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Alexandre WakatsukiDr Stéphane FROUEL
Aurélie MANCEAUDr Clarisse TECHER
Frederic JOZWIAK
Novembro 2017, Brasil
USO DE FITOGÊNICOS PARA AUMENTAR A RESITÊNCIA DE ESPÉCIES AQUÁTICAS
CONTRA AGENTES PATOGÊNICOS
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Tendências da aquiculturaImplicações
Custos econômicos e sociais das doenças;
Antibióticos usados intensamente
AUMENTO DE INTENSIFICAÇÃO
SURTO DE DOENÇAS E
EMERGÊNCIAS
DIVERSIFICAÇÃO DAS ESPÉCIES
AUMENTO DO RISCO DE
INTRODUÇÃO E DISSEMINAÇÃO DE
AGENTES PATOGÊNICOS
DIVERSIFICAÇÃO DOS SISTEMAS DE
PRODUÇÃO
POTENCIAL DE PROPAGAÇÃO DE
AGENTES PATOGÊNICOS
PARA ÁREAS MAIS VASTAS
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Abordagem
Manter a saúde ótima para espécies aquáticas de acordo com o status do intestino
Controla a pressão de patógenos
Economiza energia para a imunidade
Ajuda a superar
infecções
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Apresentação do Produto
IngredientesComponentes
ativos
Principais ativosderivados de substânciassulfuradas
Propriedades
Efeitos:- Bactericida- Vírucida
Extratosde plantas
Substâncias sulfuradas rompem as ligações de enxofre das proteínas
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Modo de ação
Desnaturação das proteínas microbianas
Inibição das funções celulares:
Enzimas respiratórias
DNA giraseRNA polimerase
Ribossomos
Inibição da expressão
gênica
Interrupção do
metabolismo energético
Interrupção da síntese proteica
Morte do agente
microbiano
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Instruções de uso
Pode ser incorporado na ração ou pode usar como top coat na ração
Condições pouco desafiadoras: 1 – 2 kg/T incorporada na raçãoCondições mais desafiadoras: 4 – 5 kg/T top coat
Microbiota benéfica Agente nocivo
1-2 kg/tCONTÍNUO
2 kg/tCONTÍNUO
4-5 kg/tMIN 2 SEMANAS
5 kg/tMIN 3 SEMANAS
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Testes in vitro
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Testes in vitro
Avaliação da concentração inibitória mínima (ppm)de A-Live & Antibióticos vs patógenos aquáticos
Cepa do patógeno
10e6 ufc/ml
Ativos testados
1000 ppm
Exemplo:O ativo A inibe o patógeno a 250 ppm enquanto o ativo L inibe o patógeno a 64 ppm. A eficiência do ativo A (CIM 250) < Eficiência do ativo L (CIM 64)
A
500 ppm
250 ppm
125 ppm
64 ppm
32 ppm
16 ppm
8 ppm
B C D E F G H I J K L
[...]
Ponto em que o crescimento é inibido
= Concentração Inibitória Mínima (CIM)
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Testes in vitro
CIM (Concentração Inibitória Mínima, em ppm) do ativos do A-LIVE em comparação com outros produtos antibacterianos comerciais
Concorrente#1
Concorrente#2
Concorrente#3
Concorrente#4
Concorrente#5
Aeromonas salmonicida 64 250 250 250 >25000 >8000
Edwardsiella tarda 125 1000 500 250 >25000 >8000
Photobacterium damsela 32 500 1000 125 >25000 >10000
Streptococcus iniae 125 500 1000 64 >25000 >10000
Tenacibaculum maritimum 16 64 64 32 / /
Tenacibaculum discolor 16 64 125 64 / /
Vibrio harveyi 64 1000 1000 250 >25000 >10000
Vibrio alginolyticus 125 1000 2000 250 >25000 >10000
Vibrio anguillarum <16 500 1000 64 >25000 >10000
Yersinia ruckeri 125 1000 500 250 >25000 >8000
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Vibrio spp.
Streptococcus spp.
Aeromonas spp.
