jatropha curcas no tóxica como alternativa para la
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INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL
CENTRO INTERDISCIPLINARIO DE INVESTIGACIÓN PARA EL
DESARROLLO INTEGRAL REGIONAL UNIDAD SINALOA
TESIS
Ensilado de pescado adicionado con pasta de Jatropha curcas no tóxica como alternativa para la alimentación de tilapia (Oreochromis niloticus)
QUE PARA OBTENER EL GRADO DE MAESTRO EN
RECURSOS NATURALES Y MEDIO AMBIENTE
PRESENTA
ELIZETH GARCÍA URIAS
GUASAVE, SINALOA; MEXICO DICIEMBREDE 2012
DEDICATORIA
A mis padres José Arnoldo García Ahumada y Rosa Armida Urias Espinoza por tomar mis
estudios como un reto en la vida, por su apoyo moral en los momentos difíciles durante
mis estudios.
A mi hermano Gerardo García Urias, por mostrarme día a día el interés en que logre mis
objetivos. Estoy muy orgullosa de ellos.
A la memoria de mi abuelita Rufina Ahumada donde quiera que esté siempre está
presente en mi mente y corazón.
A mis tías Ernestina, Jesús y Hermelinda García Ahumada, fueron una pieza clave en mi
infancia, dándome momentos de alegría y consejos para convertirme en lo que hoy en día
soy.
A mi gran amiga Guadalupe Moreno Sandoval por no dejarme derrotar en ningún
momento, la quiero como la hermana que no tuve
A Jorge Antonio Aguirre por todo su cariño e interés en mis logros como mujer,
apoyándome en todo momento. Le agradezco de corazón.
Sobre todo a mi tutor de licenciatura Rafael Jiménez Martínez por darme ánimos para
enfrentar nuevos retos en mis estudios. Estoy infinitamente agradecida.
Principalmente a mi dios que puso los medios para que lograra mis metas, porque gracias
a el existo y en sus manos estoy. Esta tesis es tuya.
Elizeth
AGRADECIMIENTOS
Expreso mi más sincero agradecimiento a mis directores de tesis la Dra. Laura Gabriela
Espinosa Alonso y el Dr. Hervey Rodríguez Gonzáles. Gracias por la oportunidad que me
dieron de trabajar y aprender de ustedes.
Al Dr. Humberto Villarreal Colmenares por el apoyo brindado y aceptación para realizar
la estancia de investigación en CIBNOR, La Paz.
Al personal técnico de los laboratorios de CIBNOR:
Al laboratorio de bromatología (Sonia Guadalupe Rocha Meza y María Dolores Rondero
Astorga) y al laboratorio de bioquímica fisiológica (M.C. Roberto Hernández Herrera).
A los miembros de mi comité tutorial: Dr. Javier Orduña Rojas†, Dr. Héctor Abelardo
González Ocampo, Dr. Sergio Medina Godoy y Dr. Juan Carlos Sainz Hernández. Gracias
a su apoyo y comentarios vertidos en cada tutorial, los cuales favorecieron el desarrollo
del trabajo de tesis.
A mis tíos, hermanos Urias Espinoza por el apoyo económico y moral que me han
brindado a lo largo de mis estudios, guiándome por un buen camino logrando que sea un
mejor ser humano.
Al departamento administrativo que me ayudó siempre con su mejor disposición en cada
trámite. A DorínOrtíz, Herlinda, Fabiola, Ricardo Báez y a mi tío Roberto Urías.
Al equipo técnico que me respaldó en las prácticas de investigación: Biol. Ely Sara López
Álvarez, M. en C, Luis Daniel García, Dra. Maribel. Les agradezco por la paciencia y
atención.
A mis amigos Fátima Camacho, Sheila Rubio, Styll Armenta, John, Celestino Vargas,
Magnolia Montoya,Libia Armenta, Héctor Leyva, Juan Carlos, Camila Sánchez, Breidy
Cuevas, Francisco Valdez, Tomás Moreno, Joaquín, Lizeth Villanueva, Brenda Villanueva.
Gracias por su apoyo, amistad, ánimo y compañía durante la maestría, por todas las
locuras y risas que causaron, por todos los favores y sobre todo por su amistad. Es lo
mejor que me queda en esta experiencia de vida.
A mis compañeros de Acuacultura y de generación. Gracias por su compañía.
Al Consejo Nacional de Ciencia y Tecnología (CONACYT) por la beca de maestría
CVU 369395, al Programa Institucional de Formación de Investigadores (PIFI) del
Instituto Politécnico Nacional (IPN), a la Coordinación de Cooperación Académica
(CCA) del IPN por la beca de movilidad otorgada y a la Comisión de Operación y
Fomento de Actividades Académicas del Instituto Politécnico Nacional. A los
proyectos financiados por la Secretaria de Investigación y Posgrado con numero
de registro: SIP20100697, SIP20103022, SIP20113584, SIP20113638,
SIP20110936, SIP20120542 y SIP20120543. Al proyecto FORDECYT-CONACYT
titulado: “Desarrollo sustentable de la cadena agroindustrial de Jatropha curcas,
para el rescate de la zona serrana marginada del Noroeste de México”.
I
ÍNDICE GENERAL Página
ÍNDICE GENERAL……………………………………………………………. I
ÍNDICE DE TABLAS………………………………………………………….. V
ÍNDICE DE FIGURAS………………………………………………………… VII
GLOSARIO…………………………………………………………………….. VIII
ABREVIATURAS………………………………………………..................... XII
RESUMEN…………………………………………………………………….. XIV
ABSTRACT……………………………………………………………………. XV
1. INTRODUCCIÓN………………………………………………………………… 1
2. ANTECEDENTES……………………………………………………………….. 5
2.1. Acuacultura y cultivo de tilapia………………………………………………. 5
2.2. Origen y distribución de tilapia……………………………………………….. 6
2.3. Hábitos alimenticios de la tilapia……………………………………………. 7
2.4. Aspectos nutricionales del alimento…………………………………………. 9
2.4.1. Proteínas……………………………………………………………………... 9
2.4.2. Lípidos……………………………………………………………….............. 10
2.4.3. Carbohidratos………………………………………………………………. 11
2.4.4. Vitaminas y minerales……………………………………………………... 11
2.5. Fuentes alternativas de proteína vegetal y animal como substituto de la
harina de pescado para la alimentación en acuacultura……………………….
11
2.5.1. Fuentes de proteína vegetal……………………………………………….. 11
2.5.1.1. Jatropha curcas L. no tóxica……………………………………………. 13
2.5.1.2. Origen y distribución……………………………………………………… 13
2.5.2. Fuentes de proteína animal………………………………………………... 15
2.5.2.1. Procesos tecnológicos en fuentes proteicas…………………………… 15
2.5.2.2. Ensilado de pescado……………………………………………………… 16
2.5.3. Factores principales del proceso de ensilaje…………………………….. 16
2.5.3.1. Temperatura……………………………………………………………….. 16
2.5.3.2. Efecto del pH………………………………………………………………. 17
2.5.4. Cambios bioquímicos durante el proceso de ensilaje…………………... 17
II
2.5.4.1. Enzimas……………………………………………………………………. 17
2.5.4.2. Microorganismos…………………………………………………………. 17
2.5.4.3. Ácidos orgánicos………………………………………………………….. 18
2.5.4.4. Proteólisis………………………………………………………………….. 18
2.5.5. Factores que afectan la solubilidad de la proteína ensilada……………. 19
2.5.6. Clasificación de los ensilados……………………………………………… 19
2.5.6.1. Ensilado de clasificación láctica………………………………………… 19
2.5.6.2. Ensilados de fermentación acética……………………………………… 20
2.5.6.3. Ensilados de fermentación butírica……………………………………... 20
2.5.6.4. Ensilados tratados con aditivos…………………………………………. 20
2.5.7. Ensilaje de fuentes animales………………………………………………. 20
3. JUSTIFICACIÓN………………………………………………………………… 22
4. HIPÓTESIS………………………………………………………………………. 23
5. OBJETIVO GENERAL…………………………………………………………. 23
5.1. Objetivos específicos…………………………………………………………. 23
6. METODOLOGÍA……………………………………………………………….. 23
6.1. Obtención de desechos de pescado………………………………………… 24
6.2. Elaboración y evaluación de ensilados…………………………………….. 24
6.3. Evaluación del proceso de ensilaje…………………………………………. 26
6.3.1. Determinación de nitrógeno total…………………………………………. 26
6.3.2. Determinación de nitrógeno proteico……………………….……………. 26
6.3.3. Determinación de nitrógeno no proteico…………………………………. 27
6.4. Obtención de pastas proteicas de J. curcas………………………………. 27
6.5. Análisis químico proximal de los ingredientes y dietas
experimentales………………………………………………………………………
28
6.5.1. Humedad…………………………………………………………………….. 28
6.5.2. Cenizas………………………………………………………………………. 28
6.5.3. Proteína………………………………………………………………………. 28
6.5.4. Extracto etéreo………………………………………………………………. 29
6.5.5. Fibra cruda…………………………………………………………………… 29
6.5.6. Extracto Libre de Nitrógeno…..…………………………………………… 29
III
6.5.7. Energía Bruta………………………………………………………………. 29
6.6. Análisis de perfil de aminoácidos…………………………………………… 30
6.7. Formulación de dietas experimentales……………………………………… 30
6.8. Elaboración de dietas experimentales………………………………………. 31
6.9. Diseño experimental de los bioensayos de crecimiento………………….. 33
6.9.1. Reproducción de tilapia Oreochromis niloticus………………………….. 33
6.9.2. Bioensayo de crecimiento de juveniles de tilapia……………………….. 34
6.9.3. Bioensayo de alevines de tilapia………………………………………….. 35
6.10. Alimentación de peces………………………………………………………. 35
6.11. Tasa de crecimiento diario….………………………………………………. 36
6.12. Factor de conversión alimenticia…………………………………………… 36
6.13. Análisis estadístico…………………………………………………………... 36
7. RESULTADOS…………………………………………………………………... 37
7.1. Parámetros de calidad del proceso de ensilaje……………………………. 37
7.2. Características físicas de ensilados de pescado…………………………... 37
7.3. Calidad nutrimental de ensilados de pescado……………………………… 37
7.3.1. Composición química proximal de ensilados…………………………….. 37
7.3.2. Proteína soluble de ensilados……………………………………………… 39
7.3.3. Selección de ensilado empleado en formulación y elaboración de
dietas experimentales………………………………………………………………
41
7.4. Proceso de hidrólisis de ensilado de tilapia………………………………… 42
7.4.1. Nitrógeno proteico…………………………………………………………... 42
7.4.2. Nitrógeno no proteico……………………………………………………….. 43
7.5. Composición química proximal de ingredientes proteicos de dietas para
tilapia O. niloticus……………………………………………………………………
44
7.5.1. Ensilado de tilapia…………………………………………………………… 44
7.5.2. Jatropha curcas L. no tóxica………………………………………………. 44
7.6. Perfil de aminoácidos de ingredientes proteicos de dietas para tilapia O.
niloticus………………………………………………………………………………
44
7.6.1. Ensilado de tilapia…………………………………………………………… 44
7.6.2. Jatropha curcas L. no tóxica……………………………………………….. 46
IV
7.7. Diseño de dietas isoproteicas para tilapia O. niloticus……………………. 46
7.8. Aminoácidos esenciales en dietas para tilapia O. niloticus………………. 48
7.9. Aminoácidos presentes en dietas experimentales para juveniles de
tilapia………………………………………………………………………………….
49
7.10. Aminoácidos presentes en dietas experimentales para alevines de
tilapia………………………………………………………………………………….
50
7.11. Bioensayos de crecimiento de tilapia O. niloticus………………………... 51
7.11.1. Oxígeno disuelto y temperatura………………………………………….. 51
7.11.1.2. Determinación de compuestos nitrogenados………………………… 51
7.11.2. Bioensayo de crecimiento de juveniles de tilapia……………………… 53
7.11.3. Bioensayo de crecimiento de alevines de tilapia………………………. 54
7.11.4. Tasa de crecimiento diario……………………………………………….. 55
7.11.4.1. Tasa de crecimiento diario en bioensayo de crecimiento de
juveniles de tilapia………………………………………………………………….
56
7.11.4.2. Tasa de crecimiento diario en bioensayo de crecimiento de
alevines de tilapia…………………………………………………………………..
56
7.11.5. Factor de conversión alimenticia………………………………………… 57
7.11.5.1. Factor de conversión alimenticia en bioensayo de crecimiento de
juveniles de tilapia…………………………………………………………………..
57
7.11.5.2. Factor de conversión alimenticia en bioensayo de crecimiento de
alevines de tilapia…………………………………………………………………...
58
7.11.6. Sobrevivencia en bioensayos de crecimiento de tilapia O. niloticus…. 59
7.11.6.1. Sobrevivencia en bioensayos de crecimiento de juveniles de
tilapia………………………………………………………………………………….
59
7.11.6.2. Sobrevivencia en bioensayos de crecimiento de alevines de tilapia 59
8. DISCUSIÓN………………………………………………………………………. 61
9. CONCLUSIONES………………………………………………….................... 73
10. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS……………………………………….. 74
V
ÍNDICE DE TABLAS
Número Título
Página
1 Requerimientos proteicos para tilapia…………………………. 9
2 Aminoácidos requeridos para el crecimiento de tilapia O.
niloticus……………………………………………………………….
10
3 Formulación de dietas utilizadas en bioensayo de crecimiento
para juveniles de tilapia…………………………………………….
31
4 Formulación de dietas utilizadas en bioensayo de crecimiento
para alevines de tilapia……………………………………………..
32
5 Premezcla de vitaminas y minerales utilizados en la
elaboración de dietas experimentales para los bioensayos de
crecimiento de tilapia……………………………………………….
33
6 Parámetros físico-químicos de calidad de
ensilados…………………………………………………………….
38
7 Composición química proximal de ensilados de pescado…….. 39
8 Composición química proximal de residuos de fileteo de tilapia
sin vísceras………………………………………………………….
42
9 Composición química proximal de ensilado de tilapia…………. 44
10 Análisis químico proximal de pasta de Jatropha curcas………. 45
11 Perfil de aminoácidos de ensilado de tilapia…………………….. 45
12 Perfil de aminoácidos de Jatropha curcas………………………. 46
13 Composición proximal de dietas a evaluar en bioensayo de
crecimiento para juveniles de tilapia………………………………
47
14 Composición proximal de dietas a evaluar en bioensayo de
crecimiento para alevines de tilapia……………………………….
48
15 Balance de aminoácidos requeridos para tilapia en cada uno
de los bioensayos de crecimiento………………………………..
49
VI
16 Aminoácidos presentes en dietas experimentales para
juveniles de tilapia O. niloticus…………………………………….
50
17 Aminoácidos presentes en dietas experimentales para
alevines de tilapia O. niloticus……………………………………..
51
18 Oxígeno disuelto y temperatura del agua del sistema de cultivo
controlado para juveniles de tilapia……………………………….
52
19 Oxígeno disuelto y temperatura del agua del sistema de cultivo
controlado para alevines de tilapia………………………………..
52
20 Concentración de nitritos, nitratos y amonio del agua del
sistema de cultivo controlado de juveniles de tilapia……………
53
21 Concentración de nitritos, nitratos y amonio del agua del
sistema de cultivo controlado de alevines de tilapia…………….
53
22 Tasa de crecimiento diario de juveniles de tilapia………………. 56
23 Tasa de crecimiento diario de alevines de tilapia………………. 57
VII
ÍNDICE DE FIGURAS
Número Título Página
1 Diagrama del proceso de fileteo del pescado que utiliza la
empresa Guasave 400………………………………………….
24
2 Especies empleadas en la elaboración de ensilados de
pescado…………………………………………………………..
25
3 Sistema de unidades experimentalesutilizadas para
bioensayo de crecimiento en juveniles de tilapia O.
niloticus…………………………………………………………..
34
4 Sistema de unidades experimentales utilizadas para
bioensayo de crecimiento en alevines de tilapia O.
niloticus…………………………………………………………..
35
5 Hidrólisis proteica de ensilado de tilapia (Oreochromis
nilóticus)……………………..
40
6 Hidrólisis proteica de ensilado de
botete(Sphoeroidesannulatus)…………………………………
…………………
40
7 Hidrólisis proteica de ensilado de congrio
cornudo(Lepophidiumprorates)………………………………
…………
41
8 Evaluación del nitrógeno proteico durante proceso de
ensilaje de tilapia………………………………………………..
43
9 Evaluación de nitrógeno no proteico durante proceso de
ensilaje de tilapia………………………………………………..
43
10 Crecimiento de juveniles de tilapia…………………………… 54
11 Crecimiento de alevines de tilapia……………………………. 55
12 Factor de conversión alimenticia en bioensayo de
crecimiento de juveniles de tilapia O. niloticus………………
57
VIII
13 Factor de conversión alimenticia en bioensayo de
crecimiento de alevines de tilapia O. niloticus………………
58
14 Sobrevivencia de juveniles de tilapia durante 60 días de
crecimiento………………………………………………..……..
59
15 Sobrevivencia de alevines de tilapia durante 60 días de
crecimiento……………………………………………….………
60
IX
GLOSARIO
Acuacultura.- Conjunto de técnicas y actividades cuyo objetivo es la cría en
cautiverio de organismos acuáticos (peces, moluscos, crustáceos, reptiles o algas)
en agua cuyo mayor o menor carácter intensivo depende del grado de intervención
del hombre en los ciclos biológicos de los organismos en cuestión.
Aireación.- Mezcla mecánica de aire y agua, en general se refiere a un proceso
mediante el cual los gases contenidos en el aire son transferidos a través de la
interface aire-agua.
Alimento balanceado.- Es un alimento que confiere nutrimentos en cantidades y
proporciones que satisfacen los requerimientos y necesidades fisiológicas de los
organismos.
Aminoácidos.- Compuestos orgánicos a partir de los cuales se constituyen las
proteínas. Dentro de su clasificación se encuentra que los hay esenciales y no
esenciales. Los aminoácidos esenciales son aquellos que el propio organismo no
puede sintetizar, a diferencia de los no esenciales que se refiere a los aminoácidos
sintetizados por el organismo.
Carbohidratos.- Son compuestos orgánicos formados por carbono, hidrógeno y
oxígeno, y distribuido de tal forma que en cada carbono seencuentra una molécula
de agua, es decir dos hidrógenos y un oxígeno. También se les conoce como
hidratos de carbono, azúcares o sacáridos.
Cenizas.- Se denomina así a la materia inorgánica (sales minerales) que
constituyente a los alimentos.
Diadromos.- Peces migratorios que se mueven entre el mar y las aguas dulces.
