Βασικές αρχές...
TRANSCRIPT
![Page 1: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/1.jpg)
Βασικές αρχές κυτταροχημείας
Π. ΚαρακίτσοςΚαθηγητής Κυτταρολογίας
Διευθυντής Εργαστηρίου Διαγνωστικής Κυτταρολογίας Π.Γ.Ν. «ΑΤΤΙΚΟΝ»
![Page 2: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/2.jpg)
Η Χρώση Παπανικολάου
Πολυχρωμική χρώση Παγκοσμίως αποδεκτή ως
βασική χρώση εξέτασης κυτταρολογικών επιχρισμάτων• Ποικίλες παραλλαγές από
εργαστήριο σε εργαστήριο (εύκολα αναγνωρίσιμες τόσο με το μάτι όσο και αναλυτικά)
![Page 3: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/3.jpg)
Πολυχρωμική χρώση
Πυρήνες• Καλή αναγνώριση
κατανομής της χρωματίνης
• Καλή αναγνώριση πυρηνίων
Κυτταρόπλασμα• Διαφοροποίηση• Διαφάνεια
![Page 4: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/4.jpg)
Παραλλαγές
Τεχνική 1 (Regressive) Τεχνική 2 (Progressive) Τεχνική Gills 1 (Regressive) για επιχρίσματα φίλτρου
nucleopore Τεχνική Gills 1 (Progressive) για επιχρίσματα φίλτρου
nucleopore Τεχνική Miller για επιχρίσματα μονιμοποιημένα σε carbowax Τεχνική Saccomanno για επιχρίσματα πτυέλων
μονιμοποιημένα σε carbowax Τεχνική Durfee για επιχρίσματα ούρων Οικολογική χρώση Παπανικολάου On site ταχεία Παπανικολάου
![Page 5: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/5.jpg)
Ακόμα και αν ένα εργαστήριο χρησιμοποιεί
τα ίδια διαλύματα ακριβώς με ένα άλλο, το
αποτέλεσμα της χρώσης δεν είναι το ίδιο
![Page 6: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/6.jpg)
Παράγοντες που επηρεάζουν τη χρωστική
αντίδραση/εμφάνιση
1. Τύπος μονιμοποιητικού2. Επιλογή διαλύματος
αιματοξυλίνης3. Επιλογή διαλυμάτων orange G
και polychrome4. Διάρκεια παραμονής στα
χρωστικά διαλύματα
![Page 7: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/7.jpg)
Παράγοντες που επηρεάζουν τη χρωστική
αντίδραση/εμφάνιση
5. Αριθμός επιχρισμάτων6. pH και χημική σύνθεση του
νερού της βρύσης7. Θερμοκρασία του νερού βρύσης8. Υγρασία περιβάλλοντος9. pH των διαλυμάτων και των
χρώσεων
![Page 8: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/8.jpg)
Παράγοντες που επηρεάζουν τη χρωστική
αντίδραση/εμφάνιση
10.Γήρανση χρωστικών11.Κροκίδωση του διαλύματος χρωστικής12.Επιμολύνσεις στα διαλύματα
αφυδάτωσης/ενυδάτωσης13.pH του δείγματος14.Παρουσία ιδίων στοιχείων φλεγμονής15.Ποιότητα επιχρίσματος
![Page 9: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/9.jpg)
Τύπος μονιμοποιητικού
Υγρή μονιμοποίηση• Αιθανόλη• Μεθανόλη• Προπανόλη• Ισοπροπανόλη
Μονιμοποίηση με spray• Λακ μαλλιών με υψηλή
συγκέντρωση αλκοόλης• Carbowax• Diaphane
Ειδικά spray
![Page 10: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/10.jpg)
Τεχνική 1 (Regressive)
Παπανικολάου 1954 Η περίσσεια χρώσης αφαιρείται
με διάλυμα HCl H περίσσεια του HCl αφαιρείται
με νερό βρύσης Ως συχνότερο αποτέλεσμα η
υποχρωμία του πυρήνα
![Page 11: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/11.jpg)
Τεχνική 2 (Progressive)
Η πλέον συνήθης τεχνική• Η σταθερότητα και ο
έλεγχός της είναι σχετικά εύκολες διαδικασίες
Ο πυρήνας χρωματίζεται με αιματοξυλίνη μέχρι την επιθυμητή από τον κυτταρολόγο ένταση
Σταθεροποιητικοί παράγοντες Ανθρακικό λίθιο Scotts tap water Νερό βρύσης pH>8 NH3OH δεν
χρησιμοποιείται πλέον σήμερα λόγω της αστάθειας του διαλύματος όχι μόνο από μέρα σε μέρα αλλά και κατά τη διάρκεια της ίδιας ημέρας
Παπανικολάου 1960
![Page 12: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/12.jpg)
