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Fisiologia del Sangue
Eritrociti o globuli rossi Funzioni – trasporto O2 e CO2
Eritrociti nel sangue
Genesi degli eritrociti
Fetale –sacco vitellino- fegato Adulto- midollo osseo
Stem cells- Precursori eritrociti Proeritroblasto- eritroblasto basofilo- reticolocita – eritrocita maturo
Regolazione ematopoiesi –
Eritropoietina O2 Kidneys 90%, the rest liver
Eritrociti delle principali specie di interesse veterinario
Cane Gatto
Cavallo Bovino Cammello
Pecora Capra
Capra –Angora
fL=0,000000000000001 litri
Metabolismo globuli rossi
1) Mantenere integrità funzionale membrana
2) Trasporto ioni di membrana
3) Mantenere il Fe emoglobina in forma ferrosa
4) Impedire ossidazione proteine
ATP unico metabolita usato dal globulo rosso …..no nucleo…..
Anemie - ematocrito
1) Post-emorragica 2) Aplastica
3) Megaloblastica 4) Emolitica Effetti dell’anemia -
Emopoiesi
Cofattori: Say you need proteins for hemoglobin
Vitamine gruppo B- B12, cianocobalamina, Vit B 1, Tiamina, Vit. B6, Piridossina, PP, A. Folico, Biotina Oligoelementi: Fe++, Cu, Co,
Eritropoietina
Metabolismo del ferro
Fe 3+
HCl
Fe 2+
Fe 2+
Enterocita
Fe 2+
Apoferritina
Ferritina
Sangue
Fe 2+
Fe 3+
Fe 2+
Transerrina Ferrico
Fe 2+ferroso
Emosiderina
Sangue
Policitemia
Policitemia secondaria
Policitemia vera
Effetti
Emolisi
Resistenza osmotica eritrocitaria
Vita media eritrocitaria
Velocità di eritrosedimentazione (VES)
Globuli bianchi o leucociti
Neutrofili Eosinofili Basofili Linfociti
Linfociti T
Linfociti B
Monociti Macrofagi
Piastrine
Il sangue PLASMA
Residuo Solido 10%
Proteine plasmatiche Sostanze inorganiche Sostanze organiche gas
Albumine Globuline Fibrinogeno Ormoni – enzimi Na, K, Ca, Mg, Cl, Fe, Mn, Cu, Zn, I, Co Metaboliti:A.A. Glucosio, Grassi, colesterolo etc. Cataboliti: urea, a. urico, creatina Creatinina, Sali di ammonio O2, CO2 N
Ematocrito
Frazioni proteiche del Plasma
Albumine – riserva aminoacidi- (150/200 mg/Kg pv)- a.grassi NE,trasporto ormoni α-globuline (α1fast α 2slow) - ceruloplasmina, eritropoietina, ormoni β-globuline (β1 as above β2)- β lipoproteine, transferrina, fattori coagulazione γ-Globuline Fibrinogeno
Frazioni proteiche del Plasma
Tracciato elettroforetico proteine del Plasma
Albumina α β γ
Enzimi plasmatici Plasma-specifici
Esogeni
Enzimi della coagulazione colinesterasi
Cellulari: Transaminasi Fosfatasi Creatinchinasi Lattatodeidrogenasi sorbitoldeidrogenasi
Di secrezione: Amilasi Lipasi Fosfatasi
Emostasi – Coagulazione del sangue
1) Spasmo muscolare 2) Formazione di un tappo piastrinico 3) Coagulazione del sangue 4) a-Sviluppo di tessuto fibroso nel coagulo-chiusura della lesione- b-dissoluzione del coagulo
Emostasi – Coagulazione del sangue
Caratteristiche delle piastrine
1) Filamenti di actina, miosina e trombostenina
2) Reticolo endoplasmico- Golgi-proteine leganti Ca++
3) Mitocondri – ATP sintesi
4) Fattore stabilizzante la fibrina
5) Fattore di crescita endoteliale
6) Trombossano A2
Meccanismo di formazione del tappo piastrinico Say what happens when no platelets
La coagulazione del sangue nelle rotture vascolari Summarize the all events
Meccanismo della coagulazione
1) Attivazione della protrombina (alfa2 globulina), 15mg/100 ml
2) Conversione protrombina in trombina
3) Scissione del fibrinogeno (100-700 mg/100ML) in fibrina
Schema dei principali eventi della coagulazione
Protrombina
Attivatore protrombina (intrinseco o intrinseco) Ca++
Trombina
Fibrinogemo Monomero di Fibrina
Ca++
Filamenti di fibrina Insolubile
Fattore stabilizzante le fibrina
Il coagulo sanguigno
Retrazione del coagulo
Siero
Avvio della coagulazione Via intrinseca ed estrinseca
Via estrinseca
1) Liberazione di tromboplastina tessutale (fosfolipidi di membrane- lipoproteine ad azione proteolitica)
1) (Bis)Legame fattore X con fattore VII (attivazione fattore X)
2) Attivazione fattore X (fattore V + fosfolipidi + piastrine)
Attivatore protrombinico
Via estrinseca Avvio della coagulazione
Trauma tissutale
tromboplastina tessutale fosfolipidi di membrane- lipoproteine ad
azione proteolitica
Fattore X Fatttore X attivo
Attivatore della protrombina
Ca++ + Fattore V
Protrombina Trombina
Ca++
Vie
Tessuto lesionato
Coagulazione - vie -
Prevenzione della coagulazione vasale I: Prostaciclina e NO
Prevenzione della coagulazione intravasale II: Fattori vasali e Plasmatici
1) Levigatezza superficie endoteliale
2) Glicocalice + Trombociclina local endothelial factor
3) Trombomodulina – legame con trombina –
4) Filamenti di fibrina – adsorbimento trombina
5) Antitrombina III
6) Eparina (legame antitrombina III) Say were it is produced mastcells, or basophyle granulocytes alone very weak!!!!!
