2021年2月発行

HPLC, LC/MSカラム

InertSustain AX-C18

酸性化合物の分離分析にお薦め！

InertSustain AX-C18

シリカゲルにC18基と3級アミノ基を化学結合させたミックスモードカラム

【 特⻑ 】○ 逆相と陰イオン交換の両⽅を兼ね備えた保持挙動○ 酸性化合物に対する優れた保持⼒○ 優れた再現性 ・ 安定した品質

【このような場合にお薦め！】○ C18カラムから分離パターンを少し変えたい○ 酸性化合物・陰イオン性化合物を分析したい○ 陰イオン交換カラムで再現性・ロット差に困っている

仕様・ ⺟体・ 粒⼦径・ 表⾯積・ 細孔径・ 細孔容積・ 化学結合基・ エンドキャップ・ 炭素量・ U S P コ ー ド・ 推奨使⽤pH範囲

： ⾼純度球状シリカゲル（ESシリカ）： 3 μm、5 μm： 200 m2/g： 200Å (20 nm)： 1.00 mL/g： オクタデシル基＋3級アミノ基： あり： 8 %： L1、L78： 1〜9

0 10 20Time (min)

0 10 20Time (min)

InertSustain AX-C184+5

3t0 6

1

2

53 6

21,4

酸性化合物の保持⼒⼤幅UP！

【核酸塩基、モノリン酸の分析】 ConditionsColumnEluentFlow Rate Col. Temp.Detection

逆相と陰イオン交換の両⽅を兼ね備えた保持挙動

特⻑１

InertSustain C18（⼀般的なC18カラム）

Sample：1. Cytosine(塩基性) 2. Uracil(中性) 3. CMP(酸性) 4. UMP(酸性) 5. Adenine(塩基性) 6. AMP(酸性)

3 4 6 1 25

酸性化合物 塩基性化合物 中性化合物

t0

＊ 塩基性化合物の保持は減少

⼀般的なC18カラムと⽐べて

◎ 酸性化合物の保持が増加

： 3 μm, 150 × 2.1 mm I.D.： 25 mM NaH2PO4 in H2O ： 0.2 mL/min： 40 ℃： UV 254 nm

酸性化合物に対する優れた保持⼒

0 10 20Time (min)

12

3

t0

0 10 20Time (min)

t0

1+2

3

特⻑2

溶離液にイオン対試薬無しで

◎ ⾼極性の酸性化合物を保持

ConditionsColumnFlow Rate Col. Temp.Detection Sample

InertSustain AX-C18

InertSustain AQ-C18（⾼極性化合物分析⽤C18カラム）

【糖ヌクレオチドの分析】Eluent ： 20 mM HCOONH4 in H2O（イオンペア不使⽤）

⾼極性化合物分析⽤C18カラムで保持できない⾼極性の酸性化合物をしっかり保持！

： 3 μm, 150 × 2.1 mm I.D. ： 0.2 mL/min： 40 ℃： UV 254 nm： 1. UDP-Glu 2. UDP-Gal 3. GDP-Man

溶離液の塩濃度が低くても

【モノリン酸の分析】ConditionsColumnFlow Rate Col. Temp.Inj.VolumeDetection Eluent ： A) 10 mM HCOONH4 in CH3OH

B) 10 mM HCOONH4 in H2OA/B = 5/95 - 10 min - 100/0 - 5 min - 100/0, v/v

10 mMの塩濃度でも⾼極性の酸性化合物をしっかり保持！シャープに溶出！低濃度の塩で分析できるのでMSへの適応も可能！

Sample: Q1 > Q31. CMP: 324.90 > 111.95 (+) 0.5mg/L2. GMP: 364.90 > 153.00 (+) 0.5mg/L3. UMP: 325.90 > 96.90 (+) 1.0mg/L4. AMP: 348.90 > 136.95 (+) 0.05mg/L

：3 μm, 150 × 2.1 mm I.D.：0.2 mL/min：40 ℃：5 μL：MS/MS (ESI, Positive, MRM)

◎ 酸性化合物をしっかり保持◎ MS分析への適応

0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 min

0.0

0.5

1.0

1.5(x10,000)

4:AMP 348.90>136.95(+) CE: -19.03:UMP 325.90>96.90(+) CE: -13.02:GMP 364.90>153.00(+) CE: -15.01:CMP 324.90>111.95(+) CE: -15.0

4:AMP 348.90>136.95(+) CE: -19.03:UMP 325.90>96.90(+) CE: -13.02:GMP 364.90>153.00(+) CE: -15.01:CMP 324.90>111.95(+) CE: -15.0

0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 min

0.0

1.0

2.0

3.0

4.0

(x100)

4:AMP 348.90>136.95(+) CE: -19.03:UMP 325.90>96.90(+) CE: -13.02:GMP 364.90>153.00(+) CE: -15.01:CMP 324.90>111.95(+) CE: -15.0

