diagnóstico laboratorial - anemias
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Anemias
Diagnóstico Laboratorial
Profª.MSc. Fernanda Gomes
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Distúrbios dos Eritrócitos
Microcíticos e Hipocrômicos
Normocíticos e Normocrômicos
Macrocíticos
Congênitos e Adquiridos
Anemias
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Eritropoese
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4
Eritropoiese
Eritropoiese normal na medula óssea. 1: Proeritroblasto; 2: Eritroblasto basófilo; 3: Eritroblasto policromático; 4: Eritroblasto ortocromático.
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5
Anemia?
História Hb, Ht Diminuídos
RPI/Reticulócitos <2
Reticulócitos >2
Sgto ou Hemólise
Coombs D e I
Eletroforese Hb
Fragil. Osmótica
VCM, HCM, CHCM
Microcítica/Hipocrômica Macrocítica
Megaloblástica
Normoblástica
Anemia FerropênicaFerritina, Fe MO
Talassemia, Hbpatia
Anemia SideroblásticaDoença Crônica,
Folatos
B12; Perniciosa
Identifique a Causa
Fígado, Álcool
Tireoidopatia
Drogas
Medulopatia
Crioaglutininas
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6
“Condição na qual o conteúdo de hemoglobina
no sangue está abaixo do normal como resultado da carência de um ou mais nutrientes essenciais, seja qual for a causa dessa deficiência (OMS)”.
Anemias
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Anemias Hipocrômicas e
Microcíticas
Anemia Ferropênica
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Deficiência de Ferro Metabolismo Humano Transporte e armazenamento de O₂ Cofator de reações enzimáticas Reações de liberação de energia na cadeia de
transporte de elétrons
Anemia Ferropênica
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Aquisição do Ferro Dieta e reciclagem de hemácias senescentes Dieta normal: 13 mg a 18 mg de Fe Absorvidos: 1 mg a 2 mg Inorgânica: (Fe3+ ou Fe2+) Orgânica: mioglobina da carne
Anemia Ferropênica
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Necessidades diárias de Ferro
Anemia Ferropênica
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Anemia Ferropênica
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Regulação da absorção de Fe
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Grupo HEME Síntese: células nucleadas Produzida pelo tecido eritróide Fígado
Anemia Ferropênica
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Anemia Ferropênica
Ferro não-heme: forma oxidada Fe³+ (férrico)
Menor biodisponibilidade
Acidez e agentes solubilizantes
Ferro heme: forma iônica Fe²+ (ferroso)
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Atividade das células intestinais, Dieta, Eritropoese, Estado funcional dos depósitos.
Ferro na circulação Transferrina (glicoproteína) = receptores
MO (90%), Células da placenta, Macrófagos, Fígado
Absorção/Transporte de Ferro
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Depósito de Ferro
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Armazenamento:
Ferritina e Hemossiderina: Fígado, Baço e Medula óssea.
Eritrócitos, Coração, Macrófagos tissulares (MO), Mioglobina.
Depósito de Ferro
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Forma gradual e progressiva.
Estágios:
1º estágio: depleção de ferro.
2º estágio: eritropoiese ferro-deficiente.
3º estágio: anemia ferropriva
Deficiência de Ferro
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Perdas Sanguíneas Crônicas
Lesão do aparelho digestivo, Parasitas intestinais, Tumores intestinais, Hemólise neonatal, Menstruações prolongadas.
Deficiência de Ferro
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Instalação lenta e progressiva
Fe corporal. absorção gastrointestinal.
Eritropoese Ausência de Fe nos depósitos, transferrina livre, saturação de transferrina, protoporfirina nos eritrócitos, Microcitose e hipocromia.
Etiopatogenia
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Sintomatologia:
Fatigabilidade Palidez Dispnéia de esforço Coiloníquia Queilose angular Glossite
Aspectos clínicos
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Diagnóstico Laboratorial
HEMOGRAMA
Início: Anemia normocítica e normocrômica
Alterações evidentes a partir de Hb <
10g/dL
Aumento do RDW
Diminuição de Hb→E →Hct →VCM →HCM
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Diagnóstico Laboratorial
HEMOGRAMA
Hemoglobina < 10 g/dL
Hematócrito <35%
nº Hemácias: normal, ou diminuído
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Diagnóstico Laboratorial
HEMOGRAMA
VCM < 80 (82-93fl)
HCM < 26 (27-32pcg)
CHCM < 30% (32-36%).
