i

SKRIPSI

FARAH KHOLIDAH DZIA

UJI AKTIVITAS ANTIKANKER DAUN KUCAI (Allium

odorum L) TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA

T47D SECARA In Vitro DENGAN METODE MTT

(Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol)

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS ILMU KESEHATAN

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

2013

ii

iii

iv

KATA PENGANTAR

Assalamursquoalaikum warohmatullahi wabarokatuh

Puji syukur tercurahkan kepada Allah SWT Tuhan semesta alam karena

berkat rahmat dan ridhonya penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul

UJI AKTIVITAS ANTIKANKER DAUN KUCAI (Allium odorum

L)TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA T47D SECARA In Vitro

DENGAN METODE MTT (Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol)

Skripsi ini diajukan untuk memenuhi syarat untuk mencapai gelar Sarjana

Farmasi pada Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas

Muhammadiyah Malang Dalam penyusunan skripsi ini penulis tidak terlepas dari

peranan pembimbing dan bantuan dari seluruh pihak Oleh karena itu dengan

segala kerendahan hati penulis ingin mengucapkan banyak terima kasih kepada

1 Allah SWT tuhan semesta alam yang memberikan rahmat nikmat dan

hidayahnya kepada umatnya Rosulullah SAW yang sudah menuntun kita

menuju jalan yang lurus

2 ProfDrSukardimanMSApt selaku dosen pembimbing I dan Annisa

Farida Muti SFarm MScApt selaku dosen pembimbing II atas saran

bimbingan dan arahannya yang dengan sabar telah meluangkan waktu

untuk membimbing dan mengarahkan penulis

3 Siti Rofida MFarmApt selaku Dosen Penguji I dan Ahmad Sobrun

JamilSSiMP selaku Dosen Penguji II atas saran dan kritikan yang

diberikan sehingga penyusunan skripsi ini menjadi lebih baik

4 Tri Lestari HMKepSpMat selaku Dekan Fakultas ilmu kesehatan

Universitas Muhammadiyah Malang yang telah memberikan kesempatan

penulis belajar di Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah

Malang

5 Dra Uswatun Chasanah MKes Apt selaku Ketua Program Studi

Farmasi Universitas Muhammadiyah Malang yang telah member motivasi

dan kesempatan penulis belajar di Program Studi Farmasi Universitas

Muhammadiyah Malang

v

6 Fakultas Farmasi Universitas Airlangga khususnya ibu lusi dan teman-

teman FFUA (Dini Aula dkk) yang telah membantu dalam pembelajaran

sehingga penulis dapat mengenal dan mempelajari tentang kultur jaringan

7 Laboratorium Parasitologi Fakultas Kedokteran Universitas Gajah Mada

khususnya ProfDrSupargiyonoDTMampHSUPhDSpParK dan Ibu

Rumbi yang telah bersedia meluangkan waktu dan memberikan tempat

agar penulis dapat melaksanakan penelitiannya dengan baik

8 Ika Ratna Hidayati SFarm Apt selaku Dosen wali Terima kasih

banyak atas arahan ibu selama ini

9 Untuk semua Dosen Farmasi Universitas Muhamadiyah Malang yang

sudah memberikan waktunya untuk mengajarkan ilmu-ilmu yang sangat

bermanfaat Terutama Ibu Arina Swastika Maulita SFarm Apt yang

telah susah payah membantu jalanya ujian skripsi sehingga kami dapat

melaksanakan ujian skripsi dengan baik

10 Staff Tata Usaha Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu kesehatan

Universitas Muhammadiyah Malang terima kasih karena telah banyak

membantu dalam hal administrasi

11 Kedua orang tuaku tercinta Bapak Drs H Takat Saifudin dan Ibu

HjUswatun Khasanah yang tiada hentinya memotivasi dalam segala hal

terima kasih atas didikan dan kerja kerasnya untuk membahagiakan

putrinya serta dengan sabar mendoakan untuk kebaikan dan kesuksesan

putrinya Buat nenek dan kakekku (H Saichon HjSaningsih dan

HjSafiinah) serta adek-adekku (dek Fuad dan dek Arif) motivasinya dan

doa-doanya

12 Sahabat-sahabatku Widi Astutik Sutriani Nabilah Nadhif Dini Setiya

Praja Dwi Ajeng Eli Ananda Royyan Athoillah dengan keceriaan dan

semangat kalian selama ini sebagai sahabat yang membantu dan

mendukung saat senang maupun susah

13 Teman-teman seperjuangan Emma Atika dan Wilda dengan banyak

keceriaan kebersamaan bantuan motivasi semangat serta kerja samanya

sehingga skripsi ini dapat terwujud

vi

14 Teman-teman Farmasi 2009 terimakasih atas kebersamaannnya selama 4

tahun terakhir ini kalian memberikan warna baru dalam kehidupanku

15 Teman-teman kos mutiara sigura-gura kav9 (neney santi sabitul tika

icha rahma rara vivi farah2) terimaksih buat semangat yang diberikan

sehingga skripsi ini dapat terselesaikan dengan baik

16 Untuk semua pihak yang belum disebutkan namanya penulis mohon maaf

dan terima kasih yang sebesar-besarnya Semua keberhasilan ini tak luput

dari bantuan doa yang telah kalian semua berikan

Jasa dari semua pihak yang telah membantu dalam penelitian ini penulis

tidak mampu membalas dengan apapun Semoga amal baik semua pihak

mendapat imbalan dari Allah SWT Penulis menyadari bahwa skripsi ini jauh dari

kesempurnaan oleh karena itu penulis mengharapkan saran dan kritik yang

membangun dari pembaca demi kebaikan skripsi ini Semoga penulisan ini dapat

berguna bagi penelitian berikutnya amiin

Wassalamursquoalaikum warohmatullohi wabarokatuh

Malang 31 juli 2013

Penyusun

(Farah Kholidah Dzia)

vii

RINGKASAN

UJI AKTIVITAS ANTIKANKER DAUN KUCAI (Allium odorum

L)TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA T47D SECARA In Vitro

DENGAN METODE MTT

(Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol)

Kanker merupakan suatu penyakit pertumbuhan sel yang tumbuhnya tidak

normal cepat dan tidak terkendali Sel-sel kanker akan terus membelah diri

terlepas dari pengendalian pertumbuhan dan tidak lagi menuruti hukum-hukum

pembiakan Bila pertumbuhan ini tidak cepat dihentikan dan diobati maka sel

kanker akan berkembang terus Sel kanker akan tumbuh menyusup ke jaringan

sekitarnya (invasif) lalu membuat anak sebar (metastasis) ke tempat yang lebih

jauh melalui pembuluh darah dan pembuluh darah getah bening Selanjutnya akan

tumbuh kanker baru di tempat lain sampai akhirnya menyebabkan kematian

penderitanya (Dalimartha 2003) Saat ini mulai dikembangkan obat antikanker

yang berasal dari tumbuh-tumbuhan yang memiliki efek terapi lebih baik

dibandingkan dengan pengobatan dengan menggunakan bahan kimia atau operasi

Salah satu tumbuhan yang memiliki khasiat untuk antikanker yaitu daun kucai

(Allium odorum L) Ekstrak daun kucai ( Allium odorum L ) mengandung

senyawa aktif berkhasiat obat seperti alkaloid flavonoid saponin dan

steroidtriterpenoid (Wulandari 2011) Berdasarkan penelitian pendahuluan yang

dilakukan oleh Wulandari 2011 diketahui ekstrak n-heksan dan ekstrak metanol

yang telah diuji didapatkan ekstrak n-heksan mempunyai harga LC50 lt 1000

microgml yaitu 80562 plusmn 853534 microgml Hal itu menunjukkan bahwa ekstrak n-

heksan daun kucai (Allium odorum L) mempunyai aktifitas antikanker menurut

BST (Wulandari 2011)

Selanjutnya akan di uji kembali untuk mengetahui ekstrak yang

menunjukkan aktivitas antikanker secara in vitro dengan metode MTT Terlebih

dahulu penelitian dimulai dengan pembuatan ekstrak daun kucai dengan metode

maserasi dan dilanjutkan dengan uji secara in vitro dengan metode MTT Hasil

dari uji tersebut kemudian diolah dengan menggunakan analisis probit Potensi

antikanker berdasarkan National cancer institute (NCI) Guideline Aktif (IC50 lt

30 microgml) moderat aktif (30 microgml le IC50 lt 100 microgml) tidak aktif (IC50 gt 100

microgml) (Haryadi 2012)

Microculture Tetrazolium Salt (MTT) Assay merupakan uji yang sensitif

kuantitatif dan terpercaya Reaksi MTT merupakan reaksi reduksi selular yang

didasarkan pada pemecahan garam tetrazolium berwarna kuning menjadi Kristal

formazan berwarna biru keunguan (CCRC 2009) Metode ini menggunakan sel

kanker payudara T47D sebagai sel coba Uji MTT digunakan untuk menentukan

parameter nilai IC50 yaitu bilangan yang menunjukkan konsentrasi ekstrak yang

mampu menghambat aktivitas sebesar 50 Semakin kecil nilai IC50

menunjukkan semakin tinggi aktivitas antikanker

Hasil dari ekstrak yang di uji yaitu ekstrak n-heksana dan ekstrak metanol

ekstrak n-heksana memiliki nilai IC50 sebesar 200484 microgml dan ekstrak metanol

sebesar 273445 microgml Hasil dari uji kromatografi lapis tipis (KLT) dilakukan

viii

hasil KLT menunjukkan adanya senyawa flavonoid dan triterpenoid padaekstrak

n-heksana daun kucai (Allium odorum L)

Kandungan kimia antikanker dari penelitian ini perlu dilakukan penelitian

lanjutan melakukan penelitian lebih lanjut dengan menggunakan jenis sel kanker

lainnya seperti sel kanker MCF 7 dan kanker prostat Selain itu juga perlu

dilakukan optimasi dengan menggunakan pelarut lain untuk mendapatkan IC50

yang lebih aktif terhadap sel kanker payudara T47D

ix

ABSTRAK

UJI AKTIVITAS ANTIKANKER DAUN KUCAI (Allium odorum

L)TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA T47D SECARA In Vitro

DENGAN METODE MTT

(Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol)

Kucai (Allium odorum L) adalah tanaman yang berfungsi sebagai antioksidan

antikanker antibakteri serta antimikroba dan antiseptik karena mampu

menghambat bakteri patogen (penyebab penyakit) Penelitian ini bertujuan untuk

mengetahui aktivitas antikanker serta mengetahui golongan senyawa kimia dari

ekstrak yang positif pada daun kucai (Allium odorum L) terhadap sel kanker

payudara T47D secara in vitro dengan metode Microculture Tetrazolium Salt

(MTT) Assay Potensi adanya aktivitas antikanker dapat diketahui setelah

pembacaan data menggunakan elisa reader kemudian ditentukan besarnya IC50

dengan menggunakan analisis probit Suatu ekstrak dikatakan aktif sebagai

antikanker berdasarkan metode Microculture Tetrazolium Salt (MTT) Assay jika

harga IC50 lt 30 microgml Dari ekstrak yang diuji yaitu ekstrak n-heksana dan ekstrak

metanol ekstrak n-heksana memiliki harga IC50 sebesar 200484 microgml dan

ekstrak metanol sebesar 273445 microgml Nilai IC50 semua ekstrak daun kucai

terhadap sel kanker payudara T47D gt 100 microgml Berdasarkan National cancer

institute (NCI) nilai ini menunjukkan aktivitas antikanker ekstrak daun kucai

yang sangat lemah terhadap sel T47D Isolasi dan pengujian menggunakan pelarut

lain serta menggunakan sel lain masih diperlukan untuk pengembangan di masa

depan

Kata Kunci Daun Kucai (Allium odorum L) Sel T47D Microculture

Tetrazolium Salt (MTT) Assay n-Heksana Metanol

x

ABSTRACT

IN-VITRO ANTI-CANCER ACTIVITIES TEST OF Allium odorum L LEAF

EXTRACT ON T47D BREAST CANCER THROUGH MTT METHOD

( n-Heksane and Methanol Extracts)

Allium odorum L is a plant that have functions as an antioxidant anticancer

antibacterial antimicrobial and antiseptic with inhibition bacterial pathogens

capabilities This study aims to determine the anticancer activities and knowing

class of chemical compounds in the leaf positive extract Allium odorum L on

T47D breast cancer cells through in vitro microculture method Tetrazolium Salt

(MTT) assay Potential of anticancer activities known after lection of data by

ELISA tested then determined the magnitude of IC50 by probit analysis An

extract said to be active as anticancer based microculture method Tetrazolium Salt

(MTT) assay if the value of IC50 lt 30 ug ml The result of this study showed

that IC50 of n-heksane extract and methanol extract are 200484 mg ml and

273445 ug ml IC50 values of all Allium odorum L extract against breast cancer

cells on T47D gt 100 ug ml Based on the National Cancer Institute (NCI) the

value of anti-cancer activities of Allium odorum L leaf extract exhibits very weak

capabilities to against T47D cells Isolation and testing using other solvents and

cells are still needed for future development

Key words Allium odorum L Leaf T47D cells Microculture Tetrazolium Salt

(MTT) Assay n-Heksana Methanol

xi

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL i

LEMBAR PENGESAHAN ii

LEMBAR PENGUJIAN iii

KATA PENGANTAR iv

RINGKASAN vii

ABSTRAK ix

DAFTAR ISI xi

DAFTAR TABEL xiv

DAFTAR GAMBAR xv

DAFTAR LAMPIRAN xvi

DAFTAR SINGKATAN xvii

BAB 1 PENDAHULUAN 1

11 Latar belakang 1

12 Rumusan Masalah Penelitian 3

13 Tujuan Penelitian 4

14 Hipotesis Penelitian 4

15 Manfaat Penelitian 4

BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA 5

21 Tinjauan tentang Kucai 5

211 Klasifikasi 5

212 Sinonim 5

213 Nama Daerah 5

214 Morfologi 5

215 Penyebaran 6

216 Kandungan 6

217 Golongan Senyawa dalam Daun Kucai 7

218 Khasiat 8

22 Tinjauan tentang Kanker 9

221 Definisi 9

xii

222 Epidemiologi 9

223 Sifat Sel Kanker 10

224 Karsinogenesis 10

225 Siklus Pertumbuhan Sel 13

23 Tinjauan tentang Kanker Payudara 14

231 Definisi 14

232 Epidemiologi 15

233 Faktor Resiko 16

234 Gejala 17

235 Perkembangan Sel 17

24 Tinjauan Sel T47D 18

25 Tinjauan tentang Kultur Sel 19

26 Tinjauan Uji Microculture Tetrazolium Salt (MTT) Assay 21

261 Cara Menghitung Persentase Sel Hidup 22

27 Tinjauan tentang Ekstraksi 23

28 Tinjauan tentang Aktivitas Daun Kucai terhadap Sel Kanker Payudara

24

BAB 3 KERANGKA KONSEPTUAL 25

BAB 4 METODE PENELITIAN 28

41 Bahan Penelitian 28

411 Bahan Tanaman 28

412 Bahan Kimia 28

42 Alat-alat Penelitian 29

43 Variabel Penelitian 29

431 Variabel Bebas 29

432 Variabel Tergantung 30

44 Metode Penelitian 30

441 Rancangan Penelitian 30

442 Kerangka Operasional 31

443 Prosedur Kerja 32

4431 Pembuatan Ekstrak Bahan Uji 32

4432 Pembuatan Media 34

xiii

4433 Penumbuhan Sel 35

4434 Penggantian Media 35

4435 Panen Sel 36

4436 Perhitungan Sel 36

4437 Preparasi Sampel 38

4438 Pembuatan Larutan Induk dan Larutan Uji 38

4439 Uji Aktivitas Antikanker dengan Metode MTT 39

44310 Analisis Data 41

44311 Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) 41

BAB 5 HASIL PENELITIAN 43

51 Pembuatan Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 43

52 Perhitungan Sel T47D dan Volume Panenan Sel yang ditransfer 43

53 Uji Aktivitas Antikanker dari Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak

Metanol Daun Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker

Payudara T47D dengan Metode MTT 44

54 Penentuan Nilai IC50 Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun

Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker Payudara T47D

dengan Probit Analisis 47

55 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) 47

571 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Senyawa Flavonoid

47

571 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Senyawa Steroid 48

BAB 6 PEMBAHASAN 49

BAB 7 KESIMPULAN DAN SARAN 54

DAFTAR PUSTAKA 55

xiv

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

II1 Formula Baku Media Kultur 20

IV1 Kelompok Perlakuan Kultur Sel Kanker Payudara T47D Dalam Tiap

Percobaan 30

V1 Hasil Pembuatan Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 43

V2 Hasil Uji Kontrol Sel dan Kontrol Media 44

V3 Hasil Uji Aktivitas Antikanker dari Kontrol Positif Doksorubisin Sel Kanker

Payudara (T47D) dengan Metode MTT 45

V4 Hasil Uji Aktivitas Antikanker dari Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol

Daun Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker Payudara T47D

dengan Metode MTT 45

V5 Hasil penentuan nilai IC50 doksorubisin IC50 ekstrak n-heksana dan IC50

ekstrak metanol daun kucai (Allium odorum L) terhadap sel kanker payudara

T47D dengan analisis probit 47

xv

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

21 Kucai (Allium odorum L) 6

22 Struktur Flavonoid 7

23 Struktur Saponin Steroid dan Saponin Triterpenoid 8

24 Karsinogenesis 11

25 Pertumbuhan Sel 13

26 Perkembangan Kanker Payudara 18

27 Reaksi MTT 21

31 Skema Kerangkan Konseptual 27

41 Skema Kerangkan Operasional 31

42 Skema Pembuatan Ekstrak n-heksana dan metanol daun kucai 33

43 Perhitungan Sel 37

51 Ekstrak Kental Daun Kucai 43

52 Kondisi sel sebelum dan sesudah MTT di lihat di bawah mikroskop dengan

perbesaran 40x 44

53 Hubungan antara konsentrasi kontrol positif dan bahan uji terhadap prosentase

sel hidup kanker payudara T47D 46

54 Hasil KLT flavonoid daun kucai (Allium odorum L) 47

55 Hasil KLT terpenoid daun kucai (Allium odorum L) 48

xvi

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1 Daftar Riwayat Hidup 59

2 Surat Pernyataan 60

3 Surat Determinasi 61

4 Sertifikat Kultur Jaringan 62

5 Data Hasil Pembacaan Elisa reader 63

6 Pembuatan Larutan Uji Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 64

7 Pembuatan Konsentrasi Doksorubisin 65

8 Analisis Probit Kontrol Positif Doksorubisin 66

9 Analisis Probit Ekstrak n-Heksana 68

10 Analisis Probit EkstrakMetanol 70

11 Lampiran Foto 72

12 Kondisi Sel Doksorubisin Dilihat Dibawah Mikroskop dengan Perbesaran 40x

Lensa Objektif 75

13 Kondisi Sel Ekstrak n-Heksana Dilihat Dibawah Mikroskop dengan

Perbesaran 40x Lensa Objektif 76

14 Kondisi Sel Ekstrak Metanol Dilihat Dibawah Mikroskop dengan Perbesaran

40x Lensa Objektif 77

xvii

DAFTAR SINGKATAN

MTT Microculture Tetrazolium Salt

IC50 Inhibitori Concentration 50

NCI National Cancer Institute

WHO Word Health Organization

SKRT Survei Kesehatan Rumah Tangga

FBS Fetal Bovine Serum

DMSO Dimethyl sulfoxide

RPMI Rosewell Park Memorial Institute

SDS Sodium Duodecyl Suphate

PBS Phosphat Buffer Serum

LAF Laminar Air Flow

SPSS Program for Social Science

KLT Kromatografi Lapis Tipis

xviii

DAFTAR PUSTAKA

Agoes Azwar 2010 Tanaman Obat Indonesia (Buku 1) Salemba Medika

Jakarta

Amalina Nur Lia 2008 Uji Sitotoksik Ekstrak Etanol 70Buah Merica

Hitam (Piper nigrum L) Terhadap Sel Hela Skripsi Fakultas Farmasi

Universitas Muhammadiyah Surakarta

Anggraini Polis Novita 2008 Aktivitas Campuran Ekstrak Etanol Herba

Sambiloto dan Rimpang Kunyit Terhadap Sel Kanker Payudara

Manusia T47D In Vitro Dengan Metode MTT Skripsi Fakultas Farmasi

Universitas Airlangga

Astawan Made 2010 Kucai cegah kanker turunkan kolesterol

httpcybermedcbnnetidcbprtlcybermeddetailaspxx=Nutritionampy=cyb

ermed|0|0|6|565 (8 juli 2010)

Balmer CM Valley AW and Iannucci A 2005 Cancer treatment and

Chemotherapy In Dipiro JT Talbert RL Matzke GR Wells BG

and Posey LM (Eds) Pharmacotherapy A Pathofisiologic Approach

6th

Edition New York The McGraw-Hill Co Inc

Baradero wilfride yakobus 2007 Klien Kanker penerbit buku kedokteran

EGC Jakarta Hal 7 amp 38

Baskhara Ali Widi 2008 Sehat Murah Dengan Buah dan Sayuran Kreasi

Wacana Yogyakarta

Cahyono Bambang 2005 Bawang Daun Kanisius Yogyakarta Hal 12

Continuing Care Retirement Community (CCRC) 2009 Prosedur Uji MTT in

vitro Yogyakarta Universitas Gajah Mada

Chooiong hean 2007 Sayuran Khasiat Makanan dan Ubatan Kuala lumpur

Dalimartha Setiawan 2003 Ramuan Tradisional Untuk Pengobatan Kanker

Penebar Swadaya Jakarta Hal 1-6

De Jong Wim2004 Kanker apakah itu pengobatan Harapan Hidup dan

Dukungan Keluarga Arcan Jakarta hal 45 317

Departemen Kesehatan RI 1979 Farmakope Indonesia Edisi ke-3 Jakarta

Departemen Kesehatan hal 23-33

Departemen Kesehatan RI 1995 Farmakope Indonesia Edisi ke-4 Jakarta

Departemen Kesehatan hal 7

ii

iii

iv

KATA PENGANTAR

Assalamursquoalaikum warohmatullahi wabarokatuh

Puji syukur tercurahkan kepada Allah SWT Tuhan semesta alam karena

berkat rahmat dan ridhonya penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul

UJI AKTIVITAS ANTIKANKER DAUN KUCAI (Allium odorum

L)TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA T47D SECARA In Vitro

DENGAN METODE MTT (Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol)

Skripsi ini diajukan untuk memenuhi syarat untuk mencapai gelar Sarjana

Farmasi pada Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas

Muhammadiyah Malang Dalam penyusunan skripsi ini penulis tidak terlepas dari

peranan pembimbing dan bantuan dari seluruh pihak Oleh karena itu dengan

segala kerendahan hati penulis ingin mengucapkan banyak terima kasih kepada

1 Allah SWT tuhan semesta alam yang memberikan rahmat nikmat dan

hidayahnya kepada umatnya Rosulullah SAW yang sudah menuntun kita

menuju jalan yang lurus

2 ProfDrSukardimanMSApt selaku dosen pembimbing I dan Annisa

Farida Muti SFarm MScApt selaku dosen pembimbing II atas saran

bimbingan dan arahannya yang dengan sabar telah meluangkan waktu

untuk membimbing dan mengarahkan penulis

3 Siti Rofida MFarmApt selaku Dosen Penguji I dan Ahmad Sobrun

JamilSSiMP selaku Dosen Penguji II atas saran dan kritikan yang

diberikan sehingga penyusunan skripsi ini menjadi lebih baik

4 Tri Lestari HMKepSpMat selaku Dekan Fakultas ilmu kesehatan

Universitas Muhammadiyah Malang yang telah memberikan kesempatan

penulis belajar di Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah

Malang

5 Dra Uswatun Chasanah MKes Apt selaku Ketua Program Studi

Farmasi Universitas Muhammadiyah Malang yang telah member motivasi

dan kesempatan penulis belajar di Program Studi Farmasi Universitas

Muhammadiyah Malang

v

6 Fakultas Farmasi Universitas Airlangga khususnya ibu lusi dan teman-

teman FFUA (Dini Aula dkk) yang telah membantu dalam pembelajaran

sehingga penulis dapat mengenal dan mempelajari tentang kultur jaringan

7 Laboratorium Parasitologi Fakultas Kedokteran Universitas Gajah Mada

khususnya ProfDrSupargiyonoDTMampHSUPhDSpParK dan Ibu

Rumbi yang telah bersedia meluangkan waktu dan memberikan tempat

agar penulis dapat melaksanakan penelitiannya dengan baik

8 Ika Ratna Hidayati SFarm Apt selaku Dosen wali Terima kasih

banyak atas arahan ibu selama ini

9 Untuk semua Dosen Farmasi Universitas Muhamadiyah Malang yang

sudah memberikan waktunya untuk mengajarkan ilmu-ilmu yang sangat

bermanfaat Terutama Ibu Arina Swastika Maulita SFarm Apt yang

telah susah payah membantu jalanya ujian skripsi sehingga kami dapat

melaksanakan ujian skripsi dengan baik

10 Staff Tata Usaha Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu kesehatan

Universitas Muhammadiyah Malang terima kasih karena telah banyak

membantu dalam hal administrasi

11 Kedua orang tuaku tercinta Bapak Drs H Takat Saifudin dan Ibu

HjUswatun Khasanah yang tiada hentinya memotivasi dalam segala hal

terima kasih atas didikan dan kerja kerasnya untuk membahagiakan

putrinya serta dengan sabar mendoakan untuk kebaikan dan kesuksesan

putrinya Buat nenek dan kakekku (H Saichon HjSaningsih dan

HjSafiinah) serta adek-adekku (dek Fuad dan dek Arif) motivasinya dan

doa-doanya

12 Sahabat-sahabatku Widi Astutik Sutriani Nabilah Nadhif Dini Setiya

Praja Dwi Ajeng Eli Ananda Royyan Athoillah dengan keceriaan dan

semangat kalian selama ini sebagai sahabat yang membantu dan

mendukung saat senang maupun susah

13 Teman-teman seperjuangan Emma Atika dan Wilda dengan banyak

keceriaan kebersamaan bantuan motivasi semangat serta kerja samanya

sehingga skripsi ini dapat terwujud

vi

14 Teman-teman Farmasi 2009 terimakasih atas kebersamaannnya selama 4

tahun terakhir ini kalian memberikan warna baru dalam kehidupanku

15 Teman-teman kos mutiara sigura-gura kav9 (neney santi sabitul tika

icha rahma rara vivi farah2) terimaksih buat semangat yang diberikan

sehingga skripsi ini dapat terselesaikan dengan baik

16 Untuk semua pihak yang belum disebutkan namanya penulis mohon maaf

dan terima kasih yang sebesar-besarnya Semua keberhasilan ini tak luput

dari bantuan doa yang telah kalian semua berikan

Jasa dari semua pihak yang telah membantu dalam penelitian ini penulis

tidak mampu membalas dengan apapun Semoga amal baik semua pihak

mendapat imbalan dari Allah SWT Penulis menyadari bahwa skripsi ini jauh dari

kesempurnaan oleh karena itu penulis mengharapkan saran dan kritik yang

membangun dari pembaca demi kebaikan skripsi ini Semoga penulisan ini dapat

berguna bagi penelitian berikutnya amiin

Wassalamursquoalaikum warohmatullohi wabarokatuh

Malang 31 juli 2013

Penyusun

(Farah Kholidah Dzia)

vii

RINGKASAN

UJI AKTIVITAS ANTIKANKER DAUN KUCAI (Allium odorum

L)TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA T47D SECARA In Vitro

DENGAN METODE MTT

(Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol)

