ــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــــ٢٧ ، شماره مسلسل ١٣٨٢، بهار ١سال دهم ، شماره

١٧

مقاله پژوهشي

ي توسط مهارگران آنزيم هاE2تنظيم ترشح پروستاگالندين و پروستاگالندين دهيدروژناز در ) II و Iنوع( سيكلواكسيژناز

ي تروفوبالست جفت انسانيسلولها

** جان چليس، دكتر **يناديا الفائد، دكتر * يناصر ميرازدكتر

:چكيدهبه ترتيب موجب ) G C(در سلولهاي كوريون و آمنيون نشان داده است كه گلوكوكورتيكوئيدها مطالعات جديد

در مقـدار ترشـح ايـن آنزيمهـا در GCاثـر . مي گردد PGDH و PGHSافزايش و كاهش مقدار فعاليت آنزيم هاي ي جفـت انسـاني تـاثير جهت پي بردن به اين موضوع بر آن شديم تا در سـلولها . نا مشخص است ) PC(سلولهاي جفت

.اين آنزيم ها را معلوم نمائيمسلولهاي جفتي . عدد جفت انسان پس از عمل سزارين از زنان با زايمان زودرس تهيه گرديد ١٢ در اين مطالعه

سـاعت از كشـت سـلولي، محـيط كشـت ٧٢ جـدا كـرده و بعـد از Percollرا با استفاده از غلظت هاي خاص محلول ملوكسـيكام و سولفاسـاالزين ساعت ديگر در مجاورت با داروهاي دگزامتازون، ٢٤ و سپس سلولها براي مدت تعويض

)µM (به همراه اسيد آراشيدونيك ) ١µMپس از دوره انكوباسيون، محيط كشـت سـلولي جهـت تعيـين . قرار گرفتند )٥يج حاصـله بـا اسـتفاده از روش آمـاري نتا. جمع آوري شد ) RIA( توسط روش راديو ايمونو اسي PGE2مقدار ترشح

Student’s t-test و One-way ANOVA ارزيابي شد و اختالفات حاصله با P<0.05 معني دار تلقي گرديد. به طور معني داري افزايش داده و مصرف همزمان PC را در PGE2 دگزامتازون و سولفاساالزين مقدار ترشح

ملوكسيكام تاثير . نسبت به مصرف دگزامتازون به تنهائي گرديد PGE2بيشتري در ترشح آن دو موجب افزايش بسيار نداشت و كاربرد همزمـان آن بـا دگزامتـازون افـزايش مختصـري را در ترشـح PGE2قابل توجهي در ترشح پايه اي

PGE2 سولفاسـاالزين بـه سولفاسـاالزين و يـا + داشت كه به طور معني داري كمتر از مقداري بـود كـه دگزامتـازون .تنهائي ايجاد مي كردند

PGHS-I در انسـان بيشـتر بسـتگي بـه فعاليـت آنـزيم PC به وسيله PGE2 اين نتايج نشان مي دهند كه ترشح بـوده و PGE2 در تنظـيم ترشـح PGDHاثر سولفاساالزين مبين اهميت ترشح داخلي آنزيم . PGHS-IIدارد تا آنزيم

ممكـن اسـت PC مترشـحه توسـط PGE2 در مقـدار GCت اين داروها داللت بر آن دارد كه اثر تحريكـي تداخل اثرا . باشدPGDH و كاهش فعاليت آنزيم PGHSبدليل افزايش فعاليت آنزيم

/پروستاگالندين دهيدروژناز / E2پروستاگالندين / آنزيم هاي سيكلواكسيژناز : كليد واژه ها

سلولهاي تروفوبالست جفت انساني

ــــــــــــــــــــــــــــــــــ سينا همداني دانشكده علوم دانشگاه بوعلي گروه زيست شناسياستاديار فيزيولوژ *

كانادا– دانشگاه تورنتو يو مامائعضو هيأت علمي گروه فيزيولوژي **

مجله علمي دانشگاه علوم پزشكي و خدمات بهداشتي درماني همدان ـــــــــــــــــــــــــــــــــــــ

١٨

:مقدمه زايمان در انسان و حيوان حاصل تـأثيرات پيچيـده

در ايـن ). ٢،١(فاكتورهاي مـادري ـ جنينـي مـي باشـد ميان حضور پروستاگالندين ها بسيار مهم بوده و شركت مْوثر آنها در پديده زايمان نقش تعيـين كننـده أي دارد بــه نحويكــه افــزايش يــا كــاهش يــك يــا چنــد نــوع از

ندين ها مي توانـد در تسـريع يـا تـأخير ايـن پروستاگال). ٢-٤(پديده فيزيولوژيك اثر قابل توجهي اعمال نمايـد

پروستاگالندين ها از اسيد آراشـيدونيك توليـد شـده در غشــاء ســلولها و در پــي تــأثير مكانيســم هــاي آنزيمــي

