cinetica enzimatica 2 2011
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Universidad de Oriente
Núcleo Bolívar
Escuela de Ciencias de la Salud “Francisco Batisttini”
Dpto. de Ciencias Fisiológicas: Bioquímica
Profesora Zulay Castillo Pérez
Proteínas con actividad catalítica de los seres vivos.
Unidades del Metabolismo
Regulan la velocidad de las reacciones químicas espontáneas(ΔG-).
No promueven reacciones no-espontáneas (Δ G +).
Incrementan la velocidad de reacción 103 a 1012 veces sinafectar el sentido de la reacción.
No forman parte del producto de la reacción.
Enzimas
Catalizador de origen biológico y naturaleza proteica, de
alto peso molecular y conformación tridimensional
característica, acelera la reacción al disminuir la energía
de activación.
Contiene un centro activo, generalmente situado en un entorno
apolar. La actividad catalítica requiere que dicho centro adopte
una conformación determinada, mantenida por el resto de la
molécula proteica.
Enzimas
Estructura
No hacen factibles las reacciones imposibles
Son sustancias que, sin consumirse en unareacción, aumentan notablemente su velocidad.
Ello hace posible que en condiciones fisiológicas tenganlugar reacciones que sin catalizador requeriríancondiciones extremas de presión, temperatura o pH.
Prácticamente todas las reacciones químicas que tienenlugar en los seres vivos están catalizadas por enzimas.
* En su mayoría son proteínas, hay ARN con capacidad catalítica (ribozimas)
Aumentan la velocidad de reacción ◊ De 106 a 1012 veces vs sin enzima.◊ Aún más rápido que los catalizadores químicos.
Condiciones de reacción◊ Temperatura 25-40 o C (algunas hasta 75 o C)◊ pH neutro (5-9), la mayoría 6.5 – 7.5◊ Presión atmosférica normal
Capacidad de regulación◊ Por concentración de sustrato◊ Por concentración de enzima◊ Por inhibidores competitivos (semejantes al sustrato)◊ Por inhibidores no competitivos (modificación covalente de la
enzima)◊ Por regulación alostérica
Alta especificidad de reacción◊ Interacción estereoespecífica con el sustrato◊ No hay productos colaterales.
Propiedades generales
Las enzimas simples están constituidas por
proteína sin requerir de la unión de otra molécula o
grupo químico para realizar su actividad catalítica.
Las enzimas conjugadas poseen en su estructura
una parte no protéica esencial para su
funcionamiento que según su naturaleza puede
llamarse cofactor o coenzima.
Enzimas simples y conjugadas
Apoenzima: fracción protéica
Cofactor: grupo que se une a la fracción protéica parapermitir el correcto funcionamiento de la enzima.
Holoenzima: fracción protéica + cofactor o coenzima
Átomo, ion o molécula que participa en el proceso catalítico sin
ser enzima ni sustrato.
Los cofactores participan de dos maneras distintas:
A través de una fijación muy fuerte a la proteína y salen sin sermodificados del ciclo catalítico.
Como un segundo substrato; salen modificados del sitiocatalítico y por lo general requieren otra enzima para volver alestado original.
Cofactores
En función de su naturaleza los cofactores se denominan:
Grupos prostéticos: se trata de iones o moléculas
inorgánicas.
Coenzima: es una molécula orgánica. Aquí se puede
señalar, que muchas vitaminas funcionan como coenzimas;
y realmente las deficiencias producidas por la falta de
vitaminas responde más bien a que no se origina la
coenzima, para una determinada enzima.
Cofactores
Tiamina B1 Tiamina pirofosfato
RiboflavinaFAD (Flavín adenín dinucleótido), FMN (Flavín
mononucleótido)
Piridoxina PLP (Piridoxal fosfato)
Cobalamina Metilcobalamina, cobamida
Ácido pantoténico Coenzima A (CoA)
NicotinamidaNAD+ (Nicotín adenín dinucleótido) Y NADP+
(Nicotín adenín dinucleótido fosfato)
Ácido lipoico Lipoamida
Ácido fólico THF (Tetrahidrofolato)
Coenzimas de naturaleza
vitamínica
Hemo Hemoenzimas , citocromos
Complejos Fe-S Ferredoxinas
Quinonas Transporte electrónico mitocondrial yfotosintético
Glutatión Redox, transporte de aminoácidos
ATP Transferencia de fosfato y/o energía
UTP Transferencia de grupos glucosídicos
Carnitina Transportador de grupos acilo
Coenzimas de naturaleza no
vitamínica
Región de la enzima donde se une la molécula de sustrato
de forma específica, suele ser un bolsillo o una hendidura
que se forma entre las cadenas laterales de los aminoácidos.