Kanker merupakan suatu penyakit pertumbuhan sel yang tumbuhnya tidak

normal cepat dan tidak terkendali Sel-sel kanker akan terus membelah diri

terlepas dari pengendalian pertumbuhan dan tidak lagi menuruti hukum-hukum

pembiakan Bila pertumbuhan ini tidak cepat dihentikan dan diobati maka sel

kanker akan berkembang terus Sel kanker akan tumbuh menyusup ke jaringan

sekitarnya (invasif) lalu membuat anak sebar (metastasis) ke tempat yang lebih

jauh melalui pembuluh darah dan pembuluh darah getah bening Selanjutnya akan

tumbuh kanker baru di tempat lain sampai akhirnya menyebabkan kematian

penderitanya (Dalimartha 2003) Saat ini mulai dikembangkan obat antikanker

yang berasal dari tumbuh-tumbuhan yang memiliki efek terapi lebih baik

dibandingkan dengan pengobatan dengan menggunakan bahan kimia atau operasi

Salah satu tumbuhan yang memiliki khasiat untuk antikanker yaitu daun kucai

(Allium odorum L) Ekstrak daun kucai ( Allium odorum L ) mengandung

senyawa aktif berkhasiat obat seperti alkaloid flavonoid saponin dan

steroidtriterpenoid (Wulandari 2011) Berdasarkan penelitian pendahuluan yang

dilakukan oleh Wulandari 2011 diketahui ekstrak n-heksan dan ekstrak metanol

yang telah diuji didapatkan ekstrak n-heksan mempunyai harga LC50 lt 1000

microgml yaitu 80562 plusmn 853534 microgml Hal itu menunjukkan bahwa ekstrak n-

heksan daun kucai (Allium odorum L) mempunyai aktifitas antikanker menurut

BST (Wulandari 2011)

Selanjutnya akan di uji kembali untuk mengetahui ekstrak yang

menunjukkan aktivitas antikanker secara in vitro dengan metode MTT Terlebih

dahulu penelitian dimulai dengan pembuatan ekstrak daun kucai dengan metode

maserasi dan dilanjutkan dengan uji secara in vitro dengan metode MTT Hasil

dari uji tersebut kemudian diolah dengan menggunakan analisis probit Potensi

antikanker berdasarkan National cancer institute (NCI) Guideline Aktif (IC50 lt

30 microgml) moderat aktif (30 microgml le IC50 lt 100 microgml) tidak aktif (IC50 gt 100

microgml) (Haryadi 2012)

Microculture Tetrazolium Salt (MTT) Assay merupakan uji yang sensitif

kuantitatif dan terpercaya Reaksi MTT merupakan reaksi reduksi selular yang

didasarkan pada pemecahan garam tetrazolium berwarna kuning menjadi Kristal

formazan berwarna biru keunguan (CCRC 2009) Metode ini menggunakan sel

kanker payudara T47D sebagai sel coba Uji MTT digunakan untuk menentukan

parameter nilai IC50 yaitu bilangan yang menunjukkan konsentrasi ekstrak yang

mampu menghambat aktivitas sebesar 50 Semakin kecil nilai IC50

menunjukkan semakin tinggi aktivitas antikanker

Hasil dari ekstrak yang di uji yaitu ekstrak n-heksana dan ekstrak metanol

ekstrak n-heksana memiliki nilai IC50 sebesar 200484 microgml dan ekstrak metanol

sebesar 273445 microgml Hasil dari uji kromatografi lapis tipis (KLT) dilakukan

viii

hasil KLT menunjukkan adanya senyawa flavonoid dan triterpenoid padaekstrak

n-heksana daun kucai (Allium odorum L)

Kandungan kimia antikanker dari penelitian ini perlu dilakukan penelitian

lanjutan melakukan penelitian lebih lanjut dengan menggunakan jenis sel kanker

lainnya seperti sel kanker MCF 7 dan kanker prostat Selain itu juga perlu

dilakukan optimasi dengan menggunakan pelarut lain untuk mendapatkan IC50

yang lebih aktif terhadap sel kanker payudara T47D

ix

ABSTRAK

UJI AKTIVITAS ANTIKANKER DAUN KUCAI (Allium odorum

L)TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA T47D SECARA In Vitro

DENGAN METODE MTT

(Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol)

Kucai (Allium odorum L) adalah tanaman yang berfungsi sebagai antioksidan

antikanker antibakteri serta antimikroba dan antiseptik karena mampu

menghambat bakteri patogen (penyebab penyakit) Penelitian ini bertujuan untuk

mengetahui aktivitas antikanker serta mengetahui golongan senyawa kimia dari

ekstrak yang positif pada daun kucai (Allium odorum L) terhadap sel kanker

payudara T47D secara in vitro dengan metode Microculture Tetrazolium Salt

(MTT) Assay Potensi adanya aktivitas antikanker dapat diketahui setelah

pembacaan data menggunakan elisa reader kemudian ditentukan besarnya IC50

dengan menggunakan analisis probit Suatu ekstrak dikatakan aktif sebagai

antikanker berdasarkan metode Microculture Tetrazolium Salt (MTT) Assay jika

harga IC50 lt 30 microgml Dari ekstrak yang diuji yaitu ekstrak n-heksana dan ekstrak

metanol ekstrak n-heksana memiliki harga IC50 sebesar 200484 microgml dan

ekstrak metanol sebesar 273445 microgml Nilai IC50 semua ekstrak daun kucai

terhadap sel kanker payudara T47D gt 100 microgml Berdasarkan National cancer

institute (NCI) nilai ini menunjukkan aktivitas antikanker ekstrak daun kucai

yang sangat lemah terhadap sel T47D Isolasi dan pengujian menggunakan pelarut

lain serta menggunakan sel lain masih diperlukan untuk pengembangan di masa

depan

Kata Kunci Daun Kucai (Allium odorum L) Sel T47D Microculture

Tetrazolium Salt (MTT) Assay n-Heksana Metanol

x

ABSTRACT

IN-VITRO ANTI-CANCER ACTIVITIES TEST OF Allium odorum L LEAF

EXTRACT ON T47D BREAST CANCER THROUGH MTT METHOD

( n-Heksane and Methanol Extracts)

Allium odorum L is a plant that have functions as an antioxidant anticancer

antibacterial antimicrobial and antiseptic with inhibition bacterial pathogens

capabilities This study aims to determine the anticancer activities and knowing

class of chemical compounds in the leaf positive extract Allium odorum L on

T47D breast cancer cells through in vitro microculture method Tetrazolium Salt

(MTT) assay Potential of anticancer activities known after lection of data by

ELISA tested then determined the magnitude of IC50 by probit analysis An

extract said to be active as anticancer based microculture method Tetrazolium Salt

(MTT) assay if the value of IC50 lt 30 ug ml The result of this study showed

that IC50 of n-heksane extract and methanol extract are 200484 mg ml and

273445 ug ml IC50 values of all Allium odorum L extract against breast cancer

cells on T47D gt 100 ug ml Based on the National Cancer Institute (NCI) the

value of anti-cancer activities of Allium odorum L leaf extract exhibits very weak

capabilities to against T47D cells Isolation and testing using other solvents and

cells are still needed for future development

Key words Allium odorum L Leaf T47D cells Microculture Tetrazolium Salt

(MTT) Assay n-Heksana Methanol

xi

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL i

LEMBAR PENGESAHAN ii

LEMBAR PENGUJIAN iii

KATA PENGANTAR iv

RINGKASAN vii

ABSTRAK ix

DAFTAR ISI xi

DAFTAR TABEL xiv

DAFTAR GAMBAR xv

DAFTAR LAMPIRAN xvi

DAFTAR SINGKATAN xvii

BAB 1 PENDAHULUAN 1

11 Latar belakang 1

12 Rumusan Masalah Penelitian 3

13 Tujuan Penelitian 4

14 Hipotesis Penelitian 4

15 Manfaat Penelitian 4

BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA 5

21 Tinjauan tentang Kucai 5

211 Klasifikasi 5

212 Sinonim 5

213 Nama Daerah 5

214 Morfologi 5

215 Penyebaran 6

216 Kandungan 6

217 Golongan Senyawa dalam Daun Kucai 7

218 Khasiat 8

22 Tinjauan tentang Kanker 9

221 Definisi 9

xii

222 Epidemiologi 9

223 Sifat Sel Kanker 10

224 Karsinogenesis 10

225 Siklus Pertumbuhan Sel 13

23 Tinjauan tentang Kanker Payudara 14

231 Definisi 14

232 Epidemiologi 15

233 Faktor Resiko 16

234 Gejala 17

235 Perkembangan Sel 17

24 Tinjauan Sel T47D 18

25 Tinjauan tentang Kultur Sel 19

26 Tinjauan Uji Microculture Tetrazolium Salt (MTT) Assay 21

261 Cara Menghitung Persentase Sel Hidup 22

27 Tinjauan tentang Ekstraksi 23

28 Tinjauan tentang Aktivitas Daun Kucai terhadap Sel Kanker Payudara

24

BAB 3 KERANGKA KONSEPTUAL 25

BAB 4 METODE PENELITIAN 28

41 Bahan Penelitian 28

411 Bahan Tanaman 28

412 Bahan Kimia 28

42 Alat-alat Penelitian 29

43 Variabel Penelitian 29

431 Variabel Bebas 29

432 Variabel Tergantung 30

44 Metode Penelitian 30

441 Rancangan Penelitian 30

442 Kerangka Operasional 31

443 Prosedur Kerja 32

4431 Pembuatan Ekstrak Bahan Uji 32

4432 Pembuatan Media 34

xiii

4433 Penumbuhan Sel 35

4434 Penggantian Media 35

4435 Panen Sel 36

4436 Perhitungan Sel 36

4437 Preparasi Sampel 38

4438 Pembuatan Larutan Induk dan Larutan Uji 38

4439 Uji Aktivitas Antikanker dengan Metode MTT 39

44310 Analisis Data 41

44311 Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) 41

BAB 5 HASIL PENELITIAN 43

51 Pembuatan Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 43

52 Perhitungan Sel T47D dan Volume Panenan Sel yang ditransfer 43

53 Uji Aktivitas Antikanker dari Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak

Metanol Daun Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker

Payudara T47D dengan Metode MTT 44

54 Penentuan Nilai IC50 Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun

Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker Payudara T47D

dengan Probit Analisis 47

55 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) 47

571 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Senyawa Flavonoid

47

571 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Senyawa Steroid 48

BAB 6 PEMBAHASAN 49

BAB 7 KESIMPULAN DAN SARAN 54

DAFTAR PUSTAKA 55

xiv

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

II1 Formula Baku Media Kultur 20

IV1 Kelompok Perlakuan Kultur Sel Kanker Payudara T47D Dalam Tiap

Percobaan 30

V1 Hasil Pembuatan Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 43

V2 Hasil Uji Kontrol Sel dan Kontrol Media 44

V3 Hasil Uji Aktivitas Antikanker dari Kontrol Positif Doksorubisin Sel Kanker

Payudara (T47D) dengan Metode MTT 45

V4 Hasil Uji Aktivitas Antikanker dari Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol

Daun Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker Payudara T47D

dengan Metode MTT 45

V5 Hasil penentuan nilai IC50 doksorubisin IC50 ekstrak n-heksana dan IC50

ekstrak metanol daun kucai (Allium odorum L) terhadap sel kanker payudara

T47D dengan analisis probit 47

xv

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

21 Kucai (Allium odorum L) 6

22 Struktur Flavonoid 7

23 Struktur Saponin Steroid dan Saponin Triterpenoid 8

24 Karsinogenesis 11

25 Pertumbuhan Sel 13

26 Perkembangan Kanker Payudara 18

27 Reaksi MTT 21

31 Skema Kerangkan Konseptual 27

41 Skema Kerangkan Operasional 31

42 Skema Pembuatan Ekstrak n-heksana dan metanol daun kucai 33

43 Perhitungan Sel 37

51 Ekstrak Kental Daun Kucai 43

52 Kondisi sel sebelum dan sesudah MTT di lihat di bawah mikroskop dengan

perbesaran 40x 44

53 Hubungan antara konsentrasi kontrol positif dan bahan uji terhadap prosentase

sel hidup kanker payudara T47D 46

54 Hasil KLT flavonoid daun kucai (Allium odorum L) 47

55 Hasil KLT terpenoid daun kucai (Allium odorum L) 48

xvi

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1 Daftar Riwayat Hidup 59

2 Surat Pernyataan 60

3 Surat Determinasi 61

4 Sertifikat Kultur Jaringan 62

5 Data Hasil Pembacaan Elisa reader 63

6 Pembuatan Larutan Uji Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 64

7 Pembuatan Konsentrasi Doksorubisin 65

8 Analisis Probit Kontrol Positif Doksorubisin 66

9 Analisis Probit Ekstrak n-Heksana 68

10 Analisis Probit EkstrakMetanol 70

11 Lampiran Foto 72

12 Kondisi Sel Doksorubisin Dilihat Dibawah Mikroskop dengan Perbesaran 40x

Lensa Objektif 75

13 Kondisi Sel Ekstrak n-Heksana Dilihat Dibawah Mikroskop dengan

Perbesaran 40x Lensa Objektif 76

14 Kondisi Sel Ekstrak Metanol Dilihat Dibawah Mikroskop dengan Perbesaran

40x Lensa Objektif 77

xvii

DAFTAR SINGKATAN

MTT Microculture Tetrazolium Salt

IC50 Inhibitori Concentration 50

NCI National Cancer Institute

WHO Word Health Organization

SKRT Survei Kesehatan Rumah Tangga

FBS Fetal Bovine Serum

DMSO Dimethyl sulfoxide

RPMI Rosewell Park Memorial Institute

SDS Sodium Duodecyl Suphate

PBS Phosphat Buffer Serum

LAF Laminar Air Flow

SPSS Program for Social Science

KLT Kromatografi Lapis Tipis

xviii

DAFTAR PUSTAKA

Agoes Azwar 2010 Tanaman Obat Indonesia (Buku 1) Salemba Medika

Jakarta

Amalina Nur Lia 2008 Uji Sitotoksik Ekstrak Etanol 70Buah Merica

Hitam (Piper nigrum L) Terhadap Sel Hela Skripsi Fakultas Farmasi

Universitas Muhammadiyah Surakarta

Anggraini Polis Novita 2008 Aktivitas Campuran Ekstrak Etanol Herba

Sambiloto dan Rimpang Kunyit Terhadap Sel Kanker Payudara

Manusia T47D In Vitro Dengan Metode MTT Skripsi Fakultas Farmasi

Universitas Airlangga

Astawan Made 2010 Kucai cegah kanker turunkan kolesterol

httpcybermedcbnnetidcbprtlcybermeddetailaspxx=Nutritionampy=cyb

ermed|0|0|6|565 (8 juli 2010)

Balmer CM Valley AW and Iannucci A 2005 Cancer treatment and

Chemotherapy In Dipiro JT Talbert RL Matzke GR Wells BG

and Posey LM (Eds) Pharmacotherapy A Pathofisiologic Approach

6th

Edition New York The McGraw-Hill Co Inc

Baradero wilfride yakobus 2007 Klien Kanker penerbit buku kedokteran

EGC Jakarta Hal 7 amp 38

Baskhara Ali Widi 2008 Sehat Murah Dengan Buah dan Sayuran Kreasi

Wacana Yogyakarta

Cahyono Bambang 2005 Bawang Daun Kanisius Yogyakarta Hal 12

Continuing Care Retirement Community (CCRC) 2009 Prosedur Uji MTT in

vitro Yogyakarta Universitas Gajah Mada

Chooiong hean 2007 Sayuran Khasiat Makanan dan Ubatan Kuala lumpur

Dalimartha Setiawan 2003 Ramuan Tradisional Untuk Pengobatan Kanker

Penebar Swadaya Jakarta Hal 1-6

De Jong Wim2004 Kanker apakah itu pengobatan Harapan Hidup dan

Dukungan Keluarga Arcan Jakarta hal 45 317

Departemen Kesehatan RI 1979 Farmakope Indonesia Edisi ke-3 Jakarta

Departemen Kesehatan hal 23-33

Departemen Kesehatan RI 1995 Farmakope Indonesia Edisi ke-4 Jakarta

Departemen Kesehatan hal 7

iii

iv

KATA PENGANTAR

Assalamursquoalaikum warohmatullahi wabarokatuh

Puji syukur tercurahkan kepada Allah SWT Tuhan semesta alam karena

berkat rahmat dan ridhonya penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul

UJI AKTIVITAS ANTIKANKER DAUN KUCAI (Allium odorum

L)TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA T47D SECARA In Vitro

DENGAN METODE MTT (Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol)

Skripsi ini diajukan untuk memenuhi syarat untuk mencapai gelar Sarjana

Farmasi pada Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas

Muhammadiyah Malang Dalam penyusunan skripsi ini penulis tidak terlepas dari

peranan pembimbing dan bantuan dari seluruh pihak Oleh karena itu dengan

segala kerendahan hati penulis ingin mengucapkan banyak terima kasih kepada

1 Allah SWT tuhan semesta alam yang memberikan rahmat nikmat dan

hidayahnya kepada umatnya Rosulullah SAW yang sudah menuntun kita

menuju jalan yang lurus

2 ProfDrSukardimanMSApt selaku dosen pembimbing I dan Annisa

Farida Muti SFarm MScApt selaku dosen pembimbing II atas saran

bimbingan dan arahannya yang dengan sabar telah meluangkan waktu

untuk membimbing dan mengarahkan penulis

3 Siti Rofida MFarmApt selaku Dosen Penguji I dan Ahmad Sobrun

JamilSSiMP selaku Dosen Penguji II atas saran dan kritikan yang

diberikan sehingga penyusunan skripsi ini menjadi lebih baik

4 Tri Lestari HMKepSpMat selaku Dekan Fakultas ilmu kesehatan

Universitas Muhammadiyah Malang yang telah memberikan kesempatan

penulis belajar di Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah

Malang

5 Dra Uswatun Chasanah MKes Apt selaku Ketua Program Studi

Farmasi Universitas Muhammadiyah Malang yang telah member motivasi

dan kesempatan penulis belajar di Program Studi Farmasi Universitas

Muhammadiyah Malang

v

6 Fakultas Farmasi Universitas Airlangga khususnya ibu lusi dan teman-

teman FFUA (Dini Aula dkk) yang telah membantu dalam pembelajaran

sehingga penulis dapat mengenal dan mempelajari tentang kultur jaringan

7 Laboratorium Parasitologi Fakultas Kedokteran Universitas Gajah Mada

khususnya ProfDrSupargiyonoDTMampHSUPhDSpParK dan Ibu

Rumbi yang telah bersedia meluangkan waktu dan memberikan tempat

agar penulis dapat melaksanakan penelitiannya dengan baik

8 Ika Ratna Hidayati SFarm Apt selaku Dosen wali Terima kasih

banyak atas arahan ibu selama ini

9 Untuk semua Dosen Farmasi Universitas Muhamadiyah Malang yang

sudah memberikan waktunya untuk mengajarkan ilmu-ilmu yang sangat

bermanfaat Terutama Ibu Arina Swastika Maulita SFarm Apt yang

telah susah payah membantu jalanya ujian skripsi sehingga kami dapat

melaksanakan ujian skripsi dengan baik

10 Staff Tata Usaha Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu kesehatan

Universitas Muhammadiyah Malang terima kasih karena telah banyak

membantu dalam hal administrasi

11 Kedua orang tuaku tercinta Bapak Drs H Takat Saifudin dan Ibu

HjUswatun Khasanah yang tiada hentinya memotivasi dalam segala hal

terima kasih atas didikan dan kerja kerasnya untuk membahagiakan

putrinya serta dengan sabar mendoakan untuk kebaikan dan kesuksesan

putrinya Buat nenek dan kakekku (H Saichon HjSaningsih dan

HjSafiinah) serta adek-adekku (dek Fuad dan dek Arif) motivasinya dan

doa-doanya

12 Sahabat-sahabatku Widi Astutik Sutriani Nabilah Nadhif Dini Setiya

Praja Dwi Ajeng Eli Ananda Royyan Athoillah dengan keceriaan dan

semangat kalian selama ini sebagai sahabat yang membantu dan

mendukung saat senang maupun susah

13 Teman-teman seperjuangan Emma Atika dan Wilda dengan banyak

keceriaan kebersamaan bantuan motivasi semangat serta kerja samanya

sehingga skripsi ini dapat terwujud

vi

14 Teman-teman Farmasi 2009 terimakasih atas kebersamaannnya selama 4

tahun terakhir ini kalian memberikan warna baru dalam kehidupanku

15 Teman-teman kos mutiara sigura-gura kav9 (neney santi sabitul tika

icha rahma rara vivi farah2) terimaksih buat semangat yang diberikan

sehingga skripsi ini dapat terselesaikan dengan baik

16 Untuk semua pihak yang belum disebutkan namanya penulis mohon maaf

dan terima kasih yang sebesar-besarnya Semua keberhasilan ini tak luput

dari bantuan doa yang telah kalian semua berikan

Jasa dari semua pihak yang telah membantu dalam penelitian ini penulis

tidak mampu membalas dengan apapun Semoga amal baik semua pihak

mendapat imbalan dari Allah SWT Penulis menyadari bahwa skripsi ini jauh dari

kesempurnaan oleh karena itu penulis mengharapkan saran dan kritik yang

membangun dari pembaca demi kebaikan skripsi ini Semoga penulisan ini dapat

berguna bagi penelitian berikutnya amiin

Wassalamursquoalaikum warohmatullohi wabarokatuh

Malang 31 juli 2013

Penyusun

(Farah Kholidah Dzia)

vii

RINGKASAN

UJI AKTIVITAS ANTIKANKER DAUN KUCAI (Allium odorum

L)TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA T47D SECARA In Vitro

DENGAN METODE MTT

(Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol)

Kanker merupakan suatu penyakit pertumbuhan sel yang tumbuhnya tidak

normal cepat dan tidak terkendali Sel-sel kanker akan terus membelah diri

terlepas dari pengendalian pertumbuhan dan tidak lagi menuruti hukum-hukum

pembiakan Bila pertumbuhan ini tidak cepat dihentikan dan diobati maka sel

kanker akan berkembang terus Sel kanker akan tumbuh menyusup ke jaringan

sekitarnya (invasif) lalu membuat anak sebar (metastasis) ke tempat yang lebih

jauh melalui pembuluh darah dan pembuluh darah getah bening Selanjutnya akan

tumbuh kanker baru di tempat lain sampai akhirnya menyebabkan kematian

penderitanya (Dalimartha 2003) Saat ini mulai dikembangkan obat antikanker

yang berasal dari tumbuh-tumbuhan yang memiliki efek terapi lebih baik

dibandingkan dengan pengobatan dengan menggunakan bahan kimia atau operasi

Salah satu tumbuhan yang memiliki khasiat untuk antikanker yaitu daun kucai

(Allium odorum L) Ekstrak daun kucai ( Allium odorum L ) mengandung

senyawa aktif berkhasiat obat seperti alkaloid flavonoid saponin dan

steroidtriterpenoid (Wulandari 2011) Berdasarkan penelitian pendahuluan yang

dilakukan oleh Wulandari 2011 diketahui ekstrak n-heksan dan ekstrak metanol

yang telah diuji didapatkan ekstrak n-heksan mempunyai harga LC50 lt 1000

microgml yaitu 80562 plusmn 853534 microgml Hal itu menunjukkan bahwa ekstrak n-

heksan daun kucai (Allium odorum L) mempunyai aktifitas antikanker menurut

BST (Wulandari 2011)

Selanjutnya akan di uji kembali untuk mengetahui ekstrak yang

menunjukkan aktivitas antikanker secara in vitro dengan metode MTT Terlebih

dahulu penelitian dimulai dengan pembuatan ekstrak daun kucai dengan metode

maserasi dan dilanjutkan dengan uji secara in vitro dengan metode MTT Hasil

dari uji tersebut kemudian diolah dengan menggunakan analisis probit Potensi

antikanker berdasarkan National cancer institute (NCI) Guideline Aktif (IC50 lt

30 microgml) moderat aktif (30 microgml le IC50 lt 100 microgml) tidak aktif (IC50 gt 100

microgml) (Haryadi 2012)

Microculture Tetrazolium Salt (MTT) Assay merupakan uji yang sensitif

kuantitatif dan terpercaya Reaksi MTT merupakan reaksi reduksi selular yang

didasarkan pada pemecahan garam tetrazolium berwarna kuning menjadi Kristal

formazan berwarna biru keunguan (CCRC 2009) Metode ini menggunakan sel

kanker payudara T47D sebagai sel coba Uji MTT digunakan untuk menentukan

parameter nilai IC50 yaitu bilangan yang menunjukkan konsentrasi ekstrak yang

mampu menghambat aktivitas sebesar 50 Semakin kecil nilai IC50

menunjukkan semakin tinggi aktivitas antikanker

Hasil dari ekstrak yang di uji yaitu ekstrak n-heksana dan ekstrak metanol

ekstrak n-heksana memiliki nilai IC50 sebesar 200484 microgml dan ekstrak metanol

sebesar 273445 microgml Hasil dari uji kromatografi lapis tipis (KLT) dilakukan

viii

hasil KLT menunjukkan adanya senyawa flavonoid dan triterpenoid padaekstrak

n-heksana daun kucai (Allium odorum L)

Kandungan kimia antikanker dari penelitian ini perlu dilakukan penelitian

lanjutan melakukan penelitian lebih lanjut dengan menggunakan jenis sel kanker

lainnya seperti sel kanker MCF 7 dan kanker prostat Selain itu juga perlu

dilakukan optimasi dengan menggunakan pelarut lain untuk mendapatkan IC50

yang lebih aktif terhadap sel kanker payudara T47D

ix

ABSTRAK

UJI AKTIVITAS ANTIKANKER DAUN KUCAI (Allium odorum

L)TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA T47D SECARA In Vitro

DENGAN METODE MTT

(Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol)

Kucai (Allium odorum L) adalah tanaman yang berfungsi sebagai antioksidan

antikanker antibakteri serta antimikroba dan antiseptik karena mampu

menghambat bakteri patogen (penyebab penyakit) Penelitian ini bertujuan untuk

mengetahui aktivitas antikanker serta mengetahui golongan senyawa kimia dari

ekstrak yang positif pada daun kucai (Allium odorum L) terhadap sel kanker

payudara T47D secara in vitro dengan metode Microculture Tetrazolium Salt

(MTT) Assay Potensi adanya aktivitas antikanker dapat diketahui setelah

pembacaan data menggunakan elisa reader kemudian ditentukan besarnya IC50

dengan menggunakan analisis probit Suatu ekstrak dikatakan aktif sebagai

antikanker berdasarkan metode Microculture Tetrazolium Salt (MTT) Assay jika

harga IC50 lt 30 microgml Dari ekstrak yang diuji yaitu ekstrak n-heksana dan ekstrak

metanol ekstrak n-heksana memiliki harga IC50 sebesar 200484 microgml dan

ekstrak metanol sebesar 273445 microgml Nilai IC50 semua ekstrak daun kucai

terhadap sel kanker payudara T47D gt 100 microgml Berdasarkan National cancer

institute (NCI) nilai ini menunjukkan aktivitas antikanker ekstrak daun kucai

yang sangat lemah terhadap sel T47D Isolasi dan pengujian menggunakan pelarut

lain serta menggunakan sel lain masih diperlukan untuk pengembangan di masa

depan

Kata Kunci Daun Kucai (Allium odorum L) Sel T47D Microculture

Tetrazolium Salt (MTT) Assay n-Heksana Metanol

x

ABSTRACT

IN-VITRO ANTI-CANCER ACTIVITIES TEST OF Allium odorum L LEAF

EXTRACT ON T47D BREAST CANCER THROUGH MTT METHOD

( n-Heksane and Methanol Extracts)

Allium odorum L is a plant that have functions as an antioxidant anticancer

antibacterial antimicrobial and antiseptic with inhibition bacterial pathogens

capabilities This study aims to determine the anticancer activities and knowing

class of chemical compounds in the leaf positive extract Allium odorum L on

T47D breast cancer cells through in vitro microculture method Tetrazolium Salt

(MTT) assay Potential of anticancer activities known after lection of data by

ELISA tested then determined the magnitude of IC50 by probit analysis An

extract said to be active as anticancer based microculture method Tetrazolium Salt

