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AO DE LA DIVERSIFICACIN PRODUCTIVA Y DEL FORTALECIMIENTO DE LA LGO UNHEVAL.jpgEDUCACIN "2012.jpg

UNIVERSIDAD NACIONAL HERMILIO VALDIZNFACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS

Escuela Acadmico ProfesionalDe Ingeniera Agroindustrial:Ingeniera que Produce, Transforma y Conserva al Servicio de la ComunidadDETERMINACION CUANTITATIVA DE PROTEINAS

CURSO: Bioqumica.DOCENTE: Ing. Ana Maria Matos Ramirez.ALUMNOS: Bravo Martel, Amalia ngela

Caqui caballero, Jos

Damian Villanueva, Pedro Jhony.

Snchez, Almendra Bony.

HUANUCO PERU2015DETEERMINACION CUANTITATIVA DE PROTEINASTEMA: Obtencin e identificacin de protenas encontradas en la leche y en la clara de huevo.

I. INTRODUCCIN:Las protenas son las molculas orgnicas ms abundantes en la clula, ellas constituyen ms del 50% del peso seco de la clula. Cada tipo celular, tiene un rol especfico determinado por su composicin proteica. Con la posibilidad de que 20 (o 22) aminocidos diferentes puedan estar unidos en cualquier orden para conformar polipptidos de cientos de aminocidos, tienen el extraordinario potencial de producir una gran cantidad de variantes en su conformacin.

Las protenas estn formadas poraminocidos. Los aminocidos, grficamente, son representados como ladrillos que forman una pared, los aminocidos forman diferentes protenas especficas, las protenas son el fundamento mismo de la vida. En efecto, debido a la gran variedad de protenas existentes y como consecuencia de su estructura, las protenas cumplen funciones sumamente diversas, participando en todos los procesos biolgicos y constituyendo estructuras fundamentales en los seres vivos. Este grupo de nutrientes se encarga bsicamente de formar y renovar las clulas de nuestro cuerpo. Adems, distribuye el agua contenida, forma enzimas, hormonas y anticuerpos y, en ltima instancia, nos proporciona energa.

Los alimentos que ingerimos nos proveen protenas. Pero tales protenas no se absorben directamente ni como tales, sino que, luego de su desdoblamiento (hidrlisis o rotura), causado por el proceso de digestin, atraviesan la pared intestinal en forma de aminocidos.

La extraccin de protenas celulares comienza siempre con una ruptura celular o lisis. Los mtodos ms utilizados se basan esencialmente en la homogeneizacin de los tejidos y la destruccin de los lmites celulares por medio de diferentes procedimientos fsicos y/o qumicos. Obtenindose lo que se denomina extracto crudo. Los objetivos a lograr en esta etapa son maximizar la liberacin de las protenas de inters, evitando la degradacin trmica o las alteraciones secundarias por oxidacin, proselitismo

La funcionalidad de la protena es algunas veces considerada solo importante para procesos de alta demanda, como extrusiones o emulsiones. Sin embargo, la funcionalidad de la protena debe ser considerada para todos los productos y sistemas de consumo humano.

La leche es un alimento rico en protenas aunque en su mayora, se encuentran en reducidas cantidades entre el 3 y el 3,5% de la leche de vaca, est formado por protenas. Estas protenas se distribuyen en seroprotenas o protenas solubles, casenas y otras sustancias nitrogenadas de naturaleza no protica., as mismo las protenas del huevo la principal protena de la clara de huevo es la ovoalbmina, un tipo de albmina, adems de tener el mejor perfil proteico que se puede encontrar en un alimento, la clara contiene vitaminas y minerales y aporta aproximadamente 17 caloras, adems de la ovoalbmina, la clara de huevo tiene otras protenas como la ovomucina responsable de cuajar el huevo pochado o frito, la conalbmina y el ovomucoide.

II. OBJETIVO GENERAL:

Aplicar tcnicas para la separacin y obtencin de protenas y su identificacin mediante reacciones qumicas.

III. OBJETIVOS ESPECIFICOS:

Determinar la solubilidad de las protenas

Determinar la cantidad de protenas presente en la leche polvo (gloria).

