xilanaza.doc
DESCRIPTION
enzimeTRANSCRIPT
Testarea unor Amestecuri Enzimatice utilizate la Ameliorarea Făinurilor din grâu,
R. TAMBA-BEREHOIU, N. C. POPA, S. POPESCU, D. BALAN, A. IANCU
Faculty of Biotechnology, Bd. Marasti No. 59, 71331, Bucharest, Romania
Abstract
Ameliorarea făinurilor din grâu este strict necesară pentru îmbunătăţirea proprietăţilor
tehnologice ale acestora. Experimentul a constat în ameliorarea unui eşantion de făină tip
650, în 6 variante, cu un amestec de 5 enzime, anume: două hemicelulaze, amilază, lipază
şi glucoxidază. De menţionat că una dintre hemicelulaze avea activitate predominant
xilanazică. În urma efectuării probei de coacere, s-au evaluat volumul, porozitatea şi
elasticitatea pâinii obţinute la cele 6 variante. S-a constatat că cele mai bune rezultate (în
special creşterea volumului pâinii) s-au evidenţiat la variantele la care aportul de acid
ascorbic şi glucozidază a fost redus, iar xilanaza şi hemicelulaza s-au introdus în cantităţi
echilibrate. Cel mai bun raport cantitativ xilanază/hemicelulază, a avut valoarea 0,73.
Retestarea variantei optime de ameliorare ca atare, pe un eşantion de făină de altă
provenienţă, a confirmat rezultatele bune obţinute, comparativ cu martorul. Îndepărtarea
totală a xilanazei din reţeta de ameliorare a provocat o uşoară scădere a volumului şi
porozităţii pâinii, dar parametri de calitate au fost superiori comparativ cu martorul.
Keywords: improvment, wheat flours, enzymes, parametri de calitate, volum, porozitate,
elasticitate, baking test etc
1
Introduction
Potenţialul tehnologic al făinurilor obţinute din grâne româneşti necesită o serie
de îmbunătăţiri, prin adăugare de amelioratori. Amelioratorii utilizaţi în panificaţie sunt
diverşi, putând fi de natură enzimatică sau nonenzimatică. Adaosul de enzime la făină are
în vedere: creşterea volumului pâinii (α-amilaze, lipaze, hemicelulaze, proteaze),
îmbunătăţirea structurii miezului (hemicelulaze, proteaze, lipaze, α-amilaze), prelungirea
termenului de garanţie al produselor (-amilaze, hemicelulaze), precum şi ameliorarea
aromei, respectiv a culorii cojii (-amilaze, proteaze, lipoxigenaze, lipaze,
glucozoxidaze, hemicelulaze).
Utilizarea preparatelor hemicelulazice, care au făcut obiectul testelor noastre, în
special, determină: creşterea capacităţii de frământare a aluatului, îmbunătăţirea
comportamentului la coacere, creşterea volumului, a stabilităţii produsului, îmbunătăţirea
texturii miezului şi diminuează viteza de învechire a pâinii.
Acidul ascorbic (utilizat de asemenea, în reţeta de ameliorare testată), în prezenţa
enzimei ascorbat oxidază şi a oxigenului, oxidează grupările tiolice ale proteinelor, cu
efecte asupra creşterii rezistenţei şi extensibilităţii glutenului din aluat. Reglarea cantităţii
de oxigen disponibilă pentru acidul ascorbic se face prin adaos de glucozoxidază. În plus,
datorită producerii apei oxigenate, glucozoxidaza poate avea un efect independent de cel
al acidului ascorbic în ceea ce priveşte creşterea rezistenţei şi elasticităţii proteinelor
glutenice. În general, reţetele de ameliorare utilizate, combină efectele activităţilor
hemicelulazice cu cele ale acidului ascorbic şi glucozoxidazei.
Acest studiu şi-a propus:
2
1. să optimizeze calităţile de panificaţie ale unor mostre de făină, folosind amestecuri
enzimatice (amilază, lipază, glucozoxidază, diverse tipuri de hemicelulază), pentru a
demonstra că acestea pot înlocui cu succes alte tipuri de amelioratori nonenzimatici;
2. să determine valorile cantităţilor optime ale enzimelor adăugate, respectiv unele
tipuri de hemicelulază, care să conducă la obţinerea unui produs de calitate;
3. să determine raportul optim dintre două tipuri de hemicelulază, utilizate
concomitent la ameliorare;
4. să verifice efectul variantelor de ameliorare considerate optime, pe făinuri similare
ca grad de extracţie, dar provenind din diferite surse.
