BABIPENDAHULUAN

LatarBelakang

KelautandanPerikananadalahsalahsatusektorekonomiyangsangatstrategisbagiperkembanganpembangunanIndonesiamelaluikegiataneksporprodukperikanan.SaatinipemerintahberusahamenjadikansektorkelautandanperikanansebagaisalahsatusektorandalanyangdiharapkanmampumengeluarkanbangsaIndonesiadarikrisisekonomiyangberkepanjangan.Pembangunansektorkelautandanperikananbertujuanuntukmenyediakanproteinhewanipadamakanandanbahanmentahbagiindustryperikanan,meningkatkanpendapatanpetaniikan,menciptakankesempatankerjadanmeningkatkandevisaNegaramelaluipromosieksporprodukperikananbudidaya,dandukungandaerahsebagaimanapembangunannasionalberkelanjutan.

Dalameraglobalisasidewasainiaruslalulintaskomoditasperikanansemakinmeningkat.Perdaganganbebasmulaidirasakan,terlebihlagidenganperkembanganteknologiinformasidankomunikasi,hubunganantarNegarahampirtiadabatas.HalinisemakinmembukapeluangkemungkinandapatmasukdantersebarnyahamadanpenyakitikandiluarnegeridanantarareaataudaerahdidalamwilayahRepublikIndonesia.

SumberdayaalamhayatitersebutmerupakansalahsatumodaldasarsekaligussebagaifaktordominanyangperludiperhatikandalampembangunannasionaluntukmewujudkanmasyarakatadildanmakmurberdasarkanPancasiladanUndangUndangDasar1945.

SebagianpulaupulaudiIndonesiamasihbebasdarihamadanpenyakitikan.SejalansemakinmeningkatnyalalulintasikanantarNegaradandarisuatuareakearealaindalamwilayahRepublikIndonesia,dalamrangkaperdagangan,semakinmembukapeluangbagikemungkinanmasukdanmenyebarnyahamadanpenyakitikanyangberbahayaataumenularyangdapatmerusaksumberdayaalamhayati.

SejalandenganarusglobalisasidanperdaganganbebastelahdisepakatibahwaaturanteknisikankarantinamerupakanhakberdaulatNegaraanggotaWTO(WorldTradeOrganization)yangimplikasinyamenjadikanaturankarantinasebagaiinstrumentdagangprodukprodukperikananmelaluiproteksionismeterselubung.Untukmenghindariaksesnegatifdarikondisitersebutmakajajarankarantinaharusdiperkuatsehinggaselainmencegahhamadanpenyakitkarantinajugamampumengendalikanprodukimporperikananyangtidakmemenuhistandarkarantinadanmampumemberikanjaminankualitasprodukeksporperikanan.

UntukmengantisipasisegalakemungkinanyangdapatmerusakkelestariansumberdayaperikananmakasesuaidenganUndangUndangNo.16tahun1992tentangKarantinaHewan,IkandanTumbuhan,padapasal3disebutkanbahwakarantinaikanbertujuanuntukmencegahmasuknyahamadanpenyakitikankarantinadariluarnegerikedalamwilayahRepublikIndonesia.Upayatersebutdirealisasikandalambentukpelaksanaantindakankarantinaataskomoditiataumediapembawalainnyabaikyangdiekspor,impormaupundomestikmelaluipelabuhanlautmaupunbandaraudarasertatempattempatpemasukanataupengeluaranlainnya(UUNo.16tahun1992).

Olehkarenaitupentingnyadilakukantindakankarantinapadakomoditiataumediapembawalainnyayangkeluarmaupunyangmasuk,untukmencegahmasukdantersebarnyaHamadanPenyakitIkanKarantinayangdapatmerusaksumberdayaperikanandidalamwilayahRepublikIndonesiaterutamapadakomoditikepitingbakau(scyllaserrata)yangmempunyainilaigiziyangtinggisehinggapermintaanakankepitingbakauterusmeningkatbaiksecaradomestikmaupunekspor,mengingatpentingnyahaltersebutmakapenulismengambiljudulMetodePemeriksaandanIdentifikasiBakteriVibriosppadaKepitingBakau(scyllaserrata).

