concentration techniques for feacal examination
TRANSCRIPT
Concentration techniquesfor stool examinationsการตรวจอุ�จจาระด้�วยว ธี�เข้�มข้�น
Panupong SahaisookDivision of Parasitology
Faculty of Medical technology
Stool specimen
fresh preserved
Routine procedures employed for examination of fecal specimen
direct smear
preserved
- concentration- permanent stain
Stool examination
Qualitative technique Quantitative technique
Unconcentrationtechnique
Concentrationtechnique
- Simple smear
- Direct smear method of Beaver- Stoll’s dilution egg count- Kato-Katz technique
Flotation technique Sedimentation technique
- Brine flotation- Sugar flotation- Zinc-sulfate flotation
- Simple sedimentation- Centrifugal sedimentation- Formalin-ether concentration technique
Concentration techniques
• เป็�นการทำาให้�ป็รสิ�ตในอุ�จจาระมารวมต�วก�น ในขณะเดี�ยวก�นม�การกาจ�ดีเศษอุ�จจาระอุ� นๆอุอุกไป็ ช่$วยให้�พบป็รสิ�ตทำ� ม�จานวนน�อุยห้ร�อุไม$สิามารถตรวจพบดี�วยว�ธี�การ wet smear
Concentration techniques
• Sedimentation techniques– เป็�นการทำาให้�เช่�)อุป็รสิ�ตมารวมต�วก�นโดียอุาศ�ยการตก
ตะกอุน
• Flotation techniques– เป็�นการทำาให้�เช่�)อุป็รสิ�ตทำ� อุย+$ในอุ�จจาระลอุยต�ว
Stool examination
Qualitative technique Quantitative technique
Unconcentrationtechnique
Concentrationtechnique
- Simple smear
- Direct smear method of Beaver- Stoll’s dilution egg count- Kato-Katz technique
Flotation technique Sedimentation technique
- Brine flotation- Sugar flotation- Zinc-sulfate flotation
- Simple sedimentation- Centrifugal sedimentation- Formalin-ether concentration technique
Sedimentation technique
• Simple sedimentation
• Centrifugal sedimentation
• Formalin-ether concentration technique
Simple sedimentation(gravity sedimentation)
1 .นาอุ�จจาระป็ระมาณ 1-2 g กวนใน NSS ป็ระมาณ 10-15 ml
2. กรอุงผ่$านผ่�าก/อุสิ 2 ช่�)น ลงในแก�วก�นแห้ลมและแบ$งลงใน centrifuge tube ป็ระมาณ 2 ml เต�ม NSS 10 ml ต�)งทำ�)งเอุาไว�ให้�อุ�จจาระตกตะกอุนป็ระมาณ 15 นาทำ�
3. เทำน)าสิ$วนบนทำ�)งจนเก�อุบห้มดีให้�เห้ล�อุเฉพาะตะกอุน 2-3 ห้ยดีทำ� ก�น tube แล�วจ2งนาตะกอุนทำ�)งห้มดีมาตรวจห้าป็รสิ�ต
น)ากรอุงอุ�จจาระ
นาน)าอุ�จจาระแบ$งใสิ$ Centrifuge tube 2 ml + NSS 10 mlต�)งทำ�)งไว� 15 นาทำ�
NSS 10 ml Simple sedimentation
อุ�จจาระ 2 ml
