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UNIVERSIDAD PRIVADA ANTENOR ORREGO
FACULTAD DE MEDICINA HUMANA
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA
TESIS PARA OPTAR EL TÍTULO PROFESIONAL DE MÉDICO CIRUJANO
SEGURIDAD DE LA DOSIS DEL LATÉX DE Synadenium grantii
(EUPHORBIACEAE) EN EL TRATAMIENTO DE LESIONES GÁSTRICAS
INDUCIDAS A Rattus norvegicus var. albinus.
AUTOR: RODRÍGUEZ CARBONELL, JUAN AARÓN
ASESOR: CÁCERES ANDONAIRE, ELENA ADELA
TRUJILLO – PERÚ
2020
ii
iii
UNIVERSIDAD PRIVADA ANTENOR ORREGO
FACULTAD DE MEDICINA HUMANA
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA
TESIS PARA OPTAR EL TÍTULO PROFESIONAL DE MÉDICO CIRUJANO
SEGURIDAD DE LA DOSIS DEL LATÉX DE Synadenium grantii
(EUPHORBIACEAE) EN EL TRATAMIENTO DE LESIONES GÁSTRICAS
INDUCIDAS A Rattus norvegicus var. albinus.
AUTOR: RODRIGUEZ CARBONELL, JUAN AARÓN
ASESOR: CÁCERES ANDONAIRE, ELENA ADELA
TRUJILLO – PERÚ
2020
iv
DEDICATORIA
A Dios, por ser mi protector y principal
guía en cada uno de mis sueños, por su
amor incondicional durante mi vida.
A mis padres, por todo el esfuerzo,
valores y enseñanzas cimentadas.
Gracias por enseñarme que lo más
importante siempre es ayudar a los
demás, por todo su apoyo, cariño y
amor.
Juan Aarón
v
AGRADECIMIENTO
Agradezco a mi asesora la Dra. Elena
Cáceres Andonaire por aceptar guiarme
desde el inicio en este proyecto, por
aclarar siempre mis dudas; y además
por su enorme paciencia y motivación
espiritual.
Agradezco al señor Luis Lujan, por su
paciencia, experiencia y enseñanza
durante el desarrollo de la tesis.
Agradecimiento especial a mi tío Pool
Rodríguez y Antonio Rodríguez, por su
apoyo incondicional.
Juan Aarón.
vi
RESUMEN
El propósito de esta investigación fue determinar la seguridad de la dosis de látex
de Synadenium grantii (Euphorbiaceae) en el tratamiento de lesiones gástricas de
tipo inflamatorias, inducidas a Rattus norvegicus var. albinus.
Para este estudio cuasi experimental, longitudinal y prospectivo, se trabajó con una
muestra seleccionada de 30 especímenes divididos en 5 subgrupos a los que se
administró 3 mL de tres diluciones de látex de Synadenium grantii (Euphorbiaceae)
en dosis de V gotas (Grupo 1), IX gotas (Grupo 2) y XVIII gotas (Grupo 3) diluidas
en 250 mL de agua destilada; 10 mg/5mL de Omeprazol (Grupo 4), y un grupo
control con 4 mL de agua destilada (Grupo 5). Todos los especímenes recibieron las
sustancias por vía sonda orogástrica. Las lesiones gástricas se analizaron a través
de la evaluación macroscópica del estómago mediante la escala de Marhuenda. Y
la seguridad del látex, se evaluó mediante la determinación de los efectos adversos
y tasa de mortalidad.
Según el análisis de los resultados, se determinó que la dosis de 3 mL (IX gotas/250
mL) de látex de Synadenium grantii (Euphorbiaceae) provocó un porcentaje de
inhibición de lesiones gástricas inflamatorias del 6.25%; en comparación con
Omeprazol, con un 40%. En esta misma dosis, el Synadenium grantii
(Euphorbiaceae) administrado durante 5 días consecutivos provocó en el 60% de
los especímenes (Grupo 2), un aumento en su frecuencia cardiaca. Concluyendo
que la dosis de látex de Synadenium grantii (Euphorbiaceae) ha evidenciado no ser
seguro como tratamiento de lesiones gástricas inflamatorias, inducidas por
indometacina a Rattus norvegicus var. albinus., con efectos adversos a nivel
cardiaco y en mucosa gástrica.
Palabras clave: Dosis, indometacina, lesiones gástricas, seguridad, Synadenium
grantii (Euphorbiaceae), toxicidad aguda, úlcera gástrica.
vii
ABSTRACT
The purpose of this investigation was to determine the safety of the latex dose of
Synadenium grantii (Euphorbiaceae) in the treatment of inflammatory gastric lesions
induced to Rattus norvegicus var. albinus.
For this quasi-experimental, longitudinal and prospective study, we worked with a
selected sample of 30 specimens divided into 5 subgroups to which 3 mL of three
latex dilutions of Synadenium grantii (Euphorbiaceae) were administered in doses of
V drops (Group 1) , IX drops (Group 2) and XVIII drops (Group 3) diluted in 250 mL
of distilled water; 10 mg / 5mL of Omeprazole (Group 4), and a control group with 4
mL of distilled water (Group 5). All the specimens received the substances by
orogastric tube. Gastric lesions were analyzed through macroscopic evaluation of
the stomach using the Marhuenda scale. And the safety of latex was evaluated by
determining the adverse effects and mortality rate.
According to the analysis of the results, it was determined that the dose of 3 mL (IX
drops / 250 mL) of Synadenium grantii (Euphorbiaceae) latex caused a percentage
of inhibition of inflammatory gastric lesions of 6.25%; compared to Omeprazole, with
40%. At the same dose, Synadenium grantii (Euphorbiaceae) administered for 5
consecutive days caused 60% of the specimens (Group 2), an increase in their heart
rate. Concluding that the latex dose of Synadenium grantii (Euphorbiaceae) has not
been shown to be safe as a treatment for inflammatory gastric lesions induced by
indomethacin to Rattus norvegicus var. albinus., with adverse effects on the heart
and gastric mucosa.
Key words: Dose, Indomethacin, gastric lesions, safety, Synadenium grantii,
toxicidad aguda, gastric ulcer, acute toxicity.
viii
ÍNDICE
DEDICATORIA ...........................................................................................................................iv
AGRADECIMIENTO .................................................................................................................. v
RESUMEN ...................................................................................................................................vi
ABSTRACT ................................................................................................................................ vii
ÍNDICE ....................................................................................................................................... viii
ÍNDICE DE TABLAS ................................................................................................................. ix
ÍNDICE DE GRÁFICOS ............................................................................................................ ix
I. INTRODUCCIÓN .............................................................................................................. 15
1.1. Problema de investigación. ..................................................................................... 16
1.2. Objetivos. ....................................................................................................................... 16
1.2.1 General: ............................................................................................................. 16
1.2.2 Específicos: ....................................................................................................... 17
1.3. Justificación del estudio. .............................................................................................. 17
II. MARCO DE REFERENCIA ............................................................................................ 18
2.1. Antecedentes del estudio. ........................................................................................... 18
2.2. Marco teórico. ................................................................................................................ 21
2.3. Marco conceptual. ........................................................................................................ 30
2.4. Sistema de hipótesis. ................................................................................................... 31
2.5. Variables e indicadores.: Operacionalización de las variables ............................. 32
III. METODOLOGÍA EMPLEADA ................................................................................... 33
3.1. Tipo y nivel de investigación. ...................................................................................... 33
3.2. Población y muestra de estudio. ................................................................................ 33
3.2.1 Población de estudio: ............................................................................................. 33
3.2.2 Muestra: ............................................................................................................. 33
3.3. Diseño de investigación. .............................................................................................. 36
3.4. Técnicas e instrumentos de investigación. ............................................................... 38
3.5. Procesamiento y análisis de datos. ........................................................................... 38
IV. PRESENTACIÓN DE RESULTADOS ............................................................................ 42
4.1. Análisis de resultados: ................................................................................................. 42
4.2. Docimasia de Hipótesis. .............................................................................................. 48
V. DISCUSIÓN .......................................................................................................................... 50
VI. CONCLUSIONES ......................................................................................................... 55
VII. RECOMENDACIONES ............................................................................................... 56
ix
VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ......................................................................... 56
ANEXOS .................................................................................................................................... 61
Anexo 01: Instrumentos de recolección de datos ........................................................... 61
Ficha de Observación 1 ....................................................................................................... 61
Ficha de observación 2 ....................................................................................................... 61
Ficha de observación 3 ....................................................................................................... 62
Anexo 02: Evidencia de la ejecución: ................................................................................ 63
Anexo 03: Resolución que aprueba el proyecto de investigación ................................ 78
Anexo 04: Constancia de la Institución u organización donde se ha desarrollado la
propuesta de investigación ................................................................................................. 79
ÍNDICE DE TABLAS
Tabla N° 01: Porcentaje de inhibición de lesiones gástricas inflamatorias inducidas
en grupos experimentales (1,2,3,4) y control de Rattus norvegicus var. albinus.
Tabla N° 02: Tasa de mortalidad de cada grupos experimentales (1,2,3,4) y control
de Rattus norvegicus var. albinus.
Tabla N° 03: Resultado de datos cruzados grupos de estudio y su seguridad
Tabla N° 04: Prueba de hipótesis
ÍNDICE DE GRÁFICOS
Gráfico N° 01: Efectos adversos de la administración de 3mL (V gotas de látex de
Synadenium grantii (Euphorbiaceae)/250 mL de agua destilada) en el GE1, previo a
la inducción de las lesones gástricas inflamatorias.
Gráfico N° 02: Efectos adversos de la administración de 3mL (IX gotas de látex de
Synadenium grantii (Euphorbiaceae)/250 mL de agua destilada) en el GE2, previo a
la inducción de las lesones gástricas inflamatorias.
Gráfico N° 03: Efectos adversos de la administración de 3mL (XVIII gotas de látex
de Synadenium grantii (Euphorbiaceae)/250 mL de agua destilada) en el GE3,
previo a la inducción de las lesones gástricas inflamatorias.
x
Gráfico N° 04: Efectos adversos de la administración de 5mL de 10 mg de
Omeprazol/5 mL de agua destilada en el GE4, previo a la inducción de las lesones
gástricas inflamatorias.
Gráfico N° 05: Efectos adversos de la administración de 4mL de agua destilada en
el GC, previo a la inducción de las lesones gástricas inflamatorias.
Gráfico N° 06: Efecto del látex de Synadenium grantii sobre la frecuencia
cardiaca con valores previos y al minuto en 25 Rattus norvegicus var. albinus
versus omeprazol y agua destilada
Gráfico N° 07: Efecto del látex de Synadenium grantii sobre la frecuencia
cardiaca con valores previos y a los 5 minutos, en 25 Rattus norvegicus var.
albinus versus omeprazol y agua destilada
15
I. INTRODUCCIÓN
Dentro de nuestra sociedad, existen diversos factores a lo largo del día que
logran ocasionar lesiones gástricas y que paulatinamente progresan en la
historia natural de la enfermedad ácido-péptica.
