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Microbiologia INDT
LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA
ESTERILIZACIÓN POR IRRADIACION
Dra. Grisel Rodríguez
Lic. Walter Vicentino
INDT
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Microbiologia INDT
CONTROL MICROBIOLOGICO TISULAR
Controlar la calidad microbiológica de tejidos producidos por el Banco de
Tejidos, destinados a uso clínico,
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Microbiologia INDT
PORQUE CONTROLAR TEJIDO
DESTINADO A INJERTO ?
Para evitar trasmitir infecciones al receptor.
Bacterias y hongos son causa de
morbimortalidad
en receptores de hueso, tendon, cartílago
cornea, piel, válvulas cardíacas y vasos
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Microbiologia INDT
Calidad microbiológica ↓
Tejido sin riesgo microbiológico↓
Tejido seguros para uso clínico
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Microbiologia INDT
Quien debe hacer el control microbiológico ?
Lo solicita el Banco de TejidosLo realiza e informa un laboratorio de
Microbiología calificado, externo o interno .
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Microbiologia INDT
LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA CALIFICADO
Laboratorio capaz de entregar resultados en tiempo y forma, asegurando la calidad
microbiológica del tejido.
Personal técnicamente capacitado y habilitado por los organismos
correspondientes en cada país.
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Microbiologia INDT
LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA
CALIFICADO:
Equipamiento adecuado para las tareas
Estufa de incubación
Microscopio
Cabina de bioseguridad
Heladera
Freezer
Materiales
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Microbiologia INDT
LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA CALIFICADO
Protocolos de trabajo basados en pautas internacionales y buenas prácticas ( ASM, CDC, SEIMC )
Area física separada del resto del banco.
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Microbiologia INDT
PROBABLES FUENTES DE
CONTAMINACIÓN TISULAR
Infección no diagnosticada del donante
Contaminación del tejido por bacterias endógenas
Contaminación por el ambiente o el operador
Reactivos contaminados
Pruebas de esterilidad insensibles o inválidas
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Microbiologia INDT
ACTIVIDADESControl microbiológico sobre el tejido
- muestra representativa -hemocultivo del donante
Control sobre el ambiente y el operador
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Microbiologia INDT
ACTIVIDADES
Procedimientos de control microbiológico y esterilización
validados
Interpretación de resultados
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Microbiologia INDT
CONTROL MICROBIOLOGICOPorción normalizada de tejido o
hisopadoCabina de bioseguridad
Medios de enriquecimientoCultivo prolongado- 14 días
Temperatura 33° C
Observación diariaCaracterización de cultivos
positivos
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Microbiologia INDT
CONTROL MICROBIOLÓGICO SOBRE EL TEJIDO
Control pre procesamiento inmediato- piel del donante
- traslocación bacteriana- ambiente de la ablación
Control post procesamiento previo al empaque
- ambiente del procesamiento-microbios no detectados en control previo
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Microbiologia INDT
HEMOCULTIVOS
Dos muestras de puncion venosa inmediatamente previo a la ablación.
Puede aportar a la interpretación de resultados de cultivos
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Microbiologia INDT
CONTROL DEL AMBIENTEIncluye áreas físicas y al operador
Operador: pueden hacerse hisopados de manos y nasal .
Ambiente: placa expuesta al aire, placa de contacto,
hisopado de superficiesdispositivos cuenta partículas
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Microbiologia INDT
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Microbiologia INDT
Q.C.
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Microbiologia INDT
Q.C.
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Microbiologia INDT
MORFOLOGÍA MICROSCOPICA
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Microbiologia INDT
Cocos Gram positivos
MORFOLOGÍA MACROSCOPICAe identifivación primaria
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Microbiologia INDT
MORFOLOGIA MACROSCOPICA e identificación pimariaBACILOS GRAM NEGATIVOS
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Microbiologia INDT
CRITERIOS DE INTERPRETACIÓN
Deben estar definidos por el Laboratorio y el Banco de Tejidos
Su aplicación puede determinar:-liberación del tejido
- descarte - utilización de un procedimiento de
esterilización final.