เทำน)าสิ$วนใสิทำ�)งไป็ ให้�เห้ล�อุป็ระมาณ 2-3 ห้ยดีทำ� ก�น tube แล�วนาไป็ห้าเช่�)อุป็รสิ�ต
Simple sedimentation
Simple Sedimentation
ข�อุดี�1. ทำาไดี�ง$าย2. ใช่�เคร� อุงม�อุน�อุย3.สิามารถตรวจไข$พยาธี�
ไดี�เก�อุบทำ�กช่น�ดีรวมทำ�)ง Cyst ขอุงโป็รโตซั�วดี�วย
4.ไข$พยาธี�และ Cyst ขอุงโป็รโตซั�วไม$เสิ�ยร+ป็ร$างห้ร�อุบ�ดีเบ�)ยว
ข้�อุเสี�ย1. ใช่�เวลานาน2.ช่$วงเวลาขอุงการตก
ตะกอุนต�อุงนานพอุทำ� จะแน$ใจไดี�ว$าไข$พยาธี�ทำ�กช่น�ดีตกตะกอุนห้มดีแล�ว
Centrifugal sedimentation
1 .นาอุ�จจาระป็ระมาณ 1-2 g กวนใน NSS ป็ระมาณ 10-15 ml
2. กรอุงผ่$านผ่�าก/อุสิ 2 ช่�)น ลงในแก�วก�นแห้ลมและแบ$งลงใน centrifuge tube ป็ระมาณ 2 ml เต�ม NSS 10 ml
3. นาไป็ป็5 นทำ� 1500 rpm นาน 5 นาทำ� (2900 rpm 3 นาทำ�)
4. เทำ supernatant ทำ�)งไป็ แล�วนาตะกอุนไป็ตรวจดี+ดี�วยกล�อุงจ�ลทำรรศน6
นาน)าอุ�จจาระแบ$งใสิ$ Centrifuge tube 2 ml + NSS 10 ml
NSS 10 ml Centrifugal sedimentation
อุ�จจาระ 2 ml
Centrifugal sedimentation
ป็5 นทำ� 1500 rpm 5 นาทำ�ห้ร�อุ 2900 rpm 3 นาทำ�
เทำน)าสิ$วนใสิทำ�)งไป็แล�วนาไป็ห้าเช่�)อุป็รสิ�ต
Centrifugal sedimentation
Centrifugal Sedimentation
ข�อุดี�1. ทำาไดี�ง$าย2. รวดีเร7ว3. ไม$ต�อุงใช่�สิารเคม� นอุกจากน)าเกล�อุ (NSS)
เทำ$าน�)น
ข�อุเสิ�ยเศษขยะทำ� ป็ะป็นในอุ�จจาระย�งคงม�อุย+$และอุาจบดีบ�งห้ร�อุข�ดีขวางในการตรวจห้าพยาธี�และไข$พยาธี�ในอุ�จจาระ
Formalin-ether concentration technique (FECT)
1 .นาอุ�จจาระป็ระมาณ 1-2 g กวนใน NSS ป็ระมาณ 10-15 ml
2 .กรอุงผ่$านผ่�าก/อุสิ 2 ช่�)น ลงในแก�วก�นแห้ลมและแบ$งลงใน centrifuge tube ป็ระมาณ 2 ml เต�ม 10% formalin 7 ml mix ให้�เข�าก�น ต�)งทำ�)งไว� 5 นาทำ�
3 .เต�ม ether 3 ml mix ให้�เข�าก�น4 .นาไป็ป็5 นทำ� 1500 rpm นาน 5 นาทำ� (2900 rpm 3
นาทำ�)5 .ใช่�ไม�แห้ลมเข� ยเศษอุ�จจาระทำ� เกาะอุย+$ระห้ว$างช่�)น ether
และ formalin อุอุกจากผ่น�งห้ลอุดี6 .เทำ supernatant ทำ�)งไป็ แล�วนาตะกอุนไป็ตรวจดี+ดี�วย
กล�อุงจ�ลทำรรศน6
ค�ณสิมบ�ต�ขอุงสิารเคม�ทำ� ใช่�ใน FECT
1. 10% formalin ช่$วยร�กษาร+ป็ร$างและสิภาพขอุงเช่�)อุป็รสิ�ต
2. Diethyl ether (Ethyl acetate) ช่$วยละลายไขม�นและดี2งกากใยทำ� ม�น)าห้น�กเบาให้�ลอุยต�วข2)นมา
นาน)าอุ�จจาระแบ$งใสิ$ Centrifuge tube 2 ml + formalin 7 mlต�)งทำ�)งไว� 5 นาทำ�
formalin 7 mlFECT
อุ�จจาระ 2 ml
เต�ม diethyl ether 3 ml เขย$าแรงๆ (ระว�งแรงดี�นขอุง ether)
Ether 3 mlFECT
อุ�จจาระ 2 ml
FECT
ป็5 นทำ� 1500 rpm 5 นาทำ�ห้ร�อุ 2900 rpm 3 นาทำ�
การแยกช่�)นห้ล�งจากการทำาว�ธี� FECT