RDW = aumentado (anisocitose).
Reticulose normal ou discreta
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Diagnóstico Laboratorial
HEMOGRAMA
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Diagnóstico Laboratorial
HEMOGRAMA
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Diagnóstico Laboratorial
DOSAGENS BIOQUÍMICAS
Dosagem de Ferro Sérico ↓ 70µg/dl (VR: 80-160µg/dl).
Transferrina :> 400µg/ml (200-400µg/ml).
Saturação da transferrina ↓: < 15% (250-400µg/dl).
Ferritina sérica ↓: < 20 μg/l (> 150μg/l).
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Diagnóstico Laboratorial
MIELOGRAMA
Hiperplasia eritróide
↓ grânulos de Fe nos eritroblastos
Ausência de Fe corável ou ferritina
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Em estados de sobrecarga de ferro, o nível
está alto e a capacidade total de transporte do metal está normal ou baixa, o que aumenta a saturação da transferrina.
Diagnóstico laboratorial
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Diagnóstico Diferencial
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Diagnóstico Diferencial
Traço Talassêmico
Anemia de Doença Crônica
Talassemia minor (target cells, pontilhado
basófilo)
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Investigação clínica
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Anemias Hipocrômicas e
Microcíticas
Anemia de Doença Crônica
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Anemia de Doença Crônica
ADC Infecção, inflamação crônica↓ Fe sérico
Resposta inadequada da eritropoetina
Encurtamento da sobrevida de Eritróide
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Diagnóstico Laboratorial
• Normocítica • Normocrômica ADC Leve
• Microcitose• Hipocromia
ADC Grave
• Neutrofilia• Trombocitose• Rouleaux
Sinais frequente
s
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Diagnóstico Laboratorial
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Anemias Hipocrômicas e
Microcíticas
Anemia Sideroblástica Congênita
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ASC Raro defeito genético
Herança ligada ao sexo (masculino)Microcitose e HipocromiaBloqueio da síntese do Heme
Mutação no gene eritróide Ácido 5-amino levulínico sintetase – ALAS2Mutação no gene ABC7
Anemia Sideroblástica
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Diagnóstico Laboratorial
• HB: 3 a 4g/dL a quase normal• VCM e HCM diminuídos
• Pecilocitose acentuada• Pontilhado basófilo• Microcitose e hipocromia
• Corpúsculo de Pappenheimer• Leucopenia e trombocitopenia
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Diagnóstico Diferencial
Mielograma
Coloração de Perls
• Sideroblastos em anel
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Anemia Sideroblástica
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Anemias macrocíticas
Anemia megaloblástica
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↓Vitamina B12
Ácido Fólico
Inibição da Síntese de
DNA
Produção de GV
Anemia megaloblástica
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Co-fatores essenciais na formação do ácido
timidínico (timidilato) a partir do ácido uridílico (uridilato), duplicação do material genético.
Vitamina B12 - FUNÇÃO
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Gastrectomia total
Dissociação inadequada da cobalamina da proteína alimentar (idosos).
Insuficiência pancreática
Doença celíaca, enterite regional e ressecção ileal
Deficiência de Vitamina B12
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Deficiência congênita de fator intrínseco Deficiência de transcobalamina II Dieta vegetariana Gravidez
Deficiência de Vitamina B12
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Alimento de origem vegetal e animal. Termolábil. Necessidade diária: 200-300 g. Dieta: 200-400 g/dia Necessidades orgânicas Vit.B12.
Ácido Fólico (Ácido Pteroilglutâmico)
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48
Ácido Fólico (Ácido Pteroilglutâmico)
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Dietas inadequadas. Má absorção intestinal
Alcoolismo,doenças intestinais, anticonvulsionantes, neoplasias.
Aumento das necessidades Gestação, Lactação, Crescimento, Anemia hemolítica crônica.
Hepatopatias crônicas.
Deficiência de Ácido Fólico
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50
Vitamina B12 e Ácido Fólico
Metabolismo celular.
Células que sofrem divisões.
Assincronismo de maturação núcleo-citoplasma.
Falta da transformação uracila-timina (RNA DNA)
Deficiência:
Anemia Megaloblástica.