Verificar si la clara y yema del huevo es una protena

Comprobar si el agua tiene protenas.

Determinar la cantidad de protena que tiene la leche liquida ( gloria).

IV. EQUIPOS:

Balanza electrnicaV. MATERIALES:

tubos de ensayo

Matraz Erlenmeyer

Vaso de precipitacin

Embudo

Pipeta aforada 10 ml.

Pipetas

Varilla de vidrio

Vaso de precipitacin 100 ml

Vasos de precipitacin 250 ml

VI. REACTIVO E INSUMOS.

Agua, leche en polvo, leche liquida y huevo.

Hidrxido de sodio 1N

Sulfato de cobre 10%

VII. REVISIN DE LITERATURA:

Reaccin de Biuret:(Mora, 2007) Es aquel que detecta la presencia de protenas, pptidos cortos y otros compuestos con dos o ms enlaces peptdicos en sustancias de composicin desconocida. Est hecho de hidrxido potsico (KOH) y sulfato cprico (CuSO4), junto con tartrato de sodio y potasio (KNaC4H4O64H2O). El reactivo, de color azul, cambia a violeta en presencia de protenas, y vira a rosa cuando se combina con polipptidos de cadena corta. El hidrxido de potasio no participa en la reaccin, pero proporciona el medio alcalino necesario para que tenga lugar. Se usa normalmente en el ensayo de Biuret, un mtodo colorimtrico que permite determinar la concentracin de protenas de una muestra mediante espectroscopia ultravioleta visible a una longitud de onda de 560 nm (para detectar el ion Cu2+).VIII. PROCEDIMIENTO:

Leche en Polvo.

Se peso en la balanza analtica 120 gr de leche en polvo.

Luego se midi 100 ml agua en un matras de Erlenmeyer, para luego disolver la leche en polvo en el matras de Erlenmeyer.

Por ultimo se extrajo con la pipeta 2 ml sustancia de leche para luego introducirlo en el tubo de ensayo.

Leche liquida.

Se abri el taro de leche para extraer 10 ml de leche liquida.

El cual se le introdujo en el matras de Erlenmeyer.

Por ultimo se extrajo con la pipeta 2 ml de sustancia de leche para luego introducirlo en el tubo de ensayo.

Clara de huevo.

Se abri una parte del huevo para luego extraer la clara del huevo con sumo cuidado en un vaso de precipitado.

Por ultimo se medio 2 ml de la clara de huevo en una probeta de 10 ml, para luego introducirlo en el tubo de ensayo.

Yema de huevo.

Se abri una parte del huevo para luego extraer la yema del huevo con sumo cuidado en un vaso de precipitado.

Por ultimo se medio 2 ml de la yema de huevo en una probeta de 10 ml, para luego introducirlo en el tubo de ensayo.

agua de cao.

Se midi 10 ml de agua de cao en una probeta de 10 ml..

Por ultimo se extrajo con la pipeta 2 ml de agua para luego introducirlo en el tubo de ensayo.

RECONOCIMIENTO DE PROTENAS

Reaccin de Biuret

En dos tubos de ensayo se coloc 2 ml de solucin de clara de huevo. Al tubo 1 se agreg 2cc de agua destilada. Se aadi igual volumen de solucin de hidrxido de sodio. Se agit. Se agreg tres gotas de solucin de sulfato de cobre y se agita. Se dej reposar la mezcla, y se observ la reaccin:

En el tubo 2 se aadi 2cc de solucin de hidrxido de sodio. Se agit. Se agreg tres gotas de solucin de sulfato de cobre y nuevamente se agit. Se dej reposar la mezcla, y se observ la reaccin.

Muestra 2 ml. 3 gotas

muestra 2 ml. sustancia 2ml.