319
50
25
413
319
9
300
9 75
Testes in vitro
Resposta semelhante ao Antibiótico em condições de laboratório
CIM (ppm) dos fitobióticos & Antibióticos vs Patógenos aquáticos
V. anguillarum
A-Live OTC ERY ENR
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Resultados de Microscopia
A microscopia eletrônica de varredura demonstra ação inibitória direta do A-Live nas células do patógeno Francisella spp
Pictures Copyrights © UEL
Testes In vitro
A-LiveControle
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Aplicações preventivas
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Teste #1: Robalo D. labrax vs Photobacterium (SPAROS, Portugal)
Teste #2: Tilapia O. niloticus vs Streptococcus (ICTYOPHARMA, France)
Teste #3: Tilapia O. niloticus vs Francissella (UEL, Brazil)
Teste #4: Camarão branco P. vannamei vs Vibrio parahaemolyticus st. EMS (PSU, Thailand)
Teste #5: Camarão branco P. vannamei vs WSSv (PSU, Thailand)
Aplicações preventivas
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Aplicações preventivas
Dose de aplicação: 2 kg/t da ração em uso contínuo
Período de aclimatação
Período de alimentaçãoexperimental
Período de desafio
Ração comercial Ração Experimental
4 semanas 3 semanas 3 semanas
Inoculação do patógeno
Período de aclimatação
Período de alimentaçãoexperimental
Período de desafio
Ração comercial Ração Experimental
1 semana 4 semanas 3 semanas
Período de aclimatação
Período de alimentaçãoexperimental
Período de desafio
Ração comercial Ração Experimental
1 semana 3 semanas 2 semanas
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1229
1633
30
3048
28
8782
Mo
rta
lida
de
fin
al (
%)
A-Live ControlControle
Efeito em mortalidade
Dose de aplicação: 2 kg/t de ração em uso contínuo
A-Live
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% relativa vs CTRL Peso final FCA
Robalo vs Photobacterium +6.5% +8.3%
Tilapia vs Streptococcus +9.2% 0%
Tilapia vs Francissella +57.5% -57.3%
Camarão vs Vibrio parahaemolyticus +0.6% -9.5%
Efeito na performance de crescimentoexpressa em % relativa vs controle
Dose de aplicação: 2 kg/t de ração em uso contínuo
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Aplicações Curativas
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Aplicações curativas
Dose de aplicação: 4-5 kg/t de ração por 35 dias
Primeiros sintomas da doença
Ração comercial Ração Experimental Ração Comercial
35 dias
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Efeito na resitência a doença(teste de campo em fazenda de camarão – 2017 – Vietnã)
Sistema: intensivo (> 70 pL/m²)Tamanho: 2 tanques;Duração: 145 diasPesos: pL12 - 20 gLotes: mesmo viveiroDesafio: Vibrio sp
GRUPO CONTROLE GRUPO TRATAMENTO
RAÇÃORAÇÃO + A-LIVE
4 kg/t – 35 diasA B
Vietnã
Camarão branco - Penaeus vannamei
Taxa de sobrevivência, Biomassa, Retorno de investimento, FCA
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Resultados Zootécnicos(teste de campo em fazenda de camarão – 2017 – Vietnã)
• ↗ Sobrevivência: + 71 %• ↗ Biomassa (kg): 4800 vs 28• ↘ FCA: 1,3 vs 5.8
O A-Live fornece maior resistência a doenças e melhor recuperação
10,0%
81,5%
0%
10%
20%
30%
40%
50%
60%
70%
80%
90%
100%
Mo
rta
lida
de
cu
mu
lati
va (
%)
Dias de cultivo
Control (%) MiX-Alive (%)
Aplicação (35 dias)
Controle (%)
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Resultados Econômicos(teste de campo em fazenda de camarão – 2017 – Vietnã)
>3 $
ROI in trial conditions
1 $
O A-Live promove uma receita positiva durante a ocorrência de umadoença
1581
2101
-523
27373
9380
17989
-5000 0 5000 10000 15000 20000 25000 30000
Shrimp revenues
Shrimp feed cost
Benefit
USD
MiX-Alive Control
Benefício-523
Custo alimentação
Receita
Controle
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Mecanismos de Ação
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0
5
10
15
20
25
30
Ctrl Alive 1 kg/t
19
28
Ati
vid
ad
e B
ac
teri
cid
a %
O A-Live ativa a máquina imune do organismo.Isso ajuda os peixes a controlar a pressão patogênica
Ativação do sistema imunológico antimicrobiano no sangue do Robalo
*ANOVA P < 0,05
**
0
200
400
600
800
1000
Ctrl Alive 1 kg/t
615
855
Un
ida
de
Re
lati
va d
e
Lu
min
esc
ên
cia
0
0,5
1
1,5
2
2,5
3
3,5
Ctrl Alive 1 kg/t
2,8
3,5
Lis
ozi
ma
(µ
g/m
l)
A-Live A-Live A-Live
Efeito antimicrobiano
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Impacto nos parâmetros sanguíneos do Robalo
O A-Live não induz alterações no sangue, indicando que o metabolismo do hospedeiro não é alterado pelo produto
Haematocrit
Haemogobin
Mean CorpuscularHaemoglobin
Mean CorpuscularHaemoglobin
Concentration
Red Blood Cells
White Blood Cells
Ctrl A-Live 1 kg/t
Efeito no hospedeiro
A-Live
Glóbulos vermelhos
Glóbulos brancos Hemoglobina
Hemoglobina corpuscularmédia
Concentração de hemoglobina corpuscular
média
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Peixe infectado – A-LiveFígado com hepatócitos cheios
Resultados de histopatologia hepática
Peixe infectado - ControleFígado com hepatócitos vazios
Pictures Copyrights © UEL
O A-Live mantém o status ótimo das células do fígado
Efeitos no hospedeiro
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CONCLUSÃO
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Diminui os custos de produção
Aumenta o rendimento
Principais benefícios: efeitos em cascata
Melhora a
sobrevivência
global
Otimiza as condições
sanitárias
Controla microrganismos patogênicos,
Retarda a infestação de parasitas
PRODUTOR
PROPRIEDADE
ANIMAL
TGI
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OBRIGADO
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