� )u<�

�771>� .� ���� ��������� ��������� ��� ������ =/���� .� /��Gu����<� �779>,� /���

���u�� ���������3"������������u���� ��u����#������"��� ����������� ����u� ��

������ � �� ���� ������������� ���" � � � ���� � ������ � ������ � �� ���� ��������<�

"�������������u������ ������� ����� ���������,�/ ����������� ���������� � ��������

" � � � ����u� ��"���' �� �����3"��� � ��"��� � ����������� ����� � �"���� ���� ��

���� � � ���� ���� ����"����������� ��� ���� ��� ����� ���"� ���� ��� ��� �������

������ ����=�(����.����,<��7D7>,�

0����������� ������������� ������ ���� �u ���������������������� ��� � �����"��4�(�

.�� ���������������� ��������������� ������������ ������������� �����" ���.����9�

" ���<� ��� �u �� ����� �2u�� � � ������������ ����"���������u� ��������9�" ��������

� � ��� �������u� ��� " ���'��� �" � �� �������� ������� �� ,�

����������"��������" �����������������������"���������.������"��������u�������

�������� ��� �u.� � �� ��<� "���� ��� ���� � ���������� � �� ���u������� ������������

Page 119: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���;:���

� � ��� ����� � ��"������� �,�+��u�� ��������� �����u����������������"�� ������

������ " ���� ��� �������� ���� ����"��������� ���� � � ��� � = ������ .� ���,<� �7DDN�

)�.� �� .� ���,<� �7DCN� ��� *������ .� ���,<� �779N� �5�����<� �771N� 6������ .� *���<�

�7D@>,�/����������5 �� (�����u�������"��� ������������������������=����G���

.�)u<��771>,�

���� �������� ����������� ������������"����������u� ���<�� ��� � ������ ����������

����� � ����������3"������������.�1��u���������� ���� �� ��� � ������ ����������

��������������"��� � ��������������u�����= (���G�M�G �.����,<��771N�)�.� ��.�

���,<� �7DCN� ��� *������ .� ���,<� �779N� � Gu�� .� ���,<� �779N� 6������ .� *���<� �7D@>,�

� � ���� ��� ���� ���u�� ���� "������ ���<� ��� ������� ��� ������ ������� ����

������������� ��� ��� �������� ��� " � � � �� ��u� �,� ������<� � � �������� ����

����"��������������" ������ ���� � ����������������"����� ��������� ��#�,�

0�� 5u�� ��������� �� ������ � �� ���u������� ��� �������� ���� ��� � �� �� �u ������� ���

�����,� ���� �� ���<� �u�������� ��������� �� �u ���� ��� ���" � ���� � �� � � �� ���

"��4�(�.�� ���������,� /u������� � � �� ��������� <� � ����u� ���������� � ������ � �

���u���� ���� ����� ���� ��#��� ���"��� ������� 2u�� 2u��� �� �������� � �� ����

&�F*��<� �� �( ���� � ������ 2u�� ��� "��3�� �� � 2u������ ��������� ���� � ��

��u� �� 2u��5 ' �� ����� �� ������� ����� ������,�&��� ��� �" ���<� ����� ����������

�������� ���� "��� �u �2u��� � ��� ���� ���� �������� ����� ���� � � �� ��� "��4�(� .�

� ���������� ���� # �� 2u�� 2u������ �� ���������� ��� ������,� !�u���� ��� ������

�u ������� � ��(�������#u������������� �������������=��u� ��F�� ���������>,�

&������� ���<�� ��������� ���� �� �(�u�� ��� � �����"��4�(�.�� ���������,�

��� ���u����� "������� =%�� & (� .� ���,<� �77@><� ��� ��u������� # �� � � �� ���

��� �����������������u ������������������u������3"u������ �� ����u����&�F*��� �

���"�� �u� � ������� =�1� .� �C?>,��(���� .� ���,� =�77;>� ��u�������u� � � � ����

� ���������� ��� ��������� ��� �D<:?� �u���� ��� � � �3"������� ��� ���� ��������� �

���5 � ���u���� ������ @� .� �1K <� .� �(���� .� P������� =�77@>� ��"��� ���� � � �� ���

� ���������� ��� :1?� u� ���� � � ���� � ���������' ,� 0u������� ���u�� ����

����� ����u� �� � ����� ��������������������������1B<:?���"�� �������������

������,�

Page 120: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���;B���

&���� �����<� � � ���u���� ���� 5 � ����� u� � � ����� ������ ��� �������� ���� ���

��������� ��� � ��� =Q � �� .� ���,<� �77;><� ����#�� =Q � �� .� ���,<� �771>� .� � � ��

=� 5��u�( ��5�.����,<��779><�"���������������"�������� #��������2u��5 ������

��"�� � ��������������������# ,�/���"���������5 �� (�����u���� �����u�� ����

��"� ����� �������� ���� �u ������������������������� ��� � ����� ���������,�

������ �� 2u�� ���� ������� ��� �������� ��������� ���� u����� ���u�� ���� #��

���������������� �"�<������� � �� ���� � ����������u��� �� ������.�����u���������

��������' ���������� ���<� � ����u��������������� ����� # ���������2u������������

" ��� � # � ���"�� �u� �"������ � � ��������� ����=@� ��1K >,�&��� ��� � ���<������

����������u���������������� "��� �������� �������������� ������������ � �,�

&��� ��� � " ���<� ����� ���� u� � ������ "��"������ ��� � � ��� ���� � � � ���

� ���������T� � ����"��4�(���������������������� ��������������������2u��������

��������"������ ���,������"���' ����������� ��5��5�����2u�� � �����"������ ����

��"��� �u� ����� �����������������������������������#����� ���� �<������� ��

2u��� ����������������u�������� ��������������� ������������� ������<� �����u ����

"���' �����������������u�������������� ��������u���������u���,�

��� ������<� �u������� 5 �� (���� �u���� �� 2u�� ��� u��� ���� ������������� �����

����"���������.�� ��������������������u��" �������� � ��� �������"�������������

���u ��� " � � � � ����"������ ���� ��� ��������� ������,� / � �������� ���� ���

��������� ������� �� �(� u����� ���u�� ���� ��� ��������� ��� � � �� ���

� ���������<�.����� �u��u�� ����������������� ���� ��"� ���" � � �������������

������,�

Page 121: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���;C���

;� ����-��������� �� ������ � ��� �

���� ���� �����

;���� ���������

/ �����"������ ������� �����������������������������������������"��# �2u�� � �

��� ���� ��������� ��� ����� =� ���"� .� ���,<� �77:>,� ��� 5 � �u������� 2u�� � � ������

�� ���� �� �u���� ���� ������ ������� ��� ���� ��������� ��������� ��� ������ ����

���"����� � ���� ��������� ��������� ��� ����� ����� � ��� ��������� �� ��������� �<�

��������� �� .� ��2u'��� �� ������ ���� ��u"��� =*����� .� ���,<� �779N�� ���"� .�

���,<� �77:>,� 0�� ��� ���<� ��� 5 �� "���u����� � ����� �������� ������ ��� � �

����"������ ��������������������������������������=%���.���.����,<��777N�Q ����

.����,<�1;;;N������������.�0��� ��<��777>,�

� ����� ���u����� 5 �� ��"��� ��� ��� � ��������� ��� ��������� �u���� ��� � �

�� ��������� � ��� ������� ��� ��������� ��������� ��� ������ =���M�� .� + �(��M��<�

�77DN� ���.����,<��77CN� 5����.����,<��7DBN� ������.����,<��77�N� ��(���.����,<�

�7DCN�)����.����,<��77BN�/��� �.����,<��777N�65��"����.����,<��77:><�"��������

� ������� ���� ��������� �����"������ ����������������������������� ��� ������

��� ���,��������� #�������� �������u� ����������� ������� ���������������� ��

���������� ��� �������� ���<� .<� ��� ������ ���� � ���<� �u����� �� ���������� 1� �����

��������� "��� ����"��� � =% ���� � .� ���,<� 1;;;� .� 1;;@N� � ��� .� ���,<� �77BN�

& " ��"�u���� .� ���,<� 1;;1N� &� G� .� ���,<� �777N� ����� ���� .� ���,<� �77B>,� /���

��"������ ���� ���"����� � � �� � � �� ��� ������� � �u���� ��� � � �� ��������� � ���

������������������������������������������������"������ ����������� ���,�

����#����������� "'�u���5 ���������" � ��� �� �������� ���������"������ �������

�u� � " ��� ��" � �� ������� � ��� ���� ����� ������������� ���������������� ���

������.�����"������ ���,������ �u�� �������� ���������������������������u�������

� � ����"������ ���� ���� "���������� ��� ������ ������� ������ .� ��� �������� ���,�

Page 122: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���;D���

��� ������� ��� �� �u� � � ������� � ������ �� � �u���� ��� � � ����"������ ����

���� ������ ��������� �,�

;�,���������

��� "������ u�� ��� �� ��� 97C;� �������<� ��� ���� �u ���� ���� ���� �u���� ��� � �

�������( ����9�1@� =CD<C?>�.��;;7���� ������ �� �( ������� ��� ���� ���� ���������

=91<9?>,���������3"���������������"���u����� �����C�;�� ���������<�.�177����

�u���������u�������������3"��������������������u�� � �� ��� �,�

;�,��� �0�$(� ��� $�"���� ��"(� ��"(� $�" ���$���� 1 �(���"���$�� ��!��

� !���"���&�"���!(�"�����"&�(��

�����"�� �����;;����������" � ����" � ������ �����u������ ��������� � �� � � ��

��� ��� ������� ������ ���� .� ��� �������� .� ��� ������� ��� �������,� %�� �����<� :;�

�u����������� �����������"���������*���9&�.�:;��������"������������9&,�

0�� 5u�� ��������� �� �������� ��� �� ��� � �� � � �� ��� ��� ������� ��� ���� ���������

��"�� ���� ���� ����"����������,� ���� �� ���<� � � � � � ��� �������� .� ���

"������������������������������ �u��������� ����������� �� � ����������9&�2u��

������*���9&�=6 � ��>,�

;�,�,� �0�$(� �� �� &�(��0�$�$�%" $�" ��� ���#$��"�� -�:��� 1 �� �" ��

��!��&����"&�(����� !���"���&�"���!(�"�����"&�(��

�����"�� ����7;����������" � ����" � ������ �����u���������������� ��� � �����

��� ������������� ����.������������.���������������������,�%�������<�@:��u�����

�������� ��������� ����u��������������� ����&�F*���.�@:������ ����u�������,�

Page 123: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���;7���

0��5u����������� ����� � �� � � �������� ������������� ���������� � �����u�������

����"�������� ��u� � �,������� ���<�����������u� �� .���� � ������������.�

�������"�������������������2u������� � �������&�F*���=6 � �1>,�

;�,�/� �0�$(� �� �� &�(��0�$�$�%" $�" ��� ���#$��"�� �� 1 ��:��� �" ��

��!��&����"&�(����� !���"���&�"���!(�"�����"&�(��

�����"�� ������;����������" � ����" � ������ �����u������ ��������� � �� � � ��

��� ��� ������� ������ ���� .� ��� �������� .� ��� ������� ��� �������,� %�� �����<� ::�

�u������������� ��������� ����u��������������� ��������.�::������ ����u������F*��,�

/��� ��������� �������� ���� ���� ��F*��� �u������� � � �� ��� ��� ������� .� ��������

�������� ��� ������ � .����� .� u�� � .��� ������� "�������� ��� �������� 2u�� ����

� ������������������ ������������=6 � �9>,�

;�,�5� �0�$(� �� ��0���"(�� $�"$�"(��$��"�� �� ��$����� �" ��

&�(��0�$�$�%"��!��� !���"���&�"���!(�"�����"&�(��

�����"�� ����1;;���������<�:;���������u �����u������������� ����������F*��<�:;�

���� ��F*��� ����� ��� ���� � � ��� � ;<�� �<� :;� ���� ��F*��� ����� ��� ����

� � ��� �;<9���.�:;�������F*�������� �������� � ��� �;<:��,�

/ � ���������� � ��� �;<����������u� ��������� � �u� �� .������������ ����� �

����"������ ���<� ��� ���� � �� ��������� �� ���� ���� ��u"��� ��F*��� .� ��F*���

����� ��� ���� � � ��� �;<9������ �u����� �������� ��� �,� / � ��������� � � ��� �

;<:�� ������ u�� ������� ������<� ������������� ��������� �� �������� ��� �� ���� ���

��u"����F*�������� �������� � ��� �;<����=6 � �@>,�

Page 124: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

����;���

;�,�=��0�$(����$�"���� ��"(���"(�1����&�(��0�$�$�%"�"����!��&���

�#�������(��"�0���"$����� !���"���&�"���!(�"�����"&�(��

����� �u�� �������� � �u�������� ��� ��������� �����D;����������������������

�����.�1�;���������������������������,�/������������������������������u�����

���� �������� ����u������� ��� A�B;��u����������� �����������"������������9&<�

B;��u������������� ��������� ����u������F*�������� � ������ � ��� �;<����.�B;�

�u����� �� ���������� ��� ������� ����� �������,� /��� ��������� ��������� ��� ������

�u����� ���� �������� ����u������� ��� A�C;��u����������� �����������"���������

���9&<�C;��u������������� ��������� ����u������F*�������� � ������ � ��� �;<��

��.�C;� �u����� �� ���������� ��� ������� ������������,���� ������� ���� � �� � � �����

"��4�(� .� � ���������<� � � ������u�� ��� � � ���� ���<� ��� "���� �� � ���� ��� ����

���������.�� �"��"�����������3��,�

/ �� � � �� ��� "��4�(� .� � ���������� ��� ���� ��������� ��������� ��� �����

�� ���������� ��� ������� �u����� �������� ��� ������ ���� �� �� 2u�� � � ��� ������

2u������ ��������� ���������� � � � ����"������ ���� .� 2u�� ���� ���������

��������� ��� ������ �� ���������� ��� ������,� ������<� ������ ���� �������� ���

����"������ ���� ������� ���� � � �� ��� "��4�(� .� � ���������� ����� ���� ������ ��,�

���� ���� ��������� ��������� ��� ������ ������ ���� ���� ��� "��������� ��F9&�

����� ����u� � � � ����� ����������������2u�� ���������������������� ��������

������ �����������������"���������=6 � �:>,�

0�� 5u�� ��������� �� �������� ��� �� ��� � � ������u�� ��� � � ���� ���� .� ��� � �

"��"������ ��� ��3��� ������ �� � �������,� ���� �� ���<� ���� ���������

�3��"���� ������� �� ����� 2u�� ���u�� ���� � " ����� ��� � � �� ��������� � ���

��������� ��������� ��� �����<� ����� ���� u�� "���� "�������� �� � ����

�������� ��� ���������� ����2u�� 2u������������ ����"��������������������� ���

�����=6 � �B>,�

)u����������� ���������� ��� ������ ���������� ����� ���������� ���������.��u�����

"���� � �������������������������������������������������=6 � �C>,�

Page 125: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

��������

��!������������������������������������ �������������*���9&�.����9&������� ��� � �������� �������.������������.����������������������

�������������������������������������

� 6� � ��������

� *���9&� ���9&�

%�� ������� 1CT:;�=:@<;?> � 1:T:;�=:;<;?> �

�������� �;T:;�=1;<;?> � 1;T:;�=@;<;?>�

0����������������� ��D<:Z�7<:� � �9:<@Z1;<C��

/���� �������������3"��� ����������������������������������������2u������3" ������������ �������T��� ��

��������������������"������ ����.��������������2u���������� ���T��� ����������������������"������ ���<�

.���������"�����������������������������<������������'����� �� �,�/���� �����������u"��'�����������������

����������� ���� ������������������ ��� ������=&V;<;:>,�

Page 126: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

����1���

��!��,��6 � �������� �������.������������.���������������������������������������������������������������� ��������&�F*���.�����

� 6� � ��������

� &�F*��� ����

%�� ������� 19T@:�=:�<�?> � 17T@:�=B@<@?> �

�������� �9T@:�=1D<7?> � 19T@:�=:�<�?>�

0����������������� ��9<:Z11<;� � �99<DZ9B<D��

/���� �������������3"��� ����������������������������������������2u������3" ������������ �������T��� ��

��������������������"������ ����.��������������2u���������� ���T��� ����������������������"������ ���<�

.���������"�����������������������������<������������'����� �� �,�/���� ����������������������u"��'�������

����������� ���� ������������������ ��� ������=&V;<;:>,�

Page 127: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

����9���

��!��/��6 � �������� �������.������������.���������������������������������������������������������������� ������������.���F*���

� 6� � ��������

� ���� ��F*���

%�� ������� 9BT::�=B:<@?> � @DT::�=DC<9?>�

�������� 9;T::�=:@<:?> � @1T::�=CB<@?>�

0����������������� ��9<�Z�@<�� � �9:<CZ9@<:��

/���� �������������3"��� ����������������������������������������2u������3" ������������ �������T��� ��

��������������������"������ ����.��������������2u���������� ���T��� ����������������������"������ ���<�

.���������"�����������������������������<������������'����� �� �,�/���� ����������������������u"��'�������

����������� ���� ������������������ ��� ������=&V;<;:>,�

Page 128: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

����@���

��!��5��6 � �������� �������.������������.���������������������������������������������������������������� ����������F*�������� ���

����������������������� ����������� � ��� �

������� �������

� � ��� �;��� ;<���� ;<9��� ;<:���

%�� ������� @�T:;�=D1<;?> � @BT:;�=71<;?> � @1T:;�=D@<;?> � 9:T:;�=C;<;?>�

�������� 9:T:;�=C;<;?> � 9CT:;�=C@<;?> � 9BT:;�=C1<;?> � 1BT:;�=:1<;?>�

0����������������� �9;<9Z9;<9� � �9�<1Z91<@� � �9�<7Z9�<:� � �9;<@Z17<7� �

/��� � ������ ������ �3"��� ���� ����� ��� ��������� ������ ���� ��������� 2u�� ����3" �������� ��� � �������T��� �� ��� ���� ��������� ����"������ ���� .� ���� ��������� 2u��

�������� ���T��� ����������������������"������ ���<�.���������"�����������������������������<������������'����� �� �,�/���� ����������������������u"��'�����������������

� ���� ������������������ ��� ������=&V;<;:>,�

Page 129: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

����:���

��!�� =�� 6 � �� ��� "��4�(� .� � ���������� �u���� ��� � � �� ��������� � ��� ��������� ������� ��������� ��� ����� �� ��� �����<� �������� .�

����"������ ����

!���������������� � -������� � � � � -�������� � �

6� � �������� ������� ���9&� ��F*���F�� ��;<�� ������� ���9&� ��F*���F�� ��;<��

6 � ����"��4�(�"���

������������ ����

=+���"��� ��"��4 � ��T�

��� �������������>�

@9TB;�=C�<C?> � 1BTB;�=@9<9?>�� 19TB;�=9D<9?>�� 9:TC;�=:;<;?>� 1;TC;�=1D<B?>�� 1DTC;�=@;<;?>��

6 � ����"��4�(�"���

����������� ����������

=+���"��� ��"��4 � ��T�

����������� ���������>�

@9TB;�=C�<C?> � 1BT:B�=@B<@?>�� 19T:B�=@�<�?>�� 9:TC;�=:;<;?>� 1;TB:�=9;<D?>�� 1DTBB�=@1<@?>��

6 � ����� ����������

"��������������� ����

=6��������� ������T�

��� �������������>�

@9TB;�=C�<C?> � 1@TB;�=@;<;?>� 1�TB;�=9:<;?>�� 1CTC;�=9D<B?>� �:TC;�=1�<@?>�� 1;TC;�=1D<B?>��

6 � ����� ����������

"������������

�� ����������=6��������

� ������T����������

�� ���������>�

@9TB;�=C�<C?> � 1@T:B�=@1<7?>� 1�T:B�=9C<:?>�� 1CTC;�=9D<B?>�� �:TB:�=19<�?>�� 1;TBB�=9;<9?>��

/���� ����������������������u"��'������������������ ����u�� ������������������ ��� ������=&V;<;:>,�

Page 130: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

����B���

��!��A��/�����u������ ����� ����.�"���� ��� ���������.�"��"�����������3����u�������� ��� ��������� ��������������������������������

���������������<�� ���������������������"������ ����

6� � �������� !���������������������� /�����u������ ����� ����

=�' �>�

&���� ��� ����=G�>� &��"�����������3���=�A5>�

�������� -������� �:9<CZ1<1� � 9<1Z;<B� � 19A1;� �

���9&� -������� �:@<1Z1<:� � 9<�Z;<B� � �1A�1� �

��F*���F�� ��;<���� -������� �:1<9Z1<:� � 9<9Z;<B� � �;A��� �

�������� -�������� �::<7Z1<9� � :<:Z;<:�� �1A�:� �

���9&� -�������� �:1<:Z1<:� � @<7Z;<@�� CAD� �

��F*���F�� ��;<���� -�������� �:9<@Z1<1� � :<@Z;<:�� �;A�;� �

/���� �������������3"��� �������������"�������������������u������ ����� ����.�"���� ��� ��������<������������'����� �� �,�/���� ����������������������u"��'��������������

���� ����u�� ������������������ ��� ������=&V;<;:>,�

Page 131: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

����C���

��!��;��6 � ������ ���������� ���������.��u�����"���� � ���������������u�������� ��� ��������� ���������������������������������������

���������

!���������������������� 0 ���������� ��������� �u�����"���� � ��

!���������������� @TDD�=@<B?> � �TDD�=�<�?> �

!����������������� ��TB1�=�C<C?>� BTB1�=7<C?>�

/���� �������������3"��� ���������������������������" ����� ��������T��� ��.��u����������������T��� �,�

/���� ����������������������u"��'������������������ ����u�� ������������������ ��� ������=&V;<;:>,�

Page 132: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

����D���

;�/�������

/��� ����������� "���������� ��� ����"������ ���� �� �u ���� ��� ��������� ���

������� � ������ �� � ��� �����<� � � �� ��� "��4�(� .� � ���������<� �u������� ���

����� �����u�� ���� ��"� ���,��������� ���������� #����� ��( ����"���� ������

=% ���� �.����,<�1;;;N�% ���� �.����,<�1;;@N�� ���.����,<��77BN�/����.����,<�1;;1N�

& " ��"�u���� .� ���,<� 1;;1N� &� G� .� ���,<� �777N� ����� ���� .� ���,<� �77B>� ��� ����

�u ���� ��� �� ����������� 1� �� ���� ��������� ����"������ ���� "��� ����"��� <� ���

������ �����3"��������������"�����������u��������� ���������� ������u��������

"��� ����"��� � ��"���u������� ���� ���������� � �� ������������ ��� u�� ������ �

"���u�����,�

%�� �u����� � ���� ���u�� ���� ��������� ��� ��� �3"��������� �<� ��� ������������� �u��

�u"������ �� ��������� ����� ����"��������� " � � ��� ������ ������� ��� ���������

������������������������,� ����. ��u�� �����u��������� "'�u���� ���������������� �

������ �(���� .� ���,� =�7D7>� .� ����� ���� .� ���,� =�77:><� ������� ���� 2u�� ���

������������� ������� "���� ��� ��� � ����� � � ���u� �� 2u�� ��� "��"����������<� ���

��������� .� ��� %��!,� ������<� ��� �������� u�� ����������� ��� � � ������� � "����

��������� ������� ��� ���� ��������� �� � ���� ���� ������������,� /��� ���u�� ����

��������� ���" �� �� ������ 5 �� (���� "������,� &��� ��� � " ���� ��� ������� ����

���u�� ��������� ������������������������������������������=/����.�/��Gu����<�

�779>�.��������������������������������������= ������.����,<�1;;1>,�

��� ��� �3"��������� 1<� � � ���u���� ���� �u�� �u"������ � � � ���u���� &�F*��<� ���

�u����� ��������u�� �������������" � �� �� � ������������.�����������"��������

��� �������,� ����� 5��5�� "���' � ���� �3"��� ��� "��� � � � .��� "���� ���� �� ����

�������������5 �� ���� ������������ � �����u� ����� ����� ���������<����" � ����������

"��"�����������.������������� =& � �(�.�� "������<��77B>,�������<� � �� � ��� �.����

�������C;�=����"��������������"���� ���>�����������u���������"��������� ������ ��

�� ���<������� �� 2u�� &�F*��� ��� ��������� ��� �u� ���"������� ����"����������� ���

"���� ��������u�����u� ���,�/ �� � ��� �� u� �� ����5��� � �������������<�

"��� ���2u�����u��� � �"�� ���� ��������� �������5��������� ���u� ��.��������� �

� �� � ��������u� �� ��� ��� ����"� �� � ��� 2u�� � ����� � � � �������� ���� ���� ���u� ��

Page 133: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

����7���

=+ ��<� �7DC>,� ��� u��� ��� u� � � ��������u� � � �� ����� ��� ������� C;� � ����� � � �

�������� ����.�"��������� ����� �����3�� ���u� �����5������u� ����� ��������� ����.�

������������ �������=� 5.�.����,<��7D@N�Q � ��.����,<��77;>,�

��� �3"��������� 9� ������ 2u�� ���� ��������� ����"������ ���� ���� ���� �u�������

�������� � � �� ��� ��� ������� .� �������<� .������� ������� "�������� ��� ��������

2u����F*��,���� ���������� �" �������� ����� ���� � ������������������" �������

�2u���� ���.T��� ���������� ��������������"�������������2u������� ������ ����

��� ����"����������,� ��� � 5�"������ ��� "�. � � "��� �� #��� "������<� ������ ���

��������2u��u�� ����������� ������ ����������" ��������2u���� ��� �������� � �

��������� ��� �� ��� � � ���u���� ��� �������� ���� ���u��� ��� u�� ����������� ��� � �

������� � ������ �� � ���"u��� ���� � ���� ������� =% ������� .� ���,<� �77@N�

QuM . � �.����,<��771N�� 5��u�( ��5�.����,<��77:N�!5��5��.����,<��77C>,�

/ ����������� ����������������������������������������� ����������� ������ ��� � ��

����������,�/�����������2u��"���u����� ��� � ����������������� �� �<�� �����

�u���� �� ���� �������� "��������� ��� �������� ���� ����,� ��� � ���� ���� ������

������� ������� �� �.�������������������"���' ������u.������" � �"��������� �

� " ��� �� ��� ��"� �� ���� ���� ������ " � � u� � ������ � � � ,� ��� � 5�"������

��� ���������������� � ����� � ��u ��� �,�

�������3"���������@�������������� ������������� ����� � �� � � �������� �������.�

�������������������� � ���������������2u�����u��� ����u������F*�������� � ��� �

�� ����� � � ���� � � ��� � ;<�� .� ;<9� �,� / � ���u���� ��F*��� ����� � � ����

� � ��� � ;<���������� � � �� ��� ��� ������� .� ��������� .����� 2u�� � � ���u����

��F*�������� � ��� �;<:��,�

�������� �� � ��� ����������u���������"��������� ������ ��.�� ����� �� ��������� ����

���� ���u� ��=+ ��<��7DC><��������u������ # ���������� ����������� � ��� �=;<��.�

;<9��>�������u���������"�������<�"����u ����u� ��������� �������� �� �=;<:��>�

���u������� � ������3�����������<�����u ���u������2u�����u�������������� �������

�� �� ��� � � ��� � ����� u�� u����� �������� ������ �������� �������� ����� ����

�������������"������ ����=/���<��7D@N���P���� ���.����,<��77�N������ ����.�

���,<��77:N��(����.��5�����<��7DB>,�

Page 134: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���1;���

���������u�� �������� ���� ��� ������������������u�������������� ��������������

9&�.��u�������� ��������� ����������F*�������� � ������ � ��� �;<���,�

/ �� � � �� ��� "��4�(� .� ��� � ���������� �u���� ��� � � �� ��������� � ��� ���������

��������� ��� ����� ��� ������� �u����� � �� � ������ ���� �� �� 2u�� 2u��� ��

������ �� ���� ���� ������ �� � �������<� ��� �u �� �u�� ��"�� ��� . � 2u�� ������

��������� �������� ��u����� 2u�� �u� ����� " ���� "���u������ "���� �u� ���� ���

�����<� .� ��� �u����� ���������� � � � ����"������ ���,� ����� ��������� ���� �� #���

"��������������������� ������������� ����������������������������������������

��������<� � ���� �����������������"������ ����=*�����.����,<��779N�� ���"�.����,<�

�77:N�&��� ���.�/���<��77@>,�

/��� ��������� ��������� ��������� ������ ���� ���� � ����u�������9&� �u������� � ��

� � �� ��� "��4�(� .� � ���������� ���� # �<� ����� ���� 2u�� ���� ���������

��������� ��� ������ ���� " ����u� ������� ��������� � ����� ������� ���

������ ������,� ����� ��� �u�� ����� ��� ���� � � ���u���� ��� �������� ���� ��F*���

����� � ������ � ��� �;<���<����u �����������������������������������u�����

������ ���� ���� ���9&,� ������ ���u�� ���� ���������� ���� �� #��� "������� ����

����������������=� ���"�.����,<��77:N�6 �5�G M �.����,<��779>,�

��������� ���� �� � ������������������� � �"����� ����"��4����������� ���������� �

������ � � � � ����"��4�(�.� � � � � ����� ���������,����� �������2u�� � �� � � �����

��"� �� ���� �u���������� ������������ � �������<�������������������������� ���

�������u������� � �u� �� .���"����� �2u��������������������������� �������<�

���� ��"��� �� ��� �� � ������� ��"�� ��,� ����� ��������� ���� �� #��� �� ��( ���� ���

������<� ������ ��� ����� ��� ����� ���� � � �� ��� "��4�(� ���� # �<� ����� 2u�<�

�����<� ��� ������� ���� �� �� � � �� ��� "����� � ��� �� �u ���� ��� ���" � ����

��������� ��������� ��� ����� ���� ��������� ��������� ��� ������ =*����� .� ���,<�

�779N�) �����.����,<��77:N�� ���"�.����,<��77:N�P���5��.����������<��77:>,�

���"���� ��� ��������������������"�������������������������������������������u��

� .���2u�������� 2u������������ ���� �" ���������������������������������<�u��

�������2u�������� ���u���� ���������� ������ �������� ����� �����# ����"�� � �,�

����� ����������� ��� ��� "���� �� � ��������� ����u#�� �� �u���u����� �����������

Page 135: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���1����

�������� ����� ��� ���� " ����� �����u������� 2u�� ������� ���� ���� ��������� .� ��� � �

���� ��� �� "���� � �,� ����� 5��5�� 5 � ����� ��"��� ��� "���� ������ ��� ������� .�

������<�.���� ���5 ���� ���� ����������u�������u��������������������u�����<��� �

����� ����� � ����� u�� ������������ ���� "������� ��� "���u����� ��� ������ =� ���� .�

� ���<��77CN�)����.����,<��77BN�65��"���<��77CN�P �G���.����,<��77B>,�

0��5u����������� �� ��� � � "��"�����������3��������� �������������� �����,������

��������������������u�� ����"������ ����"��� ���.����,�=�77C><�2u�����<����� ����

��� ������� �� u� � � .��� "��"������ ��� � �5��� ��� ���� ��������� �������

��������� ��� ������ 2u�� �� �( �� ��� ��� ���� ��� � ��������<� ��� ������� ����

��������� ��������������������� ��������,�

���������u�� �������u���� ��2u��� ��� ��������� �����������������������������

��� ������ �������� ���� ���� ��F*��� ����� � � ���� � � ��� � ;<�� �� "���' � ���� u��

"�������������� ������" � �u��"���� � �������� �� ��� ����� � �����"���2u�����

"����� � ��� ���� " ����� ���������� ������ �� � .��� � � 4�� ��� �� "u�� � ����

���u���� ��<�. �2u��� �����������������������u�u ��������� ��������u��� �����

����� ����" � � ��� ��"������������ ��"����� ��������,������ ���' �" ����u� �������

��'����������� ������ ��2u����� "��� �u��� ��#���3����������������� 4��,�

Page 136: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���11���

B��� ����� ��� �����

���������u��������������u�� ��������������u� ��������� #���3"������� �����

� �"��������������"�������������2u�A�

��/ �����u���������� ����"������ ���� ����u� � ������������������� �������� .���

5 ���� ��" � �������� ���������������2u�� 2u��� ��2u�����������������������

"��"����������,������������� �2u������������������������� .���"���� ���� �� �

�� �������� ����� � �"� ������ ,�

����� ���� ��� ��� # �� �������� ������� ��� � � ��� � =;<�� �>� � ���� ��� � ��

���u���������������"�� ������������� ���������������������"���������������

u�� ������� ����������,� ����� ������� ��� ��������� ������������ ������� �� �� ���

� � ��� ,�

��/ � �� ��������� � ������ � ��� ��������� ������� "���u������ ��� ����� ��� u��

������� 2u�� "������� �� �( �� � � �� ��� �3���� ����� ���� � ���� �������� 2u��

�����u�� �� � ����� " ���� ��� �������� ��� � �� �����,� ����<� �u� ��� � �u�

���"����� �<����5 ���u����������u.������" � ����� "��� ���������������������

� �"�,�

��/ � �������� ���<� � ���� ��� ��������� ������� ����� ������<� ��� u�� �������

��"� ��� ���� ���u�� ���� ���" � ���� � ���� ���� ������ ������� ������

���������� �,�

��/��� ��������� "���u������ ��� ������ ������� � � �� ��� �3���� �������� 2u�� ����

"���u������ �������,�&������ �" ���<� ���� ���������.���������������������� .���

"���� �� � ��������<� ��� �u �� "����� � u�� u������ ��� ���� " ����� ���������,�

�� �� ������������ 5 ���� 2u�� ��� ��"���� ��� ������ ��������� ��� ������ ��

"���u������������ ������ ��,�

Page 137: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���19���

��/ ��������� ������� ����������� #������"������� � "� ������"�������������

����"������ ���� " � � � � � ��"����� .� ��"�� ��� ������ ���u�� ��<� ���� ����

������� � � ��3�� � ��������� � ��� ��� "������� ��� ����"������ ���� ���� � ��

5��� ����� �����"����������� � ��u ��� �A�

o ����������������"���u��������������

�� ����� ������� ���� ������������� �<:� �,� -����"�� ���� ��� �� " ��� .�

�� ��������� ������� �=���6�%��>�

o ����������������"���u���������������

�� ����� ������� ���� ������������� �<:� �,� -����"�� ���� ��� �� " ��� .�

�� ��������� ������� �=���6�%��>�

���������� �������� � ����u�����������������1:?�.����������1:?������ ���

����� � ��� �;<����=��F*���F�� � ��� �;<���>�

o ����������������"���u��������������

�� ����� ������� ���� ������������� �<:� �,� -����"�� ���� ��� 9� " ���� .�

�������������" ���=���9&�>�

���������� ��������� ����u�����������������@;?<��������C;��D?�.�� � ��� ��

;<9���=���>�

o ����������������"���u���������������

�� ����� ������� ���� ������������� �<:� �,� -����"�� ���� ��� 9� " ���� .�

�����������9�" ����=���9&>�

���������� �������� � ����u�����������������1:?�.����������1:?������ ���

����� � ��� �;<����=��F*���F�� � ��� �;<���>�

��$����D�"����#�(�&����(�"�)������$����"(�"�������E����

Page 138: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���1@���

C�-��������� �

/������u�� �������� �"���������������u�����"u��� �������� �����u������������� �A�

��� ��'��(��*<�� �G������,� �.�"������ �����������������.��A����M�����(����

����������� ����,�65�����������.��77CN�@7A��;97��;@7,�

��� ��'��(��*<����� ����%*<��u��u�� <������� ����*�,�-���������� �u ����� ���

"���� ��.� � ���� ����� �������� ����� ��� ��������� "���u���� ������ ���.��,�

65�����������.��77DN�:;A�C:C�CBC,�

��� ��'��(� �*<� ������ ���� *�<� � �� ����� �<� ��� � �� )�� ����,� &���� ��.� � ����

����� �� ��������� ���(������������.��A��� ������ ��� �,�65�����������.�1;;1N�

:DA�7B9�7C1,�

��� ��'��(� �*<� � �������� �<� ��� � �� )�� �� ��<� ��� � ���� %*<� �u��u�� <�

������ ����*�,��������� �������� ���������"���u�������������.��A���������� ���

���������� �u �����,����� ��+�"���u��������������1;;1N�C9A����1�,�

��� ��'��(��*<�� ���������<� �u��u�� <� ���� ����%*<� -�����*�<� ��� � ��)�� ��

��,� �.�"������ ����� ��� ��� ������ "���u���� ������ ���.��,� �� ��� +u��� ���

+��� ��5�1;;BN�B9A�1DD�17B,�

Page 139: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���1:���

�<�����������?�

��� �S<��������+/<�0���5�.�%/<���5 �����%�<�+u�������XX,�&�����5 M�"���� ��.�

� �������" ������������������� ������(������������"���u�������������.��,�

65����������.��77B<�@:A��C:� ���,�

���� X<� �5������ X0,� %������ ��� �������� ����� ���u������ ���� �5�� ��.�"������ ����� ���

���.��,�X�u�� �����+�"���u������ �����������.��779<�77A�@C��@CC,�

���� X<� �5������ X0,� �u������u�� �������� ����� ��� % .�B� �5��"� ���.��,� X�u�� �� ���

+�"���u������ �����������.��779<�77A�B:�C;,�

��5M��������5��X<� � �� ��� X� =���>,� /�M� 6��"�� �u���&������ ����� ������������

���������.<�&��� ��&����<�� �5<��7D;,�

� �� �� ����)<������ �<� �������5�� <� ���� ����%*,� ��" � ����� ��u�.���M����

5u� �� ����" u���� ��� �����"5��� =)�*>� ��� 5�"����� �.� ���������

����u� ����� 5������� =��)�&>� ���� �u"����u� ����� ��� �5��",� &���������� ���

�1�5�-����� ���� �� ��������������� ��+�"���u�����<�%u���<��771<��A��D1�

�D9� ���,�

� �� �� ���� )<� �u��u�� <� ���� ����%*<� &����� ),� -�������� "���u������ ��� �5��"�

���.��� u����� � " �����"��� ������u����������A� ������ ����� ��� �����"5���

��� ������� ���� ����u� ����� ��� ���.��� ������,� 65�����������.� �77B<� @:A�

C;C�C�C,�

� ���� *<� � ���# � � &<� &������ X<� � ����� X ,� ���.�� "���u�����<� ����(���� ���

�� ������ ��� ���� <� �"���� ��� � ���� �� ��,� &���������� @�5� �����������

������������5���u��"� �����.��6� ������������ ����<�/.��<��7DD<�BC�79,�

� ����*<�� �����X ,6���������u� ���������� ��.��� ������u��������u"����u� ���M��5�

"��������������������u� �����5��������u����� ����u������5������������ ���,�

65�����������.��77;<�9@A�9;9�9��,�

Page 140: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���1B���

� ������/<�������0/,����.������� �����"������������������u��u�������������.��,�

�����u� ��+�"���u������ ���%�����"������77�<�17A���C��19,�

� ������� �%<� +����)����G ��� 6�,� %�����"����� ��� ��� ������ � �u���T��� ������

�������(��������� ���.��� ��������u� �� ���� ����.���� ������������u��u���

���� ,�65�����������.��771<�9CA��1C��@B,�

�����������QX<�����5���X�,�65�� � ���.� ���"5.������.����"�� �� �5�����������

���.��,�65�����������.��7DD<�17A��::��DC,�

����������� QX,� �� 5�����.� ��� � ��� ��� �� ���.�� �� ������ ��� ����� ����� ����

���5��2u��,����� ��+�"���u��������������1;;9<�C7A�1;9O1@@,�

����.�Q�<��������*�X�<��������+&,� �.�"������ ����������u������.���.��������

"�u�������������2u�����������,�65�����������.��7DB<�1:A��@;� ���,�

��������X%,�-���������������( ����� ������.���� ���������5������� ��"���"������,�-�A�

6��u������!<�P���� � =���,><� -�� ������ �������( ����� ������.�� 6� �����,�

5u��5����/����������<�/�����<��7D@<�9O�:,�

������ u�*�������� �<� & ���5� &,� �������� ��� ���.��� 2u ���.� ��� ������"����� ���

�� �����"���� �� ������.� ��� � ��.� ������ ���.��,� ���� �� +�"���u������

��������1;;1<�C�A��@9��::,�

������� +X<� ������ 0P,� -�� ������ �u��u��<� ���� ��� ��� �� ������ ��� �� �� ���.��,�

�u��� �� ��X�u�� ������������.����������7CB<�17A��1:��17,�

��� ����&<�*�u������%<�+��5��X�,������� �������� �����"5��������u"����u� ��������

� ����,�65�����������.��77�<�9:A�:��C,�

�����&�X<�� ����5�����X��<�� ��������<����Q�u����,�6� ��� ��� ����u��"��G�u"�

=!&8>� ��� �5�� ��MA� � ��M� ���"�� ��� ������� �u�� ���� �.����,�

65�����������.��77: <�@9A�BCC�BDC,�

������� �<� 0�� �<� � �5 � ��5 �� )<� /��� �<� P���� &<� + �� �� �,� 5���������

� �.���� ��� �M������� ��u��� ���.��� ���(��� .� ���M� ��� u��� �� "���

Page 141: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���1C���

���5���� u����� �M�� ���������� ��.�"������ ���,� ��������.� �����������.� �7DD<�

@7A�7;D,�

�� �G���� �*<� S�u���� -<� � .����)��G��� +�,� ��5 ����� �� ����.� ����� ��� ������

�������( �����������������.����� �u�������������M��5�5��5��������� ���������

�u�����(����5������,���������.� �����������.��7D7<�:1A�9�7�91@,�

�� �G�����*<�Hu��G��Q�,��� �.�������� �������������������5�����������"���u���������

���������.��,�65�����������.��779<�97A�@9�B@,�

�� ����� X�,� 65�����.� ����� ��� "������� ��� �u� ����,� -,� 65�� ��� �u� ����� ���

5.����."�������,� X�u�� �� ��� ������ �� 5������.� ������.� �7B@<� DBA�

@17��@9;�,�

��� ����� &X<� ���M ��� �<� %��� �� %�,� +���"����� � � ������� ��� ���.��

�� �����,�65�����������.��77�<�9:A��1:��97,�

���M���P<�+ �(��M���6,�&���u����������5��"����.������������ ���������"�����

��� "�����.� �����M���� ������� ��� �M��� ���.�� �� ������,� 65�����������.�

�77D<�@7A��:1:��:9B,�

��u�� �<� )�.� �� S<���(��u�P<�����(�� S,� �� � ��� �.���� �5�� ���G� �� ���

��� �u���� �� ����� �� ������ ��� � ��.� ������ ���.��� �u��u���� M��5�

���"5�� �������������,�X�u�� �����+�"���u������ �����������.��7D@<�C1A�@C7�

@D:,�

��u�� �<� Q�"���.� �<� ����5��� X�,� �u��� ����� "5��� ���������� ��� �5�� � �������

�� ������[9)]�u������������"�� �����������5����M����.�,�������.� �����7DB<�

:DA��7:�1;;,�

����/<�!]������XQ<�� 3M����P� <��� ���*,������������� ������������"�����������

������ "���u���� ������ ���.��� ��� ��3� � ���� ��� ��� ������ �u���� �� �����

���.���� �����,�65�����������.��77C<�@DA��9B7��9CD,�

5����� u� &<� &���u��u�� +<� ������ S<� /��^���� & <� /�� ������ �<� 5u"��� %,�

&���u�����<� ����(���� ��� �� ������ ��� ���.��� ����� � �u�����u�����������

Page 142: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���1D���

�� �� 5���� M��5�u�� �u�����u�� �� ���������,� 65�����������.� �7DB<� 1BA�

1C7�17;,�

5����P6Q<� ����� +�<� &����� ,� -�� ������ �������( ����� ��� "��� ��� �5��"� ���.����

� �u������������ �����������,�65�����������.��7DB<�1:A��@B��@7,�

5u"���%,��""��� ������"� ��2u����u��� ��������]���.�����5�(� ���������,�����,�

���-������ ������7D:<�1;BA�9��:,�

5u"���%,��u"����u� �����" ��&��*��u���)�"�u������� ����������.��� ���,� ���,�

������^��� �� ����_�u������� ���������^<�� ����<�& ���<��7DD<�1BA�1�9�191,�

������ �X<� %' (� ��� � � ��"�� � ��<� ��u�� �� �,� 8��� ����u��u� �� �5 � ����������� ���

����5� �� ���(����5 M������������.���u������M����.�"������ ���,�������.�

���+�"���u������1;;1<�BBA��1@@��1:D,�

�������X<�&���u��u��&<�%��/ ��u�����X<� 5u"���%,�*�.�����������5.�������.��������

��.�"����������������"����(����M�����.��,�65�����������.��7DD<�17A�19D�

���,�

������S<�*u�����S<�*u. ���� <�&�u����0<� ��(���0,�-���������������( ���������5��"�

���.����� �u�����������,�65�����������.��77�<�9:A�979�@;;,�

������� ��<� � ���� &P<� %.G��� � �X<� ���3 ����� X�<� � ���� �,� 8��� ���u��u� ��

���"5�����.� ��� ������ ���" ��� ���u� �� "���u���� ��� ����� ��� ��� �����,�

������.����+�"���u������1;;;<�B1A��@:7��@B:,�

��M��X)<� ��M��/�<�!��������<�6����G�� �0<�P��G����P<�6 �����,�65�����5 �����

�.�5����������A�-�����u��������� ��.�"���u������� ���( ������������������5��

��.��� ��,� �.������.�1;;�<�@9A�D7��;:,�

��(���0<�)u�� u�%<�%��������<�65������ <��(�������%<�6�������<���������� ,�-��

�������������( �����M��5����� ��������"���������5���5��",�* �����+��� ��5�

�7DC<��BA��:7��C;,�

��(��� 0,� � ��"u� ����� ��� ���.���� ��� ��� ������ �������( ����,� X�u�� �� ���

+�"���u������ �����������.��77�<�@9A�19:�1@9,�

Page 143: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���17���

(���G�M�G ��<� �.�.����� 8<� *u�(G��M��(� �<� Q��� G�M�G���<�%(� G� �,� ����5� ���

� ��� ����� ���������� �u� ����<� �������( ����<� ������u��u���M��5�����u�� ��

�����,������u� ��+�"���u������ ���%�����"������77�<�9;A�9@�9D,�

(���G�M�G ��<�& "���Q<�*u�(G��M��(��<�Q��� G�M�G���<��.�.�����8,�����(�������

�5��"����.������9,;������5 ���,� �.��/��������77�<��1A�����B,�

(���G�M�G � �<� & "��� Q<� *u�(G��M��(� �<� Q��� G�M�G�� �,� �u���� �� ��� � ��

"����������5��"���������.��� ���������(���,� �.��/��������771<��9A�179�

17B,�

% ������� 8<� *u�� ������ )<� �5 ��u����� �<� / ������ �<� +�����u�(�� ��'��(� ),�

�u���� �� � ��� ��� u��� ���u��u��� ��� ���������� ������ ��� ������ ��� ��� �����

