investigacion de la paternidad

Dr. Carlos A. Mendoza Quispe

INVESTIGACIÓN DE LA PATERNIDAD



INVESTIGACIÓN DE LA PATERNIDADMARCADORES GENÉTICOS SISTEMA HLA Forman parte del sistema mayor de

histocompatibilidad descrito hasta la fecha en el hombre, localizado en el cromosoma 6. Constituyen el sistema HLA (Human Leucyte Antigen) y se estudian habitualmente sus loci A, B y C. Se determinan mediante técnicas inmunológicas de microlinfotoxicidad.


INVESTIGACIÓN DE LA PATERNIDADUna estimación aproximada entre los genotipos más frecuentes en la práctica, la sitúa en un valor Essen-Möller de 8,22, equivalente a un valor medio ponderado de probabilidad de paternidad de 98,35 %.

Como puede deducirse fácilmente a la vista de las cifras, el sistema HLA roza las cotas establecidas por el polimorfismo ideal, aunque sin llegar a alcanzarlas, por lo que su estudio debe complementarse con otros sistemas.



Sin discusión es el sistema de mayor rendimiento en función de la relación esfuerzo /información.

ANTÍGENOS ERITROCITARIOS Se encuentran en la superficie del

hematíe. Fueron los primeros en describirse y se determinan mediante reacciones de aglutinación en presencia de antisueros conocidos.



En función de su utilidad, los más usados y su probabilidad de exclusión media, son: MNSs (32,0 %), Rh (27,8 %),ABO (20,0 %), Kidd (18,5 %), Duffy (18,4 %), Kell (6,2 %), Lutheran (3,8 %), P (2,9 %); haciendo el total de antígenos eritrocitarios, un 77,1 %.


INVESTIGACIÓN DE LA PATERNIDADMARCADORES PLASMÁTICOS PROTEÍCOS

Y ENZIMÁTICOS Son en su mayoría proteínas plasmáticas

que cumplen funciones fisiológicas muy diversas. En la actualidad se estudian en su mayoría mediante técnicas de isoelectroforesis convencional. Las más utilizadas y su probabilidad de exclusión media son: Inmunoglobulinas Gm (34,6 %), Alfa-1-antitripsina (32,0 %), Proteínas Gc (29,0 %),


INVESTIGACIÓN DE LA PATERNIDADFactor XIII (23,0 %), Orosomucoide (18,7 %), Haptoglobinas (18,5 %), Alfa-2-HS-glicoproteína (18,0 %), Transferrina (17,9 %), Complemento C6 (17,0 %), Complemento C4 (16,8 %), Inmunoglobulinas Km (14,9 %), Complemento C3 (14,8 %), Plasminógeno PLG (13,5 %), Properdina factor B (13,3 %), Colinesterasa C5 (4,4 %), Amilasa sérica (2,8 %), Colinesterasa E1 (2,6 %); haciendo el total de proteínas y enzimas séricas, un 96,2 %.


INVESTIGACIÓN DE LA PATERNIDADMARCADORES ENZIMÁTICOS ERITROCITARIOS Y LEUCOCITARIOS

Este grupo está formado por enzimas existentes sobre todo en hematíes y leucocitos. Debido a su pequeña concentración precisa un tipo de revelado en el que interviene la actividad enzimática. Los más utilizados y sus probabilidades de exclusión media, son:



Enzimas eritrocitarias: Fosfoglucomutasa PGM1 (32,0), Fosfotasa ácida ACP (24,0), Transminasa glutámico-pirúvica GPT (18,8 %), Glioxalasa GLO (18,8 %), Esterasa D (10,9 %), Delta-aminolevulinato-dehidrasa (7,0 %), Fosfoglicolato-fosfatasa PGP (6,9 %), Galactosa-1-fosfato-uridil-transferasa GALT(6,8%),


INVESTIGACIÓN DE LA PATERNIDADAdenosín-desaminasa ADA (4,5 %), Uridín-monofosfoquinasa (4,2%), Adenaliatoquinasa (3,6 %), 6-Fosfogluconato-deshidrogenasa PGD (2,1 %), Glucosa-6-fosfato-deshidrogenasa Gd (1,0 %). Enzimas leucocitarias: Enzima málica (18,2 %), Fosfoglucomutasa(17,1 %); haciendo el total de enzimas eritrocitarias y leucocitarias, un 89,6%.


INVESTIGACIÓN DE LA PATERNIDAD La totalidad de las probabilidades de exclusión, cuando se toman en consideración todos los sistemas de marcadores genéticos, se puede resumir en lo siguiente: HLA 98,6 %, Antígenos eritrocitarios 77,1 %, Marcadores plasmáticos proteicos y enzimáticos 96,2 %, Marcadores enzimáticos eritrocitarios y leucocitarios 89,6 %; haciendo el total de sistemas un 99,999 %.


POLIMORFISMO DNA



POLIMORFISMO DNA

Desde que, en 1980, Wyman y White descubrieron el primer locus hipervariable en el DNA humano con una sonda específica, se tuvo el convencimiento de que se revolucionaría por completo la homogenética forense.

Los últimos avances en tecnología DNA, que detectan loci altísimamente polimórficos, han puesto al alcance de numerosos laboratorios la posibilidad de aplicar ésta metodología en casos de paternidad.


POLIMORFISMO DNALas sondas DNA utilizadas en la investigación de la paternidad se pueden describir como fragmentos de DNA que contienen secuencias de nucleótidos, complementarias a secuencias presentes en loci específicos del genoma humano. En condiciones de hibridación apropiadas, éstas sondas DNA se unen al DNA genómico complementario con alta especificidad. Esta unión puede ser detectada marcando la sonda con métodos isotópicos (normalmente el 32P) o métodos no isotópicos (métodos enzimáticos habitualmente).


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Los estudios sobre el DNA humano que se han realizado a la fecha, han podido cristalizar la posibilidad de su aplicación médico legal; así el método de análisis del DNA, que se basa en el análisis del RFLP (Restriction Fragment Lenght Polymorfism), tiene una aplicación idónea en la investigación biológica de la paternidad.


POLIMORFISMO DNA

DNA E INVESTIGACIÓN DE LA PATERNIDAD

Para afrontar la investigación biológica de la paternidad se acepta el supuesto de que la mitad del genoma que una persona posee procede del padre y la otra de la madre, heredándose según los postulados mendelianos.


POLIMORFISMO DNA

El uso del DNA en éstos supuestos pretende poner de manifiesto que aquellos minisatélites que sean específicos en localización y longitud para cada persona, y no procedan de la madre, deben provenir del padre putativo.


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La probabilidad de error en la confirmación de una paternidad, o sea, el riesgo de que debido al azar un individuo, que no sea el verdadero padre, pueda ser incriminado por tener las mismas bandas que el hijo, es de una entre un millón para una sonda multilocus con 20 bandas. De éste modo, la confirmación de la paternidad se hace con un 99,9999 % de probabilidad.


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Cuando se emplean sondas monolocus, la confirmación de la paternidad se hace con un 98 % de probabilidad si se usa sólo una de ellas (2 bandas), porcentaje que sube al 99,999 % al usar tres sondas.


POLIMORFISMO DNAPor tanto, con la aplicación del DNA a la investigación de la paternidad, se puede afirmar la paternidad de un padre putativo sobre un hijo con una probabilidad de error mínima, no conseguida con otros medios. Existe, además, otra ventaja, derivada de la posibilidad de realizar estudios precoces, incluso desde el mismo momento del nacimiento del hijo, sin necesidad de esperar varios meses ó un año, plazo mínimo necesario para conseguir una fiabilidad absoluta con las técnicas clásicas con un 99,9999 % de probabilidad.


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DNA E IDENTIFICACIÓN

Con éste procedimiento se pretende identificar a una persona sospechosa de haber cometido un delito, comparando los resultados ofrecidos por el análisis de los indicios (semen en una vagina, cabellos en las manos de una víctima, manchas de sangre en el lugar de los hechos, etc.) con los ofrecidos por la investigación de DNA en el/los sospechosos.


POLIMORFISMO DNAPara ello hay que contar con el material recogido en el lugar de los hechos o sobre la víctima, que se supone que procede del autor, para compararlo con materiales similares procedentes de la víctima (si la hubiere) y del sospechoso. En éste caso se trata de comprobar si los indicios coinciden con algunos de los sospechosos, lo que permite una identificación positiva y no sólo descartar a un presunto autor. Las principales ventajas que tiene en criminalística el empleo del DNA son: la pequeña cantidad de material con que se puede trabajar, y la fiabilidad de los resultados.


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Al contrario que en los supuestos de investigación de la paternidad, en los que siempre es posible contar con la cantidad necesaria de sangre procedente de los sujetos que hay que estudiar, en la esfera penal se ha de trabajar en gran parte de las ocasiones con indicios, que a su vez pueden estar en forma de sangre, semen, cabellos o restos de tejidos u otros líquidos orgánicos. El DNA se puede extraer con técnicas adecuadas de cualquiera de las fuentes mencionadas.


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También es posible aplicar la tecnología del DNA en el campo de la identificación del cadáver en casos de grandes catástrofes o en cuerpos que por su avanzado estado de descomposición no dan resultados concluyentes con otros métodos más simples. No es una situación normal, pero es posible actuar siempre que confluyan tres requisitos:


POLIMORFISMO DNA- Que exista una sólida prueba de quién

puede ser la víctima.

- Que ésta tenga material válido para efectuar el estudio: cabellos, zonas de tejidos no excesivamente putrefactas.

- Que exista previamente material biológico apto para la presunta víctima (sangre donada o en laboratorios de análisis, semen congelado, cabellos) con el que poder realizar la comparación.


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Por último, se ha incorporado al estudio de DNA, la técnica que consiste en replicar una secuencia de una cadena de DNA hasta infinitas veces, la Polymerase Chain Reaction (PCR).


Gracias por

su atención.

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