formalin
Ether
ตะกอุน
กากอุ�จจาระ
เทำน)าสิ$วนใสิทำ�)งไป็แล�วนาไป็ห้าเช่�)อุป็รสิ�ต
FECT
Formalin- ether(ethyl acetate) concentration technique
ข�อุดี�1. ตรวจห้าไดี�ทำ�)ง cyst , egg
,larva (ยกเว�น trophozoite)
2. ethyl acetate ละลายไขม�น
3. formalin ร�กษาร+ป็ร$างขอุง cyst, , egg , larva เก7บไว�ไดี�นาน
ข�อุเสิ�ย 1. ใช่�เคร� อุงป็5 น, สิารเคม� 2. ไม$เห้มาะในการใช่�ตรวจห้า cyst ขอุง Giardia lambria และไข$ขอุง H. nana
Formalin-ether concentration technique (FECT)
** ห้ล�งจากเต�ม 10% formalin จะต�อุงต�)งทำ�)งไว� 5 นาทำ� เพ� อุให้�ทำาป็ฏิ�ก�ร �ยาและสิามารถร�กษาสิภาพเช่�)อุป็รสิ�ตไดี� **
Modified Formalin-ether concentration technique (Modified FECT)
Modified formalin-ether concentration technique (Modified FECT)
1 .ผ่สิมอุ�จจาระป็ระมาณ 1 g ก�บ 10% formalin ป็ระมาณ 15-20 ml กวนให้�กระจายต�วก�นดี�
2 .กรอุงอุ�จจาระผ่$านผ่�าก/อุสิ 2 ช่�)น ลงใน centrifuge tube ป็ระมาณ 10 ml
3 .เต�ม ether 3 ml ป็:ดีจ�กและ mix ให้�เข�าก�น4 .นาไป็ป็5 นทำ� 1500 rpm นาน 5 นาทำ� (2900 rpm 3
นาทำ�)5 .ใช่�ไม�แห้ลมเข� ยเศษอุ�จจาระทำ� เกาะอุย+$ระห้ว$างช่�)น ether
และ formalin อุอุกจากผ่น�งห้ลอุดี6 .เทำ supernatant ทำ�)งไป็ แล�วนาตะกอุนไป็ตรวจดี+
ดี�วยกล�อุงจ�ลทำรรศน6
Stool examination
Qualitative technique Quantitative technique
Unconcentrationtechnique
Concentrationtechnique
- Simple smear
- Direct smear method of Beaver- Stoll’s dilution egg count- Kato-Katz technique
Flotation technique Sedimentation technique
- Brine flotation- Sugar flotation- Zinc-sulfate flotation
- Simple sedimentation- Centrifugal sedimentation- Formalin-ether concentration technique
Flotation technique
• Concentrated brine flotation
• Sugar flotation
• Zinc sulfate centrifugal flotation technique
Concentrated brine flotation technique
Reagent- Saturated sodium chloride solution
เตร�ยมโดียใสิ$เกล�อุแกงในน)าเดี�อุดีห้ร�อุน)าร�อุนจนเกล�อุไม$ละลายในน)าอุ�กต$อุไป็ ต�)งทำ�)งไว�ให้�เย7น ตรวจความถ$วงจาเพาะให้�ไดี�ไม$ต ากว$า 1.20 และต�อุงกรอุงก$อุนนามาใช่�
Method
Feces 0.5-1 g + saturated NaCl 2 mlในขวดีป็ากกว�างป็ระมาณ 2 cm สิ+ง 3-4 cm
กวนให้�เข�าก�น
เต�ม saturated NaCl ลงไป็จนเต7มพอุดี�
วาง cover slip บนป็ากขวดี 10-15 นาทำ�
ยก cover slip ข2)นตามแนวดี� ง
นามาป็:ดีบน slide ตรวจดี+ดี�วยกล�อุงจ�ลทำรรศน6
Concentrated brine flotation