4:AMP 348.90>136.95(+) CE: -19.03:UMP 325.90>96.90(+) CE: -13.02:GMP 364.90>153.00(+) CE: -15.01:CMP 324.90>111.95(+) CE: -15.0

InertSustain AX-C18

A社ミックスモードカラム（逆相＋アニオン交換＋カチオン交換）

B社ミックスモードカラム（逆相＋弱アニオン交換）

1

2

34

保持が弱い

ブロードピーク

0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 min

0.0

0.5

1.0

1.5(x10,000)

4:AMP 348.90>136.95(+) CE: -19.03:UMP 325.90>96.90(+) CE: -13.02:GMP 364.90>153.00(+) CE: -15.01:CMP 324.90>111.95(+) CE: -15.0

4:AMP 348.90>136.95(+) CE: -19.03:UMP 325.90>96.90(+) CE: -13.02:GMP 364.90>153.00(+) CE: -15.01:CMP 324.90>111.95(+) CE: -15.0

優れた再現性・安定した品質特⻑3

【出荷検査によるロット間差評価】

【酸性化合物のロット間差評価】

Column ： 3 μm, 150 × 4.6 mm I.D.Eluent ： CH3CN/H2O = 65/35, v/vFlow Rate ： 1.0 mL/min Col. Temp.：40 ℃Detection ： UV 254 nmSample ： 1. Uracil 2. Acetophenone 3. Benzene

4. Toluene 5. Naphthalene

ミックスモードで懸念される再現性は

◎ 独⾃の充填・製造技術により改善

Column ： 3 μm, 150 × 4.6 mm I.D.Eluent ： CH3CN/0.1 % HCOOH = 10/90, v/vFlow Rate ： 1.0 mL/minCol. Temp. ： 40 ℃Detection ： UV 254 nmSample ： 1. AMP

再現性のコントロールが難しいミックスモードカラムで保持時間の再現性良好！

0 2 4Time (min)

0 2 4Time (min)

0 2 4Time (min)

12 3 4 5

1 2 3 4 5

1 2 3 4 5

Lot 1

Lot 2

Lot 3

0

0

0

2

2

2 4

4

4

0 2 4 6Time (min)

0 2 4 6Time (min)

0 2 4 6Time (min)

1

1

1

Lot 1

Lot 2

Lot 3

4

4

4

6

6

6

2

2

2

0

0

0

⾼極性化合物を分析したい場合のカラム選択

C18カラムで⾼極性化合物分析にお困りの場合…

全体的に保持を強めたい

酸性化合物を特に保持させたい

塩基性化合物を特に保持させたい

InertSustain AQ-C18

InertSustain AX-C18

InertSustain PFP

おまけ

1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0Time (min)

1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0Time (min)

1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0Time (min)

1

2

3

1

2 3

t0

t0

1

23

t0

InertSustain C18（⼀般的なC18カラム）

InertSustain AX-C18

InertSustain PFP

1. Chlorogenic acid

酸性化合物

塩基性化合物

2. Caffeic acid

3. Caffeine

Column ： 3 μm, 150 × 2.1 mm I.D. Eluent ： A) CH3CN

B) 25 mM NaH2PO4 in H2O A/B = 20/80, v/v

Flow Rate ： 0.2 mL/minCol. Temp. ： 40 ℃Detection ： UV 270 nm

1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0Time (min)

InertSustain AQ-C18

1

23

t0

InertSustain AX-C18アプリケーション

0 2 4 6 8 10Time (min)

1

2

34

56

0 2 4 6 8 10Time (min)

1

2

3

5 67

4108 9

ATP分解物

尿酸代謝ConditionsColumnEluent

Flow Rate Col. Temp.Detection Inj. Vol. Sample

ConditionsColumnEluent

Flow Rate Col. Temp.Detection Inj. Vol. Sample

0 2 4 6 8 10Time (min)

NAD+, NADH

1

2

Nicotinamide Adenine Dinucleotide

ConditionsColumnEluent

Flow Rate Col. Temp.Detection Inj. Vol. Sample

1 2

: 3 μm, 150 × 2.1 mmI.D. (⾼耐圧UHPLC PEEKカラム): A) 10 mM HCOONH4 in (CH3CN/H2O = 90/10, v/v)

B) 10 mM HCOONH4 in H2OA/B = 2/98 ‒ 10 min ‒ 80/20, v/v

: 0.3 mL/min: 40℃: UV 254 nm: 1 μL: 1. NAD+

2. NADH(500 mg/L each)

: 3 μm, 150 × 2.1 mmI.D. (⾼耐圧UHPLC PEEKカラム): A) 200 mM HCOONH4 in (CH3CN/H2O ＝ 50/50, v/v)