در ). ٦،٥( سـاخته مـي شـوند II و Iسيكلواكسيژناز نـوع روسـتاگالندين هـا در بافـت خالل دوره آبستني، سنتز پ

آمنيون و كوريون افزايش مي يابد و سـطح هاي رحمي، ). ٧-٩(سرمي آنها به ويژه در زمان زايمـان بـاال مـي رود

در هنگام زايمان ظهـور ايـن واسـطه هـاي فيزيولوژيـك سـينتاز Hتوسط فعاليـت آنـزيم هـاي پروسـتاگالندين

)PGHS–Iو PGHS–II ( ــد ــابوليزه كننـ ــزيم متـ ه و آنـ ) PGDH(ـ هيدروكسي دهيـدروژناز ١٥پروستاگالندين در بعضـي از مطالعـات انجـام ). ١٠-١٣(تعيين مي گردد

در هنگـام PGHS–II آنزيم mRNAافزايش مقدار شده،زايمان در بافتهاي آمنيون و كوريون گزارش شـده اسـت

در مطالعه اي كه اخيراً بر روي گوسفند انجام ). ١٤-١٦(ده شـد كـه در اواخـر دوره آبسـتني شده است نشـان دا

ميـزان گلوكوكورتيكوئيـد هـا در بافـت هـاي جنينــي از معلـوم ). ١٦،١٤(جمله غدد فوق كليوي افزايش مي يابد

گرديــده اســت كــه كــورتيزول در جفــت موجــب تغييــر استروئيدوژنز شده به طوريكه مقدار پروژسترون كـاهش

اين رونـد .يافته و بر ميزان استروژن ها افزوده مي گردد P450C17در جفت در ارتباط با افزايش آنزيم هاي جفتـي

مطالعات جديد نشان مي دهد كـه در ). ١٧،١٥(مي باشد گلوكوكورتيكوئيدها افزايش مي يابند و آمنيون و كوريون

و كـاهش PGHSاين پديده در افـزايش فعاليـت آنـزيم تـأثير ).١٩،١٨،١٤( باشد مْوثر مي PGDHفعاليت آنزيم

وكوكورتيكوئيدها بر روي بروز فعاليت اين آنزيم ها در گل .سلول هاي تروفوبالست جفتي بدرستي معلوم نيست

در ايـــن رابطـــه جهـــت پـــي بـــردن بـــه نقـــش گلوكوكورتيكوئيدها در سـلولهاي جفـت انسـان مطالعـْه

با اين فرضيه كه گلوكوكورتيكوئيدها در . ر انجام شد ضحا PGHS-II توانند بر آنزيم سلــول هاي جفت انساني مي

تأثير گذاشته و مقدار پروستاگالندين ها را در اين سلولها

بـراي تعيـين دقيـق ايـن اثـر از تعـدادي . افزايش دهند تركيبات تحريك كننده و مهار كننده اختصاصـي آنـزيم هاي مداخله كننده در سنتز و متـابوليز پروسـتاگالندين

ــيكام، ــر ملوكس ــا نظي ــازون، ه ــين و دگزامت ايندومتاس .سولفاساالزين استفاده گرديد

:روش كار براي انجام اين پروژه اقدام به تهيه جفت انسـاني از

). n=12(گرديــد زنــان ســزارين شــده در هنگــام زايمــانسپس با استفاده از روش كلـيمن آمنيـون و كوريـون از

از هـــر جفـــت ). ٢٠(بافتهـــاي جفـــت جـــدا گرديـــد گـرم برداشـته و پـس از ١٠٠د انسان مقـداري در حـدو

ــا ســـرم فيزيولـــوژي ، توســـط شستشـــوي كامـــل بـ DMEMقيچـــي آن را خـــرد كـــرده و در محلـــول

)Life Technologies,Grand Island,NY ( حاوي آنـزيم) Sigma Chemical Co.,St louis,MO%(١٢٥/٠تريپسين

) .Sigma Chemical Co./.% (٢و دئوكسـي ريبونوكلئـاز لول هاي جفت شناور شده در محلول را س. قرار داده شد

ــا ــز ب ــذ ري ــايلوني داراي مناف ــر ن ــتفاده از فيلت ــا اس ب Percollجــــدا كــــرده و در محلــــول µm٢٠٠قطــــر

)Sigma Chemical Co. ( ــين ــاي ب ــت ه ــاوي غلظ ح. قـرار داده شـد )mL٣از هر غلظت به ميـزان ( %٥-٧٠

دقيقـه و بـا دور ٢٠پس از عمل سـانتريفيوژ بـه مـدت rpmدر دماي اتاق سلول ها كامالً از ساير بافت ها ٢٣٠٠

سلول هاي جفت جدا شـده را ابتـدا بـا بكـار . جدا شدند ــردن ــوواTrypan blue ml٢٠بـ ــتفاده از الم كـ و اسـ

)Kova glasstic slide,Hycor:CA,USA( شمارش كرده چالـه ٢٤و سپس در ظروف مخصوص پالستيكي حاوي