X
Digestibilidad.- Es el índice que cuantifica el proceso de transformación que
sufren los alimentos en el tracto digestivo. Comprende dos procesos, (i) la
digestión, que corresponde a la hidrólisis de las moléculas complejas de los
alimentos; y (ii) la absorción, de pequeñas moléculas (aminoácidos, ácidos grasos,
etc.) en el sistema digestivo.
Ensilado de pescado.- Es un alimento proteico, de alta humedad y de fácil
preservación, consiste en un producto líquido pastoso obtenido a partir de la
acción de las enzimas sobre el pescado entero, partes o residuos y es
comúnmente usado como componente de raciones alimenticias para animales.
Extracto Libre de Nitrógeno (E.L.N.).- En este concepto se agrupan
principalmente los carbohidratos, así como compuestos orgánicos solubles no
nitrogenados. Se calcula con la fórmula E.L.N. = 100 – (% de proteína + % de
extracto etéreo + % de ceniza + % de fibra cruda).
Factor de conversión alimenticia.- Es un factor que permite medir
matemáticamente en forma simple el nivel de incremento en peso de la población
de peces en relación al alimento que han consumido en un rango de tiempo
determinado, y se expresa de la siguiente forma:
FCA= Alimento consumido (Kg)/ incremento de peso (Kg)
Factores antinutricionales.-Son constituyentes propios de los alimentos
naturales sintetizados por el metabolismo normal de las especies de las cuales
dicho alimento procede y que por diferentes mecanismos ejerce efectos contrarios
a la óptima nutrición ya sea reduciendo el consumo e impidiendo la digestión la
absorción y la utilización de nutrimentos.
Fibra.- Sontodas las sustancias orgánicas que están formadas principalmente por
glúcidos estructurales vegetales, tales como celulosa (90%) y hemicelulosa, pero
también contienen algo de lignina, que es una sustancia muy poco digestible que
se relaciona con la porción fibrosa de los tejidos vegetales.
XI
Grenetina.- Es un compuesto obtenido de los huesos y pieles animales,
principalmente del cerdo, que a través de distintos procedimientos es separado de
la grasa. Su componente principal es una proteína llamada colágeno, que disuelta
en agua y sometida a bajas temperaturas adquiere peculiar consistencia, conocida
como coloidal, que se encuentra justo entre los estados líquido y sólido. Se utiliza
como aglutinante de los ingredientes en la elaboración de alimento para
organismos acuícolas.
Harina.- Producto que resulta de moler algunos cereales, tubérculos u otros
alimentos.
Humedad.- Es la cantidad de agua contenida en el alimento la cual permite
determinar su capacidad de conservación y de propagación bacteriana.
Ingrediente.- Materia prima u otro compuesto de la fórmula de un alimento.
Liofilización.- Es un proceso en el que se congela el alimento y una vez
congelado se introduce en una cámara de vacío para que se separe el agua por
sublimación. De esta manera, se elimina el agua desde el estado sólido del
alimento al gaseoso del ambiente sin pasar por el estado líquido. Para acelerar el
proceso se utilizan ciclos de congelación-sublimación con los que se consigue
eliminar prácticamente la totalidad del agua libre contenida en el producto original.
Lípidos.- Son un conjunto de moléculas orgánicas, la mayoría biomoléculas,
compuestas principalmente por carbono e hidrógeno y en menor medida oxígeno,
aunque también pueden contener fósforo, azufre y nitrógeno, que tienen como
característica principal el ser hidrofóbicas o insolubles en agua. Los lípidos
cumplen funciones diversas en los organismos vivientes, entre ellas las de reserva
energética (triglicéridos), la estructural (fosfolípidos de las bicapas) y la reguladora
(esteroides).
Materia Seca.- Es el peso de la materia sin la humedad, la biomasa es el peso de
la materia, que por lo general se expresa como el contenido de la materia seca.
XII
Nutrición.- Conjunto de procesos físicos y químicos que suministran la energía
necesaria para los organismos y proporcionan las moléculas básicas para su
organización estructural y funcional.
Oreochromis.- Es un gran género de tilapiinecíclidos, peces endémicos de África.
Los miembros de este género, así como las de los géneros Tilapia y
Sarotherodon, comparten el nombre común “tilapia”.
Palatable.- Es el grado de aceptación por parte de un animal, determinada por la
respuesta sensorial a características específicas tanto químicas como físicas
llamadas, olor, gusto y textura. La combinación de olor y gusto es conocida como
“sabor”.
Pienso alimenticio.- Es todo material único o múltiple, elaborado, semielaborado
o en bruto, destinado a la alimentación directa de animales productores de
alimentos.
Pisicultura.- Tiene por objeto el cultivo racional de los peces, lo que comprende
particularmente el control de su crecimiento y su reproducción.
Proteína cruda.- Fracción que incluye la proteína verdadera y el nitrógeno no
proteico presentes en ingredientes y alimentos. Se expresa porcentualmente como
proteína cruda (nitrógeno total x 6.25), ya que los alimentos contienen alrededor
del 16 % de nitrógeno (100 ÷ 16 = 6.25).
Supervivencia.- Número de organismos vivos después de un intervalo de tiempo,
dividido por el número inicial. Generalmente expresado sobre base anual o para el
periodo de cría.
Tilapia.- Grupo de peces de origen africano que habita mayoritariamente en
regiones tropicales del mundo. Sus extraordinarias cualidades, como crecimiento
acelerado, tolerancia a altas densidades, adaptación al cautiverio, aceptación a
una amplia gama de alimentos, resistencia a enfermedades, carne blanca de
calidad y amplia aceptación, han despertado gran interés comercial en la
acuacultura mundial.
XIII
ABREVIATURAS
µ Micras
AA Aminoácidos
AAE Aminoácidos esenciales
°C Grado centígrado
ELN Extracto libre de nitrógeno
g Gramo
CH2O2
EE Extracto etéreo
Ácido fórmico
hr Hora
Kcal Kilocalorías
Kg Kilogramo
L Litros
mg Miligramos
ml Mililitros
N Nitrógeno
NNP Nitrógeno no proteico
NP Nitrógeno proteico
NT Nitrógeno total
NaOH Hidróxido de sodio
XIV
NH3 Amonio
NO2 Nitritos
NO3 Nitratos
PC Proteína cruda
PS Proteína soluble
pH Potencial de hidrógeno
ppm Partes por millón
p/v Peso por volumen
rpm Revoluciones por minuto
TCD Tasa de crecimiento diario
W Watts
XV
RESUMEN
En el presente estudio se evaluaron dietas para tilapia O. niloticus utilizando
descartes de pescado procesados mediante una técnica de conservación de
alimentos denominada ensilaje, y pasta de J. curcas obtenida como residuo del
proceso de extracción de lípidos para la generación de biodiesel. Los ingredientes
evaluados fueron: ensilado de pescado y J. curcas sometida a dos extracciones
lipídicas; la primera a través de una prensa y la segunda con hexano.El ensilado
de pescado se preparó a partir de la hidrólisis química en medio ácido (pH 3.8) a
temperatura ambiente, utilizando ácido fórmico. Constituido de 42.29 ± 1.8 % de
proteína y 26.59 ± 0.9 % de lípidos. La pasta de J. curcas proveniente de primera
extracción presentó valores de proteína y lípidos de 29.90 ± 0.05 % y 49.66 ± 0.37
%, respectivamente. Mientras que la proveniente de segunda extracción, con
valores de 55.14 ± 0.14 % de proteína y 15.29 ± 0.40 % de lípidos.Posteriormente
se formularon las dietas a evaluar. Para desarrollarel primer bioensayo se
elaboraron 4 dietas isoproteicas (33%): control, ensilado, J. curcas y proporción
50:50 de ensilado con J. curcas. Para el segundo bioensayo se formularon 6
dietas isoproteicas (38%): un control y cinco basadas en diferentes porcentajes de
inclusión de J. curcas y ensilado de pescado. Debido al incremento de proteína en
J. curcas, después de la extracción con hexano nos permitió evaluar la tilapia en
estadio de alevín. Los sistemas de cultivo del primer y segundo bioensayo
consistieron en tinas de 270 L y 50 L, con control de temperatura, oxígeno
disuelto, registrando un promedio de 28 ± 0.65 °C, 28.1± 0.8 °C, 5.4 ± 0.20 mg/l y
6.4 ± 0.2 mg/l de O2, NH3, NO2 y NO3, respectivamente. Se manejó una densidad
de siembra de 22 organismos/m3 (6 juveniles por tina) con cuatro replicas por
tratamiento en primer bioensayo y para el segundo, 100 organismos/m3 (3
alevines por tina) con tres replicas por tratamiento. Los resultados del bioensayo
para juveniles muestran que el control presentó mayor crecimiento, seguido de
ensilado e inclusión 50% ensilado y J. curcas. Mientras que parael bioensayo de
alevinesel crecimiento fue mejor para las dietas: control, ensilado e inclusión de
25% de J. curcasy ensilado, sin presentar diferencias significativas comparadas
XVI
con el control. Por lo que se concluye que las dietas evaluadas a partir de la
mezcla de ensilado de pescado y harina de J. curcasson una excelente alternativa
para alimentación de tilapia.
ABSTRACT
In the present study, diets for tilapia O. niloticus using fish wastes processed through
a food preservation technique called silage, and also using J. curcas paste obtained
as a residue from lipid extraction process for biodiesel production were evaluated.
The ingredients evaluated were: fish silage and J. curcas, processed through a two
lipid extractions: the first one through a press and the second one using hexane. The
fish silage was prepared by chemical hydrolysis in an acid environment (pH 3.8) at
room temperature, using formic acid, protein content was 42.29 ± 1.8% and lipids
26.59 ± 0.9%. J. curcas paste from the first extraction showed a protein and lipid
content of 29.90 ± 0.05% and 49.66 ± 0.37%, respectively. While the one from the
second extraction, presented 55.14 ± 0.14 of protein and 15.29% ±0.40% lipids.
Later, experimental diets were formulated. Four isoproteic diets (33%) were
prepared for the first bioassay: control, silage, J. curcas and 50:50 silage with J.
curcas. For the second bioassay six isoproteic diets (38%) were formulated: one
control and five diets based on tha inclusion of different percentages of J. curcas and
fish silage. Because of the protein increment in J. curcas, after the extraction with
hexane, it was possible to evaluate the tilapia in the alevin stage. Culture systems for
the first and second bioassay consist of 270 L and 50 L containers, with controled
temperatureand dissolved oxygen, It showed an average of 28 ± 0.65 °C, 28.1± 0.8
°C, 5.4 ± 0.20 mg/l and 6.4 ± 0.2 mg/l of O2, NH3, NO2 and NO3, respectively. It was
handled a density of 22 organisms/m3(six juveniles per container) for the first
bioassay with four replicates per diet, and for the second one were 100
organisms/m3 (three alevines per container) with three replicates per diet. Results
from the first bioassay showe the higher growth in juveniles feeding the control diet ,
followed by 100% silage and 50:50 silage inclusion and J. curcas. For the second
bioassay the alevine growth was better feeding the control diets, then silage and
inclusion of 25% of J. curcas, but without significant difference compared with control.
XVII
It is concluded that diets evaluated from the mix of fish silage and J. curcas flour are
an excellent alternative for tilapia feed.
1
INTRODUCCIÓN
La acuacultura es una actividad económica que al nivel mundial ha tomado gran
interés debido al importante aporte de alimentos.Contribuye además con la
sustentabilidad de las zonas costeras, reduciendo los volúmenes de captura de
especies vulnerables en su entorno natural. La actividad de la acuacultura es
señalada como la actividad que más ha crecido al nivel mundial en los últimos
años, dentro del sector de alimentos destinados a la humanidad (Luchini, 2008).
Logrando un crecimiento más rápido que cualquier otro sector de producción de
alimentos de origen animal, y a mayor ritmo que la población, con un incremento
del suministro acuícola per cápita de 0.7 kg en 1970 hasta 7.8 kg en 2008,
constituye un crecimiento medio anual de 6.6 % (FAO, 2010). La producción
acuícola mundial alcanzó un máximo histórico en 2010, correspondiente a 79
millones de toneladas, por valor de 125 000 millones de dólares (FAO, 2012).
En las últimas décadas la creciente demanda de pescado y productos pesqueros
ha sido cubierta principalmente gracias a la producción acuícola, ya que la pesca
se ha mantenido bastante estancada y en algunos países se ha llegado a reducir.
De esta forma la acuacultura generó un 46% de la producción destinada al
consumo en el 2008, y ha fomentado la demanda y el consumo de especies como
camarones, salmónidos, bivalvos y tilapia. Estas especies han pasado de ser
principalmente capturadas en el medio silvestre a ser producidas mayormente en
medios acuícolas, lo que ha ocasionado el descenso de sus precios y el
incremento de su comercialización (FAO, 2010).
Los peces de agua dulce dominan la producción piscícola mundial (56.4 %),
seguido de los moluscos (23.6%), crustáceos (9.6%), peces diadromos (6%),
peces marinos (3.1%) y otros animales acuáticos (1.4%). La proporción de peces
de agua dulce ha aumentado espectacularmente en las dos últimas décadas,
impulsado principalmente por el rápido desarrollo de la tilapia del Nilo. Su
producción tiene una amplia distribución; 72% se cría en Asia, 19% en África y 9%
en América. Citada entre las especies de escama introducidas satisfactoriamente
2
a nivel internacional y entre las especies que han impulsado más demanda y
consumo. La mayor producción de peces de agua dulce ha llevado a un
incremento considerable en el consumo anual per cápita aumentando de 1.5 kg en
1961 a 6 kg en 2009 (FAO, 2012).
Dentro de los cultivos acuícolas de agua dulce, el cultivo de tilapia es el de mayor
importancia en la acuacultura tropical, por ser una fuente importante de proteína y
generación de divisas en los países con economías menos aceleradas. De las
especies de tilapia, Oreochromis niloticus es la especie más usada en ambientes
semitropicales y tropicales (Rodríguez y García, 2009). Sus atributos que la
convirtieron en uno de los organismos más apropiados para la piscicultura fueron
su rápido crecimiento, fácil reproducción, resistencia a enfermedades, elevada
productividad, tolerancia a desarrollarse en condiciones de alta densidad,
resistencia a concentraciones bajas de oxígeno y temperaturas y salinidades
diferentes(Wohlfarth y Hulata,1983; Welcomme, 1988; Yi et al., 1996; de Graaf et
al., 1999; Coward y Bromage, 2000).
Este incremento en las actividades acuícolas, aumenta también las necesidades
para llevar a cabo dicha actividad como la dieta. Esta es un factor importante para
el desarrollo y rentabilidad de los cultivos, que dependen de alimentos de calidad
con alto contenido de proteína y aditivos complementarios que satisfagan los
requerimientos nutricionales de la especie a bajo costo (Apún-Molina, 2007).La
elección del método de alimentación depende de diversos factores y objetivos.
Entre los factores importantes cabe mencionar el valor de mercado de las
especies cultivadas, los recursos financieros del acuicultor y la disponibilidad local
de fertilizantes y piensos alimenticios. Se calcula que la producción mundial de
piensos acuícolas elaborados en granja se situó entre los 18.7 millones y los 30.7
millones de toneladas en el 2006.
3
Actualmente los piensos acuícolas se utilizan en las dietas de peces omnívoros
(tilapia, bagre, carpa, etc.), carnívoros (salmón, trucha, lubina, atún, etc.) y
crustáceos (camarón, cangrejo, langosta, etc.).
Los ingredientes utilizados para la producción de estos piensos acuícolas se
clasifican en tres grandes categorías dependiendo de su origen: fuentes de
nutrientes animales, fuentes de nutrientes vegetales y fuentes de nutrientes
microbianos (FAO, 2012). Entre los ingredientes de nutrientes animales más
empleados en la formulación y la confección de dietas está la harina de
pescado.Esta se considera el ingrediente por excelencia para el óptimo
crecimiento de los peces, ya que contiene todos los aminoácidos esenciales para
estos animales. Desafortunadamente,el precioes cada vez más inaccesible debido
a la contaminación y sobrepesca (Toledo-Pérez, 2007). La producción mundial de
harina aumentó de 5,00 millones de toneladas en 1976 hasta 7,48x106ton en
1994, y registrando un descenso constante hasta situarse en 5,74 x106
ton en
2009, donde 25% de esta producción procede de subproductos pesqueros. La
mayor usuaria de esta harina y de aceite de pescado es la cría de animales, como
la acuacultura y su uso en la dietas acuícolas oscila entre el 2 y el 10%, con
excepción de las tilapias y bagres que pueden llegar hasta 25% (FAO, 2012).
Esta concentración de harina de pecado es el reto más importante para los
sistemas alimenticios ya que es el ingrediente más costoso. Por tal motivo, se
investiga sobre los sustitutos de este ingrediente, que resulten en la disminución o
el remplazo de la harina de pescado (Oliveira et al., 2007). Actualmente las
investigaciones en el área de alimentos para acuacultura se están enfocando en
diversas fuentes más económicas de proteína. Idealmente, éstas deberían de
encontrarse fácilmente en el mercado a bajo costo, tener una calidad nutritiva alta
(Sudaryno et al. 1995), y no presentar factores antinutricionales como: inhibidores
de enzimas digestivas, lectinas, fenoles, ácido fítico, taninos, saponinas, entre
otros.
4
Una alternativa en la elaboración de dietas, es la utilización de proteína animal a
través de procesos tecnológicos, transformándola en proteína disponible. Los
subproductos de la industria pesquera son un gran potencial como suplementos
de la proteína en piensos para la acuacultura (Vidottiet al. 2003). De estos
subproductos, el ensilado de pescado ha resultado ser una buena fuente de
proteína con alto valor biológico para la alimentación animal.El ensilado es
elaborado a partir de residuos de la industria del filete queconstituyen alrededor
del 50% (Mattos, 2003). Estos subproductos,pueden obtenersea partir de peces
muertos, especies sub-utilizadas, subproductos de la pesca marina, desechos de
la pesca comercial y residuos industriales. Como estos residuos de consideran de
baja calidad se consideran de baja calidad, no son regularmente utilizados por la
posibilidad de causar problemas de salud ambiental (Vidottiet al., 2003).
El ensilado es un alimento proteico de alta humedad y de fácil preservación,
consiste en un producto líquido pastoso obtenido a partir de la hidrólisis del
pescado entero, partes o residuos usados como componentes de raciones
alimenticias para animales. El ensilaje de pescado es una metodología utilizada en
países poco desarrollados para la elaboración de alimentos destinados a la
acuacultura ganadería y avicultura (Llanes, 2007), con la incorporación de
subproductos agrícolas (Bermúdezet al., 1999).