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51
Vitamina B12 e Ácido Fólico
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Anemia megaloblástica
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Anemia megaloblástica
MO = HIPERPLASIA ERITRÓIDE, METAMIELÓCITOS GIGANTES, MEGACARIÓCITOS GRANDES
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55
Esfregaço (anisocitose e poiquilocitose)
Macrocitose, Corpúsculos de Howell-Jolly Eritroblastos Neutrófilos hipersegmentados
Diagnóstico Laboratorial
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56
Diagnóstico Laboratorial
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57
Diagnóstico Laboratorial
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Dosagem de Vitamina B12 (soro)
200 ng/l (VR: 200-900 ng/l)
Dosagem de Ácido fólico (soro) > 3 µg/l (6-20 µg/l)
Dosagem de Ácido fólico (eritrócitos) 100 µg/l (VR: 200µg/dl)
Dosagem de Fator intrínseco
Dosagem de Transcobalamina II
Diagnóstico Laboratorial
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Pesquisa de anticorpos
Anticorpos séricos anti-células parietais (90%) - IFI.
Anticorpos séricos anti-fator intrínseco (50%) - ELISA.
Diagnóstico Laboratorial
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60
Teste de Schilling: teste de absorção de B12
marcada Injeção intramuscular (dose elevada)= 1000 µg
de Vitamina B12
Depósitos saturados = 24h (5-30%).
Falta de absorção = ausência/ de B12 na urina.
FI + B12 = aumentada ou normal.
Diagnóstico Laboratorial
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61
Pesquisa de anticorpos
Anticorpos séricos anti-células parietais (90%) - IFI.
Anticorpos séricos anti-fator intrínseco (50%) - ELISA.
Diagnóstico Laboratorial
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62
Tipos de Anemias Megaloblásticas
Anemia Perniciosa. Anemia Megaloblástica por Deficiência de Ácido
Fólico. Anemia Megaloblástica associada a Esteatorréia,
Doença celíaca. Anemia Megaloblástica Nutricional, da Gravidez,
da Infância. Anemia Megaloblástica secundária: Gastrectomia
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Anemia Perniciosa
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64
Indivíduos 50 anos. Ambos os sexos. Raça branca.
ETIOPATOGENIA Atrofia da mucosa gástrica – Ausência de FATOR INTRÍNSECO e acloridria. Atrofia das células parietais.
Anemia perniciosa
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65
Quadro clínico
Palidez acentuada, Cansaço fácil, Língua lisa e careca, ardor lingual, Diarréias, Anorexia, Diminuição da acuidade visual, Alterações da pele, Neurológicas, Formigamento e dores musculares, falta de
cordenação motora das extremidades.
![Page 66: Diagnóstico Laboratorial - Anemias](https://reader037.vdocuments.site/reader037/viewer/2022102500/55c7ec7cbb61eb7e398b457d/html5/thumbnails/66.jpg)
66
Hemoglobinopatias
Diagnóstico Laboratorial
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67
Hemoglobinopatias
Anemia Falciforme
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68
Surgimento
Doença hereditária Países Africanos Alteração genética Mutação Produção de Hb S Prevalência em africanos e
afrodescendentes Sickle cell anemia
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69
Hereditariedade
Síndrome falciforme Drepanocitose Traço falciforme (HbAS)
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70
Estrutura e função da Hb
Molécula de Hb Tetrâmero de cadeias de
globina - 2α e 2β Grupo prostético: grupo
heme Cromossomo 16: α Cromossomo 11: β Função: Transporte de
O₂ dos pulmões até os tecidos.
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71
Processo mutacional da HbS
Mutação na cadeia 6 do 11° cromossomo
Mutação: (troca de adenina por timina) GAG para GTG no 6º códon
Troca do ácido glutâmico por valina
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72
RNAm
RNA mensageiro codifica com mutação
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73
Ribossomos
Ribossomo traduz as bases de RNA mutadas
Formação da Globina Beta S, a causadora da Anemia Falciforme
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74
Formação das cadeias globínicas
Dímeros de globina β
Os Dímeros de Globina Beta S se unem à Dímeros de Globina Alfa vindos do cromossomo 16.
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75
Tetrâmeros de Globina Alfa/Beta S
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76
Ligação do O₂ com a HbS
Na presença de pouco oxigênio, ocorre:
Mudança conformacional
Exposição da valina, criando uma instabilidade termodinâmica
Polimerização da hemoglobina em longas fibras.
Ponto hidrofóbico de ligação na superfície externa da cadeia beta, alterando a conformação final da proteína.
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77
Polimerização
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78
Falcização do eritrócito
A polimerização da Hb S começa a deformar o eritrócito imediatamente, fazendo com que a célula adquira a forma alongada –
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79
Distensão sanguínea
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80
Distensão sanguínea
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81
Vasoclusão
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82
Diagnóstico Laboratorial
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83
Identificação da Hemoglobina S
Presença de Hb S: Teste de Falcização ou
de solubilidade
Determinantes de genótipos (AS, SS, SC,
etc)
Eletroforeses de Hb: meio ácido e alcalino
Isoeletrofocalização
Dosagem de Hb Fetal
HPLC
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84
Identificação da Hemoglobina S
Determinantes de Haplótipos Biologia Molecular
Monitoração
Hemograma, contagem de reticulócitos
Morfologia eritrocitária
Dosagem de Ferritina, bilirrubina, ácido úrico,
FA, LDH, metaHb
Pesquisas intracelulares, corpos de Heinz, Hb H,
Hb F
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85
Teste de falcização ou afoiçamento:
Indicam a presença de Hb S
Não diferenciam Hb SS, SA e heterozigotos
compostos como AF-talassemias
Pouco usados para diagnóstico de AF
Diagnóstico Laboratorial
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86
Eletroforese alcalina de
hemoglobina
pH variável entre 8 e 9 Carga elétrica da molécula de Hb S menos
negativa em relação à Hb A
Método: Acetato de celulose e agarose
Algumas Hb variantes migram na mesma
posição
Diagnóstico Laboratorial
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87
Eletroforese alcalina
Diagnóstico Laboratorial
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88
Eletroforese alcalina
Diagnóstico Laboratorial
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89
Eletroforese ácida Diferenciar a Hb S das outras 22 principais Hb variantes
que migram na mesma posição Ex: Hb D Los Angeles
Gel de agarose, pH variável entre 5 e 6
Movimentação da Hb induzida por sua carga elétrica
Interação elétrica entre as proteínas da agarose com as
Hbs
Diagnóstico Laboratorial
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90
Eletroforese ácida
Diagnóstico Laboratorial
![Page 91: Diagnóstico Laboratorial - Anemias](https://reader037.vdocuments.site/reader037/viewer/2022102500/55c7ec7cbb61eb7e398b457d/html5/thumbnails/91.jpg)
91
Isoeletrofocalização:
Eletroforese de focalização isoelétrica
Permite identificar cerca de 80 tipos diferentes de
hemoglobinas variantes
Permite a análise de várias amostras por vez (20 a
100 amostras).
Uso IEF no "screening" para Hb S em sangue de
recém-nascidos
Alto custo operacional
Diagnóstico Laboratorial
![Page 92: Diagnóstico Laboratorial - Anemias](https://reader037.vdocuments.site/reader037/viewer/2022102500/55c7ec7cbb61eb7e398b457d/html5/thumbnails/92.jpg)
92
Isoeletrofocalização
Diagnóstico Laboratorial
![Page 93: Diagnóstico Laboratorial - Anemias](https://reader037.vdocuments.site/reader037/viewer/2022102500/55c7ec7cbb61eb7e398b457d/html5/thumbnails/93.jpg)
93
Cromatografia líquida de alta pressão - HPLC
Permite a quantificação de hemoglobinas A, A2 e Fetal, bem como de hemoglobinas variantes
Diagnóstico Laboratorial
![Page 94: Diagnóstico Laboratorial - Anemias](https://reader037.vdocuments.site/reader037/viewer/2022102500/55c7ec7cbb61eb7e398b457d/html5/thumbnails/94.jpg)
94
Cromatografia líquida de alta pressão - HPLC
Processo de troca catiônica Moléculas com cargas positivas são adsorvidas em
uma fase estacionária da coluna; Eluições induzidas pela passagem de um líquido
(fase móvel) com altas concentrações de cátions. O eluato é detectado opticamente e quantificado
computando a área do gráfico correspondente à fração eluída.
Diagnóstico Laboratorial
![Page 95: Diagnóstico Laboratorial - Anemias](https://reader037.vdocuments.site/reader037/viewer/2022102500/55c7ec7cbb61eb7e398b457d/html5/thumbnails/95.jpg)
95
Cromatografia líquida de alta pressão - HPLC
Diagnóstico Laboratorial
![Page 96: Diagnóstico Laboratorial - Anemias](https://reader037.vdocuments.site/reader037/viewer/2022102500/55c7ec7cbb61eb7e398b457d/html5/thumbnails/96.jpg)
96
Biologia Molecular
genes da globina beta no cromossomo 11
Enzimas de restrição permite a ruptura de
ligações entre determinadas sequências de
bases nitrogenadas;
Objetivo de relacionar haplótipos com a
diversidade clínica.
Diagnóstico Laboratorial
![Page 97: Diagnóstico Laboratorial - Anemias](https://reader037.vdocuments.site/reader037/viewer/2022102500/55c7ec7cbb61eb7e398b457d/html5/thumbnails/97.jpg)
97
Biologia Molecular
Outras Aplicações: Identificação pré-natal de anemia falciforme
por meio da enzima Mst II que fragmenta o DNA da globina b S.
Diferenciação de outras hemoglobinas variantes que migram eletroforeticamente em posição similar à da Hb S,
Ex. Hb D Los Angeles e Hb Korle-Bu
Diagnóstico Laboratorial
![Page 98: Diagnóstico Laboratorial - Anemias](https://reader037.vdocuments.site/reader037/viewer/2022102500/55c7ec7cbb61eb7e398b457d/html5/thumbnails/98.jpg)
98
Biologia Molecular
Diagnóstico Laboratorial
![Page 99: Diagnóstico Laboratorial - Anemias](https://reader037.vdocuments.site/reader037/viewer/2022102500/55c7ec7cbb61eb7e398b457d/html5/thumbnails/99.jpg)
99
Diagnóstico Laboratorial
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100
Diagnóstico Laboratorial
![Page 101: Diagnóstico Laboratorial - Anemias](https://reader037.vdocuments.site/reader037/viewer/2022102500/55c7ec7cbb61eb7e398b457d/html5/thumbnails/101.jpg)
101
↑Contagem de reticulócitos
↑Ferritina
↑Bilirrubina ↑Fosfatase alcalina: Ocorrência de cálculos
biliares (colelitíase) devido à bilirrubinemia desencadeada pelas crises de hemólise.
Diagnóstico Laboratorial
![Page 102: Diagnóstico Laboratorial - Anemias](https://reader037.vdocuments.site/reader037/viewer/2022102500/55c7ec7cbb61eb7e398b457d/html5/thumbnails/102.jpg)
102
↑Ácido úrico: reutilização de ácidos nucléicos
provenientes da degradação da globina.
↑LDH: marcador de destruição celular
↑Metaemoglobina: Hb S maior que 50% a metaemoglobinemia desencadeia a degradação da Hb S com formação de corpos de Heinz.
Diagnóstico Laboratorial
![Page 103: Diagnóstico Laboratorial - Anemias](https://reader037.vdocuments.site/reader037/viewer/2022102500/55c7ec7cbb61eb7e398b457d/html5/thumbnails/103.jpg)
103
Pesquisa Intracelular de corpos de Heinz e Hb F
Corpos de Heinz : precipitados de globinas α ou β
Indicativo de processos oxidativos da hemoglobina.
Diagnóstico Laboratorial
![Page 104: Diagnóstico Laboratorial - Anemias](https://reader037.vdocuments.site/reader037/viewer/2022102500/55c7ec7cbb61eb7e398b457d/html5/thumbnails/104.jpg)
104
Pesquisa intracelular de Hb Fetal: técnica de
eluição ácida; Hb A é retirada (ou eluída) dos eritrócitos,
enquanto que a Hb Fetal permanece dentro da célula.
Distribuição heterogênea: Talassemia menor ou maior
Persistência hereditária de Hb Fetal (PHHF): todos os eritrócitos corados;
Diagnóstico Laboratorial
![Page 105: Diagnóstico Laboratorial - Anemias](https://reader037.vdocuments.site/reader037/viewer/2022102500/55c7ec7cbb61eb7e398b457d/html5/thumbnails/105.jpg)
105
Anemias Hemolíticas
Visão Geral
![Page 106: Diagnóstico Laboratorial - Anemias](https://reader037.vdocuments.site/reader037/viewer/2022102500/55c7ec7cbb61eb7e398b457d/html5/thumbnails/106.jpg)
ANEMIAS HEMOLÍTICAS
Hemólise: destruição prematura de eritrócitos
Anemia hemolítica: MO não consegue compensar
Gravidade da anemia: intensidade/velocidade da hemólise e da resposta medular (MO)
Assintomática ou rapidamente fatal (IAM, ICC)
![Page 107: Diagnóstico Laboratorial - Anemias](https://reader037.vdocuments.site/reader037/viewer/2022102500/55c7ec7cbb61eb7e398b457d/html5/thumbnails/107.jpg)
ANEMIAS HEMOLÍTICAS
Apresentação clínica depende da causa (p.ex., crises álgicas na doença falciforme)
Existem muitas causas (testes específicos) de hemólise (exames gerais)
Abordagem diagnóstica/terapêutica da hemólise depende da causa subjacente da mesma
![Page 108: Diagnóstico Laboratorial - Anemias](https://reader037.vdocuments.site/reader037/viewer/2022102500/55c7ec7cbb61eb7e398b457d/html5/thumbnails/108.jpg)
HEMÓLISE
Hemólise Intravascular Destruição das hemácias dentro do espaço vascular Hb é liberada na circulação (hemoglobinemia) e eventualmente
perdida na urina (hemoglobinúria) Hb reage com haptoglobina (complexo catabolizado pelo fígado),
o que reduz a haptoglobina sérica Excedida a saturação da haptoglobina, Hb livre é
filtrada/eliminada pelos rins (hemoglobinúria)
![Page 109: Diagnóstico Laboratorial - Anemias](https://reader037.vdocuments.site/reader037/viewer/2022102500/55c7ec7cbb61eb7e398b457d/html5/thumbnails/109.jpg)
HEMÓLISE
Hemólise Intravascular
A Hb reabsorvida é armazenada nas células epiteliais tubulares renais como hemossiderina
Quando a hemólise é crônica, células epiteliais cheias de hemossiderina podem ser encontradas na urina (hemossiderinúria; reação azul da Prússia)
![Page 110: Diagnóstico Laboratorial - Anemias](https://reader037.vdocuments.site/reader037/viewer/2022102500/55c7ec7cbb61eb7e398b457d/html5/thumbnails/110.jpg)
HEMÓLISE
Hemólise Extravascular
A destruição das hemácias senescentes ou anormais ocorre no interior dos macrófagos, no baço, no fígado e na MO
A anatomia do baço o torna mais sensível para detectar alterações mínimas nos eritrócitos e removê-los (diferentemente dos demais locais)
![Page 111: Diagnóstico Laboratorial - Anemias](https://reader037.vdocuments.site/reader037/viewer/2022102500/55c7ec7cbb61eb7e398b457d/html5/thumbnails/111.jpg)
HEMÓLISE
Consequências: Redução da sobrevida de hemácias Rápido catabolismo do heme (macrófagos), com produção de
pigmentos biliares e CO O ferro é reaproveitado Protoporfirina é convertida em biliverdina e esta é reduzida a
bilirrubina , que circula ligada à albumina.
![Page 112: Diagnóstico Laboratorial - Anemias](https://reader037.vdocuments.site/reader037/viewer/2022102500/55c7ec7cbb61eb7e398b457d/html5/thumbnails/112.jpg)
HEMÓLISE
Consequências: No fígado, a bilirrubina é conjugada com ácido glicurônico
(glicuroniltransferase), formando a “bilirrubina conjugada” (bilirrubina-diglicuronato), excretada nas fezes (bile)/urina (reabsorção)
Bilirrubina (ou pigmentos biliares) na urina é sinal de excreção de bilirrubina conjugada (ou direta)
Bilirrubina não-conjugada (indireta) não é excretada na urina!
![Page 113: Diagnóstico Laboratorial - Anemias](https://reader037.vdocuments.site/reader037/viewer/2022102500/55c7ec7cbb61eb7e398b457d/html5/thumbnails/113.jpg)
HEMÓLISE
Consequências: A elevação de bilirrubina indireta no plasma se manifesta como
icterícia acolúrica (já que a BI não é excretada na urina) A hiperatividade fagocitária pode gerar esplenomegalia e
hepatomegalia A medula óssea também estará hiperplásica, com aumento da
eritropoese (até 6-7 vezes o normal)
![Page 114: Diagnóstico Laboratorial - Anemias](https://reader037.vdocuments.site/reader037/viewer/2022102500/55c7ec7cbb61eb7e398b457d/html5/thumbnails/114.jpg)
HEMÓLISE
Consequências: Quando a sobrevida eritrocitária é menor que 20 dias, a MO não
consegue mais compensar as perdas, e surge a anemia.
Refletindo a hiperatividade da MO, há aumento de reticulócitos no sangue (reticulocitose)
![Page 115: Diagnóstico Laboratorial - Anemias](https://reader037.vdocuments.site/reader037/viewer/2022102500/55c7ec7cbb61eb7e398b457d/html5/thumbnails/115.jpg)
HEMÓLISE
Em geral, os mecanismos que causam hemólise podem ser divididos em quatro grupos:
Anormalidades da membrana das hemácias
Anormalidades da hemoglobina
Anormalidades das enzimas eritrocitárias
Fatores externos às hemácias
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Testes para DiagnosticarHemólise
1. Hemograma Seriado2. Contagem de Reticulócitos 3. Bilirrubinas Séricas4. DHL Sérica5. Haptoglobina Sérica6. Hemosiderinúria7. Hemoglobinúria
![Page 117: Diagnóstico Laboratorial - Anemias](https://reader037.vdocuments.site/reader037/viewer/2022102500/55c7ec7cbb61eb7e398b457d/html5/thumbnails/117.jpg)
Anemia Hemolítica
Anemia por aumento da destruição eritrocitária Meia-vida menor das hemácias Normocítica/Normocrômica Reticulocitose e hiperbilirrubinemia (BI) Geralmente assintomática até que a meia-vida
eritrocitária seja menor que 20 dias MO compensa até 6-7 vezes
![Page 118: Diagnóstico Laboratorial - Anemias](https://reader037.vdocuments.site/reader037/viewer/2022102500/55c7ec7cbb61eb7e398b457d/html5/thumbnails/118.jpg)
Reticulócitos e IPR Aumentados
Bilirrubina Total e Indireta Aumentadas
DHL Aumentada
Haptoglobina Diminuída
Hemoglobinúria Presente
Hemosiderinúria Presente
Urobilinogênio na Urina Aumentado
Meia-vida Hemácias Cr 51 Diminuída
![Page 119: Diagnóstico Laboratorial - Anemias](https://reader037.vdocuments.site/reader037/viewer/2022102500/55c7ec7cbb61eb7e398b457d/html5/thumbnails/119.jpg)
Anemia Hemolítica
![Page 120: Diagnóstico Laboratorial - Anemias](https://reader037.vdocuments.site/reader037/viewer/2022102500/55c7ec7cbb61eb7e398b457d/html5/thumbnails/120.jpg)
Drepanócitos (SS)Anemia Falciforme
www.drsarma.in
![Page 121: Diagnóstico Laboratorial - Anemias](https://reader037.vdocuments.site/reader037/viewer/2022102500/55c7ec7cbb61eb7e398b457d/html5/thumbnails/121.jpg)
Target Cells
Talassemias
Hepatopatias
Asplenia
Esplenectomia
![Page 122: Diagnóstico Laboratorial - Anemias](https://reader037.vdocuments.site/reader037/viewer/2022102500/55c7ec7cbb61eb7e398b457d/html5/thumbnails/122.jpg)
Esferocitose
![Page 123: Diagnóstico Laboratorial - Anemias](https://reader037.vdocuments.site/reader037/viewer/2022102500/55c7ec7cbb61eb7e398b457d/html5/thumbnails/123.jpg)
Esferocitose Hereditária
![Page 124: Diagnóstico Laboratorial - Anemias](https://reader037.vdocuments.site/reader037/viewer/2022102500/55c7ec7cbb61eb7e398b457d/html5/thumbnails/124.jpg)
Testes para Definir aCausa da Hemólise
1. Eletroforese de Hemoglobina2. Autoimune: TAD e TAI (CD e CI)3. Fragilidade Osmótica (Esferocitose)4. Crioaglutininas (AHC)5. Teste HAM/Imunofenotipagem (HPN)6. Enzimopatia (G6PD, PK etc.)7. Coagulograma (CID, PTT, SHU)
![Page 125: Diagnóstico Laboratorial - Anemias](https://reader037.vdocuments.site/reader037/viewer/2022102500/55c7ec7cbb61eb7e398b457d/html5/thumbnails/125.jpg)
125
Anemias Hemolíticas Congênitas
Esferocitose Hereditária
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126
Defeito de membrana
Mutações gênicas SPTB, ANK1,..
Espectrina-β e α, anquirina
Redução da densidade do citoesqueleto
Esferocitose hereditária
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127
Esferocitose hereditária
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128
Esferocitose hereditária
Anemia significativa
Pode ser assintomática
Icterícia intermitente
Esplenomegalia ↑ Bilirrubina
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129
Diagnóstico Laboratorial
Esferócitos Macrócitos
Policromatocitose
pecilócitos
Hb normal ou
↓
VCM e HCM normais CHCM ↑
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130
Teste de antiglobulina direta
Teste de fragilidade osmótica
Citometria de FluxoLigação da eosina-5-maleimida à banda 3
Exames adicionais
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131
Esferocitose hereditária
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132
Esferocitose hereditária
![Page 133: Diagnóstico Laboratorial - Anemias](https://reader037.vdocuments.site/reader037/viewer/2022102500/55c7ec7cbb61eb7e398b457d/html5/thumbnails/133.jpg)
133
Anemias Hemolíticas Congênitas
• Eliptocitose e Ovalocitose Hereditária
• Estomatocitose
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134
Assintomática. Não se conhece a causa desta anomalia.
Espectrina não tetrameriza, sobrando dímeros.
Hemograma: Eliptocitose.
Eliptocitose hereditária
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135
Estomatocitose
Defeito da membrana. Depressão longitudinal central. Associação a doenças hereditárias Como não existe consequência clínica não há
tratamento específico.
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136
Anormalidades Enzimáticas do
Eritrócito
Deficiência de glicose-6-fosfato desidrogenase (G6FD)
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137
Mutações no gene codificante para G6FD Localizado no cromossomo X (locus Xq28) 400 variantes enzimáticas. Causa hemólise = não há produção de ATP.
Deficiência de G6FD
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138
Desencadeada por agentes externos:
Drogas oxidantes (sulfas, cloranfenicol, furazolidona),
Alimentos oxidantes (fava) Infecções.
Deficiência de G6FD
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139
Hemograma
Diagnóstico Laboratorial
Anisocitose, Pecilocitose
Macrocitose, Pontilhado Basófilo
Policromatocitose, Corpos de Heinz
Queratócitos
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140
Hemograma
Diagnóstico Laboratorial
![Page 141: Diagnóstico Laboratorial - Anemias](https://reader037.vdocuments.site/reader037/viewer/2022102500/55c7ec7cbb61eb7e398b457d/html5/thumbnails/141.jpg)
141
Testes de triagem e dosagem da enzima G6PD
Diagnóstico Laboratorial
Pesquisa qualitativa
Oxidação da Hb para MHb com
NaNO₂
Reação enzimática –coloração
final castanha
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142
Diagnóstico molecular da deficiência de G6FD
PCR seguida da digestão do produto amplificado com enzimas de restrição (PCR-RFLP).
Diagnóstico Laboratorial
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143
Anemias por perda de Sangue
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144
Anemias por perda de sangue
Trauma Cirurgias, acidentes
Parasitas (Helmintos hematófagos)
Distúrbios hemostáticos Trombocitopenias, coagulopatias, etc
Lesões hemorrágicas Neoplasias, úlceras no TGI, queimaduras,
infecção
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145
Hemograma Completo
Hemograma Completo
Eritrograma
HbE
VCM, HCMCHCM, RDW
Plaquetograma
Contagem total
Leucograma
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146
Anemias por perda de sangue
Fase Aguda Após Hemorragia Fase de Recuperação
Hematócrito normal
Hematócrito Baixo Anemia macrocítica
Perda de plasma Anemia normocítica
Hipocrômica
Perda celular Normocrômica Reticulocitose
Hipoproteinemia Normoproteinemia
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147
Classsificação quanto à resposta
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148
Diagnóstico laboratorial
Anisocitose
*
Policromasia
Regenerativa (pico da resposta em 2 a 3 dias)
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149
Diagnóstico laboratorial
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Azul de cresil brilhante
Novo Azul de Metileno
Diagnóstico laboratorial
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151
Diagnóstico laboratorial
Valores de Referência: Adulto 0,5 a 1,5% Gravidez: aumentado RN: até 10%
Reticulocitose: anemia aguda pós hemorrágica.
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Diagnóstico laboratorial