7/31/2019 Hepatitis b Surface Antigen

1/5

HEPATITIS B SURFACE ANTIGEN

TEST STRIP

INTRODUCTION

The complex antigen found on surface of HBV is called HBs Ag. Thepresence of HBs Ag in serum or plasma is indication of an active hepatitis Binfection, either acute or chronic. In a typical hepatitis B infection, HBs Ag willbe detected 2-4 week before the ALT level becomes abnormal and 3 to 5 weeksbefore symptoms or jaundice develop. HBs Ag has four principal subtype : adw,ayw, adr and ayr. Because of antigenic heterogeneneity of determinant, thereare 10 mayor serotypes of hepatitis B virus.

PRINCIPLE OF THE METHOD

One step hepatitis B surface antigen test device (serum/plasma) is aqualitative, lateral flow immunoassay for the detection of HBs Ag in serum orplasma. The membrane is pre-coated with anti HBs Ag antibodies on test lineregion of the strip. During testing, the serum or plasma specimen reacts withthe particle coated with anti HBs Ag antibody. The mixture migrates upward onthe membrane chromatographically by capillary action to react with anti HBs

Ag antibodies on the membrane and generate a colored line. The presence of this colored line in the test region indicates a positive result, while its absenceindicates a negative result. To serve as procedural control, a colored line willalways appear in the control line region indicating that proper volume of specimen has been added and membrane wicking has occurred.

SPECIMEN TYPE, COLLECTION AND STORAGE

The test may be performed using human serum or plasma. If specimenare not immediately tested they should be refrigerated at 2-8 degree C. Forstorage periods greater than three days, freezing is recomended. Specimencontaining precipitate may yield inconsistent test result. Such specimens mustbe clarified prior to assaying.

7/31/2019 Hepatitis b Surface Antigen

2/5

EQUIPMENT NEEDED

Specimen collection container, centrifuge, timer.

REAGENTS

Material provided

Delta HBs Ag test device

PROCEDURE

Allow test strip, serum or plasma specimen, and/or controls to

equilibrate to room temperature (15-30 C) prior to testing.

1. Bring the pouch to room temperature before opening it. Remove the teststrip from sealed pouch and use it as soon as possible. Best results willbe obtained if the assay is performed within one hour.

2. With arrows pointing toward the serum or plasma specimen, immersethe test strip vertically in the serum or plasma for least 10-15 second.

3. Place the test strip on non-absorbent flat surface, interpret test results at20-30 minutes.

INTERPRETATION

1. A color band will appear in upper section of the result window to showthat the test is working properly. This band is the control band.

2. The lower section of the result window indicates the results. If anothercolor band appears in the lower section of the result window, this band isthe test band.

POSITIVE RESULTS

The presence of two colors band (? band and C band) with in theresult window no matter which band appears first indicates a positive result.Note : generally, the higher the analyte level in specimen, the stronger the ?

7/31/2019 Hepatitis b Surface Antigen

3/5

band color will be. When the specimen analyte level is close to but still withinthe sensi tivity limit of the test, the color of the ? will be very faint.

NEGATIVE RESULTS The presence ooooof only one purple color band within the result window

indicates a negative result.

INVALID RESULTS

If after performing the test no band is visible within the result window,the result is considered invalid. The directions may not have been followed

correctly or the test may have deterioated. It is recomended that the specimenbe re-tested.

LIMITATIONS OF THE TEST

A negative result does not preclude the possibility of infection with HBV.Other clinically available tests are required if questionable results are obtained.As with all diagnostic tests, a definitive clinical diagnosis should not be basedon the results of a single test, but should only be made by the physician after

all clinical and laboratory findings have been evaluated.

7/31/2019 Hepatitis b Surface Antigen

4/5

HEPATITIS B antigen permukaanTEST STRIP

PENDAHULUANAntigen kompleks yang ditemukan pada permukaan HBV disebut HBs Ag. Kehadiran HBs Ag

dalam serum atau plasma adalah indikasi infeksi hepatitis B aktif, baik akut atau kronis. Dalaminfeksi hepatitis B khas, HBs Ag akan terdeteksi 2-4 minggu sebelum tingkat ALT menjadinormal dan 3 sampai 5 minggu sebelum gejala atau ikterus berkembang. HBs Ag memilikiempat subtipe utama: adw, ayw, adr dan Ayr. Karena heterogeneneity antigenik determinan, ada10 walikota serotipe virus hepatitis B.