Otra alternativa en acuacultura es el empleo de ingredientes proteicos vegetales,
que han sido seleccionadas de acuerdo a su alto contenido proteico y su
balanceado perfil de aminoácidos (Brett, 2006).En este sentido, el piñón o
piñoncillo (Jatropha curcas), una planta originaria de México y Centroamérica es
una de ellas. Sus semillas son fuente de aceite y han adquirido importancia para
obtenerlo brindando una pasta rica en proteína.La semilla de J. curcasen
genotipos no tóxicosse destina a la alimentación humana y animal en ciertas
regiones de México (Schmook y Serralta, 1997; Martínez et al., 2006).
5
La pasta residual, obtenida después de la extracción de aceite, contiene un 50-
60% de proteína cruda con un buen balance de aminoácidos esenciales
(exceptuando el aminoácido lisina)que cumple con el patrón de la FAO, (Makkar,
1997).
El propósito de esta investigación es desarrollar un producto alimenticioque cubra
los requerimientos nutricionales de la tilapia (Oreochromis niloticus), elaborado a
partir de ensilado de pescado y pasta de J. curcas, el cual será evaluado mediante
bioensayos de crecimiento en dos estadios de tilapia del Nilo, la ganancia en peso
y sobrevivencia.
2. ANTECEDENTES 2.1. Acuacultura y cultivo de tilapia
En América Latina la acuacultura ha registrado un avance notable. En Brasil,
México, Ecuador y Chile, los principales productores acuícolas con cerca del 40%
de la producción anual de pescado del comercio internacional (FAO, 2010).
En México, la acuacultura ha experimentado en la última década avances
importantes, usando prácticas diversas, entre ellas las extensivas con sistemas
abiertos y cerrados, así como intensivas y semiintensivas, en jaulas, encierros,
líneas suspendidas, estanques artesanales de tierra canales de corriente rápida,
estanques de concreto, cubiertas plásticas y otras tecnologías disponibles para
criar especies acuáticas para el autoconsumo o comercio de productos(Lluch y
Hernández, 2006).
El 72% de la producción nacional por acuacultura lo conforman 4 especies que
son, sardina (47%), camarón (11.25%), atún (5.2%), calamar (4.8%) y tilapia que
contribuye con un 4.3%, el 28% restante lo conforman más de 270 especies
diversas (CONAPESCA, 2010).
6
La tilapia por su volumen de producción se encuentra posicionada en el quinto
lugar de la producción pesquera en México,aunque por su valor está en el lugar
tres, con una tasa media de crecimiento anual en la producción de los últimos diez
años de 1.44%. En el 2011, la producción alcanzó 75,927 toneladas con un valor
comercial de 1,078,101(miles de pesos), obteniéndose 71,135 toneladas por
acuacultura (CONAPESCA, 2011).
El noroeste de México es la región de mayor productividad biológica marina,
debido a la combinación de procesos oceánicos que favorecen una alta
productividad primaria (Luch y Hernández, 2006). Alrededor del 65% de la
producción nacional proviene de esta zona, donde Sonora y Sinaloa aportan
cerca del 40% de la producción total. Sinaloa cuenta con una de las industrias
acuícolas más desarrolladas de México por sus volúmenes de producción y
número de granjas en operación siendo el primer lugar en producción de camarón
de granja con 50 mil toneladas (CONAPESCA, 2012).
En el año 2011, la producción de tilapia en Sinaloa alcanzó 6,335 toneladas
mediante jaulas flotantes. Este estado cuenta con un potencial de cultivo de 74 mil
hectáreas de embalses naturales, como lo son las presas Sanalona (Culiacán);
Adolfo López Mateos (Badiraguato) y El Salto (Elota; Soto - Rodríguez, 2009).
2.2. Origen y distribución de tilapia Las tilapias pertenecen al género Oreochromis, son originarias de África, y se
extendieron posteriormente hacia el nortede Israel y Jordania. Luego de la
Segunda Guerra Mundial(Wicki,1998), fueron introducidas a variospaíses de Asia
y América. Para el año de 1960 ya se encontraban diseminadas en Haití,Estados
Unidos, Republica Dominicana, Jamaica, El Salvador, Nicaragua, en el
HemisferioOccidental y en Filipinas, Taiwán, y Tailandia.
Fue introducida en México proveniente de Estados Unidos y se ha distribuido en
una gran cantidad de cuerpos de agua continentales, representando así un
7
recurso más en las actividades piscícolas. Las primeras especies introducidas
fueron tilapia redalli, Oreochromis mossambicus y O. aureus. En 1879, llegaron a
México los primeros ejemplares de tilapia nilotica (Oreochromis niloticus)
procedente de Panamá y fueron depositados en el Centro Acuícola de
Tezontepec de Aldama en Hidalgo, de donde fueron enviados al Centro Acuícola
de Temascal, Oaxaca.
Las tilapias habitan principalmente en regiones tropicales del mundo, donde
existen las condiciones necesarias para su reproducción y crecimiento. Dentro de
sus áreas originales de distribución, las tilapias han colonizado hábitats diversos,
pues es un pez de aguas cálidas, dulces, salobres o salinas que puede adaptarse
a aguas con baja concentración de oxígeno. Por lo que también es común que
habiten en aguas de poca corriente (lenticas), permaneciendo en zonas poco
profundas y cercanas a las orillas (Alceste, 2002).
2.3. Hábitos Alimenticios de la tilapia
A través de los alimentos disponibles, los peces deben obtener suficientes
cantidades de nutrimentos esenciales para garantizar la funcionalidad de sus
procesos fisiológicos y metabólicos, asegurando un adecuado crecimiento, salud
y reproducción. De forma general, las demandas de nutrientes esenciales de las
cuales obtienen energíaincluyen: agua, aminoácidos esenciales, ácidos grasos
esenciales, vitaminas, minerales y carotenoides, con algunas particularidades
dependiendo de la especie (Toledo-Pérez, 2007).
Las tilapias son de hábitos alimenticios herbívoros con tendencia omnívora. Su
dieta natural está constituida en mayor o menor grado por plantas superiores,
detritos vegetales, algas azul-verdes, diatomeas, fitoplancton, fitobentos, perifiton,
macrofitas acuáticas, zooplancton, bacterias, existiendo variaciones en cuanto a
preferencias alimentarias según la especie y condiciones de cultivo (Northcott,
1992).
8
El crecimiento de los organismos acuáticos en cautiverio está influenciado por
factores externos entre los que destaca la ración alimenticia. El conocimiento de la
ración óptima para cualquier especie es conveniente para suministrar el alimento
necesario para alcanzar la mayor eficiencia en la conversión del mismo, logrando
el máximo crecimiento de los organismos. La cantidad de alimento varía en
función de la demanda energética que es principalmente caracterizada por el
estado fisiológico de los peces. La cantidad requerida para los primeros estadios
de vida es mayor debido a la energía demandada por el acelerado metabolismo
que se canaliza en la formación de tejido somático, derivando en un rápido
crecimiento (García-Ulloa, 2004).
La mayor parte de las tilapias, poseen tendencia por hábitos alimenticios
herbívoros. Las adaptaciones estructurales a este tipo de dieta, son
principalmente un largo intestino muy plegado, dientes bicúspides o tricúspides
sobre las mandíbulas y la presencia de dientes faríngeos, que utilizan para poder
cortar o rasgar plantas y hojas fibrosas (Morales, 1974).
De forma general y con base a sus hábitos alimenticios predominantes, las
tilapias se clasifican en dos grupos principales (Morales, 1974).
a) Especies omnívoras (que se alimentan de plantas y animales)
b) Especies Fitoplantófagas (que se alimentan de las algas y organismos
microscópicos conocidos como fitoplancton)
Los dos usos más importantes del alimento absorbido son mantenimiento y
crecimiento. El exceso de alimento es almacenado en forma de grasa una vez
satisfechos los requerimientos.
9
2.4. Aspectos nutricionales del alimento 2.4.1. Proteínas La proteína es el ingrediente más importante en la formulación de dietas
destinadas a alimentar organismos en cultivo bajo la premisa de que estas dietas
deben ser altamente nutricias y económicamente rentables.El aspecto nutricional
es de suma importancia porque la fuente proteica que aporta los aminoácidos
esenciales son empleados por el organismo para formar tejido y crecimiento, y
esto, en acuicultura es lo más importante (García, 2000).
El nivel de proteína va a determinar el crecimiento del organismo. A medida que el
cultivo avanza, el requerimiento de ésta disminuye. El nivel de proteína, se ve
influenciado por múltiples factores:
a) El contenido de energía de la dieta
b) El estado fisiológico del pez (edad, peso y madurez)
El consumo de energía depende del estadío del organismo. En la Tabla 1 se citan
los porcentajes de proteína de acuerdo al estadío de desarrollo de la tilapia.
Tabla 1. Requerimientos proteicos para tilapia
Peso de la tilapia (g) Requerimiento proteico (%)
Larva (0.5) 40 – 45
0.5 – 10 35 – 40
10 - 30 30 – 35
30 - 250 30 – 35
250 – talla de mercado 25 – 30
Valores expresados en gramos de tilapia y porcentajes de proteína en alimento
10
c) Factores ambientales (temperatura del agua, salinidad y oxígeno disuelto)
d) La calidad de la proteína: cantidad y disponibilidad de aminoácidos esenciales
(Tabla 2)
e) Tasa de alimentación
Tabla 2. Aminoácidos requeridos para el crecimiento de juveniles de tilapia
Oreochromis niloticus (Corazón et al, 1988).
Aminoácidos esenciales Requerimientos (%) Lisina
5.12
Arginina 4.20 Histidina 1.72 Valina 2.80 Leucina 3.39 Isoleucina 3.11 Treonina 3.75 Triptófano 1.0 Metionina con Cistina 3.21 Fenilalanina con tirosina 5.54
Valores expresados en porcentaje de proteína total
2.4.2. Lípidos Los lípidos en el alimento tienen dos funciones principales (Kanazawa, 1985):
a) Recurso de energía metabólica
b) Recurso de ácidos grasos esenciales
En general los peces dulceacuícolas de agua fría, muestran un requerimiento
exclusivo para los ácidos grasos poliinsaturados de las series n-3 en su dieta
(ácidos linolénico, eicosapentaenoico y docosahexaenoico). Mientras que las
especies dulceacuícolas de zonas cálidas, requieren tanto las n-3 como las n-6
(ácidos linoleico y araquidónico) (Kanazawa, 1985).
11
2.4.3. Carbohidratos Los carbohidratos son la fuente más barata de energía en la dieta; niveles en la
dieta de tilapia deben de estar alrededor del 40%.
2.4.4. Vitaminas y Minerales La mayor parte de las vitaminas no son sintetizadas por el pez, por lo que deben
estar suplementadas en una dieta balanceada. Su importancia radica en el factor
de crecimiento, ya que catalizan todas las reacciones metabólicas. Los minerales
son importantes ya que afectan los procesos de osmorregulación (intercambio de
sales) a nivel de la célula. También influyen en la formación de huesos, escamas
y dientes (Morales, 1974).
2.5. Fuentes alternativas de proteína vegetal y animal como substitutos de la harina de pescado para la alimentación en acuacultura 2.5.1. Fuentes de proteína vegetal Actualmente la acuacultura depende en suministro proteico de las pesquerías y la
agricultura pues basan su producción en la harina de pescado y en segundo
término harinas vegetales. Si la acuacultura continua con la tasa de crecimiento
que ha tenido en éstas últimas dos décadas, necesariamente la harina de
pescado se verá limitada a corto plazo por la falta de recursos proteicos, lo que
ocasionará que la acuacultura en muchos lugares del mundo no sea una actividad
sostenible ni rentable. Por lo anterior, se han realizado esfuerzos por optimizar los
métodos de alimentación y por buscar fuentes alternas de proteínas
convencionales y no convencionales derivadas de productos animales y
vegetales, subproductos de la agricultura, ganadería y de la industria.
Se han realizado numerosos esfuerzos en la búsqueda de fuentes alternas de
proteína vegetal para la substitución total o parcial de la harina de pescado y a la
fecha pocos productos se pueden utilizar a nivel comercial por diversos motivos,
tales como costos de producción, niveles de antinutrientes, imbalance de
12
aminoácidos baja disponibilidad de los productos o altos costos de los procesos,
entre otras.
En la alimentación de peces algunas fuentes proteicas vegetales empleadas han
sido:
Soya como harina integral y desengrasada. Encontrándose como ingrediente
adecuado para alimentar trucha, carpa, salmón, tilapia nilótica y bagres,
sustituyendo entre 30 y 75% de la proteína animal (Reinitz et al., 1978; Lovel,
1980; Tacon et al., 1983; Abel et al., 1984; Robinson, 1989; Wilson y Poe, 1985;
Wee y Shu, 1989; Shiau et al., 1990; Van den Ingh et al., 1991; Moyano et al.,
1992; Gómez et al.,1995; Kaushik et al., 1995).
La harina de algodón es otro elementoel cual las tilapias utilizan eficientemente,
obteniendo rendimientos adecuados con substituciones del 100% de la harina de
pescado (Jackson et al., 1982; Viola y Zohar, 1984). Sin embargo, se observa
retardo en el crecimiento con niveles superiores al 50%, atribuida a la deficiencia
de aminoácidos, en especial lisina (Robinson y Brent, 1995; Robinson y Tiersch,
1995).
Harina de cacahuate donde los resultados obtenidos con alimentos para tilapia y
carpa, indican que no se debe incluir más del 25%, ya que afecta el crecimiento
(Jackson et al., 1981, 1982; Robinson et al., 1984b).
La canola posee una adecuada calidad nutricional, no afecta el crecimiento de
tilapia cuando se incluye hasta un nivel de 50% en su dieta (Jackson et al., 1982).
Harina de ajonjolí la cual presenta adecuada calidad nutricional, principalmente
cuando se mezcla con otros ingredientes ricos en lisina. Hossain y Jauncey
(1989) así como Hossain et al. (1992), evaluaron la digestibilidad del ajonjolí como
única proteína en dietas para carpa y tilapia respectivamente, observando
13
resultados inferiores a los de la soya, semilla de lino, semilla de mostaza, harina
de pescado lo cual se atribuyó a que contiene niveles altos de ácido fítico.
Algunas fuentes utilizadas como substituto de harina de pescado han sido:
levaduras, proteínas bacterianas, hongos filamentosos, microalgas, concentrados
de proteína foliar y subproductos agroindustriales. Una fuente experimental en
alimentación de acuacultura es la pasta de Jatropha curcas, la cual se obtiene
después del proceso de extracción de lípidos para la generación de
biocombustibles. Su elevado contenido proteico y su perfil de
aminoácidosbalanceado, ha generado el interés para fortalecer la cadena
productiva de esta semila, brindándole un valor agregado que permita eficientizar
la cadena agroindustrial de este cultivo, haciendo más redituable la intensificación
de este cultivo en el Norte del país.
2.5.1.1. Jatropha curcasno tóxica 2.5.1.2. Origen y distribución
México es un país de gran biodiversidad que alberga un alto número de plantas
autóctonas. Una de éstas plantas poco investigadas es el piñón o piñoncillo
(Jatropha curcas L.) (Félix, 2007). Jatropha curcas es miembro de la familia de las
Euphorbiaceae que se localiza en climas tropicales y semitropicales, es un arbusto
resistente a la sequía, originaria de América Central y México.Esta especie se
cultiva en América del sur, el sudeste Asiático, India y África (Francis et al., 2005).
La semilla de J. curcas es una oleaginosa que por su elevado contenido de aceite
tiene potencial para su cultivo debido al interés por la generación de biodiesel (De
la Vega, 2008).
Las características de las plantas según Francis et al., 2005 son las siguientes:
a. Altura: 4 a 8 metros de altura.
b. Vida productiva: 45 a 50 años.
14
c. Tallos: erguido y ramas gruesas.
d. Hojas verdes: 6 a 15 cm largo y ancho.
e. Fruto oval 30 mm. Longitud aproximada
f. Cada fruto contiene de 2 a 3 semillas
g. Semillas de color negro: Longitud de 17 a 20 mm.Ancho 10 a 12 mm
h. Aproximadamente 1700 semillas corresponden a un kilogramo
i. Aceite de semillas: 30 a 40 % (52 % en municipio de Sinaloa de Leyva)
j. Se defolia (caída de hojas) en sequía e invierno su desarrollo queda latente
k. No soporta bajas temperaturas (bajo cero) prolongadas.
l. Principales aceites: oleico y linoleico
m. Existen variedades tóxicas y no tóxicas (Sólo en México)
Esta especie es de rápido crecimiento y la producción de semillas puede
comenzar incluso en el primer año de establecida la plantación, lo que depende
de muchos factores, como las precipitaciones y la forma de propagación que se
utilice (por semillas o por estacas). Es ampliamente plantada como cobertura para
proteger campos que ya no son cultivados o aprovechados por el ganado u otros
animales. El rendimiento de semilla reportado para J. curcas varía de 0.5 a 12
ton/año/Ha dependiendo del tipo de suelo, fertilización y condiciones de riego. El
arbusto de J. curcas tiene un promedio anual de producción de semilla alrededor
de 5 Ton/Ha puede esperarse en excelentes tierras y precipitaciones de 900-1200
mm (Francis et al., 2005).
Los estados de la República Mexicana que registraron mayor superficie óptima
para su cultivo fueron Sinaloa 557, 641 ha, Tamaulipas con 317, 690 ha, Guerrero
con 282, 158 ha y Michoacán con una superficie de 197, 288 ha (Félix, 2007).
Son pocos los estudios realizados con J. curcas en la sustitución de harina de
pescado, la siguiente investigación es tomada como base para realizar la
presente investigación.
15
Makkar y Becker (2003) realizaron estudios en laboratorio quemostraron que la
harina de semilla de J. curcas presentó niveles de proteína cruda entre 58% y
64%. Los niveles de aminoácidos esenciales, excepto lisina, fueron altos. Sin
embargo, la harina de semilla de variedades en Cabo Verde y Nicaragua fue
altamente tóxica en la alimentación de peces, ratas y pollos, mientras que la
harina de semillas de la variedad Mexicana no resultó tóxica. Durante 7 días se
suministró harina de semilla de la variedad no tóxica a peces, en proporción al
50% de la harina de pescado. Se observó mucosidad en las heces, y los
rendimientos en los desarrollos de los peces no tuvieron variación comparados
con el grupo de peces al que no se les suministró harina de semillas de J. curcas.
El contenido de proteína y aminoácidos esenciales en la variedad no tóxica fue
similar al de las variedades tóxicas de Cabo Verde y Nicaragua. Adicionalmente,
en experimentos con ratas el índice de eficiencia de la proteína en la harina de
semillas de la variedad no tóxica fue alrededor del 86% comparada con proteína
proveniente de la caseína. Esto sugiere que ambas variedades, tóxica y no tóxica,
son buenas fuentes de proteína. Pero la harina de semillas debe ser detoxificada
antes de suministrarla como alimento a los animales.
2.5.2. Fuentes de proteína animal Las principales harinas animales usadas habitualmente en piensos acuícolas son:
harinas de subproductos de la carne, harina de subproductos de aves, harina de
plumas hidrolizadas y harinas de sangre.