Con una prevalencia estimada del 5-10% de la población en general, diversos
autores la consideran como una enfermedad frecuente, ya que es repetitivo
encontrarla en la práctica clínica diaria y/o asociada a otras patologías(1,2).
Debido a su alta prevalencia silente es común encontrar, que al menos un
25% de esta misma población, puede llegar a presentar complicaciones y/o
requerir atención hospitalaria(2).
A pesar de esto, se encontró limitaciones en la revisión bibliográfica nacional,
debido a la falta de investigaciones sobre mortalidad respecto a esta
enfermedad en los últimos 10 años. Encontrando solo un reporte actualizado,
con un mayor porcentaje de mortalidad en varones (67,1%)(3); siendo en
ambos géneros, la mortalidad ligeramente alta en Huancavelica (3,8%) y
Huánuco (2,3%)(3). Estos departamentos que coinciden con un estado
socioeconómico bajo, al poco acceso y desconfianza al tratamiento médico
de estas lesiones.
Asimismo, en nuestro país se reporta una baja en su prevalencia, tanto en
las úlceras duodenales como gástricas, solo en la población de nivel medio
en adelante, capaces de solventar estos productos farmacéuticos(3).
Entre estos fármacos, tenemos como ejemplo a la familia de los inhibidores
de bombas de protones; de estas dependen la fabricación del ácido
clorhídrico(4). Siendo asi un tratamiento usual para lesiones gástricas, de
bajo costo y de amplia distribución(5). Sin embargo, la población rural por
desconocimiento, desconfianza o tradición, continua empleando y
promoviendo el uso de diversas sustancias provenientes de la tierra, para
tratar infinidad de enfermedades sin un sustento científico de base.(6)
16
Generación tras generación se fue inculcando el uso de flora vegetal de cada
país. Se estima más de 25 mil plantas entre Brasil y Perú en su Amazonía, y
que solo sabemos y/o hacemos uso de sus propiedades, menos del 1%(7).
Siendo así, que, durante el último siglo se ha ido revelando la presencia de
diversas sustancias implicadas en la medicina tradicional debido al interés en
la búsqueda de alternativas a la medicina convencional.
Tal es el caso del género Synadenium, conjunto de plantas, siendo asociadas
a diversas propiedades, como antitumorales, antiinflamatorias, proteolíticas,
acción fibrinolítica e inmunoregulación(7,8), pero pocos estudios han
demostrado su eficacia en el tratamiento de lesiones gástricas(9) y no se ha
encontrado estudios con mejores poblaciones que garanticen seguridad a
dosis de tratamiento de las lesiones gástricas.
Como es sabido, para el uso y comercialización de una sustancia, es
necesario no solo basarse en la experiencia empírica y por tradición; si no, el
poder demostrar in vivo sus efectos y probar la seguridad del látex a dosis
que tengan efecto sobre las lesiones gástricas.
1.1. Problema de investigación.
¿Cuál es la seguridad de la dosis de látex de Synadenium grantii
(Euphorbiaceae) en el tratamiento de lesiones gástricas inflamatorias,
inducidas a Rattus norvegicus var albinus?
1.2. Objetivos.
1.2.1 General:
Determinar la seguridad de la dosis de látex de Synadenium grantii
(Euphorbiaceae) en el tratamiento de lesiones gástricas inflamatorias,
inducidas con indometacina en Rattus norvegicus var. albinus.
17
1.2.2 Específicos:
• Determinar la dosis de látex del Synadenium grantii
(Euphorbiaceae) que presenta actividad protectora en lesiones
gástricas inflamatorias, inducidas con indometacina en Rattus
norvegicus var. albinus.
• Determinar las reacciones adversas de la dosis del látex de
Synadenium grantii (Euphorbiaceae) que presenta actividad
protectora en lesiones gástricas inflamatorias, inducidas con
indometacina en Rattus norvegicus var. albinus.
• Determinar la tasa de mortalidad de la dosis del látex de
Synadenium grantii (Euphorbiaceae) en Rattus norvegicus var.
albinus.
1.3. Justificación del estudio.
En la actualidad, existen una infinidad de agentes gastro-lesivos que conlleva
a una enfermedad ulcero-péptica, siendo un trastorno silente, que, si bien se
podría usar fármacos para mejorar el curso de la enfermedad, presentan un
costo moderado y múltiples efectos adversos por la necesaria administración
continua; como es el caso del uso de inhibidores de bomba de protones o
análogos de las prostaglandinas, por consiguiente, abandono farmacológico.
En nuestro medio y estilo de vida, representa cada vez un problema mayor
encontrar fármacos ideales, ya sea por el desarrollo de alergias o falta de
adherencia al tratamiento continuo. Por eso, resulta importante e
indispensable realizar estudios que permitan aprobar el consumo de
productos alternativos de origen natural a bajo costo.
Con este estudio se busca evidenciar, la seguridad del látex de Synadenium
grantii a dosis de protección en lesiones gástricas inflamatorias inducidas;
cuyos componentes se les ha otorgado varias propiedades solo de manera
18
empírica en los últimos 30 años. Para este fin, se justifica el promover diversos
estudios e investigaciones que tengan el objetivo de generar productos a base
de la naturaleza, siendo necesario realizar investigaciones en animales de
experimentación.
Los beneficios de este estudio apuntan directamente a ser un adyuvante de
la industria farmacéutica, complementar a las futuras investigaciones, y
principalmente aportar conocimiento sobre la protección gástrica y seguridad
del látex, abriendo así la posibilidad de realizar mayores investigaciones que
permitan conocer propiedades in vivo del látex del Synadenium grantii
(Euphorbiaceae).
Finalmente, existe escasez de estudios del empleo de este látex como
alternativa terapéutica para el manejo de úlceras pépticas u otros usos
antinflamatorios, y la evidente falta de información sobre toxicidad
dependiente del consumo agudo y/o crónico de estos compuestos.
II. MARCO DE REFERENCIA
2.1. Antecedentes del estudio.
Se realizó una búsqueda exhaustiva de antecedentes relacionadas a las
variables de estudio, y se evidenció la falta de progresión en las investigaciones,
desarrollo o innovación nula de estas mismas; por ejemplo, la investigación
realizada por Costa y col. en Brasil, 2012 desarrollaron un estudio experimental,
durante el periodo enero 2012 - febrero 2012, exponiendo a 30 Rattus norvegicus
a Indometacina, un fármaco inductor de lesiones gástricas inflamatorias. Donde
a 6 especímenes se les administró solución salina, 6 más con omeprazol, 6 con
ranitidina, 6 con el látex puro y 6 con látex disuelto de Synadenium grantii
(Euphorbiaceae). Cabe resaltar que el método de administración fue por vía oral
ad libitum y el uso de indometacina por vía subcutánea. En los resultados, se
evidenció que el látex diluido mostró un 6% de reducción de las lesiones
gástricas inflamatorias; sin embargo, el concentrado de látex puro demostró un
valor de inhibición de lesiones gástrica del 90% a comparación del resto. Costa
19
y col concluyeron que el látex de Synadenium grantii (Euphorbiaceae) en
contacto con la mucosa gástrica, podría generar una barrera protectora que
impediría el daño causado por agentes lesivos a la mucosa gástrica, como lo fue
el etanol y/o indometacina(9). Añadiendo que en este estudio solo se logró medir
el efecto agudo de la exposición al látex, y no una exposición prolongada,
visualización de alteraciones histológicas y/o efectos adversos.
Los investigadores Thais y col. en el año 2013 desarrollaron un estudio sobre la
evaluación antitumoral del Synadenium grantii (Euphorbiaceae) contra el
melanoma; concluyendo que el látex presentó una reducción tumoral en el 40%,
en animales de experimentación y demostraron que el Synadenium grantii
(Euphorbiaceae) a concentraciones dependientes, causaba la muerte de células
específicas, en la fase S-G2/M(8) mediante disminución de radicales libres y
disminución de la inflamación producto del cáncer. Sin embargo, no
especificaron datos de toxicidad a exposición prolongada o signos clínicos en los
animales de experimentación que demuestren efectos adversos.
En la investigación de Shamkant B. Badgujar en India 2014, se reporta que
Synadenium grantii (Euphorbiaceae) está siendo usado de manera empírica por
la población indígena, para detener hemorragias. El método que realizó fue
extraer el látex a 0-5° C, homogenizada, filtrada y centrifugada a 16,000 c/m por
45 minutos y almacenada a 4°; finalmente se logró concentrar y ser administrado.
Según los resultados de la investigación, se comparó el tiempo de coagulación
en 12 tubos por preparación con 500 uL de sangre cada uno, teniendo un efecto
hemostático. Esto se logra disminuyendo el tiempo de sangrado y aumentando
el proceso de coagulación. Badjugar propone que este efecto se debe a
proteasas afines a cisteína. Este estudio si logra concluir que, mediante su
extracto, no se encontraron riesgos de toxicidad(10).
También, Munhoz y col en el año 2014 en Brasil, en su investigación lograron
identificar los componentes químicos del Synadenium grantii (Euphorbiaceae) en
un estudio sobre la inhibición de radicales libres y antinflamatorios. Mediante el
uso de un espectro UV, se logró reconocer a compuestos fenólicos,
20
hidrocarburados, terpenos, antocianinas, lecitinas, proteasas, flavinoides,
compuestos aromáticos, euphol y lanosterol; los cuales tuvieron acción contra la
mieloperoxidasa, inhibiendo la producción de radicales libres(11).
Recientemente, Jesuíno y col. en Brasil 2018 desarrollaron un estudio
experimental sobre el efecto del látex de Synadenium grantii (Euphorbiaceae) en
dosis de 1, 3, 10, 30 y 100 mg/kg en ratones, a los que se les indujo dolor pélvico
con dosis de oxitocina. Demostrando que el efecto analgésico del látex diluido
tuvo similitud con el grupo control con ibuprofeno(12). Sin embargo, el
compuesto descrito como 3,4,12,13-tetracetylphorbol-20-phenylacetato, un
phorbol concentrado del látex, tuvo una reducción significativa mayor del 49-65%
que los grupos anteriores, encontrando que la oxitocina reducía el área uterina,
y el compuesto la aumentaba en dosis de 10-100 mg/kg sin reducir el peso del
útero. Además, se encontró una disminución del edema en lamina propia y una
arquitectura histológica preservada sin signos inflamatorios en el endometrio(12)
Con respecto a los efectos adversos del látex, se encontró un caso clínico
publicado en Brasil, por Docampo y col. en 2010; quienes reportaron un incidente
en su centro de salud; una menor de 4 años, eutrófica que presentó erupción
eritematosa, pruriginosa, descamativa, edema bipalpebral, bilateral y secreción
seropurulenta que disminuía su campo visual. Como antecedente, su madre
refiere que su menor hija ingirió tallos y hojas de una planta. Al momento de la
anamnesis, la menor la describió como una planta con flores llamativas, teñidas
de rojo y hojas verdes, conocida como “lechero africano”, planta cuyas
características morfológicas y taxonómicas describen al Synadenium grantii
(Euphorbiaceae). En la analítica se evidenció leucocitosis (14 300 mm3). Con
diagnóstico de eritrodermia, el plan terapéutico requirió hidratación endovenosa,
analgésicos tópicos, gotas oftálmicas de eritromicina y vitamina A. Se le otorgó
a esta reacción al éster del 4-desoxiforbol, que lesiona queratinocitos e
inflamación sin mediador alérgico(13).
