introdução à cultura de tecidos

CULTURA DE TECIDOS

O que é cultura de tecidos?

CULTURA DE TECIDOS

Histórico

• Século XVII (DUHAMEL) � calos de espécies arbóreas.

• 1675 (MALPIGHI) � anatomia microscópica.

• 1838 (SCHLEIDEN) e 1839 (SCHWANN) �

formularam a “teoria celular”.

• 1853 (TRÈCUL) � formação de calos (arbóreas) e publicação de figuras de seções.

• 1878 (VÖCHTING) � calos de Brassica rapa. Atenção voltada para a polaridade.

• 1893 (RECHINGER) � tamanho mínimo dos explantespara permitir a divisão celular (20 mm). Espessura < 1,5mm � incapazes.

• 1902 (HABERLANDT) � teoria de totipotência:

“Seres vivos têm a capacidade de

regenerar organismos inteiros, idênticos

à matriz doadora, a partir de células

únicas.”

CULTURA DE TECIDOS VEGETAIS

Célula madura e especializada (diferenciada )

Volta ao estágio embrionário (desdiferenciada)

Volta a ser especializada (determinação/rediferenciação)

• 1920 � germinação e crescimento de orquídeas.

• 1926 (WENT) � descoberta das auxinas.

• 1939 (WHITE, NOBERCOURT, GAUTHERET) � calos de fumo e cenoura.

• Década de 40 � água de coco – zeatina.

• 1954 (TORREY) � suspensões celulares.

• 1955 (MILLER et al.) � descoberta das citocininas.

• 1957 (SKOOG & MILLER) � Auxina/citocinina na morfogênese.

• 1958 (STEWARD & REINERT) � embriões somáticos em cenoura.

• 1960 (MOREL) � eliminação de vírus.

• 1960 (COCKING) � cultura de protoplastos.

• 1962 (MURASHIGE & SKOOG) � desenvolvimento de meio artificial.

• 1965 (AGHION-PRAT) � indução de florescimento in vitro de tabaco.

• 1985 (HORSCH et al.) � transformação genética de discos foliares por Agrobacterium, com regeneração das plantas transformadas.

Crop genetic engineering includes:

1) DNA isolation;

2) gene cloning;

3) gene design;

4) Transformation;

5) plant breeding.

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Cultura de tecidos

Explantes = fragmentos de tecidos vegetais

Totipotência

Teoria � todas as células

Cultura de tecidos

1. Cultura de tecidos desorganizados

Calos – cultura e manutenção de massas celulares �proliferação desordenada, a partir de tecidos ou órgãos.

Suspensões – proliferação de células isoladas ou em pequenos aglomerados, dispersos.

2. Cultura de tecidos organizados

Cultura de órgãos – inclui o isolamento de primórdios e segmentos foliares. Para a micropropagação, os tipos mais importantes são:

a) Cultura de meristemas – ápices meristemáticos, consistindo de domo apical, isentos ou contendo um ou dois primórdio foliares.

b) Cultura de ápices caulinares – iniciada a partir de ápices caulinares ou gemas laterais.

c) Cultura de segmentos nodais – contêm segmentos caulinares que carregam gemas simples ou múltiplas.

d) Cultura de embriões – embriões zigóticos são excisados e cultivados para originar plântulas.

e) Cultura outros tecidos vegetais

Cultura de raízes – raízes isoladas.