aspergilosis en abanicos de mar: diversidad de hongos · a. flavus. objetivos comparar ......

AspergilosisAspergilosis en abanicos en abanicos de mar: diversidad de hongosde mar: diversidad de hongos

Paul Paul BaymanBayman, Carlos Toledo, Carlos Toledo--HernHernáández, ndez, Anabella Zuluaga Anabella Zuluaga & Alberto & Alberto SabatSabat

DeptoDepto dede BiologBiologíía,a, UPR UPR –– RRíío Piedraso Piedras

Aspergilosis en abanicos de mar: diversidad de hongos

• antecedentes• diversidad de hongos• producción de aflatoxinas in

vitro

enfermedades de corales en el Caribe

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Photo: A. Bruckner

lesionesen

Gorgoniaventalina

D. Geiser

Aspergillus sydowii

1. esporas en nubes de polvo del Sahel

(imagenes de SeaWIFS, NASA)

AfricaAfrica

PRPRfuentes posibles de A. sydowii :

2. escorrentía de ríos

fuentes posibles de A. sydowii :

www.www.cotfcotf..eduedu//eteete/modules//modules/coralreefcoralreef//CRanthroCRanthro.html.html

¿Cómo es la comunidad microbianade los abanicos de los abanicos sanossanos??

http://www.primidi.com/images/aspergillus_fu

www4.umdnj.edu/cswaweb/rad_teach/allasper.html

¿son patógenos oportunistas?¿mayormente atacan hospederos

enfermos o estresados??

academics.hamilton.edu/.../image/candida.jpg

Candida albicans

aspergilosisA. fumigatus,A. flavus

objetivoscomparar comunidades de Aspergillus y Penicillium en:

a. Gorgonia vs aguab. tejido sano vs. lesiones

comparar producción de aflatoxinas en cepas de A. flavus de mar con cepas terrestres

averiguar de dónde viene el inóculo

1. Colectar muestras 1. Colectar muestras de abanicosde abanicos

A. flavus

aguaabanico

2. Sembrar en placas:• tejido con esterilización superficial• filtros de agua• medio es GPYA (para hongos marinos)

3. Identificar hongos por morfología, secuencias de la región ITS con BLAST

0

2

4

6

8

10

A. flavu

sPen

icillu

mClad

osporiu

mA. s

ydowii

A. terre

usA. n

igerdesc

onocido #

colo

nias

ais

lada

shay variación en distribución dehongos dentro de una colonia

resultados:

05

101520253035

P. citr

inum

A. flav

usA. s

ydow

iiA. ta

marii

A. vers

icolor

A. acu

leatus

A. sp.

A. terre

usP. c

ommun

e

# m

uest

ras agua

tejido

los hongos aislados de gorgonios también están en el agua

…ninguno muestra una preferenciaobvia para el gorgonio

P < 0.01

los hongos aislados de lesiones también están en tejidos sanos

…¿patógenos oportunistas?

05

1015

202530

P. citr

inumA. fl

avus

A. tamari

iA. s

ydowii

A. vers

icolor

A. terre

us

P. chrys

ogenum

Tritira

chium

# m

uest

ras lesiones

tejidos sanos

P > 0.90

métodos:

producción de aflatoxinas

aflatoxinas extraidos de cultivos líquidos con diclorometano

analisis con TLC, HPLC20 cepas de A. flavus probadas

hasta la fecha

A. flavus

Producción de aflatoxinas por A. flavusen medio líquido: analisis por TLC y HPLC

AFB1AFG1

Est H H H Est

aflatoxin B1

Producción de aflatoxinas en A. flavus

11/20 de cepas las producen

niveles hasta 2000 ng/mL AFB1

producen AFB1 y también AFG1

(poco común en A. flavus)

no sabemos si hay producción deaflatoxinas en gorgonios infectados

Efectos de aflatoxinas en vertebrados

hepatocarcinogénicashepatotóxicasinmunosupresivassíndrome de malnutrición (Kwashiorkor)

pérdida de peso

Aspergillus flavus

Dosis diario que produce tumores en 50% de ratas machos (en g)

etanol 10.0 gbenzeno 0.3cloroformo 0.2DDT 0.1formaldehido 0.008sterigmatocystin 0.0009aflatoxina B1 0.000005

Killer maize sparks Kenya alarm> 80 deaths, 180 hospitalized

"The patients have symptoms of liver failure, they are coming in with yellow eyes, swollen legs, vomiting and bleeding from the nose," Dr. Jared Omollo...told the BBC.

"It's the first time we have dealt with this magnitude of aflatoxin poisoning. It's a bit scary," he said.

BBC NEWS Sunday, 13 June, 2004

Conclusiones

Los hongos aislados de tejidos enfermos también se aislaron de tejido sano y agua

Probablemente son patógenos oportunistas

A. sydowii poco común, solamente uno de varios patógenos

¿ ?

Conclusiones

Aspergillus flavus común en tejido enfermo de gorgonios

la mitad de las cepas producen aflatoxinas

muchas producen AFB1 y AFG1

Reconocimientos

NOAA Sea Grant NIH-SCORE

Adelmarie BonesJosean RodríguezOmara Ortiz