B) 10 mM HCOONH4 in H2OA/B ＝2/98 - 10 min ‒ 50/50, v/v

: 0.3 mL/min: 40℃: UV 254 nm: 1 μL: 1. Hypoxanthine 2. Inosine 3. IMP

4. AMP 5. ADP 6. ATP(100 mg/L each)

: 3 μm, 150 × 2.1 mmI.D. (⾼耐圧UHPLC PEEKカラム): A) 100 mM HCOONH4 + 0.1% HCOOH in (CH3CN/H2O ＝ 50/50, v/v)

B) 10 mM HCOONH4 + 0.1% HCOOH in H2OA/B ＝2/98 - 10 min ‒ 15/85, v/v

: 0.3 mL/min: 40℃: UV 254 nm: 1 μL: 1.Guanine 2. Uric acid 3. Hypoxanthine

4. Xanthine 5. Inosine 6. Guanosine 7. Adenosine 8. IMP 9. GMP 10. AMP(100 mg/L each)

0 2 4 6 8 10 12 14Time (min)

抗ヒスタミン剤

12

3 4

5

6 7 810

119

Maleicacid

Fumaric acid

0 2 4 6Time (min)

糖リン酸

12

0 2 4 6 8Time (min)

1

2

グリホサート・グルホシネート ConditionsColumnEluentFlow Rate Col. Temp.Detection Inj. Vol. Sample

1

2

1 2

ConditionsColumnEluent

Flow Rate Col. Temp.Detection Inj. Vol. Sample

ConditionsColumnEluent

Flow Rate Col. Temp.Detection Inj. Vol. Sample

: 3 μm, 150 × 2.1 mmI.D.: 0.1 % H3PO4 in H2O: 0.2 mL/min: 40℃: UV 210 nm: 1 μL: 1. Glufosinate

2. Glyphosate(1000 mg/L each)

: 3 μm, 150 × 2.1 mmI.D.: A) 10 mM HCOONH4 (in CH3CN/H2O = 90/10, v/v): B) 10 mM HCOONH4 in H2O

A/B = 20/80 - 15 min - 90/10, v/v: 0.3 mL/min: 40℃: UV 230 nm: 2 μL: 1. Epinastine 2. Chlorpheniramine＊1

3. Triprolidine 4. Hydroxyzine5. Azelastine 6. Ketotifen＊27. Loratadine 8. Homochlorcyclizine9. Clemastine＊2 10. Cetirizine11. Fexofenadine(50 mg/L each)

*1 Maleate *2 Fumarate

: 3 μm, 150 × 4.6 mmI.D.: 10 mM HCOONH4 + 0.1 % HCOOH in H2O: 1.0 mL/min: 40℃: RI: 5 μL: 1. Glucose 1-phosphate

2. Glucose 6-phosphate(2,500 mg/L each)

0 2 4 6 8 10Time (min)

12

3

4 5

ペプチド

0 2 4 6Time (min)

1

2

オリゴ核酸

シアル酸

0 20 40Time (min)

1

2

34

1 2

ConditionsColumnEluent

Flow Rate Col. Temp.Detection Inj. Vol. Sample

ConditionsColumnEluent

Flow Rate Col. Temp.Detection

ConditionsColumnEluentFlow Rate Col. Temp.Detection Inj. Vol. Sample

InertSustain AX-C18アプリケーション

: 3 μm, 150 × 2.1 mmI.D.: A) 10 mM HCOONH4 (0.1% HCOOH) in CH3CN/H2O =90/10, v/v: B) 10 mM HCOONH4 (0.1% HCOOH) in H2O

A/B ＝2/98 - 10 min - 80/20, v/v: 0.3 mL/min: 40℃: UV 254 nm: 1 μL: 1. Gly-Tyr

2. Val-Tyr-Val3. Angiotensin Ⅱ (Asp-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-Phe)4. Met-Enkephalin (Tyr-Gly-Gly-Phe-Met)5. Leu-Enkephalin (Tyr-Gly-Gly-Phe-Lue)(500 mg/L each)

: 3 μm, 150 × 2.1 mmI.D. (⾼耐圧UHPLC PEEKカラム): A) 200 mM HCOONH4 in (CH3CN/H2O＝50/50, v/v): B) 200 mM HCOONH4 in H2O

A/B ＝ 10/90 - 40 min - 40/60, v/v: 0.2 mL/min: 40℃: UV 260 nm: 1. 5ʼ-CATGACGTTCCTGATGCT-3ʼ (18 mer)

2. 5ʼ- GCTACGACGTTCCTGATGCT-3ʼ (20 mer)3. 5ʼ- TATGACGTTCCTGATGCT-3ʼ (18 mer)4. 5ʼ- GCTA TGACGTTCCTGATGCT-3ʼ (20 mer)