BABIIIHASILDANPEMBAHASAN

A.UraianKegiatan

Adapunkegiatanyangdilakukanpadapraktikkerjalapangdistasiun KarantinaIkanPengendalianMutudanKeamananHasilPerikanan kelas 1 aceh terdiridaristerilisasialatdanbahan,pembuatanmediaagar danmediauji TSA,TCBS,TSIA,UREASE,SIMMON SITRAT,LIA,MIO,O/F,MR-VP,WP,GLATIN,GLUKOSA,SUKROSA,LAKTOSA,dan THREALOSA,isolasibakteri,Pemurnianbakteri,ujibiokimiabakteridanidentifikasibakteri.

1.SterilisasiAlatdanBahan

Sebelumdilakukanpemeriksaankesehatanterhadapsampeluji,terlebihdahulusiapkanalatyangdibutuhkan.Perlengkapantersebutberupaalatdanbahanyangharusdisterilkansebelumdansetelahdigunakan.

Yangdimaksuddengansterilladalahsuatukondisiyangbebasmikrobabaikvegetatifmaupunspora(Anonim1992),sedangkansterilisasiadalahkegiatanyangdiilakukansecarafisikataukimiawiuntukmemperolehkondisisteril.

.

a.Sterilisasipanaskering

Sterilisasipanaskeringyangdilakukanmenggunakanoven.Sterilisasiinidigunakanuntukmensterilkanalatalatyangterbuatdarikacaataugelassepertitabungreaksi,cawanpetri,Erlenmeyer,pipet,dll.Alatyangdisterilkanterlebihdahuludibungkusdengankertaslaludimasukkankedalamoven,tujuannyaagarsetelahdiovenalatalattersebuttidakkontaminanterhadapudara.Suhuyangdigunakanyaitu160Cselama2jam,halinidimaksudkanuntukmengoksidasicairanyangadapadatubuhbakterisehinggaterjadisuatudehidrasidanpadaakhirnyadapatmembunuhmikroorganismetersebut.

b.Sterilisasipanaslembap

Sterilisasipanaslembabyaitusterilisasiyangmenggunakansuhupanasdanuapairsecarabersamasamadenganautoclave.Umumnyasterilisasiinidilakukanuntukmensterilkanbahanyangakandigunakansepertibahanujilanjutataubahanmediatumbuh.Sterilisasidilakukandalamautoclavedengansuhu121Cdalamwaktu15menit,karenapadasuhutersebutmikroorganismetidakdapatbertahanhidup(Hadioetomo,1993).Setelah15menit,autoclavedapatdimatikan.Biarkantekanandalamautoclave0atmdansuhukurangdari100C,setelahitumediaataubahanyangadadidalamautoclavedapatdikeluarkan.

2.PembuatanMediaTumbuh

1 . TSA (Triptone soya agar) (M.2)

Bahan :

TSA 40 gram

Akuades 1000 ml (eg)

Cara pembuatan

Larutan TSA dalam akuades dan panaskan hinaga mendidih

Kemuadia disterilkan dengan autoclave suhu 121 C selama 15 menit

Distribusikan dalam cawan petrisk dan tabung reaksi.

simpan d

4.IsolasiBakteri

Isolasibakterimerupakancarauntukmemisahkanataumemindahkanmikrobatertentudarilingkungannyasepertiyangterdapatpadatubuhorganisme(ikan),sehinggadiperolehkulturbakteriyangmurniataubiakanyangtumbuhdidalammediatumbuh.Mengisolasibakteridilakukandalamlaminaryflowsecaraaseptikdanteliti.Isolasipadaagarcawandapatdilakukandenganduacara,yaitumetodegoresdantuang.Isolasiinidilakukanpadamikrobayangdapatmembentukkoloniyangmudahterpisahpadamediapadatsepertikebanyakanbakteri,jamur,danalgauniseluler(Hadioetomo1985).