Cea mai sensibilă modalitate de evaluare, a efectului ameliorării enzimatice
asupra calităţilor de panificaţie ale făinii, a fost considerată proba de coacere, utilizată în
lucrarea de faţă.
Materials and Methods
Experimentul a constat în compararea comportamentului tehnologic al unor
făinuri neameliorate (martor) cu cel al unor făinuri diferit ameliorate cu enzime şi acid
ascorbic, prin evaluarea parametrilor de calitate ai pâinii obţinute. Rezultatele probelor de
coacere au fost corelate calitativ şi cantitativ cu amelioratorii utilizaţi.
Experimentul a fost condus în două etape. În prima etapă, s-a utilizat ca martor,
o făină comercială tip 650 provenită de la S.C. Moara Loulis S.A. Această făină a fost
ameliorată cu 5 preparate enzimatice diferite şi acid ascorbic. Preparatele enzimatice
utilizate au fost obţinute de la firma DSM Bakery Ingredients, denumirea comercială şi
rolul lor fiind prezentate în tabelul 1. Acidul ascorbic a fost obţinut de la Roche Vitamins
Limited.
3
Tabelul 1. Preparatele enzimatice utilizate
Denumirea comercială Enzima
Bakezyme BXP 5000 Hemicelulază bacteriană (xilanază)
Bakezyme HSP 6000 Hemicelulază fungică
Bakezyme GO 1500 Glucozoxidază fungică
Bakezyme P 180 α – Amilază fungică
Bakezyme PH 800 Lipaze şi fosfolipaze fungice
În tabelul 2 sunt prezentate cantităţile de preparate enzimatice şi acid ascorbic
utilizate pentru ameliorarea în şase variante a făinii martor, tip 650. Se observă că nivelul
amilazelor (Bakezyme P 180) şi al lipazelor (Bakezyme PH 800) din formulele de
ameliorare a fost acelaşi la toate variantele, astfel încât să poată fi evidenţiat în special,
efectul celor două preparate hemicelulazice diferite (Bakezyme BXP 5000 şi Bakezyme
HSP 6000). Menţionăm că nivelele cantităţilor de enzime utilizate ca adaosuri la făină (în
ppm), s-au înscris între limitele recomandate de firma producătoare.
Tabelul 2. Variantele de ameliorare
Varianta I II III IV V VI
Bakezyme BXP 5000 (ppm) 0 25 100 55 35 35
Bakezyme HSP 6000 (ppm) 0 80 0 40 55 75
Bakezyme GO 1500 (ppm) 45 80 45 45 45 45
Bakezyme P 180 (ppm) 20 20 20 20 20 20
Bakezyme PH 800 (ppm) 25 25 25 25 25 25
4
Acid ascorbic (ppm) 50 70 50 50 50 50
The enzymes where added to the baking formula during the mixing stage. Pentru
obţinerea pâinii a fost folosită metoda descrisă de standardul românesc în vigoare.
Rezultatele probei de coacere au fost interpretate în funcţie de aspectul organoleptic al
produsului finit şi pe baza metodelor de analiză descrise de standardul românesc pentru
pâine, produse de franzelărie şi specialităţi de panificaţie. Au fost evaluate în consecinţă:
volumul, porozitatea şi elasticitatea pâinii. Pentru determinarea volumului pâinii a fost
folosit aparatul tip Fornet şi metoda prezentată în acelaşi standard.
În a doua etapă, variantele de ameliorare, ca atare şi modificate, la care s-au
înregistrat cele mai bune probe de coacere, au fost retestate pe un acelaşi tip de făină 650,
provenind de la alt furnizor, anume S.C. Boromir S.A. S-au executat din nou probele de
coacere pentru aceste ultime variante.
Results and Discussion
Rezultatele obţinute în urma probelor de coacere ale pâinii, provenite din făina
martor, precum şi din făina ameliorată în cele şase variante, sunt sintetizate în tabelul 3.