Estas cadenas:
• Facilitan la unión del sustrato (especificidad de sustrato)
• Intervienen en la catálisis (centro catalítico)
Sitio Activo
1. Supone una porción relativamentepequeña del volumen total de laenzima
2. Es una entidad tridimensional
3. Se unen a los sustratos por fuerzasrelativamente débiles
4. Son hoyos o hendiduras de las quesuele quedar excluida el agua, salvoque sea un componente de lareacción
5. La especificidad del enlace dependede la disposición de los átomosdel centro activo
Sitio Activo. Características
Lugar de la enzima en el que ocurre la catálisis y
puede incluir también:
• Coenzimas
• Cofactores
Puede coincidir o no con el centro activo
Sitio Catalítico
PUENTES DE H
INTERACCIONES IÓNICAS
ENLACES COVALENTES
Mecanismo de unión del sustrato
al sitio activo
En 1894, Emil Fischer propuso la hipótesis de la llave-cerradura
Modelos de interacción del
sustrato y el sitio activo
Sitio activo
En 1958, Koshland propuso el modelo del ajuste inducido
Modelos de interacción del
sustrato y el sitio activo
Conformación del estado de transición
Sitio activo
Estereoespecificidad
Centros activos asimétricos: sólo L-aminoácidos
Capacidad de distinguir entre estereoisómeros
Especificidad geométrica
Grupos químicos que interactúan con el sitio activo
Más limitante que la estereoespecificidad
Enzimás digestivas: más “preferencia” que “especificidad”
Especificidad de la unión
enzima-sustrato
Antiguamente, los enzimas recibían nombres
particulares, asignados por su descubridor.
Ejemplo:
amilasa (hidroliza el almidón)
Glc + ATP Glc-6P + ADP
Al ir aumentando el número de enzimas conocidos, se hizo
necesaria una nomenclatura sistemática que informara
sobre la acción específica de cada enzima y los sustratos
sobre los que actuaba.
Nomenclatura enzimática.
Nombres particulares
Consta actualmente de 3 partes:
el sustrato preferente
el tipo de reacción realizado
terminación "asa"
ejemplo: la glucoquinasa
ATP-glucosa-fosfo-transferasa
Glc + ATP Glc-6P + ADP
Nomenclatura enzimática.
Nombres sistemáticos
El nombre es identificado por un código numérico:
Encabezado por las letras EC (enzymecommission), seguidas de cuatro números separados porpuntos:
el primer número indica a cual de las seis clasespertenece la enzima,
el segundo se refiere a distintas subclases dentro decada grupo,
el tercero y el cuarto se refieren a los grupos químicosespecíficos que intervienen en la reacción.
Nomenclatura enzimática.
Comisión de enzimas
Ej.: ATP:glucosa fosfotransferasa (glucoquinasa)
Glc + ATP Glc-6P + ADP
EC 2.7.1.2.
2: transferasa
7: fosfotransferasa
1: el aceptor es un grupo OH
2: es un OH de la D-glucosa el que acepta el grupo
fosfato.
Nomenclatura enzimática.
Comisión de enzimas
Clases
1. Óxido-reductasas
2. Transferasas
3. Hidrolasas
4. Liasas
5. Isomerasas
6. Ligasas
Nomenclatura enzimática.
Comisión de enzimas
Catalizan reacciones de transferencia de hidrógeno (H) o electrones (e-) de un sustrato a otro
AH2 + B ⇄ A + BH2
Ared + Box ⇄ Aox + Bred
Clase 1-Oxidorreductasas
Catalizan la transferencia de un grupo químico (distinto del hidrógeno) de un sustrato a otro
A-B + C ⇄ A + C-B
Clase 2-Transferasas
Catalizan las reacciones de hidrólisis
A-B + H2O ⇄ AH + B-OH
Clase 3-Hidrolasas
Catalizan reacciones de ruptura o unión de sustratos
A-B ⇄ A + B
Clase 4-Liasas
Catalizan la interconversión de isómeros
AB ⇄ BA
Clase 5-Isomerasas
Catalizan la unión de dos sustratos con hidrólisis
simultánea de un nucleótido trifosfato (ATP, GTP, etc.)