21
2.2. Marco teórico.
Dentro de las lesiones gástricas, de etiología diversa; con mayor frecuencia toma
la posta el curso natural de la patogénesis de tipo inflamatorias y úlcera gástrica.
Para esto, debemos comprender el funcionamiento fisiológico del estómago para
conocer la ubicación exacta del desequilibrio en la homeostasis.
La secreción de ácido clorhídrico, está a cargo principalmente de las células
parietales u oxínticas, las cuales segregan un aproximado de 160 ml por cada
litro de solución, llegando a un pH de 0,8(14).
Para la formación de este compuesto, el ion cloro, es llevado por canales activos
desde las células parietales hacia la luz canalicular; estos canales son voltaje-
dependientes, por lo que ante la carga negativa del Cloro, inducen una difusión
pasiva del potasio (K+) con el fin de contrarrestar el voltaje negativo(14). Por otro
lado, dentro del citoplasma, el agua se separa en iones hidrogeno e hidroxilo. El
ion hidrógeno es segregado a los canalículos, por una bomba de H+/K+ ATPasa
de transporte activo.
Por lo que los iones potasio que habían ingresado para contrarrestar el voltaje
negativo, terminan por ser intercambiados por iones hidrógeno, los cuales
finalmente, se unirán al cloro para formar una sustancia ácida, conocida como
ácido clorhídrico(14).
Como producto final se tiene, además, el anhídrido carbónico. Esta molécula se
encargará de realizar funciones de buffer, difundiendo a la zona extracelular por
medio de un intercambiador de ion cloro y aminorando el daño del epitelio ante
la exposición del ácido clorhídrico(2,14)
Por el contrario, para contrarrestar esta secreción ácida, se secreta moco en el
estómago por las propias glándulas pilóricas, siendo su función principal,
proteger la pared gástrica de la digestión enzimática cuando hay estasis en el
canal pilórico, antes de iniciar el vaciamiento gástrico(14). Este moco secretado
en el píloro, solo es uno de un conjunto de componentes encargados de la
22
protección gástrica, como lo son el moco, bicarbonato, flujo sanguíneo y
prostaglandinas. Especialmente el rol de la prostaglandina PGE2 es
fundamental, debido a que se encarga de aumentar la secreción de moco
gástrico, reducir la propia secreción gástrica, estabilizar la membrana lisosomal
e incrementar el flujo sanguíneo en la superficie de la mucosa gástrica(4,15).
Respecto a la fisiopatología de la úlcera péptica, podemos afirmar, que se debe
a un aumento en la secreción gástrica o disminución de la protección mucosa en
el trayecto gástrico, en zonas donde se ha perdido la continuidad de la pared del
estómago o duodeno hasta la muscularis mucosae sin sobrepasar la
serosa(4,14). En su gran mayoría estas lesiones son crónicas y únicas, pero
también pueden ser múltiples en un 5-20% de casos(1,2,5).
Se resalta que la secreción gástrica se producirá durante un conjunto de
estímulos endocrinos, paracrinos y neural(5). Y ante una desregulación de
cualquiera de estos sistemas, se pierde la homeostasis y genera suficiente
secreción gástrica que favorece al desarrollo de lesiones gástricas.
Entre los estímulos endocrinos, tenemos la liberación de la gastrina mediante las
células G antrales(4,14).
A nivel paracrino, se obtiene una liberación de histamina por las células
enterocromafines, las cuales mantienen una posición bivalente; ya que,
aumentará la secreción ácida y participa en la liberación de moco, gastrina,
bicarbonato. Su receptor específico es H2(4,14).
En el componente neuronal (el núcleo motor dorsal del vago e hipotálamo)
mediante liberación de acetilcolina, cumple la función de agonista menor en las
células parietales, al producir ácido clorhídrico, mediante un intercambiador
activo de ATP-asa H+/K+. Su receptor específico es el M3, que logra activarse
en respuesta a la vista, olor, sabor(4,14).
Teniendo un sistema de secreción ácida, para aminorar el daño propio a las
células gástricas, tenemos un sistema de protección, siendo estimulada su
23
producción, en su mayoría por prostaglandinas y NO(14). Para lograr esta
defensa es necesario tener un sistema de flujo sanguíneo integro en la mucosa,
además el que se encarga de atrapar el bicarbonato secretado para mantener la
mucosa integra, lentificando la difusión de iones, es la secreción de moco(5).
La enfermedad ácido-péptica corresponde entonces a una entidad relacionada
con el desequilibrio entre factores protectores y dañinos de la mucosa
gastroduodenal. Debido a este desequilibrio en la homeostasis, ocurre una
inflamación en la mucosa y en estos procesos, casi siempre se acompañan de
infiltración leucocitaria polimorfonuclear, siendo entonces un evento agudo.
Progresivamente, sin un control sobre esta pérdida de la homeostasis, ocurre
una pérdida de la solución de continuidad desde la submucosa con un diámetro
de por lo menos 5 milímetros y con una afección crónica activa(16).
Podemos entonces delimitar dos tipos de úlcera péptica, ya que tienen
mecanismos etiológicos totalmente diferentes. En la úlcera duodenal, el factor
agresivo que predispone a su formación es la acción inmediata del ácido
clorhídrico sobre la mucosa duodenal; por el contrario, el mecanismo patológico
de una úlcera gástrica es de carácter multifactorial e incluye una perdida en la
homeostasis entre factores agresivos y defensores(2,15,17).
Esto es debido a que la mucosa duodenal no presenta los mismos factores
protectores multifactoriales, que se han descrito anteriormente de la mucosa
gástrica. Según Ferrer, la úlcera duodenal es frecuente dentro de las úlceras
pépticas, además que existe una predisposición por el género masculino sobre
el femenino y tiene una incidencia mayor sobre las personas añosas.(18) Por lo
tanto, la úlcera gástrica tiene menor frecuencia, sin predisposición por el género
y es más frecuente entre personas adultas(17–19).
Delimitando la etiología multifactorial de la úlcera gástrica. En los de carácter
agresivo, tenemos, por ejemplo, gastritis por Helicobacter pylori(17,19), consumo
crónico de antiinflamatorios no esteroideos, retraso en el vaciamiento gástrico,
consumo de alcohol, tabaco, reflujo de ácidos biliares. Y para los factores
24
defensivos, tenemos una disminución o pérdida de bicarbonato, perdida en la
calidad del moco, disminución de prostaglandinas(20,21).
Con respecto a la úlcera inducida por AINE, señalamos que los antiinflamatorios
no esteroideos poseen una inhibición sobre los receptores cox-1 o
cicloxigenasas, ocasionando una baja de prostaglandinas, prostaciclina y
tromboxanos(21,22). Estas prostaglandinas, como hemos mencionado,
desempeñan una función de protección gástrica, aumentando las barreras
defensoras del epitelio gástrico. Por lo tanto, al disminuir los factores defensivos,
permitirá que el ácido clorhídrico lesione el epitelio gástrico.
A partir de esto, coexistirá una inflamación aguda, originando una adhesión
leucocitaria desde el endotelio vascular(23). Y al mantener quimiotaxis en la
lámina propia por lesión aguda recidivante, ocasionaría lesión localizada y en
profundidad.
Rozman C. y Cardellac F., en la descripción del cuadro clínico de la úlcera
gástrica, se constató que la mayoría de pacientes con úlceras pépticas son
asintomáticos, aproximadamente ocupan el 70%. Dentro del 30% sintomático, el
más frecuente, en un 80% es el dolor epigástrico, teniendo una presentación
atípica en cuadrantes superior del hipocondrio, con la posibilidad de irradiarse a
región dorsal o lumbar(23).
Además, las úlceras duodenales, presentan un dolor de dos a cinco horas
postprandial, con mayor exacerbación en la noche. Correspondiente con el
cambio secreción ácida nocturna, por su ritmo circadiano(16,23). Al contrario,
pacientes con úlceras gástricas, podrían presentar sintomatología en relación
con los alimentos, incluyendo dolor epigástrico que agrava con los alimentos,
asociado a eructos, saciedad temprana, poca o nula tolerancia a las comidas con
alto contenido en grasa y náuseas ocasionales(24). Estos síntomas se explican
por la sensibilidad visceral y desorden del movimiento gastroduodenal(14,22)
Al realizar un examen físico del paciente llega a ser normal; salvo el caso que
coexista complicaciones como; sequedad de mucosas y/o palidez cutánea, lo
25
que reflejaría un cuadro de probable de perforación o penetración de las capas
histológicas; palpar un abdomen rígido, asociado a signos de irritación peritoneal
indicaría lo mismo. El diagnóstico de la enfermedad de úlcera péptica, se
establece con la observación de la úlcera, en la endoscopia digestiva alta(23).
Para guiar un tratamiento definitivo se debe tener en cuenta, aliviar la
sintomatología de los pacientes, además de fomentar el cierre histológico de la
úlcera y prevenir las secuelas y recidivas(4,5). Alrededor de 1960, no existía un
tratamiento médico, por lo que la única alternativa era una cirugía llamada
vagotomía truncal no selectiva, la principal complicación posterior a la operación
era el síndrome de vaciamiento gástrico(25,26).
Ante un problema repetitivo en la comunidad, se pudo demostrar e investigar la
familia de inhibidores de bomba de protones, de la cual dependía la fabricación
del ácido clorhídrico. Siendo estos, los inhibidores de la secreción del ácido
clorhídrico(21). Ya que pueden disminuir la producción diaria de ácido en un 80-
95% debido a la inactivación irreversible de la bomba de H+/K+ ATPasa. Esto
significa una inhibición de aproximadamente 24-48 horas, hasta la producción de
nueva H+/K+ ATPasa por el retículo endoplasmático rugoso(14,15).
Con respecto a los efectos secundarios, por lo regular producen náuseas, dolor
abdominal, flatulencia, diarrea; pudiendo incomodar al paciente y, por lo tanto,
abandonar el tratamiento. Como interacciones se han reportado por su
metabolismo hepático, warfarina, diazepam y ciclosporina(17,21). Además, un
tratamiento crónico con estos inhibidores de bombas de protones, disminuye la
absorción de vitamina B12, además de un estado de hipergastrinemia que puede
predisponer un aumento en la secreción del ácido clorhídrico por rebote ante la
suspensión de los fármacos inhibidores de bomba de protones(4).