όχιΔιάλυμα Orange G
Orange GΦωσφοβολφραμικό οξύ
ΕΑ 36Light greenBrun BismarkΗωσίνη
Φωσφοβολφραμικό οξύΑνθρακικό λίθιο
![Page 13: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/13.jpg)
Orange G
Όξινη χρώση• Κερατίνη έντονα φωτεινό πορτοκαλόχρουν χρώμα
Ελαφρά διαλυτή σε 95% αιθανόλη Έντονα διαλυτή στο νερό Το οξικό οξύ επιταχύνει τη χρωστική αντίδραση
επειδή θετικά ιόντα Η στρέφουν τις ισορροπίες του φορτίου από το ισοηλεκτρικό σημείο των πρωτεϊνών προς την όξινη πλευρά
Η προσθήκη φωσφοβολφραμικού οξέος σταθεροποιεί τη χρωστική αντίδραση
![Page 14: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/14.jpg)
ΕΑ
Πολυχρωμική χρώση• Light green 65%
• Όξινη χρώση• Ανιχνεύει μεταβολικά ενεργά κύτταρα
• Eosin Y 80%• Όξινη χρωστική• Ανιχνεύει άτομα βρωμίου
• Αυξημένη συγκέντρωση ατόμων βρωμίου βαθύ κόκκινο χρώμα• Χαμηλή συγκέντρωση ατόμων βρωμίου κίτρινο χρώμα
• Bismarck brown Y 45%• Κατακρημνίζει το φωσφοβολφραμικό οξύ, γεγονός που
επιτρέπει την διακριτή χρωστική αντίδραση του Light green και Eosin
![Page 15: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/15.jpg)
ΕΑ
Τρεις τύποι• 36
• Κυρίως γυναικολογικά επιχρίσματα• 50
• Εμπορικά τροποποιημένη ΕΑ 36, η σύνθεση της οποίας ποικίλλει από κατασκευαστή σε κατασκευαστή
• 65• Τροποποιημένη 36 με σκοπό τη βελτίωση της
χρωστικής αντίδρασης σε παχιά επιχρίσματα
![Page 16: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/16.jpg)
Σφάλματα Progressive
Υπερχρωματικός πυρήνας• Οφείλεται σε πυκνό διάλυμα ΝΗ3ΟΗ
Υποχρωματικός πυρήνας• Οφείλεται σε αραιό διάλυμα ΝΗ3ΟΗ• Δεν αφαιρέθηκε σωστά το carbowax• Ο χρόνος στην αιματοξυλίνη δεν ήταν αρκετός• Το νερό της βρύσης είχε pH < 8• Υπερβολική αφαίρεση της αιματοξυλίνης• Δεν αντικαταστάθηκε η αιματοξυλίνη μετά από 2000
επιχρίσματα ή μετά από 6-8 εβδομάδες• Δεν αφαιρέθηκαν τα υαλοειδή σταγονίδια πριν το στάδιο
της αιματοξυλίνης
![Page 17: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/17.jpg)
Σφάλματα Regressive
Υπερχρωματικοί πυρήνες• Παρατεταμένη παραμονή στο διάλυμα
αιματοξυλίνης Harris• Μη ορθή αφαίρεση της περίσσειας της
αιματοξυλίνης Harris• Η συγκέντρωση του HCl είναι χαμηλή• Μη επαρκής χρόνος δράσης του HCl
![Page 18: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/18.jpg)
Ανεπαρκής χρώση κυτταροπλάσματος
Παρατεταμένη παραμονή επιχρίσματος εκτός μονιμοποιητικού Μη σεβασμός της ιδιαίτερης διαχείρισης της χρώσης ανάλογα με
τον τύπο του μονιμοποιητικού Επιχρίσματα άλλοτε άλλου πάχους Έκθεση των επιχρισμάτων σε εστίες θερμότητας πριν τη χρώση Παρατεταμένη παραμονή στην αιματοξυλίνη Ανεπαρκές ξέπλυμα Μη τήρηση του χρόνου παραμονής στις χρωστικές pH νερού βρύσης < 8 pH EA μικρότερο του 4.5 ή μεγαλύτερο του 5.0 Η θερμοκρασία του νερού βρύσης ποικίλλει από μέρα σε μέρα Το pH του επιχρίσματος ποικίλλει
![Page 19: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/19.jpg)
Κυτταρόπλασμα έντονα πράσινο
Λανθασμένη αναλογία συστατικών ΕΑ
Εσφαλμένη επιμήκυνση χρόνου παραμονής των επιχρισμάτων στο ΕΑ
![Page 20: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/20.jpg)
Κυτταρόπλασμα ασθενώς πράσινο
Μη επαρκής παραμονή στο ΕΑ
Εξασθενημένη χρωστική
![Page 21: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/21.jpg)
Επιμολύνσεις
Επιμόλυνση από αφυδατικά και διαυγαστικά διαλύματα
Μη επαρκής αφαίρεση μονιμοποιητικού
Μη ορθή αντικατάσταση των διαλυμάτων
Μη ορθή φύλαξη αντικειμενοφόρων πλακών και καλυπτρίδων