ข�อุดี�1 .เห้มาะสิาห้ร�บการ
ตรวจห้าไข$พยาธี�ป็ากขอุ และไข$ขอุงพยาธี�ช่น�ดีอุ� นๆ ยกเว�นช่น�ดีทำ� ม� operculum
2 .เกล�อุแกง ห้าง$าย ราคาถ+ก
3 .ทำาง$าย สิะดีวก
ข�อุเสิ�ย1 .ตรวจไม$พบไข$พยาธี�ทำ� ม�
operculum2 .ตรวจไม$พบไข$พยาธี�ทำ� ม�ค$า
ความถ$วงจาเพาะมากกว$า 1.18 เช่$น1.Ascaris lumbricoides
(unfertilized egg)2.Taenia spp. Egg3.Schistosoma egg
3. Protozoa cyst อุาจถ+กทำาลายถ�าต�)งทำ�)งไว�นาน
Sugar flotation technique
ReagentSugar solution (sp.gr.1.180)
- Cane sugar 1,000 g- Water 1,125 ml- Phenol 10 ml
ละลายน)าตาลทำรายในน)าจนห้มดี เต�ม phenol ลงไป็ 10 ml เพ� อุเป็�น preservation ตรวจห้าความถ$วงจาเพาะก$อุนนามาใช่�
Method
Feces 0.5-1 g + sugar solution 2 mlในขวดีป็ากกว�างป็ระมาณ 2 cm สิ+ง 3-4 cm
กวนให้�เข�าก�น
เต�ม sugar solution ลงไป็จนเต7มพอุดี�
วาง cover slip บนป็ากขวดี 20-30 นาทำ�
ยก cover slip ข2)นตามแนวดี� ง
นามาป็:ดีบน slide ตรวจดี+ดี�วยกล�อุงจ�ลทำรรศน6
Sugar flotation
ข�อุดี�
เห้มาะสิมสิาห้ร�บการตรวจห้า
Cyst
ข�อุเสิ�ย
ใช่�เวลานาน
Zinc sulfate flotation technique
ReagentZinc sulfate solution (sp.gr.1.180)
- ZnSO47H2O 331 g
- Water 1,125 ml
ละลาย Zinc sulfate ในน)าอุ� $นจนห้มดี ตรวจห้าความถ$วงจาเพาะก$อุนนามาใช่�
MethodFeces 1 g + น��า 1 ml
กวนให้�เข้�าก�น เต มน��าอุ�ก 10 ml
กรอุงด้�วยผ้�าก�อุซ 2 ชั้��น
centrifuge ที่� 1,500 rpm 2 นาที่� เที่สี!วนใสีที่ �ง
ใสี! zinc sulfate solution 1 ml กวนให้� เข้�าก�น แล้�วเต มอุ�กจนเก$อุบเต&ม tube
centrifuge ที่� 2,000 rpm 1 นาที่� สีารล้ะล้ายจะแยกเป็(นชั้��น
zinc sulfate
surface film
sediment
ใชั้� wire loop เสี�นผ้!าศู*นย+กล้าง~ 5 mm แตะบนผ้ วบนสี�ด้ข้อุง suspension
น�าน��าที่� ต ด้มาก�บ loop ห้ยด้ล้งบน slide 2-3
loop
ป็,ด้ cover glass ตรวจด้*ด้�วยกล้�อุงจ�ล้ที่รรศูน+
Zinc sulfate flotation
ข�อุดี�
ไดี�ผ่ลดี�สิาห้ร�บการตรวจห้า
Cyst, ไข$และต�วอุ$อุนขอุงพยาธี�บางช่น�ดี เช่$น
เดี�ยวก�นก�บว�ธี� Brine flotation
ข�อุเสิ�ย
ใช่�เวลานาน ข�)นตอุนย�$งยาก
Stool examination
Qualitative technique Quantitative technique
Unconcentrationtechnique
Concentrationtechnique
- Simple smear
- Direct smear method of Beaver- Stoll’s dilution egg count- Kato-Katz technique
Flotation technique Sedimentation technique
- Brine flotation- Sugar flotation- Zinc-sulfate flotation
- Simple sedimentation- Centrifugal sedimentation- Formalin-ether concentration technique
