hidrolisis de las grasas por accion de la lipasa pancreatica ii
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UNIVERSIDAD ALAS PERUANAS MANUAL DE PRACTICAS DEBIOQUIMICA
Universidad alas Peruanas-farmaia ! "i#$u%mia- il# VI P&'ina (
CURSO ) BIOQUIMICA II
DOCENTE ) IN*+ MILA*ROS QUE,ADA
CICLO )VI
INTE*RANTES)
BRICEO BALMACEDA .ROSMER/ BERNAL LEON C/NT0IA PAOLA RAMOS RIOS /O0ANA
ESCUELA ) 1ARMACIA / BIOQUIMICA
2AO DE LA INVERSI3N PARA EL
DESARROLLO RURAL 4
UAP
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HIDROLISIS DE LAS GRASAS POR ACCION DE LA LIPASA PANCREATICA
I. OBJETIVOS
• Determinar los meq-acido grasos liberados por
acción de la pancreática.• Observar como es que actua y que efectos trae
las sales biliares sobre el aceite.• Observar la actividad de la enzima lipasa
indirectamente por titulación de los acidos
grasos liberados utilizando en la titulación
usando la base de idró!ido de sodio
II. FUNDAMENTO TEORICO
"as grasas de la dieta incluyen triglic#ridos$
fosfol%pidos y colesterol. "os trigleceridos son una rica
fuente de calor%as$ y constituyen el mayor porcenta&e
de las grasas incorporadas en la dieta. "a digestión de
las grasas comprenden la idrolisis de estos
triglic#ridos a acidos grasos libres y monogliceridos
para que puedan ser captados por las c#lulas. 'steproceso comienza en el estomago$ mediante la lipasa
gástrica que es secretada por las c#lulas principales
que tambi#n secretan pepsina. 'sta lipasa gástrica es
especialmente importante en el reci#n nacido para
digerir la grasa de lece. "a lipasa pancreática es esencial para la absorción
normal de las grasas$ pues en casos en que el
páncreas no funcione en mas de un ()*$ la grasas no
se absorbe."as sales biliares tambi#n tienen un rol importante en
la digestión y absorción de las grasa no se absorbe."as sales biliares tambi#n tienen un rol importante en
la digestión y absorción de las grasas. +on
sintetizadas$ a partir del colesterol$ en el %gado en
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cantidad apro!imada de ,)) a ))mg. Por dia$ y
e!cretadas en la bilis &unto con los aminoácidos glicina
y taurina. "a mayor parte de las sales biliares
con&ugadas se absorben nuevamente en el ilion$ yluego de entrar a la vena porta$ estan su&etas a la
llamada circulación enteroepatica/ 0intestino-
igado1.Por este proceso$ un 2)* de las sales biliares que
llegan al ileon es reabsorbidos$ como consecuencia$
unos ,)) a )) mg. De sales biliares son e!cretadas
en la materia fecal por dia$ a pesar de que sean 3ó 4
gr. 5ue pasan a trav#s del circulo enteroepatico
mucas veces por dia. 'sto permite que pueda entrar
al duodeno 0 a trav#s de la via biliar principal unos ,)
a 3) gr. De sales biliares por dia para participar
activamente$ en la digestión de los alimentos.+i el ileon esta enfermo o se lo a removido en una
operación$ se produce una signi6cativa perdida de
sales biliares por materia fecal. 'sto puede ocasionar
una mala absorción de las grasas y de las vitaminas
solubles en grasas$ como las vitaminas A$ D y 7."os productos de la digestión y los trigleceridos
0acidos grasos libres y monogliceridos1 pueden luego
penetrar en la celula intestinal 0 enterocito1. All% son
sintetizados nuevamente y envueltos para ser
liberados a la circulación y distribuidos por todo el
organismo.
III+ MATERIALES. EQUIPOS / REACTIVOS
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• Aceite neutralizado
• 8enoltaleina
• 9aO:
•
;u"• +ales biliares =* en bu" p: ?@Páncreas =* en bu p:? @Pipetas
VI+ PROCEDIMIENTO E7PERIMENTAL
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(+ Primero cogemos tres recipientes$ de los cuales agregamos cadamuestra de aceite$ bilis y el páncreas.