A + B + XTP ⇄ A-B + XDP + Pi
Clase 6-Ligasas
Perfil energético de una
reacción espontánea
Perfil energético de una
reacción catalizada
Mecanismo de acción enzimática
La acción de los catalizadores consiste en disminuir la Energía de activación.
Las enzimas son catalizadores especialmente eficaces, ya que disminuyen la energía de activación, aún más que los
catalizadores inorgánicos.
Por ejemplo, la descomposición del agua oxigenada (H2O2)
puede ocurrir:
sin catalizador Ea= 18 Kcal/mol
con un catalizador inorgánico (platino) Ea= 12 Kcal/mol
con una enzima específico (catalasa) Ea= 6 Kcal/mol
Así, se puede calcular que el platino acelera la reacción
20.000 veces, mientras que la catalasa la acelera 370.000
veces.
Mecanismo de acción enzimática
Para que una reacción química tenga lugar, las moléculas de los reactantes
deben chocar con una energía y una orientación adecuadas.
La enzima :
aumenta la concentración efectiva de los sustratos (aumenta la
probabilidad de choque)
permite que los reactantes (sustratos) se unan a su centro activo con
una orientación óptima para que la reacción se produzca y
modifica las propiedades químicas del sustrato unido a su centro
activo, debilitando los enlaces existentes y facilitando la formación
de otros nuevos
Mecanismo de acción enzimática
Estudio cuantitativo de la catálisis enzimática queproporciona información sobre las velocidades dereacción, afinidad de las enzimas por su sustrato,mecanismos de reacción y los inhibidores
Aplicación:
- Mejor comprensión de las rutas metabólicas
- Diseño de tratamientos más adecuados
Velocidad de una reacción bioquímica: Cambio de laconcentración de un reactante o un producto por unidadde tiempo
Cinética enzimática
1. Concentración de sustrato
2. Concentración de enzima
3. pH
4. Temperatura
5. Efectores (Activadores e Inhibidores)
Variables que influyen en la velocidad de una
reacción enzimática
La velocidad inicial Vo de la reacción A → P , donde A= Sustrato y P=Producto, es:
Es proporcional a la frecuencia con que las moléculas reactantesforman el producto, la velocidad de reacción es
- Δ[A] Δ[P]Vo=
ΔtΔt=
Donde
[A]= concentración de sustrato
[P]= concentración del producto
T= tiempo
Vo= K [A]x Donde
Vo= velocidad
K= constante de velocidad (temp, pH, fuerza iónica)
X= orden de reacción
Reacción de Primer Orden:La velocidad es
proporcional a laconcentración de sustrato
Reacción de Orden Cero:
Independientementede la concentración desustrato, la velocidad esconstante
Orden de Reacción: Suma de los componentes de lostérminos de concentración en la expresión develocidad
Orden de una reacción enzimática
Modelo propuesto por Leonor Michaelis y MaudMenten en 1913
Hipótesis del Estado Estacionario: establece que [ES]se mantiene casi constante durante gran parte de lareacción
E + S ES E + Pk1
K-1
k2
Donde:
K1= constante de velocidad dela formación de ES
K-1= constante de velocidadde la disociación de ES
K2= constante de velocidad dela formación y liberación delproducto del lugar catalítico
K1 [E][S]=K-1 [ES] + K2 [ES]
Cinética Michaelis-Menten
Inducen una nueva constante: Km (Constante de Michaelis)
Ecuación de Michaelis-Menten:
vV s
K sm
max
Donde
Vmax= velocidad máxima
Km= constante de Michaelis
[S]= concentración del sustrato
Km=K-1 + K2
K1
Cinética Michaelis-Menten
Representa la Ecuación de Michaelis-Menten
Km (Constante de Michaelis): mide laconcentración del sustrato a la que laenzima tiene la mitad de la velocidadmáxima (Vmáx/2)
Vmáx: Se alcanza cuando todos los centroscatalíticos de la enzima se encuentranocupados por sustrato
Efecto de la [S]
Km y Vmax se determina midiendo las velocidades iniciales de reacción a varias [S]
No todas las enzimas cumplen las condiciones
(Enzimas alostéricas)
Difícilmente aplicable a reacciones con dossustratos
No se puede determinar con exactitud Vmaxni Km (Hipérbola rectangular, nunca llega aVmax)
Cinética Michaelis-Menten.