)Coring Coster Cop.Cambridge,MA( دانسـيته بـا وــدود ــت و در١٠٦ ml/Cellاي حـ ــيط كشـ DMEMمحـ

,FCS)Fetal Calf Serum,Life Technologies% ١٠حـاوي

Gibco BRL ( ٠٠٥/٠آنتــي بيوتيــك كــه حــاوي % ١و %ــين و ــين% ٠١/٠جنتاميســ Sigma(استرپتومايســ

Chemical Co. (سلول ها بـراي . مي باشد قرار داده شد و بـا ºC٣٧انكوبـاتور ساعت جهـت كشـت در ٧٢مدت

).١١( نگهداري شدندCO2% ٥هوا و % ٩٥شرايط :درمان سلول هاي جفت

روز از دوره انكوباسـيون، سـلولهاي ٣ بعد از گذشت شستشـــــو FCS بدون DMEMجفت با محيط كشت

ــــــ ـــــــــــــــــــــــــــــــــــــــ٢٧ ، شماره مسلسل ١٣٨٢، بهار ١سال دهم ، شماره

١٩

ساعت ديگـر ٢٤سپس سلول ها براي مدت . داده شدند نگهــداري تنهــاDMEMدر انكوبــاتور و در مجــاورت

جهـت بررسـي كيفيـت رشـد سـلول هـا و توليـد .شدند Cytokeratinسنسيتيوم توسط آنها، از آنتي بادي هـاي

و ) Dako Corp.,Santa Barbara,CA(١٠٠٠٠/١با رقت Vimentin ١٠٠/١ با رقت)DakoCorp.( و رنگ آميزي با

) Fisher Scientific,Fairlawn,NJ(هماتوكسيلين كارازيزــوري مشــاهده وبوســيله ميكروســكاســتفاده شــد و پ ن

در اين مدت به محيط كشت همـه سـلول هـا . گرديدندبه عنوان ماده زمينه و اصـلي ) µM٥(اسيد آراشيدونيك

سـنتز پروسـتاگالندين هــا اضـافه كـرده و مطــابق روش درماني خاصي كـه در پروتكـل مربوطـه در نظـر گرفتـه

وهـائي بوديم و به طريق زير آنها را تحـت درمـان بـا دار ــازون ــر دگزامت ــيكام)µM١(نظي ــار ،µM١(، ملوكس مه

، )II-PGHSكننــــده اختصاصــــي فعاليــــت آنــــزيم -١اختصاصـي آنـزيم كننـده مهار ،µM١(ايندومتاسين

PGHS) ((و سولفاســـاالزين ) ١٣،١٢µMمهاركننـــده ١،قـرار ) PGDH، )Sigma Chemical Coاختصاصي آنزيم

قـرار زيـر مـي پروتكل درماني سلول ها بـه ). ١٩(داديم :باشد

A: Arachidonic acid (5µM) B: Arachidonic acid (5µM)+Meloxicam(1µM) B`: Arachidonic acid (5µM)+Indomethacin(1µM) C: Arachidonic acid (5µM)+Dexametasone(1µM) D: Arachidonic acid (5µM)+Dexametasone(1µM)+ Meloxicam(1µM) D`: Arachidonic acid (5µM)+Dexametasone(1µM)+ Indomethacin(1µM) E: Arachidonic acid (5µM)+Sulphasalasine(1µM) F: Arachidonic acid (5µM)+Sulphasalasine(1µM)+ Dexametasone(1µM) G: Arachidonic acid (5µM)+Sulphasalasine(1µM)+ Dexametasone(1µM) +Meloxicam(1µM) G`: Arachidoni acid (5µM)+Sulphasalasine(1µM)+ Dexametasone(1µM) +Indomethacin (1µ ) H: Arachidonic acid (5µM)+Sulphasalasine(1µM)+ Meloxicam(1µM) H`: Arachidonic acid (5µM)+Sulphasalasine(1µM)+ Indomethacin(1µM)

:RIA توسط روش E2 ارزيابي پروستاگالندين

پس از پايان دوره انكوباسيون، محيط كشت سلولها مترشحه بـا اسـتفاده از روش PGE2جهت تعيين مقدار

براي انجام . جمع آوري گرديدند ) RIA(راديو ايمونواسي تهيه شـده در PGE2اين عمل از آنتي بادي پلي كلونال

آماده شده بود استفاده شد ٤٠٠٠/١خرگوش كه با رقت

)Oxford Biomedical,MI .( همچنـــــين در ايـــــن

روش از پروســـــتا گالنـــــدين نشـــــاندار شـــــده -PGE2 3H) Amersham,Alington Heights,IL (استفاده

سپس داده هاي بدسـت آمـده توسـط ). ٢١،٢٠(گرديد ) RIA) Gamatech.Co.USAدستگاه شمارشگر در روش