![Page 22: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/22.jpg)
Διορθωτικές κινήσεις
Η διήθηση των χρωστικών οφείλει να ακολουθεί συγκεκριμένες διαδικασίες με τη χρήση διαφορετικής χοάνης ανάλογα με το διάλυμα
Τα φίλτρα πρέπει να αντικαθίστανται όταν η ροή μέσω αυτών δεν είναι επαρκής
Οι χρωστικές πρέπει να φυλάσσονται σε αεροστεγή δοχεία
![Page 23: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/23.jpg)
Διορθωτικές κινήσεις
Συνεχής και επαρκής αφαίρεση εμφανών στοιχείων στα διαλύματα
Ιδιαίτερη προσοχή στη διαχείριση μετά τον καθαρισμό Αλλαγή των ενυδατικών και αφυδατικών διαλυμάτων δύο
φορές την ημέρα Αλλαγή του νερού μετά από κάθε χρήση Αντικατάσταση των διαλυμάτων διαφοροποίησης
τουλάχιστον μία φορά την ημέρα Χρώση μάρτυρα πριν την αντικατάσταση του σετ χρώσεων
και αμέσως μετά την αντικατάσταση τους Έλεγχος ότι ο δείκτης διάθλασης καλυπτρίδων αντιστοιχεί
προς 1.515±0.015
![Page 24: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/24.jpg)
Μακροσκοπική Εμφάνιση Επιχρισμάτων
![Page 25: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/25.jpg)
Αυξημένη Κυτταρικότητα
![Page 26: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/26.jpg)
Φλεγμονώδες Υλικό
![Page 27: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/27.jpg)
Ατελής Βλεννόλυση
![Page 28: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/28.jpg)
Συμβατικό επίχρισμα
Επίχρισμα ThinPrep
Επίδραση οξείδωσης
![Page 29: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/29.jpg)
Ατελής μονιμοποίηση
![Page 30: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/30.jpg)
Ατελής Διαφοροποίηση
![Page 31: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/31.jpg)
![Page 32: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/32.jpg)
Διαδικασίες αποχρωματισμού και επαναχρωματισμού
Είναι δυνατόν να εφαρμοστούν σε όλα τα επιχρίσματα, με την προϋπόθεση ότι το κυτταρικό δείγμα έχει μονιμοποιηθεί σωστά
Αφαίρεση της καλυπτρίδας μετά από παραμονή ποικίλου χρονικού διαστήματος σε ξυλόλη
Υπάρχουν διάφορες ακολουθούμενες διαδικασίες
![Page 33: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/33.jpg)
Χρώση Giemsa
Η χρώση Giemsa αποτελεί τη δεύτερη βασική χρώση στο κυτταρολογικό εργαστήριο
Προέκυψε ως εργαστηριακό λάθος
![Page 34: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/34.jpg)
Ιστορική αναδρομή
Ταχεία χρώση methylene blue (1910)
Επιχρίσματα αίματος είχαν χρωσθεί με methylene blue αλλά είχαν παραμείνει επί μακρόν και είχαν οξειδωθεί, με αποτέλεσμα ο Romanowsky να αναγνωρίσει φωτεινό μωβ χρώμα σε αυτό που στη συνέχεια ονομάζουμε πυρήνες σε πλασμώδια ελονοσίας (1891)
Τρία προϊόντα οξείδωσης της methylene blue
![Page 35: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/35.jpg)
Ιστορική αναδρομή
Giemsa 1902-1935 Προσέθεσε στο αλκοολικό
διάλυμα Azure-B γλυκερίνη, με αποτέλεσμα την καλύτερη σταθεροποίηση της χρώσης
Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald
![Page 36: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/36.jpg)
Μονιμοποίηση
Με διάλυμα μεθανόλης
Σε επιχρίσματα αμονιμοποίητα
Σε διάλυμα αιθυλικής αλκοόλης
Σε διάλυμα 5% φορμόλης
![Page 37: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/37.jpg)
Κυτταρολογικά χαρακτηριστικά
Χρωματίζει την ευχρωματίνη και το RNA του πυρηνίου
Σε σύγκριση με την αιματοξυλίνη, το δίκτυο της χρωματίνης είναι λιγότερο διαφανές και περισσότερο πυκνό, ενώ το πυρηνικό περίγραμμα σαφέστερο