Limitantes
Unidades Internacionales (UI): Cantidad deenzima necesaria para producir 1 μmol deproducto/minuto
Nueva Unidad: Katal
Cantidad de enzima que transforma 1 mol desustrato/segundo (6 x 107 UI)
Grado de Pureza: Actividad Específica. Númerode UI en 1 mg de proteína
Unidades de actividad
enzimática
Consiste en representar la recíproca de la ecuación de Michaelis-Menten
Resultado: línea recta
Pendiente: Km/Vmax
Corte en ordenada: 1/Vmax
Corte en Abscisa (extrapolado): -1/Km
1
v0
KM
Vmax
1
S
1
Vmax
Donde:
y = 1/Vo
x = 1/[S]
m = Km/Vmáx
b = 1/Vmáx
Ecuación de Lineweaver-Burk
Representación de
Lineweaver-Burk
Inhibidores: moléculas que reducen la actividad deuna enzima (fármacos, antibióticos, conservantesalimentarios, venenos)
- Importante para regular las rutas metabólicas
- Tratamiento clínico
Tipos de Inhibición Enzimatica:
Isostérica: Reversible (competitiva, acompetitiva y nocompetitiva) e Irreversible
Alostérica
Inhibición enzimática
Representación de MM de unaactividad enzimática sin inhibir frentea un inhibidor competitivo
Representación de dobles recíprocos de unaactividad enzimática sin inhibir frente a uninhibidor competitivo
Inhibición Competitiva
Inhibición Acompetitiva
Representación de doblesrecíprocos de una actividadenzimática sin inhibir frentea un inhibidor acompetitivo
Representación de MM de unaactividad enzimática sin inhibir frentea un inhibidor no competitivo
Representación de dobles recíprocosde una actividad enzimática sininhibir frente a un inhibidor nocompetitivo
Inhibición no competitiva
Los inhibidores irreversibles reaccionan con un grupo químico dela enzima, modificándola covalentemente, su acción no sedescribe por una constante de equilibrio Ki, sino por unaconstante de velocidad ki:
E + I E’
A diferencia de la inhibición reversible, el efecto de los inhibidoresirreversibles depende del tiempo de actuación del inhibidor.
Los inhibidores irreversibles son, por lo general, altamentetóxicos.
Algunos tipos de inhibidores irreversibles
1. Reactivos de grupos -SH
2. Organofosfóricos
3. Ligandos de metales
4. Metales pesados
Inhibidores
Sustratos suicidas:
(Inhibidores activados enzimáticamente)
E + I EI EI* E’ + I*1 2 3
1. El inhibidor se unen al centro activo de la enzima, de manera específica, igualque el substrato o un inhibidor competitivo convencional
2. La acción catalítica de la enzima convierte al inhibidor I en una especiealtamente reactiva I*
3. I* modifica covalentemente a la enzima, inactivándola de forma definitiva aligual que un inhibidor irreversible.
Tienen por tanto:
(a) la especificidad del inhibidor competitivo y
(b) la potencia de los inhibidores irreversibles
Ejemplo: Sistema de la b-lactamasa bacteriana
La utilización masiva de antibióticos b-lactámicos(penicilinas, sus derivados semisintéticos ycefalosporinas) ha conducido a la aparición deresistencias a los mismos.
Los microorganismos resistentes a estosantibióticos lo son por producir una enzima, la b-lactamasa, que inactiva a los antibióticos b-lactámicos.
R CO NHS
N
O
CH3
CH3
COO-
R CO NHS
HN
CH3
CH3
COO-
CO
O-
-Lactamasa
Penicilina (activa)
Ác.peniciloico (inactivo)
Factores que afectan la actividad enzimática
[E] Temperatura
pH
Características:
También llamadas regulables, la actividad de la enzima seafecta por moléculas efectores que se unen en otros lugares;sitios alostéricos o regulables
Catalizan pasos reguladores claves de las rutas bioquímicas
La regulación puede ser:
- Activación alostérica: enzima aumenta afinidad por elsustrato (disminuye su Km), así como su velocidad de catalisis
- Inhibición alosterica: efectores negativos.