TeknikisolasibakteriyangbiasadilakukandiBBKIPMyaituTeknikgores,Teknikinidigunakanuntukmengisolasibakteripadaikanmenggunakanjaruminokulum(ose).CaranyayaitusterilkanterlebihdahulujarumosedenganapiBunsen,agartidakterjadikontaminasibakteridariudara.Jarumoseyangtelahsterildigoreskankeorgantargetyangdidugamengandungpathogendanselanjutnyadigoreskankemediatumbuhsecarahati-hati.

Setelahprosesisolasibakteriselesai,makatindakanselanjutnyamemasukkanmediatadikedalamincubatordengansuhu27C30Catauincubator35oCselama2448jam.

5.TeknikPemurnianBakteri

Untukmempelajarisifat-sifatperturnbuhan,morfologidansifatfisiologibakteri,makamasing-masingbakteritersebutharusdipisahkansatudenganyanglainnya,sehinggaterbentukkulturmumi,yaitusuatubiakanyangterdiridarisel-selsatuspesiesatausatugalurmikroba(Fardiaz1989).Pemurniandilakukanpadahasilisolasibakteriyangtelahdiinkubasiselama24-48jam,bakteriyangtelahdiinkubasitersebutbiasanyaterdiridaribeberapakolonibakteri.Sehinggadiperlukanpemurnianbakterisecaraaseptikagarkitahanyamemperolahsatujenisbakterisajadalamjumlahyangbanyakdidalammediatumbuhtersebut.Bakteriyangdimurnikanadalahbakteriyangdominantumbuhdalammediadanterpisah.

Teknikmemurnikanbakterimenggunakanteknikgoresdenganmengambilsatukolonibakteridanmenggoreskannyakepermukaanmediatumbuhsecaraaseptik,Prosespemurnianbakteriinidilakukanuntukmendapatkankolonibakteriyangbenar-benarmurni.Umumnyabakteriyangakandimurnikanadalahbakteriyangkoloninyaterpisahdantumbuhpadahasilgoresanpadamediatumbuh.HalinisesuaidenganpendapatPelczar(2006),yangmenyatakanbahwakoloniyangberlainandapatmewakliorganismeyangberbeda-beda,setiapkoloniagaknyamerupakanbiakanmurnisatumacammikroorganisme.Setelahkulturmurniselesai,makahasilpemurniantersebutdimasukkankedalaminkubatorselama24-48jam.

6.UjiLanjut

Ujilanjutdilakukanuntukdapatmengidentifikasibakteriyangmenyerangikan,selaindenganmelihatbentukdanwarnakolonibakteri,kitaperlumelakukanujilanjutagarprosesidentifikasibakterilebihakuratsehinggakitadapatmenentukanjenisbakteriyangmenyerangkomodititersebut.

AdapunujilanjutyangdilakukandiBalaiBesarKarantinaIkanPengendalianMutudanKeamananHasilPerikananMakassaruntukmengidentifikasibakteriVibriospyangterdapatpadasampelujiKepitingBakau(Scyllaserrata)adalahsebagaiberikut:

a.Ujipewarnaangaram

Salahsatuteknikpewarnaandiferensialyangpalingpentingdanpalingluasdigunakanuntukbakteriialahpewarnaangram.Ujipewarnaangramdilakukanuntukmengetahuibentukdarikolonibakteritersebutdanuntukmenentukanwarnabakteriapakahtermasukgramnegatifataugrampositif.Dalamprosesiniolesanbakteriyangterfiksasikarenalarutan-larutanantaralainKristalviolet,larutanyodium,alkohol(bahanpemucat),dansafraninataubeberapapewarnatandinganlainyangsesuai(Pelczar,2006).

