Métodos generales de Métodos generales de extracción y extracción y

purificación de p.a. purificación de p.a. dede drogas drogas

Interés en aislamiento de componentes químicos elaborados por las plantas

Aislar p.a. conocidos para su uso terapéutico

Aislar p.a. conocidos para su uso terapéutico

Aislar sustancias activas a partir de

plantas no estudiadas previamente

Aislar sustancias activas a partir de

plantas no estudiadas previamente

RecolecciónRecolecciónDesecaciónDesecaciónPulverizaciPulverizaciónón EXTRACCIÓNEXTRACCIÓN

Fracciones activasFracciones activasSEPARACIÓNSEPARACIÓN

(AISLAMIENTO)(AISLAMIENTO)

PURIFICACIÓNPURIFICACIÓNIDENTIFICACIÓNIDENTIFICACIÓN

EVALUACIÓNEVALUACIÓNFARMACOLÓGICAFARMACOLÓGICA

Modelos Modelos celularescelulares

Modelos Modelos animalesanimales

Ensayos Ensayos clínicosclínicos

PROCESOS DE EXTRACCIÓNPROCESOS DE EXTRACCIÓNEl proceso extractivo se inicia con la El proceso extractivo se inicia con la interacción droga-disolvente. Dependiendo del interacción droga-disolvente. Dependiendo del tipo de principios a aislar se elegirá un tipo de principios a aislar se elegirá un método u otro.método u otro.Las soluciones extractivas son aquellas que Las soluciones extractivas son aquellas que resultan de la acción de un solvente o resultan de la acción de un solvente o menstruo sobre una droga animal o vegetal.menstruo sobre una droga animal o vegetal.

Una parte de la sustancia puesta en contacto Una parte de la sustancia puesta en contacto con el solvente pasará a la solución, la con el solvente pasará a la solución, la parte insoluble parte insoluble se denomina se denomina residuo o marco. residuo o marco.

PROCESOS DE EXTRACCIÓNPROCESOS DE EXTRACCIÓN

Operaciones farmacéuticas para Operaciones farmacéuticas para obtener soluciones extractivas:obtener soluciones extractivas:

1.- Maceración y doble maceración1.- Maceración y doble maceración2.- Percolación o lixiviación 2.- Percolación o lixiviación 3.- Infusión 3.- Infusión 4.- Digestión4.- Digestión5.- Decocción5.- Decocción

1.- Maceración y doble maceración:1.- Maceración y doble maceración:

Se realiza a temperatura ambiente (15 a Se realiza a temperatura ambiente (15 a 20 °C).20 °C).La droga se pone en contacto con el La droga se pone en contacto con el solvente en un recipiente tapado y se solvente en un recipiente tapado y se agita periódicamente.agita periódicamente.Tiempo de maceración 2 a 14 días.Tiempo de maceración 2 a 14 días.Se decanta, se exprime el residuo y se Se decanta, se exprime el residuo y se filtra.filtra.Menstruo puede ser alcohol de diversa Menstruo puede ser alcohol de diversa graduación , éter, mezcla alcohol éter. graduación , éter, mezcla alcohol éter.

    MaceraciónMaceración

MetodologíaMetodología

1.1. Moler la droga vegetal (cuando sea necesario)Moler la droga vegetal (cuando sea necesario)

2.2. Tamizar la droga vegetalTamizar la droga vegetal

3.3. Verter la cantidad necesaria de menstruo (alcohol Verter la cantidad necesaria de menstruo (alcohol al 70 %) sobre la droga. Ajustar pH (si es al 70 %) sobre la droga. Ajustar pH (si es necesario)necesario)

4.4. Guardar a temperatura ambiente en un recipiente Guardar a temperatura ambiente en un recipiente cerrado y al abrigo de la luz durante 5 días, cerrado y al abrigo de la luz durante 5 días, agitar frecuentemente.agitar frecuentemente.