سـي و تجزيـه و تحليـل كـامپيوتري قـرار داده رمورد بر . و جداول و نمودارهاي مربوطه ترسيم گرديدندشدند

:ارزيابي آماري نتايج و داده هاي بدست آمده در ايـن پـروژه مـورد

تأثير مجاورت داروهـا بـر . بررسي آماري قرار داده شدند سلول هاي كشت داده شده جفت انسان تعيين گرديدند

One-wayو نتايج حاصله را با اسـتفاده از روش آمـاري

ANOVA و بكارگيري متد Tukey’s Pairwise ارزيابي همچنين جهت تعيـين تغييـرات حاصـله غلظـت . شدند

داروهــاي مــورد اســتفاده در محــيط كشــت از روش ــاري ــره جســتيم-test Student’s tآم ــات . به اختالف

. معني دار تلقي گرديدندP<0.05فيمابين اين داده ها با

:نتايج دقيـق تـر پاسـخگوئي سـلولي ابتدا جهـت بررسـي

منحني دوز پاسخ داروهاي سولفاساالزين، ملوكسـيكام و 6M-10سولفاسـاالزين در دوز . ايندومتاسين ثبت گرديد

بهترين تأثير را در سلول هاي تروفوبالست جفـت ايجـاد ). ١نمودار. (كرد

توسط PGE2 تاثير سولفاساالزين بر ترشح :١نمودار )n=6 (لولهاي تروفوبالست جفت انسانيس

بـه مراتـب PGE2 تأثير مهاري ايندومتاسـين در ترشـح تـأثير 6M-10قويتر از ملوكسيكام بـود بطوريكـه در دوز

ــه ملوكســيكام بســيار بيشــتر و ايندومتاســين نســبت ب P<0.05) ،(F=13.704اختالف فيمابين آنها معني دار بود

). ٢نمودار (

500

Sulphasalazine (M)

ح رش

تPG

E 2

)رل

كنتبه

ت سب

د نرص

د(

600

100

200

500

0

مجله علمي دانشگاه علوم پزشكي و خدمات بهداشتي درماني همدان ـــــــــــــــــــــــــــــــــــــ

٢٠

توسط سلولهاي تروفوبالست جفت PGE2 ترشح : ٢ نمودار )PGHS-I)n=4 و PGHS-II انساني پس از مهار آنزيمهاي

دگزامتازون به تنهائي و يـا همـراه بـا ملوكسـيكام تـأثير گذاشـتند و اختالفـات آن PGE2بسيار باالئي در ترشـح

ــا گــروه دريافــت ك ــه گــروه كنتــرل و ي ــده نســبت ب نن ، (P<0.05ملوكســـيكام بـــه تنهـــائي معنـــي دار بـــود

(F=23.128 تأثير سولفاساالزين موجـب افـزايش ترشـح PGE2 نسبت به گروه كنتـرل گرديـد)P<0.05 ( و تـأثير

ــزايش ــازون و سولفاســاالزين ســبب اف همزمــان دگزامتگرديـد بطوريكـه اختالفـات فيمـابين ايـن PGE2زيادتر

. معنــــي دار شــــدP<0.001) ، (F=21.228تـــأثيرات همچنين اختالفات فيمابين اين گروه بـا گـروه دريافـت

ملوكسيكام معنـي دار +دگزامتازون+كننده سولفاساالزين عالوه بر ايـن تـأثير همزمـان ).P<0.05)،F=22.446بود

سولفاساالزين و ملوكسيكام نسبت به گروه كنترل معني ريافـت دار نشد و تنها اين گـروه در مقايسـه بـا گـروه د

ملوكسـيكام اخـتالف +سولفاسـاالزين +كننده دگزامتازون ).٣نمودار (نشان داد (P<0.05)معني داري را با

اثرات دگزامتازون و سولفاساالزين بر فعاليت : ٣ نمودار در سلولهاي تروفوبالست جفت ٢آنزيم سيكلواكسيژناز

)n=12(انساني , (1µM)ت درمان با دگزامتـازون كشت مستقل جفتي تح ١٢ تا ٧

و يا مخلـوطي از ايـن (1µM) سولفاساالزين , (1µM)ملوكسيكام بـراي مقايسـه بـين One way ANOVAتست . مواد قرار گرفتند

.گروهها مورد استفاده قرار گرفت . مي باشد>P ٠٥/٠ نشان دهنده اختالف معني دار با * . مي باشد>P ٠١/٠ نشان دهنده اختالف معني دار با **

سي ديگري كه با استفاده از ايندومتاسين به جاي ردر بر ملوكسيكام صورت گرفت مشخص گرديد كه تـأثير ايـن دارو بر سلول هاي كشت شده جفت انساني موجب مهار

هر چند اختالف فيمابين معنـي (مي گردد PGE2ترشح ري قـويتر از تـأثير مهـا رليكن اين مهار بسـيا ). دار نبود