(MTT) assay if the value of IC50 lt 30 ug ml The result of this study showed

that IC50 of n-heksane extract and methanol extract are 200484 mg ml and

273445 ug ml IC50 values of all Allium odorum L extract against breast cancer

cells on T47D gt 100 ug ml Based on the National Cancer Institute (NCI) the

value of anti-cancer activities of Allium odorum L leaf extract exhibits very weak

capabilities to against T47D cells Isolation and testing using other solvents and

cells are still needed for future development

Key words Allium odorum L Leaf T47D cells Microculture Tetrazolium Salt

(MTT) Assay n-Heksana Methanol

xi

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL i

LEMBAR PENGESAHAN ii

LEMBAR PENGUJIAN iii

KATA PENGANTAR iv

RINGKASAN vii

ABSTRAK ix

DAFTAR ISI xi

DAFTAR TABEL xiv

DAFTAR GAMBAR xv

DAFTAR LAMPIRAN xvi

DAFTAR SINGKATAN xvii

BAB 1 PENDAHULUAN 1

11 Latar belakang 1

12 Rumusan Masalah Penelitian 3

13 Tujuan Penelitian 4

14 Hipotesis Penelitian 4

15 Manfaat Penelitian 4

BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA 5

21 Tinjauan tentang Kucai 5

211 Klasifikasi 5

212 Sinonim 5

213 Nama Daerah 5

214 Morfologi 5

215 Penyebaran 6

216 Kandungan 6

217 Golongan Senyawa dalam Daun Kucai 7

218 Khasiat 8

22 Tinjauan tentang Kanker 9

221 Definisi 9

xii

222 Epidemiologi 9

223 Sifat Sel Kanker 10

224 Karsinogenesis 10

225 Siklus Pertumbuhan Sel 13

23 Tinjauan tentang Kanker Payudara 14

231 Definisi 14

232 Epidemiologi 15

233 Faktor Resiko 16

234 Gejala 17

235 Perkembangan Sel 17

24 Tinjauan Sel T47D 18

25 Tinjauan tentang Kultur Sel 19

26 Tinjauan Uji Microculture Tetrazolium Salt (MTT) Assay 21

261 Cara Menghitung Persentase Sel Hidup 22

27 Tinjauan tentang Ekstraksi 23

28 Tinjauan tentang Aktivitas Daun Kucai terhadap Sel Kanker Payudara

24

BAB 3 KERANGKA KONSEPTUAL 25

BAB 4 METODE PENELITIAN 28

41 Bahan Penelitian 28

411 Bahan Tanaman 28

412 Bahan Kimia 28

42 Alat-alat Penelitian 29

43 Variabel Penelitian 29

431 Variabel Bebas 29

432 Variabel Tergantung 30

44 Metode Penelitian 30

441 Rancangan Penelitian 30

442 Kerangka Operasional 31

443 Prosedur Kerja 32

4431 Pembuatan Ekstrak Bahan Uji 32

4432 Pembuatan Media 34

xiii

4433 Penumbuhan Sel 35

4434 Penggantian Media 35

4435 Panen Sel 36

4436 Perhitungan Sel 36

4437 Preparasi Sampel 38

4438 Pembuatan Larutan Induk dan Larutan Uji 38

4439 Uji Aktivitas Antikanker dengan Metode MTT 39

44310 Analisis Data 41

44311 Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) 41

BAB 5 HASIL PENELITIAN 43

51 Pembuatan Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 43

52 Perhitungan Sel T47D dan Volume Panenan Sel yang ditransfer 43

53 Uji Aktivitas Antikanker dari Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak

Metanol Daun Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker

Payudara T47D dengan Metode MTT 44

54 Penentuan Nilai IC50 Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun

Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker Payudara T47D

dengan Probit Analisis 47

55 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) 47

571 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Senyawa Flavonoid

47

571 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Senyawa Steroid 48

BAB 6 PEMBAHASAN 49

BAB 7 KESIMPULAN DAN SARAN 54

DAFTAR PUSTAKA 55

xiv

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

II1 Formula Baku Media Kultur 20

IV1 Kelompok Perlakuan Kultur Sel Kanker Payudara T47D Dalam Tiap

Percobaan 30

V1 Hasil Pembuatan Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 43

V2 Hasil Uji Kontrol Sel dan Kontrol Media 44

V3 Hasil Uji Aktivitas Antikanker dari Kontrol Positif Doksorubisin Sel Kanker

Payudara (T47D) dengan Metode MTT 45

V4 Hasil Uji Aktivitas Antikanker dari Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol

Daun Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker Payudara T47D

dengan Metode MTT 45

V5 Hasil penentuan nilai IC50 doksorubisin IC50 ekstrak n-heksana dan IC50

ekstrak metanol daun kucai (Allium odorum L) terhadap sel kanker payudara

T47D dengan analisis probit 47

xv

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

21 Kucai (Allium odorum L) 6

22 Struktur Flavonoid 7

23 Struktur Saponin Steroid dan Saponin Triterpenoid 8

24 Karsinogenesis 11

25 Pertumbuhan Sel 13

26 Perkembangan Kanker Payudara 18

27 Reaksi MTT 21

31 Skema Kerangkan Konseptual 27

41 Skema Kerangkan Operasional 31

42 Skema Pembuatan Ekstrak n-heksana dan metanol daun kucai 33

43 Perhitungan Sel 37

51 Ekstrak Kental Daun Kucai 43

52 Kondisi sel sebelum dan sesudah MTT di lihat di bawah mikroskop dengan

perbesaran 40x 44

53 Hubungan antara konsentrasi kontrol positif dan bahan uji terhadap prosentase

sel hidup kanker payudara T47D 46

54 Hasil KLT flavonoid daun kucai (Allium odorum L) 47

55 Hasil KLT terpenoid daun kucai (Allium odorum L) 48

xvi

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1 Daftar Riwayat Hidup 59

2 Surat Pernyataan 60

3 Surat Determinasi 61

4 Sertifikat Kultur Jaringan 62

5 Data Hasil Pembacaan Elisa reader 63

6 Pembuatan Larutan Uji Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 64

7 Pembuatan Konsentrasi Doksorubisin 65

8 Analisis Probit Kontrol Positif Doksorubisin 66

9 Analisis Probit Ekstrak n-Heksana 68

10 Analisis Probit EkstrakMetanol 70

11 Lampiran Foto 72

12 Kondisi Sel Doksorubisin Dilihat Dibawah Mikroskop dengan Perbesaran 40x

Lensa Objektif 75

13 Kondisi Sel Ekstrak n-Heksana Dilihat Dibawah Mikroskop dengan

Perbesaran 40x Lensa Objektif 76

14 Kondisi Sel Ekstrak Metanol Dilihat Dibawah Mikroskop dengan Perbesaran

40x Lensa Objektif 77

xvii

DAFTAR SINGKATAN

MTT Microculture Tetrazolium Salt

IC50 Inhibitori Concentration 50

NCI National Cancer Institute

WHO Word Health Organization

SKRT Survei Kesehatan Rumah Tangga

FBS Fetal Bovine Serum

DMSO Dimethyl sulfoxide

RPMI Rosewell Park Memorial Institute

SDS Sodium Duodecyl Suphate

PBS Phosphat Buffer Serum

LAF Laminar Air Flow

SPSS Program for Social Science

KLT Kromatografi Lapis Tipis

xviii

DAFTAR PUSTAKA

Agoes Azwar 2010 Tanaman Obat Indonesia (Buku 1) Salemba Medika

Jakarta

Amalina Nur Lia 2008 Uji Sitotoksik Ekstrak Etanol 70Buah Merica

Hitam (Piper nigrum L) Terhadap Sel Hela Skripsi Fakultas Farmasi

Universitas Muhammadiyah Surakarta

Anggraini Polis Novita 2008 Aktivitas Campuran Ekstrak Etanol Herba

Sambiloto dan Rimpang Kunyit Terhadap Sel Kanker Payudara

Manusia T47D In Vitro Dengan Metode MTT Skripsi Fakultas Farmasi

Universitas Airlangga

Astawan Made 2010 Kucai cegah kanker turunkan kolesterol

httpcybermedcbnnetidcbprtlcybermeddetailaspxx=Nutritionampy=cyb

ermed|0|0|6|565 (8 juli 2010)

Balmer CM Valley AW and Iannucci A 2005 Cancer treatment and

Chemotherapy In Dipiro JT Talbert RL Matzke GR Wells BG

and Posey LM (Eds) Pharmacotherapy A Pathofisiologic Approach

6th

Edition New York The McGraw-Hill Co Inc

Baradero wilfride yakobus 2007 Klien Kanker penerbit buku kedokteran

EGC Jakarta Hal 7 amp 38

Baskhara Ali Widi 2008 Sehat Murah Dengan Buah dan Sayuran Kreasi

Wacana Yogyakarta

Cahyono Bambang 2005 Bawang Daun Kanisius Yogyakarta Hal 12

Continuing Care Retirement Community (CCRC) 2009 Prosedur Uji MTT in

vitro Yogyakarta Universitas Gajah Mada

Chooiong hean 2007 Sayuran Khasiat Makanan dan Ubatan Kuala lumpur

Dalimartha Setiawan 2003 Ramuan Tradisional Untuk Pengobatan Kanker

Penebar Swadaya Jakarta Hal 1-6

De Jong Wim2004 Kanker apakah itu pengobatan Harapan Hidup dan

Dukungan Keluarga Arcan Jakarta hal 45 317

Departemen Kesehatan RI 1979 Farmakope Indonesia Edisi ke-3 Jakarta

Departemen Kesehatan hal 23-33

Departemen Kesehatan RI 1995 Farmakope Indonesia Edisi ke-4 Jakarta

Departemen Kesehatan hal 7

iv

KATA PENGANTAR

Assalamursquoalaikum warohmatullahi wabarokatuh

Puji syukur tercurahkan kepada Allah SWT Tuhan semesta alam karena

berkat rahmat dan ridhonya penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul

UJI AKTIVITAS ANTIKANKER DAUN KUCAI (Allium odorum

L)TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA T47D SECARA In Vitro

DENGAN METODE MTT (Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol)

Skripsi ini diajukan untuk memenuhi syarat untuk mencapai gelar Sarjana

Farmasi pada Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas

Muhammadiyah Malang Dalam penyusunan skripsi ini penulis tidak terlepas dari

peranan pembimbing dan bantuan dari seluruh pihak Oleh karena itu dengan

segala kerendahan hati penulis ingin mengucapkan banyak terima kasih kepada

1 Allah SWT tuhan semesta alam yang memberikan rahmat nikmat dan

hidayahnya kepada umatnya Rosulullah SAW yang sudah menuntun kita

menuju jalan yang lurus

2 ProfDrSukardimanMSApt selaku dosen pembimbing I dan Annisa

Farida Muti SFarm MScApt selaku dosen pembimbing II atas saran

bimbingan dan arahannya yang dengan sabar telah meluangkan waktu

untuk membimbing dan mengarahkan penulis

3 Siti Rofida MFarmApt selaku Dosen Penguji I dan Ahmad Sobrun

JamilSSiMP selaku Dosen Penguji II atas saran dan kritikan yang

diberikan sehingga penyusunan skripsi ini menjadi lebih baik

4 Tri Lestari HMKepSpMat selaku Dekan Fakultas ilmu kesehatan

Universitas Muhammadiyah Malang yang telah memberikan kesempatan

penulis belajar di Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah

Malang

5 Dra Uswatun Chasanah MKes Apt selaku Ketua Program Studi

Farmasi Universitas Muhammadiyah Malang yang telah member motivasi

dan kesempatan penulis belajar di Program Studi Farmasi Universitas

Muhammadiyah Malang

v

6 Fakultas Farmasi Universitas Airlangga khususnya ibu lusi dan teman-

teman FFUA (Dini Aula dkk) yang telah membantu dalam pembelajaran

sehingga penulis dapat mengenal dan mempelajari tentang kultur jaringan

7 Laboratorium Parasitologi Fakultas Kedokteran Universitas Gajah Mada

khususnya ProfDrSupargiyonoDTMampHSUPhDSpParK dan Ibu

Rumbi yang telah bersedia meluangkan waktu dan memberikan tempat

agar penulis dapat melaksanakan penelitiannya dengan baik

8 Ika Ratna Hidayati SFarm Apt selaku Dosen wali Terima kasih

banyak atas arahan ibu selama ini

9 Untuk semua Dosen Farmasi Universitas Muhamadiyah Malang yang

sudah memberikan waktunya untuk mengajarkan ilmu-ilmu yang sangat

bermanfaat Terutama Ibu Arina Swastika Maulita SFarm Apt yang

telah susah payah membantu jalanya ujian skripsi sehingga kami dapat

melaksanakan ujian skripsi dengan baik

10 Staff Tata Usaha Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu kesehatan

Universitas Muhammadiyah Malang terima kasih karena telah banyak

membantu dalam hal administrasi

11 Kedua orang tuaku tercinta Bapak Drs H Takat Saifudin dan Ibu

HjUswatun Khasanah yang tiada hentinya memotivasi dalam segala hal

terima kasih atas didikan dan kerja kerasnya untuk membahagiakan

putrinya serta dengan sabar mendoakan untuk kebaikan dan kesuksesan

putrinya Buat nenek dan kakekku (H Saichon HjSaningsih dan

HjSafiinah) serta adek-adekku (dek Fuad dan dek Arif) motivasinya dan

doa-doanya

12 Sahabat-sahabatku Widi Astutik Sutriani Nabilah Nadhif Dini Setiya

Praja Dwi Ajeng Eli Ananda Royyan Athoillah dengan keceriaan dan

semangat kalian selama ini sebagai sahabat yang membantu dan

mendukung saat senang maupun susah

13 Teman-teman seperjuangan Emma Atika dan Wilda dengan banyak

keceriaan kebersamaan bantuan motivasi semangat serta kerja samanya

sehingga skripsi ini dapat terwujud

vi

14 Teman-teman Farmasi 2009 terimakasih atas kebersamaannnya selama 4

tahun terakhir ini kalian memberikan warna baru dalam kehidupanku

15 Teman-teman kos mutiara sigura-gura kav9 (neney santi sabitul tika

icha rahma rara vivi farah2) terimaksih buat semangat yang diberikan

sehingga skripsi ini dapat terselesaikan dengan baik

16 Untuk semua pihak yang belum disebutkan namanya penulis mohon maaf

dan terima kasih yang sebesar-besarnya Semua keberhasilan ini tak luput

dari bantuan doa yang telah kalian semua berikan

Jasa dari semua pihak yang telah membantu dalam penelitian ini penulis

tidak mampu membalas dengan apapun Semoga amal baik semua pihak

mendapat imbalan dari Allah SWT Penulis menyadari bahwa skripsi ini jauh dari

kesempurnaan oleh karena itu penulis mengharapkan saran dan kritik yang

membangun dari pembaca demi kebaikan skripsi ini Semoga penulisan ini dapat

berguna bagi penelitian berikutnya amiin

Wassalamursquoalaikum warohmatullohi wabarokatuh

Malang 31 juli 2013

Penyusun

(Farah Kholidah Dzia)

vii

RINGKASAN

UJI AKTIVITAS ANTIKANKER DAUN KUCAI (Allium odorum

L)TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA T47D SECARA In Vitro

DENGAN METODE MTT

(Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol)

Kanker merupakan suatu penyakit pertumbuhan sel yang tumbuhnya tidak

normal cepat dan tidak terkendali Sel-sel kanker akan terus membelah diri

terlepas dari pengendalian pertumbuhan dan tidak lagi menuruti hukum-hukum

pembiakan Bila pertumbuhan ini tidak cepat dihentikan dan diobati maka sel

kanker akan berkembang terus Sel kanker akan tumbuh menyusup ke jaringan

sekitarnya (invasif) lalu membuat anak sebar (metastasis) ke tempat yang lebih

jauh melalui pembuluh darah dan pembuluh darah getah bening Selanjutnya akan

tumbuh kanker baru di tempat lain sampai akhirnya menyebabkan kematian

penderitanya (Dalimartha 2003) Saat ini mulai dikembangkan obat antikanker

yang berasal dari tumbuh-tumbuhan yang memiliki efek terapi lebih baik

dibandingkan dengan pengobatan dengan menggunakan bahan kimia atau operasi

Salah satu tumbuhan yang memiliki khasiat untuk antikanker yaitu daun kucai

(Allium odorum L) Ekstrak daun kucai ( Allium odorum L ) mengandung

senyawa aktif berkhasiat obat seperti alkaloid flavonoid saponin dan

steroidtriterpenoid (Wulandari 2011) Berdasarkan penelitian pendahuluan yang

dilakukan oleh Wulandari 2011 diketahui ekstrak n-heksan dan ekstrak metanol

yang telah diuji didapatkan ekstrak n-heksan mempunyai harga LC50 lt 1000

microgml yaitu 80562 plusmn 853534 microgml Hal itu menunjukkan bahwa ekstrak n-

heksan daun kucai (Allium odorum L) mempunyai aktifitas antikanker menurut

BST (Wulandari 2011)

Selanjutnya akan di uji kembali untuk mengetahui ekstrak yang

menunjukkan aktivitas antikanker secara in vitro dengan metode MTT Terlebih

dahulu penelitian dimulai dengan pembuatan ekstrak daun kucai dengan metode

maserasi dan dilanjutkan dengan uji secara in vitro dengan metode MTT Hasil

dari uji tersebut kemudian diolah dengan menggunakan analisis probit Potensi

antikanker berdasarkan National cancer institute (NCI) Guideline Aktif (IC50 lt

30 microgml) moderat aktif (30 microgml le IC50 lt 100 microgml) tidak aktif (IC50 gt 100

microgml) (Haryadi 2012)

Microculture Tetrazolium Salt (MTT) Assay merupakan uji yang sensitif

kuantitatif dan terpercaya Reaksi MTT merupakan reaksi reduksi selular yang

didasarkan pada pemecahan garam tetrazolium berwarna kuning menjadi Kristal

formazan berwarna biru keunguan (CCRC 2009) Metode ini menggunakan sel

kanker payudara T47D sebagai sel coba Uji MTT digunakan untuk menentukan

parameter nilai IC50 yaitu bilangan yang menunjukkan konsentrasi ekstrak yang

mampu menghambat aktivitas sebesar 50 Semakin kecil nilai IC50

menunjukkan semakin tinggi aktivitas antikanker

Hasil dari ekstrak yang di uji yaitu ekstrak n-heksana dan ekstrak metanol

ekstrak n-heksana memiliki nilai IC50 sebesar 200484 microgml dan ekstrak metanol

sebesar 273445 microgml Hasil dari uji kromatografi lapis tipis (KLT) dilakukan

viii

hasil KLT menunjukkan adanya senyawa flavonoid dan triterpenoid padaekstrak

n-heksana daun kucai (Allium odorum L)

Kandungan kimia antikanker dari penelitian ini perlu dilakukan penelitian

lanjutan melakukan penelitian lebih lanjut dengan menggunakan jenis sel kanker

lainnya seperti sel kanker MCF 7 dan kanker prostat Selain itu juga perlu

dilakukan optimasi dengan menggunakan pelarut lain untuk mendapatkan IC50

yang lebih aktif terhadap sel kanker payudara T47D

ix

ABSTRAK

UJI AKTIVITAS ANTIKANKER DAUN KUCAI (Allium odorum

L)TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA T47D SECARA In Vitro

DENGAN METODE MTT

(Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol)

Kucai (Allium odorum L) adalah tanaman yang berfungsi sebagai antioksidan

antikanker antibakteri serta antimikroba dan antiseptik karena mampu

menghambat bakteri patogen (penyebab penyakit) Penelitian ini bertujuan untuk

mengetahui aktivitas antikanker serta mengetahui golongan senyawa kimia dari

ekstrak yang positif pada daun kucai (Allium odorum L) terhadap sel kanker

payudara T47D secara in vitro dengan metode Microculture Tetrazolium Salt

(MTT) Assay Potensi adanya aktivitas antikanker dapat diketahui setelah

pembacaan data menggunakan elisa reader kemudian ditentukan besarnya IC50

dengan menggunakan analisis probit Suatu ekstrak dikatakan aktif sebagai

antikanker berdasarkan metode Microculture Tetrazolium Salt (MTT) Assay jika

harga IC50 lt 30 microgml Dari ekstrak yang diuji yaitu ekstrak n-heksana dan ekstrak

metanol ekstrak n-heksana memiliki harga IC50 sebesar 200484 microgml dan

ekstrak metanol sebesar 273445 microgml Nilai IC50 semua ekstrak daun kucai

terhadap sel kanker payudara T47D gt 100 microgml Berdasarkan National cancer

institute (NCI) nilai ini menunjukkan aktivitas antikanker ekstrak daun kucai

yang sangat lemah terhadap sel T47D Isolasi dan pengujian menggunakan pelarut

lain serta menggunakan sel lain masih diperlukan untuk pengembangan di masa

depan

Kata Kunci Daun Kucai (Allium odorum L) Sel T47D Microculture

Tetrazolium Salt (MTT) Assay n-Heksana Metanol

x

ABSTRACT

IN-VITRO ANTI-CANCER ACTIVITIES TEST OF Allium odorum L LEAF

EXTRACT ON T47D BREAST CANCER THROUGH MTT METHOD

( n-Heksane and Methanol Extracts)

Allium odorum L is a plant that have functions as an antioxidant anticancer

antibacterial antimicrobial and antiseptic with inhibition bacterial pathogens

capabilities This study aims to determine the anticancer activities and knowing

class of chemical compounds in the leaf positive extract Allium odorum L on

T47D breast cancer cells through in vitro microculture method Tetrazolium Salt

(MTT) assay Potential of anticancer activities known after lection of data by

ELISA tested then determined the magnitude of IC50 by probit analysis An

extract said to be active as anticancer based microculture method Tetrazolium Salt

(MTT) assay if the value of IC50 lt 30 ug ml The result of this study showed

that IC50 of n-heksane extract and methanol extract are 200484 mg ml and

273445 ug ml IC50 values of all Allium odorum L extract against breast cancer

cells on T47D gt 100 ug ml Based on the National Cancer Institute (NCI) the

value of anti-cancer activities of Allium odorum L leaf extract exhibits very weak

capabilities to against T47D cells Isolation and testing using other solvents and

cells are still needed for future development

Key words Allium odorum L Leaf T47D cells Microculture Tetrazolium Salt

(MTT) Assay n-Heksana Methanol

xi

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL i

LEMBAR PENGESAHAN ii

LEMBAR PENGUJIAN iii

KATA PENGANTAR iv

RINGKASAN vii

ABSTRAK ix

DAFTAR ISI xi

DAFTAR TABEL xiv

DAFTAR GAMBAR xv

DAFTAR LAMPIRAN xvi

DAFTAR SINGKATAN xvii

BAB 1 PENDAHULUAN 1

11 Latar belakang 1

12 Rumusan Masalah Penelitian 3

13 Tujuan Penelitian 4

14 Hipotesis Penelitian 4

15 Manfaat Penelitian 4

BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA 5

21 Tinjauan tentang Kucai 5

211 Klasifikasi 5

212 Sinonim 5

213 Nama Daerah 5

214 Morfologi 5

215 Penyebaran 6

216 Kandungan 6

217 Golongan Senyawa dalam Daun Kucai 7

218 Khasiat 8

22 Tinjauan tentang Kanker 9

221 Definisi 9

xii

222 Epidemiologi 9

223 Sifat Sel Kanker 10

224 Karsinogenesis 10

225 Siklus Pertumbuhan Sel 13

23 Tinjauan tentang Kanker Payudara 14

231 Definisi 14

232 Epidemiologi 15

233 Faktor Resiko 16

234 Gejala 17

235 Perkembangan Sel 17

24 Tinjauan Sel T47D 18

25 Tinjauan tentang Kultur Sel 19

26 Tinjauan Uji Microculture Tetrazolium Salt (MTT) Assay 21

261 Cara Menghitung Persentase Sel Hidup 22

27 Tinjauan tentang Ekstraksi 23

28 Tinjauan tentang Aktivitas Daun Kucai terhadap Sel Kanker Payudara

24

BAB 3 KERANGKA KONSEPTUAL 25

BAB 4 METODE PENELITIAN 28

41 Bahan Penelitian 28

411 Bahan Tanaman 28

412 Bahan Kimia 28

42 Alat-alat Penelitian 29

43 Variabel Penelitian 29

431 Variabel Bebas 29

432 Variabel Tergantung 30

44 Metode Penelitian 30

441 Rancangan Penelitian 30

442 Kerangka Operasional 31

443 Prosedur Kerja 32

4431 Pembuatan Ekstrak Bahan Uji 32

4432 Pembuatan Media 34

xiii

4433 Penumbuhan Sel 35

4434 Penggantian Media 35

4435 Panen Sel 36

4436 Perhitungan Sel 36

4437 Preparasi Sampel 38

4438 Pembuatan Larutan Induk dan Larutan Uji 38

4439 Uji Aktivitas Antikanker dengan Metode MTT 39

44310 Analisis Data 41

44311 Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) 41

BAB 5 HASIL PENELITIAN 43

51 Pembuatan Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 43

52 Perhitungan Sel T47D dan Volume Panenan Sel yang ditransfer 43

53 Uji Aktivitas Antikanker dari Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak

Metanol Daun Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker

Payudara T47D dengan Metode MTT 44

54 Penentuan Nilai IC50 Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun

Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker Payudara T47D

dengan Probit Analisis 47

55 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) 47

571 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Senyawa Flavonoid

47

571 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Senyawa Steroid 48

BAB 6 PEMBAHASAN 49

BAB 7 KESIMPULAN DAN SARAN 54

DAFTAR PUSTAKA 55

xiv

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

II1 Formula Baku Media Kultur 20

IV1 Kelompok Perlakuan Kultur Sel Kanker Payudara T47D Dalam Tiap

Percobaan 30

V1 Hasil Pembuatan Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 43

V2 Hasil Uji Kontrol Sel dan Kontrol Media 44

V3 Hasil Uji Aktivitas Antikanker dari Kontrol Positif Doksorubisin Sel Kanker

Payudara (T47D) dengan Metode MTT 45

V4 Hasil Uji Aktivitas Antikanker dari Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol

Daun Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker Payudara T47D

dengan Metode MTT 45

V5 Hasil penentuan nilai IC50 doksorubisin IC50 ekstrak n-heksana dan IC50

ekstrak metanol daun kucai (Allium odorum L) terhadap sel kanker payudara

T47D dengan analisis probit 47

xv

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

21 Kucai (Allium odorum L) 6

22 Struktur Flavonoid 7

23 Struktur Saponin Steroid dan Saponin Triterpenoid 8

24 Karsinogenesis 11

25 Pertumbuhan Sel 13

26 Perkembangan Kanker Payudara 18

27 Reaksi MTT 21

31 Skema Kerangkan Konseptual 27

41 Skema Kerangkan Operasional 31

42 Skema Pembuatan Ekstrak n-heksana dan metanol daun kucai 33

43 Perhitungan Sel 37

51 Ekstrak Kental Daun Kucai 43

52 Kondisi sel sebelum dan sesudah MTT di lihat di bawah mikroskop dengan

perbesaran 40x 44

53 Hubungan antara konsentrasi kontrol positif dan bahan uji terhadap prosentase

sel hidup kanker payudara T47D 46

54 Hasil KLT flavonoid daun kucai (Allium odorum L) 47

55 Hasil KLT terpenoid daun kucai (Allium odorum L) 48

xvi

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1 Daftar Riwayat Hidup 59

2 Surat Pernyataan 60

3 Surat Determinasi 61

4 Sertifikat Kultur Jaringan 62

5 Data Hasil Pembacaan Elisa reader 63

6 Pembuatan Larutan Uji Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 64

7 Pembuatan Konsentrasi Doksorubisin 65

8 Analisis Probit Kontrol Positif Doksorubisin 66

9 Analisis Probit Ekstrak n-Heksana 68

10 Analisis Probit EkstrakMetanol 70

11 Lampiran Foto 72

12 Kondisi Sel Doksorubisin Dilihat Dibawah Mikroskop dengan Perbesaran 40x

Lensa Objektif 75

13 Kondisi Sel Ekstrak n-Heksana Dilihat Dibawah Mikroskop dengan

Perbesaran 40x Lensa Objektif 76

14 Kondisi Sel Ekstrak Metanol Dilihat Dibawah Mikroskop dengan Perbesaran

40x Lensa Objektif 77

xvii

DAFTAR SINGKATAN

MTT Microculture Tetrazolium Salt

IC50 Inhibitori Concentration 50

NCI National Cancer Institute

WHO Word Health Organization

SKRT Survei Kesehatan Rumah Tangga

FBS Fetal Bovine Serum

DMSO Dimethyl sulfoxide

RPMI Rosewell Park Memorial Institute

SDS Sodium Duodecyl Suphate

PBS Phosphat Buffer Serum

LAF Laminar Air Flow

SPSS Program for Social Science

KLT Kromatografi Lapis Tipis

xviii

DAFTAR PUSTAKA

Agoes Azwar 2010 Tanaman Obat Indonesia (Buku 1) Salemba Medika

Jakarta

Amalina Nur Lia 2008 Uji Sitotoksik Ekstrak Etanol 70Buah Merica

Hitam (Piper nigrum L) Terhadap Sel Hela Skripsi Fakultas Farmasi

Universitas Muhammadiyah Surakarta

Anggraini Polis Novita 2008 Aktivitas Campuran Ekstrak Etanol Herba

Sambiloto dan Rimpang Kunyit Terhadap Sel Kanker Payudara

Manusia T47D In Vitro Dengan Metode MTT Skripsi Fakultas Farmasi

Universitas Airlangga

Astawan Made 2010 Kucai cegah kanker turunkan kolesterol

httpcybermedcbnnetidcbprtlcybermeddetailaspxx=Nutritionampy=cyb

ermed|0|0|6|565 (8 juli 2010)