2.5.2.1. Procesos tecnológicos en fuentes proteicas Las técnicas aplicadas a la producción de ingredientes proteicos son diversas, las
harinas de pescado, concentrados, aislados y ensilados son algunos ejemplos de
productos de estas tecnologías (García, 2000). Entre ellas se encuentra el
ensilado de pescado que se ha realizado con residuos del proceso de fileteo de
tilapia y otros peces para la alimentación en acuacultura (Vidotti et al., 2003;
Copes et al., 2006; Toledo et al., 2007; Llanes et al., 2007) y ganado bovino
(Gerón et al., 2007).
16
2.5.2.2. Ensilado de pescado El ensilado de pescado se elaboró por primera vez en Suecia alrededor de 1930 y
años posteriores en Dinamarca, destinado principalmente a la formulación de
dietas para engorde de animales de granja. El proceso para la obtención de
ensilado es práctico, sencillo y económico, no requiere de procedimientos y
equipos sofisticados y costosos, como sucede en el caso de la elaboración de
harina de pescado. Los ensilados de pescado, se obtienen mediante el
procesamiento de la materia prima utilizando agentes biológicos o químicos
(Tatterson y Windsor, 1974)
El ensilado químico es elaborado por la adición de los ácidos mineralese hidrólisis
de la proteína de pescado. Se prefiere la utilización de ácido fórmico ya que
asegura la conservación sin descenso excesivo en el pH, lo que a su vez, evita la
etapa de neutralización del producto antes de su empleo en la alimentación animal
(Tatterson y Windsor, 1974; Windsor y Barlow, 1984; Córdova y Bello, 1986; Barral
et al, 1989).
El ensilado biológico es elaborado por la hidrólisis enzimática de origen bacteriano
mediante la adición de una fuente de carbono generalmente miel de caña y
organismos microbianos (Toledo-Pérez, 2007).
2.5.3. Factores principales del proceso de ensilaje
2.5.3.1. Temperatura La temperatura es uno de los factores relacionados con el éxito del ensilado. La
temperatura óptima varía entre 27 y 38°C. En la práctica se tiene cierta idea de la
temperatura por la apariencia del ensilado. Un ensilaje frío es generalmente pardo
verdoso, tiene un olor fuerte, los tejidos son viscosos, poseen un gusto insípido y
presentan un pH de 5 o superior. Un ensilado a temperatura adecuada tiene un
color ligeramente verde o amarillo, un gusto agradable ligeramente ácido que
indica un pH por debajo de 4.5. Los ensilajes sobrecalentados tienen
17
características acentuadas por el grado de calentamiento, su color varía de marrón
a negro y presentan un olor desde un azúcar ligeramente quemada hasta un heno
pasado (Hiriart, 1984).
2.5.3.2. Efecto del pH El pH del ensilado es un indicador ampliamente utilizado para medir su calidad. No
obstante, la mayoría de los especialistas están de acuerdo en que su uso sólo
está justificado si se interpreta correctamente y si está acompañado de
información adicional. Si los ácidos están presentes como mezclas, su efecto
relativo sobre el pH dependerá del grado de ionización y la capacidad
amortiguadora de la masa ensilada. Sin embargo, la diminución del pH indica un
incremento en ácido láctico, acidez total y aminoácidos, mientras que denota un
menor contenido de ácidos volátiles (Hiriart, 1984).
2.5.4. Cambios bioquímicos durante el proceso de ensilaje
2.5.4.1. Enzimas Los cambios están influenciados por la presencia de ciertas sustancias llamadas
enzimas, secretadas por las células, y que tienen la propiedad de acelerar las
acciones químicas. Dicho de otra manera, son catalizadores tan específicos que
sólo intervienen en una reacción particular cuando las condiciones son apropiadas
(Hiriart, 1984).
2.5.4.2. Microorganismos Al morir las células del material ensilado, su contenido de carbohidratos, grasas y
proteínas puede difundirse fuera de la masa y convertirse en alimento para los
numerosos microorganismos presentes. Las condiciones óptimas para el
desarrollo de estos microorganismos varían entre límites amplios: algunos crecen
mejor y otros no pueden crecer en presencia de oxígeno, y otros en ausencia se
desarrollan más.
18
Entre los microorganismos que requieren oxígeno se encuentran las levaduras y
los mohos, que tienen poca relevancia excepto en los casos superficiales de la
masa ensilada; pero si el aire penetra al interior del silo, entonces los mohos
entran y descomponen el producto (Hiriart, 1984).
2.5.4.3. Ácidos orgánicos Cuando los carbohidratos experimentan los efectos de la respiración aeróbica,
dan origen a ácidos orgánicos, entre otras sustancias. Los ácidos orgánicos
encontrados comúnmente en ensilaje son el acético, propiónico, butírico y láctico.
Los tres primeros son volátiles y en su conjunto se denominan ácidos volátiles del
ensilaje; el ácido láctico no se volatiliza fácilmente denominándose así ácido no
volátil. Al hacer el ensilaje es conveniente que se produzca una cantidad
considerable de ácidos, pero también es deseable que predomine el láctico, o
cuando menos que el butírico esté ausente ya que posee un olor desagradable
(Hiriart, 1984).
2.5.4.4. Proteólisis La proteólisis es la descomposición de las proteínas, y en el ensilaje todo ocurre
para que ésta se presente. Existen enzimas que convierten las proteínas en
aminoácidos, se considera que es un proceso de digestión previa; como los
aminoácidos son nutrientes valiosos, no se pierde el valor nutritivo de las
proteínas (Hiriart, 1984).
Sin embargo, las enzimas proteolíticas formadoras de ácido butírico producen
amonio y compuestos amoniacales a partir de las proteínas. Por los que un
ensilaje mal hecho tenga un olor parecido a una mezcla de mantequilla rancia y
pescado descompuesto, debido a que las bacterias del ácido butírico han
fermentado los carbohidratos y atacado las proteínas (Hiriart, 1984).
19
2.5.5. Factores que afectan la solubilidad de la proteína ensilada En el proceso de fermentación, ó hidrólisis química la proteína es hidrolizada
(solubilizada) por acción de las enzimas del material a ensilar, convirtiéndose en
nitrógeno no proteico, lo que ocasiona una reducción en el contenido de proteína
en el ensilado a un 50 a 60%, incluso en los ensilados bien conservados. Los
principales factores que afectan la solubilidad de la proteína en los ensilados son:
Material a ensilar, temperatura, cantidad de materia seca, pH y tiempo en el silo.
En ensilados bien fermentados los aminoácidos libres son los que principalmente
aportan nitrógeno. Mientras que en los mal conservados, los microoganismos del
género Clostridium degradan los aminoácidos, y producen concentraciones
elevadas de amidas, aminas y amoniaco (Hiriart, 1984).
2.5.6. Clasificación de ensilados 2.5.6.1. Ensilados de fermentación láctica Se caracteriza por tener un pH entre 3.7 y 4.2, y un alto contenido de ácido
láctico, suelen tener cantidades menores de ácido acético, así como trazas de los
ácidos propiónico y butírico. Los compuestos nitrogenados son principalmente no
proteicos, en forma soluble, y en baja cantidad nitrógeno amoniacal,
generalmente inferior al 10% del nitrógeno total (Lancaster, 1977).
2.5.6.2. Ensilados de fermentación acética En ciertas condiciones no bien conocidas, las bacterias productoras de ácido
acético, no suelen darse en los países de climas templados. Contienen grandes
cantidades de ácido acético y bajos niveles de ácido láctico. La desaminación de
aminoácidos suele ser intensa, por lo que la concentración de amoniaco es alta
(Lancaster, 1977).
20
2.5.6.3. Ensilados de fermentación butírica
En este tipo de ensilados se produjo una fermentación por clostridios.
Normalmente el pH oscila entre 5 y 6, conteniendo poca cantidad de ácido láctico
y carbohidratos solubles (Lancaster, 1977).
2.5.6.4. Ensilados tratados con aditivos Los aditivos para ensilaje pueden clasificarse en dos grandes grupos:
Estimulantes, como son los inóculos contra la acción inhibidora de ácidos, y los
azúcares que estimulan la multiplicación de las bacterias ácido lácticas, e
inhibidores, como son los ácidos y el formaldehído, que inhiben total o
parcialmente el crecimiento microbiano (Lancaster, 1977).
Como inhibidores potenciales de la fermentación se han empleado numerosos
compuestos químicos, aunque han sido pocos los aceptados a nivel comercial.
Uno de los primeros fue una mezcla de ácidos minerales, como el sulfúrico y el
clorhídrico, que se añadían a forrajes durante el ensilaje en cantidades suficientes
para disminuir el pH a menos de 4. Durante muchos años el proceso fue muy
usado en algunos países, pero últimamente se ha utilizado el ácido fórmico. Éste
ácido ha sustituido a los ácidos minerales y es aceptado como aditivo en muchos
países por ser menos corrosivo. No es posible inhibir totalmente el crecimiento
microbiano, cuando tiene lugar una cierta fermentación láctica. Para inhibir las
bacterias ácido lácticas se recomienda usar una dosis de tres a cuatro veces
mayor que la recomendada a nivel comercial (Lancaster, 1977).
2.5.7. Ensilaje de fuentes animales A principios esta tecnología se implementaba en forrajes para la alimentación de
aves y ganado, posteriormente, algunas organizaciones nacionales se han
dedicado a la búsqueda fuentes proteicas tratada bajo esta tecnología como lo
son el Centro Nacional de Desarrollo Acuícola de Aguas Cálidas (CENADAC), en
conjunto con el Instituto Nacional de Investigación y Desarrollo Pesquero
(INIDEP), durante 2001-2002 implementaron la tecnología de ensilados químicos
21
como una alternativa para la disminución del costo de las dietas para peces
encontrando un muy buen mercado en la elaboración de “pellets” húmedos para
la acuicultura (Welfare, 2003).
En un estudio realizado por Vidotti et al., 2003 caracterizan la composición
química y perfil de aminoácidos de diversos ensilados químicos y biológicos de
pescado utilizando diferentes materias primas entre las que se encuentran, los
residuos de la industria de fileteo de tilapia, resultando un ensilado químico con un
buen porcentaje de proteína 39.5 % y finalmente a pesar de la deficiencia de
menor importancia de ciertos AAE como valina, isoleucina y leucina, no pierde su
valor nutritivo. Con la excepción del triptófano que es el aminoácido limitante en el
ensilado ácido de tilapia.
Hay indicios de que el triptófano es inestable en medio ácido, por lo que se
convierte en el primer aminoácido limitante en los ensilajes ácidos (Arason, 1994).
Copes et al., 2006 desarrollaron un ensilado químico de pescado en pequeña
escala a partir de residuos de pejerrey previamente molidos, con la finalidad de
obtener un suplemento dietario proteico para ser utilizado en la acuacultura.
Evaluando las características y composición proteica final del ensilado. El
porcentaje de proteína fue de 16.6%. Concluyeron que el producto posee una
sumatoria de ventajas para los pequeños productores que justifican la
implementación del ensilado químico en los establecimientos de acuacultura.
Llanes et al., (2007) evaluaron una tecnología de alimento semi-húmedo a base de
ensilado de desechos pesqueros como sustituto de la harina de pescado. Fueron
formuladas dos dietas y un control (Alimento comercial de tilapia, 30% de
proteína). Estas fueron empleadas en la alimentación de tilapia roja (Oreochromis
mossambicus x Oreochromis niloticus). Los resultados mostraron que existen
diferencias significativas (p<0.05) en el crecimiento a favor del control, sin
embargo los indicadores de utilización de alimento y supervivencia no presentan
diferencias significativas (p > 0.05).
22
3. JUSTIFICACIÓN Actualmente la acuacultura se ha convertido en una de las actividades
económicas de mayor auge y desarrollo en los últimos años. Este crecimiento
acelerado implica una demanda considerable de alimentos que garanticen un
adecuado suministro y balance de nutrientes capaces de satisfacer los
requerimientos nutricionales de la especie a cultivar (Peterset al, 2009).
La alimentación en acuacultura representa más del 50% de los costos operativos y
a pesar de que la harina de pescado es la mejor fuente en la alimentaciónpara la
acuacultura altamente demandada existiendo escasez y por ende un incremento
en los costos. La sustitución de la harina de pescado por ingredientes de menor
costo económico es unos de los principales retos en acuaculturaque ha
encaminado la labor de nutricionistas en la búsqueda de materias primas que la
remplacen sean altamente disponibles manteniendo una composición nutricional
estable y sean de bajo costo (El-Sayed, 1999).
Estudios llevados a cabo en diversas regiones de México han sugerido que el
cultivo de tilapia es una alternativa de producción capaz de atenuar la demanda de
alimentos y a su vez, contribuir con la disminución de la presión sobre los recursos
naturales. Adicionalmente, la producción de tilapia es importante como alternativa
en la generación de empleos y la producción de alimento de alta calidad
nutricional para el ser humano (Vegaet al., 2010).
Una alternativa para el remplazo de la harina de pescado es el uso de sub-
productos de pescadocomo la fauna acompañante de peces (principalmente) y
crustáceos (en menor cantidad). Como estos no son aprovechados en su
totalidad, su eliminación en basureros o en ecosistemas marinos produce
problemas de contaminación, debido al alto contenido de materia orgánica que
incrementa la actividad primaria, reduciendo el contenido de oxígeno, de tal forma
que las condiciones anaeróbicas afectan a otros organismos del ecosistema (FAO,
1998).
23
Una estrategia para el aprovechamiento de los subproductos pesqueros es su
procesamiento a partir del ensilaje, cuya tecnología provoca la biodisponibilidad de
la proteína animal.Con la complementación del valor nutritivo de la dieta a partir de
una fuente de proteína vegetal comoJ. curcaspuede permitir la reducción de los
costos de la misma y a su vez el aprovechamiento integral de estos recursos
agroindustriales.
4. HIPÓTESIS La utilización de Jatropha curcas no tóxica y ensilado de pescado en dietas para
tilapia (Oreochromis niloticus) permite uncrecimiento de forma similar al obtenido
por un alimento elaborado con harina de pescado.
5. OBJETIVOS GENERAL Evaluar ensilado de pescado adicionado con pasta de Jatropha curcas no tóxica
para la alimentación de tilapia (Oreochromis niloticus)
5.1. Objetivos Específicos 1. Evaluar tres residuos pesqueros para la obtención de ensilados de pescado
2. Diseñar dietas empleando como ingredientes un ensilado de pescado, Jatropha
curcas y la combinación de ellos. 3. Evaluar el efecto de la alimentación con las dietas propuestas en variables
productivas en tilapia (Oreochromis niloticus) bajo condiciones controladas (peso
ganado, tasa de crecimiento, factor de conversión alimenticia y porcentaje de
sobrevivencia)
6. METODOLOGÍA El desarrollo de la presente investigación se llevó a cabo en el Centro
Interdisciplinario de Investigación para el Desarrollo Integral Regional (CIIDIR-
Sinaloa. La preparación de ingredientes y formulación de dietas se desarrolló en
los laboratorios de Nutrición acuícola y de Alimentos funcionales del departamento
de Biotecnología Agrícola y el trabajo experimental, en el invernadero y
24
laboratoriohúmedo del departamento de Acuacultura. Las muestras fueron
analizadas en el Centro de Investigaciones Biológicas del Noroeste (CIBNOR), en
Baja California Sur, en los laboratorios de Bioquímica fisiológica y Bromatología.
6.1. Obtención de desechos de pescado Los desechos de pescado constituyen un subproducto del proceso de fileteo, se
obtuvieron de la empresa Guasave 400, localizada en la ciudad de Guasave,
Sinaloa México. Es una empresa regional que procesa alimentos de origen marino
obtenidos por pesca extractiva o acuacultura generada en los campos pesqueros
del municipio de Guasave o cercanos. Los desechos de pescado que la empresa
nos brindó para este estudio fueron de Sphoeroides annulatusyLepophidium
prorates, consistieron en cabeza, esquilón, pieles y aleta caudal para Lepophidium
prorates y esquilón, pieles y aleta caudar para Sphoeroides annulatus. En la
figura1, se muestra el diagrama de producción de filete de la empresa. La
especieOreochromis niloticus se utilizó y se obtuvo del departamento de
acuacultura del CIIDIR-Sinaloa.
Figura 1.Diagrama del proceso de fileteo de pescado que utiliza la empresa
Guasave 400.
6.2. Elaboración y evaluación de ensilados Se elaboraron diversos ensilados de pescado utilizando como materia prima
desechos de la industria de fileteo de tres especies: Oreochromis niloticus,
Lepophidium prorates y Sphoeroides annulatus, que tienen como nombre común
25
tilapia del Nilo o nilótica, congrio cornudo y botete, respectivamente. En la figura 2,
se ilustran las especies mencionadas.
Figura 2. Especies empleadas en la elaboración de ensilados de pescado
Los desechos de pescado se clasificaron en sus diferentes componentes del
cuerpo: aleta caudal, esquilón, pieles y cabeza (con excepción de botete ya que se
descabeza durante la captura y ésta se arroja al mar). Las partes de cada especie
se sometieron a un proceso de molienda en proporción 1:1 con un molino para
carne (marca Torrey modelo M-22R con capacidad de 745 W) obteniendo tres
homogeneizados de pescado. Se colocaron cada uno de los homogenados de
pescado en bolsas de plástico herméticas, se etiquetaron por especie y se
congelaron a -20 ºC para su posterior utilización en el proceso de ensilaje. Los
ensilados de cada especie se elaboraron de la siguiente manera: Se colocó 1 Kg
de homogeneizado en un contenedor de plástico de 5 L, posteriormente se
adicionaron 15 mL de ácido fórmico de manera lenta con agitación frecuente con
la finalidad de lograr que el ácido esté en contacto con el homogeneizado.
Diariamente se monitoreo el pH de los ensilados asegurando un ajuste entre 3.8 y
4.0, con la adición de más ácido con la finalidad de mantener ese pH. Se
almacenaron en contenedores opacos con cierre hermético a temperatura
ambiente permaneciendo en ausencia de luz y aire. Se tomaron muestras de los
ensilados en diferentes tiempos del proceso para monitorear su hidrólisis.
26
6.3. Evaluación del proceso de ensilaje Se tomaron muestras a los ensilados en diferentes días de proceso con la
finalidad de evaluar parámetros de calidad para la selección del ensilado a
emplear en las dietas experimentales. Los puntos de muestreo fueron a diferentes
tiempos desde el día 0 al día 35. Se determinó el análisis químico proximal a las
muestras, posteriormente se les realizó la determinación de aminoácidos al
ensilado seleccionado para las dietas. Se registraron datos de nitrógeno total,
nitrógeno proteico y no proteico para evaluar la hidrólisis química.