توسـط سـلول هـاي مزبـور PGE2ملوكسيكام در ترشح ــد ــان داده ش ــأثير . نش ــات ت ــروه از آزمايش ــن گ در اي

با اختالف معني داري نسبت PGE2دگزامتازون بر ترشح ــود ــرل در ســلول هــاي جفــت همــراه ب ــروه كنت ــه گ ب

P<0.05)،(F=15.716 سولفاســـاالزين بـــه تنهـــائي و PGE2ايش ترشحهمچنين بهمراه دگزامتازون موجب افز

گرديد و اختالفات حاصله با شـدت بيشـتري نسـبت بـه ). P<0.01) ، F=19.802گروه كنتـرل معنـي دار گرديـد

ــازون ــراه دگزامتـ ــه همـ ــين بـ ــتفاده از ايندومتاسـ اسـدر سـلول PGE2وسولفاساالزين موجـب كـاهش ترشـح

هاي جفت گرديـد و كـاهش ترشـح رخ داده نسـبت بـه لـيكن اختالفـات (P<0.05) گروه كنترل معنـي دار بـود

فيمابين اين گروه و گروه دريافت كننده سولفاساالزين و

ح رش

تPG

E 2)

رلكنت

به ت

سبد ن

رصد

(

Indomethacin

ح رش

تPG

E 2)

رلكنت

به ت

سبد ن

رصد

(

Meloxicam

ح رش

تPG

E 2)

رلكنت

به ت

سبد ن

رصد

( A= Ctr B= Mel C= Dex D= Dex+Mel E= Sulf F= Sulf+Dex G= Sulf+Dex+Mel H= Sulf+Mel

ــــــ ـــــــــــــــــــــــــــــــــــــــ٢٧ ، شماره مسلسل ١٣٨٢، بهار ١سال دهم ، شماره

٢١

���������������

�������������������������

���������������

���������������

������������

���������������������

�����������������������������������

�������

��������

��������������������

������

���������������������������

����������������������������������������

��������������

����������������������

�������������������������������������������������������

������

������������������

�������������������������

��������������

��������

��������������������

������

0

50

100

150

200

250

300

A B C D E F G H

.ايندومتاسين نسبت بـه گـروه كنتـرل معنـي دار نبـود

در حاليكه اين اختالف نسبت بـه گـروه دريافـت كننـده ).٤نمودار((P<0.05) دگزامتازون معني دار تلقي گرديد

ثرات دگزامتازون و سولفاساالزين بر فعاليت آنزيم ا: ٤نمودار جفت انساني در سلولهاي تروفوبالست١ سيكلواكسيژناز

)n=12(

كشت مستقل تروفوبالسـتي تحـت درمـان بـا دگزامتـازون ١٢ تا ٥(1µM) , ملوكســـيكام(1µM) , سولفاســـاالزين (1µM) و يـــا

One - way ANOVA تتسـ . مخلوطي از اين مواد قرار گرفتنـد .براي مقايسه بين گروهها مورد استفاده قرار گرفت

. مي باشد>٠٥/٠P نشان دهنده اختالف معني دار با * . مي باشد>٠١/٠P نشان دهنده اختالف معني دار با **

:بحث پروستاگالندين ها از فسفوليپيدهاي غشاء سلول ها

اثر آنزيم فسـفوليپاز اين عمل از طريق .ساخته مي شوند ٢A ــفوليپاز ــا فســ ــه موجــــب تشــــكيل C و يــ كــ

اسيدآراشيدونيك غير اسـتريفيه گرديـده اسـت صـورت اسـيد آراشـيدونيك سـپس توسـط ). ٢٣،٢٢(مي پذيرد

كه داراي ) PGHS(سينتاز -Hآنزيم هاي پروستاگالندين هر دو فعاليت سيكلواكسـيژناز و پراكسـيداز مـي باشـند

) PGs(بـديل بـه پروسـتاگالندين هـا متابوليزه شـده و ت بطـور PGHSفعاليـت آنـزيم هـاي ). ٢٥،٢٤(مي شوند

وسيعي توسط داروهاي ضد تورمي غير استروئيدي مهـار مطالعات انجام شده در بسياري از گونه ها ). ٢٦(مي شود

از جمله انسان مؤيـد ايـن واقعيـت اسـت كـه در زمـان فعاليـت آنـزيم زايمان افزايش پروستاگالندين ها در اثـر

II-PGHS در مطالعـه اي كـه ). ٢٧( صـورت مـي گيـرد توسط اولسون و همكاران انجام گرفت نشان داده شد كه

PGE2اصلي ترين پروستاگالندين ساخته شده در آمنيون

). ٢٨(آيند بوجود ميPGHS آنزيمهاي كه توسط مي باشد PGDHآنزيم اصلي متـابوليزه كننـده پروسـتاگالندينها

در غشاءهاي جنيني و سـلول هـاي " باشد كه عمدتا مي ايـن آنـزيم ). ٢٩(تروفوبالست كوريون قرار گرفته اسـت