Balmer CM Valley AW and Iannucci A 2005 Cancer treatment and

Chemotherapy In Dipiro JT Talbert RL Matzke GR Wells BG

and Posey LM (Eds) Pharmacotherapy A Pathofisiologic Approach

6th

Edition New York The McGraw-Hill Co Inc

Baradero wilfride yakobus 2007 Klien Kanker penerbit buku kedokteran

EGC Jakarta Hal 7 amp 38

Baskhara Ali Widi 2008 Sehat Murah Dengan Buah dan Sayuran Kreasi

Wacana Yogyakarta

Cahyono Bambang 2005 Bawang Daun Kanisius Yogyakarta Hal 12

Continuing Care Retirement Community (CCRC) 2009 Prosedur Uji MTT in

vitro Yogyakarta Universitas Gajah Mada

Chooiong hean 2007 Sayuran Khasiat Makanan dan Ubatan Kuala lumpur

Dalimartha Setiawan 2003 Ramuan Tradisional Untuk Pengobatan Kanker

Penebar Swadaya Jakarta Hal 1-6

De Jong Wim2004 Kanker apakah itu pengobatan Harapan Hidup dan

Dukungan Keluarga Arcan Jakarta hal 45 317

Departemen Kesehatan RI 1979 Farmakope Indonesia Edisi ke-3 Jakarta

Departemen Kesehatan hal 23-33

Departemen Kesehatan RI 1995 Farmakope Indonesia Edisi ke-4 Jakarta

Departemen Kesehatan hal 7

v

6 Fakultas Farmasi Universitas Airlangga khususnya ibu lusi dan teman-

teman FFUA (Dini Aula dkk) yang telah membantu dalam pembelajaran

sehingga penulis dapat mengenal dan mempelajari tentang kultur jaringan

7 Laboratorium Parasitologi Fakultas Kedokteran Universitas Gajah Mada

khususnya ProfDrSupargiyonoDTMampHSUPhDSpParK dan Ibu

Rumbi yang telah bersedia meluangkan waktu dan memberikan tempat

agar penulis dapat melaksanakan penelitiannya dengan baik

8 Ika Ratna Hidayati SFarm Apt selaku Dosen wali Terima kasih

banyak atas arahan ibu selama ini

9 Untuk semua Dosen Farmasi Universitas Muhamadiyah Malang yang

sudah memberikan waktunya untuk mengajarkan ilmu-ilmu yang sangat

bermanfaat Terutama Ibu Arina Swastika Maulita SFarm Apt yang

telah susah payah membantu jalanya ujian skripsi sehingga kami dapat

melaksanakan ujian skripsi dengan baik

10 Staff Tata Usaha Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu kesehatan

Universitas Muhammadiyah Malang terima kasih karena telah banyak

membantu dalam hal administrasi

11 Kedua orang tuaku tercinta Bapak Drs H Takat Saifudin dan Ibu

HjUswatun Khasanah yang tiada hentinya memotivasi dalam segala hal

terima kasih atas didikan dan kerja kerasnya untuk membahagiakan

putrinya serta dengan sabar mendoakan untuk kebaikan dan kesuksesan

putrinya Buat nenek dan kakekku (H Saichon HjSaningsih dan

HjSafiinah) serta adek-adekku (dek Fuad dan dek Arif) motivasinya dan

doa-doanya

12 Sahabat-sahabatku Widi Astutik Sutriani Nabilah Nadhif Dini Setiya

Praja Dwi Ajeng Eli Ananda Royyan Athoillah dengan keceriaan dan

semangat kalian selama ini sebagai sahabat yang membantu dan

mendukung saat senang maupun susah

13 Teman-teman seperjuangan Emma Atika dan Wilda dengan banyak

keceriaan kebersamaan bantuan motivasi semangat serta kerja samanya

sehingga skripsi ini dapat terwujud

vi

14 Teman-teman Farmasi 2009 terimakasih atas kebersamaannnya selama 4

tahun terakhir ini kalian memberikan warna baru dalam kehidupanku

15 Teman-teman kos mutiara sigura-gura kav9 (neney santi sabitul tika

icha rahma rara vivi farah2) terimaksih buat semangat yang diberikan

sehingga skripsi ini dapat terselesaikan dengan baik

16 Untuk semua pihak yang belum disebutkan namanya penulis mohon maaf

dan terima kasih yang sebesar-besarnya Semua keberhasilan ini tak luput

dari bantuan doa yang telah kalian semua berikan

Jasa dari semua pihak yang telah membantu dalam penelitian ini penulis

tidak mampu membalas dengan apapun Semoga amal baik semua pihak

mendapat imbalan dari Allah SWT Penulis menyadari bahwa skripsi ini jauh dari

kesempurnaan oleh karena itu penulis mengharapkan saran dan kritik yang

membangun dari pembaca demi kebaikan skripsi ini Semoga penulisan ini dapat

berguna bagi penelitian berikutnya amiin

Wassalamursquoalaikum warohmatullohi wabarokatuh

Malang 31 juli 2013

Penyusun

(Farah Kholidah Dzia)

vii

RINGKASAN

UJI AKTIVITAS ANTIKANKER DAUN KUCAI (Allium odorum

L)TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA T47D SECARA In Vitro

DENGAN METODE MTT

(Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol)

Kanker merupakan suatu penyakit pertumbuhan sel yang tumbuhnya tidak

normal cepat dan tidak terkendali Sel-sel kanker akan terus membelah diri

terlepas dari pengendalian pertumbuhan dan tidak lagi menuruti hukum-hukum

pembiakan Bila pertumbuhan ini tidak cepat dihentikan dan diobati maka sel

kanker akan berkembang terus Sel kanker akan tumbuh menyusup ke jaringan

sekitarnya (invasif) lalu membuat anak sebar (metastasis) ke tempat yang lebih

jauh melalui pembuluh darah dan pembuluh darah getah bening Selanjutnya akan

tumbuh kanker baru di tempat lain sampai akhirnya menyebabkan kematian

penderitanya (Dalimartha 2003) Saat ini mulai dikembangkan obat antikanker

yang berasal dari tumbuh-tumbuhan yang memiliki efek terapi lebih baik

dibandingkan dengan pengobatan dengan menggunakan bahan kimia atau operasi

Salah satu tumbuhan yang memiliki khasiat untuk antikanker yaitu daun kucai

(Allium odorum L) Ekstrak daun kucai ( Allium odorum L ) mengandung

senyawa aktif berkhasiat obat seperti alkaloid flavonoid saponin dan

steroidtriterpenoid (Wulandari 2011) Berdasarkan penelitian pendahuluan yang

dilakukan oleh Wulandari 2011 diketahui ekstrak n-heksan dan ekstrak metanol

yang telah diuji didapatkan ekstrak n-heksan mempunyai harga LC50 lt 1000

microgml yaitu 80562 plusmn 853534 microgml Hal itu menunjukkan bahwa ekstrak n-

heksan daun kucai (Allium odorum L) mempunyai aktifitas antikanker menurut

BST (Wulandari 2011)

Selanjutnya akan di uji kembali untuk mengetahui ekstrak yang

menunjukkan aktivitas antikanker secara in vitro dengan metode MTT Terlebih

dahulu penelitian dimulai dengan pembuatan ekstrak daun kucai dengan metode

maserasi dan dilanjutkan dengan uji secara in vitro dengan metode MTT Hasil

dari uji tersebut kemudian diolah dengan menggunakan analisis probit Potensi

antikanker berdasarkan National cancer institute (NCI) Guideline Aktif (IC50 lt

30 microgml) moderat aktif (30 microgml le IC50 lt 100 microgml) tidak aktif (IC50 gt 100

microgml) (Haryadi 2012)

Microculture Tetrazolium Salt (MTT) Assay merupakan uji yang sensitif

kuantitatif dan terpercaya Reaksi MTT merupakan reaksi reduksi selular yang

didasarkan pada pemecahan garam tetrazolium berwarna kuning menjadi Kristal

formazan berwarna biru keunguan (CCRC 2009) Metode ini menggunakan sel

kanker payudara T47D sebagai sel coba Uji MTT digunakan untuk menentukan

parameter nilai IC50 yaitu bilangan yang menunjukkan konsentrasi ekstrak yang

mampu menghambat aktivitas sebesar 50 Semakin kecil nilai IC50

menunjukkan semakin tinggi aktivitas antikanker

Hasil dari ekstrak yang di uji yaitu ekstrak n-heksana dan ekstrak metanol

ekstrak n-heksana memiliki nilai IC50 sebesar 200484 microgml dan ekstrak metanol

sebesar 273445 microgml Hasil dari uji kromatografi lapis tipis (KLT) dilakukan

viii

hasil KLT menunjukkan adanya senyawa flavonoid dan triterpenoid padaekstrak

n-heksana daun kucai (Allium odorum L)

Kandungan kimia antikanker dari penelitian ini perlu dilakukan penelitian

lanjutan melakukan penelitian lebih lanjut dengan menggunakan jenis sel kanker

lainnya seperti sel kanker MCF 7 dan kanker prostat Selain itu juga perlu

dilakukan optimasi dengan menggunakan pelarut lain untuk mendapatkan IC50

yang lebih aktif terhadap sel kanker payudara T47D

ix

ABSTRAK

UJI AKTIVITAS ANTIKANKER DAUN KUCAI (Allium odorum

L)TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA T47D SECARA In Vitro

DENGAN METODE MTT

(Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol)

Kucai (Allium odorum L) adalah tanaman yang berfungsi sebagai antioksidan

antikanker antibakteri serta antimikroba dan antiseptik karena mampu

menghambat bakteri patogen (penyebab penyakit) Penelitian ini bertujuan untuk

mengetahui aktivitas antikanker serta mengetahui golongan senyawa kimia dari

ekstrak yang positif pada daun kucai (Allium odorum L) terhadap sel kanker

payudara T47D secara in vitro dengan metode Microculture Tetrazolium Salt

(MTT) Assay Potensi adanya aktivitas antikanker dapat diketahui setelah

pembacaan data menggunakan elisa reader kemudian ditentukan besarnya IC50

dengan menggunakan analisis probit Suatu ekstrak dikatakan aktif sebagai

antikanker berdasarkan metode Microculture Tetrazolium Salt (MTT) Assay jika

harga IC50 lt 30 microgml Dari ekstrak yang diuji yaitu ekstrak n-heksana dan ekstrak

metanol ekstrak n-heksana memiliki harga IC50 sebesar 200484 microgml dan

ekstrak metanol sebesar 273445 microgml Nilai IC50 semua ekstrak daun kucai

terhadap sel kanker payudara T47D gt 100 microgml Berdasarkan National cancer

institute (NCI) nilai ini menunjukkan aktivitas antikanker ekstrak daun kucai

yang sangat lemah terhadap sel T47D Isolasi dan pengujian menggunakan pelarut

lain serta menggunakan sel lain masih diperlukan untuk pengembangan di masa

depan

Kata Kunci Daun Kucai (Allium odorum L) Sel T47D Microculture

Tetrazolium Salt (MTT) Assay n-Heksana Metanol

x

ABSTRACT

IN-VITRO ANTI-CANCER ACTIVITIES TEST OF Allium odorum L LEAF

EXTRACT ON T47D BREAST CANCER THROUGH MTT METHOD

( n-Heksane and Methanol Extracts)

Allium odorum L is a plant that have functions as an antioxidant anticancer

antibacterial antimicrobial and antiseptic with inhibition bacterial pathogens

capabilities This study aims to determine the anticancer activities and knowing

class of chemical compounds in the leaf positive extract Allium odorum L on

T47D breast cancer cells through in vitro microculture method Tetrazolium Salt

(MTT) assay Potential of anticancer activities known after lection of data by

ELISA tested then determined the magnitude of IC50 by probit analysis An

extract said to be active as anticancer based microculture method Tetrazolium Salt

(MTT) assay if the value of IC50 lt 30 ug ml The result of this study showed

that IC50 of n-heksane extract and methanol extract are 200484 mg ml and

273445 ug ml IC50 values of all Allium odorum L extract against breast cancer

cells on T47D gt 100 ug ml Based on the National Cancer Institute (NCI) the

value of anti-cancer activities of Allium odorum L leaf extract exhibits very weak

capabilities to against T47D cells Isolation and testing using other solvents and

cells are still needed for future development

Key words Allium odorum L Leaf T47D cells Microculture Tetrazolium Salt

(MTT) Assay n-Heksana Methanol

xi

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL i

LEMBAR PENGESAHAN ii

LEMBAR PENGUJIAN iii

KATA PENGANTAR iv

RINGKASAN vii

ABSTRAK ix

DAFTAR ISI xi

DAFTAR TABEL xiv

DAFTAR GAMBAR xv

DAFTAR LAMPIRAN xvi

DAFTAR SINGKATAN xvii

BAB 1 PENDAHULUAN 1

11 Latar belakang 1

12 Rumusan Masalah Penelitian 3

13 Tujuan Penelitian 4

14 Hipotesis Penelitian 4

15 Manfaat Penelitian 4

BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA 5

21 Tinjauan tentang Kucai 5

211 Klasifikasi 5

212 Sinonim 5

213 Nama Daerah 5

214 Morfologi 5

215 Penyebaran 6

216 Kandungan 6

217 Golongan Senyawa dalam Daun Kucai 7

218 Khasiat 8

22 Tinjauan tentang Kanker 9

221 Definisi 9

xii

222 Epidemiologi 9

223 Sifat Sel Kanker 10

224 Karsinogenesis 10

225 Siklus Pertumbuhan Sel 13

23 Tinjauan tentang Kanker Payudara 14

231 Definisi 14

232 Epidemiologi 15

233 Faktor Resiko 16

234 Gejala 17

235 Perkembangan Sel 17

24 Tinjauan Sel T47D 18

25 Tinjauan tentang Kultur Sel 19

26 Tinjauan Uji Microculture Tetrazolium Salt (MTT) Assay 21

261 Cara Menghitung Persentase Sel Hidup 22

27 Tinjauan tentang Ekstraksi 23

28 Tinjauan tentang Aktivitas Daun Kucai terhadap Sel Kanker Payudara

24

BAB 3 KERANGKA KONSEPTUAL 25

BAB 4 METODE PENELITIAN 28

41 Bahan Penelitian 28

411 Bahan Tanaman 28

412 Bahan Kimia 28

42 Alat-alat Penelitian 29

43 Variabel Penelitian 29

431 Variabel Bebas 29

432 Variabel Tergantung 30

44 Metode Penelitian 30

441 Rancangan Penelitian 30

442 Kerangka Operasional 31

443 Prosedur Kerja 32

4431 Pembuatan Ekstrak Bahan Uji 32

4432 Pembuatan Media 34

xiii

4433 Penumbuhan Sel 35

4434 Penggantian Media 35

4435 Panen Sel 36

4436 Perhitungan Sel 36

4437 Preparasi Sampel 38

4438 Pembuatan Larutan Induk dan Larutan Uji 38

4439 Uji Aktivitas Antikanker dengan Metode MTT 39

44310 Analisis Data 41

44311 Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) 41

BAB 5 HASIL PENELITIAN 43

51 Pembuatan Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 43

52 Perhitungan Sel T47D dan Volume Panenan Sel yang ditransfer 43

53 Uji Aktivitas Antikanker dari Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak

Metanol Daun Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker

Payudara T47D dengan Metode MTT 44

54 Penentuan Nilai IC50 Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun

Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker Payudara T47D

dengan Probit Analisis 47

55 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) 47

571 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Senyawa Flavonoid

47

571 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Senyawa Steroid 48

BAB 6 PEMBAHASAN 49

BAB 7 KESIMPULAN DAN SARAN 54

DAFTAR PUSTAKA 55

xiv

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

II1 Formula Baku Media Kultur 20

IV1 Kelompok Perlakuan Kultur Sel Kanker Payudara T47D Dalam Tiap

Percobaan 30

V1 Hasil Pembuatan Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 43

V2 Hasil Uji Kontrol Sel dan Kontrol Media 44

V3 Hasil Uji Aktivitas Antikanker dari Kontrol Positif Doksorubisin Sel Kanker

Payudara (T47D) dengan Metode MTT 45

V4 Hasil Uji Aktivitas Antikanker dari Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol

Daun Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker Payudara T47D

dengan Metode MTT 45

V5 Hasil penentuan nilai IC50 doksorubisin IC50 ekstrak n-heksana dan IC50

ekstrak metanol daun kucai (Allium odorum L) terhadap sel kanker payudara

T47D dengan analisis probit 47

xv

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

21 Kucai (Allium odorum L) 6

22 Struktur Flavonoid 7

23 Struktur Saponin Steroid dan Saponin Triterpenoid 8

24 Karsinogenesis 11

25 Pertumbuhan Sel 13

26 Perkembangan Kanker Payudara 18

27 Reaksi MTT 21

31 Skema Kerangkan Konseptual 27

41 Skema Kerangkan Operasional 31

42 Skema Pembuatan Ekstrak n-heksana dan metanol daun kucai 33

43 Perhitungan Sel 37

51 Ekstrak Kental Daun Kucai 43

52 Kondisi sel sebelum dan sesudah MTT di lihat di bawah mikroskop dengan

perbesaran 40x 44

53 Hubungan antara konsentrasi kontrol positif dan bahan uji terhadap prosentase

sel hidup kanker payudara T47D 46

54 Hasil KLT flavonoid daun kucai (Allium odorum L) 47

55 Hasil KLT terpenoid daun kucai (Allium odorum L) 48

xvi

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1 Daftar Riwayat Hidup 59

2 Surat Pernyataan 60

3 Surat Determinasi 61

4 Sertifikat Kultur Jaringan 62

5 Data Hasil Pembacaan Elisa reader 63

6 Pembuatan Larutan Uji Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 64

7 Pembuatan Konsentrasi Doksorubisin 65

8 Analisis Probit Kontrol Positif Doksorubisin 66

9 Analisis Probit Ekstrak n-Heksana 68

10 Analisis Probit EkstrakMetanol 70

11 Lampiran Foto 72

12 Kondisi Sel Doksorubisin Dilihat Dibawah Mikroskop dengan Perbesaran 40x

Lensa Objektif 75

13 Kondisi Sel Ekstrak n-Heksana Dilihat Dibawah Mikroskop dengan

Perbesaran 40x Lensa Objektif 76

14 Kondisi Sel Ekstrak Metanol Dilihat Dibawah Mikroskop dengan Perbesaran

40x Lensa Objektif 77

xvii

DAFTAR SINGKATAN

MTT Microculture Tetrazolium Salt

IC50 Inhibitori Concentration 50

NCI National Cancer Institute

WHO Word Health Organization

SKRT Survei Kesehatan Rumah Tangga

FBS Fetal Bovine Serum

DMSO Dimethyl sulfoxide

RPMI Rosewell Park Memorial Institute

SDS Sodium Duodecyl Suphate

PBS Phosphat Buffer Serum

LAF Laminar Air Flow

SPSS Program for Social Science

KLT Kromatografi Lapis Tipis

xviii

DAFTAR PUSTAKA

Agoes Azwar 2010 Tanaman Obat Indonesia (Buku 1) Salemba Medika

Jakarta

Amalina Nur Lia 2008 Uji Sitotoksik Ekstrak Etanol 70Buah Merica

Hitam (Piper nigrum L) Terhadap Sel Hela Skripsi Fakultas Farmasi

Universitas Muhammadiyah Surakarta

Anggraini Polis Novita 2008 Aktivitas Campuran Ekstrak Etanol Herba

Sambiloto dan Rimpang Kunyit Terhadap Sel Kanker Payudara

Manusia T47D In Vitro Dengan Metode MTT Skripsi Fakultas Farmasi

Universitas Airlangga

Astawan Made 2010 Kucai cegah kanker turunkan kolesterol

httpcybermedcbnnetidcbprtlcybermeddetailaspxx=Nutritionampy=cyb

ermed|0|0|6|565 (8 juli 2010)

Balmer CM Valley AW and Iannucci A 2005 Cancer treatment and

Chemotherapy In Dipiro JT Talbert RL Matzke GR Wells BG

and Posey LM (Eds) Pharmacotherapy A Pathofisiologic Approach

6th

Edition New York The McGraw-Hill Co Inc

Baradero wilfride yakobus 2007 Klien Kanker penerbit buku kedokteran

EGC Jakarta Hal 7 amp 38

Baskhara Ali Widi 2008 Sehat Murah Dengan Buah dan Sayuran Kreasi

Wacana Yogyakarta

Cahyono Bambang 2005 Bawang Daun Kanisius Yogyakarta Hal 12

Continuing Care Retirement Community (CCRC) 2009 Prosedur Uji MTT in

vitro Yogyakarta Universitas Gajah Mada

Chooiong hean 2007 Sayuran Khasiat Makanan dan Ubatan Kuala lumpur

Dalimartha Setiawan 2003 Ramuan Tradisional Untuk Pengobatan Kanker

Penebar Swadaya Jakarta Hal 1-6

De Jong Wim2004 Kanker apakah itu pengobatan Harapan Hidup dan

Dukungan Keluarga Arcan Jakarta hal 45 317

Departemen Kesehatan RI 1979 Farmakope Indonesia Edisi ke-3 Jakarta

Departemen Kesehatan hal 23-33

Departemen Kesehatan RI 1995 Farmakope Indonesia Edisi ke-4 Jakarta

Departemen Kesehatan hal 7

vi

14 Teman-teman Farmasi 2009 terimakasih atas kebersamaannnya selama 4

tahun terakhir ini kalian memberikan warna baru dalam kehidupanku

15 Teman-teman kos mutiara sigura-gura kav9 (neney santi sabitul tika

icha rahma rara vivi farah2) terimaksih buat semangat yang diberikan

sehingga skripsi ini dapat terselesaikan dengan baik

16 Untuk semua pihak yang belum disebutkan namanya penulis mohon maaf

dan terima kasih yang sebesar-besarnya Semua keberhasilan ini tak luput

dari bantuan doa yang telah kalian semua berikan

Jasa dari semua pihak yang telah membantu dalam penelitian ini penulis

tidak mampu membalas dengan apapun Semoga amal baik semua pihak

mendapat imbalan dari Allah SWT Penulis menyadari bahwa skripsi ini jauh dari

kesempurnaan oleh karena itu penulis mengharapkan saran dan kritik yang

membangun dari pembaca demi kebaikan skripsi ini Semoga penulisan ini dapat

berguna bagi penelitian berikutnya amiin

Wassalamursquoalaikum warohmatullohi wabarokatuh

Malang 31 juli 2013

Penyusun

(Farah Kholidah Dzia)

vii

RINGKASAN

UJI AKTIVITAS ANTIKANKER DAUN KUCAI (Allium odorum

L)TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA T47D SECARA In Vitro

DENGAN METODE MTT

(Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol)

Kanker merupakan suatu penyakit pertumbuhan sel yang tumbuhnya tidak

normal cepat dan tidak terkendali Sel-sel kanker akan terus membelah diri

terlepas dari pengendalian pertumbuhan dan tidak lagi menuruti hukum-hukum

pembiakan Bila pertumbuhan ini tidak cepat dihentikan dan diobati maka sel

kanker akan berkembang terus Sel kanker akan tumbuh menyusup ke jaringan

sekitarnya (invasif) lalu membuat anak sebar (metastasis) ke tempat yang lebih

jauh melalui pembuluh darah dan pembuluh darah getah bening Selanjutnya akan

tumbuh kanker baru di tempat lain sampai akhirnya menyebabkan kematian

penderitanya (Dalimartha 2003) Saat ini mulai dikembangkan obat antikanker

yang berasal dari tumbuh-tumbuhan yang memiliki efek terapi lebih baik

dibandingkan dengan pengobatan dengan menggunakan bahan kimia atau operasi

Salah satu tumbuhan yang memiliki khasiat untuk antikanker yaitu daun kucai

(Allium odorum L) Ekstrak daun kucai ( Allium odorum L ) mengandung

senyawa aktif berkhasiat obat seperti alkaloid flavonoid saponin dan

steroidtriterpenoid (Wulandari 2011) Berdasarkan penelitian pendahuluan yang

dilakukan oleh Wulandari 2011 diketahui ekstrak n-heksan dan ekstrak metanol

yang telah diuji didapatkan ekstrak n-heksan mempunyai harga LC50 lt 1000

microgml yaitu 80562 plusmn 853534 microgml Hal itu menunjukkan bahwa ekstrak n-

heksan daun kucai (Allium odorum L) mempunyai aktifitas antikanker menurut

BST (Wulandari 2011)

Selanjutnya akan di uji kembali untuk mengetahui ekstrak yang

menunjukkan aktivitas antikanker secara in vitro dengan metode MTT Terlebih

dahulu penelitian dimulai dengan pembuatan ekstrak daun kucai dengan metode

maserasi dan dilanjutkan dengan uji secara in vitro dengan metode MTT Hasil

dari uji tersebut kemudian diolah dengan menggunakan analisis probit Potensi

antikanker berdasarkan National cancer institute (NCI) Guideline Aktif (IC50 lt

30 microgml) moderat aktif (30 microgml le IC50 lt 100 microgml) tidak aktif (IC50 gt 100

microgml) (Haryadi 2012)

Microculture Tetrazolium Salt (MTT) Assay merupakan uji yang sensitif

kuantitatif dan terpercaya Reaksi MTT merupakan reaksi reduksi selular yang

didasarkan pada pemecahan garam tetrazolium berwarna kuning menjadi Kristal

formazan berwarna biru keunguan (CCRC 2009) Metode ini menggunakan sel

kanker payudara T47D sebagai sel coba Uji MTT digunakan untuk menentukan

parameter nilai IC50 yaitu bilangan yang menunjukkan konsentrasi ekstrak yang

mampu menghambat aktivitas sebesar 50 Semakin kecil nilai IC50

menunjukkan semakin tinggi aktivitas antikanker

Hasil dari ekstrak yang di uji yaitu ekstrak n-heksana dan ekstrak metanol

ekstrak n-heksana memiliki nilai IC50 sebesar 200484 microgml dan ekstrak metanol

sebesar 273445 microgml Hasil dari uji kromatografi lapis tipis (KLT) dilakukan

viii

hasil KLT menunjukkan adanya senyawa flavonoid dan triterpenoid padaekstrak

n-heksana daun kucai (Allium odorum L)

Kandungan kimia antikanker dari penelitian ini perlu dilakukan penelitian

lanjutan melakukan penelitian lebih lanjut dengan menggunakan jenis sel kanker

lainnya seperti sel kanker MCF 7 dan kanker prostat Selain itu juga perlu

dilakukan optimasi dengan menggunakan pelarut lain untuk mendapatkan IC50

yang lebih aktif terhadap sel kanker payudara T47D

ix

ABSTRAK

UJI AKTIVITAS ANTIKANKER DAUN KUCAI (Allium odorum

L)TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA T47D SECARA In Vitro

DENGAN METODE MTT

(Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol)