Años después del descubrimiento de estos fármacos, se descubrió los
receptores H2 histamínicos, con la finalidad de obtener fármacos afines a otros
receptores, e inhibir o disminuir la exposición a factores agresivos. Fue en el año
1976, donde se obtuvo la cimetidina, el primer bloqueador antihistamínico(2,18).
26
Su principal función es durante la inhibición irreversible en los receptores H2,
ubicado en la membrana basolateral de las células parietales, teniendo en la
práctica, la cimetidina y ranitidina, estas son menos potentes que los inhibidores
de bomba de protones, pero logran reducir la producción de ácido gástrico en un
70% durante las 24 horas, siendo eficaz durante la noche por la supresión en
cadena(4,27). Ya que el factor más importante para la cicatrización de úlceras,
es la secreción gástrica nocturna, constituye el tratamiento pilar en esta
fase(4,27). Para estos fármacos, de un 10-20 % presentan metabolismo
hepático, por lo que no requieren ajuste de dosis; caso contrario si hablamos de
un metabolismo renal, si se necesita un ajuste de dosis ante una elevación de la
creatinina(18). Con respecto a los efectos adversos, son menores y por lo
general son bien tolerados. Adicionalmente cruzan la barrera placentaria, pero
no se ha demostrado que tenga un factor teratogénico hasta el momento(4).
Con el tiempo, se pensó solo en estos fármacos que inhiben directamente el
daño, inhibiendo las bombas activas y de histamina. Pero luego se encontró
fármacos que aumentarían la defensa mucosa, como son los análogos de
prostaglandinas(4,5).
El misoprostol como análogo de la prostaglandina E1, receptor de la EP3 de la
célula parietal, reduce el AMP cíclico intracelular y por consiguiente la secreción
del ácido gástrico, aumentando además el flujo sanguíneo en la mucosa
gástrica(5). Favoreciendo entonces los factores defensivos, resulta importante
en la etiopatogenia de la úlcera gástrica. Las dosis orales de 100-200 ug. inhiben
en grado importante la secreción basal de ácido en un 85-95% durante los
siguientes 30 minutos y alcanzando un efecto terapéutico a los 60-90 minutos,
persistiendo en los siguientes 120 minutos(4,28). Como efecto adverso, la
diarrea/cólico abdominal se puede presentar en un 30% de la población,
causando también una probable exacerbación de enfermedad inflamatoria
intestinal. Además está contraindicado durante el embarazo por aumentar la
contractibilidad uterina(2,4,5).
27
En resumen, se debe clasificar a los pacientes según la etiopatogénesis de su
úlcera sea gástrica o duodenal, se debe tener en cuenta además enfermedades
asociadas, afectación hepática, renal y probable abandono del tratamiento, para
poder dar un tratamiento adecuado. Es por esto que, con la idea de competir con
los medicamentos de uso diario, se investigan diversas formas naturales y de
fácil obtención, dando un esquema alternativo y con menos efectos adversos.
Las plantas, desde la antigüedad, han sido señaladas como tratamiento empírico
para diferentes enfermedades, inclusive siendo alabadas por la cantidad de
propiedades que se fueron transmitiendo de población en población. Por lo que,
en los últimos años se han realizado infinidad de investigaciones con la idea de
dar una base científica a los tratamientos(29).
Una de estas plantas, perteneciente a la familia Euphorbiaceae, se ha
considerado como alternativa para estas formas farmacéuticas, debido a su látez
de aspecto y consistencia viscosa(9). Dentro de esta gran familia, resaltamos a
Synadenium grantii hook o también llamada Euphorbia umbellate(12,30). Esta
planta, catalogada como medicinal desde hace más de 23 años(6), puede crecer
hasta 5 metros de altura en las condiciones adecuadas, presenta una morfología
de tallo verde con hojas laterales, con peciolos cortos y flores rojo oscuras(6).
Con respecto al tallo, presenta una forma cilíndrica, de coloración verde oscura
cuando la planta es madura y presenta gran cantidad de nutrientes en el suelo.
Sin embargo, es morado cuando la planta es inmadura o no obtiene los
suficientes nutrientes. Con el tiempo, irriga látex dentro de sus ramas y presenta
abundantes brotes de hojas lateralmente(6). Las hojas son de características
ovoides y elípticas de 5-17 centímetros de largo y de 2 a 6 centímetros de ancho,
de coloración verde y textura gruesa, que contiene látex y son de difícil
desprendimiento.
Autóctona y predominante en el territorio africano y americano, especialmente
en climas tropicales y áridos(8). Se describe su uso en la población sur de Brasil,
teniendo diferentes nombres como “planta de la vida”, “tiborna”, “cola-nota”,
28
“garrafada”(9,13,30). En climas templados logra desarrollarse adecuadamente
con un ligero retraso; sin embargo, en lugares donde las estaciones del año son
notorias, su desarrollo pasa por diversas etapas. Por ejemplo, en verano, se
evidencia un mayor crecimiento y en invierno, lo contrario(6).
Descubierta por el científico norteamericano Grant Hook, hace aproximadamente
40 años, encontró un compuesto activo en la marcha fitoquímica, el phorbol,
cuyos ésteres presentan gran cantidad de propiedades en protección y
regeneración tisular(6).
Según Ortencio, desde los años ochenta, las poblaciones indígenas han estado
utilizando el látex como remedio natural para varias enfermedades(6), como es
el caso de reflujo, gastritis, úlcera péptica, alergias, obesidad, diabetes(8,9,31).
Cuando la rama y la corteza son removidas de la planta, libera un látex blanco
abundante(8), el cual, es usado de forma diluida y empíricamente para
contrarrestar los efectos de estas enfermedades(6,31,32); la dilución se debe a
su consistencia viscosa, de sabor amargo y de rápida solidificación. Además, sin
un registro de cantidades claras de cuantificación en la dilución o medidas
exactas en su preparación para lograr un efecto preventivo o terapéutico.
La forma de preparación en el este de Panamá, Brasil y pueblos indígenas, es
mezclar XVIII gotas de látex en 1 litro de agua, lo ponen en refrigeración y poder
consumir todo el litro de agua en un periodo de 2-3 dias(6,8,9,33). Además se
promueve como efecto preventivo IX gotas en 1 litro de agua y en el mismo
periodo de días(6,9).
El metabolito activo aislado identificado ha sido el phorbol, compuesto de la
familia de los diterpenos, altamente soluble en agua y en solventes orgánicos
debido a su polaridad, por lo que se le asocia a las propiedades antes
mencionadas(6,9,31). A partir de esto, han surgido varias investigaciones
dirigidas al ámbito inmunológico y efectos antiinflamatorios del látex de
Synadenium grantii, en el tratamiento antitumoral de Campos(34), el efecto
29
nematicida de Gomez(33), y el tratamiento de la dismenorrea en ratones de
Jesuíno(12).
En éste mismo propósito Thais y otros, pudieron identificar un triterpeno
adyuvante en su investigación antitumoral(8). Y Gomes, en su investigación
antiplagas de nematelmintos, encontró gran cantidad de proteasas(33). Según
Costa, de todas estas sustancias, la que tiene mayor porcentaje y probablemente
tengan los efectos mencionados, son los terpenos(29); en su investigación,
denota la importancia de estos terpenos y además de un raro phorbol; 3,4,12,13-
tetracetylphorbol-20-phenylacetato(11,33) este compuesto es reafirmado en el
2018, por Jesuíno, durante su investigación en dismenorrea(12).
Con lo que respecta a su toxicología, según Cunha el extracto etanólico, no
representa toxicidad a pesar de utilizar dosis elevadas de 1000 ug/ml(7). Sin
embargo, el látex puro, si representa altos grados de toxicidad dosis
dependiente, en Artemia salina, abriendo una diversidad de correlación con sus
propiedades antitumorales, insecticidas y posiblemente antitripanosómicas (9,
10).
Además, en la investigación sobre el efecto antitumoral de Synadenium grantii
(Euphorbiaceae), realizada por Thais y otros, demostraron la presencia de
citrostadienol y euphol (triterpenoide) mediante cromatografía y particiones con
etanol, metanol, acetato etílico y cloroformo(8). En la misma investigación, el
euphol no presentaba ninguna habilidad para disminuir la viabilidad celular, por
lo que, en concentraciones investigadas concluían, que no es citotóxico(8). El
citrostadienol, por el contrario, demostró poca actividad citotóxica con una
pérdida de 8% de viabilidad celular en concentraciones 250ug/ml. Según Costa,
toda la familia Euphorbiaceae, es bien conocida por presentar un látex rico en
sinfín de sustancias no polares, esta propiedad ayudaría en su actividad frente a
las células tumorales y procesos inflamatorios(9,10). Sin embargo, se encontró
además un grupo de compuestos dentro del análisis bioquímico del látex, los
cuales son llamados los bufadienolides; un grupo de sustancias químicas que
presentan actividad similar a la digoxina o agentes inotrópicos(6,9,34).
30
Presentan un efecto inhibidor en la bomba de Sodio-Potasio ATPasa en el
músculo cardiaco, ocasionando que el sodio salga y que el calcio entre a las
células, por lo que tendrían un efecto inotrópico positivo.
2.3. Marco conceptual.
Synadenium grantii (Euphorbiaceae): Se describe como una planta de 4-5 m de
altura en su forma madura, con los tallos cilíndricos, con marcas de las hojas,
carnosos al principio y verdes, tornándose algo leñosos con el tiempo, con látex;
corteza grisácea, escamosa y peciolos rojos.
Seguridad: Característica de una sustancia de poder usarse con una
probabilidad pequeña de causar efectos adversos injustificables.
Látex: Sustancia de aspecto lechoso, acuosa o coloidal, constituida por resinas,
alcaloides, grasas, ceras etc. Pudiendo obtenerse de cortes hechos en el tronco
de algunos árboles y de ciertas materias primas, como el caucho y la laca.
Úlcera péptica: Zonas en donde se ha perdido la continuidad de la pared del
estómago o duodeno hasta la muscularis mucosae sin sobrepasar la serosa.
Bufadienolides: Compuestos químicos, de características similares a los agentes
inotrópicos positivos, cuyo lugar de obtención es de origen animal o vegetal.
Anafilaxia: Corresponde a una reacción de hipersensibilidad tipo 1, grave,
sistémico, a una molécula que pasaría a ser un alergeno.
Edema: Se refiere a un incremento de líquido en el extracelular o espacio
intersticial, además de las cavidades de un organismo.
Equímosis: Luego de una noxa, ocurre un sangrado interno de la piel o mucosa
provocado por la ruptura de algún vaso sanguíneo. Ocasionalmente, miden entre
1-2 cm.