سبب تنظيم مقـدار پروسـتاگالندين هـا در بافـت هـاي جنيني ـ رحمـي گرديـده تـا فعاليـت هـاي بيولـوژيكي

پاتـل و ). ٣٠(خواسته شده در آن بافت ها حفـظ گـردد نـد كـه كـورتيزول بـر نشان داد ١٩٩٨همكاران در سال

PGDH mRNA اثر كرده و سطح PGDHفعاليت آنزيم كـورتيزول بـا مكانيسـم مهـار . سلولي را تنظيم مينمايد

را افـزايش مـي دهـد PGE2مقدار غلظت PGDH آنزيم نشـان دادنـد كـه ٢٠٠٠ويتل و همكاران در سال ). ١١(

موجب PGDHدگزامتازون با اثر مهاري خود روي آنزيم در سلول هاي مزانشيالي و آمنيوني PGE2 سطح افزايش

بـري و همكـاران در ). ١٤(كشت شده انساني مي گردد نشان دادند كه سولفاساالزين كـه بـه عنـوان ١٩٨٣سال

داروئي مؤثر در درمان كوليت السراتيو كاربرد دارد، مهـار بوده و بطـور PGDHكننده اختصاصي غير رقابتي آنزيم

ستقيم با تركيب با ساختمان شيميائي آن موجب غيـر مهمچنـين در ). ٢٠. (فعال شدن آنزيم مزبـور مـي گـردد

٢٠٠٠يك بررسي كه توسط چليس و همكاران در سال موجـب CRHانجام گرفت نشان داده شد كه هورمـون

در سلول هاي تروفوبالست PGDHكاهش فعاليت آنزيمبا ). ٤(ه دوز مي گردد كوريون در يك وضعيت وابسته ب

توجه به بررسي هاي انجـام شـده قبلـي انگيـزه مطالعـه در اين بررسـي تـالش گرديـد كـه در . حاضر بوجود آمد

سلول هاي تروفوبالست جفت انسـان وضـعيت ترشـح و و همچنـين اثـر تعـدادي از مهـار PGDHفعاليت آنزيم

كننده هاي آن و آنزيم هاي سيكلواكسيژناز مورد مطالعه همانطوريكه از نتـايج بدسـت آمـده برداشـت . قرار گيرد

مي شود، مشخص گرديد كه سولفاساالزين به تنهـائي و را افـزايش PGE2دگزامتـازون مقـدار ترشـح يا بهمـراه

PGDHمي دهد كه اين امر ميتواند ناشي از مهار آنـزيم لذا اين يافته با نتايجي .در سلول هاي جفتي انسان باشد

رحمـي -حققان در ساير بافت هـاي جنينـي كه ديگر م ملوكسيكام ). ١٥،١١،٤(بدست آورده بودند مطابقت دارد

مـي باشـد II-PGHSكه مهار كننده اختصاصـي آنـزيم تأثير قابل مالحظه اي در سلول هاي تروفوبالست انساني

ح رش

تPG

E 2)

رلكنت

به ت

سبد ن

رصد

(

A= Ctr B= Ind C= Dex D= Dex+Ind E= Sulf F= Sulf+Dex G= Sulf+Dex+Ind H= Sulf+Ind

*

** *

*

مجله علمي دانشگاه علوم پزشكي و خدمات بهداشتي درماني همدان ـــــــــــــــــــــــــــــــــــــ

٢٢

ايجاد PGE2نشان نداد و تغييرات معني داري در ترشح سـلول هـاي تروفوبالسـت تصور مي شـود كـه در . نكرد

چنـدان II-PGHSجفت انساني فعاليت يا ترشح آنـزيم از طرفي با تأثير ايندومتاسين بعنوان .قابل مالحظه نباشد

در سـلول هـاي I -PGHSمهار كننده اختصاصي آنزيم كشت شده جفت انسـان مشـاهده گرديـد كـه از ميـزان

به ميزان قابل مالحظه اي كاسته شـد لـذا PGE2ترشح در سـلول PGE2چنين استنباط مي گـردد كـه ترشـح

هاي مزبور وابستگي شديدي به حضور يا فعاليـت آنـزيم I -PGHS به عبارت ديگر تصور مي شود كه ترشح . دارد

توسط سـلول هـاي تروفوبالسـت جفـت PGE2پايه اي صورت مي گيرد تـا I-PGHSانسان بيشتر توسط آنزيم

سـاالزين در سـلول هـاي تـأثير سولفا . II-PGHS آنزيم كشت شده،نشان دهنده اهميت قـدرت تنظيمـي آنـزيم

PGDH مترشحه توسط سلول هـاي مزبـور در بـرون ده PGE2 با توجه به مطالعات پاتل و همكـاران در .مي باشد

ارتباط با اثر گلوكوكورتيكوئيد ها در سلول هاي كوريـون زيم كه نشان داده شد كورتيزول ميزان ترشح و فعاليت آن