Kucai (Allium odorum L) adalah tanaman yang berfungsi sebagai antioksidan

antikanker antibakteri serta antimikroba dan antiseptik karena mampu

menghambat bakteri patogen (penyebab penyakit) Penelitian ini bertujuan untuk

mengetahui aktivitas antikanker serta mengetahui golongan senyawa kimia dari

ekstrak yang positif pada daun kucai (Allium odorum L) terhadap sel kanker

payudara T47D secara in vitro dengan metode Microculture Tetrazolium Salt

(MTT) Assay Potensi adanya aktivitas antikanker dapat diketahui setelah

pembacaan data menggunakan elisa reader kemudian ditentukan besarnya IC50

dengan menggunakan analisis probit Suatu ekstrak dikatakan aktif sebagai

antikanker berdasarkan metode Microculture Tetrazolium Salt (MTT) Assay jika

harga IC50 lt 30 microgml Dari ekstrak yang diuji yaitu ekstrak n-heksana dan ekstrak

metanol ekstrak n-heksana memiliki harga IC50 sebesar 200484 microgml dan

ekstrak metanol sebesar 273445 microgml Nilai IC50 semua ekstrak daun kucai

terhadap sel kanker payudara T47D gt 100 microgml Berdasarkan National cancer

institute (NCI) nilai ini menunjukkan aktivitas antikanker ekstrak daun kucai

yang sangat lemah terhadap sel T47D Isolasi dan pengujian menggunakan pelarut

lain serta menggunakan sel lain masih diperlukan untuk pengembangan di masa

depan

Kata Kunci Daun Kucai (Allium odorum L) Sel T47D Microculture

Tetrazolium Salt (MTT) Assay n-Heksana Metanol

x

ABSTRACT

IN-VITRO ANTI-CANCER ACTIVITIES TEST OF Allium odorum L LEAF

EXTRACT ON T47D BREAST CANCER THROUGH MTT METHOD

( n-Heksane and Methanol Extracts)

Allium odorum L is a plant that have functions as an antioxidant anticancer

antibacterial antimicrobial and antiseptic with inhibition bacterial pathogens

capabilities This study aims to determine the anticancer activities and knowing

class of chemical compounds in the leaf positive extract Allium odorum L on

T47D breast cancer cells through in vitro microculture method Tetrazolium Salt

(MTT) assay Potential of anticancer activities known after lection of data by

ELISA tested then determined the magnitude of IC50 by probit analysis An

extract said to be active as anticancer based microculture method Tetrazolium Salt

(MTT) assay if the value of IC50 lt 30 ug ml The result of this study showed

that IC50 of n-heksane extract and methanol extract are 200484 mg ml and

273445 ug ml IC50 values of all Allium odorum L extract against breast cancer

cells on T47D gt 100 ug ml Based on the National Cancer Institute (NCI) the

value of anti-cancer activities of Allium odorum L leaf extract exhibits very weak

capabilities to against T47D cells Isolation and testing using other solvents and

cells are still needed for future development

Key words Allium odorum L Leaf T47D cells Microculture Tetrazolium Salt

(MTT) Assay n-Heksana Methanol

xi

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL i

LEMBAR PENGESAHAN ii

LEMBAR PENGUJIAN iii

KATA PENGANTAR iv

RINGKASAN vii

ABSTRAK ix

DAFTAR ISI xi

DAFTAR TABEL xiv

DAFTAR GAMBAR xv

DAFTAR LAMPIRAN xvi

DAFTAR SINGKATAN xvii

BAB 1 PENDAHULUAN 1

11 Latar belakang 1

12 Rumusan Masalah Penelitian 3

13 Tujuan Penelitian 4

14 Hipotesis Penelitian 4

15 Manfaat Penelitian 4

BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA 5

21 Tinjauan tentang Kucai 5

211 Klasifikasi 5

212 Sinonim 5

213 Nama Daerah 5

214 Morfologi 5

215 Penyebaran 6

216 Kandungan 6

217 Golongan Senyawa dalam Daun Kucai 7

218 Khasiat 8

22 Tinjauan tentang Kanker 9

221 Definisi 9

xii

222 Epidemiologi 9

223 Sifat Sel Kanker 10

224 Karsinogenesis 10

225 Siklus Pertumbuhan Sel 13

23 Tinjauan tentang Kanker Payudara 14

231 Definisi 14

232 Epidemiologi 15

233 Faktor Resiko 16

234 Gejala 17

235 Perkembangan Sel 17

24 Tinjauan Sel T47D 18

25 Tinjauan tentang Kultur Sel 19

26 Tinjauan Uji Microculture Tetrazolium Salt (MTT) Assay 21

261 Cara Menghitung Persentase Sel Hidup 22

27 Tinjauan tentang Ekstraksi 23

28 Tinjauan tentang Aktivitas Daun Kucai terhadap Sel Kanker Payudara

24

BAB 3 KERANGKA KONSEPTUAL 25

BAB 4 METODE PENELITIAN 28

41 Bahan Penelitian 28

411 Bahan Tanaman 28

412 Bahan Kimia 28

42 Alat-alat Penelitian 29

43 Variabel Penelitian 29

431 Variabel Bebas 29

432 Variabel Tergantung 30

44 Metode Penelitian 30

441 Rancangan Penelitian 30

442 Kerangka Operasional 31

443 Prosedur Kerja 32

4431 Pembuatan Ekstrak Bahan Uji 32

4432 Pembuatan Media 34

xiii

4433 Penumbuhan Sel 35

4434 Penggantian Media 35

4435 Panen Sel 36

4436 Perhitungan Sel 36

4437 Preparasi Sampel 38

4438 Pembuatan Larutan Induk dan Larutan Uji 38

4439 Uji Aktivitas Antikanker dengan Metode MTT 39

44310 Analisis Data 41

44311 Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) 41

BAB 5 HASIL PENELITIAN 43

51 Pembuatan Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 43

52 Perhitungan Sel T47D dan Volume Panenan Sel yang ditransfer 43

53 Uji Aktivitas Antikanker dari Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak

Metanol Daun Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker

Payudara T47D dengan Metode MTT 44

54 Penentuan Nilai IC50 Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun

Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker Payudara T47D

dengan Probit Analisis 47

55 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) 47

571 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Senyawa Flavonoid

47

571 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Senyawa Steroid 48

BAB 6 PEMBAHASAN 49

BAB 7 KESIMPULAN DAN SARAN 54

DAFTAR PUSTAKA 55

xiv

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

II1 Formula Baku Media Kultur 20

IV1 Kelompok Perlakuan Kultur Sel Kanker Payudara T47D Dalam Tiap

Percobaan 30

V1 Hasil Pembuatan Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 43

V2 Hasil Uji Kontrol Sel dan Kontrol Media 44

V3 Hasil Uji Aktivitas Antikanker dari Kontrol Positif Doksorubisin Sel Kanker

Payudara (T47D) dengan Metode MTT 45

V4 Hasil Uji Aktivitas Antikanker dari Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol

Daun Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker Payudara T47D

dengan Metode MTT 45

V5 Hasil penentuan nilai IC50 doksorubisin IC50 ekstrak n-heksana dan IC50

ekstrak metanol daun kucai (Allium odorum L) terhadap sel kanker payudara

T47D dengan analisis probit 47

xv

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

21 Kucai (Allium odorum L) 6

22 Struktur Flavonoid 7

23 Struktur Saponin Steroid dan Saponin Triterpenoid 8

24 Karsinogenesis 11

25 Pertumbuhan Sel 13

26 Perkembangan Kanker Payudara 18

27 Reaksi MTT 21

31 Skema Kerangkan Konseptual 27

41 Skema Kerangkan Operasional 31

42 Skema Pembuatan Ekstrak n-heksana dan metanol daun kucai 33

43 Perhitungan Sel 37

51 Ekstrak Kental Daun Kucai 43

52 Kondisi sel sebelum dan sesudah MTT di lihat di bawah mikroskop dengan

perbesaran 40x 44

53 Hubungan antara konsentrasi kontrol positif dan bahan uji terhadap prosentase

sel hidup kanker payudara T47D 46

54 Hasil KLT flavonoid daun kucai (Allium odorum L) 47

55 Hasil KLT terpenoid daun kucai (Allium odorum L) 48

xvi

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1 Daftar Riwayat Hidup 59

2 Surat Pernyataan 60

3 Surat Determinasi 61

4 Sertifikat Kultur Jaringan 62

5 Data Hasil Pembacaan Elisa reader 63

6 Pembuatan Larutan Uji Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 64

7 Pembuatan Konsentrasi Doksorubisin 65

8 Analisis Probit Kontrol Positif Doksorubisin 66

9 Analisis Probit Ekstrak n-Heksana 68

10 Analisis Probit EkstrakMetanol 70

11 Lampiran Foto 72

12 Kondisi Sel Doksorubisin Dilihat Dibawah Mikroskop dengan Perbesaran 40x

Lensa Objektif 75

13 Kondisi Sel Ekstrak n-Heksana Dilihat Dibawah Mikroskop dengan

Perbesaran 40x Lensa Objektif 76

14 Kondisi Sel Ekstrak Metanol Dilihat Dibawah Mikroskop dengan Perbesaran

40x Lensa Objektif 77

xvii

DAFTAR SINGKATAN

MTT Microculture Tetrazolium Salt

IC50 Inhibitori Concentration 50

NCI National Cancer Institute

WHO Word Health Organization

SKRT Survei Kesehatan Rumah Tangga

FBS Fetal Bovine Serum

DMSO Dimethyl sulfoxide

RPMI Rosewell Park Memorial Institute

SDS Sodium Duodecyl Suphate

PBS Phosphat Buffer Serum

LAF Laminar Air Flow

SPSS Program for Social Science

KLT Kromatografi Lapis Tipis

xviii

DAFTAR PUSTAKA

Agoes Azwar 2010 Tanaman Obat Indonesia (Buku 1) Salemba Medika

Jakarta

Amalina Nur Lia 2008 Uji Sitotoksik Ekstrak Etanol 70Buah Merica

Hitam (Piper nigrum L) Terhadap Sel Hela Skripsi Fakultas Farmasi

Universitas Muhammadiyah Surakarta

Anggraini Polis Novita 2008 Aktivitas Campuran Ekstrak Etanol Herba

Sambiloto dan Rimpang Kunyit Terhadap Sel Kanker Payudara

Manusia T47D In Vitro Dengan Metode MTT Skripsi Fakultas Farmasi

Universitas Airlangga

Astawan Made 2010 Kucai cegah kanker turunkan kolesterol

httpcybermedcbnnetidcbprtlcybermeddetailaspxx=Nutritionampy=cyb

ermed|0|0|6|565 (8 juli 2010)

Balmer CM Valley AW and Iannucci A 2005 Cancer treatment and

Chemotherapy In Dipiro JT Talbert RL Matzke GR Wells BG

and Posey LM (Eds) Pharmacotherapy A Pathofisiologic Approach

6th

Edition New York The McGraw-Hill Co Inc

Baradero wilfride yakobus 2007 Klien Kanker penerbit buku kedokteran

EGC Jakarta Hal 7 amp 38

Baskhara Ali Widi 2008 Sehat Murah Dengan Buah dan Sayuran Kreasi

Wacana Yogyakarta

Cahyono Bambang 2005 Bawang Daun Kanisius Yogyakarta Hal 12

Continuing Care Retirement Community (CCRC) 2009 Prosedur Uji MTT in

vitro Yogyakarta Universitas Gajah Mada

Chooiong hean 2007 Sayuran Khasiat Makanan dan Ubatan Kuala lumpur

Dalimartha Setiawan 2003 Ramuan Tradisional Untuk Pengobatan Kanker

Penebar Swadaya Jakarta Hal 1-6

De Jong Wim2004 Kanker apakah itu pengobatan Harapan Hidup dan

Dukungan Keluarga Arcan Jakarta hal 45 317

Departemen Kesehatan RI 1979 Farmakope Indonesia Edisi ke-3 Jakarta

Departemen Kesehatan hal 23-33

Departemen Kesehatan RI 1995 Farmakope Indonesia Edisi ke-4 Jakarta

Departemen Kesehatan hal 7

vii

RINGKASAN

UJI AKTIVITAS ANTIKANKER DAUN KUCAI (Allium odorum

L)TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA T47D SECARA In Vitro

DENGAN METODE MTT

(Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol)

Kanker merupakan suatu penyakit pertumbuhan sel yang tumbuhnya tidak

normal cepat dan tidak terkendali Sel-sel kanker akan terus membelah diri

terlepas dari pengendalian pertumbuhan dan tidak lagi menuruti hukum-hukum

pembiakan Bila pertumbuhan ini tidak cepat dihentikan dan diobati maka sel

kanker akan berkembang terus Sel kanker akan tumbuh menyusup ke jaringan

sekitarnya (invasif) lalu membuat anak sebar (metastasis) ke tempat yang lebih

jauh melalui pembuluh darah dan pembuluh darah getah bening Selanjutnya akan

tumbuh kanker baru di tempat lain sampai akhirnya menyebabkan kematian

penderitanya (Dalimartha 2003) Saat ini mulai dikembangkan obat antikanker

yang berasal dari tumbuh-tumbuhan yang memiliki efek terapi lebih baik

dibandingkan dengan pengobatan dengan menggunakan bahan kimia atau operasi

Salah satu tumbuhan yang memiliki khasiat untuk antikanker yaitu daun kucai

(Allium odorum L) Ekstrak daun kucai ( Allium odorum L ) mengandung

senyawa aktif berkhasiat obat seperti alkaloid flavonoid saponin dan

steroidtriterpenoid (Wulandari 2011) Berdasarkan penelitian pendahuluan yang

dilakukan oleh Wulandari 2011 diketahui ekstrak n-heksan dan ekstrak metanol

yang telah diuji didapatkan ekstrak n-heksan mempunyai harga LC50 lt 1000

microgml yaitu 80562 plusmn 853534 microgml Hal itu menunjukkan bahwa ekstrak n-

heksan daun kucai (Allium odorum L) mempunyai aktifitas antikanker menurut

BST (Wulandari 2011)

Selanjutnya akan di uji kembali untuk mengetahui ekstrak yang

menunjukkan aktivitas antikanker secara in vitro dengan metode MTT Terlebih

dahulu penelitian dimulai dengan pembuatan ekstrak daun kucai dengan metode

maserasi dan dilanjutkan dengan uji secara in vitro dengan metode MTT Hasil

dari uji tersebut kemudian diolah dengan menggunakan analisis probit Potensi

antikanker berdasarkan National cancer institute (NCI) Guideline Aktif (IC50 lt

30 microgml) moderat aktif (30 microgml le IC50 lt 100 microgml) tidak aktif (IC50 gt 100

microgml) (Haryadi 2012)

Microculture Tetrazolium Salt (MTT) Assay merupakan uji yang sensitif

kuantitatif dan terpercaya Reaksi MTT merupakan reaksi reduksi selular yang

didasarkan pada pemecahan garam tetrazolium berwarna kuning menjadi Kristal

formazan berwarna biru keunguan (CCRC 2009) Metode ini menggunakan sel

kanker payudara T47D sebagai sel coba Uji MTT digunakan untuk menentukan

parameter nilai IC50 yaitu bilangan yang menunjukkan konsentrasi ekstrak yang

mampu menghambat aktivitas sebesar 50 Semakin kecil nilai IC50

menunjukkan semakin tinggi aktivitas antikanker

Hasil dari ekstrak yang di uji yaitu ekstrak n-heksana dan ekstrak metanol

ekstrak n-heksana memiliki nilai IC50 sebesar 200484 microgml dan ekstrak metanol

sebesar 273445 microgml Hasil dari uji kromatografi lapis tipis (KLT) dilakukan

viii

hasil KLT menunjukkan adanya senyawa flavonoid dan triterpenoid padaekstrak

n-heksana daun kucai (Allium odorum L)

Kandungan kimia antikanker dari penelitian ini perlu dilakukan penelitian

lanjutan melakukan penelitian lebih lanjut dengan menggunakan jenis sel kanker

lainnya seperti sel kanker MCF 7 dan kanker prostat Selain itu juga perlu

dilakukan optimasi dengan menggunakan pelarut lain untuk mendapatkan IC50

yang lebih aktif terhadap sel kanker payudara T47D

ix

ABSTRAK

UJI AKTIVITAS ANTIKANKER DAUN KUCAI (Allium odorum

L)TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA T47D SECARA In Vitro

DENGAN METODE MTT

(Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol)

Kucai (Allium odorum L) adalah tanaman yang berfungsi sebagai antioksidan

antikanker antibakteri serta antimikroba dan antiseptik karena mampu

menghambat bakteri patogen (penyebab penyakit) Penelitian ini bertujuan untuk

mengetahui aktivitas antikanker serta mengetahui golongan senyawa kimia dari

ekstrak yang positif pada daun kucai (Allium odorum L) terhadap sel kanker

payudara T47D secara in vitro dengan metode Microculture Tetrazolium Salt

(MTT) Assay Potensi adanya aktivitas antikanker dapat diketahui setelah

pembacaan data menggunakan elisa reader kemudian ditentukan besarnya IC50

dengan menggunakan analisis probit Suatu ekstrak dikatakan aktif sebagai

antikanker berdasarkan metode Microculture Tetrazolium Salt (MTT) Assay jika

harga IC50 lt 30 microgml Dari ekstrak yang diuji yaitu ekstrak n-heksana dan ekstrak

metanol ekstrak n-heksana memiliki harga IC50 sebesar 200484 microgml dan

ekstrak metanol sebesar 273445 microgml Nilai IC50 semua ekstrak daun kucai

terhadap sel kanker payudara T47D gt 100 microgml Berdasarkan National cancer

institute (NCI) nilai ini menunjukkan aktivitas antikanker ekstrak daun kucai

yang sangat lemah terhadap sel T47D Isolasi dan pengujian menggunakan pelarut

lain serta menggunakan sel lain masih diperlukan untuk pengembangan di masa

depan

Kata Kunci Daun Kucai (Allium odorum L) Sel T47D Microculture

Tetrazolium Salt (MTT) Assay n-Heksana Metanol

x

ABSTRACT

IN-VITRO ANTI-CANCER ACTIVITIES TEST OF Allium odorum L LEAF

EXTRACT ON T47D BREAST CANCER THROUGH MTT METHOD

( n-Heksane and Methanol Extracts)

Allium odorum L is a plant that have functions as an antioxidant anticancer

antibacterial antimicrobial and antiseptic with inhibition bacterial pathogens

capabilities This study aims to determine the anticancer activities and knowing

class of chemical compounds in the leaf positive extract Allium odorum L on

T47D breast cancer cells through in vitro microculture method Tetrazolium Salt

(MTT) assay Potential of anticancer activities known after lection of data by

ELISA tested then determined the magnitude of IC50 by probit analysis An

extract said to be active as anticancer based microculture method Tetrazolium Salt

(MTT) assay if the value of IC50 lt 30 ug ml The result of this study showed

that IC50 of n-heksane extract and methanol extract are 200484 mg ml and

273445 ug ml IC50 values of all Allium odorum L extract against breast cancer

cells on T47D gt 100 ug ml Based on the National Cancer Institute (NCI) the

value of anti-cancer activities of Allium odorum L leaf extract exhibits very weak

capabilities to against T47D cells Isolation and testing using other solvents and

cells are still needed for future development

Key words Allium odorum L Leaf T47D cells Microculture Tetrazolium Salt

(MTT) Assay n-Heksana Methanol

xi

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL i

LEMBAR PENGESAHAN ii

LEMBAR PENGUJIAN iii

KATA PENGANTAR iv

RINGKASAN vii

ABSTRAK ix

DAFTAR ISI xi

DAFTAR TABEL xiv

DAFTAR GAMBAR xv

DAFTAR LAMPIRAN xvi

DAFTAR SINGKATAN xvii

BAB 1 PENDAHULUAN 1

11 Latar belakang 1

12 Rumusan Masalah Penelitian 3

13 Tujuan Penelitian 4

14 Hipotesis Penelitian 4

15 Manfaat Penelitian 4

BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA 5

21 Tinjauan tentang Kucai 5

211 Klasifikasi 5

212 Sinonim 5

213 Nama Daerah 5

214 Morfologi 5

215 Penyebaran 6

216 Kandungan 6

217 Golongan Senyawa dalam Daun Kucai 7

218 Khasiat 8

22 Tinjauan tentang Kanker 9

221 Definisi 9

xii

222 Epidemiologi 9

223 Sifat Sel Kanker 10

224 Karsinogenesis 10

225 Siklus Pertumbuhan Sel 13

23 Tinjauan tentang Kanker Payudara 14

231 Definisi 14

232 Epidemiologi 15

233 Faktor Resiko 16

234 Gejala 17

235 Perkembangan Sel 17

24 Tinjauan Sel T47D 18

25 Tinjauan tentang Kultur Sel 19

26 Tinjauan Uji Microculture Tetrazolium Salt (MTT) Assay 21

261 Cara Menghitung Persentase Sel Hidup 22

27 Tinjauan tentang Ekstraksi 23

28 Tinjauan tentang Aktivitas Daun Kucai terhadap Sel Kanker Payudara

24

BAB 3 KERANGKA KONSEPTUAL 25

BAB 4 METODE PENELITIAN 28

41 Bahan Penelitian 28

411 Bahan Tanaman 28

412 Bahan Kimia 28

42 Alat-alat Penelitian 29

43 Variabel Penelitian 29

431 Variabel Bebas 29

432 Variabel Tergantung 30

44 Metode Penelitian 30

441 Rancangan Penelitian 30

442 Kerangka Operasional 31

443 Prosedur Kerja 32

4431 Pembuatan Ekstrak Bahan Uji 32

4432 Pembuatan Media 34

xiii

4433 Penumbuhan Sel 35

4434 Penggantian Media 35

4435 Panen Sel 36

4436 Perhitungan Sel 36

4437 Preparasi Sampel 38

4438 Pembuatan Larutan Induk dan Larutan Uji 38

4439 Uji Aktivitas Antikanker dengan Metode MTT 39

44310 Analisis Data 41

44311 Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) 41

BAB 5 HASIL PENELITIAN 43

51 Pembuatan Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 43

52 Perhitungan Sel T47D dan Volume Panenan Sel yang ditransfer 43

53 Uji Aktivitas Antikanker dari Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak

Metanol Daun Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker

Payudara T47D dengan Metode MTT 44

54 Penentuan Nilai IC50 Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun

Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker Payudara T47D

dengan Probit Analisis 47

55 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) 47

571 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Senyawa Flavonoid

47

571 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Senyawa Steroid 48

BAB 6 PEMBAHASAN 49

BAB 7 KESIMPULAN DAN SARAN 54

DAFTAR PUSTAKA 55

xiv

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

II1 Formula Baku Media Kultur 20

IV1 Kelompok Perlakuan Kultur Sel Kanker Payudara T47D Dalam Tiap

Percobaan 30

V1 Hasil Pembuatan Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 43

V2 Hasil Uji Kontrol Sel dan Kontrol Media 44

V3 Hasil Uji Aktivitas Antikanker dari Kontrol Positif Doksorubisin Sel Kanker

Payudara (T47D) dengan Metode MTT 45

V4 Hasil Uji Aktivitas Antikanker dari Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol

Daun Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker Payudara T47D

dengan Metode MTT 45

V5 Hasil penentuan nilai IC50 doksorubisin IC50 ekstrak n-heksana dan IC50

ekstrak metanol daun kucai (Allium odorum L) terhadap sel kanker payudara

T47D dengan analisis probit 47

xv

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

21 Kucai (Allium odorum L) 6

22 Struktur Flavonoid 7

23 Struktur Saponin Steroid dan Saponin Triterpenoid 8

24 Karsinogenesis 11

25 Pertumbuhan Sel 13

26 Perkembangan Kanker Payudara 18

27 Reaksi MTT 21

31 Skema Kerangkan Konseptual 27

41 Skema Kerangkan Operasional 31

42 Skema Pembuatan Ekstrak n-heksana dan metanol daun kucai 33

43 Perhitungan Sel 37

51 Ekstrak Kental Daun Kucai 43

52 Kondisi sel sebelum dan sesudah MTT di lihat di bawah mikroskop dengan

perbesaran 40x 44

53 Hubungan antara konsentrasi kontrol positif dan bahan uji terhadap prosentase

sel hidup kanker payudara T47D 46

54 Hasil KLT flavonoid daun kucai (Allium odorum L) 47

55 Hasil KLT terpenoid daun kucai (Allium odorum L) 48

xvi

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1 Daftar Riwayat Hidup 59

2 Surat Pernyataan 60

3 Surat Determinasi 61

4 Sertifikat Kultur Jaringan 62

5 Data Hasil Pembacaan Elisa reader 63

6 Pembuatan Larutan Uji Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 64

7 Pembuatan Konsentrasi Doksorubisin 65

8 Analisis Probit Kontrol Positif Doksorubisin 66

9 Analisis Probit Ekstrak n-Heksana 68

10 Analisis Probit EkstrakMetanol 70

11 Lampiran Foto 72

12 Kondisi Sel Doksorubisin Dilihat Dibawah Mikroskop dengan Perbesaran 40x

Lensa Objektif 75

13 Kondisi Sel Ekstrak n-Heksana Dilihat Dibawah Mikroskop dengan

Perbesaran 40x Lensa Objektif 76

14 Kondisi Sel Ekstrak Metanol Dilihat Dibawah Mikroskop dengan Perbesaran

40x Lensa Objektif 77

xvii

DAFTAR SINGKATAN

MTT Microculture Tetrazolium Salt

IC50 Inhibitori Concentration 50

NCI National Cancer Institute

WHO Word Health Organization

SKRT Survei Kesehatan Rumah Tangga

FBS Fetal Bovine Serum

DMSO Dimethyl sulfoxide

RPMI Rosewell Park Memorial Institute

SDS Sodium Duodecyl Suphate

PBS Phosphat Buffer Serum

LAF Laminar Air Flow

SPSS Program for Social Science

KLT Kromatografi Lapis Tipis

xviii

DAFTAR PUSTAKA

Agoes Azwar 2010 Tanaman Obat Indonesia (Buku 1) Salemba Medika

Jakarta

Amalina Nur Lia 2008 Uji Sitotoksik Ekstrak Etanol 70Buah Merica

Hitam (Piper nigrum L) Terhadap Sel Hela Skripsi Fakultas Farmasi

Universitas Muhammadiyah Surakarta

Anggraini Polis Novita 2008 Aktivitas Campuran Ekstrak Etanol Herba

Sambiloto dan Rimpang Kunyit Terhadap Sel Kanker Payudara

Manusia T47D In Vitro Dengan Metode MTT Skripsi Fakultas Farmasi

Universitas Airlangga

Astawan Made 2010 Kucai cegah kanker turunkan kolesterol

httpcybermedcbnnetidcbprtlcybermeddetailaspxx=Nutritionampy=cyb

ermed|0|0|6|565 (8 juli 2010)

Balmer CM Valley AW and Iannucci A 2005 Cancer treatment and

Chemotherapy In Dipiro JT Talbert RL Matzke GR Wells BG

and Posey LM (Eds) Pharmacotherapy A Pathofisiologic Approach

6th

Edition New York The McGraw-Hill Co Inc

Baradero wilfride yakobus 2007 Klien Kanker penerbit buku kedokteran

EGC Jakarta Hal 7 amp 38

Baskhara Ali Widi 2008 Sehat Murah Dengan Buah dan Sayuran Kreasi

Wacana Yogyakarta

Cahyono Bambang 2005 Bawang Daun Kanisius Yogyakarta Hal 12

Continuing Care Retirement Community (CCRC) 2009 Prosedur Uji MTT in

vitro Yogyakarta Universitas Gajah Mada

Chooiong hean 2007 Sayuran Khasiat Makanan dan Ubatan Kuala lumpur

Dalimartha Setiawan 2003 Ramuan Tradisional Untuk Pengobatan Kanker

Penebar Swadaya Jakarta Hal 1-6

De Jong Wim2004 Kanker apakah itu pengobatan Harapan Hidup dan

Dukungan Keluarga Arcan Jakarta hal 45 317

Departemen Kesehatan RI 1979 Farmakope Indonesia Edisi ke-3 Jakarta

Departemen Kesehatan hal 23-33

Departemen Kesehatan RI 1995 Farmakope Indonesia Edisi ke-4 Jakarta

Departemen Kesehatan hal 7

viii

hasil KLT menunjukkan adanya senyawa flavonoid dan triterpenoid padaekstrak

n-heksana daun kucai (Allium odorum L)

Kandungan kimia antikanker dari penelitian ini perlu dilakukan penelitian

lanjutan melakukan penelitian lebih lanjut dengan menggunakan jenis sel kanker

lainnya seperti sel kanker MCF 7 dan kanker prostat Selain itu juga perlu

dilakukan optimasi dengan menggunakan pelarut lain untuk mendapatkan IC50

yang lebih aktif terhadap sel kanker payudara T47D

ix

ABSTRAK

UJI AKTIVITAS ANTIKANKER DAUN KUCAI (Allium odorum

L)TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA T47D SECARA In Vitro

DENGAN METODE MTT

(Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol)