,. ogemos un recipiente y colocamos a la bilis
3. 'n este caso traba&aremos con las páncreas$ la cual será e!tra%da
una cierta cantidad para e!perimentación.
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Agregamos bu"
'!traemos =ml de
aceite
Aceite
ABadimos ).=mol>" de
bu
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4. para cada muestra de páncreas$ sales biliares y aceite. se va amedir el p:.
MUESTRA DE PANCREAS
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'!traemos =ml de páncr
luego colocamos en ot
recipiente la cual aBadim
bu
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MUESTRA DE ACEITE
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Observamos la
muestra de aceite$medimos su p:$ la
fue el inicio (.=,$
como no llego a
p:?@ tuvimos que
aBadir unas cuantas
gotas de 9aO: para
alcanzar el p:?@
+e agrega 9aO: que es una base$ solo se
aBade a la muestra en caso que no llegue a
p:?@
Por ultimo ab%amos
agregado 3 gotas de
9aO: a la muestra de
aceite y nos dio como
resultado
apro!imadamente de
p:?@.=,
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MUESTRA DE SALES BILIARES
C. 'n este procedimiento utilizaremos 4 tubos de ensayo para las
siguientes muestras páncreas$ sales biliares y aceite.
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uestra de
aceite
"a muestra de la sales
biliares tubo p:?(.2( inical
la cual no llego al p:?@
Por esta razón ab%amos aBadido
9aO: como resultado se obtuvo
apro!imadamente p:?@.)3
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Tu"# N=(
TUBO N=5
ABadimos ,ml de bu"
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Agremos aceite neutralizado =ml E
,ml de agua destilada E Cml de
panceatina
ABadimos ,ml de
sales biliares en
'!traemos =ml de aceite
neutralizado E Cml depancreatina
uestra de aceite
neutralizado
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Fambi#n vamos agregar
,ml de agua destilada
Despu#s agregamos Cml
de pancreatina
TUBO N= B(
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'n el tubo 9G ;= aBadimos lo
siguienteH 3ml de agua
destilada
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TUBO N=B5
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,ml +ales biliares e
bu
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IV+ PROCEDIMIENTO E7PERIEMNTAL
Preparar tubos de ensayo segIn como se indica en lasiguiente tabla.
MUESTRAS @u"#sAei@e neu@raliad# ml = ;= , ;,
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'n el tubo 9G ;, aBadi
,ml bu
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Buer f#sfa@# ?+( m#lLF0
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V#lumen de NaO0 'as@ad#s @u"#s= ;= , ;,
Jealice un cuadro de comparación con lasotras mesas
Mesa m E$ ( m E$ 5(56
VI+ CUESTIONARIO=. NUA" '+ "A AO9 D' "A+ +A"'+ ;"AJ'+ '9 '"
++F'A D' J'AO9
,. NPor qu# +' U+O ;U88'J 8O+8AFO ).= A P:@ '9
'" ++F'A
Por qu# es una solución capaz de resistir cambios en el p:.
onsiste de una mezcla de ácidos y bases con&ugados. Al
mezclarlos$ se transforman en otra solución que gana ypierde protones. "os sistemas bu
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iones de fosfato de idrógeno 0:PO4,1 los aceptan. Ambos
iones están en equilibrio el uno con el otro.. uando el Quido
celular llega a ser más ácido$ :PO43 reacciona con iones e!tra
de idrógeno para formar :,PO4 y el equilibrio se instala en la
izquierda. uando el Quido celular llega a ser alcalino$ los ionesde idró!ido reaccionan con :,PO4 para formar :PO4, y el
equilibrio pasa a la dereca.
3. NPAJA 5U' +' U+AJO9 "O+ FU;O+ ;"A9O+ '9 "A
PJAFA
4. 'MP"5U' '" PJO'+O D' DK'+FO9 R A;+OJO9
D' "O+ "PDO+.
El consumo diario de lípidos es de unos 60-100 g. En su mayor parte son triglicéridos y sólo una
pequeña porción se encuentra en forma de lecitinas, ésteres de colesterol o vitaminas liposolules.