PRINSIP YANG METODESalah satu langkah hepatitis B antigen permukaan uji perangkat (serum / plasma) adalah, alirankualitatif immunoassay lateral untuk mendeteksi HBs Ag dalam serum atau plasma. membranyang digunakan adalah pra-dilapisi dengan antibodi anti HBs Ag pada daerah uji baris strip.Selama pengujian, spesimen serum atau plasma bereaksi dengan partikel dilapisi dengan antibodi

anti HBs Ag. Campuran bermigrasi ke atas pada membran kapiler chromatographically olehtindakan untuk bereaksi dengan antibodi anti HBs Ag pada membran dan menghasilkan garisberwarna. Kehadiran garis berwarna di wilayah pengujian menunjukkan hasil positif, sedangkanketiadaan menunjukkan hasil negatif. Untuk melayani sebagai kontrol prosedural, garis berwarnaakan selalu muncul di wilayah garis kontrol menunjukkan bahwa volume spesimen yang tepattelah ditambahkan dan wicking membran telah terjadi.

CONTOH TIPE, PENGUMPULAN DAN PENYIMPANANPengujian dapat dilakukan dengan menggunakan serum atau plasma manusia. Jika spesimentidak segera diperiksa dan mereka harus didinginkan pada 2-8 derajat C. Untuk periodepenyimpanan yang lebih besar dari tiga hari, pembekuan dianjurkan. Spesimen yangmengandung endapan dapat menghasilkan hasil tes tidak konsisten. spesimen tersebut harusdiklarifikasi sebelum pengujian.

PERALATAN DIPERLUKANKoleksi spesimen kontainer, centrifuge, timer.

ReagenBahan yang disediakanDelta HBs Ag uji perangkat

PROSEDURIzinkan spesimen uji strip, serum atau plasma, dan / atau kontrol untuk menyeimbangkan ke suhuruang (15-30 C) sebelum pengujian.1. Bawa kantong ke suhu kamar sebelum membukanya. Lepaskan strip uji dari kantong disegeldan menggunakannya sesegera mungkin. Hasil terbaik akan didapat jika metode analisisdilakukan dalam satu jam.2. Dengan panah menunjuk ke arah spesimen serum atau plasma, strip merendam uji vertikaldalam serum atau plasma untuk setidaknya 10-15 detik.3. Tempatkan strip uji pada permukaan datar non-penyerap, menginterpretasikan hasil tes pada

7/31/2019 Hepatitis b Surface Antigen

5/5

20-30 menit.

INTERPRETASI1. Sebuah band warna akan muncul di bagian atas jendela hasil menunjukkan bahwa tes tersebutbekerja dengan benar. Band ini merupakan band kontrol.

2. Bagian bawah jendela hasil menunjukkan hasilnya. Jika band lain warna muncul di bagianbawah jendela hasil, band ini adalah band tes.

HASIL POSITIFKehadiran dua band warna (band "?" Dan "C" band) dalam jendela pun hasil yang muncul bandpertama menunjukkan hasil yang positif. Catatan: umumnya, semakin tinggi tingkat analit dalamspesimen, semakin kuat warna band akan "?". Ketika tingkat analit spesimen dekat tapi masihdalam batas sensitivitas tes, warna dari "?" Akan sangat samar.

HASIL NEGATIFPara ooooof Kehadiran band hanya satu warna ungu dalam jendela hasil menunjukkan hasil

negatif.INVALID HASILJika setelah melakukan tes band tidak ada terlihat dalam jendela hasil, hasilnya dianggap tidak valid. Arah mungkin belum diikuti dengan benar atau tes mungkin telah deterioated. Disarankanbahwa spesimen akan kembali diuji.

PEMBATASAN ATAS UJIHasil negatif tidak menghalangi kemungkinan infeksi VHB. tes klinis lain yang tersediadiperlukan jika hasil yang diperoleh dipertanyakan. Seperti dengan semua tes diagnostik,diagnosis klinis yang pasti tidak harus didasarkan pada hasil tes tunggal, tetapi hanya bolehdilakukan oleh dokter setelah semua temuan klinis dan laboratorium telah dievaluasi.