PrinsippewamaanGramadalahkemampuandindingselmengikatzatwarnadasar(kristalviolet)setelahpencuciandenganalkohol96%.Haliniberhubungandengankomposisisenyawapenyusundindingsel,yaitupadabakteriGrampositifmengandungpeptidoglikanlebihbanyakdaripadaGramnegatif(Prabaningtyas2003).BakteriGrampositifterlihatberwamaungukarenaasam-asamribonukleatpadasitoplasmasel-selGrampositifmembentukikatanlebihkuatdengankristalviolet.Namun,sel-selbakteriGramnegatifmempunyaikandunganlipidyanglebihtinggidanumumnyamudahlarutolehalkoholyangmemperbesarpori-poridindingsel.Dengandemikianpemucatanpadasel-selGramnegatiflebihcepat(Hadioetomo1985).

Tahap-tahappewarnaanGramadalahsebagaiberikut:mula-mulaobjekglassdibersihkandengankapasyangtelahdiberialkohol.Selanjutyadiberikode(label).Biakanbakteripadaagardiambilmenggunakanjarumosesterildandipindahkandibagiantengahobjekglassyangtelahditetesiakuadessteril,setelahitudiratakantipis-tipisagarbakteritersebuttidakmenumpuksehinggamudahdiamati.PreparatinidibiarkanmengeringdiudarakemudiandifiksasidiatasBunsenagarbakteritersebutbenar-benarmelekatpadaobjekglass,tetapiperludiingatbahwaprosesfiksasijanganterlalulamadanpanaskarenadapatmenyebabkanbakterirusak.Adapunprosespewarnaangramsebagaiberikut:

1.LarutangramA(kristalviolet)dandibiarkanselama1menit.Selanjutnyadibilasdenganakuades(airmengalir),selanjutnyadikeringanginkan.

2.PreparatiniditetesidenganlarutangramB(yodium)dandibiarkanselama1menitlaludibilasdenganakuades(airmengalir),selanjutnyadikeringanginkan.

3.Kemudianpreparatditetesilarutanpemucatwama,yaitualkohol95%selama30detik,selanjutnyadicucidenganlarutanakuades(airmengalir),selanjutnyadikeringanginkan.

4.YangterakhirditeteskandengangramD(safranin)selama2menit,laludibilasdenganakuades(airmengalir),selanjutnyadikeringanginkan.

Kemudiandiamatibentukselnyadenganmenggunakanmikroskopdenganperbesaran1000x.Sebelumnyapreparatditeteskandenganminyakimersi.BakteridinyatakanbersifatGrampositifapabilawarnaselnyaungudanGramnegatifapabilawamaselnyamerah.(iii)Pewarnaanspora(Hadioetomo1985).

b.Ujikatalase

Ujikatalasedilakukanuntukmengetahuiadatidaknyaenzimkatalasepadabakteri.Katalaseadalahenzimyangdapatmengkatalisasipenguraianhidrogenperoksida(H202)menjadiairdan02.Hidrogenperoksidabersifattoksikterhadapselkarenabahaninidapatmengaktifkanenzimdalamsel.Ujiinipentingdilakukanuntukmengetahuisifatbakteriterhadapkebutuhanakanoksigen(Lay1994).UjiinidilakukandengancaramengambilbiakanbakterilaluditaruhkeobjekglassyangtelahditetesiH2O2,jikaterjadigelembunggasmakaujikatalasepositif,sedangkanjikatidakterjadigelembungmakaujikatalasenegatif.

c.UjiOksidase

Ujioksidasedilakukanuntukmengetahuiadatidaknyaenzimoksidasepadabakteritersebut.Ujioksidaseberfungsiuntukmenentukanadanyacytochromeoksidaseyangditemukanpadabakteritertentu(Lay1994).Ujiinidilakukandengancaramengambilbiakanbakteridandigoreskanpadakertasoksidase,jikakertasoksidaseberubahwarnamenjadiwarnabiruatauungumakaujioksidasepositif,Hasilpositifmenunjukkanbahwaisolat-isolatbakteritersebutmampumenghasilkanenzimcytochromeoksidase,sehinggabakteritersebutmelakukanmetabolismeenergimelaluirespirasisedangkanapabilatidakterjadiperubahanwarnamakaujioksidasenegatif.