5.5. Filtrar a través de algodón hidrófilo. Exprimir Filtrar a través de algodón hidrófilo. Exprimir el marco y lavar con líquido extractivo hasta el marco y lavar con líquido extractivo hasta obtener la cantidad necesariaobtener la cantidad necesaria

6.6. Dejar reposar durante 5 días a una temperatura Dejar reposar durante 5 días a una temperatura inferior a 15 ºC.inferior a 15 ºC.

7.7. Filtrar por papel. Completar a peso con el Filtrar por papel. Completar a peso con el líquido extractivo (si es necesario)líquido extractivo (si es necesario)

2.- Percolación o lixiviación 2.- Percolación o lixiviación Se realiza a temperatura ambiente (15 a 20 Se realiza a temperatura ambiente (15 a 20 °C).°C).El solvente se deja descender a través de El solvente se deja descender a través de la droga en polvo, en un percolador la droga en polvo, en un percolador (recipiente con una llave en su parte (recipiente con una llave en su parte inferior).inferior).

Proceso:Proceso:a .- Humectación de la droga en polvo.a .- Humectación de la droga en polvo. 40: 100 (solvente: droga)40: 100 (solvente: droga) Tiempo de humectación 2 a 4 horas.Tiempo de humectación 2 a 4 horas.

b .- Carga del percoladorb .- Carga del percoladorc .- Maceración: c .- Maceración:

Agregar solvente con la llave Agregar solvente con la llave inferior abierta inferior abierta hasta que gotee. Se hasta que gotee. Se cubre con 2 cm de cubre con 2 cm de solvente y se solvente y se deja 24 horas.deja 24 horas.

Se cubre con papel filtro.Se cubre con papel filtro.d .- Percolación :d .- Percolación :

Goteo 20 - 25 gotas/minuto, hasta Goteo 20 - 25 gotas/minuto, hasta agotar. agotar.

Ventajas de la percolación:Ventajas de la percolación:Agotamiento completo de la drogaAgotamiento completo de la drogaMenor consumo de solvente que en la Menor consumo de solvente que en la maceración .maceración .Menor pérdida de líquido extractivo.Menor pérdida de líquido extractivo.

3.- Infusión 3.- Infusión Solvente: agua Solvente: agua Se utiliza una cantidad variable de Se utiliza una cantidad variable de droga fresca o seca.droga fresca o seca.Se debe humectar por 15 minutos con Se debe humectar por 15 minutos con agua a temperatura ambiente y luego agua a temperatura ambiente y luego agregar agua caliente a ebullición. Se agregar agua caliente a ebullición. Se deja reposar por 30 minutos.deja reposar por 30 minutos.Infuso es para uso inmediato. Infuso es para uso inmediato.

  Elaboración de InfusosElaboración de Infusos

Metodología:Metodología:

1.     Moler la droga vegetal (cuando sea 1.     Moler la droga vegetal (cuando sea necesario)necesario)

2.     Tamizar la droga vegetal2.     Tamizar la droga vegetal

3.     Humectar: mezclar en un mortero 1 parte de 3.     Humectar: mezclar en un mortero 1 parte de la droga vegetal tamizada con 3 a 5 partes de la droga vegetal tamizada con 3 a 5 partes de agua fría. Dejar reposar por 15 minutos.agua fría. Dejar reposar por 15 minutos.

4.     Verter el resto de agua calentada a 4.     Verter el resto de agua calentada a ebullición sobre la droga humectada.ebullición sobre la droga humectada.

5.     Mantener a una temperatura superior a 90ºC 5.     Mantener a una temperatura superior a 90ºC (baño María) y agitar por 5 minutos. (baño María) y agitar por 5 minutos.

6.     Filtrar a través de algodón hidrófilo.6.     Filtrar a través de algodón hidrófilo.

7.     Completar a peso haciendo pasar a través 7.     Completar a peso haciendo pasar a través del marco agua fría y exprimir.del marco agua fría y exprimir.

