CARIOTIPO HUMANO

Definición: conjunto de cromosomas de un individuo dispuestos sobre

una hoja de papel de acuerdo a un orden preestablecido.

Conformación: 22 pares autosómicos y 1 par sexual (XX/XY)

Objetivos del estudio: Detección de cromosomopatías

Genética humana

Técnica o método de estudio: se realiza el análisis cromosómico con

un tejido. Se puede utilizar cualquier célula, las mas utilizadas son:

- Linfocitos de sangre periférica

- Fibroblastos

- Medula ósea

- Piel

- Células fetales

Procedimiento: se utiliza sangre venosa entera, se obtiene con técnica

estéril, y se le agrega un anticoagulante.

1. Siembra en medio de cultivo: Para que las células no mueran, se

agrega antibióticos para evitar el sobrecrecimiento bacteriano.

2. Agregado de mitógeno: Para estimular la división celular, se utiliza

la Fitohemaglutininas que se unen a la célula utilizada.

3. Secreción de interleuquinas: la célula utilizada secreta IL 2 que

estimula su división celular.

4. Cultivo durante 72 hs: a temperatura de 37°c.

5. Bloqueo de mitosis en metafase: se utiliza la colchicina (actúa

sobre los microtúbulos).

6. Choque hipotónico: Estimula la separación de los cromosomas. Se

utiliza CLK 0,075 M.

7. Fijación celular: Goteo la suspensión sobre un portaobjeto y luego

se realiza la tinción.

8. Microscopio: Se toma una microfotografía.

9. Recorte y armado de cromosomas.

Tabla de características- clasificación ZINCH (sistema

internacional de nomenclatura para citogenética humana).

Los cromosomas se agrupan por su forma.

GRUPO PARES DESCRIPCIÓN

A 1-3 Grandes casi submetacéntricos

B 4-5 Grandes submetacéntricos

C 6-12-X Medianos submetacéntricos

D 13-15 Grandes acrocéntricos con satélites

E 16-18 Cortos. 16 metacéntrico

17-18 submetacéntricos

F 19-20 Metacéntricos pequeños

G 21-22-Y Acrocéntricos cortos con satélites

Forma de los cromosomas

Metacéntricos Submetacéntricos Acrocéntricos con

satélites

Telocéntrico (no en humanos)

Técnica de Bandeo

Mediante técnicas de tinción es posible detectar a lo largo de cada

cromosoma diferentes bandas alternantes con mas o menos tinción.

Permite la identificación de cromosomas y caracterizar regiones

particulares de los mismos dentro de cada brazo. También permiten

evaluar el estado del cromosomas (si estan en metafase o en

profase) por la cantidad de bandas.

BANDA SUSTANCIA TIPO DE BANDA SECTOR DE ADN

Q Quinacrina Brillante Rica en T_A

G Giemza Oscuras Rica en A_T

C Desnaturalizació

n con alcali-

giemza

ADN repetitivo

R Cromomicina Inverso a Q y G Rica en G_C

N Nitrato de plata Organizadores

nucleolares