Quantitative techniques(Estimation of helminth eggs in feces)
• เป็�นการตรวจห้าจานวนไข$ขอุงป็รสิ�ตทำ� ม�อุย+$ในอุ�จจาระ
• สิามารถบ$งช่�)ถ2งภาวะความร�นแรงขอุงโรคพยาธี�• ห้น$วยน�บเป็�น epg : egg per gram
(จานวนไข$พยาธี�ต$อุอุ�จจาระ 1 กร�ม)• ม�ป็ระโยช่น6ในการต�ดีตามผ่ลการร�กษา
Method for estimated helminth eggs in feces
• Direct smear method of Beaver
• Stoll’s dilution egg count
• Kato-Katz technique
Direct smear method of Beaver
เป็�นการ smear อุ�จจาระลงบน slide และนามาห้าน)าห้น�กขอุงอุ�จจาระโดียเทำ�ยบก�บ standard smear ซั2 งอุาศ�ย Photoelectric light meter เพ� อุว�ดีแสิงผ่$าน ต$อุมาจ2งไดี�ดี�ดีแป็ลงโดียใช่�การช่� งน)าห้น�กห้ร�อุป็ระมาณการว$า อุ�จจาระแต$ละคร�)งจะไดี�จานวนอุ�จจาระ 2 mg เม� อุน�บไข$แล�วจ2งมาคานวณห้าจานวนไข$ต$อุอุ�จจาระ 1 กร�ม
Direct smear method of Beaver
ต�วอุย$างตรวจน�บไข$พยาธี�ไสิ�เดี�อุนจากอุ�จจาระ 2 mg พบไข$พยาธี� 200 ใบ
อุ�จจาระ 2 mg พบไข$พยาธี�ไสิ�เดี�อุน 50 ใบอุ�จจาระ 1000 mg จะพบ (50x1000)/2
= 25000 epg
Stoll’s dilution egg count
• ว�ธี�น�)ใช่�ก�นแพร$ห้ลาย
• ไม$เห้มาะก�บผ่+�ทำ� ต�ดีเช่�)อุพยาธี�จานวนน�อุย (light infection)
• ห้ล�กการค�อุการนาอุ�จจาระมาเจ�อุจางใน stoll’s flask ทำ� ม�ข�ดีบอุกป็ร�มาตรแน$นอุนทำ� คอุขวดี น�บจานวนไข$พยาธี�และคานวณไข$พยาธี�ต$อุอุ�จจาระป็กต� (formed stool) 1 กร�ม
อุ�ป็กรณ6- stoll’s flask ทำ� ม�ข�ดีบอุกป็ร�มาตร 56 และ 60 ml
(ห้ร�อุใช่� Erlenmayer flask แทำน)
- 0.1 N NaOH
- Glass bead 5-10 เม7ดี- stoll’s pipette : 0.15, 0.075 ml (ห้ร�อุ autopipette 150, 75 ul)
0.1 N NaOH 56 ml
เต�มอุ�จจาระถ2งข�ดี 60 ml (4 g)
glass bead 5-10 เม7ดี เขย$าแรงๆ
56 ml 60 ml
ว�ธี�ทำา
pipette 0.15 ml ใสิ$บน slide (เขย$า flask ทำ�กคร�)งก$อุน pipette)
ป็:ดีดี�วย cover glass 22x40 mm
ตรวจน�บไข$พยาธี�ดี�วยกล�อุงจ�ลทำรรศน6
คานวณ จานวนไข$ทำ� น�บไดี� x dilution factor x factor อุ�จจาระ
= จานวนไข$/ อุ�จจาระ 1 g (epg)*** ถ�าอุ�จจาระแข7งมากให้�เก7บค�างค�นในต+�เย7นเพ� อุให้�อุ$อุนต�ว
อุ�จจาระ 4 ml ในสี!วนผ้สีม ที่��งห้มด้ 60 ml.
Dilution = 4 = 1:15
60
ถ้�าน�าอุ�จจาระมา 0.15 ml (150 ul)Dilution = 1 x 0.15 = 1 15 100
Factor = 100
Dilution factor มาไดี�อุย$างไร ??
อุ�จจาระ 4 ml ในสี!วนผ้สีม ที่��งห้มด้ 60 ml.
Dilution = 4 = 1:15
60
ถ้�าน�าอุ�จจาระมา 0.075 ml (75 ul)Dilution = 1 x 0.075 = 1 15 200
Factor = 200
แล�วถ�าดี+ดีสิารละลายอุอุกมา 0.075 ml ล$ะ??
