Coordenadoria Regional de Desenvolvimento da Educação – 10ª CREDE - RussasNÚCLEO REGIONAL DE DESENVOLVIMENTO DA ESCOLA – NRDES

ROTEIRO DAS AULAS PRÁTICAS DO LDC

ESCOLA: E.E.F.M ARSÊNIO FERREIRA MAIAPROFESSOR COORDENADOR: OTACÍLIO JR. / SELMIRADISCIPLINA: BIOLOGIAPROFESSOR DA TURMA: EDUARDO.DATA: 28/05/2012 À 02/06/2012.TURMAS: 3° ANOS A, B, C, D.NOME DA PRÁTICA: EXTRAÇÃO E OBSERVAÇÃO DA MOLÉCULA DE DNA.

OBJETIVO: Extrair o DNA da banana que pode ser visualiza a olho nu. Observar a estrutura do DNA no microscópio Analisar a importância da molécula de DNA para os seres vivos.

MATERIAL UTILIZADO:

Saco plástico (tipo zip loc); Morango ou banana ou kiwi; Tubos de ensaio; Bastão de vidro ou palito de madeira; Álcool etílico gelado; Béquer ou copo de vidro; Conta-gotas; Lâmina e lamínula; Microscópio; Aparato filtrante (gases ou papel de filtro); Funil; Aproximadamente 10ml de solução extratora de DNA; Água (de preferência mineral);

Observação:Receita da solução extratora de DNA:

50mL de detergente líquido; (DE PREFERÊNCIA INCOLOR). 2 colheres de chá de sal (NaCl); 900mL de água. Misture tudo em um recipiente (béquer ou copo).

METODOLOGIA:

1. Coloque a fruta, previamente lavada em saco plástico zip loc e esmague-a com o punho (cuidado para não rasgar o saco) até ficar um extrato homogêneo;2. Adicione a solução extratora ao conteúdo do saco, misture tudo apertando com as mãos homogeneizando;3. Derrame o extrato no filtro com o aparato filtrante e deixe filtrar num recipiente (béquer ou copo);4. Encha a menos da metade, um tubo de ensaio com o filtrado;5. Derrame devagar o álcool gelado do tubo de ensaio (deixando-o escorrer vagarosamente pela borda) a fim de se formar duas fases, a superior, alcoólica e a inferior, a aquosa. O volume adicionado do álcool deve ser aproximadamente o mesmo volume do filtrado;6. Mergulhe o bastão ou palito dentro do tubo até o local onde se encontra a solução mais turva (o filtrado com moléculas de DNA);7. Retire um pouco dos filamentos e coloque-os em uma lâmina, pingue uma gota da solução extratora, cubra com uma lamínula e em seguida observe ao microscópio.8. Desenhe em forma de esquema o observado.

ANÁLISE

O detergente dissolve as membranas lipídicas além de desintegrar os núcleos e os cromossomos das células da cebola, liberando o DNA. Com a ruptura das membranas, o conteúdo celular, incluindo DNA e proteínas, se soltam e se dispersam na solução. Um dos componentes do detergente, o lalril sulfato de sódio, desnatura as proteínas, separando-as do DNA cromossômico. 

A adição de sal, no início da experiência, proporcionou ao DNA um ambiente favorável. O sal contribui com íons positivos Na+ que neutralizam a carga negativa do DNA. Nessa forma, O DNA precipita na solução aquosa.

O álcool gelado, além de proporcionar uma mistura heterogenia (duas fases), em ambiente salino, faz com que as moléculas de DNA se aglutinem, formando uma massa filamentosa e esbranquiçada.

O DNA não se dissolve no álcool, na concentração e na temperatura que se usou neste experimento. Pelo fato do DNA ser menos denso que a água e a mistura aquosa dos restos celulares, ele se localiza na interface da fase alcoólica e aquosa.

BIBLIOGRAFIA

Matias, O.;Martins, P.(2004). Manual de biologia de 11º ano. Areal Editores. Porto

Sites: http://www.dbio.uevora.pt/LBM/Foco/Extraccao/Extraccao_DNA.html,http://www.seara.ufc.br/sugestoes/biologia/biologia007.htm