6.3.1. Determinación de nitrógeno total (NT) La composición de nitrógeno de las muestras se determinó con el método de
Kjeldhal. El método consistió en la digestión de las muestras en un Sistema de
Digestión (Foss Kjeltec 2400) con ácido sulfúrico concentrado a 400º C a la que se
adicionó un catalizador. Seguido de una destilación con NaOH en un Sistema de
Destilación (Foss Kjeltec 2300) al 40% en presencia de una solución indicadora
con ácido bórico al 4%. Por último se realizó una titulación con HCl 0.1 N (AOAC,
1995).
N = (NO3-) + (NO2-) + (NH4
+ NH3 + H+
)
6.3.2. Determinación de nitrógeno proteico (NP) El método para determinar el nitrógeno proteico fue por el método del ácido
bicinconínico BCA, el cual a partir de una solución del ensilado, disolviendo 0.100
g en 1mL de agua destilada, se tomó una alícuota de 30 µl la cual se disolvió con
300 µl de NaOH para digerir por 2h. Posteriormente se agitaron las muestras y se
recuperaron 25 µl de cada una, en microplaca, se les añadió 200 µl de reactivo
BCA, se incubó a 60 °C durante 15 minutos y se tomó lectura en
espectrofotómetro a 562 nm (Suelter, 1985).
27
6.3.3. Determinación de nitrógeno no proteico (NNP) Se determinó preparando una solución de la muestra al 4% p/v en ácido
tricloroacético al 20%, se dejó precipitar la proteína por 2 h, se centrifugó a 3000
rpm por 30 min. Del sobrenadante se tomaron 3 mL para determinar el contenido
de nitrógeno por micro Kjeldhal (AOAC, 1995).
6.4. Obtención de pastas proteicasde J. curcas Se colectaron los frutos del campo experimental bajo invernadero del Centro de
Investigación de Alimentos en Desarrollo, localizado en la ciudad de Culiacán
Sinaloa. Se descascarilló el fruto de manera manual obteniendo de tres a cuatro
semillas por fruto, posteriormente se les extrajo manualmente la testa para obtener
finalmente la almendra. Se procesó la almendra en el laboratorio de toxicología del
Centro de Investigaciones en Alimentación y Desarrollo, Culiacán, Sinaloa
mediante una prensa hidráulica marca Komet DD85. Como producto final a este
proceso se obtuvo una pasta la cual fue analizada y utilizada como ingrediente
para la formulación de dietas para el primer bioensayo de crecimiento (juveniles de
tilapia). Posteriormente se sometió a un segundo proceso químico de extracción
de lípidos, para ser utilizada como ingrediente en la formulación de dietas para el
segundo bioensayo de crecimiento (alevines de tilapia).
La pasta resultante de la extracción por prensado en frío contenía altos niveles de
lípidos (49.66 ± 0.37 %) y se sometió a un segundo proceso de extracción de
lípidos utilizando como disolvente no polar, hexano en proporción (1.5 / 10 p/v), se
desengrasó por 12 h con el disolvente, se filtró y posteriormente se dejó en
campana para eliminar hexano. La pasta obtenida se guardó a 4 °C. Se determinó
la composición proximal mediante técnicas de la AOAC 1995, en CIBNOR, La
Paz.
28
6.5. Análisis químico proximal de los ingredientes y dietas experimentales Los análisis químicos proximales de los ingredientes y de las dietas se realizaron
en el Laboratorio de Bromatología del Centro de Investigaciones Biológicas del
Noroeste (CIBNOR) de acuerdo a la metodología citada por la AOAC, 1995.
6.5.1. Humedad La humedad de la muestra se determinó pesando 2 g de muestra en crisoles a
peso constante, se colocaron a desecación en un horno (TERLAB) a 105º C
durante 4 h hasta obtener un peso constante. Por diferencia de peso se calculó la
humedad de la muestra, con la fórmula siguiente:
% humedad = (Peso crisol + muestra húmeda) - (peso del crisol + muestra seca) X 100 peso de la muestra húmeda
6.5.2. Cenizas El contenido de ceniza fue determinado mediante calcinación de la muestra, se
pesaron 2 g de muestra sólida, se incineró en (horno Mufla Termolyne 6000) a 600
ºC por 5 h, después se colocó en estufa por 40 min a 100 °C y se pesó.
% cenizas= peso crisol con cenizas - peso crisol vacío
X 100 peso de la muestra
6.5.3. Proteína
El contenido de proteínas se determinó a partir de la composición del nitrógeno
total de las muestras, mediante la técnica Kjeldhal, empleando un factor de
conversión para expresar el resultado en porcentaje de proteína (6.25). El método
consistió en la digestión de las muestras en un Sistema de Digestión (Foss Kjeltec
2400) con ácido sulfúrico concentrado a 400º C a la que se adicionó un
catalizador. Seguido de una destilación con NaOH en un Sistema de Destilación
(Foss Kjeltec 2300) al 40% en presencia de una solución indicadora con ácido
bórico al 4%. Por último se realizó una titulación con HCl 0.1 N.
29
% Proteína= (Valor mL – Valor medida patrón mlL x 0.1 x 14.004 x 6.25 x 100
peso de la muestra (mg)
6.5.4. Extracto Etéreo (EE) El contenido de extracto etéreo de la muestra se determinó mediante el método de
extracción de grasa en caliente, con un Equipo de Extracción Soxtec Avanti (Foss
Tecator 2010) usando éter de petróleo.
% E.E= Peso muestra final
X 100 Peso muestra inicial
6.5.5. Fibra Cruda El contenido de fibra se determinó mediante una digestión ácida de las muestras
desgrasadas con H2SO4
, seguida de una digestión básica con NaOH, en el
sistema (Fibertec M6 1020 Foss Tecator). Posteriormente se secó el residuo
obtenido en una estufa a 105 ºC hasta peso constante, se pesó y calcinó a 550 ºC
durante 30 min en mufla para pesar al final el residuo restante.
% Fibra = Peso muestra seca 105 °C – Peso muestra calcinada 550 °C x100 peso de la muestra desgrasada
6.5.6. Extracto Libre de Nitrógeno (ELN) El contenido de extracto libre de nitrógeno se determinó por la diferencia de 100
menos la suma de los demás nutrientes.
% E.L.N. = 100 – (% cenizas + % proteínas + % E.E. + % fibra)
6.5.7. Determinación de energía bruta
La determinación de energía bruta se determinó mediante la combustión de la
muestra en forma de pastilla en una bomba calorimétrica (Parr Instrument
Company).
30
6.6. Análisis de perfil de aminoácidos
El análisis de perfil de aminoácidos del ensilado de tilapia y pasta de Jatropha
curcas L. no tóxica se realizó en el laboratorio de Cromatografía del Centro de
Investigaciones Biológicas del Noroeste. Los aminoácidos fueron determinados
por cromatografía líquida (HPLC), con previa digestión ácido-base. La digestión
ácida (ácido clorhídrico 6N, 24 h) fue realizada en tubos de cristal sellados bajo la
atmósfera del nitrógeno (110 °C). Metionina y cisteína se determinaron por
hidrólisis ácida posterior a la oxidación que se realizó con ácido perfórmico.
Después de la hidrólisis, las soluciones fueron diluidas a 0.25 M con ácido
clorhídrico 0.02 N para ajustar el pH a 8.5. Posteriormente se filtró la solución a
través de una membrana Millipore (0.45 mm); (AOAC, 1995).
6.7. Formulación de dietas experimentales Las dietas se formularon mediante un software computacional (Microsoft Excel®
)
tomando en cuenta la composición química de los ingredientes. Las dietas
empleadas en el primer bioensayo de crecimiento fueron cuatro dietas isoproteicas
(33% de proteína): una dieta control o de referencia (AC), dieta de ensilado de
tilapia (ET), dieta de J. curcasno tóxica prensada en frío (JCP) y por ultimo una
dieta formulada a base de la combinación al 50% de ensilado y pasta de J.
curcasno tóxica prensada (50 % JCPE). Las dietas para el segundo Bioensayo de
crecimiento fueron seis dietas formuladas a 34.9 ± 0.1% de proteína. La primera
dieta de control (AC2), la segunda de ensilado de tilapia (ET2), las 4 restantes se
formularon con los siguientes niveles de inclusión de harina de J. curcasno tóxica
y ensilado de tilapia, respectivamente: 25 %, 50%, 75% J. curcas tratada con
hexano y ensilado de tilapia (JCHET) y 100% de J. curcas tratada con hexano
(JCH).
En la tabla 3 y 4 se observan los resultados de las formulaciones de las dietas
para el bioensayo con juveniles y alevines, respectivamente. En la tabla 5 se
aprecia la premezcla de vitaminas y minerales que se emplearon en las dietas
experimentales.
31
Tabla 3.Formulación de dietas utilizadas en bioensayo de crecimiento para
juveniles de tilapia.
Ingredientes AC ET JCP 50% JCPE
Harina de pescado 300 - - -
Ensilado - 540 - 300
Pasta de Jatrophacurcas (Extracción con prensa)
- - 958.9 430
Harina de trigo 558.9 418.9 0 228.9
Vitaminas 0.1 0.1 0.1 0.1
Minerales 1 1 1 1
Aceite de pescado 50 - - -
Lecitina de Soya 50 - - -
Grenetina 40 40 40 40
Total 1000 1000 1000 1000
Tratamientos: AC) Control; ET) Ensilado de tilapia; JCP) Jatropha curcas
prensada; 50% JCPE) Inclusión al 50% de ensilado de tilapia y Jatropha curcas
prensada. Valores expresados en g/kg de alimento
6.8. Elaboración de dietas experimentales La elaboración de las dietas se desarrolló en el Laboratorio de Nutrición Acuícola
del Departamento de Acuacultura de CIIDIR Sinaloa. Para preparar las dietas
empleadas en los dos bioensayos de crecimiento y mencionadas en el apartado
6.8, se molieron y tamizaron los ingredientes a 465 µm con excepción del ensilado
de tilapia el cual se empleó en forma húmeda. Posteriormente se procedió a
elaborar las dietas, mezclando los ingredientes y homogeneizándolos con una
mezcladora Kitchen Aid de 325 W adicionando la cantidad de agua necesaria en
32
cada dieta con la finalidad de facilitar el paso de la masa por el molino (marca
Torrey modelo M-22R con capacidad de 745 W), donde se le dio forma a los
pellets, los cuales fueron secados con ventilación a temperatura ambiente.
Tabla 4.Formulación de dietas utilizadas en bioensayo de crecimiento para
alevines de tilapia.
Ingredientes AC2 ET2 25 % JCHET
50 % JCHET
75 % JCHET
100% JCH
Harina de pescado
430
-
-
-
-
-
Ensilado - 750 562.5 375 187.5 -
Pasta de Jatropha curcas (Extracción con hexano)
-
-
132.5
265
397.5
530
Harina de trigo 428.9 208.9 263.9 308.9 333.9 368.9
Vitaminas 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1
Minerales 1 1 1 1 1 1
Aceite de pescado 50 - - 10 40 60
Lecitina de Soya 50 - - - - -
Grenetina 40 40 40 40 40 40
Total 1000 1000 1000 1000 1000 1000
Tratamientos: AC2) control; ET2) ensilado de tilapia; 25%, 50%, 75% JCHET),
inclusión en dietas de J. curcas no tóxica tratadas con hexano y ensilado de
tilapia; 100% JCH) J.curcas tratada con hexano. Valores expresados en g/kg de
alimento.
33
Tabla 5.Premezcla de vitaminas y minerales utilizados en la elaboración de dietas
experimentales para los bioensayos de crecimiento de tilapia.
Vitaminas g/kg Minerales g/kg Tiamina
0.011
Calcio
3.0
Ácido fólico 0.005 Fósforo 7.0
Riboflavina 0.02 Magnesio 0.5
Piridoxina 0.011 Yodo 0.001
Colina 0.275 Hierro 0.15
Ácido pantoténico
0.0035
Cobre
0.003
Niacina 0.088 Zinc 0.20
Vitamina B12 0.00001 Manganeso 0.013
Vitamina K 0.0044 Selenio 0.0004
Vitamina D3 0.000055
Vitamina E 0.04422
Ácido ascórbico
0.375
Cantidades expresadas en g/kg de alimento
6.9. Diseño experimental de los bioensayos de crecimiento 6.9.1. Reproducción de tilapia Oreochromis niloticus
Se reprodujeron organismos de la especie Oreochromis niloticus para llevar a
cabo los bioensayos de crecimiento. Los organismos empleados en el primer
bioensayo de crecimiento se reprodujeron en el invernadero de tilapia de CIIDIR
Sinaloa en el periodo Noviembre 2011 - Enero 2012, periodo en el que se dio lugar
a la reproducción, desarrollo de huevo y hormonado de alevines, este último se
34
llevó a cabo con el empleo de alimento comercial purina Nutripec® 4510H de 45%
de proteína y 10 % de lípidos, hormonado con la hormona 17 alfa-metil
testosterona. Posteriormente se alimentaron con alimento comercial purina
Nutripec®
4510A de 45% de proteína y 10% de lípidos hasta alcanzar 3 g y se
cambió de alimento de la misma marca con 44% de proteína y 15% de lípidos con
un tamaño de partícula de 0.88 mm, con la finalidad de que los organismos
alcanzaran aproximadamente 6.15 ± 1.36 g de crecimiento y ser empleado en el
primer bioensayo.
Para el segundo bioensayo de crecimiento se utilizaron organismos que fueron
reproducidos en Junio–Agosto 2012, con las mismas condiciones de reproducción
del primer bioensayo, estos organismos se utilizaron de 0.95 ± 0.25 g.
6.9.2. Bioensayo de crecimiento de juveniles de tilapia El primer bioensayo de crecimiento se llevó a cabo en el invernadero de tilapia del
(CIIDIR, Unidad Sinaloa). Para el estudio de crecimiento se desarrolló un sistema
de 4 bloques de concreto donde se instalaron 16 unidades experimentales (cajas
cerradas Milenio) con capacidad de 270 L (Fig. 3). Se utilizaron 4 réplicas para
cada uno de los cuatro tratamientos con densidad de siembra de 22 organismos
por m3
(6 peces por caja) y peso inicial de 6.15 ± 1.36 g. Cada unidad
experimental contó con aireación continua, manteniendo el nivel de oxígeno en 5.4
± 0.20 mg/l y la temperatura osciló en 28 ± 0.65 °C.
35
Figura 3.Sistema de unidades experimentales utilizadas para bioensayo de
crecimiento en juveniles de tilapia O. niloticus.
6.9.3. Bioensayo de crecimiento de alevines de tilapia El segundo bioensayo de crecimiento se llevó a cabo en el Laboratorio de Húmedo
del CIIDIR Unidad Sinaloa. Para el estudio de crecimiento se utilizó un módulo de
acero con lámina galvanizada en donde se instalaron 18 unidades experimentales
(cajas Novate Monterrey cerradas) con capacidad de 30 L (Fig. 4). Se utilizaron 3
réplicas para cada uno de los 6 tratamientos y una densidad de siembra de 100
organismos por m3
(3 organismos por caja) con un peso de 0.95 ± 0.25 g. Cada
unidad experimental contó con aireación continua, manteniendo el nivel de
oxígeno en 28.1 ± 0.8 mg/l y la temperatura durante el bioensayo osciló en 6.4 ±
0.2 °C.
Figura 4.Sistema de unidades experimentales utilizadas en bioensayo de
crecimiento en alevines de tilapia O. niloticus.
6.10. Alimentación de los peces De acuerdo a la biomasa calculada para cada una de las tinas, en cada una de las
biometrías de los organismos se calcularon las raciones alimenticias por tina para
36
los diferentes tratamientos. La alimentación se realizó tres veces al día de manera
manual.
6.11. Tasa de crecimiento diario La tasa de crecimiento diario se determinó en cada bioensayo de crecimiento,
mediante la siguiente fórmula:
TCD = 𝑀𝑀𝑀𝑀 − 𝑀𝑀𝑀𝑀
t
Dónde:
Mi y Mf = promedio inicial y final de las masas individuales
t = duración del periodo de cultivo en días
6.12. Factor de conversión alimenticia (FCA) El factor de conversión alimenticia de determinó en cada bioensayo de crecimiento
utilizando la siguiente fórmula:
FCA= Alimento consumido (Kg)/ incremento de peso (Kg)
6.13. Análisis Estadístico Para determinar si los datos obtenidos eran significativamente diferentes, se usó el
software computacional STATISTICA®
7, los datos fueron sometidos a un análisis
de varianza de una vía (ANDEVA, α˂0.05), posteriormente se aplicó la prueba de
Duncan (New Duncan’s Múltiple Range Test) para clasificar los tratamientos.
(Duncan, 1951).
37
7. RESULTADOS 7.1. Parámetros de calidad del proceso de ensilaje Con la finalidad de seleccionar el ensilado a utilizar como materia prima en la
formulación y elaboración de dietas para cada uno de los bioensayos de
crecimiento de tilapia Oreochromis niloticus, se analizaron, fisicoquímica (Tabla 6)
y nutrimentalmente los tres ensilados.
7.2. Características físicas de ensilados de pescado Las principales características físicas evaluadas para la selección del ensilado de
pescado a emplear en formulaciones de dietas experimentales se presentan en la
Tabla 6,donde podemos observar que en ensilado de tilapia la hidrólisis se
estabiliza a corto plazo en comparación a los demás, además de ser el que
presenta mejor consistencia para formular las dietas.
7.3. Calidad nutrimental de ensilados de pescado 7.3.1. Composición química proximal de ensilados La composición química proximal de los ensilados muestra que el rango de
valores para proteína en los ensilados osciló entre 42.29 % y 80.31%. Con
respecto a lípidos, el valor más alto se registró en el ensilado de tilapia con 26.59
± 0.90 %, seguido de los ensilados de congrio cornudo y botete con los valores de
1.49 ± 0.06 % y 0.72 ± 0.03 % respectivamente. En la determinación de cenizas el
ensilado de congrio cornudo presentó el valor más alto 40.72 ± 0.17 %, seguido
de ensilado de tilapia con 18.01 ± 0.26 % y ensilado de botete con valor más bajo
17.87 ± 1.18 %. El ensilado de tilapia aportó 12.94 % de carbohidratos (E.L.N),
seguido de los ensilados de congrio cornudo y botete con porcentajes de 9.08 y
1.06, respectivamente (Tabla 7).