31
Petequias: Equimosis pequeñas que miden entre 1-2 milímetros.
Toxina: Aquella sustancia de origen microbiano, vegetal o químico que presenta
la capacidad de matar células, alterar el crecimiento o desarrollo o destruir el
organismo.
Toxicidad Aguda: Aparición de síntomas o signos luego de la administración de
una toxina determinada en un tiempo no mayor a 24 horas.
Indometacina: Medicamento antiinflamatorio no esteroideo (AINE). Se utiliza
para reducir la inflamación y tratar el dolor. Se ha demostrado que en altas
concentraciones producen lesiones gástricas a 75mg/kg.
Omeprazol: Corresponde a un fármaco inhibidor de la secreción ácida del
estómago. Se usa frecuentemente para tratamiento de la dispepsia, úlcera
péptica y afecciones por reflujo gastroesofágico.
2.4. Sistema de hipótesis.
Hi: La dosis de látex de Synadenium grantii (Euphorbiaceae), en
comparación con el omeprazol, presenta seguridad en el tratamiento
de lesiones gástricas inflamatorias inducidas con indometacina en
Rattus norvegicus var. albinus.
Ho: La dosis de látex Synadenium grantii (Euphorbiaceae), en comparación
con el omeprazol, no presenta seguridad en el tratamiento de lesiones
gástricas inflamatorias inducidas con indometacina en Rattus
norvegicus var. albinus.
32
2.5. Variables e indicadores.: Operacionalización de las variables
VARIABLES DEFINICIÓN
CONCEPTUAL DEFINICION
OPERACIONAL DIMENSIONES INDICADORES INDICES TIPO ESCALA
Variable dependiente
TRATAMIENTO DE LAS LESIONES GÁSTRICAS
INFLAMATORIAS INDUCIDAS
Característica de
disminuir o eliminar lesiones compatibles con la administración
de inductor de lesiones gástricas
inflamatorias, mediante
compuestos biológicos o
sintéticos
Identificar y cuantificar
cambios anatomo -macroscópicos del estómago lesionado y
evaluación del puntaje obtenido de acuerdo a la
escala de Marhuenda.
Cambios anatomo-macroscópicos
Pérdida de Pliegues de Mucosa
Presencia/No presencia Cualitativa Nominal
Decoloración de Mucosa Presencia/No presencia Cualitativa Nominal
Edema Presencia/No presencia Cualitativa Nominal
Número de Petequias
Ninguna: 0 De 1-5: 1 De 5-10:2
Más de 10:3
Cuantitativa Discreta
Intensidad de Ulceración Presencia/No presencia Cualitativa Nominal
Hemorragia Presencia/No presencia Cualitativa Nominal
Variable independiente
SEGURIDAD DE LA DOSIS
DE LÁTEX
Característica de
un compuesto
para poder
utilizarse con la
mínima
probabilidad de
causar efectos
adversos.
Identificación de los efectos
adversos agudos y seriados con una ingesta de
látex respectivamente.
Toxicidad aguda y
seriada oral en Rattus norvegicus
var. albinus
Movimientos tónico-clónicos
Presencia/No presencia Cualitativa Nominal
Pérdida de peso >10% Presencia/No presencia Cualitativa Nominal
Pérdida de apetito Presencia/No presencia Cualitativa Nominal
Taquicardia Presencia/No presencia Cualitativa Nominal
Tremores Presencia/No presencia Cualitativa Nominal
Prurito en oreja Presencia/No presencia Cualitativa Nominal
Aislamiento Presencia/No presencia Cualitativa Nominal
Respuesta a la manipulación
Presencia/No presencia Cualitativa Nominal
Tasa de mortalidad
Cantidad de muertes con respecto al total de
especímenes
Cuantificación de la tasa de mortalidad por grupos
Cuantitativa Continua
33
III. METODOLOGÍA EMPLEADA
3.1. Tipo y nivel de investigación.
Corresponde a una investigación aplicada, prospectiva, longitudinal y de carácter
Cuasi-Experimental(35).
1. Prospectiva: Porque se realizó del presente al futuro.
2. Longitudinal: Porque se realizó varias mediciones.
3. Cuasi-Experimental: Porque se manipuló las variables independientes,
para comprobar los efectos terapéuticos, además de tener un sistema
de muestreo por conveniencia.
3.2. Población y muestra de estudio.
3.2.1 Población de estudio:
La población de estudio estuvo constituida por 25 Rattus norvegicus
var. albinus provenientes de INS (Lima-Perú), a través de un ambiente
anexo de laboratorio de farmacología en la Universidad Privada
Antenor Orrego, en aparente buen estado de salud, durante diciembre
2019, en un ambiente de 12 horas de luz, con 12 horas de oscuridad,
con temperatura ambiente controlada de 27° C(36).
3.2.2 Muestra:
La muestra estuvo determinada según las características de análisis
de cada Rattus norvegicus var. albinus a las cuales se le indujo
lesiones gástricas inflamatorias con indometacina en el laboratorio
de farmacología de UPAO durante el mes de febrero 2020.
Tamaño de muestra:
Por las características de la investigación y los parámetros bioéticos
y legales(37) (5 libertades y 3 R´s) se ha utilizado una muestra no
probabilística o por conveniencia por las razones como: altos costos
34
para adquirir ratas de laboratorio, alimentación, cuidado y
mantenimiento higiénico por personal calificado, contando para éste
caso con el apoyo del personal, de un ambiente anexo de laboratorio
de farmacología en la Universidad Privada Antenor Orrego.
El número de animales utilizados en cada grupo fueron de 5.
Grupos de estudio N° de Rattus norvegicus var. albinus
GE1 5
GE2 5
GE3 5
GE4 5
GC 5
*Se reservó 5 especímenes más como medida de
previsión o contingencia. 5
Total 30
Los criterios de selección utilizados para los grupos experimentales,
así como para el grupo control fueron por sus características y
exigencias de sanidad de los animales.
Para grupo experimental, Rattus norvegicus var. albinus
Con las siguientes características de inclusión(36):
- Certificado de sanidad
- Peso entre 150-240 gramos
- Edad 2 meses a 2 ½ meses.
- Machos
- Hembras
- Lesiones gástricas inflamatorias inducidas por indometacina
- Con 12 horas de ayuno
Con las siguientes características de exclusión(36):
- Signos de letargo.
- Pérdida de apetito.
- Problemas respiratorios.
35
- Diarrea.
- Malformaciones evidentes.
- En gestación.
- Muerte en algún momento del experimento antes de inducir las
lesiones gástricas.
Para grupo control, Rattus norvegicus var. albinus
Con las siguientes características de inclusión(36):
- Certificado de sanidad
- Peso entre 150-240 gramos
- Edad 2 meses a 2 ½ meses.
- Machos
- Hembras
- Sin lesiones gástricas inflamatorias inducidas por indometacina
- Con 12 horas de ayuno
Con las siguientes características de exclusión(36):
- Signos de letargo
- Pérdida de apetito
- Problemas respiratorios
- Diarrea
- Malformaciones evidentes
- En gestación
- Muerte en algún momento del experimento antes de inducir las
lesiones gástricas.
36
3.3. Diseño de investigación.
• Esquema del Diseño de investigación
GE1 O 1 x 1 O 2
GE2 O 3 x 2 O 4
GE3 O 5 x 3 O 6
GE4 O 7 x 4 O 8
GC O 9 - O 10
Codificación:
GE1 - GE4 = Grupos Experimentales
GC = Grupo Control
O1=Medición y observación de la prueba a ratas expuestas a dosis
de 3 mL de látex diluido sensibilizante en concentración de V gotas/
250 mL de agua salina durante 4 dias, antes de la administración
de indometacina por SOG.
O2 = Medición y observación de la prueba a ratas expuestas a dosis
de 3 mL de látex diluido en concentración de V gotas/250 mL de
agua salina; después de la administración de indometacina por
SOG.
O3= Medición y observación de la prueba a ratas expuestas a dosis
de 3 mL de látex diluido sensibilizante en concentración de IX
gotas/250 mL de agua salina durante 4 dias antes de la
administración de indometacina por SOG.
37
O4 = Medición y observación de la prueba a ratas expuestas a dosis
de 3 mL látex diluido en concentración de IX gotas/250 mL de agua
salina, después de la administración de indometacina por SOG.
O5= Medición y observación de la prueba a ratas expuestas a dosis
de 3mL de látex diluido sensibilizante en concentración de XVIII
gotas/250 mL de agua salina durante 4 dias antes de la
administración de indometacina por SOG.
O6 = Medición y observación de la prueba a ratas expuestas a dosis
de 3 mL de látex diluido en concentración de XVIII gotas/250 mL
de agua salina, después de la administración de indometacina por
SOG.
O7 = Medición y observación de la prueba a ratas expuestas a dosis
sensibilizante de Omeprazol 10 mg durante 4 dias antes de la
administración de indometacina por SOG.
O8 = Medición y observación de la prueba a ratas expuestas a dosis
de Omeprazol 10 mg después de la administración de
indometacina por SOG.
O9, O10 = Medición y observación de la prueba, antes y después, a
ratas expuestos a agua destilada de 4 ml
X1 = Variable dependiente, concentración del látex de V gotas/250
mL
X2 = Variable dependiente, concentración del látex de IX gotas/250
mL
X3= Variable dependiente, concentración del látex de XVIII
gotas/250 mL
38
X4= Uso de omeprazol 10 mg.
- = Uso de agua destilada a 4 ml.
3.4. Técnicas e instrumentos de investigación.
La técnica utilizada para este modelo, fue la observación y como
instrumento, fichas de registro de datos (Anexo 1).
3.5. Procesamiento y análisis de datos.
Los procedimientos que guiaron esta investigación fueron:
1º. Se solicitó permiso de la comisión de ética por medio de la
presentación de documentos(39). (Anexo 6)
2º. Adquisición de plantas de Lechero Africano - Synadenium grantii
(Euphorbiaceae): En un inicio, fue obtenida de los campos – viveros
de Chosica - Lima y cultivada en domicilio por un periodo de 2 años.
Luego, por la cantidad requerida de muestra vegetal, se tomó
conocimiento de la existencia de plantones de Synadenium grantii
(Euphorbiaceae) identificadas y clasificadas en el Jardín Botánico de
Trujillo, ubicado en Av. América Sur Cuadra 38, Trujillo 13 008;
solicitando el permiso verbal de los cuidadores se obtuvo una muestra
del látex de 300ml; éste se extrajo haciendo pequeños cortes en el
tallo del árbol en forma de “V” y al desprender hojas del tallo.
Previamente se realizó una limpieza para evitar una contaminación y
una vez extraído el producto se guardó en un reciente, conservándose
en un refrigerador hasta su uso.