Factor สิภาพอุ�จจาระformed 1
soft 1.5
mushy, loose 2
mushy-diarrheic 3
diarrheic, watery 4,5
Stoll’s dilution egg count techniqueต�วอุย$างตรวจน�บไข$พยาธี�ป็ากขอุจาก Formed stool ดี�วยว�ธี� stoll’s dilution egg count โดียดี+ดีสิารละลายอุอุกมา 0.15 ml พบไข$พยาธี� 40 ใบ จงคานวณห้าป็ร�มาณการต�ดีเช่�)อุ
จากสิ+ตร จานวนไข$ทำ� น�บไดี� x dilution factor x factor
สิภาพอุ�จจาระ
Stoll’s dilution egg count technique
จากโจทำย6จานวนไข$พยาธี�ป็ากขอุ 40 ใบDilution factor 100Factor อุ�จจาระ 1
ป็ร�มาณการต�ดีเช่�)อุต$อุอุ�จจาระ 1 กร�ม= 40x100x1 = 4000 epg
การป็ระเม นความร�นแรง
ป็5จจ�ยทำ� ม�ผ่ลต$อุการคานวณจานวนไข$พยาธี�1. ระยะขอุงการต�ดีเช่�)อุ 1.1 ระยะเพ� งต�ดี 1.2 ระยะต�ดีนานแล�ว 1.3 ต�ดีเช่�)อุเร�)อุร�ง2. ขนาดีห้นอุนพยาธี� : พยาธี�ต�วให้ญ่$อุอุกไข$ > พยาธี�ต�วเล7ก3. ความร�นแรงขอุงโรค4. สิ� งแวดีล�อุม : อุาห้าร & metabolism ขอุงโฮสิต65. อุาย�ขอุงโฮสิต6 : เดี7ก < ผ่+�ให้ญ่$
Cellophane thick smear
• เห้มาะสิาห้ร�บการตรวจห้าไข$ป็รสิ�ตในการศ2กษาการต�ดีเช่�)อุป็ระช่ากร (Field study)
• เป็�นไดี�ทำ�)ง Qualitative และ Quantitative technique (semi-quantitative)
Cellophane thick smear (Kato’s thick smear technique)
ReagentMalachite green solution : เก7บในขวดีป็:ดีฝาเกล�ยว
Malachite green (crystal) 0.3 gDist. Water 10.0 ml
Wetting solution : เก7บในขวดีป็:ดีฝาเกล�ยวGlycerine 100
partsMalachite green solution 1.0 partDist. Water 100 parts(+Phenol)
อุ�ป็กรณ61. ตะแกรงลวดีละเอุ�ยดี ขนาดีช่$อุง 0.1-0.15 มม.
2. กระดีาษซั�บ3. กระจกสิไลดี64. แผ่$น cellophane ขนาดี 22x44 มม. แช่$ใน น)ายา glycerine-malachite green solution อุย$างน�อุย 24 ช่ม.ก$อุนใช่�งาน
5. ไม�เข� ยอุ�จจาระ
เข� ยอุ�จจาระ 50-60 mg ลงบนกระดีาษซั�บ
วางแผ่$นตะแกรง
ป็าดีเอุาอุ�จจาระทำ� กรอุงผ่$านร+ตะแกรง
ใสิ$ลงในแผ่$น slide
วางแผ่$น cellophane กดีให้�อุ�จจาระแผ่$อุอุก
ต�)งทำ�)งไว�ทำ� RT 30-60 นาทำ�
ตรวจดี+ดี�วยกล�อุงจ�ลทำรรศน6
ข�อุดี�1. ง$าย สิะดีวก2. ตะแกรงลวดี : กรอุงเศษอุาห้ารทำ� ม�ขนาดีให้ญ่$อุอุก การตรวจง$ายข2)น3. ตรวจห้าไข$พยาธี�ไดี�ดี� * Ascaris , Trichuris4. Light infection
ข�อุเสิ�ย1. การต�)งสิไลดี6ไว�นานทำาให้�ไข$พยาธี�บางช่น�ดีเสิ�ยร+ป็ร$าง **เป็ล�อุกไข$ hookworm,
ช่� )น Albuminous layer A. lumbricoides
2. ไข$พยาธี�ใสิกว$าป็กต� ** hookworm, Opisthorchis
3. Cyst, Trophozoite, Larva ถ+กทำาลาย