IX. RESULTADOS Y DISCUSIN:

1). leche en polvoEn el tubo 2 se aadi 2 ml de solucin de hidrxido de sodio. Se agit. Se agreg tres gotas de solucin de sulfato de cobre y nuevamente se agit. Se dej reposar la mezcla, y se observ la reaccin. RESULTADO: COLOR PURPURA OSCURO.2). leche liquida.En el tubo 2 se aadi 2cc de solucin de hidrxido de sodio. Se agit. Se agreg tres gotas de solucin de sulfato de cobre y nuevamente se agit. Se dej reposar la mezcla, y se observ la reaccin. RESULTADO: COLOR PURPURA CLARA.3). clara de huevo.En el tubo 2 se aadi 2cc de solucin de hidrxido de sodio. Se agit. Se agreg tres gotas de solucin de sulfato de cobre y nuevamente se agit. Se dej reposar la mezcla, y se observ la reaccin. RESULTADO: COLOR PURPURA CLARA.4) yema de huevo.En el tubo 2 se aadi 2cc de solucin de hidrxido de sodio. Se agit. Se agreg tres gotas de solucin de sulfato de cobre y nuevamente se agit. Se dej reposar la mezcla, y se observ la reaccin. RESULTADO: COLOR PURPURA OSCURO.5). agua de cao.En el tubo 2 se aadi 2cc de solucin de hidrxido de sodio. Se agit. Se agreg tres gotas de solucin de sulfato de cobre y nuevamente se agit. Se dej reposar la mezcla, y se observ la reaccin. RESULTADO: COLOR CELESTE.

X. CONCLUSIONES

El contenido de protenas presente en la leche en polvo es muy alto, mientras que en la leche liquida la cantidad de protena presente es muy bajo, a pesar de que la leche empleada para la prctica era una leche pura, sin procesar tuvo un contenido.

Mientras que en la clara de huevo el contenido de protena presente es de regular cantidad ya que al momento de realizar el mtodo de biuret nos resulto de color purpura clara, lo cual nos indica que tiene una regular cantidad de porcentaje de protena.

El mismo procedimiento realizamos con la yema del huevo, pero en este caso nos dio un resultado muy positivo ya que al realizar la reaccin por biuret, el color fue mas oscuro lo cual nos dio una conclucion de que la yema tiene mas protena que la clara del huevo

y por ultimo probamos con el agua de cao el cual nos dio un resultado negativo, el cual no dio ningn color que nos pudiera indicar que tuviera protenas, ya que permaneci con el mismo color.

En conclucion podemos decir que no todas las sustancias o productos contienen alta cantidad de protenas.

XI. RECOMENDACIONES:

Colocar la leche en una probeta o recipiente que tenga un dimetro pequeo para facilitar la posterior separacin del suero de leche y el precipitado, ser pacientes y esperar que se precipite lo suficiente antes de separarlos.

Tener mucha cautela al momento de pesar las muestras, para evitar errores que posteriormente perjudiquen el clculo de contenido de casena en la leche.

Al momento de extraer la clara de huevo tener cuidado que no se vaya a mezclar con la yema, debido a que dificultara la preparacin de la solucin para su respectivo anlisis.

Debemos tener cuidado con la empliacion de las gotas de sulfato de cobre, ya que si nos excedimos nos puede dar un resultado negativo.

XII. BIBLIOGRAFIA:Alais, C. (2003). Ciencias de la leche. Espaa: REVERTE.

Flanzy, C. (2003). Enologa: Funadamentos Cientficos y Tecnolgicos. Madrid - Espaa: Ediciones Mundi Prensa.

Gil, A. (2010). Composicion y Calidad Nutritiva de los Alimentos. Madrid - Espaa: Medica Panamericana.

Guarnizo, A. (2003). Experimentos de qumica orgnica. Colombia: Elizcom.

Mora, S. Q. (2007). Manual de experimentos de laboratorio para Bioquimica. Costa Rica: EUNED.

Ortuo, . V. (2006). Introduccin a la Qumica Industrial. Espaa: REVERTE.

http://www.csi-csif.es/andalucia/modules/mod_ense/revista/pdf/Numero_21/ALMUDENA_MORENO_2.pdf

XIII. ANEXOS.

tubos de ensayo balanza analtica leche en polvo

C:\Users\tat0\Documents\informes\bioquiica\inf 3\Foto0040.jpg muestras leche, huevo y agua leche liquida.

C:\Users\tat0\Documents\informes\bioquiica\inf 3\Foto0036.jpg

reaccin en biuret. Reaccin en enlace peptdicos