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Vírus Envelopados
• Presença de Membrana circundando o
nucleocapsídeo
• Maioria afeta animais - influenza
• Minoria infecta bactérias e plantas
Prof. Rigobelo
Vírus Envelopados
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Constituição do Envelope
Bicamada Lipídica
Proteínas
Glicoproteínas
Lipídeos
– Provenientes de Células Hospedeiras (HO)
• Proteínas
– Responsáveis pela Adesão HO
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Qual é a função do envelope?
• Componente responsável pelo contato
– Relacionados
• Especificidade da infecção
• Aspectos da penetração viral no HO
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Vírus Complexos
• Constituídos por várias partes
• Geralmente são bacteriófagos
– T4 de E. coli
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Estrutura dos Vírus Complexos
• Cauda – estrutura complexa
– Contem 20 proteínas diferentes
• Cabeça
– Contem outras 20 proteínas diferentes
• Formação
– Cauda e cabeça separadamente
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Enzimas Virais
• Partículas virais não realizam metabolismo
– Parasitas obrigatórios
– Metabolicamente inertes
• Penetração viral no HO
– Exige a presença de enzimas
– Realizam orifício na parede celular bacteriana
– Entrada do ácido nucléico viral
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Enzimas virais
• Estágios Tardios da Infecção
– Síntese de grande quantidade de lisozima
– Lise celular
– Liberação de virions
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Vírus de RNA
• Enzimas
– Transcriptase reversa
– DNA polimerase dependente de RNA
• RNA polimerase viral
– Célula HO possuem RNA polimerase
– RNA incompetente para sintetizar DNA ou RNA
– Quando o MOLDE RNA viral
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Promovem a
liberação do vírus
Enzimas
• Auxiliam a liberação do vírus no HO
– Neuraminidases
– Vírus de animais
• Agem em células animais
– Clivando ligações glicosídicas
– Glicoproteínas e glicosídeos
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TECIDO CONECTIVO
Enzimas Virais
• Substituem ausência ou enzimas não funcionais
HOSPEDEIRO
Ausência de Enzimas
Ausência de Replicação Viral
Hospedeiro Viral
• Vírus são parasitas obrigatórios
– Replicação exige HO apropriados
• Enzimaticamente falando
– O vírus precisa carregar toda enzima
– Que seu HO não tem
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Hospedeiros Virais
• Podem estar em culturas puras
– Meios liquídos ou semi-sólidos (ágar)
• Culturas de tecidos
– Facilitou os estudos de vírus
– Animais e plantas
– Plantas exigem a planta inteira
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Planta inteira
• Células possuem metabólitos diferenciados
• Estágio independentes
– Cada estágio de desenvolvimento
– Ocorre a síntese de metabolitos diferentes
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Cultura de Células Animais
• Células retiradas de animais experimentais
– Órgãos dos animais
– Remoção asséptica de partes do tecido
– Dissociação das células
– Remoção do cimento intracelular
– Semeadura da suspensão sob superfície de garrafa
– Placa de Petri
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Culturas de Células Animais
• Formação de monocamada
– Meio de cultura adequado
– Meios complexos
– Amino ácidos
– Vitaminas
– Sais
– Glicose
– Sistema de tambonamento CaHCO3
– Soros sanguíneo
Cultura de Células
• Uso de antibióticos
– Evitar contaminação bacteriana
• Algumas culturas podem crescer subcultivadas
– Crescem indefinidademente
– Células Hela
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Em alguns casos
• Cultura não cresce indefinidamente
• Exige o cultivo de novas culturas
• Preparadas frescas
• Processo de altos custos
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Uso de órgãos
• Inteiros ou partes
• Permitem a inserção da cultura viral
• Condições laboratoriais controladas
– Sintomatologia da infecção na célula HO
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Quantificação dos Vírus
• Necessário quantificar o n. de partículas virais
• Pode-se usar microscópio eletrônico
• Medir seus efeitos sobre a célula hospedeira
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Unidade Infecciosa Viral (UIV)
• Menor unidade capaz de promover efeito
– Detectável
• Quando inoculada em um hospedeiro
– Susceptível
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Unidade Infecciosa Viral
• Pode corresponder somente a um vírion
• Geralmente exige um inoculo maior
• Determinar o número de UI por volume
• Medida da quantidade de vírus
• Uma medida é denominada TÍTULOProf. Rigobelo
Placas de Lise
• Infecção viral em uma camada celular
• Células hospedeiras crescendo em uma
superfície plana
• Formação da zona de lise
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Zona de lise
• Área clara
• Convenção – surge pela infecção de um único
virion
• São janelas cortando o crescimento confluente
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Bacteriófago
• Fina camada de bactérias hospedeiras
• Espalhadas na forma de sobrecamada
• Agar – meio sólido
• Presença de vírus
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Bacteriófagos
• Com o crescimento bacteriano
• Surge uma camada turva
• Regiões onde há infecção
• Ocorrerá lise celular
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Contar Lise
• Unidade Formadoras de Placas de Lise
• Contar UFPL – determinar
• Número de Unidades Virais da Amostra
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Replicação
Curva de crescimento de Bacteriófagos:
Período de eclipse: partículas virais em replicação dentro das
células
Ensaios de Formação de Placas de Lise
• Permite isolar culturas puras
• Identificar vírus geneticamente puros
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Vírus Animais
• Usar células animais como hospedeiras
• Placas de lise – zonas de destruição
• Pelo número de placas formadas
• Estima-se o título viral
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Autólise
• A autólise ou citólise -- A ruptura dos
lisossomos no interior da célula pode digerir
as organelas celulares.
• É a autodissolução celular (autólise)
• A Autólise é a autodestruição celular por
ativação das lisosimas em decorrência da
falta de nutrientes e O2. É a desorganização
progressiva até a desintegração completa.
Vírus Intestinais de Maior Ocorrência
• Rotavírus
– Vírus entéricos
– Dores abdominais
– Contaminação por alimentos
– Pessoa pessoa
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