38
Tabla 6. Parámetros físico-químicos de calidad de ensilados
Parámetro Ensilado de tilapia
Ensilado de botete
Ensilado de congrio cornudo
Color (café)
+
++
+++
Textura
Pastoso
homogéneo
Semi-líquido
con
separación de
residuos
Líquido con
separación de
residuos
Apariencia (residuos sin degradación: espinas, piel y huesos después de ensilaje)
+ ++ +++
Estabilización de la hidrólisis (días)
7
14
25
pH Ácido orgánico utilizado para el proceso de ensilaje (mL)
4.0 ± 1.0
25
3.9 ± 0.08
21
4.0 ± 0.2
39
(+) Se utiliza en tabla para diferir intensidad de color y proporciones de residuos
sin degradación de espinas, piel y huesos en características físicas de ensilados
39
Tabla 7. Composición química proximal de ensilados de pescado
Muestra Proteína Lípidos Humedad Fibra Cenizas ELN
E. Tilapia 42.29±1.80
c
26.59±0.90
a
4.14±0.37
b
0.18 ± 0.01
a
18.01± 0.26
b
12.94
a
E. Botete 80.31±1.73
a
0.72±0.03
b
7.02± 0.13
a
0.05 ± 0.02
b
17.87 ± 1.18
b
1.06
c
E. Congriocornudo
48.72±0.15
b
1.49±0.06
b
3.18± 0.06
c
0.00 ± 0.03
b
40.72 ± 0.17
a
9.08
b
Valores expresados en g/100 g. Indica promedio de tres repeticiones ± Desviación
Estándar.
7.3.2. Proteína soluble de ensilados Durante el proceso de hidrólisis proteica en el ensilado de pescado la proteína
soluble decrece, esto debido a la acción de enzimas proteolíticas endógenas
además de la desnaturalización de las proteínas por efecto de la acidificación,
dando como resultado, péptidos y aminoácidos libres.
En el ensilado de tilapia se observó como la proteína se fue hidrolizando con un
valor inicial de 647.49 mg/g hasta 368.56 mg/g después de 35 días de hidrólisis,
correspondiente al 43% de la hidrólisis de la proteína soluble, mientras que el pH
de este se estabilizó al día 7 (Fig 5).
La proteína soluble del ensilado de botete tuvo un valor inicial de 762.9 mg/g que
disminuyó a 342.04 mg/g después de 35 días de hidrólisis, correspondiente al
55.17 % de la hidrólisis de la proteína soluble, mientras que se estabilizó el pH a
(3.8 ± 0.2) al día 14 (Fig 6).
40
Figura 5. Hidrólisis proteica de ensilado de tilapia durante el proceso de ensilaje
Figura 6. Hidrólisis proteica de ensilado de botete durante el proceso de ensilaje
41
Finalmente el ensilado de congrio cornudo presentó el menor valor de proteína
soluble que fue de 663.3 mg/g hasta 273.7 mg/g, correspondiente al 58.7 % de la
hidrólisis de la proteína soluble. Estabilizándose el pH al día 25. Las muestras
tomadas después de ese día tuvieron un incremento de proteína soluble
registrando un valor final de 350.19 mg/g (Fig. 7), después de los 35 días. Este
inesperado aumento de proteína soluble puede ser debido a la sobreestimación
durante el muestreo, debido a la falta de homogeneidad de residuos de pescado
en el ensilado.
Figura 7. Hidrólisis proteica de ensilado de congrio cornudo durante el proceso de
ensilaje
7.3.3. Selección de ensilado empleado en formulación y elaboración de dietas experimentales Con base a los resultados físicos y nutrimentales de los ensilados de pescado se
seleccionó al de tilapia como la mejor alternativa para elaborar las dietas
experimentales para los bioensayos encaminados a evaluar el crecimiento de
tilapia. Los residuos del proceso de fileteo de tilapia utilizados como ingrediente en
la elaboración del ensilado seleccionado para las formulaciones contiene la
42
composición nutrimental presentada en Tabla 8.Además de que al ser tilapia una
especie que está ampliando su cultivo extensivo, se considera que los desechos
provenientes del fileteo serán más abundantes, así como más disponibles para
que esta tecnología pueda aplicarse de manera regional.Otra ventaja adicional es
que al ser considerado un subproducto su obtención se logra por acuacultura o
captura y es permanente durante el año, a diferencia de botete y congrio cornudo
que se obtienen solamente por pesca extractiva y en temporadas o ciclos de
pesca.
Tabla 8. Composición química proximal de residuos de fileteo de tilapia sin
vísceras
Muestra Proteína Lípidos Humedad Fibra Cenizas ELN
Residuos de tilapia sin vísceras
43.94 ± 1.35
31.72 ± 0.19
4.10 ± 0.04
0.19 ± 0.02
19.99 ± 0.48
4.16
Valores expresados en g/100 g. Indica promedio de tres repeticiones ± DE
7.4. Proceso de hidrólisis de ensilado de tilapia La proteína soluble, cuantificada como nitrógeno proteico, disminuye debido a su
transformación en nitrógeno no proteico durante el proceso de hidrólisis proteica.
Esta proteína está constituida por péptidos cortos, aminoácidos libres y bases
nitrogenadas volátiles los cualesse incrementan a medida que se desarrolla la
hidrólisis. De tal manera que el resultado de la hidrólisis es la disminución del
nitrógeno proteico y el aumento del nitrógeno no proteico.
7.4.1. Nitrógeno proteico En la Figura 8 se muestra la tendencia que toma el nitrógeno proteico durante la
proteólisis en el proceso de ensilaje de tilapia.
43
Figura 8. Cinética del nitrógeno proteico durante proceso de ensilaje de tilapia
7.4.2. Nitrógeno no proteico En la Figura 9 se muestra la tendencia que toma el nitrógeno no proteico durante
la proteólisis en el proceso de ensilaje de tilapia.
Figura 9. Cinética del nitrógenono proteico durante proceso de ensilaje de tilapia
0123456789
10
0 5 10 15 20 25 30 35
0123456789
10
0 5 10 15 20 25 30 35
% N
itróg
eno
Proceso de ensilaje (días)
% N
itróg
eno
Proceso de ensilaje (días)
44
7.5. Composición química proximal de ingredientes proteínicos de dietas para tilapia O. niloticus. 7.5.1. Ensilado de tilapia El porcentaje de proteína aportado por el ensilado es considerable para la
elaboración de piensos alimenticios de acuerdo a la composición proximal del
ensilado de tilapia (Tabla 9).
Tabla 9. Composición química proximal de ensilado de tilapia
Muestra Proteína Lípidos Humedad Fibra Cenizas ELN
Ensilado de
tilapia
42.29±1.80
26.59±0.90
4.14±0.37
0.18 ± 0.01
18.01± 0.26
12.94
Valores expresados en g/100 g. El resultado es el promedio de tres repeticiones y
presenta desviación estándar.
7.5.2. Jatropha curcasno tóxica Posterior a la segunda extracción, los valores de proteína y lípidos se modificaron,
debido a la remoción de los lípidos, duplicándose el porcentaje de proteína y
disminuyéndose los lípidos hasta un 30%. Lo anterior de acuerdo a los resultados
químicos proximales correspondientes a la pasta de J. curcas sometida a dos
procesos de extracción de lípidos; uno mediante prensado en frio y el segundo por
extracción en frío con hexano (Tabla 10).
7.6. Perfil de aminoácidos de ingredientes proteínicos de dietas para tilapia O. niloticus. 7.6.1. Ensilado de tilapia
Los aminoácidos que presentaron los valores más altos fueron cisteína, lisina y
leucina. El aminoácido limitante fue histidina. Triptófano no fue determinadodebido
45
a que el método empleado no lo cuantifica de acuerdo al perfil de aminoácidos del
ensilado de tilapia (Tabla 11).
Tabla 10. Análisis químico proximal de pasta de J. curcasdespués de una
extracción en prensa y posteriormente de una extracción con hexano
Ingredientes Humedad Proteína Lípidos Cenizas Fibra ELN
Pasta extracción prensa 4.51±0.04 29.9±0.05 49.66±0.37 4.93 ±0.14 5.57±0.04 9.94
Pasta extracción c/hexano 4.02±0.02 66.32±0.14 13.1±0.40 5.57 ±0.08 4.93±0.03 6.06
Valores expresados en g/100 g. Indica promedio de tres repeticiones ± Desviación
Estándar
Tabla 11. Perfil de aminoácidos de ensilado de tilapia
Aminoácidos Ensilado de tilapia
Histidina ND
Treonina 2.32
Arginina 2.23
Tirosina 1.17
Valina 1.93
Fenilalanina 1.6
Isoleucina 1.77
Leucina 3.09
Lisina 3.47
Cisteína 6.39
Metionina 0.98
Triptófano NC
Valores expresados en mg/g ND= No detectado NC= No cuantificado
46
7.6.2. Jatropha curcasno tóxica Los aminoácidos que presentaron los valores más altos fueron cisteína, leucina y
arginina. Valina, metionina e histidina, presentaron valores más bajos. En Tabla 12
se muestra el perfil de aminoácidos de las pastas de J. curcas correspondientes a
la primera y segunda extracción lipídica.
Tabla 12. Perfil de aminoácidos de J. curcas
Aminoácidos Pasta deJ. curcas Extracción en prensa
*Pasta de J. curcas Extracción con hexano
Histidina
1.05
2.39
Treonina 2 4.56 Arginina 3.54 8.07 Tirosina 1.55 3.53 Valina 0.54 1.23 Fenilalanina 2.55 5.81 Isoleucina 2.78 6.34 Leucina 4.07 9.28 Lisina 2.38 5.43 Cisteína 7.49 17.08 Metionina 0.63 1.44 Triptófano NC NC
Valores expresados en mg aa /g NC= No cuantificado
* Se determinó por cálculo matemático.
7.7. Diseño de dietas isoproteicas para tilapia (Oreochromis niloticus). De acuerdo a la composición química proximal y al perfil de aminoácidos
contenido en los ingredientes a utilizar, se determinó el valor específico de cada
ingrediente a utilizar en los diferentes porcentajes de inclusión. Para el primer
bioensayo de crecimiento con juveniles se realizó inclusión al 50 % de ensilado de
tilapia y J. curcasprensada tomando como base de referencia la investigación de
Makkar et al., 2003, donde utilizan el mismo porcentaje de inclusión de J. curcasno
47
tóxica con harina de pescado. Además de dietas a base de ensilado (100%)y de
pasta de J. curcas(100%).
Las dietas evaluadas en el bioensayo de crecimiento con juveniles de tilapia están
formuladas a razón de 30 a 34 porciento de proteína (Tabla 13). La dieta que
presentó mayor contenido de lípidos fue la diseñada con J. curcas presada en frío
como ingrediente principal (JCP), justificación para realizar una segunda
extracción de lípidos con hexano. Posterior a este proceso el porcentaje de
proteína duplicó su valor, dando pie a la evaluación de diferentes porcentajes de
inclusión en alevines, ya que en este estadio el pez requiere mayor demanda de
proteína para cumplir con sus procesos metabólicos.
Tabla 13. Composición proximal de dietas a evaluar en bioensayo de crecimiento
para juveniles de tilapia.
Humedad
Proteína
Extracto etéreo
Fibra cruda
Cenizas
E.L.N
Energía
AC 4.9±0.03 33.22±0.18 14.22±0.06 0.05 ± 0.05 5.99±0.03 46.52
4418.3 ±
13.57
ET 6.17±0.13 30.34±0.35 7.97± 0.06 0.35 ± 0.06 5.88±0.03 55.66
4423.0 ±
21.32
JCP 2.84±0.01 34.89±0.04 47.23±0.32 4.55 ± 0.04 6.46±0.03 7.87
6815.4 ±
18.09
50 % JCPE 4.11±0.05 33.36±0.2 30.03± 0.1 1.04 ± 0.1 4.75±0.04 30.82
5540.7 ±
28.87
Tratamientos: AC) Dieta control; ET) Dieta de ensilado de tilapia; JCP) Jatropha
curcas prensada; 50% JCPE) Inclusión al 50% de ensilado de tilapia y Jatropha
curcas prensada. Valores expresados g/100 g de dieta en base seca. Indica
promedio de tres repeticiones ± Desviación estándar
Los porcentajes de inclusión a evaluar en alevines de tilapia son de 25 %, 50 % y
75 % de Jatropha curcas no tóxica procesada con hexano y ensilado de tilapia.
Además se evaluaron dietas con un 100% de ensilado de tilapia y 100% de
48
Jatropha curcas no tóxica procesada con hexano. Los valores de proteína en la
dietas oscilaron entre 36 % y 38.9 %. Rango de proteína indispensable en
alimentación de alevines (Tabla, 14).
Tabla 14.Composición proximal de dietas a evaluar en bioensayo de crecimiento
para alevines de tilapia.
Humedad
Proteína
Extracto etéreo
Fibra cruda
Cenizas
E.L.N
AC2 8.80±0.13 38.68±0.44 15.85±0.22 0.13±0.06 8.40±0.15 36.94
ET2 11.10±0.30 38.71±0.16 19.96±0.13 0.23±0.03 12.18±0.05 28.91
25%
JCHET 11.60±0.39 36.20±0.19 8.62±0.15 0.43±0.06 6.99±0.06 47.76
50% JCHET 14.55±0.13 38.80±0.17 8.31±0.10 1.33±0.15 7.80±0.12 43.68
75%
JCHET 10.03±0.04 38.90±0.08 11.48±0.15 1.60±0.06 6.31±0.19 41.72
100% JCH 9.67±0.10 38.72±0.14 11.80±0.10 2.10±0.20 6.0±0.02 41.39
Tratamientos: AC2) Dieta control; ET2) Dieta de ensilado de tilapia; 25%, 50%,
75% JCHET), inclusión en dietas de J.curcas no tóxica tratadas con hexano y
ensilado de tilapia; 100% JCH) J.curcas tratada con hexano. Valores expresados
g/100 g de dieta en base seca. Indica promedio de tres repeticiones ± Desviación
estándar.
7.8. Aminoácidos esenciales en dietas para tilapia O. niloticus. En la Tabla 15se estima el balance de aminoácidos que requiere la tilapia en cada
uno de los bioensayos de crecimientos, donde se toma como base para realizar el
cálculo los requerimientos de tilapia citados por NCR, 1993 y los porcentajes de
proteína de las dietas (33% y 38%). Además es relevante mencionar que los
aminoácidos más importantes en la nutrición de peces son metionina, lisina y
cisteína.
49
Tabla 15. Balance de aminoácidos requeridos para tilapia en cada uno de los
bioensayos de crecimiento
Aminoácidos
Requerimiento de AA*
% proteína
Requerimientos de AA para juveniles de tilapia(33 % de
proteína)
Requerimientos en dietas con 38 % de
proteína Histidina 1.72 0.57 0.65 Treonina 3.75 1.24 1.43 Arginina 4.2 1.39 1.60 Tirosina 5.54 1.83 2.11 Valina 2.8 0.92 1.06 Fenilalanina 3.75 1.24 1.43 Isoleucina 3.11 1.03 1.18 Leucina 3.39 1.12 1.29 Lisina 5.12 1.69 1.95 Cisteína 3.21 1.06 1.22 Metionina 2.68 0.88 1.02
*Valor de referencia para estimar los AA requeridos de acuerdo a los porcentajes
de proteína a evaluar.
7.9. Aminoácidos presentes en dietas experimentales para juveniles de tilapia La Tabla 16muestra el balance de aminoácidos presentes en cada una de las
dietas experimentales evaluadas en bioensayo de crecimiento para juveniles de
tilapia, además de los requerimientos de la especie de acuerdo al 33 % de
proteína que componen los tratamientos.
Con relación a los aminoácidos más importantes en la nutrición de peces el
aminoácido limitante en todos los tratamientos a evaluar para el primer bioensayo
de crecimientos es metionina. Además de presentar deficiencia también en tirosina
en todos los tratamientos y valina en los tratamientos que contienen J. cucas.
Histidina es limitante en ensilado de tilapia e inclusión de 50% JCPE.
50
Tabla 16.Aminoácidos presentes en dietas experimentales para juveniles de tilapia
O. niloticus
Aminoácidos ET 50%
JCPE JCP
Requerimiento Tilapia
(dietas 33 % proteína) Histidina ND 0.45 1.01 0.57 Treonina 1.25 1.56 1.92 1.24 Arginina 1.25 2.22 3.39 1.39 Tirosina 0.63 1.02 1.49 1.83 Valina 1.04 0.81 0.52 0.92 Fenilalanina 0.86 1.58 2.45 1.24 Isoleucina 0.96 1.73 2.67 1.03 Leucina 1.67 2.68 3.90 1.12 Lisina 1.87 2.06 2.28 1.69 Cisteína 3.45 5.14 7.18 1.06 Metionina 0.53 0.56 0.60 0.88
Tratamientos: AC) Control; ET) Ensilado de tilapia; JCP) Jatropha curcas
prensada; 50% JCPE) Inclusión al 50% de ensilado de tilapia y Jatropha curcas
prensada. Valores expresados en mg aa/g de muestra.
7.10 Aminoácidos presentes en dietas experimentales para alevines de tilapia La Tabla 17muestra el balance de aminoácidos presentes en cada una de las
dietas experimentales evaluadas en bioensayo de crecimiento para alevines de
tilapia, además de los requerimientos de la especie de acuerdo al 38 % de
proteína que componen los tratamientos.
Los aminoácidos limitantes en las dietas para el segundo bioensayo de
crecimiento son metionina y tirosina. En el caso de histidina es limitante en
tratamientos que se elaboraron con ensilado de tilapia. Y valina en los
tratamientos que tienen como ingrediente J. curcas en incorporaciones mayores al
50%.
51
Tabla 17. Aminoácidos presentes en dietas experimentales para alevines de
tilapia O. niloticus
Aminoácidos ET 25%
JCHET 50%
JCHET 75%
JCHET 100% JCH
Requerimiento tilapia
(38% proteína)
Histidina ND 0.32 0.63 0.63 1.27 0.65 Treonina 1.74 1.91 2.08 2.08 2.42 1.42 Arginina 1.74 2.37 3.01 3.01 4.28 1.59 Tirosina 0.88 1.13 1.38 1.38 1.87 2.10 Valina 1.45 1.25 1.05 1.05 0.65 1.06 Fenilalanina 1.20 1.67 2.14 2.14 3.08 1.42 Isoleucina 1.33 1.84 2.34 2.34 3.36 1.18 Leucina 2.32 2.97 3.62 3.62 4.92 1.28 Lisina 2.60 2.67 2.74 2.74 2.88 1.94 Cisteína 4.79 5.86 6.92 6.92 9.05 1.21 Metionina 0.74 0.74 0.75 0.75 0.76 1.01
Tratamientos: AC2) control; ET2) ensilado de tilapia; 25%, 50%, 75% JCHET),
inclusión en dietas de J.curcas no tóxica tratadas con hexano y ensilado de tilapia;
100% JCH) J.curcas tratada con hexano.
7.11. Bioensayos de crecimiento de tilapia O. niloticus 7.11.1. Oxígeno disuelto y temperatura Los valores de oxígeno disuelto y temperatura en los dos sistemas de cultivo
estuvieron dentro del intervalo óptimo para el crecimiento de tilapia del Nilo, según
Ross(2000), Sarig(1969), Mires(1995), (Tabla 18 y Tabla 19).