PGDHداده را بطــور معنــي داري در ســلولهاي كشــتهمچنـين اثـر .دهنـد مـي جفت كاهش و شده كوريون

پروژسترون در سلول هاي مزبور موجـب افـزايش ترشـح PGE2 و PGF2α اينكه مكانيسم تأثيرپروژسترون . ميگرددنيست معلوم" باشد دقيقا گلوكوكورتيكوئيدها نظير ميتواند

يت در اين قسـمت ايـن اسـت كـه نكته قابل اهم ). ١٩(تداخل اثرات سولفاساالزين، دگزامتازون و ملوكسيكام در

توسط سـلول هـاي تروفوبالسـت جفـت PGE2برون ده انساني تحريك شده با گلوكوكورتيكوئيدها، ممكن اسـت

و I-PGHSناشــي از تنظــيم افزايشــي آنــزيم هــاي II -PGHS ويـا كـاهش فعاليـت آنـزيم PGDH باشـد و

د اين موارد همزمان سبب چنين تغييراتي در سـلول شاياز آنجائيكـــه حضـــور . هـــاي يـــاد شـــده مـــي شـــود

جفتي ميتواند -پروستاگالندين ها در بافت هاي رحمي انقباض پذيري عضالت ميـومتر را در پـي داشـته باشـد

، تأثير گلوكوكورتيكوئيدها و يا مهار كننـده هـاي ) ٨،٧(ت الزم و يــا اثــرات تســهيالPGDHاختصاصــي آنــزيم

مربوطه ديگري را در پديـده زايمـان ايجـاد مـي نمايـد )١١،٤،١ .(

بنابراين و با توجه به موارديكـه ذكـر گرديـد تصـور مي كنيم كه در شرايط فيزيولوژيك فعاليت و يا افزايش

ــزيم ــت آنــ ــزان PGDHغلظــ ــأثير آن در ميــ و تــ

ادي مربـوط بـه مي تواند تا حدود زي E2پروستاگالندين حضور گلوكوكورتيكوئيد ها در بافتهاي رحمي ـ جنينـي

ايـن پديـده بطـور مسـتقيم فعاليـت آنـزيم هـاي . باشدمطالعـات . سيكلواكسيژناز را تحت تأثير قـرار مـي دهـد

بعدي جهت بررسي اثرات متقابل گلوكوكورتيكوئيـدها و هورمون هـاي اسـتروئيدي و تعيـين نـوع گيرنـده هـاي

درگيـر مـي باشـند " اين تأثيرات مستقيما خاصي كه در مورد نياز مي باشد تا مكانيسم هاي مولكولي كه در ايـن ــيم ــد و در تنظ ــي نماين ــه م ــاالت مداخل ــل و انفع فع .پروستاگالندين ها نقش دارند را شناسائي و روشن نمايد

:منابع 1. Mitchell MD. The mechanism(s) of

human parturition.J Dev Physiol 1984;6:107-118.

2. Novy MJ, Liggins GC. Role of prostaglandins, prostacyclin, and thromboxane in the physiologic control in the uterus and parturition. Semin Perinatal 1980; 4: 45-65. 3. Loke YW , Whyte A , (eds). Biology of Trophoblast. New York : Elsevier , 1983. 4. Challis JRG., Matthews G.S , Gibb W , Ley JS. Endocrine and paracrine regulation of birth at term and preterm. Endocrine Rev 2000 ; 21(5): 514-550. 5. Sun K, Yang K, Challis JRG. Differential regulation of 11β- hydroxysteroid dehydrogenase type 1 and 2 by nitric oxide in culture human placental trophoblast and chorionic cell proparation.Endocrinology 1997 ; 138: 4912-4920. 6. Zakar T, Olson DM. Dexametasone stimulates arachidonic acid conversion to prostaglandin E2 in human amnion cells. J Dev Physiol 1989; 12:269-272. 7. Whittle WL, Holloway AC, Ley SJ, Gibb W, Challis JRG. Prostaglandin production at the onset of ovine parturition in regulated by both estrogen- independent and estrogen dependent-pathways. Endocrinology 2000 ; 141(10):3783-91. 8. Challis JRG, Cox DB, Sloboda DM. Regulation of corticosteroids in the fetus:Control of birth and influence on adult disease.Semin Neonatal 2000 ; 4: 93-97.