1)UjiMIO(MotilIndolOrnithine)

UjiMIOterdiridarimotiluntukmelihatpergerakanbakteri,indoluntukmengetahuiproduksiindoldaritrypthophanedanornithineuntukmengamatiperubahanwarnayangterjadidalammedia.UjiMIOdilakukandengancarabiakanbakteridiambilmenggunakanjarumoselurusdandiinkunbasiselama24-48jam,laludilihatperubahanyangterjadi.Apabilabiakanbakterimenyebardarigaristusukanmakamotilpositif,apabilaterjadiperubahanwarnamenjadiungutuamakaornithinepositif,danapabilaterjadicincinmerahsetelahdiberilarutankovaksmakaindolpostif.

2)UjiOF(OksidatifFermentatif)

UjiOFinidilakukanuntukmengetahuisifatoksidatifdanfermentatifsuatubakteriterhadapglukosa.UjiinidilakukandengancaramengambilbiakanbakterimenggunakanjarumoselurusdanditusukkansecaravertikalkedalamduatabungyangberisimediaOFdansalahsatudaritabungtersebutdiberiparafincair.AdapunpembacaanujiOFbisadilihatpadagambar.

3)UjiTSIA(TripleSugarIronAgar)

UjifermentasiguladanH2SmerupakanserangkaianujiyangdilakukandenganmenggunakanmediumTSIA(TripleSugarIronAgar).Tujuannyaadalahuntukmengetahuikemampuanbakteridalammemfermentasigulauntukmenghasilkanasamataugas.PadamediaTSIAmengandungtigamacamgula,yaituglukosa,laktosaatausukrosadanindikatormerahfenolsertaFeS04(Lay1994).Warnamerahpadaagarmenunjukkanreaksibasa,sedangkanwarnakuningmenunjukkanreaksiasam.Warnamerahpadapermukaanagardankuningdibagianbawahagarmenunjukkanterjadinyafermentasiglukosa.Warnakuningpadabagianpermukaandanbawahtabungmenunjukkanterjadinyafermentasilaktosadansukrosa(Fardiaz1989).

UjiTSIAinidilakukanuntukmelihatperubahanwarnayangterjadipadagoresanmiring(Slant)dantusukantegak(Butt)danmelihatreaksibakteriterhadapasamdanbasa,sertakemampuanbakterimanghasilkangasdanH2S.

apabilaterjadiperubahanwarnamerahpadagoresanmiringdantusukantegakmakabakteribersifatK/K(basa),sedangkanapabilaperubahanpadagoresanmiringmenjadiwarnakuningdanpadatusukantegakmenjadimakabakteribersifatA/K(Asam/Basa).Selainituapabilaterbentukwarnahitam,makabakterimenghasilkanH2Sdanapabilaadagas,makabakteridapatmenghasilkangas.

4)UjiArgininedihydrolisis

UjiArgininedihydrolisisdilakukandengancaramengambilbiakanbakteridenganmenggunakanjarumoselurus,laluditusukkansecaravertikalkemediaargininedandiinkubasiselama24jam.Jikaterjadiperubahanwarnadarikuningmenjadimerahmudaberartiujiargininepositif,sedangkanapabilatidakterjadiperubahanwarnamakaujiargininenegatif.

5)UjiMR-VP

Ujiinidilakukanuntukmengetahuimendeterminasibakteriyangmampumenghasilkanecethylcarbitol(acetion)darifermentasiglukosapadapengujianVogestProskauer(VP)danUntukmengetahuikemampuanbakterimenfermentasiglukosauntukmenghasilkanasampadapengujianMethylRed(MR).PembacaanMRdilakukandenganmenambahkanreagentMRsebanyak6tetes,apabilaterjadiperubahanwarnamenjadiwarnamerahmakahasilpembacaannyapositif,sedangkanapabilaterjadiperubahanwarnamenjadikuningmakahasilpembacaannyanegatif.SedangkanuntukpembacaanVPdilakukandenganmenambahkanreagentKOH40%dengandosis600latau0.6mldanA.Naphtoldengandosis200latau0.2ml.apabilaterjadiperubahanwarnamenjadimerah,makapembacaannyapositif.Sedangkanapabilaterjadiperubahanwarnamenjadikuning,makapembacaannyanegatif.