Rimozione Fattori XII, XI IX e X
7) Alfa 2 macroglobulina - legame fattori coagulazione
Destino del coagulo
1) Organizzazione del coagulo 2) Lisi del coagulo (plasmina + urochinasi)
Plasminogeno (fibrinolisina)
Attivatore del plasminogeno
Plasmina Digestione fibrina e fattori coagulazione
Inibita da: Alfa2 antiplasmina
Sindrome emorragiche
Diminuzione protrombina e fattori coagulazione Carenza vitamina K Avvelenamenti da anticoagulanti (warfarin – cumarinici)
Emofilia – carenza genetica fattore VIII Say something about transgenic animals carrying clotting factors
Test di coagulabilità del sangue
1) Tempo di emorragia
2) Tempo di coagulazione 3) Tempo di protrombina
Gruppi sanguigni
Molteplicità di antigeni nelle cellule del sangue
Gruppi di antigeni principali:
O-A-B e Rh
Agglutinogeni ed agglutinine
Antigeni A e B = agglutinogeni
Anticorpi anti A e B = agglutinine
Gruppi sanguigni: O-A- B O = 47% A = 41% B = 9% A B = 3%
Gruppi sanguigni, agglutinogeni ed agglutinine
Gruppo
O _
A A B B
A B A -B
Agglutinogeni Agglutinine
Anti A e B
Anti B Anti A
Antigeni Rh
C D E c d e
D Rh positivo D Rh negativo
Risposta immunitaria al fattore Rh Eritroblastosi
DEA = Dog Erytrocyte Antigens
Gruppi sanguigni nel gatto
Soggetti gruppo A – anticorpi anti B – blandi
Soggetti gruppo B – anticorpi anti A – agglutinazione!
Soggetti AB- nessun anticorpo
Anemia emolitica neonatale frequente nei gattini
Determinazione gruppi sanguigni agglutinazione su gel + centrifugazione
Gruppi sanguigni Bovini
A, B, C, F, J, L, M, S, and Z
Gruppi sanguigni Felini A, B, or AB.
Gruppi sanguigni Equini A, C, D, K, P, Q, T, and U.
Gruppi sanguigni Ovini A, C, D and M
Gruppi sanguigni caprini A, B, C, R, E (diversi polimorfismi, es. C =21)
Gruppi sanguigni Suini A-E, F, G, H, I, J, K, L
Gruppi sanguigni nelle principali specie di interesse veterinario
Cenni sulle transfusioni
Collect 2ml of EDTA-anticoagulated blood from donor and recipient. Centrifuge blood samples for 1 minute in bench top centrifuge at approximately 1,000rpm (ie same speed as for plasma/serum separation) and remove plasma to prelabelled 75 x 10 mm test tubes. Make a 2% red cell suspension of each specimen in physiological saline (0.85% NaCl) solution. T his can be done by placing 0.02ml of concentrated red cells in 0.98ml of saline solution contained in a 75 x 10mm test tube; mixing, centrifuging, and washing three times; and resuspending washed red cells in a equal volume of saline solution. Place two drops of the donor’s cell suspension in a 10 x 75mm test tube and mix. In a second tube similarly place equal volumes of donor’s plasma and recipient’s cell suspension. To check for autoagglutination, set up controls in the manner by mixing donor’s red cells with its own plasma and follow the same procedure with the recipient’s red cells and plasma. Shake rack of tubes and incubate for 30 minutes at room temperature, then centrifuge for 1 minute at 1,000 rpm. Examine the supernatant for haemolysis. Shake the tubes gently by tapping with finger to detect grossly visible agglutination of red cells. If no agglutination is observed, transfer a small amount to a glass slide and examine under the low power of the microscope. A slight haemolysis in canine blood is non-specific. Significant haemolysis and/or agglutination in one or both of the cross-matched tubes but not in the controls indicates and incompatibility and the need to choose a new donor.
Blood cross matching for transfusion
Trapianti di organi
1) Isotrapianto 2) Allotrapianto 3) Xenotrapianto
Antigeni complesso HLA HLA 1 HLA 2 HLA 3
Tipizzazione del tessuto Say something about cloning pigs for xenotransplantation
Determinazione del gruppo sanguigno Say how do it
Incidenti trasfusionali 1) Agglutinazione 2) Emolisi
Conseguenze delle reazioni trasfusionali Ittero Blocco renale Shock cardiocircolatorio