hazai természetesvízi és tógazdasági halakból származó ...hakinapok.haki.hu/tartalom/2014/2....
TRANSCRIPT
Hazai természetesvízi és tógazdasági halakból származó
Aeromonas veronii törzsek összehasonlító
vizsgálata
2014. június 5.
Sellyei Boglárka, Varga Zsuzsanna, Papp Melitta, Paulus Petra,Molnár Kálmán, Székely Csaba
MTA Agrártudományi Kutatóközpont, Állatorvos-tudományi IntézetNÉBIH Élelmiszer Mikrobiológiai Laboratórium
Budapest
Halak bakteriális megbetegedése
2014. június 5.
A leggyakoribb kórképek- fekélyes bőrgyulladás- Columnaris -betegség (uszony-, farok rothadás)- gümőkór
Forrás: www.malawifish.com
Bőrgyulladás típusai
2014. június 5.
Érintett fajok: elsődlegesen pontyfélékponty, bodorka, ezüstkárász, compó
vörösszárnyú-, dévérkeszeg
Tünetek:-
pikkelyhiány
-
kipirult, gyulladásos hám-
pikkelytasak gyulladás
-
izomba terjedő, kipirult szegélyű
hámhiány
Bőrgyulladásból izolálható
baktériumok
2014. június 5.
fertőző
ágens:Aeromonas (hydrophila, veronii)Pseudomonas (fluorescens)Flexibacter columnare
Aeromonas nemzetség
előfordulás: édes-, brakk-, csap-, szennyvíz, iszap
morfológia: G (-), fakultatív anaerob egyenes pálcaegyesével, párokban v. rövid láncokban
mozgás: változó, ált. egy poláris flagellum
növekedési tartomány: 4 -
42ºC (opt. 22-
37ºC)pszichrofil és mezofil fajok
patogenitás: gerinctelenekbéka, tengeri v. édesvízi halakháziállatok, ember
Aeromonas nemzetség
2014. június 5.
A salmonicida complex
A caviae complex
A hydrophila complex
A veronii complex
Vizsgálati anyag
2014. június 5.
TolnaSomogy
Heves
Békés
Jász- Nagykun- Szolnok
Pest
A vizsgálati időszak: 2013.10 –
2014.04
Balaton, Tisza-tó
-
ponty, dévérkeszeg, bodorka, csuka tógazdaságok
-
ponty, lénai tok, szivárványos pisztráng
Mintavétel:bőrfelszíni elváltozások, fekélyek, kopoltyú, máj, lép, vese, bél
Módszerek
2014. június 5.
-
izolálás: szelektív és TSA agaron
-
morfológiai vizsgálatoktelepmorfológia, natív-, festett kenet, oxidáz reakció
-
molekuláris vizsgálatokgenus-specifikus PCR (Kong et al., 1999)
cnp gén szekvenálás (fajazonosítás) (Miñana-Galbis et al., 2009)
virulencia gének vizsgálata (Nam és Joh, 2007)
-
patogenitási teszt
(Le Coadic et al., 2011)
2014. június 5.
24 Aeromonas törzs (83% A veronii, 10% A hydrophila, A sobria, A salmonicida)egyéb potenciális kórokozók: Acinetobacter sp., Cryseobacterium sp., Streptococcus sp.,
Staphylococcus sp.,Pseudomonas sp., Flavobacterium sp.,Shewanella sp., Yersinia sp., Citrobacter
Az
A veronii törzsek gyakorisága:-
nemzetközi irodalom
Zhou et al., 2013Distribution and virulence gene comparison of Aeromonas strains
isolated from diseased fish and water environment
-
hazai megfigyelésGlatz et al., 2013Halakból és humán mintákból izolált Aeromonas sp. törzsek azonosítása klasszikus és modern módszerekkel
Az
A veronii törzsek patogenitása:
Cai et al., 2012Characterization of pathogenic Aeromonas veronii bv. veronii associated with ulcerative syndrome from Chinese longsnout catfish (Leiocassis longirostris Günther)
Kozinska et al., 2002Phenotypic characteristics and pathogenicity of Aeromonas genomospecies isolated from common carp (Cyprinus carpio L.)
Izolált törzsek
Virulencia faktorok
2014. június 5.
M
–
100bp molekula marker L
–
lipázS
–
szerin proteázG
–
glicerofoszfolipid-koleszterol transzferázA
–
aerolizin (hemolizin)N
–
nukleázLf
–
laterális fimbria
M L S G A N Lf Törzs Eredet Lip Ser GCAT Aero Nuc LafBA hydrophila harcsa + + - + + - A salmonicida pisztráng + + + + - - A sobria csuka - + - + - - A caviae hu + - - - - - A media hu + - - - - - A7 ponty + + - + - - A8 ponty - + - + - - A9 ponty - + - + - - A10 ponty - + - + - - A11 ponty - + - + - - A12 ponty - + - + - - A13 ponty - + - + - - A14 ponty - + - + - - A15 ponty - + - + - - A16 ponty - + - + - - A18 ponty - + - + - - A19 ponty + + - + - - A20 ponty - - - + - - A21 ponty - - - + - - A22 dévérkeszeg - + - + - - A23 dévérkeszeg - - - + - - A24 bodorka - + - + - - A26 bodorka - + - + - - A28 pisztráng + + + - + -
Patogenitási teszt
2014. június 5.
0123456789
10
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
órák
elhu
llott
egye
dek
szám
aA28A7A26A19A20
A28 A7 A26 A19 A200 h 0 0 0 0 01 h 7 5 2 0 22 h 7 5 3 0 23 h 7 5 3 1 24 h 7 5 4 2 25 h 7 5 5 4 26 h 7 5 5 6 27 h 7 5 6 6 38 h 7 5 7 7 39 h 7 5 8 8 510 h 9 5 9 9 711 h 9 6 9 9 812 h 9 6 9 9 8
A28 –
Lip, Ser, GCAT, NucA7 –
Lip, Ser, Aero
A26 –
Ser, AeroA19 –
Lip, Ser, Aero
A20 -
Aero
Összefoglalás
2014. június 5.
- a hazai fekélyes bőrgyulladást mutató
halakból izolált Aeromonas törzsek
többsége A. veronii(ezen faj térhódítását kiterjedt hőmérsékleti tűréstartománya és széles gazdaspektruma teszi jelentőssé)
24C
42C
-A veronii törzsekben kimutatható
virulencia faktorok megoszlása eltérő
ennek megfelelően, az egyes törzsek patogenitása különböző
• Rahman M., Colque-Navarro P., Kühn I., Huys G., Swings J., Möllby R. Identification and characterization of pathogenic Aeromonas veronii bv. sobria associated with epizootic ulcerative syndrome in fish in Bangladesh. Appl. Environ. Microbiol. 2002;68:650–655. doi: 10.1128/AEM.68.2.650- 655.2002. [PMC free article] [PubMed] [Cross Ref]
• 7. Cai S.-H., Wu Z.-H., Jian J.-C., Lu Y.-S., Tang J.F. Characterization of pathogenic Aeromonas veronii bv. veronii associated with ulcerative syndrome from Chinese longsnout catfish (Leiocassis longirostris Günther) Braz. J. Microbiol. 2012;43:382–388. doi: 10.1590/S1517-83822012000100046. [PMC free article] [PubMed] [Cross Ref]