Enzimas Alostéricas
Características:
Cinéticamente no sigue elcomportamiento catalítico deMM
- Gráfica: curva sigmoidea ohiperbólica
La presencia de una sigmoideimplica la existencia decooperatividad en la fijacióndel substrato
Vo
[S]
Enzimas Alostéricas
La cooperatividad (positiva) consiste en que la fijación de unamolécula de substrato favorece la fijación del siguiente, y así hastaocuparse toda la molécula
s s s ss s
s
s
s s
+ + +
1 2 3
En términos de Km veríamos que Km1 > Km2 > Km3
Existe también cooperatividad negativa, cuando la fijación deuna molécula de substrato dificulta la fijación del siguiente.
Enzimas Alostéricas
Modelos que tratan de explicar la cinética de lasenzimas alostéricas
1. Monad, Wyman y Chanqeux (MWC)
2. Kosland, Nemethy y Filmes (KNF)
3. Eigen (Eig)
s
s s s s s
ss s
s
ii i i i i
i i i
i
Forma R
Forma T
Los inhibidores alostéricos aumentan elgrado de cooperatividad
Los activadores alostéricos disminuyen elgrado de cooperatividad; aconcentraciones elevadas de activador, lacinética pasa a ser michaeliana, y deja deser sigmoide.
Inhibidores y activadoresalostéricos
s
0 2 4 6 8 10 12
Y
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
Activador
Inhibidor
Sin Inhibición
Los efectores alostéricos operan sobreel grado de cooperatividad del sistema:
- Control Homoalostérico
- Control Heteroalostérico
s si
Centro
activoCentro
alostérico
Centro
alostérico
Centro
activo
En ausencia de inhibidor, el sustratose fija normalmente al centro activo
Cuando el inhibidor ocupa el centroalostérico, tiene lugar un cambioconformacional en el centro activo queimpide la fijación del sustrato
Inhibición Alostérica
La mayoría de las enzimas catalizan reaccionescon dos o más sustratos
Varios mecanismos posibles
- Orden de unión de los sustratos
- Orden de liberación de los productos
Determinación más compleja que en las enzimasmonosustrato
- Para cada sustrato hay Km, Kcat y Vmax
Cinética de reacciones multiustrato
Secuencial Ordenado
Secuencial Aleatorio
Mecanismo secuencialo de desplazamientosimple:
adición de todos lossustratos para poderobtener los productos
Mecanismos principales de reacciones
multiustrato
Mecanismo de doble desplazamiento o pingpong:
no se han unidos todos los sustratos cuando ya haysalida de productos
Mecanismos principales de reacciones
multiustrato
Catálisis: Proceso en el que aumenta la velocidad ala que una reacción se aproxima al equilibrio
Catálisis Covalente
- Grupo reactivo que se une transitoriamente mediante enlace covalente
Catálisis Ácido-Base
- Molécula diferente de H2O acepta o cede protón
Catálisis por Iones Metálicos
- Varias funciones, dependiendo de la reacción
Catálisis por Aproximación
Catálisis por unión del Estado de Transición
Quimotripsina: proteasa que rompe enlaces peptídicosadyacentes a los aminoácidos aromáticos
Catálisis Covalente
- Unión irreversible con el diisopropilfluorofosfato (DFP)
- Actividad de residuo clave, Ser 195
Catálisis Ácido-Base
- Otros dos elementos de “triada catalítica”
- Asp 102 e His 57
Quimotripsina: Dos Mecanismos Catalíticos
Aprox. 30% de las enzimas usan iones metálicos:
- Metaloenzimas unidas fuertemente a metales de transición:Fe2+, Fe3+, Cu2+, Zn2+, Mn2+ o Co3+
- Metaloenzimas unidad débilmente a metales en solución:Na+, K+, Mg2+ o Ca2+
Mecanismos:
- Enlace con el sustrato para permitir su adecuada orientación
- Participación del metal en mecanismos de oxidorreducción
- Estabilizador de la reacción al atraer cargas negativas del sustrato
Catálisis por Iones Metálicos
Observada en reacciones con varios sustratos
- Reactantes se encuentran en relación espacialóptima