Tabelul 3. Parametri de calitate ai pâinii rezultată în urma probei de coacere
Varianta Volum
(cm3/100g)
Porozitate
(%)
Elasticitate
(%)
Observaţii
Martor 500 83.6 96 aluat ferm
I 485 83.4 96 aluat lipicios
II 490 84 96 aluat ferm
III 495 83.8 95 aluat uşor lipicios
5
IV 550 84.4 96 aluat uşor lipicios
V 520 83.4 95 aluat uşor lipicios, neted
VI 522 83.7 96 aluat uşor lipicios, neted
Figure 1. Variaţia volumului la pâinea obţinută în urma aplicării
tratamentelor de ameliorare
Se observă că cele mai bune rezultate privind parametrul volum au fost
înregistrate în cazul variantei IV, aceasta prezentând o creştere a volumului de 10 % faţă
de martor. Ameliorări semnificative ale acestui parametru au fost remarcate şi în cazul
variantelor V (4 %) respectiv VI (4.5 %). În cazul celorlalte variante, se observă
micşorarea volumului pâinii comparativ cu făina martor, cu 3 % pentru varianta I, cu 2 %
pentru varianta II şi cu 1 % pentru varianta III. La varianta I nu s-au folosit nici unul din
preparatele hemicelulazice. La varianta II, s-a utilizat o cantitate mare de hemicelulază
(80 ppm), în detrimentul xilanazei, iar la varianta III s-a folosit numai preparatul
xilanazic (100 ppm) şi de loc hemicelulaza Bakezyme HSP 6000. Se observă că folosirea
excesivă a uneia din cele două tipuri de enzime hemicelulazice în formula de ameliorare,
afectează parametri de calitate ai pâinii, fiind recomandabilă combinarea acestora în
proporţii echilibrate, evidenţiate la variantele IV, V şi VI.
În cazul variantei II, creşterea cantităţii de acid ascorbic şi a glucozoxidazei, a
determinat o diminuare a parametrului volum faţă de martor. Acest efect poate fi pus pe
seama unei oxidări suplimentare a grupărilor tiolice din aluat, urmată de creşterea
rezistenţei aluatului.
6
Cea mai importantă creştere a porozităţii pâinii a fost înregistrată tot în cazul
variantei IV (Figure 2).
Figure 2. Variaţia porozităţii la pâinea obţinută în urma aplicării
tratamentelor de ameliorare
În ceea ce priveşte parametrul elasticitate, diferenţele între variante sunt mici,
variantele III şi V prezentând totuşi o uşoară diminuare faţă de martor. (Figure 3).
Figure 3. Variaţia elasticităţii la pâinea obţinută în urma aplicării
tratamentelor de ameliorare
Cele mai bune rezultate la probele de coacere au fost obţinute folosind
combinaţiile IV, V şi VI, caracterizate de anumite raporturi între cantităţile de
hemicelulază (Bakezyme HSP 6000) şi xilanază (Bakezyme BXP 5000) din făină, pe
fondul păstrării la acelaşi nivel a concentraţiei de acid ascorbic, α – amilază,
glucozoxidază şi lipaze.
7
Raportul cantitativ hemicelulază/xilanază din formula de ameliorare, influenţează
decisiv caracteristicile de calitate ale produsului finit, cel puţin sub aspectul volumului şi
al porozităţii. În figura 4 se observă că valoarea celor doi parametri de calitate este mare
în cazul unei valori a raportului de 0.73 (varianta IV). Pe măsură ce creşte cantitatea de
hemicelulază adăugată, volumul şi porozitatea scad până la o valoare a raportului de 1,57
(varianta V). Dincolo de această valoare, volumul pâinii rămâne relativ constant până la
raportul de 2.14 (varianta VI), după care continuă să scadă până la 3.25 (varianta II). În
ceea ce priveşte porozitatea, aceasta a scăzut între 0.73 şi 1.57 (de la varianta IV la V),
după care a crescut pe măsura creşterii raportului hemicelulază/xilanază (variantele VI şi
II).
Figure 4. Influenţa raportului dintre hemicelulază şi xilanază
asupra calităţii pâinii
Varianta IV considerată cea mai bună, a fost retestată ca atare, pe alt eşantion de
făină tip 650, provenit din altă sursă. De asemenea, a fost testată şi varianta VI, în cazul
căreia s-a renunţat la preparatul Bakezyme BXP 5000, respectiv xilanază. Rezultatele
obţinute sunt prezentate în tabelul 4, figura 5.