3º. Se solicitó permiso para usar un espacio en un ambiente anexo de
laboratorio de farmacología en la Universidad Privada Antenor Orrego
para las ratas. (Anexo 4)
39
4º. Se solicitó permiso para usar el laboratorio de farmacología en el
pabellón M. (Anexo 4)
5º. Se financió la alimentación y cuidados de los 30 especímenes en el
ambiente anexo de laboratorio de farmacología en la Universidad
Privada Antenor Orrego.
6º. Se redactó el informe de progreso a los 3 meses de aprobado el
proyecto de investigación.
7º. Se supervisó la administró de una dieta con los requerimientos
básicos en la dieta de las ratas de laboratorio, con una composición
proteica del 17%, grasa mínima 7%, fibra mínima 5%, lo cual permitió
el adecuado crecimiento y mantenimiento de las ratas adultas;
además de cumplir con sus requerimientos hídricos.
8º. Se aclimató a los especímenes, en jaulas de metal con restos de
madera y periódico, en condiciones de temperatura e iluminación
adecuada, además de alimentos y agua ad libitum. Se observó su
comportamiento, para descartar problemas.
9º. Para los grupos experimentales y control de 25 ratas, las cuales se
pesaron, codificaron y se realizó un muestreo por conveniencia en
grupos, mínimo de 5 ratas por grupo.
10º. Se administró las sustancias químicas a los respectivos grupos de
experimentación con el fin de evitar que las ratas tengan una reacción
alérgica secundaria durante la inducción de lesiones gástricas
inflamatorias y observar efectos adversos no deseados. Durante 4
días, mediante un sondaje orogástrico con Sonda N° 4 y una Jeringa
3 o 5 mL para poder llevar una cuenta especifica de la cantidad a
administrar.
40
11º. En la inducción de lesiones gástricas se utilizó el método
Djhanguri(40,41), el mismo señala que para administrar la
Indometacina se debe diluir en agua y luego introducir vía sonda
orogástrica en dosis de 75 mg/kg por un mínimo de 6 horas.
12º. Antes de la administración de la indometacina, las ratas estuvieron en
ayuno durante 12 horas. Para cada grupo experimental, se tuvo en
cuenta que estuvieron previamente sensibilizados (4 días antes del
experimento).
13º. Para el primer grupo experimental, se diluyó V gotas/250 mL de agua
destilada, para administrar 3 mL mediante sondaje orogástrico
durante 4 días y en el último día (día 5), fue seguido de una
administración de indometacina 15 mg en 3 mL.
14º. Para el segundo grupo experimental, se diluyó IX gotas/250 mL de
agua destilada, para administrar 3 mL mediante sondaje orogástrico
durante 4 días y en el último día, fue seguido de una administración
de indometacina 15 mg en 3 mL.
15º. Para el tercer grupo experimental, se diluyó XVIII gotas/250 mL de
agua destilada, para administrar 3 mL mediante sondaje orogástrico
durante 4 días y en el último día, fue seguido de una administración
de indometacina 15 mg en 3 mL.
16º. Para el cuarto grupo experimental, se diluyó 10 mg de Omeprazol en
5 mL de agua destilada con bicarbonato, para administrar mediante
sondaje orogástrico durante 4 días y en el último día, fue seguido de
una administración de indometacina 15 mg en 3 mL.
17º. Para el quinto grupo, control, solo se le administró agua destilada 4
mL y se le indujo lesiones gástricas con indometacina 15 mg en 3 mL
de agua destilada por sondaje orogástrico.
41
18º. Luego del tratamiento, se procedió a sedar a las ratas con éter en un
espacio sin entrada de aire en aproximadamente 6 minutos para luego
aplicar dislocación cervical aplicando presión en la base del cráneo y
la columna cervical; luego se realizó una laparotomía y se extrajo
estómago. Mediante una incisión en la curvatura menor fue lavado
con agua destilada en una placa petri y fijada en un tecnopor con
alfileres para poder observar los cambios en su morfología.
19º. Se evaluó coloración y tamaño de las lesiones gástricas inflamatorias
del estómago. Se realizó una evaluación macroscópica del estómago
de la rata, con el objetivo de analizar la severidad del daño tisular,
cuantificar y medir tejido lesionado mediante la escala de
Marhuenda(40)
20º. Para el análisis estadístico e interpretación de datos se siguieron los
siguientes pasos:
- Los datos registrados en cuaderno de campo y en las fichas de
observación se sintetizaron y almacenaron en una base de datos
EXCEL
- Los datos luego fueron procesados a través del software estadístico
IBM SPSS versión 25.0, contando con el apoyo de un profesional en
estadística.
- Los resultados procesados se presentan en el informe en tablas y
gráficos estadísticas y en respuesta a los objetivos de la
investigación.
- Para la prueba de hipótesis se ha utilizado la prueba de FISHER, por
el tamaño de la muestra, la cual que nos permitió evaluar el efecto in
vivo del látex del Synadenium grantii para reducir las lesiones
gástricas al inducirlas con indometacina.
42
IV. PRESENTACIÓN DE RESULTADOS
4.1. Análisis de resultados:
Para la determinación de la seguridad del látex diluido del Synadenium grantii
(Euphorbiaceae) administrado durante 5 días, como tratamiento preventivo de
lesiones gástricas inflamatorias inducidas con indometacina en dosis de 75 mg/kg
vía sondaje orogástrico; se evaluó sus efectos adversos previos y posterior a esta;
a los grupos experimentales 1,2,3; encontrándose en la macroscopía lo siguiente:
Tabla N° 01: Porcentaje de inhibición del Synadenium grantii y Omeprazol en
lesiones gástricas inflamatorias inducidas con indometacina en los grupos
experimentales (1,2,3,4) y control de Rattus norvegicus var. albinus.
Fuente: Cuadro estadístico (base de datos de las fichas de observación)
En la Tabla N°01 se observó que en el grupo 2 de experimentación, en dosis de
3mL de IX gotas de látex de Synadenium grantii (Euphorbiaceae) en 250 mL de
agua destilada, presentó un porcentaje de inhibición de lesiones gástricas
inflamatorias, del 6,25%; en comparación con Omeprazol que expuso un
porcentaje de inhibición de lesiones gástricas inflamatorias del 40,63%.
Se cualificó y cuantificó los efectos adversos, previa y posteriormente a la
inducción de lesiones gástricas inflamatorias, verificándose lo siguiente:
Grupos de estudio Porcentaje de Inhibición
GE1: 3mL de V gotas de látex de Synadenium grantii (Euphorbiaceae) en 250 mL de agua destilada + Indometacina 75
mg/kg.
-6,25
GE2: 3mL de IX gotas de látex de Synadenium grantii (Euphorbiaceae) en 250 mL de agua destilada + Indometacina 75
mg/kg. 6,25
GE3: 3mL de XVIII gotas de látex de Synadenium grantii (Euphorbiaceae) en 250 mL de agua destilada + Indometacina 75
mg/kg. 3,13
GE4: 5mL de 10 mg de Omeprazol en 10 mL de agua destilada por via orogástrica + Indometacina 75 mg/kg.
40,63
GC: 4mL de agua destilada + Indometacina 75 mg/kg. 0,00
43
Gráfico N° 01: Efectos adversos de la administración de 3mL (V gotas de látex de
Synadenium grantii (Euphorbiaceae)/250 mL de agua destilada) en el GE1, previo
a la inducción de las lesones gástricas inflamatorias.
Fuente: Cuadro estadístico (base de datos de las fichas de observación)
Se observó en el Gráfico N° 01, un 20% pérdida de peso y apetito, aislamiento y
taquipnea posterior a la administración del látex. Un 40% presentaron un aumento
de frecuencia cardiaca y tremores; un 60% resultaron dóciles a la manipulación.
Finalmente, un 20% de los especímenes falleció con movimientos tónico clónicos al
segundo día de administración posterior a la administración del látex del
Synadenium grantii (Euphorbiaceae).
Gráfico N° 02: Efectos adversos de la administración de 3mL (IX gotas de látex de
Synadenium grantii (Euphorbiaceae)/250 mL de agua destilada) en el GE2, previo
a la inducción de las lesones gástricas inflamatorias.
Fuente: Cuadro estadístico (base de datos de las fichas de observación)
44
Se observa en el Gráfico N°02, un 20% de especímenes experimentaron pérdida de
peso y apetito, aislamiento. Un 40% presentaron taquipnea; un 60% presentó
aumento de frecuencia cardiaca. Finalmente, un 20% de los especímenes falleció
con movimientos tónico clónicos al quinto día, posterior a la administración del látex
de Synadenium grantii (Euphorbiaceae).
Gráfico N° 03: Efectos adversos de la administración de 3mL (XVIII gotas de látex
de Synadenium grantii (Euphorbiaceae)/250 mL de agua destilada) en el GE3,
previo a la inducción de las lesones gástricas inflamatorias.
Fuente: Cuadro estadístico (base de datos de las fichas de observación)
En el Gráfico N°03, se observó en un 60% pérdida de peso y apetito. Un 20%
presentó prurito en orejas y hemorragia externa en el 3er día de administración
y un 80% presentó aumento en la frecuencia cardiaca. No se reportó
fallecimientos en este grupo posterior a la administración del látex o
indometacina.
45
Gráfico N° 04: Efectos adversos de la administración de 5mL de 10 mg de
Omeprazol/5 mL de agua destilada en el GE4, previo a la inducción de las
lesones gástricas inflamatorias.
Fuente: Cuadro estadístico (base de datos de las fichas de observación)
En el Gráfico N°04, se observó un 20% de los especímenes perdieron peso con
pérdida de apetito. Se reportó un fallecimiento en este grupo durante la noche
del 3er día; se reemplazó por la rata 18-b.
Gráfico N° 05: Efectos adversos de la administración de 4mL de agua destilada
en el GC, previo a la inducción de las lesones gástricas inflamatorias.
Fuente: Cuadro estadístico (base de datos de las fichas de observación)
Se observa en el Gráfico N° 05 que en el grupo control no se presentaron efectos
adversos en los 5 dias de la administración continua de agua destilada por vía
orogástrica.
46
En vista de que el efecto adverso más significativo fue la frecuencia cardiaca en
los 3 primeros grupos anteriormente mencionados; se realizó una comparación
entre el promedio de los valores previos, al minuto y a los 5 minutos, durante los
5 días, en los 4 grupos experimentales y control.
Gráfico N° 06: Efecto del látex de Synadenium grantii sobre la frecuencia
cardiaca con valores previos y al minuto en 25 Rattus norvegicus var. albinus
versus omeprazol y agua destilada
Fuente: Cuadro estadístico (base de datos de las fichas de observación)
Se observa en el gráfico N°06, que al administrar varias diluciones de látex de
Synadenium grantii de V gotas (Grupo 1), IX gotas (Grupo 2), XVIII gotas/250 mL
de agua destilada (Grupo 3), Omeprazol 10mg/5mL de agua destilada (Grupo 4)
y grupo control con solo agua destilada (Grupo 5); se evidenció un aumento en
el promedio de la frecuencia cardiaca en los 3 primeros grupos al administrar las
sustancias al minuto de la administración, progresivo, dependiente de la dosis; y
no se observó este incremento con el omeprazol y el grupo control con agua
destilada.