6)UjiNitrate

UjiinibertujuanuntukmengetahuikemampuanbakteriuntukmengubahNitratdanNitrit.JikaterjadiperubahanwarnamenjadimerahsetelahpenambahanSulfanicaciddanA-Napthylaminesebanyak5tetesmakaujinitratpositifdanapabilaperubahanwarnakuningmakahasilnyanegatif.

7)UjiKIA(KiglerIronAgar)

UjiKIAiniterdiridaridarigoresanmiring/slant(diaminase)dantusukantegak/butt(Decarboxylase),dilakukandengancaramengambilbiakanbakterimenggunakanjarumoselalugoreskankeslantdanditusukkankebutt,setelahitudiinkubasiselama24jam.Jikaterjadiperubahanpadaslantdanbuttdariwarnamerahmenjadikuning,berartidiaminasedandecarboxylasepositifataupembacaannyaA/A.JikaterjadiperubahanpadaslantdanbuttdarimerahmenjadimerahgelapmakadiaminasedandecarboxylasepositifataupembacaannyaK/K.Apabilapadamediaadanodahitam,berartibakteridapatmenghasilkanH2S.sedangkanapabilapadatabungterbentukgelembung,berartibakteridapatmenghasilkangas.

8)UjiSCA(SimonsCitrateAgar)

Prinsipnyauntukmendeterminasikemampuanbakterimenggunakanasamcitratsebagaisumberkarbonuntukmetabolisme.UjiSCAdilakukandengancaramengambilbiakanbakterimenggunakanjarumose,laludigoreskanpadamediaSCAdandiinkubasiselama24jam.Setelahdiinkubasi,diamatiperubahanwarnayangterjadi.JikaterjadiperubahanwarnadariwarnahijaumenjadiwarnabirumakaujiSCApositif,sedangkanapabilatidakterjadiperubahanwarna,makahasilnyanegatif.

9)UjiLIA(LysinIronAgar)

MediaLIAterdiridarigoresanmiring/slant(Diaminase)dantusukantegak/butt(Decarboxylase),dilakukandengancaramengambilbiakanbakterimenggunakanjarumoselalugoreskankeslantdanditusukkankebutt,setelahitudiinkubasiselama24jam.Jikaterjadiperubahanpadaslantmenjadiwarnamerahgelap,berartilysindiaminasepositif.Sedangkanpadabuttapabilamengalamiperubahanwarnaungutua,makalysindecarboxylasepositif.Apabilapadamediaadanodahitam,berartibakteridapatmenghasilkanH2S.Sedangkanapabilapadatabungterbentukgelembung,berartibakteridapatmenghasilkangas.

TUBE

1

2

3

4*

Deaminationoflysin

(darkredslant)

-

+

-

-

Decarboxylationoflysin

(anaerobicalkalinerx.)

-

-

+

+

10)UjiUrease

Ujiureaseinibertujuanuntukmengetahuikemampuanbakterimenghasilkanenzimurease.Ujiinidilakukandengancaramengambilbiakandiinkubasiselama24jam.Jikaterjadiperubahanwarnadarikuningmenjadimerahmuda,makaujiureasepositifdanapabilatidakterjadiperubahanwarnamakaujiureasenegatif.