7.11.1.2. Determinación de compuestos nitrogenados (NH3, NO2, NO3
Los resultados de calidad de agua para los dos sistemas de cultivo muestran en
las Tablas 20 y 21, que los tratamientos presentan concentraciones de amonio,
nitritos y nitratos dentro de los intervalos óptimos para el crecimiento de tilapia.
)
52
Tabla 18. Oxígeno disuelto y temperatura del agua del sistema de cultivo
controlado para juveniles de tilapia. Se indican promedios ± DE.
Tratamiento OD (mg/L) T °C AC
5.4 ± 0.57
28.5 ± 2.8
ET 5.4 ± 0.62 28.8 ± 1.9 50% JCPE 5.4 ± 0.61 28.8 ± 1.7 JCP 5.4 ± 0.49 29.2 ± 3.1 Intervalo óptimo ˃ 3 22-29
Tratamientos: AC) Control; ET) Ensilado de tilapia; JCP) Jatropha curcas
prensada; 50% JCPE) Inclusión al 50% de ensilado de tilapia y Jatropha curcas
prensada.
Tabla 19. Oxígeno disuelto y temperatura del agua del sistema de cultivo
controlado para alevines de tilapia. Se indican promedios ± DE.
Tratamiento
OD (mg/L) T °C
AC2 6.2 ± 0.3 28.8 ± 0.1 ET2 6.6. ± 0.1 28.4 ± 0.4 25% JCHET 6.5 ± 0.1 28.4 ± 0.3 50% JCHET 6.3 ± 0.1 28.5 ± 0.2 75% JCHET 6.5 ± 0.1 26.9 ± 1.1 100% JCH 6.6 ± 0.1 27.5 ± 0.0 Intervalo óptimo ˃ 3 22-29
Tratamientos: AC2) control; ET2) ensilado de tilapia; 25%, 50%, 75% JCHET),
inclusión en dietas de J.curcas no tóxica tratadas con hexano y ensilado de tilapia;
100% JCH) J.curcas tratada con hexano.
53
Tabla 20. Concentración de nitritos, nitratos y amonio (mg/L) del agua del sistema
de cultivo controlado de juveniles de tilapia. Se indican los promedios ± DE.
Tratamientos Nitritos (mg/L) Nitratos (mg/L) Amonio (mg/L) AC 0.064 ± 0.08 0.189 ± 0.08 0.04 ± 0.04 ET 0.029 ± 0.03 0.085 ± 0.03 0.04 ± 0.04 50% JCPE 0.068 ± 0.03 0.152 ± 0.03 0.04 ± 0.02 JCP 0.086 ± 0.13 0.205 ± 0.13 0.09 ±0.1 Intervalo óptimo 0 – 0.1 mg/L ˂ 10 mg/L ˂ 0.05
Tratamientos: AC) Control; ET) Ensilado de tilapia; JCP) Jatropha curcasprensada;
50% JCPE) Inclusión al 50% de ensilado de tilapia y Jatropha curcas prensada.
Tabla 21. Concentración de nitritos, nitratos y amonio (mg/L) del agua del sistema
de cultivo controlado de alevines de tilapia. Se indican los promedios ± DE.
Tratamientos Nitritos (mg/L) Nitratos (mg/L) Amonio (mg/L) AC2
0.03 ± 0.1
0.06 ± 0.3
0.02 ± 0.01
ET2 0.04 ± 0.3 0.02 ± 0.2 0.02 ± 0.02 25 % JCHET 0.05 ± 0.2 0.09 ± 0.1 0.03 ± 0.03 50 % JCHET 0.04 ± 0.3 0.13 ± 0.1 0.03 ±0.02 75 % JCHET 0.05 ± 0.0 0.18 ± 0.02 0.02 ± 0.01 100 % JCH 0.06 ± 0.2 0.10 ± 0.03 0.04 ± 0.02 Intervalo óptimo 0 – 0.1 mg/L ˂ 10 mg/L ˂ 0.05
Tratamientos: AC2) control; ET2) ensilado de tilapia; 25%, 50%, 75% JCHET),
inclusión en dietas de J.curcas no tóxica tratadas con hexano y ensilado de
tilapia; 100% JCH) J.curcas tratada con hexano.
7.11.2. Bioensayo de crecimiento de juveniles de tilapia La figura 10 muestra el comportamiento de los tratamientos referente al
crecimiento de juveniles de tilapia cuyo peso inicial fue de 6.15 g.El tratamiento
que presentó mayor ganancia en peso fue el control el cual presentó diferencias
significativas (P<0.05)respecto a los demás tratamientos.
54
Posteriormente las dietas a base de ensilado de tilapia y dieta 50 % de inclusión
de J. curcas no tóxica prensada en frio y ensilado de tilapia, no presentaron
diferencias (P>0.05)entre ellas, sin embargo son significativamente diferentes(P<
0.05) al alimento control. El tratamiento que no presentó resultados positivos en
ganancia en peso fue la dieta a base de Jatropha curcas no tóxica prensada en
frío.
Figura 10. Crecimiento de juveniles de tilapia. Se muestra el promedio de 6
organismos expresado en g (peso húmedo). Tratamientos: AC) Control; ET)
Ensilado de tilapia; JCP) Jatropha curcas prensada; 50% JCPE) Inclusión al 50%
de ensilado de tilapia y Jatropha curcas prensada
7.11.3. Bioensayo de crecimiento de alevines de tilapia En la Figura 11 se muestra el comportamiento de los tratamientos evaluados en
alevines de tilapia teniendo como peso inicial 0.95 ± 0.25 g. Se llevó a cabo en
periodo de verano con duración de 60 días. Los tratamientos que presentaron
mayor ganancia en peso fueron ensilado de tilapia (ET2) y alimento control (AC2)
y no presentaron diferencias significativas entre ellos (P> 0.05). Seguido del
Peso (g)
55
tratamiento con inclusión del 25% de J.curcas no tóxica tratada con hexano y
ensilado de tilapia con el que presentaron diferencias significativas (P< 0.05.Por
último las dietas que no tuvieron resultados positivos en crecimiento y fueron
diferentes significativamente a los anteriores (P< 0.05) son: 50 %, 75 % de
J.curcas no tóxica tratadas con hexano y ensilado de tilapia (JCHET) y 100 % J.
curcas tratada con hexano (JCH). Además de presentar 38.9% de mortandad.
Figura11. Crecimiento de alevines de tilapia. Se muestra el promedio de 3
organismos expresado en g (peso húmedo). Tratamientos: AC2) control; ET2)
ensilado de tilapia; 25%, 50%, 75% JCHET), inclusión en dietas de J.curcas no
tóxica tratadas con hexano y ensilado de tilapia; 100% JCH) J.curcas tratada con
hexano.
7.11.4. Tasa de crecimiento diario 7.11.4.1 Tasa de crecimiento diario en bioensayo de juveniles de tilapia
Peso (g)
Días
56
En la Tabla 22 se puede observar que los organismos que presentaron mayor
crecimiento diario fueron los alimentados con la dieta control. Valores de
crecimiento diario similar presentaron los juveniles de tilapia alimentados a base
de ensilado de tilapia y de la dieta 50 % JCPE. La menor tasa de crecimiento
diario se observó en juveniles de tilapia alimentados con la dieta que sólo contenía
como ingrediente base pasta de J. curcas sometida a extracción con prensa
(P<0.001).
Tabla 22. Tasa de crecimiento diario de juveniles de tilapia en función de los 4
alimentos
Tratamiento TCD (g/día)
AC 0.24
ET 0.13
50 % JCPE 0.14
JCP 0.09
Tratamientos: AC) Control; ET) Ensilado de tilapia; JCP) Jatropha curcas
prensada; 50% JCPE) Inclusión al 50% de ensilado de tilapia y Jatropha curcas
prensada.
7.11.4.2.Tasa de crecimiento diario en bioensayo de alevines de tilapia El análisis de tasa de crecimiento diario en el bioensayo de alevines de tilapia,
muestra que los tratamientos 50 % JCHE, 75 % JCHE y 100 % JCH no
presentaron crecimiento alguno durante los 60 días de cultivo. Los organismos
alimentados con inclusión de J. curcas de 25 % alcanzaron un crecimiento diario
de 0.02 g/día. Siendo AC2 y ET2los que presentaron mayor TCD.
Tabla 23. Tasa de crecimiento diario de alevines de tilapia
57
Tratamiento TCD (g/día)
AC2 0.02 ET2 0.01
25 % JCHE 0.02 50 % JCHE 0 75 % JCHE 0 100 % JCH 0
Tratamientos: AC2) control; ET2) ensilado de tilapia; 25%, 50%, 75% JCHET),
inclusión en dietas de J.curcas no tóxica tratadas con hexano y ensilado de tilapia
100% JCH) J.curcas tratada con hexano. Valores expresados en g/día
7.11.5. Factor de Conversión alimenticia (FCA) 7.11.5.1. Factor de conversión alimenticia en bioensayo de juveniles de tilapia El tratamiento control presentó mayor ganancia en peso y mejor factor de
conversión alimenticia presentando diferencias significativas en relación a los
demás tratamientos (P<0.001), lo cual se puede observar en la figura 16.
58
Figura 12. Factor de conversión alimenticia en bioensayo de crecimiento de
juveniles de tilapia O.niloticus. Tratamientos: AC) Control; ET) Ensilado de tilapia;
JCP) Jatropha curcasprensada; 50% JCPE) Inclusión al 50% de ensilado de tilapia
y Jatropha curcas prensada.
7.11.5.2. Factor de conversión alimenticia en bioensayo de alevines de tilapia El factor de conversión alimenticia de los tratamientos en bioensayo de
crecimiento de alevines de tilapia presentó diferencias significativas(P<0.001),
obteniendo dos grupos: en donde los tratamientos AC2, ET2 y 25% JCHET fueron
significativamente iguales entre sí (P>0.05);(b), pero diferentes respecto a los
tratamientos: 50% JCHET, 75% JCHET y 100% JCH (a) (P< 0.05), Fig. 17.
Figura 13. Factor de conversión alimenticia en bioensayo de crecimiento de
alevines de tilapia O. niloticus. Tratamientos: AC2) control; ET2) ensilado de
tilapia; 25%, 50%, 75% JCHET), inclusión en dietas de J.curcas no tóxica tratadas
con hexano y ensilado de tilapia 100% JCH) J.curcas tratada con hexano.
7.11.6. Sobrevivencia en bioensayos de crecimiento de tilapia O. niloticus
59
7.11.6.1. Sobrevivencia en bioensayo dejuveniles de tilapia Durante el bioensayo de crecimiento de 60 días la sobrevivencia general fue del
98 %, en la Fig. 18 se puede observar la supervivencia para cada uno de los
tratamientos en este bioensayo.
Figura 14. Sobrevivencia de juveniles de tilapia durante 60 días de crecimiento.
Tratamientos: AC) Control; ET) Ensilado de tilapia; JCP) Jatropha curcas
prensada; 50% JCPE) Inclusión al 50% de ensilado de tilapia y Jatropha curcas
prensada. En el análisis de comparación de medias no se encuentran diferencias
significativas entre los tratamientos (p>0.05)
7.11.6.2. Sobrevivencia en bioensayo de alevines de tilapia Durante el segundo bioensayo de crecimiento con duración de 60 días la
sobrevivencia de los organismos fue de 61 %, en la Fig. 14 se puede observar la
supervivencia para cada uno de los tratamientos en este bioensayo.
% Sobrevivencia
60
Figura 15. Sobrevivencia de alevines de tilapia durante 60 días de crecimiento.
Tratamientos: AC2) control; ET2) ensilado de tilapia; 25%, 50%, 75%
JCHET),inclusión en dietas de J.curcas no tóxica tratadas con hexano y ensilado
de tilapia 100% JCH) J.curcas tratada con hexano.
% Sobrevivencia
61
8. DISCUSIÓN 8.1. Parámetros de calidad del proceso de ensilaje 8.1.1. Características físicas de ensilado de pescado La calidad de desechos pesqueros utilizados para la fermentación son
determinantes en la calidad del ensilado de pescado, ya que existe la posibilidad
de una variación considerable entre lotes debido al origen del pescado utilizado
(Arason, 1994).
El pH es uno de los índices de mayor importancia que debe ser controlado durante
todo el proceso y almacenamiento de ensilados, ya que refleja el desarrollo del
proceso, la calidad del ensilado y manifiesta cualquier cambio que pueda afectar al
producto. Los valores de pH del ensilado químico de pescado, resultaron de
aproximadamente 4.0 durante los 35 días de almacenamiento. Esto coincide con
valores reportados en otros trabajos, en los que se utilizan diferentes tipos de
pescado, tanto para ensilados químicos ó biológicos (Lessis, 1994; Vidotti et al.,
2002 a; González y Marín, 2005; Toledo et al., 2007 y Llanes et al., 2007b). Los
valores de acidificación para ensilado de tilapia permiten demostrar la posibilidad
de obtener un producto estable a tiempos cortos.
Según Bertullo et al.(1992) las características organolépticas de los ensilados se
basan en el aroma, color, consistencia y sabor. Las características de un buen
ensilado son tomando como base el color de la mezcla que va oscureciendo,
consistencia pastosa y el olor ácido se vuelve más suave. Estas características
van cambiando de acuerdo a la acción de las enzimas sobre el material a ensilar,
dando como resultado el descenso del pH y la hidrólisis de las proteínas. De
acuerdo a lo anterior y tomando como base de referencias las características
citadas por los autores se puede definir al ensilado de tilapia del presente estudio
como ensilado de buena calidad, debido a que las características del ensilado de
tilapia presentadas a los 35 días de almacenamiento son: color castaño el cual se
62
mantuvo levemente más claro al día inicial, el olor a aceite de pescado
ligeramente ácido fue agradable sin ningún indicio de posteriores procesos de
descomposición. Según lo reportado por Pérez et al. (1997)los olores
desagradables son muy propensos en las conservaciones de pescados y mariscos
al ser alimentos proteicos muy putrecibles, cuando no pueden ser conservados
correctamente en refrigeración o cuando no se tienen adecuados preservantes, ya
que contienen una flora bacteriana normal, que unida a los contaminantes que se
agregan al capturarlos y manipularlos, invaden la piel y la carne con gran rapidez,
produciendo sustancias que ocasionan alteraciones del olor. Otro indicador es la
consistencia, la cual fue pastosa, porque a pesar de que se observó presencia de
líquido exudado, la cantidad no era suficiente para darle una consistencia más
líquida como fue el caso de ensilados de botete y congrio cornudo. La consistencia
pastosa fue adecuada para manipular el ensilado como un ingrediente de la dieta
sin la necesidad de incluir un proceso de secado. En este parámetro repercute el
líquido exudado, lo cual se debe principalmente a la liberación de agua de los
tejidos durante la hidrólisis de las proteínas del pescado, siendo un proceso
enzimático e independiente de la producción de ácidos, tal y como fue citado por
Bello, (1994). Además, Vidotti et al.(2002), refieren que los ensilados de pescado
originan productos con características organolépticas diferentes, atendiendo a la
metodología de preservación, la composición de los residuos y la especie
utilizada.
8.1.2. Calidad nutrimental de ensilados de pescado 8.1.2.1. Composición química proximal de ensilados
La proteína para los peces es uno de los componentes energéticos más
importantes y por consiguiente se debe tomar en cuenta las fuentes posibles de
ésta a ser usadas en las dietas (Hilton, 1983). Por lo anterior, se sabe que la
proteína es uno de los requerimientos más importantes a considerar durante el
diseño de una dieta nutricional adecuada para peces en cultivo (Olvera-Novoa et
al., 1996). En este estudio se puede observar que el valor de proteína cruda (PC)
63
de 43.94% obtenido de los descartes del proceso de fileteo de tilapia es similar a
los valores obtenidos por Vidotti et al.(2003) y Gerón et al.(2007) los cuales
reportan valores de PC de 42.99 % y 40.69%, respectivamente. Así mismo,
Fangbenro y Jauncey,(1998), Vidotti et al.(2003) y Gerón et al.(2007)evaluaron
PC en ensilados químicos de tilapia, reportando valores de 41.3 %, 39.59 % y
37.01% respectivamente, cuyos valores son inferiores a los obtenidos en este
trabajo (42.29 %). El contenido de proteína del ensilado de tilapia fue más bajo
que el contenido de proteína de los residuos de tilapia, ésta reducción de nivel de
proteína es consecuencia de la hidrólisis proteica, desde el efecto de la autolisis
en la degradación de proteínas y nucleoproteínas pudiendo transformarlos en
compuestos más simples, como aminoácidos (Baraquet y Lindo, 1985) y amonio
que se puede volatilizar durante el almacenamiento del ensilado. Resultados
similares fueron observados por Vidotti et al. (2002), quienes encontraron niveles
de proteína de 39.6 % en ensilado comparado con residuos de tilapia 42.9 %. Por
otro lado,Gerón et al. (2007) y Morales – Ulloa y Oetter (1997) encontraron
resultados similares a los anteriores en ensilados preparados a partir de una
mezcla de ácido fórmico y ácido sulfúrico así como en ensilados biológicos y
enzimáticos, respectivamente.
A pesar de que los ensilados de botete y congrio cornudo presentaron mayor
porcentaje de proteína (80 % y 48 %, respectivamente) que el de tilapia, no tienen
una consistencia adecuada para la integración de una masa homogénea en la
elaboración de los piensos alimenticios a evaluar, debido al alto contenido de
espinas y huesos que presentaron. Así mismo, se ha reportado que las proteínas
procedentes de huesos y tejido conectivo son menos digeribles que las de origen
muscular, reduciendo su calidad nutrimental (NRC, 1993).
Por otro lado, el ensilado de congrio cornudo tiene un alto contenido de cenizas
(40.72 %).Este valor es un índice importante a evaluar en la nutrición de peces, un
mayor nivel de cenizas reduce la palatabilidad del alimento (NRC, 1993). Gerón et
al.(2007) reportan valores de 20.2 % de ceniza en los descartes de fileteo de
tilapia, resultado similar al reportado en el presente (19.99% de ceniza). El
64
ensilado de tilapia del presente estudio presenta valores de ceniza de 18 %, este
porcentaje es inferior al reportado por los autores, donde los niveles de ceniza en
ensilado ácido de tilapia fueron de 23.4 %. Estos resultados son considerables
debido a la presencia de huesos, espinas y escamas en la materia prima. Se han
reportado deficiencias fisiológicas como formación de cataratas, falta de absorción
de zinc y menor crecimiento en peces alimentados con dietas a base de harina de
pescado con alto contenido de cenizas (Satoh et al., 1983a., Ketola, 1979).