Kucai (Allium odorum L) adalah tanaman yang berfungsi sebagai antioksidan

antikanker antibakteri serta antimikroba dan antiseptik karena mampu

menghambat bakteri patogen (penyebab penyakit) Penelitian ini bertujuan untuk

mengetahui aktivitas antikanker serta mengetahui golongan senyawa kimia dari

ekstrak yang positif pada daun kucai (Allium odorum L) terhadap sel kanker

payudara T47D secara in vitro dengan metode Microculture Tetrazolium Salt

(MTT) Assay Potensi adanya aktivitas antikanker dapat diketahui setelah

pembacaan data menggunakan elisa reader kemudian ditentukan besarnya IC50

dengan menggunakan analisis probit Suatu ekstrak dikatakan aktif sebagai

antikanker berdasarkan metode Microculture Tetrazolium Salt (MTT) Assay jika

harga IC50 lt 30 microgml Dari ekstrak yang diuji yaitu ekstrak n-heksana dan ekstrak

metanol ekstrak n-heksana memiliki harga IC50 sebesar 200484 microgml dan

ekstrak metanol sebesar 273445 microgml Nilai IC50 semua ekstrak daun kucai

terhadap sel kanker payudara T47D gt 100 microgml Berdasarkan National cancer

institute (NCI) nilai ini menunjukkan aktivitas antikanker ekstrak daun kucai

yang sangat lemah terhadap sel T47D Isolasi dan pengujian menggunakan pelarut

lain serta menggunakan sel lain masih diperlukan untuk pengembangan di masa

depan

Kata Kunci Daun Kucai (Allium odorum L) Sel T47D Microculture

Tetrazolium Salt (MTT) Assay n-Heksana Metanol

x

ABSTRACT

IN-VITRO ANTI-CANCER ACTIVITIES TEST OF Allium odorum L LEAF

EXTRACT ON T47D BREAST CANCER THROUGH MTT METHOD

( n-Heksane and Methanol Extracts)

Allium odorum L is a plant that have functions as an antioxidant anticancer

antibacterial antimicrobial and antiseptic with inhibition bacterial pathogens

capabilities This study aims to determine the anticancer activities and knowing

class of chemical compounds in the leaf positive extract Allium odorum L on

T47D breast cancer cells through in vitro microculture method Tetrazolium Salt

(MTT) assay Potential of anticancer activities known after lection of data by

ELISA tested then determined the magnitude of IC50 by probit analysis An

extract said to be active as anticancer based microculture method Tetrazolium Salt

(MTT) assay if the value of IC50 lt 30 ug ml The result of this study showed

that IC50 of n-heksane extract and methanol extract are 200484 mg ml and

273445 ug ml IC50 values of all Allium odorum L extract against breast cancer

cells on T47D gt 100 ug ml Based on the National Cancer Institute (NCI) the

value of anti-cancer activities of Allium odorum L leaf extract exhibits very weak

capabilities to against T47D cells Isolation and testing using other solvents and

cells are still needed for future development

Key words Allium odorum L Leaf T47D cells Microculture Tetrazolium Salt

(MTT) Assay n-Heksana Methanol

xi

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL i

LEMBAR PENGESAHAN ii

LEMBAR PENGUJIAN iii

KATA PENGANTAR iv

RINGKASAN vii

ABSTRAK ix

DAFTAR ISI xi

DAFTAR TABEL xiv

DAFTAR GAMBAR xv

DAFTAR LAMPIRAN xvi

DAFTAR SINGKATAN xvii

BAB 1 PENDAHULUAN 1

11 Latar belakang 1

12 Rumusan Masalah Penelitian 3

13 Tujuan Penelitian 4

14 Hipotesis Penelitian 4

15 Manfaat Penelitian 4

BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA 5

21 Tinjauan tentang Kucai 5

211 Klasifikasi 5

212 Sinonim 5

213 Nama Daerah 5

214 Morfologi 5

215 Penyebaran 6

216 Kandungan 6

217 Golongan Senyawa dalam Daun Kucai 7

218 Khasiat 8

22 Tinjauan tentang Kanker 9

221 Definisi 9

xii

222 Epidemiologi 9

223 Sifat Sel Kanker 10

224 Karsinogenesis 10

225 Siklus Pertumbuhan Sel 13

23 Tinjauan tentang Kanker Payudara 14

231 Definisi 14

232 Epidemiologi 15

233 Faktor Resiko 16

234 Gejala 17

235 Perkembangan Sel 17

24 Tinjauan Sel T47D 18

25 Tinjauan tentang Kultur Sel 19

26 Tinjauan Uji Microculture Tetrazolium Salt (MTT) Assay 21

261 Cara Menghitung Persentase Sel Hidup 22

27 Tinjauan tentang Ekstraksi 23

28 Tinjauan tentang Aktivitas Daun Kucai terhadap Sel Kanker Payudara

24

BAB 3 KERANGKA KONSEPTUAL 25

BAB 4 METODE PENELITIAN 28

41 Bahan Penelitian 28

411 Bahan Tanaman 28

412 Bahan Kimia 28

42 Alat-alat Penelitian 29

43 Variabel Penelitian 29

431 Variabel Bebas 29

432 Variabel Tergantung 30

44 Metode Penelitian 30

441 Rancangan Penelitian 30

442 Kerangka Operasional 31

443 Prosedur Kerja 32

4431 Pembuatan Ekstrak Bahan Uji 32

4432 Pembuatan Media 34

xiii

4433 Penumbuhan Sel 35

4434 Penggantian Media 35

4435 Panen Sel 36

4436 Perhitungan Sel 36

4437 Preparasi Sampel 38

4438 Pembuatan Larutan Induk dan Larutan Uji 38

4439 Uji Aktivitas Antikanker dengan Metode MTT 39

44310 Analisis Data 41

44311 Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) 41

BAB 5 HASIL PENELITIAN 43

51 Pembuatan Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 43

52 Perhitungan Sel T47D dan Volume Panenan Sel yang ditransfer 43

53 Uji Aktivitas Antikanker dari Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak

Metanol Daun Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker

Payudara T47D dengan Metode MTT 44

54 Penentuan Nilai IC50 Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun

Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker Payudara T47D

dengan Probit Analisis 47

55 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) 47

571 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Senyawa Flavonoid

47

571 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Senyawa Steroid 48

BAB 6 PEMBAHASAN 49

BAB 7 KESIMPULAN DAN SARAN 54

DAFTAR PUSTAKA 55

xiv

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

II1 Formula Baku Media Kultur 20

IV1 Kelompok Perlakuan Kultur Sel Kanker Payudara T47D Dalam Tiap

Percobaan 30

V1 Hasil Pembuatan Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 43

V2 Hasil Uji Kontrol Sel dan Kontrol Media 44

V3 Hasil Uji Aktivitas Antikanker dari Kontrol Positif Doksorubisin Sel Kanker

Payudara (T47D) dengan Metode MTT 45

V4 Hasil Uji Aktivitas Antikanker dari Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol

Daun Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker Payudara T47D

dengan Metode MTT 45

V5 Hasil penentuan nilai IC50 doksorubisin IC50 ekstrak n-heksana dan IC50

ekstrak metanol daun kucai (Allium odorum L) terhadap sel kanker payudara

T47D dengan analisis probit 47

xv

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

21 Kucai (Allium odorum L) 6

22 Struktur Flavonoid 7

23 Struktur Saponin Steroid dan Saponin Triterpenoid 8

24 Karsinogenesis 11

25 Pertumbuhan Sel 13

26 Perkembangan Kanker Payudara 18

27 Reaksi MTT 21

31 Skema Kerangkan Konseptual 27

41 Skema Kerangkan Operasional 31

42 Skema Pembuatan Ekstrak n-heksana dan metanol daun kucai 33

43 Perhitungan Sel 37

51 Ekstrak Kental Daun Kucai 43

52 Kondisi sel sebelum dan sesudah MTT di lihat di bawah mikroskop dengan

perbesaran 40x 44

53 Hubungan antara konsentrasi kontrol positif dan bahan uji terhadap prosentase

sel hidup kanker payudara T47D 46

54 Hasil KLT flavonoid daun kucai (Allium odorum L) 47

55 Hasil KLT terpenoid daun kucai (Allium odorum L) 48

xvi

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1 Daftar Riwayat Hidup 59

2 Surat Pernyataan 60

3 Surat Determinasi 61

4 Sertifikat Kultur Jaringan 62

5 Data Hasil Pembacaan Elisa reader 63

6 Pembuatan Larutan Uji Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 64

7 Pembuatan Konsentrasi Doksorubisin 65

8 Analisis Probit Kontrol Positif Doksorubisin 66

9 Analisis Probit Ekstrak n-Heksana 68

10 Analisis Probit EkstrakMetanol 70

11 Lampiran Foto 72

12 Kondisi Sel Doksorubisin Dilihat Dibawah Mikroskop dengan Perbesaran 40x

Lensa Objektif 75

13 Kondisi Sel Ekstrak n-Heksana Dilihat Dibawah Mikroskop dengan

Perbesaran 40x Lensa Objektif 76

14 Kondisi Sel Ekstrak Metanol Dilihat Dibawah Mikroskop dengan Perbesaran

40x Lensa Objektif 77

xvii

DAFTAR SINGKATAN

MTT Microculture Tetrazolium Salt

IC50 Inhibitori Concentration 50

NCI National Cancer Institute

WHO Word Health Organization

SKRT Survei Kesehatan Rumah Tangga

FBS Fetal Bovine Serum

DMSO Dimethyl sulfoxide

RPMI Rosewell Park Memorial Institute

SDS Sodium Duodecyl Suphate

PBS Phosphat Buffer Serum

LAF Laminar Air Flow

SPSS Program for Social Science

KLT Kromatografi Lapis Tipis

xviii

DAFTAR PUSTAKA

Agoes Azwar 2010 Tanaman Obat Indonesia (Buku 1) Salemba Medika

Jakarta

Amalina Nur Lia 2008 Uji Sitotoksik Ekstrak Etanol 70Buah Merica

Hitam (Piper nigrum L) Terhadap Sel Hela Skripsi Fakultas Farmasi

Universitas Muhammadiyah Surakarta

Anggraini Polis Novita 2008 Aktivitas Campuran Ekstrak Etanol Herba

Sambiloto dan Rimpang Kunyit Terhadap Sel Kanker Payudara

Manusia T47D In Vitro Dengan Metode MTT Skripsi Fakultas Farmasi

Universitas Airlangga

Astawan Made 2010 Kucai cegah kanker turunkan kolesterol

httpcybermedcbnnetidcbprtlcybermeddetailaspxx=Nutritionampy=cyb

ermed|0|0|6|565 (8 juli 2010)

Balmer CM Valley AW and Iannucci A 2005 Cancer treatment and

Chemotherapy In Dipiro JT Talbert RL Matzke GR Wells BG

and Posey LM (Eds) Pharmacotherapy A Pathofisiologic Approach

6th

Edition New York The McGraw-Hill Co Inc

Baradero wilfride yakobus 2007 Klien Kanker penerbit buku kedokteran

EGC Jakarta Hal 7 amp 38

Baskhara Ali Widi 2008 Sehat Murah Dengan Buah dan Sayuran Kreasi

Wacana Yogyakarta

Cahyono Bambang 2005 Bawang Daun Kanisius Yogyakarta Hal 12

Continuing Care Retirement Community (CCRC) 2009 Prosedur Uji MTT in

vitro Yogyakarta Universitas Gajah Mada

Chooiong hean 2007 Sayuran Khasiat Makanan dan Ubatan Kuala lumpur

Dalimartha Setiawan 2003 Ramuan Tradisional Untuk Pengobatan Kanker

Penebar Swadaya Jakarta Hal 1-6

De Jong Wim2004 Kanker apakah itu pengobatan Harapan Hidup dan

Dukungan Keluarga Arcan Jakarta hal 45 317

Departemen Kesehatan RI 1979 Farmakope Indonesia Edisi ke-3 Jakarta

Departemen Kesehatan hal 23-33

Departemen Kesehatan RI 1995 Farmakope Indonesia Edisi ke-4 Jakarta

Departemen Kesehatan hal 7

ix

ABSTRAK

UJI AKTIVITAS ANTIKANKER DAUN KUCAI (Allium odorum

L)TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA T47D SECARA In Vitro

DENGAN METODE MTT

(Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol)

Kucai (Allium odorum L) adalah tanaman yang berfungsi sebagai antioksidan

antikanker antibakteri serta antimikroba dan antiseptik karena mampu

menghambat bakteri patogen (penyebab penyakit) Penelitian ini bertujuan untuk

mengetahui aktivitas antikanker serta mengetahui golongan senyawa kimia dari

ekstrak yang positif pada daun kucai (Allium odorum L) terhadap sel kanker

payudara T47D secara in vitro dengan metode Microculture Tetrazolium Salt

(MTT) Assay Potensi adanya aktivitas antikanker dapat diketahui setelah

pembacaan data menggunakan elisa reader kemudian ditentukan besarnya IC50

dengan menggunakan analisis probit Suatu ekstrak dikatakan aktif sebagai

antikanker berdasarkan metode Microculture Tetrazolium Salt (MTT) Assay jika

harga IC50 lt 30 microgml Dari ekstrak yang diuji yaitu ekstrak n-heksana dan ekstrak

metanol ekstrak n-heksana memiliki harga IC50 sebesar 200484 microgml dan

ekstrak metanol sebesar 273445 microgml Nilai IC50 semua ekstrak daun kucai

terhadap sel kanker payudara T47D gt 100 microgml Berdasarkan National cancer

institute (NCI) nilai ini menunjukkan aktivitas antikanker ekstrak daun kucai

yang sangat lemah terhadap sel T47D Isolasi dan pengujian menggunakan pelarut

lain serta menggunakan sel lain masih diperlukan untuk pengembangan di masa

depan

Kata Kunci Daun Kucai (Allium odorum L) Sel T47D Microculture

Tetrazolium Salt (MTT) Assay n-Heksana Metanol

x

ABSTRACT

IN-VITRO ANTI-CANCER ACTIVITIES TEST OF Allium odorum L LEAF

EXTRACT ON T47D BREAST CANCER THROUGH MTT METHOD

( n-Heksane and Methanol Extracts)

Allium odorum L is a plant that have functions as an antioxidant anticancer

antibacterial antimicrobial and antiseptic with inhibition bacterial pathogens

capabilities This study aims to determine the anticancer activities and knowing

class of chemical compounds in the leaf positive extract Allium odorum L on

T47D breast cancer cells through in vitro microculture method Tetrazolium Salt

(MTT) assay Potential of anticancer activities known after lection of data by

ELISA tested then determined the magnitude of IC50 by probit analysis An

extract said to be active as anticancer based microculture method Tetrazolium Salt

(MTT) assay if the value of IC50 lt 30 ug ml The result of this study showed

that IC50 of n-heksane extract and methanol extract are 200484 mg ml and

273445 ug ml IC50 values of all Allium odorum L extract against breast cancer

cells on T47D gt 100 ug ml Based on the National Cancer Institute (NCI) the

value of anti-cancer activities of Allium odorum L leaf extract exhibits very weak

capabilities to against T47D cells Isolation and testing using other solvents and

cells are still needed for future development

Key words Allium odorum L Leaf T47D cells Microculture Tetrazolium Salt

(MTT) Assay n-Heksana Methanol

xi

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL i

LEMBAR PENGESAHAN ii

LEMBAR PENGUJIAN iii

KATA PENGANTAR iv

RINGKASAN vii

ABSTRAK ix

DAFTAR ISI xi

DAFTAR TABEL xiv

DAFTAR GAMBAR xv

DAFTAR LAMPIRAN xvi

DAFTAR SINGKATAN xvii

BAB 1 PENDAHULUAN 1

11 Latar belakang 1

12 Rumusan Masalah Penelitian 3

13 Tujuan Penelitian 4

14 Hipotesis Penelitian 4

15 Manfaat Penelitian 4

BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA 5

21 Tinjauan tentang Kucai 5

211 Klasifikasi 5

212 Sinonim 5

213 Nama Daerah 5

214 Morfologi 5

215 Penyebaran 6

216 Kandungan 6

217 Golongan Senyawa dalam Daun Kucai 7

218 Khasiat 8

22 Tinjauan tentang Kanker 9

221 Definisi 9

xii

222 Epidemiologi 9

223 Sifat Sel Kanker 10

224 Karsinogenesis 10

225 Siklus Pertumbuhan Sel 13

23 Tinjauan tentang Kanker Payudara 14

231 Definisi 14

232 Epidemiologi 15

233 Faktor Resiko 16

234 Gejala 17

235 Perkembangan Sel 17

24 Tinjauan Sel T47D 18

25 Tinjauan tentang Kultur Sel 19

26 Tinjauan Uji Microculture Tetrazolium Salt (MTT) Assay 21

261 Cara Menghitung Persentase Sel Hidup 22

27 Tinjauan tentang Ekstraksi 23

28 Tinjauan tentang Aktivitas Daun Kucai terhadap Sel Kanker Payudara

24

BAB 3 KERANGKA KONSEPTUAL 25

BAB 4 METODE PENELITIAN 28

41 Bahan Penelitian 28

411 Bahan Tanaman 28

412 Bahan Kimia 28

42 Alat-alat Penelitian 29

43 Variabel Penelitian 29

431 Variabel Bebas 29

432 Variabel Tergantung 30

44 Metode Penelitian 30

441 Rancangan Penelitian 30

442 Kerangka Operasional 31

443 Prosedur Kerja 32

4431 Pembuatan Ekstrak Bahan Uji 32

4432 Pembuatan Media 34

xiii

4433 Penumbuhan Sel 35

4434 Penggantian Media 35

4435 Panen Sel 36

4436 Perhitungan Sel 36

4437 Preparasi Sampel 38

4438 Pembuatan Larutan Induk dan Larutan Uji 38

4439 Uji Aktivitas Antikanker dengan Metode MTT 39

44310 Analisis Data 41

44311 Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) 41

BAB 5 HASIL PENELITIAN 43

51 Pembuatan Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 43

52 Perhitungan Sel T47D dan Volume Panenan Sel yang ditransfer 43

53 Uji Aktivitas Antikanker dari Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak

Metanol Daun Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker

Payudara T47D dengan Metode MTT 44

54 Penentuan Nilai IC50 Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun

Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker Payudara T47D

dengan Probit Analisis 47

55 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) 47

571 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Senyawa Flavonoid

47

571 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Senyawa Steroid 48

BAB 6 PEMBAHASAN 49

BAB 7 KESIMPULAN DAN SARAN 54

DAFTAR PUSTAKA 55

xiv

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

II1 Formula Baku Media Kultur 20

IV1 Kelompok Perlakuan Kultur Sel Kanker Payudara T47D Dalam Tiap

Percobaan 30

V1 Hasil Pembuatan Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 43

V2 Hasil Uji Kontrol Sel dan Kontrol Media 44

V3 Hasil Uji Aktivitas Antikanker dari Kontrol Positif Doksorubisin Sel Kanker

Payudara (T47D) dengan Metode MTT 45

V4 Hasil Uji Aktivitas Antikanker dari Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol

Daun Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker Payudara T47D

dengan Metode MTT 45

V5 Hasil penentuan nilai IC50 doksorubisin IC50 ekstrak n-heksana dan IC50

ekstrak metanol daun kucai (Allium odorum L) terhadap sel kanker payudara

T47D dengan analisis probit 47

xv

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

21 Kucai (Allium odorum L) 6

22 Struktur Flavonoid 7

23 Struktur Saponin Steroid dan Saponin Triterpenoid 8

24 Karsinogenesis 11

25 Pertumbuhan Sel 13

26 Perkembangan Kanker Payudara 18

27 Reaksi MTT 21

31 Skema Kerangkan Konseptual 27

41 Skema Kerangkan Operasional 31

42 Skema Pembuatan Ekstrak n-heksana dan metanol daun kucai 33

43 Perhitungan Sel 37

51 Ekstrak Kental Daun Kucai 43

52 Kondisi sel sebelum dan sesudah MTT di lihat di bawah mikroskop dengan

perbesaran 40x 44

53 Hubungan antara konsentrasi kontrol positif dan bahan uji terhadap prosentase

sel hidup kanker payudara T47D 46

54 Hasil KLT flavonoid daun kucai (Allium odorum L) 47

55 Hasil KLT terpenoid daun kucai (Allium odorum L) 48

xvi

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1 Daftar Riwayat Hidup 59

2 Surat Pernyataan 60

3 Surat Determinasi 61

4 Sertifikat Kultur Jaringan 62

5 Data Hasil Pembacaan Elisa reader 63

6 Pembuatan Larutan Uji Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 64

7 Pembuatan Konsentrasi Doksorubisin 65

8 Analisis Probit Kontrol Positif Doksorubisin 66

9 Analisis Probit Ekstrak n-Heksana 68

10 Analisis Probit EkstrakMetanol 70

11 Lampiran Foto 72

12 Kondisi Sel Doksorubisin Dilihat Dibawah Mikroskop dengan Perbesaran 40x

Lensa Objektif 75

13 Kondisi Sel Ekstrak n-Heksana Dilihat Dibawah Mikroskop dengan

Perbesaran 40x Lensa Objektif 76

14 Kondisi Sel Ekstrak Metanol Dilihat Dibawah Mikroskop dengan Perbesaran

40x Lensa Objektif 77

xvii

DAFTAR SINGKATAN

MTT Microculture Tetrazolium Salt

IC50 Inhibitori Concentration 50

NCI National Cancer Institute

WHO Word Health Organization

SKRT Survei Kesehatan Rumah Tangga

FBS Fetal Bovine Serum

DMSO Dimethyl sulfoxide

RPMI Rosewell Park Memorial Institute

SDS Sodium Duodecyl Suphate

PBS Phosphat Buffer Serum

LAF Laminar Air Flow

SPSS Program for Social Science

KLT Kromatografi Lapis Tipis

xviii

DAFTAR PUSTAKA

Agoes Azwar 2010 Tanaman Obat Indonesia (Buku 1) Salemba Medika

Jakarta

Amalina Nur Lia 2008 Uji Sitotoksik Ekstrak Etanol 70Buah Merica

Hitam (Piper nigrum L) Terhadap Sel Hela Skripsi Fakultas Farmasi

Universitas Muhammadiyah Surakarta

Anggraini Polis Novita 2008 Aktivitas Campuran Ekstrak Etanol Herba

Sambiloto dan Rimpang Kunyit Terhadap Sel Kanker Payudara

Manusia T47D In Vitro Dengan Metode MTT Skripsi Fakultas Farmasi

Universitas Airlangga

Astawan Made 2010 Kucai cegah kanker turunkan kolesterol

httpcybermedcbnnetidcbprtlcybermeddetailaspxx=Nutritionampy=cyb

ermed|0|0|6|565 (8 juli 2010)

Balmer CM Valley AW and Iannucci A 2005 Cancer treatment and

Chemotherapy In Dipiro JT Talbert RL Matzke GR Wells BG

and Posey LM (Eds) Pharmacotherapy A Pathofisiologic Approach

6th

Edition New York The McGraw-Hill Co Inc

Baradero wilfride yakobus 2007 Klien Kanker penerbit buku kedokteran

EGC Jakarta Hal 7 amp 38

Baskhara Ali Widi 2008 Sehat Murah Dengan Buah dan Sayuran Kreasi

Wacana Yogyakarta

Cahyono Bambang 2005 Bawang Daun Kanisius Yogyakarta Hal 12

Continuing Care Retirement Community (CCRC) 2009 Prosedur Uji MTT in

vitro Yogyakarta Universitas Gajah Mada

Chooiong hean 2007 Sayuran Khasiat Makanan dan Ubatan Kuala lumpur

Dalimartha Setiawan 2003 Ramuan Tradisional Untuk Pengobatan Kanker

Penebar Swadaya Jakarta Hal 1-6

De Jong Wim2004 Kanker apakah itu pengobatan Harapan Hidup dan

Dukungan Keluarga Arcan Jakarta hal 45 317

Departemen Kesehatan RI 1979 Farmakope Indonesia Edisi ke-3 Jakarta

Departemen Kesehatan hal 23-33

Departemen Kesehatan RI 1995 Farmakope Indonesia Edisi ke-4 Jakarta

Departemen Kesehatan hal 7

x

ABSTRACT

IN-VITRO ANTI-CANCER ACTIVITIES TEST OF Allium odorum L LEAF

EXTRACT ON T47D BREAST CANCER THROUGH MTT METHOD

( n-Heksane and Methanol Extracts)

Allium odorum L is a plant that have functions as an antioxidant anticancer

antibacterial antimicrobial and antiseptic with inhibition bacterial pathogens

capabilities This study aims to determine the anticancer activities and knowing

class of chemical compounds in the leaf positive extract Allium odorum L on

T47D breast cancer cells through in vitro microculture method Tetrazolium Salt

(MTT) assay Potential of anticancer activities known after lection of data by

ELISA tested then determined the magnitude of IC50 by probit analysis An

extract said to be active as anticancer based microculture method Tetrazolium Salt

(MTT) assay if the value of IC50 lt 30 ug ml The result of this study showed

that IC50 of n-heksane extract and methanol extract are 200484 mg ml and

273445 ug ml IC50 values of all Allium odorum L extract against breast cancer

cells on T47D gt 100 ug ml Based on the National Cancer Institute (NCI) the

value of anti-cancer activities of Allium odorum L leaf extract exhibits very weak

capabilities to against T47D cells Isolation and testing using other solvents and

cells are still needed for future development

Key words Allium odorum L Leaf T47D cells Microculture Tetrazolium Salt

(MTT) Assay n-Heksana Methanol

xi

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL i

LEMBAR PENGESAHAN ii

LEMBAR PENGUJIAN iii

KATA PENGANTAR iv

RINGKASAN vii

ABSTRAK ix

DAFTAR ISI xi

DAFTAR TABEL xiv

DAFTAR GAMBAR xv

DAFTAR LAMPIRAN xvi

DAFTAR SINGKATAN xvii

BAB 1 PENDAHULUAN 1

11 Latar belakang 1

12 Rumusan Masalah Penelitian 3

13 Tujuan Penelitian 4

14 Hipotesis Penelitian 4

15 Manfaat Penelitian 4

BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA 5

21 Tinjauan tentang Kucai 5

211 Klasifikasi 5

212 Sinonim 5

213 Nama Daerah 5

214 Morfologi 5

215 Penyebaran 6

216 Kandungan 6

217 Golongan Senyawa dalam Daun Kucai 7

218 Khasiat 8

22 Tinjauan tentang Kanker 9

221 Definisi 9

xii

222 Epidemiologi 9

223 Sifat Sel Kanker 10

224 Karsinogenesis 10

225 Siklus Pertumbuhan Sel 13

23 Tinjauan tentang Kanker Payudara 14

231 Definisi 14

232 Epidemiologi 15

233 Faktor Resiko 16

234 Gejala 17

235 Perkembangan Sel 17

24 Tinjauan Sel T47D 18

25 Tinjauan tentang Kultur Sel 19

26 Tinjauan Uji Microculture Tetrazolium Salt (MTT) Assay 21

261 Cara Menghitung Persentase Sel Hidup 22

27 Tinjauan tentang Ekstraksi 23

28 Tinjauan tentang Aktivitas Daun Kucai terhadap Sel Kanker Payudara

24

BAB 3 KERANGKA KONSEPTUAL 25

BAB 4 METODE PENELITIAN 28

41 Bahan Penelitian 28

411 Bahan Tanaman 28

412 Bahan Kimia 28

42 Alat-alat Penelitian 29

43 Variabel Penelitian 29

431 Variabel Bebas 29

432 Variabel Tergantung 30

44 Metode Penelitian 30

441 Rancangan Penelitian 30

442 Kerangka Operasional 31

443 Prosedur Kerja 32

4431 Pembuatan Ekstrak Bahan Uji 32

4432 Pembuatan Media 34

xiii

4433 Penumbuhan Sel 35

4434 Penggantian Media 35

4435 Panen Sel 36

4436 Perhitungan Sel 36

4437 Preparasi Sampel 38

4438 Pembuatan Larutan Induk dan Larutan Uji 38

4439 Uji Aktivitas Antikanker dengan Metode MTT 39

44310 Analisis Data 41

44311 Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) 41

BAB 5 HASIL PENELITIAN 43

51 Pembuatan Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 43

52 Perhitungan Sel T47D dan Volume Panenan Sel yang ditransfer 43

53 Uji Aktivitas Antikanker dari Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak

Metanol Daun Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker

Payudara T47D dengan Metode MTT 44

54 Penentuan Nilai IC50 Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun

Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker Payudara T47D

dengan Probit Analisis 47

55 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) 47

571 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Senyawa Flavonoid

47

571 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Senyawa Steroid 48

BAB 6 PEMBAHASAN 49

BAB 7 KESIMPULAN DAN SARAN 54

DAFTAR PUSTAKA 55

xiv

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

II1 Formula Baku Media Kultur 20

IV1 Kelompok Perlakuan Kultur Sel Kanker Payudara T47D Dalam Tiap

Percobaan 30

V1 Hasil Pembuatan Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 43

V2 Hasil Uji Kontrol Sel dan Kontrol Media 44

V3 Hasil Uji Aktivitas Antikanker dari Kontrol Positif Doksorubisin Sel Kanker

Payudara (T47D) dengan Metode MTT 45

V4 Hasil Uji Aktivitas Antikanker dari Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol

Daun Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker Payudara T47D

dengan Metode MTT 45

V5 Hasil penentuan nilai IC50 doksorubisin IC50 ekstrak n-heksana dan IC50

ekstrak metanol daun kucai (Allium odorum L) terhadap sel kanker payudara

T47D dengan analisis probit 47

xv

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

21 Kucai (Allium odorum L) 6

22 Struktur Flavonoid 7

23 Struktur Saponin Steroid dan Saponin Triterpenoid 8

24 Karsinogenesis 11

25 Pertumbuhan Sel 13

26 Perkembangan Kanker Payudara 18

27 Reaksi MTT 21

31 Skema Kerangkan Konseptual 27

41 Skema Kerangkan Operasional 31

42 Skema Pembuatan Ekstrak n-heksana dan metanol daun kucai 33

43 Perhitungan Sel 37

51 Ekstrak Kental Daun Kucai 43

52 Kondisi sel sebelum dan sesudah MTT di lihat di bawah mikroskop dengan

perbesaran 40x 44

53 Hubungan antara konsentrasi kontrol positif dan bahan uji terhadap prosentase

sel hidup kanker payudara T47D 46

54 Hasil KLT flavonoid daun kucai (Allium odorum L) 47

55 Hasil KLT terpenoid daun kucai (Allium odorum L) 48

xvi

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1 Daftar Riwayat Hidup 59

2 Surat Pernyataan 60

3 Surat Determinasi 61

4 Sertifikat Kultur Jaringan 62

5 Data Hasil Pembacaan Elisa reader 63

6 Pembuatan Larutan Uji Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 64

7 Pembuatan Konsentrasi Doksorubisin 65

8 Analisis Probit Kontrol Positif Doksorubisin 66

9 Analisis Probit Ekstrak n-Heksana 68

10 Analisis Probit EkstrakMetanol 70

11 Lampiran Foto 72

12 Kondisi Sel Doksorubisin Dilihat Dibawah Mikroskop dengan Perbesaran 40x

Lensa Objektif 75

13 Kondisi Sel Ekstrak n-Heksana Dilihat Dibawah Mikroskop dengan

Perbesaran 40x Lensa Objektif 76

14 Kondisi Sel Ekstrak Metanol Dilihat Dibawah Mikroskop dengan Perbesaran

40x Lensa Objektif 77

xvii

DAFTAR SINGKATAN

MTT Microculture Tetrazolium Salt

IC50 Inhibitori Concentration 50

NCI National Cancer Institute

WHO Word Health Organization

SKRT Survei Kesehatan Rumah Tangga

FBS Fetal Bovine Serum

DMSO Dimethyl sulfoxide

RPMI Rosewell Park Memorial Institute

SDS Sodium Duodecyl Suphate

PBS Phosphat Buffer Serum

LAF Laminar Air Flow

SPSS Program for Social Science

KLT Kromatografi Lapis Tipis

xviii

DAFTAR PUSTAKA

Agoes Azwar 2010 Tanaman Obat Indonesia (Buku 1) Salemba Medika

Jakarta

Amalina Nur Lia 2008 Uji Sitotoksik Ekstrak Etanol 70Buah Merica

Hitam (Piper nigrum L) Terhadap Sel Hela Skripsi Fakultas Farmasi

Universitas Muhammadiyah Surakarta

Anggraini Polis Novita 2008 Aktivitas Campuran Ekstrak Etanol Herba

Sambiloto dan Rimpang Kunyit Terhadap Sel Kanker Payudara

Manusia T47D In Vitro Dengan Metode MTT Skripsi Fakultas Farmasi

Universitas Airlangga

Astawan Made 2010 Kucai cegah kanker turunkan kolesterol

httpcybermedcbnnetidcbprtlcybermeddetailaspxx=Nutritionampy=cyb

ermed|0|0|6|565 (8 juli 2010)

Balmer CM Valley AW and Iannucci A 2005 Cancer treatment and

Chemotherapy In Dipiro JT Talbert RL Matzke GR Wells BG

and Posey LM (Eds) Pharmacotherapy A Pathofisiologic Approach

6th

Edition New York The McGraw-Hill Co Inc

Baradero wilfride yakobus 2007 Klien Kanker penerbit buku kedokteran

EGC Jakarta Hal 7 amp 38

Baskhara Ali Widi 2008 Sehat Murah Dengan Buah dan Sayuran Kreasi

Wacana Yogyakarta

Cahyono Bambang 2005 Bawang Daun Kanisius Yogyakarta Hal 12

Continuing Care Retirement Community (CCRC) 2009 Prosedur Uji MTT in

vitro Yogyakarta Universitas Gajah Mada

Chooiong hean 2007 Sayuran Khasiat Makanan dan Ubatan Kuala lumpur

Dalimartha Setiawan 2003 Ramuan Tradisional Untuk Pengobatan Kanker

Penebar Swadaya Jakarta Hal 1-6

De Jong Wim2004 Kanker apakah itu pengobatan Harapan Hidup dan

Dukungan Keluarga Arcan Jakarta hal 45 317

Departemen Kesehatan RI 1979 Farmakope Indonesia Edisi ke-3 Jakarta

Departemen Kesehatan hal 23-33

Departemen Kesehatan RI 1995 Farmakope Indonesia Edisi ke-4 Jakarta

Departemen Kesehatan hal 7

xi

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL i

LEMBAR PENGESAHAN ii

LEMBAR PENGUJIAN iii

KATA PENGANTAR iv

RINGKASAN vii

ABSTRAK ix

DAFTAR ISI xi

DAFTAR TABEL xiv

DAFTAR GAMBAR xv

DAFTAR LAMPIRAN xvi

DAFTAR SINGKATAN xvii

BAB 1 PENDAHULUAN 1

11 Latar belakang 1

12 Rumusan Masalah Penelitian 3

13 Tujuan Penelitian 4

14 Hipotesis Penelitian 4

15 Manfaat Penelitian 4

BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA 5

21 Tinjauan tentang Kucai 5

211 Klasifikasi 5

212 Sinonim 5

213 Nama Daerah 5

214 Morfologi 5

215 Penyebaran 6

216 Kandungan 6

217 Golongan Senyawa dalam Daun Kucai 7

218 Khasiat 8

22 Tinjauan tentang Kanker 9

221 Definisi 9

xii

222 Epidemiologi 9

223 Sifat Sel Kanker 10

224 Karsinogenesis 10

225 Siklus Pertumbuhan Sel 13

23 Tinjauan tentang Kanker Payudara 14

231 Definisi 14

232 Epidemiologi 15

233 Faktor Resiko 16

234 Gejala 17

235 Perkembangan Sel 17

24 Tinjauan Sel T47D 18

25 Tinjauan tentang Kultur Sel 19

26 Tinjauan Uji Microculture Tetrazolium Salt (MTT) Assay 21

261 Cara Menghitung Persentase Sel Hidup 22

27 Tinjauan tentang Ekstraksi 23

28 Tinjauan tentang Aktivitas Daun Kucai terhadap Sel Kanker Payudara

24

BAB 3 KERANGKA KONSEPTUAL 25

BAB 4 METODE PENELITIAN 28

41 Bahan Penelitian 28

411 Bahan Tanaman 28

412 Bahan Kimia 28

42 Alat-alat Penelitian 29

43 Variabel Penelitian 29

431 Variabel Bebas 29

432 Variabel Tergantung 30

44 Metode Penelitian 30

441 Rancangan Penelitian 30

442 Kerangka Operasional 31

443 Prosedur Kerja 32

4431 Pembuatan Ekstrak Bahan Uji 32

4432 Pembuatan Media 34

xiii

4433 Penumbuhan Sel 35

4434 Penggantian Media 35

4435 Panen Sel 36

4436 Perhitungan Sel 36

4437 Preparasi Sampel 38

4438 Pembuatan Larutan Induk dan Larutan Uji 38

4439 Uji Aktivitas Antikanker dengan Metode MTT 39

44310 Analisis Data 41

44311 Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) 41

BAB 5 HASIL PENELITIAN 43

51 Pembuatan Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 43

52 Perhitungan Sel T47D dan Volume Panenan Sel yang ditransfer 43

53 Uji Aktivitas Antikanker dari Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak

Metanol Daun Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker

Payudara T47D dengan Metode MTT 44

54 Penentuan Nilai IC50 Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun

Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker Payudara T47D

dengan Probit Analisis 47

55 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) 47

571 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Senyawa Flavonoid

47

571 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Senyawa Steroid 48

BAB 6 PEMBAHASAN 49

BAB 7 KESIMPULAN DAN SARAN 54

DAFTAR PUSTAKA 55

xiv

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

II1 Formula Baku Media Kultur 20

IV1 Kelompok Perlakuan Kultur Sel Kanker Payudara T47D Dalam Tiap

Percobaan 30

V1 Hasil Pembuatan Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 43

V2 Hasil Uji Kontrol Sel dan Kontrol Media 44

V3 Hasil Uji Aktivitas Antikanker dari Kontrol Positif Doksorubisin Sel Kanker

Payudara (T47D) dengan Metode MTT 45

V4 Hasil Uji Aktivitas Antikanker dari Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol

Daun Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker Payudara T47D

dengan Metode MTT 45

V5 Hasil penentuan nilai IC50 doksorubisin IC50 ekstrak n-heksana dan IC50

ekstrak metanol daun kucai (Allium odorum L) terhadap sel kanker payudara

T47D dengan analisis probit 47

xv

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

21 Kucai (Allium odorum L) 6

22 Struktur Flavonoid 7

23 Struktur Saponin Steroid dan Saponin Triterpenoid 8

24 Karsinogenesis 11

25 Pertumbuhan Sel 13

26 Perkembangan Kanker Payudara 18

27 Reaksi MTT 21

31 Skema Kerangkan Konseptual 27

41 Skema Kerangkan Operasional 31

42 Skema Pembuatan Ekstrak n-heksana dan metanol daun kucai 33

43 Perhitungan Sel 37

51 Ekstrak Kental Daun Kucai 43

52 Kondisi sel sebelum dan sesudah MTT di lihat di bawah mikroskop dengan

perbesaran 40x 44

53 Hubungan antara konsentrasi kontrol positif dan bahan uji terhadap prosentase

sel hidup kanker payudara T47D 46

54 Hasil KLT flavonoid daun kucai (Allium odorum L) 47

55 Hasil KLT terpenoid daun kucai (Allium odorum L) 48

xvi

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1 Daftar Riwayat Hidup 59

2 Surat Pernyataan 60

3 Surat Determinasi 61

4 Sertifikat Kultur Jaringan 62

5 Data Hasil Pembacaan Elisa reader 63

6 Pembuatan Larutan Uji Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 64

7 Pembuatan Konsentrasi Doksorubisin 65

8 Analisis Probit Kontrol Positif Doksorubisin 66

9 Analisis Probit Ekstrak n-Heksana 68

10 Analisis Probit EkstrakMetanol 70

11 Lampiran Foto 72

12 Kondisi Sel Doksorubisin Dilihat Dibawah Mikroskop dengan Perbesaran 40x

Lensa Objektif 75

13 Kondisi Sel Ekstrak n-Heksana Dilihat Dibawah Mikroskop dengan

Perbesaran 40x Lensa Objektif 76

14 Kondisi Sel Ekstrak Metanol Dilihat Dibawah Mikroskop dengan Perbesaran

40x Lensa Objektif 77

xvii

DAFTAR SINGKATAN

MTT Microculture Tetrazolium Salt

IC50 Inhibitori Concentration 50

NCI National Cancer Institute

WHO Word Health Organization

SKRT Survei Kesehatan Rumah Tangga

FBS Fetal Bovine Serum

DMSO Dimethyl sulfoxide

RPMI Rosewell Park Memorial Institute

SDS Sodium Duodecyl Suphate

PBS Phosphat Buffer Serum

LAF Laminar Air Flow

SPSS Program for Social Science

KLT Kromatografi Lapis Tipis

xviii

DAFTAR PUSTAKA

Agoes Azwar 2010 Tanaman Obat Indonesia (Buku 1) Salemba Medika

Jakarta

Amalina Nur Lia 2008 Uji Sitotoksik Ekstrak Etanol 70Buah Merica

Hitam (Piper nigrum L) Terhadap Sel Hela Skripsi Fakultas Farmasi

Universitas Muhammadiyah Surakarta

Anggraini Polis Novita 2008 Aktivitas Campuran Ekstrak Etanol Herba

Sambiloto dan Rimpang Kunyit Terhadap Sel Kanker Payudara

Manusia T47D In Vitro Dengan Metode MTT Skripsi Fakultas Farmasi

Universitas Airlangga

Astawan Made 2010 Kucai cegah kanker turunkan kolesterol

httpcybermedcbnnetidcbprtlcybermeddetailaspxx=Nutritionampy=cyb

ermed|0|0|6|565 (8 juli 2010)

Balmer CM Valley AW and Iannucci A 2005 Cancer treatment and

Chemotherapy In Dipiro JT Talbert RL Matzke GR Wells BG

and Posey LM (Eds) Pharmacotherapy A Pathofisiologic Approach

6th

Edition New York The McGraw-Hill Co Inc

Baradero wilfride yakobus 2007 Klien Kanker penerbit buku kedokteran

EGC Jakarta Hal 7 amp 38

Baskhara Ali Widi 2008 Sehat Murah Dengan Buah dan Sayuran Kreasi

Wacana Yogyakarta

Cahyono Bambang 2005 Bawang Daun Kanisius Yogyakarta Hal 12

Continuing Care Retirement Community (CCRC) 2009 Prosedur Uji MTT in

vitro Yogyakarta Universitas Gajah Mada

Chooiong hean 2007 Sayuran Khasiat Makanan dan Ubatan Kuala lumpur

Dalimartha Setiawan 2003 Ramuan Tradisional Untuk Pengobatan Kanker

Penebar Swadaya Jakarta Hal 1-6

De Jong Wim2004 Kanker apakah itu pengobatan Harapan Hidup dan

Dukungan Keluarga Arcan Jakarta hal 45 317

Departemen Kesehatan RI 1979 Farmakope Indonesia Edisi ke-3 Jakarta

Departemen Kesehatan hal 23-33

Departemen Kesehatan RI 1995 Farmakope Indonesia Edisi ke-4 Jakarta

Departemen Kesehatan hal 7

xii

222 Epidemiologi 9

223 Sifat Sel Kanker 10

224 Karsinogenesis 10

225 Siklus Pertumbuhan Sel 13

23 Tinjauan tentang Kanker Payudara 14

231 Definisi 14

232 Epidemiologi 15

233 Faktor Resiko 16

234 Gejala 17

235 Perkembangan Sel 17

24 Tinjauan Sel T47D 18

25 Tinjauan tentang Kultur Sel 19

26 Tinjauan Uji Microculture Tetrazolium Salt (MTT) Assay 21

261 Cara Menghitung Persentase Sel Hidup 22

27 Tinjauan tentang Ekstraksi 23

28 Tinjauan tentang Aktivitas Daun Kucai terhadap Sel Kanker Payudara

24

BAB 3 KERANGKA KONSEPTUAL 25

BAB 4 METODE PENELITIAN 28

41 Bahan Penelitian 28

411 Bahan Tanaman 28

412 Bahan Kimia 28

42 Alat-alat Penelitian 29

43 Variabel Penelitian 29

431 Variabel Bebas 29

432 Variabel Tergantung 30

44 Metode Penelitian 30

441 Rancangan Penelitian 30

442 Kerangka Operasional 31

443 Prosedur Kerja 32

4431 Pembuatan Ekstrak Bahan Uji 32

4432 Pembuatan Media 34

xiii

4433 Penumbuhan Sel 35

4434 Penggantian Media 35

4435 Panen Sel 36

4436 Perhitungan Sel 36

4437 Preparasi Sampel 38

4438 Pembuatan Larutan Induk dan Larutan Uji 38

4439 Uji Aktivitas Antikanker dengan Metode MTT 39

44310 Analisis Data 41

44311 Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) 41

BAB 5 HASIL PENELITIAN 43

51 Pembuatan Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 43

52 Perhitungan Sel T47D dan Volume Panenan Sel yang ditransfer 43

53 Uji Aktivitas Antikanker dari Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak

Metanol Daun Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker

Payudara T47D dengan Metode MTT 44

54 Penentuan Nilai IC50 Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun

Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker Payudara T47D

dengan Probit Analisis 47

55 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) 47

571 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Senyawa Flavonoid

47

571 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Senyawa Steroid 48

BAB 6 PEMBAHASAN 49

BAB 7 KESIMPULAN DAN SARAN 54

DAFTAR PUSTAKA 55

xiv

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

II1 Formula Baku Media Kultur 20

IV1 Kelompok Perlakuan Kultur Sel Kanker Payudara T47D Dalam Tiap

Percobaan 30

V1 Hasil Pembuatan Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 43

V2 Hasil Uji Kontrol Sel dan Kontrol Media 44

V3 Hasil Uji Aktivitas Antikanker dari Kontrol Positif Doksorubisin Sel Kanker

Payudara (T47D) dengan Metode MTT 45

V4 Hasil Uji Aktivitas Antikanker dari Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol

Daun Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker Payudara T47D

dengan Metode MTT 45

V5 Hasil penentuan nilai IC50 doksorubisin IC50 ekstrak n-heksana dan IC50

ekstrak metanol daun kucai (Allium odorum L) terhadap sel kanker payudara

T47D dengan analisis probit 47

xv

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

21 Kucai (Allium odorum L) 6

22 Struktur Flavonoid 7

23 Struktur Saponin Steroid dan Saponin Triterpenoid 8

24 Karsinogenesis 11

25 Pertumbuhan Sel 13

26 Perkembangan Kanker Payudara 18

27 Reaksi MTT 21

31 Skema Kerangkan Konseptual 27

41 Skema Kerangkan Operasional 31

42 Skema Pembuatan Ekstrak n-heksana dan metanol daun kucai 33

43 Perhitungan Sel 37

51 Ekstrak Kental Daun Kucai 43

52 Kondisi sel sebelum dan sesudah MTT di lihat di bawah mikroskop dengan

perbesaran 40x 44

53 Hubungan antara konsentrasi kontrol positif dan bahan uji terhadap prosentase

sel hidup kanker payudara T47D 46

54 Hasil KLT flavonoid daun kucai (Allium odorum L) 47

55 Hasil KLT terpenoid daun kucai (Allium odorum L) 48

xvi

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1 Daftar Riwayat Hidup 59

2 Surat Pernyataan 60

3 Surat Determinasi 61

4 Sertifikat Kultur Jaringan 62

5 Data Hasil Pembacaan Elisa reader 63

6 Pembuatan Larutan Uji Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 64

7 Pembuatan Konsentrasi Doksorubisin 65

8 Analisis Probit Kontrol Positif Doksorubisin 66

9 Analisis Probit Ekstrak n-Heksana 68

10 Analisis Probit EkstrakMetanol 70

11 Lampiran Foto 72

12 Kondisi Sel Doksorubisin Dilihat Dibawah Mikroskop dengan Perbesaran 40x

Lensa Objektif 75

13 Kondisi Sel Ekstrak n-Heksana Dilihat Dibawah Mikroskop dengan

Perbesaran 40x Lensa Objektif 76

14 Kondisi Sel Ekstrak Metanol Dilihat Dibawah Mikroskop dengan Perbesaran

40x Lensa Objektif 77

xvii

DAFTAR SINGKATAN

MTT Microculture Tetrazolium Salt

IC50 Inhibitori Concentration 50

NCI National Cancer Institute

WHO Word Health Organization

SKRT Survei Kesehatan Rumah Tangga

FBS Fetal Bovine Serum

DMSO Dimethyl sulfoxide

RPMI Rosewell Park Memorial Institute

SDS Sodium Duodecyl Suphate

PBS Phosphat Buffer Serum

LAF Laminar Air Flow

SPSS Program for Social Science

KLT Kromatografi Lapis Tipis

xviii

DAFTAR PUSTAKA

Agoes Azwar 2010 Tanaman Obat Indonesia (Buku 1) Salemba Medika

Jakarta

Amalina Nur Lia 2008 Uji Sitotoksik Ekstrak Etanol 70Buah Merica

Hitam (Piper nigrum L) Terhadap Sel Hela Skripsi Fakultas Farmasi

Universitas Muhammadiyah Surakarta

Anggraini Polis Novita 2008 Aktivitas Campuran Ekstrak Etanol Herba

Sambiloto dan Rimpang Kunyit Terhadap Sel Kanker Payudara

Manusia T47D In Vitro Dengan Metode MTT Skripsi Fakultas Farmasi

Universitas Airlangga

Astawan Made 2010 Kucai cegah kanker turunkan kolesterol

httpcybermedcbnnetidcbprtlcybermeddetailaspxx=Nutritionampy=cyb

ermed|0|0|6|565 (8 juli 2010)

Balmer CM Valley AW and Iannucci A 2005 Cancer treatment and

Chemotherapy In Dipiro JT Talbert RL Matzke GR Wells BG

and Posey LM (Eds) Pharmacotherapy A Pathofisiologic Approach

6th

Edition New York The McGraw-Hill Co Inc

Baradero wilfride yakobus 2007 Klien Kanker penerbit buku kedokteran

EGC Jakarta Hal 7 amp 38

Baskhara Ali Widi 2008 Sehat Murah Dengan Buah dan Sayuran Kreasi

Wacana Yogyakarta

Cahyono Bambang 2005 Bawang Daun Kanisius Yogyakarta Hal 12

Continuing Care Retirement Community (CCRC) 2009 Prosedur Uji MTT in

vitro Yogyakarta Universitas Gajah Mada

Chooiong hean 2007 Sayuran Khasiat Makanan dan Ubatan Kuala lumpur

Dalimartha Setiawan 2003 Ramuan Tradisional Untuk Pengobatan Kanker

Penebar Swadaya Jakarta Hal 1-6

De Jong Wim2004 Kanker apakah itu pengobatan Harapan Hidup dan

Dukungan Keluarga Arcan Jakarta hal 45 317

Departemen Kesehatan RI 1979 Farmakope Indonesia Edisi ke-3 Jakarta

Departemen Kesehatan hal 23-33

Departemen Kesehatan RI 1995 Farmakope Indonesia Edisi ke-4 Jakarta

Departemen Kesehatan hal 7

xiii

4433 Penumbuhan Sel 35

4434 Penggantian Media 35

4435 Panen Sel 36

4436 Perhitungan Sel 36

4437 Preparasi Sampel 38

4438 Pembuatan Larutan Induk dan Larutan Uji 38

4439 Uji Aktivitas Antikanker dengan Metode MTT 39

44310 Analisis Data 41

44311 Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) 41

BAB 5 HASIL PENELITIAN 43

51 Pembuatan Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 43

52 Perhitungan Sel T47D dan Volume Panenan Sel yang ditransfer 43

53 Uji Aktivitas Antikanker dari Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak

Metanol Daun Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker

Payudara T47D dengan Metode MTT 44

54 Penentuan Nilai IC50 Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun

Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker Payudara T47D

dengan Probit Analisis 47

55 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) 47

571 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Senyawa Flavonoid

47

571 Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Senyawa Steroid 48

BAB 6 PEMBAHASAN 49

BAB 7 KESIMPULAN DAN SARAN 54

DAFTAR PUSTAKA 55

xiv

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

II1 Formula Baku Media Kultur 20

IV1 Kelompok Perlakuan Kultur Sel Kanker Payudara T47D Dalam Tiap

Percobaan 30

V1 Hasil Pembuatan Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 43

V2 Hasil Uji Kontrol Sel dan Kontrol Media 44

V3 Hasil Uji Aktivitas Antikanker dari Kontrol Positif Doksorubisin Sel Kanker

Payudara (T47D) dengan Metode MTT 45

V4 Hasil Uji Aktivitas Antikanker dari Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol

Daun Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker Payudara T47D

dengan Metode MTT 45

V5 Hasil penentuan nilai IC50 doksorubisin IC50 ekstrak n-heksana dan IC50

ekstrak metanol daun kucai (Allium odorum L) terhadap sel kanker payudara

T47D dengan analisis probit 47

xv

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

21 Kucai (Allium odorum L) 6

22 Struktur Flavonoid 7

23 Struktur Saponin Steroid dan Saponin Triterpenoid 8

24 Karsinogenesis 11

25 Pertumbuhan Sel 13

26 Perkembangan Kanker Payudara 18

27 Reaksi MTT 21

31 Skema Kerangkan Konseptual 27

41 Skema Kerangkan Operasional 31

42 Skema Pembuatan Ekstrak n-heksana dan metanol daun kucai 33

43 Perhitungan Sel 37

51 Ekstrak Kental Daun Kucai 43

52 Kondisi sel sebelum dan sesudah MTT di lihat di bawah mikroskop dengan

perbesaran 40x 44

53 Hubungan antara konsentrasi kontrol positif dan bahan uji terhadap prosentase

sel hidup kanker payudara T47D 46

54 Hasil KLT flavonoid daun kucai (Allium odorum L) 47

55 Hasil KLT terpenoid daun kucai (Allium odorum L) 48

xvi

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1 Daftar Riwayat Hidup 59

2 Surat Pernyataan 60

3 Surat Determinasi 61

4 Sertifikat Kultur Jaringan 62

5 Data Hasil Pembacaan Elisa reader 63

6 Pembuatan Larutan Uji Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 64

7 Pembuatan Konsentrasi Doksorubisin 65

8 Analisis Probit Kontrol Positif Doksorubisin 66

9 Analisis Probit Ekstrak n-Heksana 68

10 Analisis Probit EkstrakMetanol 70

11 Lampiran Foto 72

12 Kondisi Sel Doksorubisin Dilihat Dibawah Mikroskop dengan Perbesaran 40x

Lensa Objektif 75

13 Kondisi Sel Ekstrak n-Heksana Dilihat Dibawah Mikroskop dengan

Perbesaran 40x Lensa Objektif 76

14 Kondisi Sel Ekstrak Metanol Dilihat Dibawah Mikroskop dengan Perbesaran

40x Lensa Objektif 77

xvii

DAFTAR SINGKATAN

MTT Microculture Tetrazolium Salt

IC50 Inhibitori Concentration 50

NCI National Cancer Institute

WHO Word Health Organization

SKRT Survei Kesehatan Rumah Tangga

FBS Fetal Bovine Serum

DMSO Dimethyl sulfoxide

RPMI Rosewell Park Memorial Institute

SDS Sodium Duodecyl Suphate

PBS Phosphat Buffer Serum

LAF Laminar Air Flow

SPSS Program for Social Science

KLT Kromatografi Lapis Tipis

xviii

DAFTAR PUSTAKA

Agoes Azwar 2010 Tanaman Obat Indonesia (Buku 1) Salemba Medika

Jakarta

Amalina Nur Lia 2008 Uji Sitotoksik Ekstrak Etanol 70Buah Merica

Hitam (Piper nigrum L) Terhadap Sel Hela Skripsi Fakultas Farmasi

Universitas Muhammadiyah Surakarta

Anggraini Polis Novita 2008 Aktivitas Campuran Ekstrak Etanol Herba

Sambiloto dan Rimpang Kunyit Terhadap Sel Kanker Payudara

Manusia T47D In Vitro Dengan Metode MTT Skripsi Fakultas Farmasi

Universitas Airlangga

Astawan Made 2010 Kucai cegah kanker turunkan kolesterol

httpcybermedcbnnetidcbprtlcybermeddetailaspxx=Nutritionampy=cyb

ermed|0|0|6|565 (8 juli 2010)

