iva flisar, univ. dipl. inž. kem., spec. med. biokem. lahke verige v serumu klinični center...
TRANSCRIPT
Proste lahke verige v serumu
Klinični center Ljubljana------------------------------------------------------------------------
Strokovni sestanek Združenja hematologov Slovenije in Združenja za transfuzijsko medicino Slovenskega zdravniškega društva, Kranjska Gora, 13. in 14. april 2007
Živa Flisar, univ. dipl. inž. kem., spec. med. biokem.Proteinsko-lipidni laboratorij, KC-Ljubljana
proste lahke verige v serumu------------------------------------------------------------------------------Število opravljenih analiz v Proteinskem laboratoriju:
Število analiz kapa / lambda
leta 2005 leta 2006
Ambulante 669 1544
Bolnišnice 161 578
Skupaj 830 2122
Zunanji naročniki Število analiz v 2006SB Novo Mesto 32SB Izola 25SB Murska Sobota 12SB Celje 4SB Brežice 1Skupaj zunanji 74
proste lahke verige v serumu------------------------------------------------------------------------------
1
10
100
1000
1 10 100 1000
Serum Kappa (mg/L)
Seru
m L
ambd
a (m
g/L) Normal sera
Kappa LCMMLambda LCMMIIMMHigh pIgGAL AmyloidosisRenal impairmentNSMM
3
2
4
5
6
7
1
8
9
17 18
15
14
10
13
16
12
11
19
Proste lahke verige in različna kliničnastanja:
Povzeto po:Bradwell AR, Serum Free Light Chain Analysis,2nd Ed., The Binding Site Ltd, Birmingham, 2004
proste lahke verige v serumu------------------------------------------------------------------------------Kappa Lambda κ/λ Ratio Interpretation
1 Normal Normal Normal Normal serum
2 Normal BM suppression without Monoclonal Gammopathy
3 High
4 Low
5 Normal Normal serum
6 Low
7 High Low
8 High
9 Normal Normal serum
10 High
11 Low
12 Normal pIg or renal impairment
13 Low Monoclonal Gammopathy
14 Low High Monoclonal Gammopathy
15 High Monoclonal Gammopathy
16 Normal
17 Normal
18 High
19 LowMonoclonal Gammopathy with
renal impairment
HighpIg or renal impairment
Normal
High
High
Monoclonal GammopathyNormal
LowNormal
Monoclonal Gammopathy
Normal
Monoclonal Gammopathy
LowLow
Klasifikacija monoklonskihgamopatij glede nakoncentracijo serumskihprostih lahkih verigkapa in lambda, ter količnika k/λ
With BM suppression
Without BM suppression
Povzeto po:Bradwell AR, Serum Free LightChain Analysis,2nd Ed., The Binding Site Ltd,Birmingham, 2004
proste lahke verige v serumu------------------------------------------------------------------------------
Komentarji k izvidu na osnovi prikazane klasifikacije:
Normalen serum (N)
Poliklonalno zvečanje sinteze imunoglobulinov ali okvara ledvic (P/O)
Monoklonski imunoglobulin (M)
Monoklonski imunoglobulin z okvaro ledvic (M+O)
Zavora sinteze imunoglobulinov (Z)
Monoklonski imunoglobulin z zavoro sinteze (M+Z)
Normalen serum z zavoro sinteze (N+Z)
proste lahke verige v serumu------------------------------------------------------------------------------
Prikaz rezultatov prostih lahkih verig v logaritemski skali
Klasifikacija monoklonskihgamopatij glede nakoncentracijo serumskihprostih lahkih verigkapa in lambda, ter količnika k/λ
Vertikale:Meje referenčnihvrednosti za kapa
Horizontale:Meje referenčnihvrednosti za lambda
Diagonale:Meje referenčnihvrednosti za količnik S-Proste kapa
Op.: Diagonale ločijo monoklonske od poliklonalnih imunoglobulinov
S-P
rost
e la
mbd
a
proste lahke verige v serumu------------------------------------------------------------------------------
Primer izvidaz referenčnimivrednostmi:
proste lahke verige v serumu------------------------------------------------------------------------------
Sinteza imunoglobulinovSintetizira se več kape kot lambde; razmerje sinteze ĸ : λ = 2 : 1
V serumu je več lambde kot kape; razmerje koncentracij ĸ : λ = 1 : 1,5
Polimerizacija lambde
Vzrok za večjereferenčne vrednosti lambda jepolimerizacija
Bradwell AR, Serum Free Light Chain Analysis,2nd Ed., The Binding Site Ltd, Birmingham, 2004
Proste lahke verige v serumu------------------------------------------------------------------------------
Primerjava rezultatovdveh analiznih metod
Proste lahke verige:Monoklonski imunoglobulinM
Proteinogram:Monoklonski zobec
Proste lahke verige v serumu------------------------------------------------------------------------------
1
2
3
M
Zmanjševanje koncentracijelahkih verig lahko potekav več smeri.
Količnika sta enaka za točki:M in 12 in 3
M 1: izboljšana funkcija ledvicob enaki tumorski sintezikapa in zavori sintezelambda
M 2: znižana sinteza kapa
M 3: znižana sinteza kapa ali odpoved ledvic
Proste lahke verige v serumu------------------------------------------------------------------------------
1. primer neskladja rezultatov:
1
K/L = normalen serumProteinogram = monoklonski
zobec nad 20 g/L
IgG/kapa (imunofiksacija)Peak: 32 g/LU-Protein/kreatinin: 11,3 g/mol
Proste lahke verige v serumu------------------------------------------------------------------------------
2. primer neskladja rezultatov
2 K/L = normalen serumProteinogram = monoklonski
zobec pod 20 g/L
IgM/kapa + kapa (imunofiksacija)Peak: 11,4 g/LU-Proteini/kreatinin: 71,9 G/L
Proste lahke verige v serumu------------------------------------------------------------------------------
3. primer neskladja rezultatov
3
K/L = poliklonalni Ig ali okvara ledvicProteinogram = monoklonski
zobec pod 20 g/L
IgG/lambda (imunofiksacija)Peak: 6 g/LU-Proteini/kreatinin: 8,6 g/mol
Proste lahke verige v serumu------------------------------------------------------------------------------
4. primer neskladja rezultatov
Količnik kapa/lambda je v območju poliklonalnih imunoglobulinovali okvare ledvic (P/O)
IgG/ lambda + lambda (imunofiksacija)
Proteinogram ima dva monoklonskazobca: peak 1 = 4 g/L (IgG lambda)Peak 2 = 3 g/L (proste lambda)
U-Proteini/kreatinin: > 200 g/mol
Od 665 pregledanih vzorcev je bilo 150 takih, ki kažejo neskladje rezultatovmed kapa/lambda (K/L) in S-Elektroforeza proteinov (ptg)
Razvrstili smo jih v dve skupini:
1. Ptg: monoklonski Ig (oznaka:M)K/L je normalen (N) ali poliklonalni Ig z okvaro ledvic (P/O)112 od 150 vzorcev
7 vzorcev - K/L: N, ptg: M > 20 g/L,38 vzorcev - K/L: N, ptg: M < 20 g/L,1 vzorec - K/L: Z, ptg: M < 20 g/L,2 vzorca - K/L: P/O, ptg: M > 20 g/L,
14 vzorcev - K/L: P/O, ptg: M < 20 g/L, U-Protein/Kr > 50 g/mol50 vzorcev - K/L: P/O, ptg: M < 20 g/L, U-Protein/Kr < 50 g/mol
2. K/L monoklonski Ig (M)Ptg: hipogamaglobulinemija ali slika brez monoklonskih Ig38 od 150 vzorcev21 vzorcev – K/L: M ptg:hipogamaglobulinemija17 vzorcev – K/L: M ptg: 11 vz – oligoklonalne fr.
2 vz – imunski kompleksi3 vz – brez komentarja1 vz – poliklonalna gama
proste lahke verige v serumu------------------------------------------------------------------------------
A.R. Bradwell navaja(Serum Free Light Chain Analysis, p168-169, 4th Edition, 2006, The Binding Site Ltd.)
tri neodvisne dejavnike tveganja za razvoj MGUS v MM:
- nenormalen količnik kapa / lambda,- monoklonski zobec večji od 15 g/L,- IgA ali IgM monoklonski imunoglobulin.
Iz tega sledi, da so potrebne vse tri preiskave:S-Proste lahke verige kapa in lambda S-Elektroforeza proteinov (proteinogram)S-Monoklonski imunoglobulini (imunofiksacija ali imunotipizacija)
? U-Vrsta proteinurije
Proste lahke verige v serumu------------------------------------------------------------------------------
The Lancet, 1847
Figure 2.1. Henry Bence Jones. (Courtesy RA Kyle & Br J Haematology) iz Serum Free Light Chain Analysis, 4th Edition, 2006, The Binding Site Ltd
Letos mineva 160 let od objave članka o novi beljakovini v urinu