Emulsificación, digestión e incorporación a las micelas
!a soluili"ación sólo es posile por incorporación a las micelas de la ilis. #uando la ilis se
me"cla con las gotitas de lípidos en el intestino, los lípidos se asoren en las micelas y así se
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mantienen estales pasando de formar parte de gotas cuyo di$metro era de 0,% a 1 &, a micelas
cuyo di$metro es de ' a 6 nm (apro)imadamente 1.000 veces m$s pequeñas*.
!a digestión de los lípidos se lleva a cao a nivel de intestino delgado gracias a la presencia de las
en"imas lipolíticas del p$ncreas. !a lipasa pancreática, es la m$s importante, desdola los
triglicéridos en monogliceridos y $cidos grasos+ tamién parece e)istir una lipasa g$strica, capa"
de digerir triglicéridos de cadena corta, pero su actividad es muy reducida. !a fosfolipasa disocia
las lecitinas en lisolecitinas y $cidos grasos. !a colesterol-ésterhidrolasa idroli"a el colesterol
esterificado, originando $cidos grasos y colesterol lire.
l mismo tiempo, la lipasa se asore tamién, manteniéndose anclada a los $cidos iliares
gracias a una proteína, la colipasa pancre$tica. Entonces se produce la idrólisis de los
triglicéridos, con formación de monoglicéridos y $cidos grasos, que se incorporan a las micelas yaque los productos de la idrólisis de los lípidos son compuestos insolules en el medio acuoso
intestinal.
Entrada al enterocito o célula epitelial intestinal
na ve" producida la incorporación a las micelas mi)tas, los productos de la digestión de los
lípidos pueden ya ponerse en contacto con las microvellosidades y asorerse a través de la
memrana celular por difusión. /ara penetrar en el interior de los enterocitos, las moléculas
lipídicas difunden primero a la "ona de líquido que rodea a éstos y luego penetran a través de lamemrana epitelial. !as micelas difunden entonces en sentido retrógrado y vuelven a asorer
nuevos lípidos, que son transportados acia las células de las vellosidades.
!a asorción intestinal de los lípidos es un proceso muy efica". $s del %2 de los mismos se
recuperan, fundamentalmente a nivel duodenal, y sólo una pequeña cantidad se pierde cada día a
través de las eces.
Metabolismo celular y formación de quilomicrones
na ve" en el interior de las células intestinales, los productos de la digestión de los lípidos se
unen a una proteína transportadora de a3o peso molecular, la cual los lleva asta el retículo
endoplasm$tico liso. En éste tiene lugar la resíntesis de triglicéridos, la de lecitinas y la de
colesterol esterificado.
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!os diferentes lípidos se agrupan posteriormente y se rodean de una cuierta de etalipoproteínas
formadas en el aparato de 4olgi, dando lugar a la aparición de los quilomicrones. 5u composición
apro)imada sería 782 de triglicéridos, 2 de fosfolípidos y colesterol lire, 92 colesterol
esterificado y 12 de vitaminas liposolules y proteínas.
PJO'D'9FO A;+OJO9 R DK'+FO9
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C. J'A"' U9 '+5U'A D' "A "A+8AO9 D'
"O+ "PDO+
VII+ CONCLUSIONES
VIII+ RECOMENDACIONES
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• antenga la limpieza y el orden en los lugares
de traba&o.•
"os reactivos deben estar siempre colocadosen el lugar que se indique.
'sta proibido acer e!perimentos no
autorizados por el profesor.
's obligatorio el uso permanente de la bata y
gafas de seguridad dentro del laboratorio.
9o toque con las manos directamente losproductos qu%micos$ ni los pruebe.
I7+ 1UENTES DE CONSULTA"aguna.fmedic$unam.m!> evasquez>
S>triacilglecerido.tmlTTT.doscivos.com>display.aspD?C(8soco.com.ar>;iolog%a>cuerpoS>ApVdig.tm
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http://www.doschivos.com/display.asp?ID=576&Fhttp://www.doschivos.com/display.asp?ID=576&F
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