4.- Digestión4.- DigestiónSe realiza a una temperatura entre 40 y 60 Se realiza a una temperatura entre 40 y 60 °C.°C.La droga se pone en contacto con el La droga se pone en contacto con el solvente, si es volátil se hace reflujo. solvente, si es volátil se hace reflujo. La temperatura aplicada debe ser menor a La temperatura aplicada debe ser menor a la temperatura de ebullición del solvente.la temperatura de ebullición del solvente.Tiempo de digestión 15 - 30 minutos.Tiempo de digestión 15 - 30 minutos.

5.- Decocción5.- DecocciónSe utiliza como solvente agua a Se utiliza como solvente agua a ebullición.ebullición.Tiempo de realización del decocto 15 a 20 Tiempo de realización del decocto 15 a 20 minutos.minutos.Para drogas resistentes a la temperaturas Para drogas resistentes a la temperaturas altas.altas.Se enfría y lleva a volumen.Se enfría y lleva a volumen.Es para uso inmediato.Es para uso inmediato.

  Elaboración de DecoctosElaboración de Decoctos

  Metodología:Metodología:

1.1. Moler la droga vegetal (cuando sea Moler la droga vegetal (cuando sea necesario)necesario)

2.     Tamizar la droga vegetal2.     Tamizar la droga vegetal

3.     Calentar agua sobre 90ºC3.     Calentar agua sobre 90ºC

4.     Verter la droga tamizada sobre el agua 4.     Verter la droga tamizada sobre el agua y ajustar pH (si es necesario)y ajustar pH (si es necesario)

5.     Mantener a una temperatura de 90ºC por 5.     Mantener a una temperatura de 90ºC por 30 minutos (baño María). Agitar 30 minutos (baño María). Agitar constantemente.constantemente.

6.     Filtrar en caliente a través de 6.     Filtrar en caliente a través de algodón hidrófilo.algodón hidrófilo.

7.     Completar a peso haciendo pasar a 7.     Completar a peso haciendo pasar a través del marco agua previamente hervida.través del marco agua previamente hervida.

Extracción continua mediante el empleo de Extracción continua mediante el empleo de aparato Soxhletaparato Soxhlet

EXTRACTOS Y EXTRACTOS FLUIDOSEXTRACTOS Y EXTRACTOS FLUIDOS

Son formas farmacéuticas líquidas, Son formas farmacéuticas líquidas, semisólidas y plásticas o sólidas y semisólidas y plásticas o sólidas y pulverulentas, preparadas con soluciones pulverulentas, preparadas con soluciones extractivas, obtenidas por agotamiento de extractivas, obtenidas por agotamiento de drogas vegetales o animales con solventes drogas vegetales o animales con solventes apropiados, mediante la evaporación de todo apropiados, mediante la evaporación de todo o casi todo el solvente y el ajuste de las o casi todo el solvente y el ajuste de las masas o los polvos residuales a las normas masas o los polvos residuales a las normas prescritas.prescritas.De acuerdo con la naturaleza del solvente o De acuerdo con la naturaleza del solvente o menstruo empleado en el agotamiento de la menstruo empleado en el agotamiento de la droga, los extractos se denominan: acuosos, droga, los extractos se denominan: acuosos, alcohólicos, hidroalcohólicos, etéreos.alcohólicos, hidroalcohólicos, etéreos.

SSe clasifican e clasifican de acuerdo a de acuerdo a su consistencia su consistencia enen::Extractos fluidos cuando son líquidosExtractos fluidos cuando son líquidosExtractos firmes, cuando son sólidos, pero Extractos firmes, cuando son sólidos, pero plásticos, pudiendo moldearse entre los plásticos, pudiendo moldearse entre los dedosdedos..Extractos secos, cuando son sólidos y en Extractos secos, cuando son sólidos y en polvo fino o granuloso y pierden por polvo fino o granuloso y pierden por desecación entre 105° y 110°C menos del 4 % desecación entre 105° y 110°C menos del 4 % de su peso.de su peso.Los extractos fluidos son preparados Los extractos fluidos son preparados líquidos de drogas vegetales, que contienen líquidos de drogas vegetales, que contienen alcohol como solvente, a menos que se alcohol como solvente, a menos que se especifique de otro modo en la monografía especifique de otro modo en la monografía correspondiente; y cada mililitro contiene correspondiente; y cada mililitro contiene los elementos constitutivos los elementos constitutivos correspondientes a 1 g de droga. correspondientes a 1 g de droga.