Además, en el control a los 5 minutos en los mismos grupos, se pudo constatar
y verificar el aumento en el promedio de la frecuencia cardiaca:
47
Gráfico N° 07: Efecto del látex de Synadenium grantii sobre la frecuencia
cardiaca con valores previos y a los 5 minutos, en 5 Rattus norvegicus var.
albinus versus omeprazol y agua destilada
Fuente: Cuadro estadístico (base de datos de las fichas de observación)
En el gráfico N° 07, al verificar la frecuencia cardiaca a los 5 minutos en los
mismos grupos; se evidencia una persistencia en el aumento del promedio de la
frecuencia cardiaca en los 3 primeros grupos, progresivo, dependiente de la
dosis; y no se observó este incremento con el omeprazol y el grupo control con
agua destilada.
Tabla N° 02: Tasa de mortalidad de cada grupos experimentales (1,2,3,4) y control
de Rattus norvegicus var. albinus.
Fuente: Cuadro estadístico (base de datos de las fichas de observación)
Como se puede apreciar, la tasa de mortalidad en el grupo experimental que
presentó acción en el tratamiento de lesiones gástricas inflamatorias, fue del 20%
del total de sus especímenes. El total de fallecidos antes de la acción de la
indometacina fue de 3 especímenes, que fueron reemplazados.
Grupos de estudio N° de fallecidos Número de
ratas Tasa de
Mortalidad
Grupo 1 1 5 20%
Grupo 2 1 5 20%
Grupo 3 0 5 0%
Grupo 4 1 5 20%
Grupo 5 0 5 0%
Total 3 25 12%
48
4.2. Docimasia de Hipótesis.
Hi: La dosis de látex, por debajo de la concentración del fármaco de control,
presenta seguridad en el tratamiento de lesiones gástricas
inflamatorias, inducidas a Rattus norvegicus var. Albinus.
Ho: La dosis de látex, por debajo de la concentración del fármaco de control,
no presenta seguridad en el tratamiento de lesiones gástricas
inflamatorias, inducidas a Rattus norvegicus var. Albinus.
Tabla N° 03: Resultado de datos cruzados grupos de estudio y su seguridad
.Fuente: Cuadro estadístico (base de datos de las fichas de observación)
Según los resultados de la tabla de doble entrada de las dos variables, se
evidencia que del grupo experimental 2, presenta un 60% de efectos adversos
evidenciables en total posterior a la administración del látex diluido; comparable
con el 80% de seguridad que ofrece el Omeprazol y el grupo control con agua
destilada e indometacina. Cabe resaltar que el grupo tratado con IX gotas de
látex en 250 mL (siendo un cuádruple de dosis usada normalmente en humanos),
presentó solo una seguridad del 20% en total.
Tabla cruzada Efecto*Grupo
Grupo de estudio Total
GE1 GE2 GE3 GE4 GC
Seguridad
SI Recuento 2 2 0 4 5 11
% dentro de Grupo
40.0% 40.0% 0.0% 80.0% 100.0% 44.0%
NO Recuento 3 3 5 1 0 12
% dentro de Grupo
60.0% 60.0% 100.0% 20.0% 0.0% 48.0%
Total
Recuento 5 5 5 5 5 25
% dentro de Grupo
100.0% 100.0% 100.0% 100.0% 100.0% 100.0%
49
Tabla N° 04: Prueba de hipótesis
En la tabla N° 04 se presentan los resultados de pruebas comparadas de
significancia; según los resultados de la prueba chi cuadrado, los valores
esperados son mayores a 5 en el 100%; por lo tanto la prueba Chi cuadrado
pierde consistencia (el máximo permitido es del 30%), por lo que se aplicó la
prueba estadística F de Fisher, que tiene un valor de F = 8.652 con nivel de
significancia mayor al 0,05 (p = 0,084 > 0.05), como p > 0,05 se decide entonces
aprobar la hipótesis nula (Ho), rechazándose la hipótesis alterna (H1).
Pruebas comparadas de significancia
Valor gl Significación
asintótica (bilateral)
Significación exacta
(bilateral) Chi-cuadrado de
Pearson 8,974a 4 ,062 ,084
Razón de verosimilitud
11,149 4 ,025 ,084
Prueba exacta de Fisher
8,652 ,084
N de casos válidos 25
a. 10 casillas (100,0%) han esperado un recuento menor que 5. El recuento mínimo esperado es 2,40.
50
V. DISCUSIÓN
Con el objetivo de determinar la dosis de látex del Synadenium grantii que
presenta actividad protectora en lesiones gástricas inflamatorias, se observa en
la Tabla N° 01 que el máximo nivel de inhibición de lesiones gástricas
inflamatorias fue de 6,25%, correspondiente al grupo experimental de 3mL de IX
gotas de 250 mL de agua destilada, siendo una dosis del doble que se utiliza
tradicionalmente; sin embargo no se aprecia un efecto inhibitorio en el grupo
tratado con 3 mL de V gotas de látex con 250 mL de agua, teniendo un porcentaje
negativo de 6,25%, el cual es el tratamiento que se utiliza y se viene promoviendo
para el consumo humano; además no se evidencia que al aumento de
concentración se incremente el porcentaje de inhibición de la sustancia en los
especímenes. Al respecto Ortencio (1997), describió el uso del látex del
Synadenium grantii desde los años 80 en las poblaciones indígenas
brasileñas(6); de forma diluida a una concentración de XVIII gotas en un litro,
para diversas enfermedades de carácter inflamatorio en especial para lesiones
gástricas. Por su parte, Latansio de Oliveira (2013) planteó que el mismo modelo
de administración se empezó a adoptar en el este de Panamá y se extendió en
la población brasileña como medicina tradicional, adicionando que el tratamiento
consistía en consumir todo el litro de agua en un periodo de 2-3 dias(8).
Actualmente se está comercializando en diversas plataformas: propiedades,
testimonios, preparación y formas de presentación (cápsulas, bebidas con la
concentración de XVIII gotas en un litro o venta de látex puro a costos muy altos).
Estos resultados, coinciden en parte con Costa y col (2012), encontraron que el
látex del Synadenium grantii diluido presentaba una actividad similar del 6% de
inhibición con el modelo etanólico(9); resaltando que en este caso solo se utilizó
una concentración de XVIII gotas por litro, que realizando un preparado similar
con 250 mL se utilizó V gotas en 250mL, siendo para nuestro caso un porcentaje
de inhibición negativo de 6.25% con modelo de Indometacina 75 mg/kg. Este
resultado además podría deberse al cambio de suelo del país y/o a la
concentración de los metabolitos activos en el látex del Synadenium grantii
cultivado en Perú a comparación de la bibliografía que fue en Brasil.
51
En la misma tabla, se observa que el porcentaje de inhibición más alto fue del
40,63%, correspondiente al grupo 4 tratado con dosis de 10 mg de Omeprazol;
siendo evidenciable su efecto protector frente a las lesiones inducidas por
Indometacina a dosis de 75mg/kg. Es decir, el Omeprazol mantiene un alto
porcentaje de inhibición frente a las dosis diluidas del látex de Synadenium
grantii, debido a pertenecer a la familia de los inhibidores de bombas de
protones, quienes logran suprimir en gran medida la producción de ácido en un
80-95% por la inactivación de las bombas de Hidrogeno y Potasio ATPasa(14).
Consecuentemente, en relación con el objetivo específico de determinar los
efectos adversos del látex de Synadenium grantii con actividad frente a lesiones
gástricas inflamatorias, inducidas; se elige el Gráfico N°02 debido a que presentó
la mayor actividad frente a la inducción de lesiones gástricas de los 3 grupos
diluidos del látex. Se evidenció que el mayor efecto adverso fue un 60%
especímenes con aumento en la frecuencia cardiaca posterior a la
administración del látex; además un 40% presentaron un patrón respiratorio
incrementado y el fallecimiento de un espécimen posterior a la inducción de
lesiones gástricas inflamatorias. Al respecto Cunha, realizó una investigación
toxicológica del látex diluido y puro, concluyendo en su investigación que la
dilución no representa toxicidad, en cambio sí lo era el látex puro en un crustáceo
denominado Artemia salina; además en otras investigaciones poco han sido el
reporte de los efectos adversos dependientes del látex como son las
investigaciones de Thais, Campos, Gomes y Jesuino (8,12,33,34). Se reportó un
efecto adverso dependiente de reacción de hipersensibilidad tipo 1 por Docampo
y col en el año 2010, un incidente por ingesta de tallos y hojas con un cuadro
clínico de eritrodermia. Para evitar una reacción similar, se le administró a las
ratas el compuesto 4 dias previos a la inducción de las lesiones gástricas para
descartar reacciones de tipo anafilaxia(13).
Con respecto a los Gráficos N° 01, 03 de los grupos tratados con 3 ml de solución
diluida de látex al V y XVIII gotas cada uno; al corresponder con su porcentaje
de inhibición de la Tabla N° 01 no representan un mayor porcentaje de inhibición
a comparación del grupo tratado con IX gotas; sin embargo, es conveniente
remarcar el aumento del porcentaje de 40%, 60%, 80% en la presencia de la
52
frecuencia cardiaca aumentada en los grupos tratados con V gotas, IX gotas,
XVIII gotas evidenciado en los Gráficos 01, 02, 03, 06, 07 constatando que este
signo observado con frecuencia está en relación directa con la dosis del látex.
Los resultados obtenidos coinciden con diversos estudios que identifican la
presencia de sustancias denominadas bufadienolides en el látex de la familia
Euphorbiaceae, las cuales presentan una actividad muy similar a la digoxina,
logrando inhibir la bomba de Sodio y Potasio ATPasa del corazón ocasionando
la salida del ion Sodio y posterior entrada del ion Calcio(6,9,34); produciendo así
una contracción miocárdica, un aumento en la frecuencia cardiaca, evidenciado
en el 60% de las ratas.
En las mismas tablas, se observa que la pérdida de peso fue una constante en
3 grupos experimentales (Gráficos N° 01, 02, 03) del 20% de los especímenes.
Además, la mayor pérdida de peso se observó en el grupo 3, con un 60% en el
total del grupo. Esto se podría pensar en dos teorías; la primera que la práctica
invasiva orogástrica, con el fin de administrar mililitros y dosis exactas, produce
un grado de estrés en los especímenes que producían una pérdida de apetito
constante y baja de peso consiguiente. La segunda, corresponde a un efecto de
deshidratación o inanición posterior a la administración del látex debido a un
efecto secundario al aumento de la frecuencia cardiaca.
