espectrofotometros uv

8/18/2019 Espectrofotometros Uv

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ESPECTROFOTOMETROS UV/VIS

Lic. Rodolfo M. Orozco

Análisis Instrumental


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Espectrofotómetros

* Los espectrofotómetros son aquellos instrumentos enlos que se mide fundamentalmente la distribuciónespectral de energía radiante en las regionesespectrales: UV, VIS e IR (cercano asta el medio!

* "stos instrumentos utili#an un comple$o sistema ópticode selección de longitud de onda (monocromador!%

& "stos instrumentos pueden seleccionar longitud de

onda en forma continua ' en algunos casos conprecisión de dcimas de nm% )or lo tanto, es posibleobtener en forma continua el espectro de absorción deuna molcula%


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Clasificación

• Un solo haz

• Doble haz

• Multicanal

• Doble disersión

• Lon!itud de onda dual


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Comonentes "ásicos• #uente de luz

• Monocromador • $ortamuestra

• Detector % &istema de Lectura


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'sectrofotometro de un solo haz

• (io de esectrofotometro más simle) se

basa en la absorción de la luz al asar un

solo haz or la muestra a una lon!itud deonda esecifica

• 'ste instrumento roduce luz

monocromática % la detecta desu*s deatra+esar la muestra de estudio


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Comonentes Oticos

• Utilizan lámaras intercambiables de,olframio) - ó D

• (ubos fotomultilicadore % redes dedisersión

• Unos utilizan diositi+os de salida di!itales)

otros diferentes medidores• Los dise/os óticos de los instrumentos

difieren or el fabricante


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Fundamentals of modern UV-visible spectroscopy

23Figure :

Conventional Spectrophotometer

Schematic of a conventional single-beam spectrophotometer


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CARACTERISTICAS

• '0uio sencillo % económico 1234)4445

• (raba6an en la re!ión 7is % otros en la re!iónU787is 1394834 : ;44834445

• $roducen anchos de banda de < ; nm.

DESVENTAJAS

• $resencia de ruido de aradeo de las fuentes %

detectores

• Cambios de intensidad de la fuente % sensibilidad

del detector con la lon!itud de onda de traba6o


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'sectrofotómetros de doble haz

• 'n este tio de instrumento la radiación se di+ideen dos 1$o similares5 uno asa or la muestra % el

otro al blanco.• Costo del e0uio 12 3=4445

• 'l doble haz realiza corecciones or> : La intensidad de la fuente de luz

: &ensiti+idad 1resuesta5 del detector : (ransmisión del monocromador

1estos factores cambian con la lon!. de onda5


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'sectrofotómetro de doble haz


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Instrumento de doble haz

&lit

"eam Choer

Reference

Mirror Mirror

&emi


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VENTAJAS

• Resultados más confiables 1Abs. diferencial de la muestra% blanco5

• Oeran automaticamente) eliminan a6ustes manuales1ahorrando tiemo5

COMPONETES OPTICOS • 'se6os !iratorios> di+iden el haz) ambos se 6untan or un

ese6o reticular 0ue refle6a uno % tansmite el otro.

• Detector> recibe ulsosalternati+os del haz de referenica %

de la muestra• &istema de se/ales> comara la resuesta de los dos haces

% efectua la corrección.

• Disositi+os 0ue i!ualan la intensidad de los dos haces.


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I&(RUM'(O& MUL(ICAAL

• (ienen ocos comonentes óticos 1ma%orrendimiento de la radiación5

• Obtención ráida de barrido % esectros 13s5• &e acolan a diferentes ordenadores ersonales

• 'le+ada relación &8

• Determinación simultánea de multicomonentes

• Obención de esectros con barrido electrónico %reroducibilidad de lon!. de onda 144 : ;44 nm)U787I&8IR5


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'sectrofotometro Multicanal


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Comonentes % #uncionamiento

• Lámaras intercambiables de deuterio %tun!steno

• 'l haz de luz deu*s de atra+esar el lamuestra se enfoca en la rendi6a de entrada % asa a una red de refleBión holo!ráfica

• 'l detector es de serie de diodos de silicio0ue consta de 3 elementos

• Costo E 23=)444


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Instrumentos de doble disersión

• 'stos instrumentos me6oran la resolución esectral% reducen la radiación arásita

• (ienen dos monocromadores en serie 1red o risma5

• (raba6an en el ran!o de 3;= a 3= nm.

• $roducen resluciones de 4.4F nm

• Luz arásita E 4.444; G de $o.

• A lon!. H ;44 nm) utilizan detector defotoconducti+idad de sulfuro de lomo conlámara de ,olframio.


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Comonentes % #uncionamiento

• La radiación atra+iesa la rendi6a de entrada 3) se

disersa en la red 3. Lue!o se diri!e a la rendi6a

de entrada % se disersa en la red .• Al salir de la rendin6a de salida ) el haz se di+ide

en dos 1ese6o obturador5 uno atra+iesa la muestra

% otro la solución de referencia

• &e diri!e hacia el detector ara re!istrarse en la

re!ión de traba6o.


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Instrumentos de lon!itud de onda dual

• Los esectros se obtienen de la deri+ada 13o) o) er ordende la Abs ó G( +rs. lon!. Onda

• Muestran detalles esectrales 0ue se ierden en un esectroordinario

• Me6oran la determinación de concentración de analito en

resencia de interferentes• o usan haz de referencia) eron ueden oerar con el.

• Dos haces de lon!itudes diferentes lle!an alternati+amente ala muestra % al detector.

• La diferencia entre se/ales alternas da una buenaaroBimación a la deri+ada de las absorbancias

• '0uio mu% costoso


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'sectro deri+ado


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'sectros de absorción de la

amicilina sódica 1a5

la dicloBacilina sódica 1b5

% la mezcla 1c5.

Obser+e la sobreosición de los

esectros de 1a5 % 1b5 a 44 nm.

1b5 tiene una ma%or absorción entodo la zona esectral utilizada)

or lo 0ue no odramos realizar

estudios cuantitati+os ni una

caracterización confiable.

EJEMPLO


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&i obtenemos la rimera deri+ada

de los esectros 1fi!. 5 se arecian

diferencias) uesto 0ue %a se

emiezan a resol+er me6or.

'n la se!unda deri+ada de los

esectros se arecia la estructura

fina 0ue nos ermite diferenciar los untos de cruce en cero ara la

amicilina sódica en J;.; nm %

ara la dicloBacilina sódica en 3=.

nm % 3. nm 0ue nos sir+en ararealizar estudios cuantitati+os.

Los mnimos definidos nos a%udan

a su caracterización.


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