Además de satisfacer los requerimientos de ácidos grasos esenciales, los lípidos
proporcionan una fuente de energía (1 g de fosfolípidos proporcionan alrededor de
8 kcal y 1 g de triglicéridos 9.5 kcal); (Guillaume et al., 1999). En este trabajo, el
contenido de lípidos en el ensilado de tilapia fue de 26.59 %, presentando un
porcentaje menor al ensilado de tilapia reportado por Gerón et al. (2007) en el que
obtuvieron 35.37 % de lípidos cuyos residuos de tilapia provenientes del fileteo
constaron de cabeza y cuerpo sin vísceras, similar a este trabajo. Uno de los
factores principales influyeron en la diferencia en composición lipídica del presente
trabajo y la investigación de Gerón et al.(2007), es que esos autores ensilaron
residuos de tilapia cultivada en Brasil, con un alimento diferente. Reinitz et al.
(1979) mencionan que la composición química de las diferentes especies de
pescado muestran diferencias dependiendo de la estación del año,
comportamiento migratorio, maduración sexual, ciclos alimenticios, principalmente.
Estos factores son observados en peces silvestres, de mar abierto y de aguas
continentales. En el caso de acuacultura se han reportado factores como la
composición del alimento, ambiente, tamaño del pez y rasgos genéticos, los
cuales tiene un impacto en la composición y la calidad del pescado de
acuacultura. Desde el punto de vista nutricional, el requerimiento óptimo de lípidos
en la nutrición de tilapia del Nilo es < 10 %, tomando este valor de referencia el
porcentaje de lípidos en el ensilado de tilapia del presente trabajo es alto.
El valor nutricional de los carbohidratos (E.L.N) varía entre los peces. Los peces
de aguas cálidas pueden utilizar mayor cantidad de carbohidratos que los de
aguas frías y marinos. Se ha demostrado en peces que no existe ningún requisito
65
dietético para los carbohidratos, sin embargo, si no se proporcionan en la dieta
otros compuestos tales como proteínas y lípidos, se catabolizan para producir
energía y para la síntesis de diversos compuestos biológicos importantes por lo
general derivados de los carbohidratos. Por lo tanto es importante proporcionarlos
en concentraciones apropiadas en dietas para peces (Shimeno, 1974). La
capacidad de los peces para utilizar los carbohidratos de la dieta difiere de
acuerdo a la especie. Diversos estudios han indicado que la carpa común
(Shimeno et al., 1977; Takeuchi et al., 1979; Furuichi y Yone, 1980; Shimeno et
al., 1981), y la tilapia (Anderson et al., 1984; El-Sayed and Garling, 1988) utilizan
niveles más altos que los salmónidos (Buhler and Halver, 1961; Edwards et al.,
1977; Atkinson and Hilton, 1981). En el presente estudio el contenido de
carbohidratos en el ensilado de tilapia fue de 12.94 %, Ottati et al.(1990), reporta
10 % de carbohidratos en ensilado biológico de pescado. Anderson et al.(1984)
mencionan que la tilapia puede utilizar eficazmente niveles de carbohidratos hasta
de 30 a 40% en la dieta.
8.1.3. Proceso de hidrólisis del ensilado de tilapia Del 42.29 %de proteína que contiene el ensilado de tilapia del presente estudio, se
cuantificó al inicio del proceso de hidrólisis un total de 647.49 mg de proteína
soluble/g de ensilado hasta 368.56 mg de proteína soluble/g de ensilado después
de 35 días de hidrólisis, esta disminución es debida al proceso de hidrólisis
propiamente.
La hidrólisis proteínica hace que el producto sea más digestible y conveniente en
la formulación de dietas para animales en la etapa de iniciación del crecimiento.
Además, los péptidos y aminoácidos libres podrían ser quimiatractantes
potenciales, así como también estimulantes alimenticios para especies carnívoras
(Lian et al., 2005).
Durante el proceso de ensilaje, la acidificación juega un papel crucial en la
activación de proteasas endógenas que participan en la hidrólisis proteica y en
66
labiodisponibilidad de los aminoácidos, con la transformación a péptidos y
aminoácidos libres altamente solubles (Benjakul y Morrisey, 1997; Ravallec et al.,
2001). Esto último ha sido controversial en cuanto a los beneficios que pueden
ofrecer los hidrolizados proteínicos al ser utilizados en alimentos para animales
(Espe et al., 1992). Sin embargo es recomendable evaluar la digestibilidad
proteínica del ensilado ya que el valor nutricional de dietas balanceadas depende
de la digestibilidad de cada ingrediente (Vidotti et al., 2002).
8.1.3.1. Nitrógeno proteico La hidrólisis del ensilado, puede monitorearse indirectamente con la
transformación de nitrógeno proteico (NP) a nitrógeno no proteico (NNP). Estas
determinaciones muestran un aumento de la hidrólisis proteica rápidamente al
inicio del proceso, haciéndose más lenta progresivamente, este fenómeno lo
podemos observar en la figura 5, donde es relevante el hecho de que el NP en el
ensilado de tilapia decreció rápidamente en los primeros días y después se
mantuvo constante.
Lindgren y Pleaje (1983) mencionan que aunque el fenómeno de acidificación e
hidrólisis parecieran estar separados o ser independientes, presentan una relación
estrecha. A medida que la hidrólisis proteica progresa, se producen compuestos
nitrogenados, como péptidos, aminoácidos, aminas, amonio y otros compuestos
de bajo peso molecular, los cuales perturban la capacidad amortiguadora del
producto, incrementándose la acidez.
8.1.3.2. Nitrógeno no proteico La acidificación en el ensilado de tilapia se mantuvo con valores de pH 4.0 ± 0.1.
Esto pudo haber aumentado la actividad de las enzimas proteolíticas endógenas
del pescado, dando lugar a un incremento del nitrógeno no proteico durante la
proteólisis (Yin et al., 2005).
67
8.2. Composición química proximal de ingredientes proteínicos de dietas para Tilapia 8.2.1. Ensilado de tilapia El ensilado de tilapia presenta valores superiores en cuanto a proteína a los
reportados por Fangbenro y Jauncey, (1998), Vidotti et al. (2003) y Gerón et al.
(2007). A diferencia de los lípidos que el presente estudio reporta porcentaje
inferior al ensilado de tilapia desarrollado por Gerón et al. (2007).Sin embargo
ambos trabajos presentan porcentajes altos en lípidos desde el punto de vista
nutricional para la alimentación de tilapia, debido a que la especie requiere de
menos del 10% para cumplir sus funciones metabólicas.En relación a los
carbohidratos el porcentaje obtenido (12.94 %) es mayor al reportado por), Ottati
et al. (1990), sin embargo Anderson et al. (1994) mencionan que la tilapia puede
utilizar hasta un 30-40 % de carbohidratos en la dieta.
8.2.2. Jatropha curcasno tóxica Los valores de proteína se encuentran en el rango de lo reportado previamente
para pasta de J. curcas después de la extracción de aceite (48 – 64%) (Makkar et
al., 1998 a, 1998b; Martínez et al; 2004, 2006; Rao et al., 2008; De la Vega, 2009).
El contenido de lípidos de J. curcas prensada fue de 49.66 % disminuyendo
significativamente a 13.1 % de lípidos mediante la técnica de extracción en frío
con hexano. Kumar et al. (2008) mencionan que las semillas de Jatropha curcas
son buena fuente de proteínas y aceite. Gubitz et al. (1999) muestran que la
semilla de J. curcas sin cáscara posee entre 43% y 59% de aceite. Oliveira et
al.(2009) muestran que el contenido de aceite representa el 32 % en peso de la
semilla. El autor llega a la conclusión de que la variación en dichas propiedades se
produce por las condiciones ambientales a las cuales está sometido el cultivo.
Sotolongo et al. (2007) mencionan que mediante prensa se puede obtener entre
un 27 y 32 % de aceite de la semilla aunque la extracción química presenta la
ventaja de quitar la mayor parte de aceite contenido en la semilla en periodos
68
cortos de tiempo. Además mencionan que el solvente que mejor ha dado
resultados es n-hexano.
8.3. Perfil de aminoácidos de ingredientes proteínicos de dietas para tilapia Vidotti et al.(2003), mencionan que el valor nutritivo de proteína de cualquier
ingrediente depende principalmente de la capacidad de la proteína para cubrir las
necesidades de los organismos con respecto a los aminoácidos.
Los aminoácidos considerados nutrientes esenciales que brindarán las unidades
básicas para la formación de proteína y tejido que a su vez se reflejará como
crecimiento, son un aspecto fundamental en la dietas para acuacultura, ya que los
elevados requerimientos proteínicos en la dieta de los peces se atribuyen a sus
hábitos alimenticios carnívoros/omnívoros y al uso preferencial de la proteína
dietética sobre los carbohidratos como fuente de energía, esto debido a que los
peces son capaces de obtener más energía metabolizable a partir del catabolismo
de las proteínas que de los carbohidratos (Cowey, 1975).
Un requisito absoluto en las dietas son 10 aminoácidos esenciales (arginina,
histidina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, treonina, triptófano y
valina), demostrado en todas las especies de peces examinados debido a que no
los pueden sintetizar. De esta forma los aminoácidos más importantes desde el
punto de vista nutricional de los peces son lisina, cisteína y metionina (Furuya et
al.(2001); Strom y Eggum, 1981).
8.3.1. Ensilado de tilapia La evaluación de aminoácidos para el ensilado de tilapia del presente estudio
muestra que los aminoácidos limitantes fueron histidina y metionina, para histidina
Vidotti et al.(2003) y Gerón et al.(2007) reportan valores de 2.20 y 2.6 g/ 100 g CP,
respectivamente. Respecto a la evaluación general de aminoácidos esenciales el
presente estudio presenta valores inferiores a los reportados por los autores
mencionados, con excepción de cisteína. Enfatizando los aminoácidos más
69
importantes desde el punto de vista nutricional el ensilado de tilapia desarrollado
en el presente trabajo presenta valores más bajos de metionina (2.31 g/100 g PC)
en comparación a los mencionados por Vidotti y Gerón et al. (2003, 2007), de
5.37 y 3.5 de metionina.De manera similar, tomando en cuenta la composición
aminoacídica de los dos autores, el presente estudio presenta valores inferiores en
contenido de Arginina, y comparándolos con la investigación de Gerón et
al.(2007), los aminoácidos: valina, isoleucina y leucina también son inferiores.
8.4. Diseño de dietas para tilapia
8.4.1. Composición proximal de dietas para juveniles de tilapia Los porcentajes de proteína de los tratamientos formulados para el primer
bioensayo de crecimiento se encuentran dentro de los rangos de proteína
requeridos por la especie en esta etapa de desarrollo entre 30 - 35 % de
proteínapara tilapias con peso entre 10 y 30 g (Hilton, 1993).
Tomando en cuenta el hecho de que las dietas fueron formuladas
isoproteicamente los niveles de lípidos en los tratamientos JCP y 50 % JCPE
estuvieron por encima de los requerimientos de tilapia que son menores a 10%.
Guillaume et al.(1999) mencionan que dietas ricas en lípidos conducen a un mayor
consumo de energía y lípidos por parte del organismo, dando lugar a un marcado
aumento en la deposición de grasa.
8.4.2. Composición proximal de dietas para alevines de tilapia Tomando en cuenta las especificaciones mencionadas por Hilton (1993) las
tilapias con peso de 0.5 a 10 g requieren de un 30 – 45 % de proteína para su
crecimiento, los valores de proteína que contienen los tratamientos formulados
para el bioensayo con alevines de tilapia cumplen con las especificaciones antes
mencionadas.
8.4.2. Aminoácidos esenciales en dietas
70
8.4.2.1. Dietas para juveniles y alevines de tilapia
El diagnóstico de deficiencias nutricionales causadas por una mal nutrición
proteica o aminoacídica en especies acuícolas y animales, es muy difícil de
diagnosticar como consecuencia del estado general de alteración que se evidencia
en el animal. Frente a un problema nutricional de este tipo, los principales
indicadores que muestra el animal son: un deterioro en la eficiencia de conversión,
una reducción en la tasa de crecimiento y una mortalidad mucho mayor que la
esperada. Es decir, todos muy inespecíficos. Sin embargo, diversos investigadores
han informado de signos, más específicos que causarían en especies acuícolas,
deficiencias nutricionales de ciertos aminoácidos en particular.
Para las dietas de los bioensayos los aminoácidos limitantes fueron:
De acuerdo a los resultados obtenidos para bioensayo de juveniles de tilapia
alimentados a base de 33% de proteína, en donde la dieta a base de ensilado de
tilapia (ET), los aminoácidos; histidina, arginina, tirosina, fenilalanina, isoleucina y
metionina no cumplieron con los requerimientos de tilapia, en la dieta 50 % JCPE
no cumplieron histidina, tirosina, valina y metionina y en la dieta JCP: tirosina,
valina y metionina no cumplieron con los requerimientos de tilapia.Podemos
observar en el crecimiento que a pesar de que los aminoácidos estuvieron por
debajo de los requerimientos, las dietas ET y 50 % JCPE tuvieron un crecimiento
similar. La dieta 50 % JCPE se vio beneficiada con la adición de J. curcaselevando
sus valores en arginina, fenilalanina e isoleucina. En cambio, la dieta JCP
presentó deficiencia sólo en los aminoácidos tirosina, metionina y valina, este
último aminoácido se ve deficiente en dietas que tiene como ingrediente a J.
curcas, y en el crecimiento la dieta JCP fue la que presentó resultados negativos.
De acuerdo a los resultados obtenidos para el bioensayo con alevines de tilapia
alimentados a base de 38% de proteína, en donde la dieta a base de ensilado de
tilapia (ET2) presentan valores inferiores a los requerimientos en la especie en los
71
aminoácidos: histidina, tirosina, fenilalanina y metionina. En relación a la dieta 25%
JCHET: histidina, tirosina y metionina; las dietas 50% JCHET y 75% JCHET:
histidina, tirosina, valina y metionina; la dieta 100% JCH: tirosina, valina y
metionina estuvieron por debajo de los requerimientos de la especie. Sin embargo
las dietas ET a pesar de sus deficiencias fue la que presentó resultado positivo en
el crecimiento seguida de la dieta 25% JCHET, y las dietas que presentaron
resultados negativos en crecimiento fueron 50 y 75 % JCHET y 100% JCH, las
cuales a diferencia de ET y 25% JCHET presentan como aminoácido limitante a la
valina.
Una deficiencia de AAE, puede ocurrir por un calentamiento excesivo de las
proteínas en el alimento, durante su elaboración, otra causa puede ocurrir a partir
del tratamiento químico de las proteínas en el alimento con ácidos (producción de
ensilado) o con un álcali o base debido a la pérdida del triptófano libre y de
lisina/cistina, respectivamente (Kies, 1981) ó por el lavado de aminoácidos, tanto
libres como aquellos que forman parte de una proteína.
Diversos estudios han indicado que la metionina es esencial para el óptimo
crecimiento de las especies acuícolas y que la presencia de cistina reduce el
requerimiento de metionina dietaria necesaria para un óptimo crecimiento. En
truchas arco iris se ha informado que dietas deficientes en metionina pueden
causar cuadros caracterizados por cataratas bilaterales. Esta situación la observó
Poston et al. 1977 al alimentar truchas cuya principal fuente de proteína era un
aislado de soya. Bajo condiciones prácticas dietas con un mínimo de 25% de
harina de pescado “especial” para la alimentación de especies acuícolas son más
que suficientes para evitar esta situación.
8.5. Bioensayos de crecimiento de tilapia
72
8.5.1. Calidad de agua Los valores óptimos de amonio en el cultivo de tilapia deben fluctuar entre 0.01 y
0.1 mg/L. Para nitritos y nitratos son 0 – 0.1 mg/L y menos de 10 mg/L,
respectivamente (Rodríguez, 2009). En los dosbioensayosde crecimiento los
rangos de estos parámetros se encontraron dentro de los valores óptimos.
8.5.1. Crecimiento Según afirman Webster y Lim (2002), muchos autores han coincidido en que
existen varios factores que afectan el crecimiento de los peces como lo son los
requerimientos proteicos, la tasa de alimentación y la temperatura del agua, entre
otros. En tal sentido, Toledo y Llanes (2002) plantean que cuando de
requerimientos proteínicos se trata, es necesario considerar la calidad de las
proteínas, el contenido de energía y la digestibilidad de los ingredientes, lo que al
incluir ensilado de pescado en las raciones para tilapia se garantiza que puedan
contar con una cantidad importante de proteína de alto valor biológico, que se
traduce en una adecuada disponibilidad de aminoácidos esenciales, ácidos grasos
y alta digestibilidad de la proteína (Fanbergo y Jauncey; 1993; Vidotti, 2001 y
Vidotti et al., 2002)
Gross et al. (1997) alimentaron peces únicamente con la pasta resultante de la
extracción de aceite previamente tratada con calor presentando una mortandad de
100%. Sin embargo, sometieron a la semilla a extracción de aceite con etanol al
92% (o éter etílico) dando como resultado una pasta resultante de la extracción de
aceite de J. curcas con la que se alimentó a los peces que se desarrollaron sin
problemas y no presentaron síntomas de intoxicación.
Padilla et al. (2000) reportan FCA de 3.12 y 3.69 utilizando raciones secas de 24%
de proteína con ensilado biológico para colossoma macropomum, similares a los
obtenidos en este trabajo. Ogunji y Wirth (2001), utilizando harina de sangre, en
73
sustitución de la harina de pescado en dietas secas de 37% de proteína para
tilapia, obtiene un FCA de 4.43, superior a los obtenidos en este estudio.
9. CONCLUSIONES
1. Al evaluar la calidad física y nutrimental de los ensilados de tilapia, botete y
congrio cornudo, se concluye que el ensilado de tilapia presenta las
características físicas y nutrimentales adecuadas que caracterizan a un
ensilaje de calidad.
2. En la dieta a base de ensilado de tilapia además de tirosina y metionina
hubo deficiencia en fenilalanina, histidina, isoleucina y valina.
3. El balance de aminoácidos en las dietas evaluados en el bioensayo de
crecimiento de juveniles muestran como aminoácidos limitantes a metionina
y tirosina. El balance de aminoácidos en las dietas evaluadas en el
bioensayo de crecimiento de alevines muestran como aminoácidos
limitantes a metionina y tirosina, por lo que se recomienda en ambos, que
sean incorporados de manera directa o mediante otra fuente que la
proporcione.
4. En dietas para juveniles de tilapia se presentan los mismos resultados en
cuanto a crecimiento y FCA en comparación al control, si se suministran
dietas que contengan en su totalidad ensilado de tilapia o sólo el 50% de
éste con inclusión al 50% de pasta de Jatropha curcas.
5. En dietas para alevines de tilapia se puede incluir pasta de Jatropha curcas
hasta un 25 %. En relación al control presenta resultados similares en
cuanto a FCA
74
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