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Microbiologia INDT
Lista de microrganismos “permitidos” y
“ no permitidos”
.saprofita o patógeno
.origen anatomico del tejido
.etapa de procesamiento
.destino clínico
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Microbiologia INDT
HEMOCULTIVO
SIN DESARROLLO DESRROLLA SAPROFITA
DESARROLLA PATOGENO
REVISION HISTORIADONANTE
SE DESCARTAN TEJIDOS
CONTINUA PROCESAMIENTO DE TEJIDOS
SIN DESARROLLO O DESARROLLO
ACEPTABLE
DESARROLLO DEPATOGENOS
LIBERACION
ESTERILIZACION Y LIBERACION
FLUJOGRAMATEJIDOS
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Microbiologia INDT
Esterilizaciónde productos biomédicos método que asegura un nivel de seguridad tal, que la posibilidad de encontrar un microorganismo viable sea de 1
en 1 millon(NSE 10 -6)
Tejidos: esterilizacion por Radiación Gama
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Microbiologia INDT
Tejidos Irradiables
OseoFascia lata
PielAmniosEscleras
TendonesEs necesario determinar dosis de irradiación
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Microbiologia INDT
Validacion del proceso de irradiación Código de prácticas OIEA
1) Calificación del tejido y su empaque2) Calificación de la instalación3) Calificación de la operación4) Calificación de desempeño
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Microbiologia INDT
Código de prácticas OIEA
1) Calificación del tejido y su empaque
Se determinará la dosis máxima aceptada
por el producto y su empaque
Se determinará la dosis mínima para
alcanzar la esterilización
Proceso de irradiación
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Microbiologia INDT
DETERMINACION DE CARGA MICROBIANA
DETERMINACION DE DOSIS
SUBESTERILIZANTE
IRRADIACION DE MUESTRAS
CONTROL DE ESTERILIDAD (Verificacion)
DETERMINACION DE DOSIS DE
IRRADIACION
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Microbiologia INDT
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Microbiologia INDT
Proceso de irradiaciónCódigo de prácticas OIEA
2) Calificación de la instalación
Demostrar que el irradiador opera según especificaciones
( especificaciones técnicas, mantenimiento, calibracion,
inspecciones )
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Microbiologia INDT
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Microbiologia INDT
Proceso de irradiaciónCódigo de prácticas OIEA
3) Calificación de la operación
Demostrar que el irradiador es capaz de operar segun sus procedimientos y
entregar las dosis apropiadas: mapeo dosimétrico en aire y con producto
simulado.
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Microbiologia INDT
Proceso de irradiaciónCódigo de prácticas OIEA
4) Calificación de desempeño
Demostrar que el resultado del proceso cumple con los requisitos especificados: medición de dosis
maxima y mínima absorbida por el producto
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Microbiologia INDT
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Microbiologia INDT
CONTROL DEL PROCEDIMIENTO DE
ESTERILIZACIÓN
Sistemas utilizados para
medir
dosis absorbida
distribución de dosis
uniformidad de dosis
DOSIMETRÍA
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Microbiologia INDT
DOSIMETROS PRIMARIOS –
DE ALTA CALIDAD , ESTABLECIDOS POR
LABORATORIOS PRIMARIOS O REFERENCIA
DOSIMETROS DE REFERENCIA –
USADOS PARA CALIBRAR FUENTES DE RADIACIÓN Y DOSÍMETROS DE RUTINA Ejs Sulfato Ferroso
(Fricke)Solución Dicromato
Etanol Clorobenzo Alanina
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Microbiologia INDT
DOSÍMETROS DE RUTINA
-POLIMETHYLMETACRILATO ( PMMA)
Se utilizan adheridos a los productosAbsorben radiación que puede ser leída
como variaciones de absorbancia en espectrofotómetro.
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Microbiologia INDT
RADIOPROTECCIÓNCONTROLES
-Dosimetría personal
-Dosimetría ambiental
-Normas de seguridad para utilización de radiaciones ionizantes de acuerdo
con el tipo de instalación
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Microbiologia INDT
Radioprotección
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Microbiologia INDT
CONTROL MICROBIOLOGICOLab. capacidad reconocida-equipamiento y materiales
-protocolos -procesamiento de al menos un control tisular
- procesamiento de hemocultivos-realización y procesamiento de controles
ambientales-resultados en tiempo
-interpretación GLOBAL de resultados-registro y archivo
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Microbiologia INDT
ESTERILIZACION POR IRRADIACION
Acceso a una fuente radioactiva ( Instalación de Irradiación )
Acceso a un laboratorio de DosimetríaAutorizaciones de operación por organismo
nacional competente
Validación del proceso de irradiación según Código de Prácticas OIEA