: 3 μm, 150 × 2.1 mmI.D.: 10 mM HCOONH4 in H2O: 0.2 mL/min: 40℃: UV 220 nm: 2 μL: 1. Neu5Gc (N-Glycolylneuraminic acid)

2. Neu5Ac (N-Acetylneuraminic acid)(500 mg/L each)

粒⼦径： 3 μm

⻑さ/内径 (mm) 2.1 3.0 4.0 4.6 価格50 5020-91037 5020-91041 5020-91045 5020-91049 48,000100 5020-91038 5020-91042 5020-91046 5020-91050 54,000150 5020-91039 5020-91043 5020-91047 5020-91051 62,000250 5020-91040 5020-91044 5020-91048 5020-91052 72,000

粒⼦径： 5 μm

⻑さ/内径 (mm) 2.1 3.0 4.0 4.6 価格50 5020-91000 5020-91004 5020-91008 5020-91012 45,000100 5020-91001 5020-91005 5020-91009 5020-91013 50,000150 5020-91002 5020-91006 5020-91010 5020-91014 55,000250 5020-91003 5020-91007 5020-91011 5020-91015 63,000

注） ジョイント形式は、パーカー型(UPタイプ)です。カラムの耐圧は、20MPaです。

パーカー型(UPタイプ)

2.4 mm

分析カラム

注）ジョイント形式は、パーカー型(UPタイプ)です。カラムの推奨最⼤圧⼒は、50MPaです。

HPシリーズ粒⼦径：3 μm

⻑さ/内径 (mm) 2.1 3.0 4.6 価格150 5020-91053 5020-91055 5020-91057 72,000250 5020-91054 5020-91056 5020-91058 82,000

InertSustain AX-C18価格表

⾼耐圧 UHPLC PEEKカラム（⾼耐圧80 MPa）粒⼦径 ⻑さ（mm）

内径（mm） 価格2.1 4.6

3 μm 150 5020-91059 5020-91061 96,000250 5020-91060 5020-91062 107,000

対象とする分析カラムの内径(mm)

⻑さ(mm) 内径(mm)

交換カートリッジガードカラムE（2本）

交換カートリッジEセット（カートリッジE2本＋ホルダー1個）

粒⼦径 価格 粒⼦径 価格3 μm 5 μm 3 μm 5 μm1.5、 2.1

101.5 5020-91076 5020-91029 22,000 5020-91077 5020-91030 41,000

2.1、 3.0 3.0 5020-91074 5020-91027 17,000 5020-91075 5020-91028 36,0004.0、 4.6 4.0 5020-91072 5020-91025 17,000 5020-91073 5020-91026 36,0002.1、 3.0 20 3.0 5020-91080 5020-91033 24,000 5020-91081 5020-91034 47,0004.0、 4.6 4.0 5020-91078 5020-91031 24,000 5020-91079 5020-91032 47,000

カートリッジガードカラムE⽤ホルダー ⻑さ10 mm⽤ 5020-08500 27,000⻑さ20 mm⽤ 5020-08550 30,000

対象とする分析カラムの内径(mm)

⻑さ(mm)

内径(mm)

交換カートリッジのみ（2本） カートリッジ（2本）+ホルダー（1個）セット粒⼦径 3 μm 価格 粒⼦径 3 μm 価格

1.010

1.5 5020-91084 27,000 5020-91087 45,0001.5、2.1 2.1 5020-91085 27,000 5020-91088 45,0002.1、3.0 3.0 5020-91086 27,000 5020-91089 45,000

ガードカラム for UHPLC 専⽤ホルダー 5020-08630 27,000

カートリッジガードカラムE（耐圧20 MPa）

注） ジョイント形式は、パーカー型（UPタイプ）です。

ガードカラム for UHPLC（⾼耐圧80 MPa）

注）専⽤ホルダーの接続ジョイントは、以下のとおりです。カラム接続側：外径1/16インチ、内径0.18 mm、⻑さ30 mmのチューブが固定されています。装置接続側：チューブ先端⻑2.4 mmの1/16インチネジとなっています。

注） ジョイント形式は、パーカー型（UPタイプ）です。粒⼦径3 μmの場合は、耐圧50 MPaになります。

ミックスモードカラム使⽤時のコツ イオン性相互作⽤が働くため、溶離液に5〜10 mMの濃度となるように塩を添加することを推奨します。 陰イオン性官能基を複数含む化合物を分析する場合、塩濃度グラジエントを推奨します。 陰イオン性化合物の分析後、カラム洗浄は50〜100 mMの酢酸アンモニウム in メタノール溶液などで

⼗分に洗浄してください。 保管時は、塩を含まない有機溶媒(メタノールまたはアセトニトリル)に置換してください。

ホームページHPLC技術情報https://www.gls.co.jp/hplc.html

AA851-20210215PDF