11)UjiSukrosa,D-Xylose,Laktose,glukosa, Maltosa,Rhamnosa,Trehalose,D-Mannitol,L-Arabinose,Dextrose,Dulcitol,Tryptose,DL-Phenylanine,Sorbitol,Inositol,inulin,esculindanRaffinose

Ujigula-gulainidilakukanuntukmengetahuikemampuanbakterimelakukanfermentasikarbohidrat.Ujiinidilakukandengancaramengambilbiakanbakteridenganjarumoselaludimasukkankemediagula-guladandiinkubasiselama24jam.Jikaterjadiperubahanwarnamakahasilnyapositifdanjikatidakterjadiperubahanwarnamakahasilnyanegatif.

12)UjiNovobiocin

UjiNovobiocinbertujuanuntukmelihatsensitivitasbakteriterhadapnovobiocinatautingkatkerentananbakteriterhadapsuatuzatmikrobasepertiantibiotik.Ujiinidilakukandengancaramengambilbiakanbakteridandigoreskankemediadandiberinovobiocindandiinkubasiselama24jam.Setelahitudilakukanpengamatan,apabilabakterimenghindarinovobiocinmakahasilnyapositifdansebaliknyaapabilabakteritidakmenghindarinovobiocinmakahasilnyanegatif.

7.IdentifikasiBakteri

identifikasimikrobabergunauntukmempelajarisecaradetailkarakterfisik,kimiawi,danbiologismikrobasehinggadapatdiketahuidandimanfaatkansecaraoptimal.

Identifikasibakteridilakukandenganmelihatperubahanujibiokimiayangtelahdiinkubasiselama24-48jam.Hasilujibiokimiadanpewarnaangramditulisdalamblankopengujiandanselanjutnyadiidentifikasisecaramanualdenganbantuanbukuacuansebagaiberikut:

1.BacteriafromFishandOtherAquaticAnimals1(Buller,2004)

2.BacterialFishPathogens-DiseaseofFarmedandWildFish(Springer,2007)

3.Manualfortheidentificationofmedicalbacteria(CowanAndSteel's,1993)

AdapunsalahsatubakteriyangteridentifikasiselamamelaksanakanPraktikKerjaLapangdiBBKIPMadalahVibriosp.

BakteriVibriosp.adalahjenisbakteriyangdapathiduppadasalinitasyangrelatiftinggi.MenurutRheinheiner(1985)cit.Herawati(1996),sebagianbesarbakteriberpendarbersifathalofilyangtumbuhoptimalpadaairlautbersalinitas20-40.BakteriVibrioberpendartermasukbakterianaerobicfakultatif,yaitudapathidupbaikdenganatautanpaoksigen.BakteriVibriotumbuhpadapH4-9dantumbuhoptimalpadapH6,5-8,5ataukondisialkalidenganpH9,0(Baumannetal.,1984cit.Herawati,1996).Darihasilpengamatandimikroskop,terlihatbakterivibriospdenganbentukbatangkomaberjenisgramnegatif(R-).

Tabel.HasilUjiBiokimiadariBakteriVibriosp.yangmenginfeksiinsangkepitingbakau(Buller,2004)

Ujibiokimia

Hasil

Ujibiokimia

Hasil

Ujibiokimia

Hasil

Katalase

+

Novobiocin

+

DMannitol

-

Oxidase

+

MR/VP

-/-

DLPhenil

-

Motility

+

Trehalose

-

Sorbitol

-

Indol

-

LArabinose

-

Inositol

-

Ornithin

-

Glukosa/gas

-/-

Raffinose

-

OF

F

Sukrosa

-

Malonate

-

TSIA

A/A

DXylose

-

SCA

-

LIA

-/-

Lactose

-

KIA

+/+

Arginine

+

Maltose

-

Urease

-

Nitrate

+

Rhamnose

-

Dextrose

-

a.Vibrioparahaemolyticus

Bakteriiniditemukanpadasampeldengankodeisolate1(kepitingbakau).Organyangdiisolasiadalahinsang,ditemukanbakteriVibrioparahaemolyticus,jenisbakterigramnegativeberbentukbatangkoma,dankoloniberwarnahijaupadamediatumbuhTCBS.