Tabelul 4. Parametri de calitate ai pâinii, obţinuţi în urma retestării
8
variantelor IV şi VI* (modificată), pe alt eşantion de făină
Varianta Aspectul
aluatului
Volum
(cm3/100g)
Porozitate
(%)
Elastici-
tate (%)
Aspectul
pâinii
M uşor lipicios,
strâns 573 87.1 95
coajă aurie,
uşor palidă,
mată
IV extensibil,
consistent,
nelipicios
590 88 95
gust şi culoare
foarte bună
VI* (* fără
xilanază)
uşor lipicios
580 86.1 95
gust şi culoare
foarte bună
9
Figure 5. Parametri de calitate ai pâinii, obţinuţi în urma
retestării ameliorării pe alt eşantion de făină
Lipsa xilanazei din combinaţia de enzime la varianta VI* a provocat o uşoară
scădere a volumului şi porozităţii produsului finit, comparativ cu varianta în care aceasta
este prezentă (IV). Cu toate acestea, parametri de calitate ai pâinii ameliorate în varianta
VI*, au fost superiori parametrilor de calitate ai pâinii obţinute din făina martor, tip 650,
chiar şi în absenţa xilanazei. Nu s-au constatat variaţii semnificative pentru parametrul
elasticitate, în nici unul din cazurile examinate.
Conclusions
1. Cele mai bune rezultate în privinţa creşterii volumului pâinii au fost înregistrate în
cazul variantelor (IV, V şi VI) care au utilizat proporţii cantitative echilibrate ale
enzimelor Bakezyme BXP 5000 (xilanază) şi respectiv Bakezyme HSP 6000
(hemicelulază), în condiţiile menţinerii constante ale concentraţiilor α-amilazice,
glucozoxidazice, lipazice şi acidului ascorbic.
10
2. Raportul hemicelulază/xilanază are o influenţă majoră asupra caracteristicilor de volum
şi textură (porozitate) ale produsului finit.
3. Cel mai eficient raport de ameliorare, hemicelulază/xilanază a avut în cazul nostru
valoarea de 0.73 (varianta IV)
4. Influenţa determinantă a acestei combinaţiei hemicelulază - xilanază s-a păstrat şi în
cazul retestării pe un alt eşantion de făină.
5. Lipsa xilanazei din combinaţie (varianta VI*) nu a influenţat semnificativ valoarea
parametrului elasticitate, dar a afectat calitatea produsului finit în ceea ce priveşte
volumul şi porozitatea, în raport cu varianta de ameliorare completă.
6. Utilizarea formulelor de ameliorare cu xilanaze şi hemicelulaze a determinat
modificări ale caracteristicilor vâscoelastice ale aluaturilor, evidente în creşterea
lipiciozităţii acestora (variantele I, III, IV, V şi VI). Creşterea cantităţii de acid ascorbic şi
glucoxidază a determinar scăderea lipiciozităţii (varianta II).
7. Creşterea cantităţii de acid ascorbic şi glucoxidază (varianta II) a determinat o
înrăutăţire a caracteristicilor de porozitate şi volum, în raport cu alte variante la care cei
doi amelioratori s-au introdus în cantităţi mai mici.
References
1. Every, D., Gilpin, M., Larsen, N.G., 1996, Ascorbate Oxidase levels in Wheat and
their Relationship to Baking Quality, Journal of Cereal Science, 23, p. 145-151.
2. Hamer, R. J., 1991, Enzymes in the Baking Industry in Enzymes in Food Processing
3. Linko, Yu-Yen, Javanainen, Paivi, Linko, Susan, 1997, Biotechnology of bread
baking, Trends in Food Science & Technology, vol. 8, p. 339 – 344.
11
4. Maarten van Oort, Flip van Straaten, Colja Laane, 1995, Pentosans and Pentosanases
in the Baking Industry, Food Ingredients, 2, martie/aprilie.
Si, Joan Qi, 1999, Synergistic Effect of Enzymes for Breadbaking, published in the
Encyclopedia of Bioprocess Technology.
6. Tamba-Berehoiu R., Muşat R., 2001, Biotehnologia în alimentaţie. Enzime.
Toxicologie biotehnologică, Ed. Agora, Călăraşi.
7. STAS 985-79 Baking yeast
8. STAS 91-83 Bread, bakery goods and baking specialties. Analysis methods
12