Imunocytologická charakteristika neoplázií z T-linie

D. Starostka, P. Mikula, L. Novosadová

Oddělení klinické hematologie Nemocnice s poliklinikou Havířov, p.o.

CD3

cCD3+, CD7+, TdT+

CD4-CD8-

Antigeny T-lymfocytu

Marker Struktura Funkce

CD1a Transmembránový glykoprotein, 49 kDa Prezentace nepeptidových glykolipidových antigenů

CD2 Transmembránový glykoprotein, 50 kDa CD58 ligand, aktivace T-ly, signální role, adhese

CD3 CD3/TCR komplex Rozpoznání antigenu, signální transdukce, aktivace

CD4 Transmembránový glykoprotein, 55 kDa Rozpoznání antigenu ve spojení s MHC II, diferenciace v thymu, signální transdukce, primární HIV-receptor

CD5 Glykoprotein, 67 kDa CD72 ligand, signální dráhy, vyzrávání thymocytu, mezibuněčné T-B interakce

CD7 Transmembránový glykoprotein, 40 kDa Influx kalcia, sekrece cytokinů, adhese

CD8 Glykoprotein, 32-34 kDa Rozpoznání antigenu ve spojení s MHC I, aktivace, diferenciace v thymu

TCR CD3/TCR komplex Rozpoznání antigenu, signální transdukce, aktivace

TdT Intranukleární marker Enzymatická role

Profil antigenní exprese během diferenciace T-lymfocytu

Pro-thymocyt

Subkapsulární thymocyt

Korový thymocyt

Dřeňový thymocyt

Periferní T-lymfocyt

Neoplasie Prekursorové T-ALL/LBL Periferní zralé T-neoplasie

CD7

CD2

CD5

CD3

CD1

CD8

CD4

TdT

+anaplastický velkobuněčný lym fom+angioimunoblastický T-lymfom

Malignity z T-linie

Definované entity s heterogenními fenotypovými znaky (WHO klasifikace)

Vzácný výskyt s geografickou diferencí (rasová predispozice)

HTLV-1, EBV

Většinou agresivní průběh

Problematické jednoduché stanovení klonality v T-linii

Omezený význam cytogenetiky (T-ALL, T-PLL, ALCL)

Molekulární genetika (TCR)

Monoklonalita v T-linii

Délka trvání lymfocytosy

Aberantní nebo uniformní imunofenotyp

Výrazně porušený poměr CD4/CD8

Typ TCR, vyšetření variabilních regionů TCR-beta

Klonální cytogenetické a molekulárně genetické změny

Imunofenotyp T-neoplázií

T-ALL/LBL TdT+, variabilní exprese CD1a, CD2, CD7, CD5, CD4 a CD8, nejčastěji

cytCD3 a CD7, často koexprese CD13 a CD33 T-PLL TdT-, CD1-, CD2+, CD3+/-, CD7+, CD5+, 60% CD4+CD8-, 25% CD4+CD8+, 13% CD4-CD8+, 2% CD4-CD8- T-LGL 80% CD3+, CD4-, CD8+, TCR alfa/beta+ 20% CD3+, CD4+, CD8-, TCR alfa/beta+ nebo CD3+, CD4+,

CD8+,TCR alfa/beta+ nebo CD3+TCR gama/delta+ s variabilní expresí CD4 a CD8 variabilní exprese CD11b, CD56 a CD57

ATLL CD2+, CD3+, CD5+, CD7-, CD25+ většinou CD4+CD8-, vzácně CD4-CD8+ či CD4+CD8+ Mycosis fungoides/Sézaryho syndrom CD2+, CD3+, CD5+, CD7+/-, CD4+,TCRb+ vzácně CD8+ Hepatosplenický T- lymfom CD2+, CD3+, CD5-, CD7+, CD4-, CD8-, CD56+/-, TCR g/d velmi vzácně TCR a/b

Imunofenotyp T-neoplázií

Extranodální NK/T-buněčný lymfom, nazální typ CD2+, sCD3-, icCD3+, CD56+, vzácně CD7+, CD30+ CD4-, CD5-,

CD8- T-buněčný lymfom asociovaný s enteropatií CD3+, CD7+, CD5-, CD4-, CD8-/+, CD103+, CD56+ Podkožní panniculitis-like T-buněčný lymfom CD3+, CD2+, CD7+, CD5+, CD8+ Primární kožní CD30+ T-lymfoproliferace C-ALCL: CD4+, CD30+, variabilní exprese CD2, CD3 a CD5 Lymfomatoidní papulosa: jako C-ALCL, vzácně CD8+ Periferní T-buněčný lymfom blíže nespecifikovaný nejčastěji CD4+, méně CD4+CD8+, CD8+, CD56+, variabilní exprese

CD5,7 Angioimunoblastický T-buněčný lymfom CD2+, CD3+, CD5+, CD4+ Anaplastický velkobuněčný lymfom (T-cell/null-cell fenotyp,

ALK+/-) CD2+, CD5+, CD4+ 70%, CD3-, vzácně CD8+ CD30+ u ALK-

CD3+

T-neoplázie na OKH NsP Havířov 1998-2008 (n=24)

T-ALL 1

T-PLL 3

T-LGLL 6

Mycosis fungoides 2

Sézaryho syndrom 2

Hepatosplenický lymfom 1

Angioimunoblastický T-buněčný lymfom 1

Periferní T-buněčný lymfom nespecifikovaný 3

Anaplastický velkobuněčný lymfom 2

Monoklonální T-lymfocytosa nejasného významu 3

Shodný imunofenotyp neznamená stejnou morfologii

et vice versa

CD4+ T-lymfomy

CD2+

CD3+

CD5+

CD7-/+

CD4+

CD3+ CD5+ CD4+ TCR αβ+

CD2+ CD3+ CD7+ CD4+ TCR αβ+

CD2+ CD3+ CD7+ CD4+ TCR αβ+

CD2+ CD3+ CD7+ CD4+ TCR αβ+

CD2+ CD4+ CD30+

Molekulární genetika: mutovaný status IgVH genu (podrodina 3-21 )

klonální rearanže TCR deltaZávěr: B-CLL (Matutes 4/5) s koexpresí CD8

„bifenotypová CLL“

Závěry Komplexní přístup v rámci WHO klasifikace – obtížná

diagnostika, panel expertů

Synergický diagnostický efekt jednotlivých modalit

Imunocytologický nález doplňuje názor patologa

Výrazná cytomorfologická variabilita T-lymfomů se specifickými rysy některých entit

Nezastupitelné místo FCM imunofenotypisace zejména u leukemi- sovaných procesů (snadná dostupnost materiálu, rychlost, široký rozsah vyšetřených antigenů)

Problematické FCM stanovení klonality v T-linii zejména u nevý- razných patologií

Molekulární genetika na rearanži genu pro TCR

CD3+ CD8+

T-PLL

T-LGL leukémie

Sézaryho syndrom

Reaktivní T-lymfocytosa

Děkuji za Děkuji za pozornost !pozornost !