![Page 38: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/38.jpg)
Εφαρμογές
Παρασιτολογία/βακτηριολογία Κύτταρα αιμοποιητικού Υλικό παρακέντησης διά λεπτής βελόνης Ταχεία κυτταρολογική Κυτταρολογία ούρων και ΕΝΥ ΔΔ βλέννας/μυξωματώδους
υλικού/αμυλοειδούς Σωμάτια αμιάντου (asbestos bodies) Μεταχρωματικό στρώμα
![Page 39: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/39.jpg)
Σύγκριση επιχρισμάτωνMGG PAP
Εξάρτηση από τεχνική επίστρωσης Έντονη Μέτρια
Ξερό επίχρισμα Καλή μονιμοποίηση Συχνά artifacts
Υγρή μονιμοποίηση Συχνά artifacts Καλή μονιμοποίηση
Ιστικά τεμαχίδια Δυσχερής αναγνώριση κυτταρικών χαρακτηριστικών
Μεμονωμένα κύτταρα με καλύτερη απεικόνιση
Κυτταρικό μέγεθος Ποικίλα αυξημένο Συγκρίσιμο με ιστολογικής τομής
Κυτταροπλασματικά χαρακτηριστικά Καλά απεικονιζόμενα Δυσχερώς απεικονιζόμενα
Πυρηνικά χαρακτηριστικά Διαφορετικά από PAP stain Άριστα
Πυρήνια Όχι πάντα αναγνωρίσιμα Άριστα αναγνωρίσιμα
Στρώμα Καλά απεικονιζόμενα Δυσχερώς απεικονιζόμενα
Νεκρωτικός ιστός Δυσχερώς απεικονιζόμενα Καλά απεικονιζόμενα
![Page 40: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/40.jpg)
Σύγκριση MGG & PAP stain ανάλογα με τον κυτταρικό τύπο
Ιστός MGG PAP stain
Επιθηλιακός Βλέννα, κολλοειδές, εκκριτικά κοκκία, κοκκία λιποφουσκίνης, κενοτόπια λίπους, βασική μεμβράνη, αμυλοειδές,
Πλακώδης διαφοροποίηση, ογκοκύτταρα, ψαμμώδησωμάτια
Λεμφικός Κυτταροπλασματική βασεοφιλία, Lymphoid globulus, κενοτόπια λίπους
Πυρηνικό περίγραμμα, δομή χρωματίνης, πυρήνια
Μεσεγχυματικός Ινοχονδρομυξοειδής ουσία, οστεοειδές, βασική μεμβράνη,αμυλοειδές, κενοτόπια λίπους
πυρηνικά χαρακτηριστικά σε συμπαγείς αθροίσεις
Νευροενδοκρινικός Κυτταροπλασματικήκενοτοπίωση
Εμφάνιση χρωματίνης ως «αλατοπίπερο»
Φλεγμονώδης Ηωσινόφιλα Μακροφάγα
![Page 41: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/41.jpg)
Σύγκριση MGG & PAP stain ανάλογα με τον κυτταρικό τύπο
![Page 42: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/42.jpg)
![Page 43: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/43.jpg)
Σύγκριση MGG & PAP stain σε επιχρίσματα FNA λεμφαδένα
![Page 44: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/44.jpg)
Σύγκριση MGG & PAP stain σε επιχρίσματα FNA μαστού
![Page 45: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/45.jpg)
Σύγκριση MGG & PAP stain σε επιχρίσματα FNA μαστού
![Page 46: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/46.jpg)
MGG vs. PAP stain σε λοιμώξεις
![Page 47: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/47.jpg)
Ειδικές χρώσεις
Ειδική χρώση ΟυσίαPAS ΓλυκογόνοPAS/Διαστάση ΒλένναAlcian Blue ΒλένναPrussian Blue ΣίδηροςMasson-Fontana ΜελανίνηGrimelius Αργυρόφιλα κοκκίαGomori’s Silver Για μικροοργανισμούςOil-red-O ΛίποςFouchet’s Κοκκία χολήςCongo red Αμυλοειδές
![Page 48: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/48.jpg)
Ειδικές χρώσεις σε λοιμώξεις
![Page 49: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/49.jpg)
Ειδικές χρώσεις σε υλικό FNA και BAL
![Page 50: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/50.jpg)
PAS (+)
PAS διαστάση (-)
![Page 51: Βασικές αρχές κυτταροχημείαςcytopathology.med.uoa.gr/Presentations/EEKK2014/Karakit...Ο Pappenheim προσέθεσε διάλυμα May-Grünwald Μονιμοποίηση](https://reader036.vdocuments.site/reader036/viewer/2022062510/61115c8f3a343b1f5423e38f/html5/thumbnails/51.jpg)