ــــــ ـــــــــــــــــــــــــــــــــــــــ٢٧ ، شماره مسلسل ١٣٨٢، بهار ١سال دهم ، شماره

٢٣ spontaneous labor. Am J Obstet Gynecol 1986 ; 155:1337-1341. 18. Economopoulos P, Sum M, Purgina B, Gibb W. Glucocorticoids stimulate prostaglandin H synthase type- 2(PGHS-2) in the fibroblast cells in human amnion cultures. Mol Cell Endocrinol 1996 ; 117:141-147. 19. Patel FA, Clifton VL, Chwalisz K, Challis JRG. Steroid regulation of prostaglandin dehydrogenase activity and expression in human term placenta and chorio-decidua in relation to labor. J Clin Endocrinol Metabol 1999; 84:291-299. 20. Kliman JH, Nestler EJ, Sermasi E, Sanger MJ, Strauss IIIJF. Purification , caracterization and in vitro differentiation of cytotrophoblast from human term placenta. Endocrinology 1986 ; 118(4):1567-1582. 21. Berry CN, Hoult JRS, Peers SH, Agback H. Inhibition of prostaglandin 15-hydroxydehydrogenase by sulphasalasine and a novel series of potent analogues. Biochemical Pharmacology. 1983 ; 32(19): 2863-2871. 22. Clark JD, Lin LL, Kriz RW, Ramesha CA, Sultzman LA, et al. A novel arachidonic acid-selective cystolic PLA2 contains a Ca2+ dependent translocation dominwith homology to PKC and GAP. Cell 1991 ; 65: 1043-1051. 23. Skannal DG, Eis ALW, Xue S, Siddiqi TA, Myatt L. Changes in activity of cytosolic phospholipase A2 in human amnion at parturition. Am J Obstet Gynecol 1997 ; 177:179-184. 24. Smith WL, De Witt DL. Prostaglandin endoperoxide H synthase-1 and –2. Adv Immonol 1996 ; 62:167-215. 25. Smith WL, Garavito RM, De Witt DL. prostaglandin endooeroxidas H synthase (cyclooxygenase)-1 and –2. J Biol Chem 1996 ;271:33157-33160. 26. Baguma-Nibasheka M, Nathanielsz PW. In vitro administration of nimesulide , a selective PGHS-2 inhibitor, increase in vitro myometrial sensitivity to prostaglandins while lowering sensitivity to oxytocin. J Soc Gynecol Invest 1998 ; 5:296-299.

9. Skinner KA, Challis JRG. Changes in synthesis and metabolism of prostaglandins by human fetal membranes and decidua at labor . Am J Obstet Gynecol 1985 ; 151: 519-523. 10. Xu XM, Hajibeige A, Tazawa RL, Mitchell D, Want LH, et al. Characterization of human prostaglandin H synthase gene, In: Samuelsson B, Paoletti R(eds). advances in prostaglandin, thromboxane, and leukoteriene research. New York :Raven , 1995: 105-107. 11. Patel FA, Chwalisz K, Challis JRG. Regulation of prostaglandin dehydrogenase (PGDH) activity by cortisol and progestron may involve paracrine/autocrine intraction and effects on levels of PGEH mRNA. Program of the 45th Annual Meeting of the Society for Gynecologic Investigation,1998(Abstract 136). 12. Gibb W, Lavoie JC. Effect of glucocorticoids on prostaglandin formation by human amnion. Can J Physiol Pharmacol 1990;68:671-676. 13. Challis JRG, Patel FA, Pomini F. Prostaglandin dehydrogenase and the initiation of labor. J Perinat Med 1999; 27:26-34. 14. Whittle WL, Gibb W, Challis JRG. The characterization of human amnionepithelial and mesenchymal cell culture ;the cellular expression activity and glucocorticoid regulation of prostaglandin sythesis. Placenta 2000 ; 21:894-901. 15. Zakar T, Hirst JJ, Mijoric JE, Olson DM. Glucocorticoids stimulate the expression of prostaglandin endoperoxide H synthase-2 in amnion cells. Endocrinology 1995 ; 136:1610-1619. 16. Murotsuki J, Challis JRG, Gagnon R. Increased fetal plasma prostaglandin E2 concentration during fetal embolization in pregnant sheep. Am J Obstet Gynecol 1995 ;173:30-35. 17. Nakla S, Skinner K, Mitchell BF, Challis JRG. Changes in prostaglandin transfer across human fetal membranes obtained after

مجله علمي دانشگاه علوم پزشكي و خدمات بهداشتي درماني همدان ـــــــــــــــــــــــــــــــــــــ

٢٤ Greep RO. Partial purification of human placental 15- hydroprostaglandin dehydrogenase:kinetic properties. Prostaglandins 1974 ; 5:417-433. 30. Okazaki T, Casey ML, Okita JR, MacDonald PC, Johnston JM. Initiation of parturition. XII, biosynthesis and metabolism of prostaglandin in human fetal membrane and uterine decidua. Am J Obstet Gynecol 1981 ; 139: 373-381.

27. Tazawa R, Xu XM, Wu KK, Wang LH. Characterization of the genomic structure, chromosomal location and promoter of human prostaglandin H synthase-2 gene. Biochem Biophys Res Commun 1994 ; 203:190199. 28. Olson DM, Skinner K, Challis JRG. Prostaglandin output in relation to parturition by cells dispersed from human intrauterine tissues. J Clin Endocrinol Metab 1983 ; 57:694-699. 29. Schlegel W, Demers LM, Hildebrandt-Stark HE, Behrman HR,