Proximidad: acercamiento simple de las moléculas
- Aumentos de velocidad de hasta 5x
Orientación: acercamiento de los grupos
Catálisis por Proximidad y Orientación
Uno de los mecanismos más importantes
- Enzima tiene mayor afinidad por el estadode transición que por los sustratos oproductos
Conjuntamente con los demás, es responsablede los grandes aumentos de velocidad
Catálisis por unión del Estado de Transición
Regulación de la actividad enzimática
Las rutas bioquímicas están organizadas en reacciones químicas catalizadaspor enzimas, donde la regulación se hace más compleja
Razones de la regulación:
- Mantenimiento de un estado ordenado
- Conservación de la energía
- Respuestas a las variaciones ambientales
Se realiza:
- Regulación de la concentración enzimática
- Regulación de la actividad intrínseca de la enzima
1. Regulación alostérica
2. Regulación por modificación covalente
Regulación alostérica
Procesos a nivel celular; regulación de ajuste fino de la actividadenzimática, a través de efectos de retroalimentación (negativao positiva)
Regulación por modificación covalente
Procesos a nivel supracelular (orgánico); regulación a gran escalade actividades enzimáticas, a través de modificación covalentede enzimas, provocadas por señales (transducción de señales)
Retroalimentación Negativa en Vías Metabólicas
Thr a-cetobutirato IleTreonina
desaminasa
Síntesis de Isoleucina
El producto final de la ruta, Isoleucina, inhibe a la primeraenzima de la misma, Treonina desaminasa
Regulación alostérica
Suele haber fenómenos de modificación covalente de enzimas en larespuesta celular a señales químicas:
1. Neurotransmisores
2. Hormonas
3. Factores de crecimiento
4. Estímulos morfogenéticos y de diferenciación
5. Muerte celular programada (apoptosis)
6. Estímulos antigénicos
7. Luz y otros agentes físico-químicos
Regulación por modificación covalente
Fosforilación: Protein kinasas
Sobre residuos de Ser, Thr y Tyr
Ser
ATP ADP
Ser
C
N
C
C
N
C
C
N
CH2OH
O
H
R
H
O
R'
H
H
H
H
C
N
C
C
N
C
C
N
CH2O
O
H
R
H
O
R'
H
P O-
O
O-
H
H
H
Defosforilación: Protein fosfatasas
Sobre residuos previamente fosforilados: Ser-P, Thr-P, Tyr-P
Ser Ser
C
N
C
C
N
C
C
N
CH2OH
O
H
R
H
O
R'
H
H
H
H
C
N
C
C
N
C
C
N
CH2O
O
H
R
H
O
R'
H
P O-
O
O-
H
H
H
H2O Pi
Regulación por modificación covalente
Adenilación.Sistema de la Glutamina sintetasa
Tyr
O
OH OH
N
N N
N
H2NC
N
C
C
N
C
C
N
O
H
R
H
O
R'
H
CH2 O P
O
O-
O CH2
H
H
H
ADP-ribosilación. Actúa NAD+ como donador del grupo ADP-ribosa
H
H
H
O
OH OH
N
N N
N
H2N
+
C
N
C
C
N
C
C
N
O
H
R
H
O
R'
H
NHC
NH2
N
O
OH OH
CH2 O P O P O CH2
O O
O-O-H
Son variantes de una misma enzima. Formas físicamentedistintas de una enzima pero que catalizan una mismareacción
Enzimas multiméricas con varios tipos de subunidades- LDH: cuatro cadenas, tipos M y H- 5 isoenzimas diferentes- Preferencia por reacciones diferentes
Permite ajustes sutiles en función catalítica, una enzimasimple puede tener isoenzimas, ej: anhidrasa carbónica
Isoenzimas
Niveles enzimáticos como índices de enfermedad
Enzimas Funcionales: Actúan normalmente enlas reacciones del metabolismo
Enzimas No Funcionales: Aumentan sus nivelescuando hay daño tisular o orgánico
Niveles enzimáticos como índices de enfermedad
Enzima no Funcional Daño ocasionado
a-amilasa Daño pancreático
Fosfatasa AlcalinaObstrucción biliar, cáncer de huesos
Fosfataa Ácida Cáncer de Próstata
Creatinfosfoquinasa (CKmb), Lactato Deshidrogenasa (LDH-H4), a-
hidroxibutirato DH
Infarto al miocardio
Trasaminasa Glutámica Oxaloacético (TGO)
Evalúa infarto
Trasaminasa Glutámica Pirúvica (TGP)
Evalúa la Hepatitis