INOCULACION DE HUEVOS EMBRIONARIOSDOCENTE: Dra. ACURIO

ASIGNATURA: Microbiologia

ALUMNA: NAVARRO ESTEBAN, Yadira Yasha.

UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL «FACULTAD DE MEDICINA «

3° año de Medicina

2015

Con la necesidad de replicar algunos virus en particular, se han desarrollado técnicas de inoculación en el embrión de pollo de cinco a once días de edad, útiles para el diagnóstico, aislamiento, propagación y caracterización de los virus, así como para la producción de vacunas virales

Para obtener óptimos resultados en el

aislamiento y propagación de los virus, se

deben considerar los siguientes aspectos:

• Vía de inoculación,

• Edad del embrión la cual depende del virus que se

va a inocular,

• Temperatura de incubación,

• Tiempo de incubación,

• Volumen y dilución del inoculo, ya que al ser mayor

el volumen a inocular podrá causar mayor

mortalidad.

CONCEPTOSBASICOS

Dentro de las características que se deben tomar en cuenta en la replicación del virus en el embrión, permiten la identificación del agente mediante las lesiones producidas por lo que representa un importante valor diagnóstico, dentro de estas, las más importantes pueden ser:

La presencia de hemorragias, Congestión, Enrollamiento, Eanismo, Presencia de pústulas, Engrosamiento, Fibrosis y edema de la membrana amniótica y de

la membrana corioalantoidea, Disminución del líquido amniótico, Desarrollo anormal de las plumas, Depósito de uratos en el estroma renal Presencia de cuerpos de inclusión.

VIRUS CULTIVADOS

FRECUENTEMENTE EN EL

EMBRION DE POLLO

Es la ruta más importante y frecuentemente usada debido a su simplicidad en la inoculación del virus. Se emplean embriones de 9-11 días de edad y normalmente se inocula 0.1 ml de suspensión viral.

2. SACO VITELINO:

1. CAVIDAD ALANTOIDEA:

Se realizan los procedimientos básicos de ovoscopía e identificación de estructuras, para esta vía se emplean embriones de cinco a siete días de edad, generalmente se inocula 0.1 ml del virus bajo estudio.

Se emplean embriones de 9 a 11 días de edad y se inoculan con 0.1 ml de la dilución del virus. Es una vía apropiada para el aislamiento de: • virus de la viruela, • virus de la Laringotraqueitis aviar, • virus de la enfermedad de Aujezsky, • virus de la vaccinia, • herpes virus, entre otros que producen

pústulas visibles.

3. MEMBRANA CORIOALANTOIDEA:

Se Inocula con 0.1 ml de virus bajo estudio por embrión. Se incuban los huevos por espacio de 72 horas a una temperatura de 35ºC, una vez que el virus prende en la membrana se puede manifestar asi:

Se realiza principalmente para el aislamiento del virus de la INFLUENZA Y PAPERAS. Los embriones deben der de 8 a 10 días de incubación, se incuban a 35ºC y se cosechan las 72 horas

4. CAVIDAD AMNIOTICA:

El virus de la viruela provoca lesiones pequeñas, redondeada casi siempre en forma de rosario

El virus de la vaccinia, produce lesiones grandes aplanadas con halo hemorrágico y necrótico.

El virus del herpes, presenta lesiones pequeñas, ovaladas como una perla.

3. MEMBRANA CORIOALANTOIDEA: LESIONES DE

LA MCA PROVOCADAS POR EL VIRUS

DE LA VIRUELA

LESIONES DE LA MCA

PROVOCADAS POR EL VIRUS

DE LA VACCINIA

a) Inoculación por membrana corialantoidea (MCA)

b) Inoculación por la cavidad alantoidea (CA)

c) Inoculación por el saco vitelino (SV)

d) Inoculación por la cavidad amniótica poco frecuente