Tabel.HasilUjiBiokimiadariBakteriVibrioparahaemolyticusyangmenginfeksiinsangkepitingbakau(Buller,2004danG.IBarrow,1993)

Ujibiokimia

Hasil

Ujibiokimia

Hasil

Ujibiokimia

Hasil

Katalase

+

Novobiocin

+

DMannitol

-

Oxidase

+

MR/VP

+/-

DLPhenil

-

Motility

+

Trehalose

+

Sorbitol

-

Indol

+

LArabinose

-

Inositol

-

Ornithin

+

Glukosa/gas

-/-

Raffinose

-

OF

F

Sukrosa

-

Malonate

-

TSIA

A/A

DXylose

-

SCA

-

LIA

-/-

Lactose

-

KIA

-/-

Arginine

-

Maltose

-

Urease

-

Nitrate

+

Rhamnose

-

Dextrose

-

b.Vibrioalginolyticus

Bakteriiniditemukanpadasampeldengankodeisolate7(kepitingbakau).Organyangdiisolasiadalahinsang,ditemukanbakteriV.alginolyticus,jenisbakterigramnegativeberbentukbatangkoma,dankoloniberwarnahijaupadamediatumbuhTCBS.

Tabel.HasilUjiBiokimiadariBakteriV.alginolyticusyangmenginfeksiinsangkepitingbakau(Buller,2004danG.IBarrow,1993)

Ujibiokimia

Hasil

Ujibiokimia

Hasil

Ujibiokimia

Hasil

Katalase

+

Novobiocin

+

DMannitol

+

Oxidase

+

MR/VP

-/+

DLPhenil

-

Motility

+

Trehalose

+

Sorbitol

-

Indol

+

LArabinose

-

Inositol

-

Ornithin

+

Glukosa/gas

-/-

Raffinose

-

OF

F

Sukrosa

+

Malonate

+

TSIA

A/A

DXylose

-

SCA

-

LIA

-/+

Lactose

-

KIA

-

Arginine

-

Maltose

-

Urease

-

Nitrate

+

Rhamnose

-

Dextrose

-

8.FaktorPenyebabKesalahanIdentifikasiBakteri

PadakegiatanIdentifikasibakteriadabeberapafaktoryangperludiperhatikanyaitusebagaiberikut:

a.MekanismeIdentifikisi

Pastikanmenggunakankulturmurni

Bekerjadarikategori/sifatyangumummenujuyangspesifik

Gunakansemuainformasiyangadauntukmempersempitkemungkinan

Gunakancommonsensepadasetiaplangkah

Gunakankarakter(test)minimaluntukidentifikasi

Gunakanbakterireferenuntukmemastikanbahwakondisiujidilabvalid.

b.Identifikasi

Identifikasibakterisecarateoriadalahmembandingkanbakteriyangbelumdiketahuidenganbakteriyangsudahdiketahuiidentitasnya.

Sehinggabakteriyangbelumdiketahuidapatdiidentifikasidenganbenar.

c.KulturMurni

Bakteriyangdiidentifikasiharusbenar-benarberasaldarikulturmurni

Isolatbakteriyangdidapatdarimediumspesifik,sebaiknyadihindariuntukidentifikasikecualitelahdikulturpadamediumumum.Sebabbakteriyangtidaksepesifikmungkintumbuhlambatdimediumspesifik,sehinggakemungkinanakanterbawasaatdipindahkemediumlain

d.MediumSesuaiDenganPetunjuk

Pastikanmediumyangdigunakanbelumhabisumurteknisnya(expired)

pHmediumsesuaidenganpetunjukyangdikeluarkanolehprodusen

Carapembuatandansterilisasisesuaidenganpetunjukyangdikeluarkanolehprodusen

Inkubasipadasuhudanwaktuyangsesuai

KarakterYangDiujiMencukupi

Kurangnyakarakteryangdiujiseringmenimbulkankesulitandanketidaktepatandalamidentifikasibakteri

Jumlahkarakteryangdiujisebaiknyamengacupadabukupedomanyangdiacu(misalAustin&Austin,2007;Buller,2004dsb)