Tinturas Tinturas

Son soluciones alcohólicas o Son soluciones alcohólicas o hidroalcohólicas preparadas a partir de hidroalcohólicas preparadas a partir de productos vegetales u otro origen.productos vegetales u otro origen.La proporción de principio activo presente La proporción de principio activo presente en las diferentes tinturas es uniforme pero en las diferentes tinturas es uniforme pero varía según las normas establecidas para varía según las normas establecidas para cada una. Las tinturas de productos cada una. Las tinturas de productos vegetales, esencialmente representan la vegetales, esencialmente representan la actividad de 10 a 20 g de sustancia por actividad de 10 a 20 g de sustancia por cada 100 mL de tintura, la potencia se cada 100 mL de tintura, la potencia se ajusta después de la valoración. A menos ajusta después de la valoración. A menos que se especifique de otro modo en la que se especifique de otro modo en la monografía correspondiente, para la monografía correspondiente, para la preparación de las tinturas oficiales se preparación de las tinturas oficiales se emplearán los siguientes métodosemplearán los siguientes métodos..

Procedimiento L (LixiviaciónProcedimiento L (Lixiviación o o percolación percolación ) )

Procedimiento M (Maceración) Procedimiento M (Maceración)   

PROCESOS DE SEPARACIÓNPROCESOS DE SEPARACIÓN

La separación y purificación de los La separación y purificación de los compuestos de un extracto se realiza compuestos de un extracto se realiza principalmente mediante técnicas principalmente mediante técnicas cromatográficas. No obstante, existen cromatográficas. No obstante, existen algunos métodos por los que se puede algunos métodos por los que se puede lograr purificar el principio activo de lograr purificar el principio activo de modo directo:modo directo:

*Sublimación (cafeína)*Sublimación (cafeína)

*Destilación (aceites esenciales)*Destilación (aceites esenciales)

*Liberación fraccionada (alcaloides de la *Liberación fraccionada (alcaloides de la quina)quina)

*Cristalización fraccionada.*Cristalización fraccionada.

TÉCNICAS CROMATOGRÁFICAS:TÉCNICAS CROMATOGRÁFICAS:A) Cromatografía de adsorción:

*Cromatografía en capa fina (CCF, TLC)

*Cromatografía en columna (CC)

B) Cromatografía de exclusión:

C) Cromatografía de intercambio iónico:

PROCESOS DE IDENTIFICACIÓNPROCESOS DE IDENTIFICACIÓN

•ESPECTROSCOPÍA UV

•ESPECTROSCOPÍA IR

•RMN DE PROTONES Y DE CARBONO

•ESPECTROMETRÍA DE MASAS

PROCESOS DE IDENTIFICACIÓNPROCESOS DE IDENTIFICACIÓN

•FLUORESCENCIA

•RADIOINMUNOENSAYOS (RIA)

ENSAYOS FARMACOLÓGICOSENSAYOS FARMACOLÓGICOS

ENSAYOS FARMACOLÓGICOSENSAYOS FARMACOLÓGICOS1.1. CULTIVOS CELULARES (CULTIVOS CELULARES (IN VITROIN VITRO).).

2.2. ENSAYOS EN UN ÓRGANO AISLADO (AORTA, ÚTERO, LÚMEN ENSAYOS EN UN ÓRGANO AISLADO (AORTA, ÚTERO, LÚMEN INTESTINAL).INTESTINAL).

3.3. BIOENSAYOS CON ANIMAL ENTERO (BIOENSAYOS CON ANIMAL ENTERO (IN VIVOIN VIVO).).

4.4. ENSAYOS CLÍNICOS CON HUMANOS.ENSAYOS CLÍNICOS CON HUMANOS.