Balmer CM Valley AW and Iannucci A 2005 Cancer treatment and

Chemotherapy In Dipiro JT Talbert RL Matzke GR Wells BG

and Posey LM (Eds) Pharmacotherapy A Pathofisiologic Approach

6th

Edition New York The McGraw-Hill Co Inc

Baradero wilfride yakobus 2007 Klien Kanker penerbit buku kedokteran

EGC Jakarta Hal 7 amp 38

Baskhara Ali Widi 2008 Sehat Murah Dengan Buah dan Sayuran Kreasi

Wacana Yogyakarta

Cahyono Bambang 2005 Bawang Daun Kanisius Yogyakarta Hal 12

Continuing Care Retirement Community (CCRC) 2009 Prosedur Uji MTT in

vitro Yogyakarta Universitas Gajah Mada

Chooiong hean 2007 Sayuran Khasiat Makanan dan Ubatan Kuala lumpur

Dalimartha Setiawan 2003 Ramuan Tradisional Untuk Pengobatan Kanker

Penebar Swadaya Jakarta Hal 1-6

De Jong Wim2004 Kanker apakah itu pengobatan Harapan Hidup dan

Dukungan Keluarga Arcan Jakarta hal 45 317

Departemen Kesehatan RI 1979 Farmakope Indonesia Edisi ke-3 Jakarta

Departemen Kesehatan hal 23-33

Departemen Kesehatan RI 1995 Farmakope Indonesia Edisi ke-4 Jakarta

Departemen Kesehatan hal 7

xiv

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

II1 Formula Baku Media Kultur 20

IV1 Kelompok Perlakuan Kultur Sel Kanker Payudara T47D Dalam Tiap

Percobaan 30

V1 Hasil Pembuatan Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 43

V2 Hasil Uji Kontrol Sel dan Kontrol Media 44

V3 Hasil Uji Aktivitas Antikanker dari Kontrol Positif Doksorubisin Sel Kanker

Payudara (T47D) dengan Metode MTT 45

V4 Hasil Uji Aktivitas Antikanker dari Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol

Daun Kucai (Allium odorum L) Terhadap Sel Kanker Payudara T47D

dengan Metode MTT 45

V5 Hasil penentuan nilai IC50 doksorubisin IC50 ekstrak n-heksana dan IC50

ekstrak metanol daun kucai (Allium odorum L) terhadap sel kanker payudara

T47D dengan analisis probit 47

xv

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

21 Kucai (Allium odorum L) 6

22 Struktur Flavonoid 7

23 Struktur Saponin Steroid dan Saponin Triterpenoid 8

24 Karsinogenesis 11

25 Pertumbuhan Sel 13

26 Perkembangan Kanker Payudara 18

27 Reaksi MTT 21

31 Skema Kerangkan Konseptual 27

41 Skema Kerangkan Operasional 31

42 Skema Pembuatan Ekstrak n-heksana dan metanol daun kucai 33

43 Perhitungan Sel 37

51 Ekstrak Kental Daun Kucai 43

52 Kondisi sel sebelum dan sesudah MTT di lihat di bawah mikroskop dengan

perbesaran 40x 44

53 Hubungan antara konsentrasi kontrol positif dan bahan uji terhadap prosentase

sel hidup kanker payudara T47D 46

54 Hasil KLT flavonoid daun kucai (Allium odorum L) 47

55 Hasil KLT terpenoid daun kucai (Allium odorum L) 48

xvi

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1 Daftar Riwayat Hidup 59

2 Surat Pernyataan 60

3 Surat Determinasi 61

4 Sertifikat Kultur Jaringan 62

5 Data Hasil Pembacaan Elisa reader 63

6 Pembuatan Larutan Uji Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 64

7 Pembuatan Konsentrasi Doksorubisin 65

8 Analisis Probit Kontrol Positif Doksorubisin 66

9 Analisis Probit Ekstrak n-Heksana 68

10 Analisis Probit EkstrakMetanol 70

11 Lampiran Foto 72

12 Kondisi Sel Doksorubisin Dilihat Dibawah Mikroskop dengan Perbesaran 40x

Lensa Objektif 75

13 Kondisi Sel Ekstrak n-Heksana Dilihat Dibawah Mikroskop dengan

Perbesaran 40x Lensa Objektif 76

14 Kondisi Sel Ekstrak Metanol Dilihat Dibawah Mikroskop dengan Perbesaran

40x Lensa Objektif 77

xvii

DAFTAR SINGKATAN

MTT Microculture Tetrazolium Salt

IC50 Inhibitori Concentration 50

NCI National Cancer Institute

WHO Word Health Organization

SKRT Survei Kesehatan Rumah Tangga

FBS Fetal Bovine Serum

DMSO Dimethyl sulfoxide

RPMI Rosewell Park Memorial Institute

SDS Sodium Duodecyl Suphate

PBS Phosphat Buffer Serum

LAF Laminar Air Flow

SPSS Program for Social Science

KLT Kromatografi Lapis Tipis

xviii

DAFTAR PUSTAKA

Agoes Azwar 2010 Tanaman Obat Indonesia (Buku 1) Salemba Medika

Jakarta

Amalina Nur Lia 2008 Uji Sitotoksik Ekstrak Etanol 70Buah Merica

Hitam (Piper nigrum L) Terhadap Sel Hela Skripsi Fakultas Farmasi

Universitas Muhammadiyah Surakarta

Anggraini Polis Novita 2008 Aktivitas Campuran Ekstrak Etanol Herba

Sambiloto dan Rimpang Kunyit Terhadap Sel Kanker Payudara

Manusia T47D In Vitro Dengan Metode MTT Skripsi Fakultas Farmasi

Universitas Airlangga

Astawan Made 2010 Kucai cegah kanker turunkan kolesterol

httpcybermedcbnnetidcbprtlcybermeddetailaspxx=Nutritionampy=cyb

ermed|0|0|6|565 (8 juli 2010)

Balmer CM Valley AW and Iannucci A 2005 Cancer treatment and

Chemotherapy In Dipiro JT Talbert RL Matzke GR Wells BG

and Posey LM (Eds) Pharmacotherapy A Pathofisiologic Approach

6th

Edition New York The McGraw-Hill Co Inc

Baradero wilfride yakobus 2007 Klien Kanker penerbit buku kedokteran

EGC Jakarta Hal 7 amp 38

Baskhara Ali Widi 2008 Sehat Murah Dengan Buah dan Sayuran Kreasi

Wacana Yogyakarta

Cahyono Bambang 2005 Bawang Daun Kanisius Yogyakarta Hal 12

Continuing Care Retirement Community (CCRC) 2009 Prosedur Uji MTT in

vitro Yogyakarta Universitas Gajah Mada

Chooiong hean 2007 Sayuran Khasiat Makanan dan Ubatan Kuala lumpur

Dalimartha Setiawan 2003 Ramuan Tradisional Untuk Pengobatan Kanker

Penebar Swadaya Jakarta Hal 1-6

De Jong Wim2004 Kanker apakah itu pengobatan Harapan Hidup dan

Dukungan Keluarga Arcan Jakarta hal 45 317

Departemen Kesehatan RI 1979 Farmakope Indonesia Edisi ke-3 Jakarta

Departemen Kesehatan hal 23-33

Departemen Kesehatan RI 1995 Farmakope Indonesia Edisi ke-4 Jakarta

Departemen Kesehatan hal 7

xv

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

21 Kucai (Allium odorum L) 6

22 Struktur Flavonoid 7

23 Struktur Saponin Steroid dan Saponin Triterpenoid 8

24 Karsinogenesis 11

25 Pertumbuhan Sel 13

26 Perkembangan Kanker Payudara 18

27 Reaksi MTT 21

31 Skema Kerangkan Konseptual 27

41 Skema Kerangkan Operasional 31

42 Skema Pembuatan Ekstrak n-heksana dan metanol daun kucai 33

43 Perhitungan Sel 37

51 Ekstrak Kental Daun Kucai 43

52 Kondisi sel sebelum dan sesudah MTT di lihat di bawah mikroskop dengan

perbesaran 40x 44

53 Hubungan antara konsentrasi kontrol positif dan bahan uji terhadap prosentase

sel hidup kanker payudara T47D 46

54 Hasil KLT flavonoid daun kucai (Allium odorum L) 47

55 Hasil KLT terpenoid daun kucai (Allium odorum L) 48

xvi

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1 Daftar Riwayat Hidup 59

2 Surat Pernyataan 60

3 Surat Determinasi 61

4 Sertifikat Kultur Jaringan 62

5 Data Hasil Pembacaan Elisa reader 63

6 Pembuatan Larutan Uji Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 64

7 Pembuatan Konsentrasi Doksorubisin 65

8 Analisis Probit Kontrol Positif Doksorubisin 66

9 Analisis Probit Ekstrak n-Heksana 68

10 Analisis Probit EkstrakMetanol 70

11 Lampiran Foto 72

12 Kondisi Sel Doksorubisin Dilihat Dibawah Mikroskop dengan Perbesaran 40x

Lensa Objektif 75

13 Kondisi Sel Ekstrak n-Heksana Dilihat Dibawah Mikroskop dengan

Perbesaran 40x Lensa Objektif 76

14 Kondisi Sel Ekstrak Metanol Dilihat Dibawah Mikroskop dengan Perbesaran

40x Lensa Objektif 77

xvii

DAFTAR SINGKATAN

MTT Microculture Tetrazolium Salt

IC50 Inhibitori Concentration 50

NCI National Cancer Institute

WHO Word Health Organization

SKRT Survei Kesehatan Rumah Tangga

FBS Fetal Bovine Serum

DMSO Dimethyl sulfoxide

RPMI Rosewell Park Memorial Institute

SDS Sodium Duodecyl Suphate

PBS Phosphat Buffer Serum

LAF Laminar Air Flow

SPSS Program for Social Science

KLT Kromatografi Lapis Tipis

xviii

DAFTAR PUSTAKA

Agoes Azwar 2010 Tanaman Obat Indonesia (Buku 1) Salemba Medika

Jakarta

Amalina Nur Lia 2008 Uji Sitotoksik Ekstrak Etanol 70Buah Merica

Hitam (Piper nigrum L) Terhadap Sel Hela Skripsi Fakultas Farmasi

Universitas Muhammadiyah Surakarta

Anggraini Polis Novita 2008 Aktivitas Campuran Ekstrak Etanol Herba

Sambiloto dan Rimpang Kunyit Terhadap Sel Kanker Payudara

Manusia T47D In Vitro Dengan Metode MTT Skripsi Fakultas Farmasi

Universitas Airlangga

Astawan Made 2010 Kucai cegah kanker turunkan kolesterol

httpcybermedcbnnetidcbprtlcybermeddetailaspxx=Nutritionampy=cyb

ermed|0|0|6|565 (8 juli 2010)

Balmer CM Valley AW and Iannucci A 2005 Cancer treatment and

Chemotherapy In Dipiro JT Talbert RL Matzke GR Wells BG

and Posey LM (Eds) Pharmacotherapy A Pathofisiologic Approach

6th

Edition New York The McGraw-Hill Co Inc

Baradero wilfride yakobus 2007 Klien Kanker penerbit buku kedokteran

EGC Jakarta Hal 7 amp 38

Baskhara Ali Widi 2008 Sehat Murah Dengan Buah dan Sayuran Kreasi

Wacana Yogyakarta

Cahyono Bambang 2005 Bawang Daun Kanisius Yogyakarta Hal 12

Continuing Care Retirement Community (CCRC) 2009 Prosedur Uji MTT in

vitro Yogyakarta Universitas Gajah Mada

Chooiong hean 2007 Sayuran Khasiat Makanan dan Ubatan Kuala lumpur

Dalimartha Setiawan 2003 Ramuan Tradisional Untuk Pengobatan Kanker

Penebar Swadaya Jakarta Hal 1-6

De Jong Wim2004 Kanker apakah itu pengobatan Harapan Hidup dan

Dukungan Keluarga Arcan Jakarta hal 45 317

Departemen Kesehatan RI 1979 Farmakope Indonesia Edisi ke-3 Jakarta

Departemen Kesehatan hal 23-33

Departemen Kesehatan RI 1995 Farmakope Indonesia Edisi ke-4 Jakarta

Departemen Kesehatan hal 7

xvi

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1 Daftar Riwayat Hidup 59

2 Surat Pernyataan 60

3 Surat Determinasi 61

4 Sertifikat Kultur Jaringan 62

5 Data Hasil Pembacaan Elisa reader 63

6 Pembuatan Larutan Uji Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol Daun Kucai

(Allium odorum L) 64

7 Pembuatan Konsentrasi Doksorubisin 65

8 Analisis Probit Kontrol Positif Doksorubisin 66

9 Analisis Probit Ekstrak n-Heksana 68

10 Analisis Probit EkstrakMetanol 70

11 Lampiran Foto 72

12 Kondisi Sel Doksorubisin Dilihat Dibawah Mikroskop dengan Perbesaran 40x

Lensa Objektif 75

13 Kondisi Sel Ekstrak n-Heksana Dilihat Dibawah Mikroskop dengan

Perbesaran 40x Lensa Objektif 76

14 Kondisi Sel Ekstrak Metanol Dilihat Dibawah Mikroskop dengan Perbesaran

40x Lensa Objektif 77

xvii

DAFTAR SINGKATAN

MTT Microculture Tetrazolium Salt

IC50 Inhibitori Concentration 50

NCI National Cancer Institute

WHO Word Health Organization

SKRT Survei Kesehatan Rumah Tangga

FBS Fetal Bovine Serum

DMSO Dimethyl sulfoxide

RPMI Rosewell Park Memorial Institute

SDS Sodium Duodecyl Suphate

PBS Phosphat Buffer Serum

LAF Laminar Air Flow

SPSS Program for Social Science

KLT Kromatografi Lapis Tipis

xviii

DAFTAR PUSTAKA

Agoes Azwar 2010 Tanaman Obat Indonesia (Buku 1) Salemba Medika

Jakarta

Amalina Nur Lia 2008 Uji Sitotoksik Ekstrak Etanol 70Buah Merica

Hitam (Piper nigrum L) Terhadap Sel Hela Skripsi Fakultas Farmasi

Universitas Muhammadiyah Surakarta

Anggraini Polis Novita 2008 Aktivitas Campuran Ekstrak Etanol Herba

Sambiloto dan Rimpang Kunyit Terhadap Sel Kanker Payudara

Manusia T47D In Vitro Dengan Metode MTT Skripsi Fakultas Farmasi

Universitas Airlangga

Astawan Made 2010 Kucai cegah kanker turunkan kolesterol

httpcybermedcbnnetidcbprtlcybermeddetailaspxx=Nutritionampy=cyb

ermed|0|0|6|565 (8 juli 2010)

Balmer CM Valley AW and Iannucci A 2005 Cancer treatment and

Chemotherapy In Dipiro JT Talbert RL Matzke GR Wells BG

and Posey LM (Eds) Pharmacotherapy A Pathofisiologic Approach

6th

Edition New York The McGraw-Hill Co Inc

Baradero wilfride yakobus 2007 Klien Kanker penerbit buku kedokteran

EGC Jakarta Hal 7 amp 38

Baskhara Ali Widi 2008 Sehat Murah Dengan Buah dan Sayuran Kreasi

Wacana Yogyakarta

Cahyono Bambang 2005 Bawang Daun Kanisius Yogyakarta Hal 12

Continuing Care Retirement Community (CCRC) 2009 Prosedur Uji MTT in

vitro Yogyakarta Universitas Gajah Mada

Chooiong hean 2007 Sayuran Khasiat Makanan dan Ubatan Kuala lumpur

Dalimartha Setiawan 2003 Ramuan Tradisional Untuk Pengobatan Kanker

Penebar Swadaya Jakarta Hal 1-6

De Jong Wim2004 Kanker apakah itu pengobatan Harapan Hidup dan

Dukungan Keluarga Arcan Jakarta hal 45 317

Departemen Kesehatan RI 1979 Farmakope Indonesia Edisi ke-3 Jakarta

Departemen Kesehatan hal 23-33

Departemen Kesehatan RI 1995 Farmakope Indonesia Edisi ke-4 Jakarta

Departemen Kesehatan hal 7

xvii

DAFTAR SINGKATAN

MTT Microculture Tetrazolium Salt

IC50 Inhibitori Concentration 50

NCI National Cancer Institute

WHO Word Health Organization

SKRT Survei Kesehatan Rumah Tangga

FBS Fetal Bovine Serum

DMSO Dimethyl sulfoxide

RPMI Rosewell Park Memorial Institute

SDS Sodium Duodecyl Suphate

PBS Phosphat Buffer Serum

LAF Laminar Air Flow

SPSS Program for Social Science

KLT Kromatografi Lapis Tipis

xviii

DAFTAR PUSTAKA

Agoes Azwar 2010 Tanaman Obat Indonesia (Buku 1) Salemba Medika

Jakarta

Amalina Nur Lia 2008 Uji Sitotoksik Ekstrak Etanol 70Buah Merica

Hitam (Piper nigrum L) Terhadap Sel Hela Skripsi Fakultas Farmasi

Universitas Muhammadiyah Surakarta

Anggraini Polis Novita 2008 Aktivitas Campuran Ekstrak Etanol Herba

Sambiloto dan Rimpang Kunyit Terhadap Sel Kanker Payudara

Manusia T47D In Vitro Dengan Metode MTT Skripsi Fakultas Farmasi

Universitas Airlangga

Astawan Made 2010 Kucai cegah kanker turunkan kolesterol

httpcybermedcbnnetidcbprtlcybermeddetailaspxx=Nutritionampy=cyb

ermed|0|0|6|565 (8 juli 2010)

Balmer CM Valley AW and Iannucci A 2005 Cancer treatment and

Chemotherapy In Dipiro JT Talbert RL Matzke GR Wells BG

and Posey LM (Eds) Pharmacotherapy A Pathofisiologic Approach

6th

Edition New York The McGraw-Hill Co Inc

Baradero wilfride yakobus 2007 Klien Kanker penerbit buku kedokteran

EGC Jakarta Hal 7 amp 38

Baskhara Ali Widi 2008 Sehat Murah Dengan Buah dan Sayuran Kreasi

Wacana Yogyakarta

Cahyono Bambang 2005 Bawang Daun Kanisius Yogyakarta Hal 12

Continuing Care Retirement Community (CCRC) 2009 Prosedur Uji MTT in

vitro Yogyakarta Universitas Gajah Mada

Chooiong hean 2007 Sayuran Khasiat Makanan dan Ubatan Kuala lumpur

Dalimartha Setiawan 2003 Ramuan Tradisional Untuk Pengobatan Kanker

Penebar Swadaya Jakarta Hal 1-6

De Jong Wim2004 Kanker apakah itu pengobatan Harapan Hidup dan

Dukungan Keluarga Arcan Jakarta hal 45 317

Departemen Kesehatan RI 1979 Farmakope Indonesia Edisi ke-3 Jakarta

Departemen Kesehatan hal 23-33

Departemen Kesehatan RI 1995 Farmakope Indonesia Edisi ke-4 Jakarta

Departemen Kesehatan hal 7

xviii

DAFTAR PUSTAKA

Agoes Azwar 2010 Tanaman Obat Indonesia (Buku 1) Salemba Medika

Jakarta

Amalina Nur Lia 2008 Uji Sitotoksik Ekstrak Etanol 70Buah Merica

Hitam (Piper nigrum L) Terhadap Sel Hela Skripsi Fakultas Farmasi

Universitas Muhammadiyah Surakarta

Anggraini Polis Novita 2008 Aktivitas Campuran Ekstrak Etanol Herba

Sambiloto dan Rimpang Kunyit Terhadap Sel Kanker Payudara

Manusia T47D In Vitro Dengan Metode MTT Skripsi Fakultas Farmasi

Universitas Airlangga

Astawan Made 2010 Kucai cegah kanker turunkan kolesterol

httpcybermedcbnnetidcbprtlcybermeddetailaspxx=Nutritionampy=cyb

ermed|0|0|6|565 (8 juli 2010)

Balmer CM Valley AW and Iannucci A 2005 Cancer treatment and

Chemotherapy In Dipiro JT Talbert RL Matzke GR Wells BG

and Posey LM (Eds) Pharmacotherapy A Pathofisiologic Approach

6th

Edition New York The McGraw-Hill Co Inc

Baradero wilfride yakobus 2007 Klien Kanker penerbit buku kedokteran

EGC Jakarta Hal 7 amp 38

Baskhara Ali Widi 2008 Sehat Murah Dengan Buah dan Sayuran Kreasi

Wacana Yogyakarta

Cahyono Bambang 2005 Bawang Daun Kanisius Yogyakarta Hal 12

Continuing Care Retirement Community (CCRC) 2009 Prosedur Uji MTT in

vitro Yogyakarta Universitas Gajah Mada

Chooiong hean 2007 Sayuran Khasiat Makanan dan Ubatan Kuala lumpur

Dalimartha Setiawan 2003 Ramuan Tradisional Untuk Pengobatan Kanker

Penebar Swadaya Jakarta Hal 1-6

De Jong Wim2004 Kanker apakah itu pengobatan Harapan Hidup dan

Dukungan Keluarga Arcan Jakarta hal 45 317

Departemen Kesehatan RI 1979 Farmakope Indonesia Edisi ke-3 Jakarta

Departemen Kesehatan hal 23-33

Departemen Kesehatan RI 1995 Farmakope Indonesia Edisi ke-4 Jakarta

Departemen Kesehatan hal 7

xix

Departemen Kesehatan RI 2009 Profil Kesehatan Indonesia 2008 Jakarta

Departemen Kesehatan hal 65-66

Dharmais2011 Rumah Sakit Dharmais Pusat Kanker Nasional Jakarta

httpwwwdharmaiscoidindexphpkanker-payudarahtml

Diananda Rama 2007 Mengenal Seluk-Beluk Kanker Katahati Jogjakarta

Hal 19 65-108

Dipiro JT Talbert RL Yee GC Matzke GR Wells BG and Posey

LM 2008 Pharmacotherapy A Pathofisiologic Approach 7th

Edition

New York The McGraw-Hill Co Inc

Eickhoff David 2012 Allium tuberosum httpeolorgdata_objects

Emily Renata 2009 Isolasi inkubasi dan inokulasi

fileDIsolasi20Inkubasi20dan20Inokulasi20_20RenataEMIL

Y20Zone5B5Dhtm Publikasi 6 november

Harmita Maksum Biomed 2008 Buku Ajaran Analisis Hayati Buku

Kedokteran EGC Jakarta

Haryadi didit 2012 Senyawa Fitokimia dan Sitotoksisitas Ekstrak Daun

Surian (Toona Sinensis) Skripsi Fakultas Matematika dan Ilmu

Pengetahuan Alam Institut Pertanian Bogor

Jaya Ara Miko 2010 Isolasi dan Uji Efektivitas Antibakteri Senyawa

Saponin dari Akar Putri Malu (Mimosa pudica) Skripsi Fakultas Sains

dan Teknologi Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim

httplibuin-

malangacidmod=th_vieweramppage=1ampid=fullchapter04530001pdf

Koller Emina 2009 Javanese medicinal plants used in rural communities

Wien Universitat Wien httpothesunivieacat550312009-06-

24_9803368pdf

Kristanti AN Aminah NS TanjungM Dan KurniadiB 2008 Buku Ajar

Fitokimia Surabaya airlangga university press

List and Schmidt 1989 Pythopharmaceutical Technology Germany CRC

Press hal 107-115

Listiani Irda Sukrasno 2005 Telaah Kandungan Kimia Daun Kucai (Allium

odorum L) Sekolah Farmasi ITB httpbahan-

alamfaitbaciddetailphpid=61 diakses tanggal 5 November 2010

Mardiana Lina 2004 Kanker Wanita Pencegah dan Pengobatan Dengan

Tanaman Obat Penebar Swadaya Yogyakarta

xx

Maryati dan Sutrisna EM 2007 Potensi Sitotoksik Tanaman Ceplukan

(Physalis angulata L) Terhadap Sel HeLa Surakarta Fakultas Farmasi

Universitas Muhammadiyah Surakarta

Menteri Kesehatan RI 2007 Pedoman Pengendalian Penyakit Kanker Jakarta

Muti Annisa Farida 2010 Uji Aktivitas Antikanker Ekstrak Etanol Rimpang

Kunyit (Curcuma domestica Val) Terhadap Kanker Kolon Mencit

Yang Diinduksi DMBA Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Airlangga

Mutia Dita 2010 Uji Toksisitas Akut Ekstrak Etanol Buah Anggur (Vitis

vinifera) Terhadap Larva Artemia salina Leach Dengan Metode Brine

Shrimp Lethality Test (BST) Skripsi Fakultas Kedokteran Universitas

Diponegoro

NCI 2012 Breast Cancer httpwwwcancergovcancertopicstypes breast

html (11 Februari 2012)

NCI 2012 Cancer Treatment httpwwwcancergovcancertopicstreat ment

html (11 Februari 2012)

Park Kyoung-Wuk Kim So-Yeon Jeong Il-You Byun Myung-Woo Park Ki-

Hun Yamada Koji and Seo Kwon-Il 2007 Cytotoxic and Antitumor

Activities of Thiosulfinates from Allium tuberosum L Korea Sunchon

National University httppubsacsorgdoipdfplus101021jf0713051

Putra Agung Tjahjono Winarto 2012 Efektivitas Ekstrak umbi Thyponium

flagelliforme Fraksi Diklorometanolik dalam Menghambat Proliferasi

Sel MCF-7 Kanker Payudara Skripsi Fakultas Kedokteran Universitas

Diponegoro

Ramli Rainy Sonar 2002 Deteksi Dini Kanker Fakultas Kedokteran

Universitas Indonesia Jakarta hal 35

Robinson T 1995 Kandungan Organik Tumbuhan Tingkat Tinggi ITB

Bandung

Rukmana Rahmat2006 Bawang Daun Kanisius Yogyakarta

Sianturi Alesipso HM 2001 Isolasi dan Fraksinasi Senyawa Bioktif dari Biji

Mahoni (Swietenia mhagoni Jacq) Skripsi Fakultas Matematika dan Ilmu

Pengetahuan Alam Institut Pertanian Bogor

Siswandono dan Bambang 2008 Kimia Medisinal Edisi kedua Surabaya

Airlangga University Press

xxi

Sukardiman PujiAwik FadjriHani Tenia 2011 Uji Sitotoksisitas dan Efek

Ekstrak Spons Laut Aaptos suberitoides Terhadap Sel Kanker Serviks

(Hela) Secara InVitro Skripsi Institute Teknologi Sepuluh November

Sukardja IDG 2000 Onkologi Klinik Edisi 2 Surabaya Airlangga University

Press

Suko Amelia 2011 Pengaruh Pemberian Ekstrak Spirulina Terhadap Indeks

Apoptosis Sel T47D Skripsi Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro

Sumarawati titiek dan Fatmawati dina 2011 Isolasi dan Uji Sitotoksik

senyawa Alkaloid Mahkota Dewa (Phaleria macocarpa) Pada Kultur

Sel Kanker Payudara (T47D) Skripsi Fakultas Kedokteran Universitas

Islam Sultan Agung Semarang

Wikipedia diakses 26 mei 2008 (online)

httpenwikipediaorgwikiFileSolanine_chemical_structurepng

Williams Lippicott dan Wilkins 2006 Understanding Breast Cancer Spanish

Entendiendo el cancer de mama Spanyol

Winarno Eko 2011 Uji Sitotoksik Ekstrak Kapang Aspergillus sp Terhadap

Sel Kanker Payudara T47D Skripsi Fakultas Matematika dan Ilmu

Pengetahuan Alam Universitas Indonesia

Wulandari Fina Tri 2011 Uji Praskrining Aktivitas Antikanker Daun Kucai

(Allium odorum L) Dengan Metode Brine Shrimp Lethality Test (BST)

(Ekstrak n-Heksana dan Ekstrak Metanol) Skripsi Fakultas Ilmu

Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang