decontamination of aflatoxin b1-contaminated corn by ammonium persulphate during fermentation
TRANSCRIPT
������� �� ��� ���� �� ���� ��� �������� � � ���� �� 3'623*)22& 7������6 &��&8+'-6 ����&49�����..
Decontamination of aflatoxin B1-contaminatedcorn by ammonium persulphate duringfermentationArmando Burgos-Hernandez,1� Ralph L Price,2 Karen Jorgensen-Kornman,2
Rebeca Lopez-Garcıa,1† Henry Njapau1 and Douglas L Park1
1Department of Food Science, Louisiana State University Agricultural Center, Baton Rouge, LA 70803-4200, USA2Department of Nutritional Sciences, University of Arizona, Tucson, AZ 85721, USA
(Rec
� CoAP 1E-ma† Cur
� &
��������� � ��� ��������� � � ���� ��� ���������� ���������� � ��� ��� �� �������� �� �� � ��
�� � �� �������� � � ����������� ���� � �� ��� ����� �!���������� � ����"����� #� ���� ��� �������$
�� #� ���� � ��� �� ���� � � �� #� ����� � � ���� ���� � �� � ���� ����� �������" � ��$ %��������
� ��������� �� �&$'(� &$(&� �$&&� �$( ��� '$&) �*�� � ��� ���� #�����#��� ���� ������ �� ��
��� ��+���� � � ������ ���������� � �� �����" ���������� �$ ,� ���� � �������� �� ��� ������
���� � � � ��� &$( ��� �$&) ��*�� �- ������ ������� ���- � #�� ���� ��� �� "�� #�� ���� ����
������$ .�� ����� ���� ����� �� ���� ��������� ���"�� � �� ���������� � #� ����� ���������� ��
�������+���� � ��� ���������� �$ /����� � ���� ��� ���� � ���� ���������� ����� ��� ���������
�� � #� ����$ ������ � �� ��� ������ � � ����"���� # ������� ����" �� ���� ���� ��� ��&& ������
������ ��� #��� ���� �� # ������ � ��� �$ ������ � � '$&) ��*�� ��� ���� #�����#��� ������ ��
�"��� ����� � ��� ��������� � ��� �� ��������" ���� � #� ����� �$ ������ � � #�� ����� ��� � �
��"��+����� ���&$&(� �������� ���� � #� ����� � � ��"��+����� ���&$&(� ��#� �� �� ��� ������
���� � #� ����$ � ���� #� ������ � � ��� ��������� � � � �� ��� � � ���� � #� ����� � ��������
�� ������ � � '$&) ��*�� ��� ���� #�����#��� � � � � ��� � �$& ��� &$() ��*�� ���- � #�� ����
���#������� $ ��� ������� � �� ���#��� � ��� � ����"���� # �������$ . ������ ���������� ��� � ����
#� ������ �� ���������$
� '&&' 0 ���� � 1������ ,������
2� � ���� �������� � �������� ����� ���� ��������������� ���������� ���� ��������� ��������
INTRODUCTION��������� ��� ���������� ��������� ���� ��� ����
������������ ���� ��� ����� ��� ����������� �������
������ ��� ����� �������� �!����� ��������������� ��
��� ������� �� ��������"������������ ���� �� ���
��!��� ��������� �� ������� !��� ����������� ���� ��
��� ���������� ��������� ����������� ���� ��� ��������"
�������� ����������� ���� �� �� ������ ��� #����"
��� ��������������� ��������� ���� ���� �����"
� ��� ��������� ������� ������������� ����������
�� �������� ������� ������������ ����� ����� �������"
���� ��� ����� �������� �����������
����������� ��� ����� �� �� ��� �� ��� ����
���������� ������� ��� ��������������� �� ��������"
������������ ������������ ��� ����������� ��"
����� ����� �������� ��������� �� ������� ����"
���� ��� ���� ������������ �� ������ ������ ��
�������� �� $$% �� � ������ �� �������������&
'�� �� ��� ���� ��� ���������� ��������"�������"
����� ���� �� �� ������������ ��� ������� �����"
eived 3 September 2001; accepted 10 December 2001�
rrespondence to: Armando Burgos-Hernandez, Departamento de658, Hermosillo Sonora, CP 83000, Mexicoil: [email protected] address: Escuela de Ciencias Quımicas, Universidad La Salle, B
��& 0������ �� 1������� -�������� � � ���� �� ��&&)23&4&
�����()* +����� ����� �������� �������� ��������� ��
������ �� $�% !�� �������� !������ �������� �������
���������� ����� ,������ ������� ��� ���������� ��
�������� ���� ������� ���� ��������"������������
���� �����!��� � ������ ���� �������� ��� �����������
�� ����������� ��� ������������ �� ��� ��� � !����
����� �� ������ � �������� ���� �� ������ ����
����������� �����!�� �� ������������ �� ����� -�
��������� ��� ��� �� �������� �� ����������� !���
����������� ��� ������,������ �� ��������"����������
���� ��� ���� ��������(�. ����� ������� ������� ����
�������� ����� ��������� ������������
'!��� �� ��� ���� ����� �������� �� ��� ���������
�� ���� �������� ��! ���������� ��� ���������� �����
������ �� �� �������� �� ������/ ��� ������������ ��
��������"������������ ���� ������ ��� ���������� ��
����� � ��!"���� ��! ��������� �!����� ���������"
������ �� ���� ���� !��� ������� ������ ���� ������
!���� ����� �������������� ���� �������� ���� �����
�� ���� �� ������ ����� ��� ������ ����� �������� ���
Investigacion y Posgrado en Alimentos, Universidad de Sonora,
enjamın Franklin 47, Mexico, DF, 06140, Mexico
��&45(���� 23*
������������ �� ����������� ��� ����� �����������
���������� �� ��� ��������������� �� ��������"���"
������� ���� !��� �������� ����� ���� 7�� ����"
��� ������ ������ �� ������ ���� ������� ������� ���
���� ������8 ������ ��� ������������ ������ ��� ���
������� �� ����� �������� �� ������� ��������� ���
�������� � �������
MATERIALS AND METHODSCorn sample preparation#�������� ��������� ��������"������������ �����!
���� ���� ���:��� !�� ������ �� � ;���� ���� �� ���
� &�"���� ������� ���� ������� �� � ������ �!��"�����
������ ��� ������ ���� !�� ��<�� �� ������ �����
�������� ��� ������ �� 3°1 ����� ������� �������� ����� �������������
Fermentation process using ammonium persulphate��� ������������ ������ ��������� �� ����� ��� �6
������������� ��������,������ ��� �������������
���������1��� 7���8� ������� �������� 7(���8 ��� ����"
���� ����� ���� 7!4!8 �� ������ �� ���� ��2� ��� �2
��� &��%!��� 3���� �� ��������� !���� !��� ��������
�� ����� =��������� ���<�� ��� �� ��� �������
!�� ��9����� �� *�& ����� ������ ��> 1� �� ��>
#�' �� � �� ������ ��� � ��(�� ������� �� ���������������"������� ����"�"������� 7>������� -�-0�1��������� #1� ?0�8 !�� ������ =��������� ���<�
���������� ���� ������� !��� �� �� !��� ������ ���
���� ��� ���������� �� �2°1 ��� 2���� ��� ���<� !��� �� ���� � $�°1 !���� ���� ��� &� !��� ������������������� ������� �� ������� ��� �������� ������
������������� ���� !�� ������ �� ������ ���� �� ���������
!����� ��� �� ��� ���� !�� ��9����� �� 3�& �����
������ ��> 1� �� ��> #�' �� � �� ������ ���
��(�� �� ���������������� 7�������� -�-08 !�� �����
�� ���� �������� ��� ���<� !��� ����� �� � *�°1!�������� ��� &� !��� ���������� ��������� �� ���������
������
�����������-� ����� �� ��� ��� ������������ ������ ��� �����
7���������� �������8 ��� ������ !�� �� ���� ���������� ��� �������� �� ��� ������������ ���������
+'@-1 ��� ����������� ����� ��<��� !��� ��� �����
�� �% ������� !���� �� 3�°1 ��� ������ ����� !��� ������ ������� ��� 2���� ��� ����� ��� ������ !��
����!�� �� ����� ��� 2���� '��� ��� ����� ��� ������
!�� ������ ��� ��� ������� �� ��� ���� !�� ��!���� ��
� ���������� 3�°1 ��� ��� !�� ��9����� �� 3�2� �2�� ������� �� ��� ����� ��� ������ !�� ����� �� ���
����� ��� ���<� !��� �� �� !��� ������"���� ������
��� ��� ��� ������� !��� ���,�� �� ����� ��� ���
���<���� ������� ��� ��� ��A� ����� � ����� ���� !��
���������� ���� ��� ���< �� ����� �� ����! ������ ��
���� ������� �� ��� ������ �� � ���� ���� ����������
� � ���� �� ���23*)22& 7������6 &��&8
!����� ��� ��������� �� ������� �� ��� ���� ����
��������� ��� ������� ������������ ������ ������ ���
���<� ��� ���������� ������� !�� ���� �� (�°1 ���.&�� ����� .&�� ��� ��� ���� ��� �� �������� !���
��<�� ��� ������� ��������� ��� ��� �������� ���� ����
!�� ����� �� ������ ����� ������ ���&�°1 ��� ����:�"����� ����� ������� �������� ���������
Fermentation procedure using ammoniumpersulphate and peroxides��� ������������ ������ !�� ������� ��� �� ���������
����� ��� !��� ��� �����!��� ����,�������� �!�
�������������� 7��2 ��� ��% !4!8 �� ����� ���������
���������� (�% �������� ������� ��������� �:���"
����������� ��� ���:�� �������� !��� ����� ������
�� ��������� ������ �� ��� ������������ ������6
������������� ��������,������ ��� �������������
+����� ������������� &�2 �� 2��� �� �:����������"
���� �� ���:��� ������� �� &�2 �� 2���� �� (�%
�������� ������� !�� ����� ����������� ������
��9������ ��� �� ��� ���� �� *�&� ���� ���������
7� ���������8 ����������� !�� ����� ��� ��� ������ ��������� �� ��������� ����������
+����� ��������,������ ��� ���� ������� �� ��"
������ !��� ����� ����� ��� �������� �� ���� ��
��������� !����� B����� 7 ��������� ����8 ����������"������ !�� ����� ��� ��� ������ ���������� +�����
��� ������������ ����� ��� �������� !��� ����� !���
��� ��� ������� �� ��� ���� !�� ��!���� �� � ����"
������ 3�°1 ��� ��� !�� ��9����� �� 3�2 �������������� �� ��� ����� 7� �������8�-� ��� ����� ��� ������������ !�� ��� �� (�°1 ���
.&�� ����� ������������� 3���� ��� ��� �� ��� �� ��"
������ !��� ��<�� ��� �������� ��� ������� ��������
��� �������� ���� !�� ��<���� ��� ������ ��
��������� ������
Aflatoxin determination��������"���� ����� �������� �"������������ ����
��� ����������� ����� ����� ������ 7++0C8 !���
�������� ��������� �� ��� ������ ��������� �� �����
�� ��� $ ������� ������ ���� 72��8 !�� ������� !�����������4!���� 7/�6&�8 ��� ,������ ����� ������� �
.2�� ������ �� ��� ,������ !�� ������� ��� ,������
������ ���������� !��� &�2���� �� �����������1��������� ��������� !��� �������� ��� �����
������� � 0� "D�< ������ ��� ��������� 7;����� ������"
����� >������� >�� ?0�8� ����� ����� !����� !���
������ ��� ����� ������ ��������� !��� ������ !���
����������4�������� �������� ��������� ��� ��� ���
!��� ����������� ��������� �� �'�1 ������ $$��((
"-�� �������� ������,������ !�� ������� ��� ����� �
���<��� ������� ����" ���������� ������ ������"
����� � !��� � >��������"�� 1"/ ������� ����
������� ����� !����4������������4�������� 7.�6.6.8
�� ��� ������ ���� �� � ��! ���� �� �&2�� ����� �E����� B���������� ����������� �������� 7(*2��
���������� ��� 3(�� ��������8 !�� ����� 1�����"
������� !��� �������� ���� � E����� 3&.� �����������
23.
������� ����!���" �� ��
Ethanol determination��� ������� ������ �� ��� �� �������� ����� ���
������������ �� ���� !�� ���������� ��������� ��
�'�1 ������ $/3�3 �"=� -�� �� ���� !�� ����
�� �� �������� ��������� ������� ���� �� ��� �� !���������� !��� ���� �� 2% ��� �� ���� ��� ��9��������� � E����� (.�� ��� ����������� �� ��� ���
����������� � !�� ���� �� !��� � 2�����*�������� ������ !���� !�� ��<�� !��� ��&% 1����!��
�� CD *�4/� 1���� ��< 14'� ��� ��� ������� �� ���
������ !�� ��°1� 1���������� �� !��� ��������!��� � E����� 3&.� �����������
Ames test procedureD���� ����� ������� ����� !��� ��� !������ 0$ ������"
����& !��� ��������� �� ��� ������ ��� ������� ��������
�������� ���� ++0C �� ���� ������������ ����������
D������� 7�B�8 ��� ������� 7+>0'8 �������� !���
��� !������ 0$ ���������� !��� ��������� '�������
���� �������� !��� � �<�� !��� <��!� ������� �� ���
�B� ��� ���� ������ ��� ��������� ��������� -� ���
������ ������ 2��� �� ���� ++0C ��� �� !��
��������� !��� ���� �� �������� ��� ������ ��
�������� ������������� �� �� �� +>0' ��� ��������
������� ��� ������������ ���������
Statistical analysis0������A� ���� !�� ���� �� ��������� ����������� �����
����� �� �������� ������ ����� ������������ �� ���
������� �� ������� ��� ����� ������������ �����
�������� ��� �������� ��� ���� ���� !�� ���� ��
��������� ����������� ����� ����� �� ������� ������
����� ��� ���� ����������� '��"!�� �������� ��
�������� 7�#'E�8( !�� ���� �� ���� �����������
���!��� �������� ��� ���������� ����� ����� ���� ��
��������� �� ��� ������� ����� �� � ����� �� ���2 !������ ������ �����!��� � ���,���
Table 1. Effect of ammonium persulphate (NH4S2O8) on aflatoxin B1 contentand ethanol production after fermentation of AFB1-contaminated corn
�������
� ��
���� �� ���� �
��� ���
��������
������� ��
������
!���� ��
�������� ��� �� �� � �
���� �� ���� ���� ������� ������ �� ����� ���� ������ ������ �� ���� ��� ������� ����� �� ���� ���� ������� ����� �� ���� ��� ������� ������ �� ��� ���� ������ ��� ����������� ����� ���� ������� ������ ��� ��� ! �"��� ��#��������$��� $����%�����& ��!!����� !� ������� ��� '" �����(�� )� �����%�����& ��!!����� '" �����(�
RESULTS AND DISCUSSIONDetoxification with ammonium persulphate��������"������������ ���� !�� �� ���� �� ����"
���� ����� ���� �� ����� �� ������� ��� ������ �� ����
�������� �� ��� �B� ������ ��������� �� ��� ����
����� ������������� 1����������� ���� !�� �� ���� ��
���� ��&2� ��2�� ��� �2 ��� &��% 7!4!8 ��������
����� ���� ������ ��� ������������ ������� ���"
����� ������ !��� ���������� �� ��� ++0C ���������
����� ������������ ��� ���� ����� �� ������������ ��
!��� �� �� ��� �B�"���� ��� ��������� ������������
�B�"���������� ����� ��� ������������ ������ ��
������ ������� �������� ������ �� 2�% �� ��� ����
7����� 8� ����� �B�"������������ ���� !�� ���"
������ �� ��� ������� �� �������� ����� �����
�B� �������� ���!�� ���� ����������� ������ �
�������������"�� ������ ��������� �� ��� ����� ��
�B� �� ��� ��������� ++0C �������� �� ��� ��������
�B�"���������� ���� 7����� 8� ��� �������� �B���������� 7�/2%8 !�� ������� !��� &��% ����"
���� ����� ���� !�� ����� ������ �� ��� �������
23/
����� ������� ��� ���������� !��� ������� �� �����3
��� �������� ���� ��� �������� �� &��% 7!4!8 ����"
���� ����� ���� ��� ������������ ������ ��������
������ �� ������������ ����� �!����� �� !�� ���� ��"
������ �� <��! ��� ������ �� �������� ����� ����
�� ������� ����������
Effect of ammonium persulphate on ethanolproduction����� .&� �� ������������� ��� ��� ���� ��� �� ��"
������ !��� ��<�� ��� �������� ��� ����� �������
�������� �� ���!� �� ����� � ��� �������� �� ����"
���� ����� ���� ��� ��� �����,������ 7�����28������ ������� ���������� ����� ������� ��� ����������
!��� ������� ������������ ������� �� �������"
������� �����()* -� ��� ����� ������� ��� ��������� ��
���� !��� ������� ���� �� ������������ ���������
��� ������� ������� -� ��� ������ ������ ��!����� ���
������� ������ !��� ��� ������� ���� ��� ���������
Effect of peroxides and ammonium persulphate onethanol production�� �������� ������� ��������� ������ �������������
��� ������ �� ���� ��������� �� ������� ��������� ���
���� ��������* ����� ����� ���������� �������� ����
���� ����� �� �������� �������� ������ �� ���� ������
������������(�. -� ��� ������ ����� ��� ������� ��
�:��������������� ���:��� ������� ��� ��������
������� �� ������� ��������� !��� �������������
��� �������� !��� ����� ������ ������������ ���� ���
������������ ������ �� �!� ��������� ��������������
7��2 ��� ��% !4!8 ��� ������ ����� ��������� ������6
������������� ��������,������� ��� �������������
�� ���!� �� B�� � ��� ����� ������� �� &��% 7!4!8
�������� ����� ���� ���� ��� ������������ ������
��� ��� ������ ������� ��������� ��� ���� !��� ���
�������� ���� �� ���������� !��� ������� �� ���"
������()* #������ �:�������������� ��� ��������
������� ��� � �����,���� ������ �� ������� ���������
!��� �� !������ �������� ����� ���� �� ��� ���"
��������� ���� �!����� ���:��� ������� ��� ���� �
�����,���� �������� ������ �� ������� ����������
��� ������� �� ��� �������������� �� �������� �� ���
� � ���� �� ���23*)22& 7������6 &��&8
Figure 1. Ethanol produced afterfermentation of corn treated with 2%(w/w) ammonium persulphate with andwithout addition of 0.5 and 1.0% (w/w)peroxides during liquefaction (L),saccharification (S) and fermentation(F). C-NH4, 2.0% ammoniumpersulphate without addition ofperoxides; control, no chemicalsadded; AZ, azodicarbonamide;BP, benzoyl peroxide. Values are meanof three replicates�SEM.
������������ �� ����������� ��� ����� �����������
������� ������ !��� ��������� ����� !��� �� �����������
����������� ���!��� �������� ����� ��2 ��� ��%
7!4!8 �:�������������� �� �������� �������� ���
��� �� ��2% � ����� �� �������� ������� ����������
!���� ��% ������ �� ���� ��� � ����� ������� �����
����������� ��� ��� ������������� �����,����� ��� ��"
��� ������� �� ��% 7!4!8 ���:��� ������� �� ���
������������ ������ �����,������ ��������� ��� ����"
��� ������ !��� �� !�� ����� ������ ��������,������
��� ������������� ;��� �� �� ��2% 7!4!8 �� ����
������� !�� ����� ������ ������������� ����� !�� ��
�����,���� ������ �� ��� ������� ������� �!����� ��2%
�� ���� �������� �����,������ ��������� ��� �������
������ !��� ����� ������ ��� ��������,������ ��
������������ ��� �� ���� �������
Effect of peroxides and ammonium persulphate onaflatoxin B1 content in fermented corn����� ���������� ��� ������ �� �������� ����� ����
�� ����������� !��� �:��������������� ���:��� ��"
����� �� �������� ������� �� ������� ���������� ���
������� �� ����� ��������� �� ��� �������� ������� ��
++0C !��� ���� ������������� �� �������� ���������
7����� 8� � �����,���� ��������� �� ��� ����� ����� !��
���� �������� !��� ���� !�� ��������� �� ���
������� �� &��% 7!4!8 �������� ����� �����
�������� �� ��� �������� �B�"���������� ����� ����
!�� ���� ���� !��� ���� ������� !�� ����� �� ���
������ �� ��� ������� �� &��% �������� �����"
���� 7B�� &8�
1�������� ����� ������ ��� ������������ �� �B�"
������������ ���� �� ��� ������� �� ��������
����� ���� ������� � �����,���� ������ �� ��� �B�������� �� ++0C �������� �� ��� �������� ���� ������
!�� ������������� ��������� �� ��� ����� ��� �����
������ ����� �� ��� ++0C ����� ������������ !���
�������� !��� ����� �� ��� �������� ����� ���������
� � ���� �� ���23*)22& 7������6 &��&8
���� ��� ��������� ���� !��� �������� �����"
����� -� ����� �� �������� ��� ������ �� �������� ��
��� �B� ��������� �� �������� ����� ����� ������
�� �B� �� ���� ��������� !��� ������� ��������
!��� ��� ���� !��� ��� �B� ������ �� ���� ���������
�� ��� ������� �� �������� ����� ���� ������
��� �������� �� ��2% 7!4!8 �:��������������� ���
���� ������������ ������ ��� ��� ���� � �����,����
������ �� ��� �B� ��������� ��!����� !��� ���
������������� �� ���� �������� !�� ��������� �� ��%
7!4!8� ��� ��,���� �� �������� ����� ���� �� ��!��
�B� ������ !�� ��� �������� ��� ��������� �� �B������� �� /.% �������� �� ��� ������� ��������� ��
� ���������� .(% !��� ��� �������� !�� �����
������ ������������ ��� ��������,������ ��� �� 2�%
!��� �������� !�� ������ ������������� B�� ���:���
������� ��� �������� �������� ������� ������� !���
���������
� ������� �������� �� ��� �B� ��������� !��
�������� !��� ��% 7!4!8 �� ��� ������� !�� �����
������ ������������ ��� ��������,������� ��� ��� ������
!�� �������� !��� ��� �������� !�� ���� ������
������������� ��� �������� �� ��2% 7!4!8 ���:���
������� �� �������� ������� ��� ��� �����,������
������ ��� ��������� �� �B� ����� ���������
�������� �� &��% �������� ����� ����� ��������
�� ��2% ���:��� ������� �� �������� ������� ������
������������ �� ��������,������ �� ����� ��� �B���������� �� �%�
Mutagenic potential of distillers’ dried solid grains-� ����� �� �������� ��� �������� ���< ���� �����
�������� ��� ���� �� ��� ,��� ������� ��� ����"
����� �������� �� ��� ++0C !�� ����������� ���
���� ����& !�� ��������� ����� ���������� ������������ ���� !��� ��� !������ ��������� ����������
70$8� �������� � �� <��!� �� ������� ������������� ��
23$
Figure 2. Aflatoxin B1 (AFB1) levels innaturally contaminated corn fermentedwith 2.0% (w/w) ammoniumpersulphate with and without addition ofselected peroxides.AZ, azodicarbonamide; BP, benzoylperoxide; OC, original corn;FC, fermented corn; FCA, fermentedcorn �2.0% ammonium persulphate;L, liquefaction; S, saccharification;F, fermentation. Values are mean ofthree replicates�SEM.
������� ����!���" �� ��
0$ ��!����� ��� ���������� ���� ��� ��������� ��
�������� �������� ������� !��� �������� ��������
��� ������� !��� �������� ����� ��� �������
��������� ���������� ��������� ���� ��� ���� �� �������
��� !������ 0$ ����������� D��� �B� !�� ���� ��
������� ��������
@������ �� ��� ������������ ���� ��� ���!� �� B�� (�
��� ������ �� � ��������� ���������� �� ���� !��
3.�(� ��� ��� ��� ������ �� ������ � ������������ ����� ��������� ��� �������� �B�"����������
����� !���� ��������� 33�� �B� ��� -� ���������
���� � �<�� !��� ������ ��� �B� ��� ��� ������
Figure 3. Comparative antimutagenicpotentials of naturally AFB1-contaminated corn treated with 2.0%ammonium persulphate with andwithout peroxides, as determined bySalmonella/microsomal mutagenicityassay using tester strain TA100 withS9. AZ, azodicarbonamide; BP,benzoyl peroxide; OC, original corn;FC, fermented corn; FCA, fermentedcorn�2.0% ammonium persulphate;L, liquefaction; S, saccharification;F, fermentation; NR, natural revertants.Values are mean of threereplicates�SEM.
22�
������������ �� ���������� ���� 7B�� 38� ? ��������� �����! �� ��� ����������� ����� ������� !���
���������� !��� ��� ���� �������� ��;��� �� ��2 !������������ ��� ��������� �������� �� �������4������"
�� �������� ������� �� ����� ���� ����� ���� ������
7.2���� ��8 �B�"������������ ���� ������ �� ���!������������ �� ��� ���� ���� ����� ���������� ������������ ����� '�� ,������� �� ����������� !��� �����
�� ;��� �� ��2 ��� !��� ����� ��������*)/ ������� ��� ������� �� F��<��!� ����������� ���������A2 �� ����
���� �������� ��� ������������ �� �B�� 1����"
�������� ��� ��������� �� �B� ��������� ��������
� � ���� �� ���23*)22& 7������6 &��&8
Figure 4. Mutagenic potential of pure AFB1 andAFB1-spiked original corn (OC) in Salmonella/microsomal mutagenicity assay using testerstrain TA100 with and without metabolicactivation (S9). The value for natural revertantswas 157 per plate. Values are mean of threereplicates�SEM.
������������ �� ����������� ��� ����� �����������
������ �� ���,����� ������� ��� ��������� �� �����
��� ����� �� � ������ �� ��� �������� !�� ���
���������
CONCLUSION���� ����� ������� �� ��� ������ �� ��������
����� ���� �� ��� ,��� �B� ������������� �� ���
++0C� ����� ������ �� �������� ����� ����
������� �B� ������������ ��� ����� ������� ��
&��% 7!4!8 �������� ����� ���� ��� �����
��������� �� ���������� �B��
��� ����� ������� �� �������� ����� ���� �� ���
������������ �� ���� ��� ��� ������ ��� ��������� ��
�������� 1������� �� ������� �������()* ���� �����"
������� ���� ��� ����� ������� �� ������� �� ���
������������ �� ���� ��������� ��� ������� ������ ����
�������� !��< ������������ ���� ������� 7�� ���
���� �� �������� ����� ����8 ���� ��� ������ ���
������� ������ ��������� ��� ��� �� &��% 7!4!8
�������� ����� ���� !�� ����� �������� �� �����"
�������� �B�"������������ ���� ������ ��������"
�����
-� �� ��������� ���� ���� ����� ���� ��� �������� ��
&��% 7!4!8 �������� ����� ���� ��� ��2% 7!4!8
���:��� ������� ������ ��� ������������ ��� !�� ���
���� ������������ �������� ������ ��� ��� �������"
�������� �� �B�"������������ ����� -� �� ���������
���� ��� �������� �� � ������� ������ �� ���� �� ������
��� ������������ �� ��������,������ ��� �� �����
��������� �� ������� �������
��� ������������ ��������� ���!�� �� ���������
��� ���� �� ��� ������������ ������ B������ �� ������"
������ �������� �� !��� �� �������� ����� �� ���! ���
��������� ��� ���� �������� ��� ������� �� ���������
�� ���� ���� ��������� !��� ��� ������������ �� ���
��������� ����� ,������ ��� ���������� !��� �������
��������2)/
� � ���� �� ���23*)22& 7������6 &��&8
REFERENCES D����� � �+� 1������ �� ��� D��< +G� � ������� �� ���������
�� ��������� �������� �� ����� ��� ������ �� #�� #�$����� ��
%���$��& ���� �����' (��������' ��� ��������� ���)�
���� =� �� =���� +G ��� C��� ��� H+� �������� D�����
'������� BG� (/()3�2 7$$38�
& D��< G+� G�� G0� D���� @G ��� D������ �=� @����! �� ���
��������������� �� ��������� �� �����������6 ������� ������
��� ����������� � ��� *�� ��� +��� 4�6*/2).�( 7$//8�
( G������9 =�� >����� ;B ��� G����� �� ��� ���� �� �������� ��
��������� ������������ ���� ������ ��� ������� �������������
+�� � ,��-�� '(6$)$3 7$.$8�
3 #�������� C; ��� ������� @H� =������ ��������� �� .������
��� ��-�� ��� ���������� ������ �� ��������"�������"
����� ��� �������"������,�� ����� +�� � ,��-�� '46*&)
*. 7$/8�
2 ������� @H� #�������� @;� G����� �� ��� ����< G�� -���"
������ ������ ��� ������� ������������ �� ��������"�������"
����� ���� ��� ������� ���������� ��� /����� ,��-��
566$*)$*( 7$/&8�
* E��1��!������� H=� ������� @H ��� G��� ��� B�������������
�� ����"�������� ���� ������� !��� �������� ������������� �
�� ���� +��� 6&6.2&).23 7$/&8�
. 1������ �� D������� @=� G����� �� ��� ��� � ��������
��������� ��� ����������� �� ��������� %���� �� &�"�����
����������� ��� ,��-�� �(6/&*)/(& 7$**8�
/ ������ # ��� @�������� 1>� =������� ������������ ��
������� ���������� ?����� 0����� +� ������� �� ������������
=������� @������� 0������� �� 0��� ���� 7766). 7$$(8�
$ ����� H=� G����: +@� ;����� +>� @������ I ��� C�������
@1� =���������� ������ � ��� ������������ ������������� ��
��������� �� ����� � ��� *�� ��� +��� 766*()*(( 7$/�8�
� D��< G+� #������ 0� ����<����;>� 0���<>= ���#�!��� @B�
G����� ����������� ��� ������ ��� ������������� �� ���"
������ �� �&� C ��� C& �� ���� ��� ����� �������6
������������� ������ � ��� *�� ��� +��� 466&*�)&** 7$$�8�
�'�1� *�)�� ,������ �� ������� *�� ���� �'�1 -����"
��������� ��������� E� 7$$28�
& >���� +> ��� ���� �#� @������ ������� ��� ��� ����������
������������ ����� ,���� 1�� ��66.()&2 7$/(8�
( 0�0� � �2�# # 3��� ��� �������� +�������' (����� 4�5� 0�0
-��������� 1���� #1 7$$/8�
3 0�����9��!� ?� 0�� �1� 1���� >+ ��� ;�� 1-� +�����,��"
���� �� ��������� �� ���� ��� ����� �� ������� ��� ��������
�������� � ���� ������ (663/$)2� 7$$�8�
22
������� ����!���" �� ��
2 ;��� 1J� >������: �H ��� D��< +G� ����"�������� ���������
������� �� ����� ���� ��� +����� �56&*$)&.$ 7$$.8�
* G�� G0� 0������ H�� 1������ �B� D��� ;� ��� C�������� G��
����������� �� �������� �6 ���������� ��� ������,������ ��
��� ��9�� �������� �������� � ��� *�� ��� +��� (46*&*)
*( 7$/38�
. G�!��� �=� �!���� 0@� K����� =� D��< +G ��� G�� G0�
22&
>�������� �������� �� �������"������� �������� ��������
������� �� ���������� ����� � � *� +��� �� 7'6(*)
(/ 7$/28�
/ �!���� 0@� G�!��� �=� K����� =� G�� G0 ��� D��< +G�
>�������� �������� �� �������"������� �������� ��������
������� �� � ����� ������� � � *� +��� �� 776�&)�3
7$/$8�
� � ���� �� ���23*)22& 7������6 &��&8