Modified Kato’s thick smear technique(Kato-Katz technique)
เป็�นว�ธี�ทำ� ถ+กดี�ดีแป็ลงมาจากว�ธี�ขอุง Kato’s โดียการช่� งน)าห้น�กอุ�จจาระให้�ไดี�จานวนทำ� แน$นอุน ห้ล�งจากน�)นตรวจน�บไข$พยาธี�ทำ�)งห้มดีทำ� พบใน smear แล�วคานวณห้าจานวนไข$พยาธี�ต$อุอุ�จจาระ 1 กร�ม
Modified Kato’s thick smear technique(Kato-Katz technique)
• เพ� มอุ�ป็กรณ6ข2)นมา 1 ช่�)น ค�อุ แผ่$นกระดีาษแข7งเจาะร+
Modified Kato’s thick smear technique(Kato-Katz technique)
• แผ่$นกระดีาษแข7งเจาะร+–ห้นา 1.37 mm–กว�าง 3 cm–ยาว 4 cmเจาะร+ตรงกลางให้�ม�เสิ�นผ่$าศนย6กลาง 6 mm
ป็ร�มาตรอุ�จจาระทำ� ไดี�จากพ�มพ6 = 43.7 mg
ว�ธี�ทำา
จ�ดีเตร�ยมอุ�ป็กรณ6และสิถานทำ� ให้�พร�อุม
ว�ธี�ทำา
วางแผ่$นกระดีาษแข7งเจาะร+บนแผ่$นสิไลดี6
ว�ธี�ทำา
สิวมถ�งม�อุให้�เร�ยบร�อุย
ว�ธี�ทำา
นาไม�ต�กอุ�จจาระป็>าย feces มาวางบนกระดีาษรอุงซั�บห้ร�อุห้น�งสิ�อุพ�มพ6
นาตะแกรงลวดีวางบน feces แล�วกดีให้�เน�)อุอุ�จจาระลอุดีผ่$านตะแกรงลวดีจากน�)นใช่�ช่�อุนพลาสิต�กป็าดีเอุาเน�)อุอุ�จจาระทำ� ลอุดีผ่$านตะแกรงมา
ว�ธี�ทำา
นาเน�)อุอุ�จจาระทำ� ลอุดีผ่$านตะแกรงมาใสิ$ในร+ขอุงแผ่$นกระดีาษ ให้�เต7ม
ว�ธี�ทำา
ยกเอุาแผ่$นกระดีาษอุอุกอุย$างระว�ง เพ� อุให้�อุ�จจาระวางอุย+$บน slide
ว�ธี�ทำา
นาแผ่$น cellophane ทำ� จ�$มโช่กดี�วย glycerol-malachite green solution
วางทำ�บบนเน�)อุอุ�จจาระ
ว�ธี�ทำา
พล�ก slide กล�บลงบนกระดีาษรอุงซั�บใช่�น�)วกดีให้�เน�)อุอุ�จจาระกระจายสิม าเสิมอุทำ� วๆก�น
ว�ธี�ทำา
ต�)งทำ�)งไว� 30 นาทำ� แล�วนาไป็สิ$อุงดี+ดี�วยกล�อุงจ�ลทำรรศน6
ว�ธี�ทำา
Kato-Katz technique
ต�วอุย$างตรวจน�บไข$พยาธี�แสิ�ม�าดี�วยว�ธี� Kato-Katz techniqueพบไข$พยาธี� 40 ใบ จงคานวณห้าป็ร�มาณการต�ดีเช่�)อุ
อุ�จจาระ 43.7 mg พบไข$พยาธี� 40 ใบอุ�จจาระ 1000 mg จะพบ 40 x 1000
43.7= 915.3 epgป็ระมาณ 916 epg
Lab อุาทำ�ตย6น�)1 .น�กศ2กษาทำ�กคนทำาการตรวจอุ�จจาระขอุงตนเอุงดี�วยว�ธี�
simple direct exam, Kato-Katz technique รายงานผ่ลลงในใบ request สิ�เห้ล�อุง
2 .แบ$งกล�$มๆละ 3-4 คน ทำาการตรวจอุ�จจาระขอุงใครก7ไดี�ดี�วยว�ธี� Modified FECT พร�อุมรายงานผ่ลลงในใบ Request สิ�เห้ล�อุง
3 .ทำาการตรวจ Stool examination จาก specimen ทำ� เตร�ยมไว�ให้� ห้าเช่�)อุป็รสิ�ตช่น�ดีใดีก7ไดี�ทำ� )งสิ�)น 5 ช่น�ดีโดียไม$ซั)าก�น รายงานผ่ลลงในแบบรายงานผ่ลป็ฎิ�บ�ต�การทำ� ให้� Xerox ห้ร�อุ download อุน�ญ่าตให้�เป็:ดี Atlas ไดี� แต$ไม$อุน�ญ่าตให้�ถามอุาจารย6ป็ระจาโต/ะ (เก7บคะแนน Unknown)!! (ให้�เวลา 45 นาทำ�)