������"������.��,���� �������� �.��� ���� �� ���77@<�9:A�@�C�@1B,�

% ���� � �<� ��� ���� <� &����5�� �<� -� �5��G�� �<� � � � /<� 5��� � �<� "" �� &,�

��" ��������������������������� �����"�������������� ����.� ������� ���������

������ � ����.���� ��� ������ "���u���� ��� ��� ����� �������,� 65�����������.�

1;;@<�B1A@D��79,�

% ���� ��<�&� G�*<�/���&<� "" ��&,��u���� �� ����� ����.����������������������� ���

��������"���u����� ����.���,�65�����������.�1;;;<�:9A��:����:�7,�

%��/�����<�� �������� <������ u��G�&<�Q�u�"�6��,����"5����.������� �u���������

���.���,�* �����+��� ��5��7D7<�1@A��7C�1;@,�

��� � ���� %*<� �u��u�� <� ������ %�<� � �� �� ���� ),� ������� ��� �.��� ����� ���

��u� �5����������� ���������"���� ��� " ���.�������������.���� �u�������

�����,������u� ��+�"���u������ ���%�����"������77:<�@1A�@91�@9B,��

��� � ���� %*<� �u��u�� <� ������ %�<� � ��'��(� �*<� � �G����� �,� ����u� ����� ���

��u� �5������.��5�������� ���������� �u�������������.���� �����������������

���.�� ������"����� ��� ����( ����.,� �����u� �� +�"���u������ ���

%�����"������77B<�@:A@:��@:C,�

Page 144: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���9;���

%��& (�&<�� ��5�(��X<� ���� ���(� X*<� � #���<�%�����u�(�X <� 5 ������ �<�

����� /,� �5��"� ���.�� ��.�"������ ����� .� �������� ����� ��� ���������� ��

����(���,�65�����������.��77@<�@1A�91C�99D,�

%� ���u�����<�*�u������<�+�.^���%<�65� u��� 5,�!� �� ���u������<�-�A�65� u���

5<�/�� ���u��� <�)u�����+)��=���,><�+�"���u���������� �� ��� ���� �<�

�������� �G����<�& ���<��779<�1D��9;B,�

%���.^���<� ��� �� <�/����� ��&<�� ���"��<�����������&,��u���� ����� ���(������

���������� ������ � ����.���� "���u���� ��� ������ ��� �.��5����� ����u��� ��u��,�

65�����������.��77B<�@BA��@1:��@97,�

%���.^���<�/����� ��&<�� ���6<���� ����&<�S ���RH,�6����������5����������� � ���

"����������� ����� ������� ��.��u���� �� ��� ��� ������"���u���� ������

� ����.���,������u� ��+�"���u������ ���%�����"������777<�:9A�9�D�91@,�

%�� ���u��� �,� +��u� ����� ��� �� �� �� ������u� �� �.� ����� ��� � ��� ��� ��,�

-�"��� ������ ���� � ��"u� ����� ��� ��"���u�����,� 65�����������.� 1;;�<� ::A�

�1����197,�

� ��� +<� +�M�� X&<� Q���.� X�<� %�� � ���� 6�,� &���� �.� � ���� ���� ����5� ��� ���(���

������ -�&� ���.��� ����� #u������� ��� �u��� ������,� &����������� �9�5�

-����� ���� �� ��������������� ��+�"���u�����<������.<��77B<��D��C,�

��M ���� /X<� � ��� &�<� * ������� �<� * ������ %Q,� ������� ������ � ��� ��� �u��u���

����u�� .� ������ ����u��� �"��5��� �� �����A� �5 ����� ��� � ��5.�� ����

����u� ��� ������ ���.�� ������"����,� �����u� �� +�"���u������ ���

%�����"������77C<�@BA��@B��:@,�

��M ����+*<����"����& ,�65������� ��������5�����(������� ������5u� �����.��,�

-���������Q� ���P5�� ��X�=���,>�65������(�������� �� �� �����.��,� � �

��u�� ������.�"���u��:1<��3���"� ������ <�������� �<��7CCA�19:�1:;,�

������ Q<� % ��� �,� �.�"������ ����,� -�A� -�� ������ �������( ����,� 8��������.� &����<�

������<�1;;;A��71�11C,�

Page 145: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���9����

������� Q<� P5�� �� X� =���,>,� -��� �u��� ����� �.�"���u�� :1<� 65�� ����(���� ���

� �� �� �����.��<���������T0���5�)��� ��<�������� �<��7CC,�

�������+<��������*<�6 G�� �6<�� �� ���*,��������3"���������M��5� ���(����5 M���

���������.����� �������������u���� ��.,�65�����������.��7D1<��CA����;,�

�� ��� � !,� !� �� �� ��������� ���M�5� ��� �����2u������ ���� ��������.� ��� �5��",�

���� ��+�"���u��������������1;;9<�CDA�1D7�9;B,�

�.�������P)<�������0/,� ���u��u������� ��.�� ��������.�������5��� ����.����� ���

M��5�����u�������u������������������������u�,�X�u�� �����+�"���u������ ���

��������.��7D7<�D:A�C�:�C1;,�

� 5����� �/<� * ��' � ��,� �� �u�� ��� ��.�"������ ����� ��� ���.��� ����� ���������

��� ��,� �.������.��771<�17A����D,�

� 5.�*�<�� ��� �� ���%+<�������� �<����.� ��)6,��������� ����� �� �� ""�� �5�

�����.�"������ ����,� �.������.��7D@<�1�A�@;C�@1B,�

� 5.� *�,� �������� ����,� -�A� /�M� 6��"�� �u��� ������5�����.A� ���������

�""��� ������ ��� ������������ �����u�����,� ��*� �5� XX� ��� %������ Q+�

=���,>���%����,��;�T�)6%����,�7D<��7D7,�

� ���� &P<� � ���� �,� &���"�������� ��� � ���� � ����� �����M���� �� ������ ��� ���.���

"���u������������,����.��6� ������0�M���������77C<��:A��:��7,�

����������<�*�u�����/ <�/ ���X,� �.�"������ �����������.��� ����� ,���������.�

�����������.��7DD<�@7A�C@9�CB@,�

�uGu� �S<�-�5�G M ��<�0 ����Q<�6�.�� �S,�����5�������� ��� ��������u�����������

���������.����� �u���<��������(��<� ����u��u����M��5��u�u�u�����������������

u"�����5��� ����.����� ��,�������.����+�"���u�������77;<�@1A���@���7,�

�uGu�� S<� *��M� ��<� * ������� �<� ����� +�,� + ���"������� �������� ��� ���������

�������( ����� ��� ��� � ��� ��� �5��"� ���.���� � �u���� ��� �����,� X�u�� �� ���

+�"���u������ �����������.��7DD<�D1A�99C�9@;,�

Page 146: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���91���

�uGu��S<����*�M ��/6<� X ����+P<�&u�5�&�<�6������)+,�� ������ ����������5�� ���

������������"��������� ����.����������������.����� �u���� ����������(�����

�����,�X�u�� �����+�"���u������ �����������.��77�<�71A��1:��9�,�

�uGu��S<�� Gu� �S8,�� �u� �����������������.�����u��u���� ��������A� ��� ��������

�� �� �� ������.<� ������u� �� ��(�� ��� �5�� "�������� ��� ������ ��� �u�u�u��

�����,�������.����+�"���u�������7D;<�11A�BB7�BC9,�

�uGu��S<�8� G M ��<�� � G�� <� 5�G � ��u�0<�!����),�%�����"����� ��� ����� � ���

���u� ����� ����.����� ��������M�������������� �u� ����� ����������( ��������

���������.���,����� ��+�"���u���������������7D7<��DA��97��@D,�

�u��u�� <� ��� � ���� %<� � ��'��(� �*<� � �G����� �,� ������� ��� ��u����� ��� ���.��

2u ���.� ��� "�����5 M� �� ����.� ��� ��� ������ "���u���� ������ ���.��,�

65�����������.��77C<�@CA�@D��@7;,�

�u��u�� <����� ����%*<�� ��'��(��*,�����������5. �u������ �������������"�����

��� ��� ������ "���u���� ������ ���.��,� 65�����������.� �77D<� @7A� �@D7�

�@77,�

* ���� <�%u�5��+<� ������*<�6u�����&<�&����� ���0<� ���������<�/ �u��� �-<�/ (( ���*,�

����������.�����5��������,�65�����������.�1;;9<�:7A�:77�B�B,�

* ������ %<� / ��� �<� �"��(��� �<� � ��� &,� ��5 ����� � ���� ��� ��� � ��� ���

������"����������5��"�(.�������u��u��������5��� ����.����� ���������������

�5�� ������ ��� ���u�� ��� ��� ���� �����A� ������ ����<� ��� ����<� ���

�u��u����� ���.��� ��� ���u"�� ����u� ���� ������"����,� ������.� ���

+�"���u�������77@<�:;A�97;�@;;,�

*������ -<� /u� Q),� &���u������ ��� ���.��� ��� ������ ��� ���� ��" ��� ��� ��������G�

"���u�����,�65�����������.��77;<�99A�CC�DC,�

*������-,����.���� ������ ��� ����� �������5��2u������� ����,�-��*������-�=��,>A�

���������� +�"���u������ ��� ����� ��� �u�� ����<� ��� -����� ���� �<�

8��������.�&����<� ������<��77B<�1@:�9C�,�

Page 147: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���99���

*������-,����.���� ������ ��� ����� �������5��2u�������� ��,�-��*������-�=��,>A�

����������+�"���u����������5��"� ���*� ��<� ���-����� ���� �<�8��������.�

&����<� ������<��77C<�@�B�@97,�

*������ -,� ���.�� �� ������ ��� ����� ���� ���5��2u��� ��� �5��",� -�� *������ -�

=��,>A� ���������� +�"���u������ ��� �5��"� ��� *� ��<� ��� -����� ���� �<�

8��������.�&����<� ������<��77C<�1D;�917,�

*����� �)<� ����5� �8<� Hu�G��� �� �,� 65�� �u����� ��� ���.���� ��� �� �� ��

u���� ���� ���������(���� ����5 M���,�X�u�� �����������������.��7:B<��9A�

99;,�

*�����6<�����.��<� ��������),��� ����.���� �������� ������������"���u����������

���.��,�+�"���u���������%������������ ����779<�1DA��B@��B7,�

*�����6<�� �������<�����.��<� �������)<�).�����&,�-��������"���u���������������

���.��A� �� "�������� ��"���� ��� �5�� �����2u������ ��� �5�� ��������

u"�� ��������� �����"�"u� �����,����� ��+�"���u���������������779 <�99A�

:��B7,�

*����� 6<� � ������ �,� -�� ������ �������( ����� ��� � ����A� �� �����M,� +�"���u�����<�

0u�������� ���%�����"������77�<�9�A��@C��:C,�

) ��� �X<� +u ��� X,� /�������G�� ������� �� �5���� ������� ����A� �� ��� �� �������M,�

������ �����������.��779<�CA�D�:�D1:,�

) ���P %<�/u��G���X<�65�� ���*<���M���+�<�����5��/<�� ���������%<�+ �� ���

* �<� ���� ��G.� �,� 0����� ���������� ��� �u�����u�� ���u�� .� ���.��

�� ������ ����� �u�����u�� ���u����������� �5��",� ������ �� X�u�� �� ���

������� �.�+��� ��5��7DD<�@7A�@BD�@C1,�

) ��� �� *<�/�M���P)<���������P<��������PP,������� �������������u ���� �����5��

��M� �����5��� M��5� ������ ��� ����u�,� �� ����� �� +������� �79�<� @DA� 1BC�

1C:,�

Page 148: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���9@���

) �����X�<�)���������P�<�)u������&X<�X���HY<��� u��.��%<���M�����<�0���.��<�

�5u�.� /�<� ���G��� X�<� 6������� ��,� &���u������ ����(���� ��� �� ������ ���

������-������.��� ����u��2u����� ���������u���,�65�����������.��77:<�

@9A��@���:1,�

) �����X�<�)u������&X<�X���HY<����G���X�,��u���� �����-��������������������.���

���(��������.�����������5.�������.���,�65�����������.��77C<�@DA�:B9�:C7,�

) ����� X�<� �� u��.� �%<� / ��5��"� P�<� ������ +),� ������� ��� ���������.��

����"����� ����� ������� ��� "���� ��.� � ��� ��� � � ������ ��� ������ ���.��

�� ������"���� �,�65�����������.��7DC<�1CA��97��BD,�

) ����<�X�,�65���u�������� �u�� ����u�u�������������� �����.���� ���������� ����,�

���� ��+�"���u��������������1;;9<�C9A�1@:�1B@,�

) . �5�� �<� Q� . �5�� Q<� ��(u��� X<� � ���5� Q<� )�� ��� �,� ����5� ��� "������� �����

���(������.��,�������� �.�+��������7D7<��1:A�@9�@@,�

)� "�� P,� �u��5��� ����� ��� �5�� �� ��"� �� ����� ��� ���M�5� ��� � �� �� �� �� �

M��5��� � u������� ����������5��,� &������������ ��� +�. �� ������.� ��� ������.�

�D7C<�B1A��CDO�D9,�

)� "��P,�&������� �.����������5���� ��"� �� ����� ������M�5����� �� �� ���� �

M��5��� � u������� ����������5��,� &������������ ��� +�. �� ������.� ��� ������.�

�D7�<�@DA�@:CO@:D,�

)�.� ��S<�����(��S,� -���� ��������� ���"5�� ��������������M��5����������.���

������"���� ��������,�-�A�65��� �� �� ��&����"� �� ��������.�,�� �������

�%�=��,><�&���u��&����<�0�M�S��G<��7DC<��C:��7�,�

)�.� ��S<��������� <�* �������<� ������S,�6� ������������(����5 M������.������

�5��",�������� �.�+��������7DC<��1;A�D9�D:,�

)��5���<��u#������6<��� u��X<�!�u���0,�&���� �����������M������ ����������2u����

���.��� ��.�"��������� .� �������� ����,� 65�����������.� �77@<� @1A� @D9�

@DD,�

Page 149: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���9:���

)���� &<� ����5� &X<� ��5����� �)<� *����� 6<� ������� ),� )��5� ������ � ����.���

������"����� ��� � �� ���� ��� ������ "���u������ �.����� u����� ��� � ����u��

�u""���������M��5�����u������ ��� ����.�����������M��5����M��5�u�����u��

"�������,�65�����������.��777<�:1A�BD9�C;;,�

)����&<�P �G����<��� � �G�+,����.���� ����.��u� ������������ ����� ������5�

M���5�� ��� �5��"� ����� �� ������ ��� ��� ������ � �u���� ��� ��� ������ �������(���

(.������ �u��u���� ��� ������ ��� ��� ����,� X�u�� �� ���+�"���u������ ��� ��������.�

�77B<��;CA��C:��D�,�

)u�� u� %<� ��(��� 0,� -�� ������ �������( ����� ��� �5�� �5��"A� ������� ��� �5�� ���� ����

� ���u���������� ����� �� ������� ����,�* �����+��� ��5��7D7<�19A���7�

�1:,�

).����� &<� *����� 6<� �������� ),� �� ���" � ����� u��� ���u��u� �� ��u�.� ��� ��� �����

����u�� ��� ������ �������( ����� ��� ������ ���.���,� �� ����� �� ���.����.�

�7D7<��C7A�@9:�@@1,�

).�����&<�*�����6<� ��������),�8��� ���u��u� �� �"�����������.���� �u� ����� ���

�������( ��������� ����,�X�u�� �����+�"���u������ �����������.��7D7 <�9DA�9:�

@C,�

-� ��Q<�� �� ��<�%��5��!<��5���5�� � -,�%��������� � ������ ������������"���� ��

���"������� �����.������ ����������������"���u�������������.�,�X�u�� ��

���������� �.������������������1;;1<�B@ADDC�D7�,�

-M � G�� �<� ) � ��� �<� QuM . � � �<� S � �5�� � �<� 8�5�# � � )<� 0 � �G � �<�

0 G 5 � � 6,� %�����"���� �� �5 ����� ��� �5�� ���������� ��� �5���������

��� ����� ��� ������ ���.��� �������(��� ��� �����,� 65�� X�u�� �� ���

�3"������� ��H�����.��771<�1B�A�C7�D:,�

-M � G�� �<� S��5� � 0<� 8�5�#�� � )<� P � � �� �<� 0 G � � � 6,� ���"5����.� ���

"��"���������������������� ������������� ����.�����������(������������ ������

����,�X�u�� �����+�"���u������ �����������.��77;<�7;A�1C7�1D@,�

Page 150: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���9B���

X �G�M�G�� �<� /���� �&<� � (u�� &,� *�.������ "���� �������� ��� �������(��� ���

u��������(�����u����� ,�X�u�� ������3"������� ��H�����.��7D;<�1�1A�917,�

Q �����<�%��� .�-<�� ���"��<�%���.��<�/ �����&,�!��������5 ���u����� ���������

"���u���� ������ � ����.���� ��� ��.�"������ ��� ���u������ �� � "������ ��

"�������������������u���� �,� �.������.�1;;;<�@�A��;B���:�

Q �����<�%��� .�-<�� ��/ ��������G���<�%���.��<�� ���"��,� ��" ��������� �M��

����u��u��� �.������ ��� ������ �5�� �u���� �� ��� ��� ������ "���u���� ������

� ����.���� ������������� ����,����� ��+�"���u���������������77D<�:1A�97�

:;,�

Q #�5 � �S<��� G�M�����*<��.�����P<�Q���� ���0<�*����Q<�*��G��+�,� -��������

� �u� ����� ��� �������( ����� ��� ������u� �� ���.���� �� ����� ����� � ����,�

65�����������.��77�<�9:A�11;,�

Q ��� �6,� �� �����M� ��� ��� ������ � ����� � �u� ����� ��� ���.�� �u��u��� ���

"������ �� ��" ��� ��� �u�u��� ��� �� �����5�����.,� ���� �� +�"���u������

��������1;;9<�C7A��C���7;,�

Q � ���<�) � �u�5��S<�H5u���<���. G��6<�� Gu� ��6<�� �5�� �6,�)��5��u���� �����

� ������u� �� ������������� �������� ����5.�������.���� �������u�����.� �

���"������5��,�������.����+�"���u�������771<�@BA��;@1��;@B,�

Q � �� �<� Q���� X)<� 6 G G ��� �<� 6�u��� � )<� � Gu� �� 6<� � �5�� � 6,� �� ���"���

���5��� ������u��� ���.�� ��.�"������ ����� ��� � ��M� ��3����.� �������� �����

���u����<�M��5�u�� ""���� ������������� ����.,�X�u�� �����+�"���u������ ���

��������.��77;<�D7A�7��7C,�

Q � �� �<� 0�M � Q<� -��� ��� �,� �������� ��� � ���u�� ��.�"���������� ������ ��� �5��

�u���� �� ��� u����(��� ��� ���(�����u������.��,� X�u�� �� ���+�"���u������

�����������.��7D�<�B9A��C:��D;,�

Q �5�M ( G�� 0<� !5� ��� �<� 0 � �5�� � )<� S � G M � )<� 5���� P6Q<� /��� � <�

!� M ��,�&���u������������� ��"������������5 ��5���� ����.�������(��� ���

�7BK ,�65�����������.��77�<�9:A�11�� ���,�

Page 151: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���9C���

Q5u� � � 0,� ��" � ����� �"����� ��� �5�� �����.���� ������ ��� ������ ���.���

������5�����.�������5��5 ��5���� ����.�������������������� ����������,�&5%�

������� ����<�������� �.���5���<�) ������<�*��� �.<��771,�

Q5u� � �0Q<�0��� ���),������.���� ���������"����"� �� ��������������.���

���������������������������,�������.����+�"���u������1;;;<�B1A�D@C�D:B,�

Q����P�<� 5 �� ���-<�Q�"���.��<������������QX<����������),�0u�����u����� ��(���

�������� ����u������� ���� �� �� �����.��,�X�u�� �����+�"���u������ ���

��������.��7D7<�1DA�B9�C�,�

Q���� P�,� ���.������ ���� "���� ��.� � ��u��� ��� � ����,� � �� �� ������ �.�

X�u�� ���77� <�91A�77��;9,�

Q� . �5��Q<�6 G ���S<�� ��5�S<�)��5��)<�!�G M �6,�%�����"��������� ��.�������

���.��� ��� �5�� � ����.��� �� ��� ��� ���u������� ����������������u�� �����

�������� �u��� �����,�-�������� ���u� ��%�����"���� ��������.��771<�1D�A�

1::�1:7,�

Q� �����% ,����.������������� ����� ������ ����� ����u��� ���,�65�����������.�

�7D7<�9�A�@���@D,�

Q���5��<� +/,� 65�� ������� ��� ���.��� 2u ���.� ��� ������"����,� X�u�� �� ��� ���� ��

��������1;;@<�D1=�u""�,>A���@O�19,�

QuM . � ��<�) � ����<�0 � ��6,��������� ��������������� ����.������ �����.�

��������� �u��u��� ��� ���.���� � �u���� ��� �������(��� ��������,� X�u�� �� ���

+�"���u������ �����������.��771<�7BA��DC��79,�

Q� �����G�� �,� -��������� �� � �� ��"� �� �����,� ���� �� ��������� �7:�<� �7A� 11@�

���,�

/ ��� �<� � . �5� X�<� )��"��� Q<� ) ����� X�<� * ������ %Q,� �.���u���� �� ���

������"����� ��� ������ � ����.���� ��� ��5 ����� .� �u��u��� M��5�

������� ��� �u���� ��� 5. �u��� �,� �����u� �<� +�"���u������ ���

%�����"�����1;;9<�B@AC;�CD,�

Page 152: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���9D���

/��� � �<� ��������� /<� /����� *<� 0 �� � � �,� &���u������ ��� � ����� � ��� ���

� ����.���� �������� ����� ��� ������ � �u���� ���.���� ����� ��� �����"���

��� ���������"��"u��� ���M��,�X�u�� ��������� �����������777<�CCA�119@�

1197,�

/��������/<�������0/,� 5 � �����( ��������������������u� �����.���� ����5���� ����.�

���� �u�����������,�X�u�� ��������� �����������7C7<�@DA�CB�DB,�

/���� �&<� /��Gu����� 0�,� �.������.� ��� ����������������� ������ ���.��,�

65�����������.��779<�97A�D��7@,�

/���� �&<� ��*� �5� XX<� � � �5�� �*,� ��������"��� ����� ����� ��� ���� ����u� �� ����

���� ����� ��� u��������(��� ��u��� �� � �� � �u������� ��� �������� � ��,�

�.������.��7CD<��:A�1:C,�

/���� �&,� �� �������"� ���5��� ���� ������� ����u���� �� �� ������ ��� ���(����5 M���

���������.��,�65�����������.��7D@<�1�A�CBC�C7;,�

/���� �&,� �2u�����u�� ��� ����2u�����u��� ��.�"������ ����� ��� ���.��,�

65�����������.��7D7<�9�A�D:�79,�

/���� �&,� P ���� "���� ����.� ��� ���� ���� ����� �����.� ��� �������(��� ���

u��������(�����u����� ,�X�u�� ��������� ���������������7D;<�:9A��C7,�

/����*<����������/<��������u����<�+�� ���-<�&���u��&<�/��� ��<�0 �� � ��,�%�������

���� � ���� �������� ���<� M �����<� ��� ��5.�� ����A� �������� ��� "�����5 M�

"������� �.��5����� ��� �� ����.� ��� ��� ������ �������� ������ ���.��,�

�.������.�1;;1<�@:A�1;@�1�1�

/�� +<� ������ �P0<� � ��� &�<� 6��u����� �!,� � 3��u�� �u���� �� ��� ���(��� �� ��

���.��� ��� �� ����� �� �5�� �3" ����<� 5 ��5���� ��� 5 ��5��� � ����.���

�� �������������"����,�+�"���u�����<���������.� ���%�����"������77;<�1A�

9@:�9:;,�

/������� *�<� P���5�� +P,� ������� ���.�� ���"5����.� ��� �� �u ����,�

65�����������.��7D@<�1;A�@;C�@�:,�

Page 153: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���97���

/�u�S<�P ����<�)��.� G�*+<���u��5�6%,��u���� ��� ����������������"���u����������

���.��� ��.�"��������� .� ����������� ���M�����(���T� ���

����(���T�������� ����,�65�����������.��77B<�@:A��CC� ���,�

/����� ��&,���u���������5������������ �u� ����<��������( ����� ����u��u������������

������u� �����.���,�&5%��5����<�0 ���� ��8��������.����-��� ��<�%u���<��771,�

/������G� X�<� ���5�"� �P),� &���������� ��� ����(���� � � ��� ��� ������� ������ .�

�����5.���u�"5�3���,�0 �u����7:7<��D9A��97@��97:,�

/u�Q)<�*������-<�* �� �5����<����*�����),�&���� ��.���� ���5��� ���� �����.�

�� ������������.����������� ����� ��������� �������( �����������.����� �u����

��������,�������� �.�+��������7DC<��1�A�1:7�1B;,�

/u.��� �X<� *�5����� +�,� /���� ��� %� �5� �� /�M� 6��"�� �u���,� ����.� ��� <�

0��� ��.<��!<��7@;,�

/u.��� �X,� 65�� �������� ����� ��� ��� ����� ��������� ��� ��� "����"� ��,� ����.� ��� �

�79C<��A����@,�

� 5��u�( ��5��+<�� ��������<������&<�S�� �����6<����Q�u����,�!"����( �����

��� � ���"��� �������� ����� "�����u��� ���� ������ ���.��� "���u���� ��������A�

������� ��� ������"���� �� �� ��<� �M�����"� �������� ��� ��.�"������ ��� ���

�u������ ���u����� ��� ���.����� �u���� �,� X�u�� �� ��� +�"���u������ ���

��������.��77:<��;9A�99�97,�

� 5��u�( ��5��+<�� ��������<�� ���� �������� -<�%��Q�u����,������" � �����

��u�.�����5�������������������"� ����������������������������� ��������u���������

��������� �u���� �� ��� ���������� ������ ���.��,� 65�����������.� �779<� 97A�

�17���9;1,�

� 5��u�( ��5��+<�� ��������<�S�� �����6<�%��Q�u����,� ��" ���������1����"�

�������� ����� ����u�� ����������� ����(���� ��� �u���� �� ��� ��������� "���u����

� ��������.��,�65�����������.��77@<�@1A��9D7��97C,�

Page 154: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���@;���

� �� ����� ��X/,� .������� �� " � ������� ���� � ����� ������ ���.�� 2u ���.,�

u������6�"�������������� �.���������� ������� �����������7DB<�9@A�1�B�

111,�

� ���"� �<� /���� �&<� �������� �,� ��������.� ��� � ������ ��� �5�� �������� ���

��������� ��� ��,�-�A�/��������5�����(����� ��<��u������X<�/ ���0<�����������

=���>� + �&����<���� �+ ���<������� <�1;;@<�9C��971,�

� ���"� �<� ���������� &<� %���.^�� �,� ���"5����.� ��� ���5������.� ��� ��� ������

"���u�������������.��A�-�"��� �����������5������.�"������ ����,�)u� ��

+�"���u�������77:<��;A�9;;@�9;��,�

� ���"� �<� ���������� &<� � �� / ��������G�� �<� 6�u(�� X/<� %���.� �,� �u���� �� ���

�� ����.� ��� ����5� ��� ���(��� �5 M��� ��� ������ ������ � ����.���,�

+�"���u�����<�0u�������� ���%�����"������77:<�9:A�9��;,�

� ���"��<�����������&<�P���� <�%���.��,���������������u�����"�����u��� ����u��u���

����������� ������5 M��������u���� ��������(���������� ����.����"���u����

��������,�X�u�� �����+�"���u������ �����������.��779<�7CA�B:�B7,�

� ���"��<�� ��%���HM �����&<���������,�+������"�������������.�"������ ��������

� ��������.��,�65�����������.��7DC<�1CA�B7�C7,�

� ���"� �<� � �� ���� HM ����� &<� ��5������ �<� ������� �,� &���� ������ �����M����

�� ���������� ��������.���"���������.��������� ����,� �.��/��������7DB<�CA�

1C;�1C9,�

� (u�� &<� + ��� P�<� /���� �&,� Q�������� ��� M ���� ����� ��� �5�� ��G���5���� ���

���� ����u� ������(���������u����� ,� �������"5.������.��7D@<�BA��7C,�

� (u��&,� u���������#u�.�������(��� ����5 M��������,����,�&������������7B:<�1@A�

��C:���D1,�

� (u�� &,� �2u�����u�<� 2u ����2u�����u�<� ��� ����2u�����u�� ����(���� ���

� �� �� �����.��,� �������"5.������77;<��CA�:9,�

Page 155: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���@����

��� *������ /Q<� %u"� ����� � <� S�u���� +,� �.�"������ ����� ��� �5��"� ���.���

u�������5.�������.���,����� ��+�"���u���������������779<�9;A�1C9�1D;,�

���/ u�5����QX<���5� ��+X<���� �� ��%�<���������*<�� ����5��%<��� � �G�+�,�

�� ����.����������������������.����u��u��������.��5���������u�������u�,�

&���������� ��� �u��� �� �� ������.� ��� +�"���u������ ������.� �7D7<� 1�A� 9B�

���,��

�� u��.� 6 <�� (( ��+<� %������ ��<�� �� X<�Pu�*<� �""�� �*<� �""�� �*�<� %��

��� ������ %<� % .� �0,� 5������� �� ���� ������� ��� % .�B<� ��� ������

"���u����"������.��,�65�����������.�1;;9<�B;A��:B7��:D;,�

��P���� ���+�<�*�����P�<�/�����&,�!����������"�����������u��� ���5u� ��

�� ����"���� ����� ������"���� ��������u���,� �.������.��77�<�1DA�:19�

���,�

���������� &<� � �������u���� �<� P���� <� ��u��� u3� X�/<� � ���"� �<� %���.� �,�

5 � �����( ����� ��� �5�� ���.����"5��� ������.� ��� �3�����u�� "������������

����u�������������������u��u���� ����u��u������� ��������.��,�������.����

+�"���u�������779<�@7A�:D1�:DC,�

����.�%�<����������Q+<�������+/<�P���5��+P,�!������"��u���������u�����������(���

�5 M����5��"����.��,�65�����������.��7D@<�11A�@99�@@9,�

���.� ��)6,�����M���,�-�A�/��������5�����(����� ��,�-�A��u������X<�/ ���0<��������

��<����,<� + �&����<�/������<�1;;@<���@,�

��. ����� )<� ��5� �5�� 6,� /�2u��� ��������� � "��� ����(���� ��� ��u��� ���.��,�

X�u�� �����+�"���u������ �����������.��7DB<�CDA�@C�,�

����� +�<� �� � �G� +�,� ���� ���� ����<� "���� ����.<� ��� ������ ��u� ���.�

�5 ����� �u����� ��� �� ��������� ������"����� ���� �� ��,� X�u�� �� ���% ��.�

���������7DB<�B7A�71C�7@9,�

0 � ��6,�65����"���������������������� �u� ������.���������������� ���"�������

���.���,�65�����������.�1;;�<�::A��17���9;�,�

Page 156: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���@1���

0 �� � ��<�% ���� ��<�* ��u���<�/��� &<��� �� ��<�/��� ��<� "" ��&,�+���"�����

�.��5����( ����� ������� �� ����.� ��� ���������� ������ � ����.���,�

65�����������.��77:<�@9A��9C���9CD,�

0�� � ���6/<�%���.����<�*�����P<�%�����G.�X+<�6� ��R <�S ���R,� ��" ������

��� ��� ������ �������(��� ������ ���.��� �u��u���� ��� Q�!�� ��� �!�� ���

��.�"��������� .� ���M� ����(���� ��� �������� ����,� 65�����������.� 1;;@<�

B1A@9C�@@7�

0��5�� �� X�,� %�����"����� ��� �� ��"� ����� � �� ����,� &���������� ��� ������.� ���

�3"������� ��������.� �������������799<�9;A�����O���9,�

0��� ���),� �.�"������ ���������� � ������.����������������GA� u�������� �u��

������� ��5������,�65�����������.��77�<�9:A��;7��1@,�

0��� ��� ),� +������ ���u���� ��� ����(���� �3"��������� M��5� ���.��� ����� � ���

��� ��,� -�A� ����(�� S<� �����u3� 5� =���,><� P���5�"� ��� ���.�� ���

!��.��������(���<� ������������u�� ����������u3<�/.��<��7DB<��7:�1;@,�

!�u���0<�6�u��u���S,�0����u���� �������� ���������� ���,�X�u�� �����+�"���u������

�����������.��7C@<�@�A�9�9O91;,�

!5��5���<����5�6<�� G �����Q<��u#�5 � �0<�S��5�� �6<�6���� ���),������������

������ ���u�� "�������� ��� �u��u��� ����u�� ��� "����M ������ �u���� �� ���

������ � ����.���� ������"��� ��� �����,� 65�����������.� �77C<� @CA� �19C�

�1@@,�

!5��5���<��u#�5 � �0<�S��5�� �6<�6���� ���),�8���u���������"��.��5.�������.����

������.�"������ �����.��������� �������� ������������������������ ����.���,�

���� ��+�"���u���������������77C<�@DA�1C�9B,�

& � �(��6<�*u�� ������)<�+�����u�(�� ��'��(�)<�*u�� �/<�/ �������<�� "�������+X,�

�������� ����� ��� ������ -��� � ����.���� ��� �� ��5.����� ��.���T�u������

���u����� ��� 5� ���� ��� "� ����3�� ����� "�������,� 65�����������.� �77C<�

@CA�DB:�DC7,�

Page 157: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���@9���

& � �(��6<�� "�������+X,� �.�"������ ��������� �� �� �����.��� ������.���A�

+������ �� ����,�������5������������ ������77B<��@A��1C��@7,�

& " ��"�u���� �<� +�(��� %<� %u��.� &<�P ����<� Yu���� Q<���� ����&<� /����� �� &,�

���.�� �u���� �� ��� ����"����� "���� ��.� � ���� ����� �� ������ ��� ����5� ���

���������<� ��� ����� ��� ��� ������"���u���� ������ � ����.���,� ���� ��

+�"���u��������������1;;1<�C@A�9:�@@,�

& ����5� X<� �u�G��& ����5� X<� ) ����M�+<� ������<� ������0,� " ��� ����� ��� ������

�"��� ��(� � .� ����u��� ��u��,� ������.� ��� +�"���u������ �7D7<� @;A� �;1;�

�;1:,�

& ����5�XX<��u�G��& ����5�X<�/��������+u��������/<� ���������<��.�������P)<�������

0�,������������������������( �����M��5����(����5 M��������,�65�����������.�

�7DB<�1:A�:7��B;;,�

& ����5�XX<��u�G��& ����5�X/<�P�������<�������0/,� " ��� ���������������"����.�

5�" ���,�������.����+�"���u�������7DD<�9DA���C����D;,�

& ������ %��,� 65�� ��������.� ��� ����� M��5� ���5���"��� �� �� �� �� ���� �������� �����

���(�������u�,�X�u�� �����+�"���u������ �����������.��7B;<��A�19;,�

& ���G� �<� �����G� X<� Q �G � X<� �u�G � X,� -�� ������ ���5��2u��� ��� ������ ���.���

� �u� ����<��������( ����� ������.���u��u������u����������5�����5���� �� ��,�

+�"���u�����<�0u�������� ���%�����"������7D7<�17A�B���B�B,�

&���������X<� /���+��,� -�"������� �u������u�� "���� ������ ����� ���.�� �� �����,�

65�����������.�1;;9<�:7A�BDC�B7C,�

&�� ���/<�Q����P�<������������QX,�&���u�����������3���� �������������(���������

���.��,�������� �.�+��������7D:<���CA�B;DOB�;,�

&� ���� /<� Q���� P�,� /��5�� ��� ��������� ��������"��� � �.���� ��� ������ ���.��

�������� .� ��� ������ ��� ��� ����� �������( ����,� X�u�� �� ��� ���������

+�"���u������\�*��������77:�=���"����>,�

Page 158: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���@@���

&� ����/<�&� ���� <��5�"5����%/<�Q����P�,� �� � ��� ���9)�u������������"�� �����

��� ������ ���.��� ��� 5��5� ��� ������ ������"���� �� "������ �,� �����u� ��

+�"���u������ ���%�����"������77@<�97A�9C:�9D9,�

&����� <�+�M����/��,��������(����� " ���.����u����"��� ��(� � ���������(���� ���

CK ,�0 �u����7:1<��B7A�B1B�B1C,�

&����� <� ����5� �8<� & �G��� ��,� +���� �� ��� �"��� ��(� � ����� �������� ����� ���

��5.�� ����� ����M����"�� �u���,�0 �u����7@7<��B@<�BBB,�

&��� ���XP<�/�����&,� 5�����������������.����� �� �� �����.��,�65�����������.�

�77@<�@�A��;���;B,�

&� �5��� +�<� � ����� �/<� ����� ��<� +��� X�<� �.������� P)<� ������ 0/,� 0u��� ��

�� ��"� �� ����� ��� �5�� ������ ���.�A� ����������� ��� ������ �u����� ���

����"��������.��,�������.����+�"���u�������7DC<�9CA�D:7ODBB,�

&� �5��� +�<� ������ 0/,� ������������ ��u"����� ��� � ��.��� ��� ������ ���.�A� ��

"������� �.���"���,�65�����������.��779<�97A�:B��:BC,�

&� �5��� +�<� ����� ��<� ������ 0/,� 0u��� �� �� ��"� �� ����� ��� � ��.� "��� ���.��,�

������.����+�"���u�������7D7<�@�A�@�@O@�D,�

&� �5���+�<��"������<���5 �����++,��� �u ����������.�"������ ��������5��2u�������

���������.��,�65�����������.��7DC<�1DA��7:�1;@,�

&� G� *<� % ���� � �<� /��� &<� 6���5���� �<� "" �� &,� !�u�� "��G�u"� ��� �5��"A�

���������.���� ������������.��"���u�������������� ����� ������5��������"����,�

65�����������.��777<��:A���;:����@,�

&u�5�&<���G��������<����*�M ��/<�6������),� �.�"������ �������� ���������������

���.��A� ������� ��� "������� �."�� ��� �������� ����� �u����� ����(���� ��� ���

��"��������u������u��u������"�����5 M��u���� �,�65�����������.��77D<�:;A�

@7:�:;B,�

Page 159: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���@:���

+ ��� P<� P���� �<� Q��.� <� P5������5 �� %,� %�����"����� ��� ��u��� ���.���

��.�"���������.��������� ����,� X�u�� �����+�"���u������ �����������.��7DC<�

D;A�@77,�

+ ��� P�<� � 5.� �,� -�������� ��.�"������ ����� ��� ��u��� ���.��� �� O�7BK � .�

�������� ����,�0 �u����7D:<�9�9A�:C9�:C:,�

+ ���P�,� �.�"������ ��������� �� �� �����.��<�� �����<� ����� �� ������u��,�

-�A� �����"�� �.�������������.A����������������( ����� ���0u��� ��6� ������

���� �� ��<�P���<� %&<� H�����G��P�������� =���,><� )u� �� &����<� 6�M � <�

0X<�1;;�<��C9��DC,�

+ ��� P�,� � ������ ��������� �5�� �u���� �� ��� ��u��� ���.��� ��.�"��������� .�

�������� ����,� �.������.��7DC<�1@A�9DC�@;1,�

+���5�� �5� )%<� /�����5� X<� ����� 8<� ����� *,� &���� ��.� � ���� ��� ���5� �����

u��� ��� ������� ��� ���� ������������������.���"���u������������,�X�u�� ��

���+�"���u������ �����������.��771 <�7:A�9B9�9C;,�

+����5 ����� �<� Q ��(� 5<� %�u������� X<� ������ .��� 5,� %�����"����� ��� ��u���

���.��������M�������������� �� ���u��� �� "�����.�"������ ����,����5�����

���*.�������.� ���!���������7DD<�1@@A�99,�

+�� ���X<�)�.� ��S<�/�.������&<�&� ��X,��u���������u����A������5��2u�� ����������

�� ������������������.������(�������5����� M,�65�����������.��7D9<��7A�

�@:� ���,�

+������%<������������QX,� &�����"���� ���"� ���������.�� �u��u��,�&��������������

�5�� D�5� ���u �� �������� ��� �5�� ������ �� ���.�� 6� ������ ������ ����<�

0 �5�����<�6��������<��7D7<��A�7D��;C,�

+������%<� /��Gu����� 0�<� �����������QX,�%�����"���� ��.� ��� ���� �5 ����� ��� �5��

u"� G�� ��� ��� ������ ��� ��u����<� ��u� ����� ��� ".�u� ��� .� � �����

���.���"���u������������,�+�"���u�����<���������.� ���%�����"������771<�

@A�:@C�::C,�

Page 160: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���@B���

+������ %<� /��Gu����� 0�,� 5 ����� ��� �5�� ��� ������ ��� ��u����<� ".�u� ��<�

��u� ����� �����.������u������ �u� ��������� ��������.������������,�X�u�� ��

���+�"���u������ �����������.��77@<��;;A�1:C�1B1,�

+������ %,� +�� �����5�"�� ��M���� �����.���� ������ ��� ������"����� ��� � ��.�

� �� �� �����.��,�65�����������.��771<�9CA�C:�7@,�

+�(��� %<� *u������(��� �� �<� &���(�* ������ �<� %�� / � �u����� X<� ��� ��� �&<�

/����� ��&,�����������.���u��u��� ��� �5��"����������� ������������u�A�

��"��� ����������� ����.���������"����<���.������ ���<� ��������������� �

�3"�������,�������.����+�"���u������1;;9<�BDA�19B�1@9,�

+���� 6�<� � ������� �%,� ������� ��� ���.��� � �u� ����� ����u�� ��� ��� ������

������"�������� ����������������(������������.��,������u� ��+�"���u������

���%�����"������771<�9�A�C1�CC,�

+u���&�� ���X<� 6������QX<�Q�������<� ����� ������<� 65 � � ���� 6<���u�� ���<�

+��������X,�%���������������5��������������� "�"��������M������������ ���

���������"���u����� ����.�������� ��� ��� ���"�����A� ����" � �������u�.,�

65�����������.�1;;:<�B9A�11:@�11BD,�

� 5 � �<� !���� 6<� 6 G ��� �<� ��������� �<� �u� ����� <� �u(uG�� 6,� 0��� �� � �����

�� ����� ����� ������� �� ������ ��� ���������� ������ ���.��� u����� ��5.�����

��.�������5 ����� ���"��.���.�".���������,� �.������.��77B<�99A�17��177,�

� 5 ��<��u(uG��6,��������� �������� ���������"���u�������������.��� ������������

���� u����� ����� ��� �5���� ���"� �������� ��� ��.�"���������� ��������,�

+�"���u�����<���������.� ���%�����"������77C<�7A�C@��C@B,�

� ����0<�-� ��Q<�6���( M ��,������������u� ��� ������������5���u���� ���������������

������ � ����.���� "���u���� ��������,� 65�����������.� �77@<� @�A� �;:9�

�;B;,�

� Gu�� )<� �� ������ *�<� ����u� ��� +)<� ��������� *�<� %�� 5u�� ��,�

�.�"������ ����� ��� ���.��� �� �� ��� ��� ����� "� ��� ������� ����� ���

�5��",�65�����������.��779<�97A�@;��@;7,�

Page 161: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���@C���

��5�������<�� ������HM �����&<�� ���"��,������"��� �������������"�����u�������

"������ ����������u������.���.��������� ����,� �.��/��������7DB<�CA�1B;�

1B7,�

��5��M�� � <� + ��� P�<� ��u ��� /%<�P����� %�,� �� �.���� ��� ��.�"������ ��<� ��������

� ��� ��� ��� ���u� ���u����� u����� ���������� �� ����(���� ��� �������� ����� ����

��.�"�����������5��"����.��,�65�����������.��77�<�9BA�1C7�179,�

��5������� 8<� � (u�� &,� -�"��� ������ ��� ""��� ������ ��� �5�� ����������

"������ ����� ��� ���.��� .� ����(���,� u������ 65�� ".� ��� 65�����������.�

�77;<�1A�D��D9,�

�������*,����.���� �����A�65����3���;;�.� ��,�65�����������.��77�<�9:A��C��

�D;,�

�5 ��u����� �<� / ������ �<� *u�� ������ )<� *u�� ��� �<� � �������� X<� +�����u�(�

� ��'��(� ),� ��" ������ ���"5������ �� �� �u ����� ��� ��� ����� ��� ��� ������

"���u�������������.��,�&�������������� �5���1�5�-����� ���� �� ��������

������� ��+�"���u�������771<�9A��999��99:,�

�5 M�X�<�%��� ������/<�6��u������!,������"���� "��������5.���u�"5�3��������(����

���5��2u�� ���� �5�� ��.�"������ ����� ��� ��������� ��� � ����.��� �� ���

"����"� �� �������u������.��,�+�"���u�����<���������.� ���%�����"�����

�77�<�9A�B1�,�

�5 M� X�<� Q�� � -<� � �� � �� ��� %+<� 6��u����� �,� ��� ����� ����� ��M����

�5������� �� ���� ������� ��� � "���.� ���(��� 1������ ��u��� ���.��� ���

�5�� ������������ "��"������� ��� �5�� ��.�"���������� ���u����,� X�u�� �� ���

+�"���u������ �����������.��77�<�7�A�7,�

�5������ X0,� � ������ ��������� �� ����.� ��� ����5� ��� ���(����5 M��� �5��"� �����

���.��,�65�����������.��771<�9CA�C�9�C1�,�

��� �����<�/ �����+%,�-���������������( ��������������������u� �����.������ �����

.�� " �����".,�������.����+�"���u�������7D:<�99A�@DC�@7@,�

Page 162: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���@D���

�G������� X<� ��.��� ��<� ������ P+,� �� ���" ������ ��� �M�� ���������� ���5���� ���

����(���� 5����� ���.��,� X�u�� �� ��� +�"���u������ ��� ��������.� �77�<� @@A�

C�@�C�B,�

�G�(.�(�M�G � �<� ���� �� H,� ���� ����� ��� �������� ��u��<� �5��"� ��� ��M�

���.��,�65����������.��7D7<�91A���:��11,�

�� ���0&<�6 G�� �6<��2u������/<��������+&<��������*�,�����M�"�����u��������5��

��.�"������ ���������2u�������.��,�65�����������.��7D:<�1@A�@:�:D,�

����5��8,�&�������������5����.�����u���������(���� ����5 M���������������������,�

/ ������7:;<�1A�7�;�7��,�

����5� /<�&������6<��""����Q�,���������������"M������.����u�����"������������(����

��� ���"M���� "�����5 M� ��5.�� ����� ��� �� ����.� ��� ������ ���.��,�

65�����������.��77@<�@�A��1BC��1C�,�

����� ����0<� �u�G����� � <� &� ���� <� /�����&,� -�� ������ ��� ��� ����� �u���� �� ���

��.�"����������5��"����.��,� �.������.��77:<�91A�CD�7�,�

����� ����0<�P �����.��<�&��� ���XP<�� �������<��u�G������ <�/�����&,�/ ���

"���u�����������.�"��������5��"����.�����������.�����������������( �����

��� �"�� �������.���,� � �� ��X�u�� ��������� �����������77B<�CBA�@B:�

@BC,�

����������� �<� 0��� ��� ),� �.�"������ ����� ��� ������ ��� ������ "���u����

���.��� u����� ��5.����� ��.���� ��� ����������� ����(���� ��� �������� ����,�

�.������.��777<�9DA�7:��;:,�

��u( � X)<� �"���� �Q<� � ���� %6,� ������u� �� �.� ����� ��� �� �� �� ��������

�����������u������5��������u� �� ���� ��.��u�� ��"5 ��������5�������u���.���,�

������.����+�"���u�������77C<�:BA�@D9�@DD,�

���"���� & <� ��M ���� +*,� +���"� �� ����� ��� � 5u� �� ���.�� M��5� �u��2u����

�u ��"���� ��.,�/ ������7CB<�-A�DD;�DD1,�

Page 163: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���@7���

�������/<�+���X�,�0u��� ����"���� ����������u��� ���� ��"� ���� ������.��,�

������.����+�"���u�������7DD<�97A�B:COBB@,�

�����������M� %�<� *������ �%,� &���������� ���� ��� �� ���������� �5��u�5� �5��

�� ������ ��� ���������������� ������ ���.��,� /�������G� &���u������ ��������

1;;;<�B1A�19C�1:�,�

�u(uG��6<�-�5�� �6<�� G ��S,� �.�"������ �����������������.����������u��M��5�

��.������ =�,@� �>� ��� �u�����,� X " ����� X�u�� �� ��� ���� �� +�"���u������

�7D7<�9:A��1:��17,�

�u(uG�� 6<� 6 G ����<� S � ������<� ����������<� � 5 ��<� � G G� � �)<�!����,�

&���� ��.�� ��� ����u���� ������u��u����������������������(������������.���

���(��� ��� � ���u�� ��.�"������ ���� ��� �5 M��� u����� � �������"� �.����,�

65�����������.��779<�@;A�B:��B:7,�

�(�����<��5������X0<��(����Q,�!��������5 � ���������������5��"� ���� ��������.��,�

�.������.��7D7<�1BA�17C�9;�,�

�(���� �<� �5������ X0,� !������� ��� ��.�"���������� �������� ��� ��.�������u������

���u������ ���� .�9���u������.��,� X�u�� �� ���+�"���u������ ��� ��������.�

�7DC<�D;A�9;7,�

�(���� �<� �5������ X0,� �u������ ���u����� ��� ��.������ ����� ��u��� ���.��� ���(���

� "���.� ��� ��2u�����������,� X�u�� �����+�"���u������ �����������.��7DB<�CBA�

@;��@;D,�

�(�����<�H5 ���X<�)u�����+,�+ "�����.�"������ ���������5��"����.���.��������

�� ������ ����� ��2u������������� "�u�� ����D;W ,�+�"���u�����<���������.� ���

%�����"������77;<�1A�B�9�B�D,�

�(���� �H<�P������� %&,� �u���� �� ��� ���������� �5��"� ���.��� ��������� ��� �������,�

65�����������.��77@<�@1A�DD��DD7,�

Page 164: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���:;���

6 �5�G M � �<� !���� 6<� Q����� �<� � �5�� � 6<� Q � �� �,� �u������u�� �������� ����� ���

������ � ����.���<� �������� .� ��������� � �u� ����� ��� �������( ����,�

�����u� ��+�"���u������ ���%�����"������779<�9@A�1BB�1C�,�

6 G � � 0<� !5�� � 0<� 0u� �� 6<� -�5�G M � S,� ����"����� � ���� ����� �� ������ ���

X " ������� �G�� ��������.���"���u������������,�������� �.�+��������77;<�

�1BA�:D��:D1,�

6 G 5 �5��S<�Q � � M �),������������2u���� �����"����������5���� ����.�������(���

�5 M�����u������u� �� ����� � "��� ����(���,������u� �<�+�"���u������ ���

%�����"������77;<�1BA��;:���;,�

6������)+<�*����&*,�%��"�����(��������5��"����.��,�65�����������.��7D@<�1�A�

1BD� ���,�

6������)+<�P5������5 ��%*<�+�M����/��,��u������u���u��u����������������5��"� ���

� ������ ,�X�u�� �����+�"���u������ �����������.��7C1<�9;A�@79�@7C,�

65� u��� <� /�� ���u�� � <� )u����� +)�,� +�"���u������ ��� � �� ��� ��� � �,�

��������� �G�����<�& ���<��779,�

65������<�*u������,����.�� �� ������ ����� ��� �u��� ���A�65�����5�������5�����

���� 5� ��5� �������� ��� ����"� ����3�5 ����,� /�������G� &���u��������������

1;;;<�B9A�1:9�1B;,�

65���� u3� XQ<��.�����P<�*���� u3� //<�����(��S<�+�u����� X%<� ���u�� ��� X+<�

*��G�� +�,� �� �u ����� �� ��� ������ �u��u��� �.����� ��� ������ u������� ���

����u��� �"��5��� �� ������ ���� �u��2u���� ���.�� ����u��u��,� +�"���u�����<�

��������.� ���%�����"������771<�@A�:C9�:D9,�

65��5�06<�6 G ���)<�S �5�� ��,� �.�"������ ��������������������M���5������"�����

� � � =���������>�.��������� ��������5��,� �.��/��������777<�1;A��B9�

�C@,�

65��"����X*<�* ������%Q<�&u�5��&<�������� ��P)<�6������)+,�/ �����5�M���5��

��� �������� .� �u��u��� �.����� u����(��� �u����� ��� ������ "�������� �����

Page 165: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���:����

������"�����������������.��,�������.����+�"���u�������77:<�:9A��9D:�

�97�,�

65��"���� X*,� ��" ������ ��M���� ��� ����� �������� ��� ��� ������ "���u���� "���

����� ����� ���.��� ����� ��������� �u��� ���� =+����M>,� +�"���u�����<�

��������.� ���%�����"��������77C<�7A�9@��9:@,�

6��u������<�&�u� ��<������ ���/<�Q��.� ,�8��� �� "�������(�������� ��.���� � ���

�� ���5u� �����.��� ������5���������u������.��,���������.� �����������.�

�7DD<�@7A�D11,�

6��u������<�&�u� ��<�Q��.� ,�8��� �� "�������(���A�����M���M������ �������������

���5���������.����.�"������ ����,���������.� �����������.��7DC<�@DA�D@9,�

6��u������,� �.�"������ ����,�������5������ ���u��������77;<�@BA�B7:,�

6������ /-<� )���5� �*,� ��u���������� � ���� ���������� ���� �� ���� � �.���A� �� ������

""�� �5� ��� �������� ��� � �.(�� "������� u��������� .� ��u���������,�

X�u�� ���������5������.� ������"5.��������5����1;;;<�@:A���1�,�

8�5�#�� ��<�!Gu� �6<�0 G . � ��<���#��Q<�-�5�� �Q<��u� � �)<�-�u�5���<����5�6,�

+�� �����5�"� ��M���� �5�� ����� �u���� ��� 2u ���.� ��� � .�D� ������

� ����.��,� &���������� ��� �5�� � ��� X " ����� ���� �� ���.�� 6� ������

������.��7DD<�7A�9C�9D,�

� #� �*<�����5�&X<�)����&<�*�����6<� �������),��u������u���������� ��������� ��.�

�� ������������������"���u�������.���M��5��5���"���"u�������� M�=!&�>�

���5��,� �.��/��������77C<��DA��7���7:,�

� #� � *<� )���� &<� *����� 6<� ������� ),� � ������ ��������� �u���� �� ��� ���������

"���u���� ������ ���.��� ����� �������� ����� ��� ������� ������ M�

��5.�� ����,����� ��+�"���u���������������77B<�@:A��7��1;;,�

� #� � *<� )���� &<� *����� 6<� ������� ),� !��� ��� ���������.� ��� ��������� ���.��

"���u������ ����������� ��������� ����,�65�����������.��77B<�@:A�BD9�BD7,�

Page 166: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���:1���

� #� � *<� )���� &<� *����� 6<� ������� ),� �u���� �� ��� ������"����� ��� ������

� ����.���� "���u���� ��� ������ ����� �������� 5 ��5���<� �������� ����� ��� ���

��� M���5.�� ����,�X�u�� �����+�"���u������ �����������.��77C<����A�B:�C;,�

� #� �*,��������� �����������������.���� ������.��,����.��6� ������0�M��������

�77C<��:A��1��D,�

� �� ���� �uM�� � �<� ��������� �<� !��G�M��#�#�� +<� &�#������� +<� Q�����G3� &+,�

�.�"������ ����� ��� "���u��� ��� ��u��� �� A� ���M� ����u�� u��� �� "���

����(���,�)u� ��+�"���u�������77;<�:A�B�7,�

� �� ����� �<� ��� Q�u��� �,� �� ���" � ����� ��u�.� ��� ��� ����� ��� ��� ������ ��������

������ ���.��,� &����������� �1�5� -����� ���� �� �������� ��� ���� ��

+�"���u�������771<�9A��9B9��9B:,�

� �� ����� �<� ���#��� &<� � �� �� �������� -<� � �� ���� �� ����� X<�� 5��u�( ��5�

�+<����Q�u����,�����5������u����u����������� ���u��� ����� ������� ������

��� ��������� "���u�������.��� ������ ��.� � ����,�65�����������.��77@<�@�A�

D::�DBC,�

� �� ����� �<� � �� �� �������� -<� � 5��u�( ��5� �+<� %��u.G��� )<� ��� Q�u��� �,�

��" ������� ����������������������(������������.������ ��������5�������� ��

������������ ����������������� � ��,�65�����������.��771<�9DA�7;:�7�7,�

� ��P �������G�%�� /��uM���<� ������ �X*<� %���% �� X)*,� ����� �� ����"�����

�����M���� ��� ������ "���u������ ��� ������ "����"� �� ����� ���.��� �� �� ������

��u�.,�65�����������.��77D<�@7A�DD9�D7@,�

���� �/�"�(��<�*��( ��(��u������<�* ��� �* ��� �+�<�%�����u�(��<� �������X,�

65�������������"�����u���� �� ���� �u�������u� ������ ��� ���� ��.����.��

������"����� ��� ���"����� ��� �u"����u� ���.� ��)� ��� ������� ��� �5��",�

65�����������.�1;;:<�B9A��7C9��7D9,�

����G��� ��<� )u� SR,� %������ �� ������ ��� ���(����5 M��� ������ ���.��,�

65�����������.��771<�9CA�19�9C,�

Page 167: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���:9���

P �G��� �Q<� ) ��M��5� Q�<� �� � �G� +�,� 65�� "���u������ ��� u�u�u ��.� � ����

����"����� �����M���� ���.�� � ��"u� ����A� �����"��� ��� �5 ��������,�

65�����������.��77B<�@:A������1;,�

P ��� �<� ��� ��� �&,� ������� ��� � �.���� ��.������ ��� �u������ �������� ������

����� ������ ��� ���.�� �u���� �� � ��� ��� � �������"� ��.�"������ ���

����� �� ����� ���(����5 M��� ������ ���.��,� 65�����������.� �7DC<� 1CA�

C1��C1D,�

P �M��G��/<�����.�+!<�)��� �5���P+,�+��u�������� ������ ����������� ���� ���

�� ��,�&�������������� �5��1C�5����u ��������������5�������� ��������.����

���� ��&���u�������79@<�11:O11C,�

P �M��G��/<�����.�+!,�-������������� ������� ��"����������.���� �����������5��"�

����� ��,�X�u�� �����)������.��7@7<�@;A�17CO9;9,�

P5������5 �� %*<� /���� �&<� � (u�� &,� �u���� �� ��� ��u��� ���.��� ���(��� ��� O

�7BK � ���1B7K ,����������7C1<��CDA�@���@�@,�

P5������5 ��%*<�P�����<�� �� ���X<�/���)<�) ���.�X�,��u���� ��������(�����u���

���.��� ����� � "��� �5 M���� ����� O�7BK ,� X�u�� �� ��� +�"���u������ ���

��������.��7C7<�:BA���,�

P5������5 ��%*,������ � ������ ������������.������ ��� ��� � �� ���.� ��� ��,�

-�A� 65�� ����(���� ��� � �� �� �� ���.��<� � � ��u�� ����� �.�"���u�<�

�7CC<�:1A�7C��;D,�

P��� �������<�&����� <�+�M����/��<������+�,�%��"�����(��������5��"����.��,�

X�u�� �����+�"���u������ �����������.��7CB<�@BA��:���:@,�

P��� �������,������5��������u��u������������ ��"u� �����5��"����.��� �������

u������"���u���������� ���M���,�0 �u����7C7<�1CCA�17DO9;;,�

P��� ����� ��,� � ������ ��������� �5�� �u���� �� ��� �5��"� ���.��� �u����� ���"�

����(���� ��� �5 M���,� -�A� 65�� ����(���� ��� �5�� � �� �� �� ����<� ������ Q<�

Page 168: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���:@���

P5 � �� X� =���,><� -��� ��u�� ����� �.�"���u�<� ������� �<� �7CC<� :1A�

�C:�1;�,�

P��� �������,�0u��� ���� ��"� �� ���������5��"����.��,�0 �u����7DB<�91;A�B9O

B:,�

P������� �/<� �� �G� P*<� ��� � /�<� ������ P)<� �u�G���� &X,� �u������u��

�� ��"� �� �������� ��������(�����������u�,����������7:�<���9A�1@C,�

P���u��-<�+�M����/��,��3"�������������5����M����"�� �u���"������ ����������M�

���.��,�������� �.�+��������7C9<�71A�BDB�B7;,�

P���u��/<�S�u���&<�%����u� <�Q����6,�0�M��""���u���������� ��� ���������� ���

"���u������ ����� ������u����.� ��� �G,����� ��+�"���u��������������1;;;<�

B;�B�A�:��@,�

P���u�� �,� 65�� ������� ��� �������� � ��<� M ������ � ��<� ��.�"���������� ����<� ���

�� ������ ������"����� ��� �u���� �������u������.����u����� ����(���� ���

�5 M���,�/�������������7C1<���A��;C���;C7,�

P������ /<�Yu����&,�%�����"����� �����u��� ���.��� ��.�"���������.� ��u��� �

� "������5����������(���,�)u� ��+�"���u�������7D7<�@A�DB,�

P�����������6�������<���������� ,���� ������5��� ��.�%�����"���������5���5��"�

���.�<�-0+��&u��� �����<�& ���<��7DC,�

P��G���� P�<� P �G��� 0X<� 6 ���� �<� ��M�� X),� )u� �� "� ������� �� ���� M��5�

���5 ������u����������(����.���,� �.�������.�1;;�<�@1AC7�DC,�

P���5�� +P<� ���������� X,� ���"5������ �� ��� "5.�������� �� ������������ ��M���� ���

����� ������������"���u����"����"� �� ��������.����������������G��"�����,�

65�����������.��77:<�@@A���BC���D7,�

Pu��5�S�<�+��������X� <�+ ���P�<�Q�u�"�6��,�%�����"���� ��"������ ��������������

"���u���� ������ ���.��� �����M���� ��.�"������ ����� ��� ����������.��

�� �����,�65�����������.��77@<�@1A��1C:��1D@,�

Page 169: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���::���

Ru� Q+<� *����� 6<� ������� )<� ).����� &,� &���� ��.� ���u������ ����� � ����� ���.����

� �u���� ����������(�����������,�X�u�� �����+�"���u������ �����������.��7DC<�

D�A�:;��:;@,�

S � �5�� ��<�� ��5�6<�)��5��)<����)<�-��5�6,������u��������u��u����.���������

���������� ��� ������ "���u������ ��� ������ � ����.���� M��5� ��"������ �� ����.�

���������(���� ����5 M���,� .�����5�����.��777<�9�A��1���17,�

S ���0�<�/u�Q)<�*������-<�&����� ,��������� ��������������� ����.����"���u����

��������,�65�����������.��771<�9CA�91B� ���,�

S���u�5�� � Q<� � G �u�5�� �<� �5���(u� �<� !G��u� � 6<� -( �G�� S,� �������� ��� � ��.�

������������������u�� �u���� ������ ��� ������u���u""������������" ���

�u��u���� ��� "���� ��� "����M ��� �� ����.� ��� ��"����� ������ ���.���

"���u���� ��� �����,� X�u�� �� ��� +�"���u������ ��� %�����"����� 1;;@<� :;A�

@C��@CB,�

S�u�����-<��� �G�����*<�� .����)��G���+�,�-���u�����������u�� ���5�����������

���������.���� �u� ����� ����������( �������������,�* �����+��� ��5��7D7<�

19A��D7�1;�,�

H5u���<�Q � ���<�!�����)<�� Gu� ��6<�� �5�� �6,� �.�"������ ���������3" �����

��u��� � ����.���� .� �������� ����� ��� ��5.����� ��.���� ���� ���u����,�

X�u�� �����+�"���u������ �����������.��779<�7DA��97��@:,�

Hu��G�� Q�<� �� �G���� �*,� /u�����(���� 5���������5 ����� ��� ������ � �u� ����� ���

������ ���.���� M��5� ��� M��5�u�� "������� �u""������ ����,� ������.� ���

+�"���u�������77;<�@9A�CD@�CDC,�

Page 170: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���:B���

�-F ����

-��������������-���������

6�� ��� �����u�������u����( � ���������"�����������������"������ ��������� ��( ����

���u� ����u���� ������������������%&�������� ��������;?��������.��?����

��,�

-������������ ������� ���� ��

��"���� ��"(�$�"���$����6�"$��*���$�%"�"�*���7���8�-9

-����"�� ������������"��������A�

� �u�������������������u� ����u�����������������;?�.�� ����������u� ����:�

���� ����"�� �u� � ������,�/u����� �� ��������������� ��" #u�� �,�

u�� ���������� ������A�

� ���� �� � � " #u�� � ��� � � ������ ��� � � u� � ���"�� �u� � ����� �� ��� �BK ,�

� ������� � � " #u�� � � �� � ���"�� �u� � �u� ���� :� ���<� .� �u���� ���u���� � �

�u��� ���� =I�������J>� "��� ���� ���� ���� u� � "��( � "���� ������ �u������ � ���

/01,�

� /u�������:���������� ��( ������I�������J<������( ��� ��u�� ��������� ������<�

���� ���� � � ���"�� �u� � ������ �BW � 5 �� � �91W � � u� � � � � ��� ��������� ��� �

;<:W T���,�

Page 171: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���:C���

� � ������� ��� ����"�� �u� ��u� ����1����,�

� �u�������� �" #u�� ����/01,�

+���������������"��������A�

� %�������� �� � �" #u�� ��3"�������� � �� �����u� �����;���.� �u�����u������� �

���u�� 4����� �u � �11K ��u� ����1;��,�

� %��� �� ��������������u� ���"�u� ����&����,�

� �u�������������������u� ����u����������������B?�.�� � ��� �;<9����u� ����

:����� ����"�� �u� � ������,�

� 6� �������� ��� ������ � u� � ���u���� ��� ��������� 9?� .� � � ��� � ;<9� �� .�

� ����������u� ����:����� ����"�� �u� � ������,�

� 6� ��������������������u� ����u�������� � ��� �;<9���.�� ����������u� ����

:����� ����"�� �u� � ������,�

� / � �����������������u���� ���.��� ����������������� ��������u�����,�

��"���� ��"(�$�"���$����6�"$��*���$�%"�",*����7���8,-9

-����"�� ������������"��������A�

� �u�������������������u� ����u����������������:?�.�� ����������u� ����:�

���� ����"�� �u� � ������,�

� 6� ����������������� �u� ����u�����������������;?�.�� ����������u� ����:�

���� ����"�� �u� � ������,�/u����� �� ��������������� ��" #u�� �,�

Page 172: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���:D���

+� ��( �� � ��u�� ���������� �������.� � �����������������"������������ � ����� �

���� �2u��������"���������*����&,�

��"���� ��"(�$�"�(���"���$��6�"$��*���$�%"�"�*���1(��"�0���"$��

����$(�7��8�����9

-����"�� ������������"��������A�

� �u������� ��� ������ ��� u� � ���u���� ��� ������������� �<:� �<� � ���������

�u� ����1;����� ����"�� �u� � �������.�� �� �������u� �" #u�� ,�

u�� ���������� ������A�

� ���� �� � � " #u�� � ��� � � ������ ��� � � u� � ���"�� �u� � ����� �� ��� �BK ,�

� ������� � � " #u�� � � �� � ���"�� �u� � �u� ���� �� ���<� .� �u���� ���u���� � �

�u��� ���� =I�������J>� "��� ���� ���� ���� u� � "��( � "���� ������ �u������ � ���

/01,�

� /u�������:���������� ��( ������I�������J<������( ��� ��u�� ��������� ������<�

���� ���� � � ���"�� �u� � ������ �BW � 5 �� � �9:W � � u� � � � � ��� ��������� ��� �

;<:W T���,�

� � ������� ��� ����"�� �u� ��u� ����1����,�

� �u�������� �" #u�� ����/01,�

+���������������"��������A�

� %�������� �� � � " #u�� � �3"�������� � �� ���� �u� ���� �;� ���� .� �u����

�u������� ����u�� 4����� �u � �9:K ��u� ����1;����,�

� 6� ����������������� �� �����"��� �������� ����� �" #u�� ,�

Page 173: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���:7���

��"���� ��"(� $�" *��*���"���$�� 6 �"$��*���$�%" �" � *��� 1

(��"�0���"$������$(�7-�8�����9

���������������u �� ������"������������6�%��<������ ��3��"������������"� (������

�������������"���"��"�������������� ��u ������������ ������<�.����2u����� ����"�����

�����"�� ������������"����������u�����:����,�

/ ��u�� ���������� �������.�� �����������������"�������������� ��( ����� ����� �

���� �2u��������"������������6�%��,�

��"���� ��"(�$�"���$����6�"$��*���$�%"�"/*����7���8/-9

-����"�� ������������"��������A�

� �u�������������������u� ����u����������������;<:���.�� ����������u� ����

�;����� ����"�� �u� � ������,�

� 6� ����������� ������ �u� ����u�����������������<;���.�� ����������u� ����

�;����� ����"�� �u� � ������,�

� 6� ����������� ������ �u� ����u�����������������<@���.�� ����������u� ����

�;����� ����"�� �u� � ������,�/u����� �� ��������������� �" #u�� ,�

u�� ���������� ������A�

� ���� �� � � " #u�� � ��� � � ������ ��� � � u� � ���"�� �u� � ����� �� ��� 1;K ,�

� �������� �" #u�� � ��� ����"�� �u� ��u� ���������,�

� ����( �� � � �u�� � ��� ����� ������<� ���� ���� � � ���"�� �u� � ������ 1;W �

5 �� ��BW � �u� �� � ������������������W T���,�

� � ������� � �� � ���"�� �u� � �u� ���� :� ���<� .� �u���� ���u���� � � �u��� ����

=I�������J>�"������� ��������u� �"��( �"���� �������u������ ����/01,�

Page 174: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���B;���

� /u�������:���������I�������J<�������u ���������� �����������BW �5 �� ��9;W �

�u� �� � �����������������;<9W T���,�

� �����u ���������� �����������9;W �5 �� ��99W � �u� �� � �����������������

;<�W T���,�

� � ������� ��� ����"�� �u� ��u� ����1����,�

� �u�������� �" #u�� ����/01,�

+���������������"��������A�

� %�������� �� � �" #u�� ��3"�������� � �� �����u� �����;���.� �u�����u������� �

���u�� 4����� �u � �1CK ��u� ����1;��,�

� %��� �� ��������������u� ���"�u� ����&����,�

� �u������� ��� ������ ��� u� � ���u���� ��� ��������� �<;��� .� � � ��� � ;<:��� .�

� ����������u� ����:����� ����"�� �u� � ������,�

� 6� �������� ��� ������ � u� � ���u���� ��� ��������� ;<:� �� .� � � ��� � ;<:� �� .�

� ����������u� ����:����� ����"�� �u� � ������,�

� 6� �������� ��� ������ � u� � ���u���� ��� ��������� ;<:� �� .� � � ��� � ;<:� �� .�

� ����������u� ����:����� ����"�� �u� � ������,�

� 6� ����������������� �u� ����u�������� � ��� �;<:���.�� ����������u� ����

:����� ����"�� �u� � ������,�

� / � �����������������u���� ���.��� ����������������� ��������u�����,�

Page 175: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���B����

��"���� ��"(�$�"�(���"���$��6�"$��*���$�%"�"/*����7��8/-9

-����"�� ������������"��������A�

� �u������� ��� ������ ��� u� � ���u���� ��� ������������� ;<:� �� .� � ���������

�u� �����;����� ����"�� �u� � ������,�

� 6� �������� ��� ������ � u� � ���u���� ��� ������������� �<;� �� .� � ���������

�u� �����;����� ����"�� �u� � ������,�

� 6� �������� ��� ������ � u� � ���u���� ��� ������������� �<:� �� .� � ���������

�u� �����;����� ����"�� �u� � ������,�/u����� �� ��������������� �" #u�� ,�

u�� ���������� ������A�

� ���� �� � � " #u�� � ��� � � ������ ��� � � u� � ���"�� �u� � ����� �� ��� 1;K ,�

� �������� �" #u�� � ��� ����"�� �u� ��u� ���������,�

� ����( �� � � �u�� � ��� ����� ������<� ���� ���� � � ���"�� �u� � ������ 1;W �

5 �� ��CW � �u� �� � ������������������W T���,�

� � ������� � �� � ���"�� �u� � �u� ���� :� ���<� .� �u���� ���u���� � � �u��� ����

=I�������J>�"������� ��������u� �"��( �"���� �������u������ ����/01,�

� /u�������:���������I�������J<�������u ���������� �����������CW �5 �� ��9:W �

�u� �� � �����������������;<9W T���,�

� �����u ���������� �����������9:W �5 �� ��9DW � �u� �� � �����������������

;<�W T���,�

� � ������� ��� ����"�� �u� ��u� ����1����,�

� �u�������� �" #u�� ����/01,�

+���������������"��������A�

Page 176: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���B1���

� %�������� �� � �" #u�� ��3"�������� � �� �����u� �����;���.� �u�����u������� �

���u�� 4����� �u � �1CK ��u� ����1;��,�

� %��� �� ��������������u� ���"�u� ����&����,�

� �u�������������������u� ����u���������������������<;���.�� � ��� �;<:���.�

� ����������u� ����:����� ����"�� �u� � ������,�

� 6� ����������������� �u� ����u��������������������;<:���.�� � ��� �;<:���.�

� ����������u� ����:����� ����"�� �u� � ������,�

� 6� ����������������� �u� ����u�������� � ��� �;<:���.�� ����������u� ����

:����� ����"�� �u� � ������,�

� / � �����������������u���� ���.��� ����������������� ��������u�����,�

��"���� ��"(� $�" �(���"���$�� 6 �"$��*���$�%" �" / *���� ���0�$���

7��8/- 9

/ � �����"�� ���� ���� ����"��������� .� � � �u�� � ��� ������ ������� ��� �� ��( � ��� � �

���� ����� �2u��������"������������9&,�

+���������������"��������A�

� %�������� �� � �" #u�� ��3"�������� � �� �����u� �����;���.� �u�����u������� �

���u�� 4����� �u � �1CK ��u� ����1;��,�

� %��� �� ��������������u� ���"�u� ����&����,�

� �u�������������������u� ����u�������� � ��� �;<:���.�� ����������u� ����

�;����� ����"�� �u� � ������,�

� / � �����������������u���� ���.��� ����������������� ��������u�����,�

Page 177: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���B9���

-����������������������

��(��0�$�$�%"$�"*��*���"���$��:���$����7-�:���9

�������� ���A�

� �u�������������������u� ����u�����������������;?�.�"��"�����������1;?�.�

� ����������u� �����;����� ����"�� �u� � ������,�

� 6� �������� ��� ������ � u� � ���u���� ��� �������� ���� ������������ ��� ���������

1:?�.�"��"�����������1:?<�.�� ���������u����3�������9;��� �@��1K ,�

� �� ��������������� �" #u�� �.��u������� ��������������'2u���,�

+���������������"��������A�

� �u�������� �" #u�� ����u�� 4����� �u � �1;K ,�

� %��� �� ������������������� �" #u�� ����u� ����u�������u�� �������� ���(�� �

������������� ��u ������� � ����u��������������� ����.�u� ����u�������� � ��� �

�<;� �,� � ������� ��� ������ ��� �� � ���u���� �u� ���� :� ���� � ���"�� �u� �

������,�

� 6� ����������������� �u� ����u�������� � ��� ��<;���.�� ����������u� ����

:����� ����"�� �u� � ������,�

� / � �����������������u���� ���" � ��u��� ��������� ����u�����,�

Page 178: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���B@���

��(��0�$�$�%"$�"�(���"���$��:��$���;<:��$�����7��9

�������� ���A�

� �u������� ��� ������ ��� u� � ���u���� ��� ������������� 1;?� .� � ���������

�u� ����:����� ����"�� �u� � ������,�

� 6� ����������������� �u� ����u��������������� ��������������������������������

@;?<��������C;��D?�.�� � ��� �;<9��<�.�� ����������u� ����9;��� ����"�� �u� �

������,�

� �� ��������������� �" #u�� �.��u������� ��������������'2u���,�

+���������������"��������A�

� �u�������� �" #u�� ����u�� 4����� �u � �1:K ,�

� %��� �� ��������������u� ���"�u� ����&����,�

� 6� ����������������� �u� ����u�������� � ��� �;<:���.�� ����������u� ����

:����� ����"�� �u� � ������,�

� / � �����������������u���� ���" � ��u��� ��������� ����u�����,�

��(��0�$�$�%"$�"�����#$�%"�� ���0�$���7�� 9

��� �� ��(�u� �������� ���� ���� "������������<� � � �u �� �������������2u���� �� ���

������ ��� 1� " ���<� ����� ��� ���� �������� ��A� "������� ��� u� � ���u���� ���

������������� �;?�.� �u���� ��� u� � ���u���� ��� ������������� 1;?<� �u� ���� :����� �

���"�� �u� � ����������� � �" ��,�/ �����������������"�������������� ��(����

� ����� ����� �2u��������"������������,�

Page 179: Optimización de métodos de criopreservación de embriones … · 2018. 7. 13. · Martínez, Alejandro Gustavo 2006 Este documento forma parte de la colección de tesis doctorales

���B:���

��(��0�$�$�%"$�"�(���"���$��:���$����7��:���9

�������� ���A�

� �u�������������������u� ����u�����������������;?�.�� ����������u� ����:�

���� ����"�� �u� � ������,�

� 6� �������� ��� ������ � u� � ���u���� ��� ��������� �;?� .� ������������� 1;?� .�

� ����������u� ����:����� ����"�� �u� � ������,�

� 6� �������� ��� ������ � u� � ���u���� ��� �������� ���� ������������ ��� ���������

1:?�.��������������1:?<�.�� ����������u� ����9;��� ����"�� �u� � ������,�

� �� ��������������� �" #u�� �.��u������� ��������������'2u���,�

+���������������"��������A�

� �u�������� �" #u�� ����u�� 4����� �u � �9CK ,�

� %��� �� ������������������� �" #u�� ����u� ����u�������u�� �������� ���(�� �

������������� ��u ������� � ����u��������������� ����.�u� ����u�������� � ��� �

�<;� �,� � ������� ��� ������ ��� �� � ���u���� �u� ���� :� ���� � ���"�� �u� �

������,�

� 6� ����������������� �u� ����u�������� � ��� �;<:���.�� ����������u� ����

:����� ����"�� �u� � ������,�

� 6� ����������������� �u� ����u�������� � ��� �;<1:���.�� ����������u� ����

:����� ����"�� �u� � ������,�

� / � �����������������u���� ���" � ��u��� ��������� ����u�����,