Otro efecto adverso fue la agitación respiratoria posterior a la administración de
las sustancias en los grupos experimentales tratados con 3mL de látex de V y IX
gotas, con un porcentaje de 20 y 40% respectivamente. No se observó estos
efectos adversos en los otros grupos experimentales. Esto se corrobora con el
uso de sondaje orogástrico y algunos intentos fallidos de colocación de este
método invasivo en los mismos especímenes.
Además, se aprecian efectos adversos relacionados con el ayuno que
experimentaron más de 12 horas, los especímenes del grupo tratado con 3mL
de látex diluido en 250 mL en un 40% de esta población. No se observó estos
efectos adversos en los otros grupos experimentales. Esto se corrobora con la
aparición de tremores luego de un ayuno de más de 12 horas(42), esto se realizó
previo al experimento para evitar que exista contenido gástrico que pueda
53
disminuir la concentración o acción de las sustancias en la mucosa gástrica. Al
momento de la administración de las sustancias este grupo tuvo un promedio de
ayuno de ± 15 horas.
Con la observación periódica de los 4 grupos experimentales y el grupo control,
se evidenció una alteración en la postura y en el comportamiento; con la
alteración de la postura en solo los dos primeros grupos experimentales (1 y 2),
en el 20% cada uno; resultando en efectos aislados. Luego de la administración,
se constató que, en el primero grupo, presentaron un 60% de docilidad a la
manipulación; y en el grupo experimental tratado con 3 mL de látex a IX gotas
en 250 mL, presentaron 40% de respuesta dócil a la manipulación. No se
observó estos efectos adversos en los otros grupos experimentales tratados con
látex a XVIII gotas, Omeprazol o agua destilada en el Gráfico N° 05 y 06. Esto
se teoriza con introducir una sonda invasiva orogástrica, produciría un leve grado
de estrés agudo en los especímenes que producen una alteración del
comportamiento inicial, alejamiento de las demás ratas del grupo aleatorio,
además que producía desorganización de su ambiente con respecto a sus
compañeros de jaula.
Se reportó un efecto de hipersensibilidad tipo 1, evidenciado como prurito en
oreja, rascado y posterior sangrado postero-externo en el 20% del grupo tratado
con 3mL de látex a concentraciones de XVIII gotas en 250 mL. Al respecto Abbas
y Kumar describieron a los alergenos, los cuales necesitan de al menos 2
procesos de exposición para generar un proceso de hipersensibilidad alérgica,
dependientes de la liberación de prostaglandinas D2, leucotrienos C4, D4. Estas
sustancias producen broncoespasmo, vasodilatación periférica y quimiotácticos
con aumento de la permeabilidad vascular dependiente de la exposición al
alergeno(22,43). Por su parte, Harrison y Robins describieron un conjunto de
reacciones alérgicas características de este proceso como es la urticaria, rinitis
alérgica, asma alérgico y shock anafiláctico(43,44). Estos resultados, coinciden
con Do Campo y col quienes describieron un caso clínico por ingesta del
Synadenium grantii, generando eritrodermia y edema bipalpebral(13). Con esto
se confirma que este efecto adverso presenciado en el día tres de la
administración de la sustancia correspondería a una reacción alérgica.
54
Con el propósito de explicar el objetivo específico: determinar la tasa de
mortalidad del látex de Synadenium grantii con actividad frente a lesiones
gástricas inflamatorias, inducidas; en la tabla N° 02, se observa que el grupo que
tuvo mayor actividad frente a las lesiones gástricas inflamatorias, tuvo una tasa
de mortalidad del 20% en el grupo tratado con IX gotas de Synadenium grantii
en 250 mL, comparable con el grupo tratado con V gotas de Synadenium grantii.
Al respecto, en ningún artículo revisado se ha evidenciado este porcentaje de
toxicidad debido a su administración de tipo ad libitum, como es en los
experimentos llevados a cabo por Campos, Thais, Jesuino y Gomes(8,12,33,34)
y no por vía orogástrica como la realizada en ésta investigación. La forma de
muerte de los especímenes probablemente se debería a una reacción tóxica,
producto de la administración del látex diluido, debido a los movimientos
espasmódicos tónico-clónicos previos a su muerte, adicionado que en el
momento de las necropsias no se encontraron mayores alteraciones que
indiquen otras causas.
Finalmente, con el resultado de datos cruzados entre grupo de estudios y su
seguridad, en la Tabla N° 03 y 04 se establece una prueba de hipótesis, la cual
nos da un valor de 0,084 con la prueba exacta de Fisher para muestras
pequeñas. Con esto se sobrepasa en valor a p, decidiendo aprobar la hipótesis
nula y determinar que la dosis de látex con un porcentaje de inhibición no
representa seguridad frente al tratamiento de lesiones gástricas inflamatorias
inducidas con indometacina en Rattus norvegicus var. albinus.
55
VI. CONCLUSIONES
Después de analizar y discutir los resultados se concluye que:
• El látex de Synadenium grantii (Euphorbiaceae) a dosis de 3mL de IX
gotas de látex de Synadenium grantii (Euphorbiaceae) en 250 mL de agua
destilada, tiene actividad en el tratamiento de lesiones gástricas
inflamatorias inducidas por Indometacina. Además, esta actividad está
representada por un mínimo porcentaje de inhibición frente al grupo
tratado con Omeprazol, siendo un 6,25% frente a un 40.63%
respectivamente.
• El grupo con el mayor porcentaje de inhibición de lesiones gástricas
inflamatorias (6%) del látex de Synadenium grantii (Euphorbiaceae)
presenta como mayor efecto adverso el aumento en la frecuencia
cardiaca.
• La tasa de mortalidad del grupo con actividad en el tratamiento de lesiones
gástricas inflamatorias inducidas fue del 20%.
56
VII. RECOMENDACIONES
Finalizando con esta investigación se recomienda:
• Profundizar esta investigación con análisis histopatológico de las células
miocárdicas posterior a la administración de látex de Synadenium grantii.
• No consumir el látex de Synadenium grantii (Euphorbiaceae) en humanos
de manera empírica, sin mayores estudios que corroboren o refuten la
toxicidad encontrada en este estudio.
• Que las empresas que están comercializando; promuevan y financien
investigaciones a raíz de estos resultados antes de vender sus productos
de manera empírica sin un control de salud.
• Sensibilizar a la población para evitar el consumo y sin un control médico.
VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
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35. Hernández Sampieri R, et al. Metodología de la investigación. México, D.F.: McGraw-Hill Education; 2014.
36. Fuentes Paredes F de M, et al. Guía de manejo y cuidado de animales de laboratorio: ratón. Lima: Ministerio de Salud, Instituto Nacional de Salud; 2010.
37. Fentener van Vlissingen JM, Borrens M, Girod A, Lelovas P, Morrison F, Torres YS. The reporting of clinical signs in laboratory animals: FELASA Working Group Report. Lab Anim. octubre de 2015;49(4):267–83.
38. Guevara A., Marín C: Manual de Prácticas Fisiopatología. En: Manual de Prácticas Fisiopatología. Universidad Nacional de Trujillo. Perú; 2011. p. 12–4.
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60
41. Arroyo J, et al. Efecto citoprotector y antisecretor del aceite de Copaifera officinalis en lesiones gástricas inducidas en ratas. An Fac Med. el 10 de diciembre de 2012;70(2):89.
42. Harpers Illustrated Biochemistry. 31a ed. McGraw-Hill Education; 2018.
43. Kumar V, Abbas A, Aster J. Patología Estructural y Funcional - Robbins y Cotran. 9a ed. Vol. 1. Barcelona, España; 2015.
44. Kasper D, et al. Principios de Medicina Interna - Harrison. 19a ed. Vol. 2. McGraw-Hill Education; 2015.
61
ANEXOS
Anexo 01: Instrumentos de recolección de datos
Ficha de Observación 1
Registro de variación de peso luego de la administración de tratadas con 3 mL
de V gotas de látex (0,225mL) en 250 mL de agua destilada (por SOG).
Ficha de observación 2
Registro de reacciones adversas luego de la administración de 3 mL de V gotas
de látex (0,225mL) en 250 mL de agua destilada (por SOG).
Grupo Experimental
1
DIA 1:
3mL
DIA 2:
3mL
DIA 3:
3mL
DIA 4:
3mL
DIA 5:
3mL SEXO
RATA 1 210gr 210gr 210gr 205gr 200gr Femenino
RATA 2 200gr 200gr 200gr 200gr 200gr Femenino
RATA 3 200gr 210gr 200gr 200gr 200gr Femenino
RATA 4 180gr 180gr Fallecida Fallecida Fallecida Femenino
RATA 5 200gr 200gr 200gr 200gr 200gr Femenino
Grupo
Experimental
1
DIA 1: 3mL DIA 2: 3mL DIA 3: 3mL DIA 4: 3mL DIA 5: 3mL
1
minuto
5
minutos
10
minutos
1
minuto
5
minutos
10
minutos
1
minuto
5
minutos
10
minutos
1
minuto
5
minutos
10
minutos
1
minuto
5
minutos
10
minutos
RATA 1 Ninguna Ninguna Hiporexia Ninguna Ninguna
RATA 2 Ninguna Ninguna Ninguna Ninguna Tremores
RATA 3 Ninguna Ninguna Ninguna Ninguna Ninguna
RATA 4 Ninguna
Taquicárdica, Agitada,
Inotropismo indirecto (+), Aislamiento espontaneo, dócil,
decaimiento, hiporexia.
Fallecida luego de 4 horas de
administración del 2do día:
Fallecida Fallecida
123 110 82
RATA 5 Ninguna Ninguna Ninguna Ninguna Tremores
62
Ficha de observación 3
Registro de resultado histopatológicos después de inducir lesiones gástricas
con Indometacina 75mg/kg + tratadas con 3 mL de V gotas de látex (0,225mL)
en 250 mL de agua destilada (por SOG).
G
R
U
P
O
Número
de
lámina
Peso
de la
rata
Resultados histopatológicos después de inducir lesiones gástricas
Grupo
Experimental 01
Macroscopía
Lesiones Gástricas
Decoloración
de mucosa Edema
Pérdida
de
pliegues
de
mucosa
Número
de
Equimosis Petequias
Número
de
eritemas
Puntos
hemorrágicos
Número
de filas
de
petequias
Lesión
Petequial
<1mm
Lesión
Petequial
≥1mm
Lesiones
Ulcerativas >
5mm
Total Puntaje
1 Muestra 4 200gr (+/+++) ++ ++ 3 42 0 0 4 39 4 0 42 6
2 Muestra 1 200gr (++/+++) + + 2 18 0 0 1 10 8 1 18 7
3 Muestra 3 200gr (+++/+++) - - 0 38 1 0 0 28 10 0 38 5
4 Muestra 5 180 gr (+++/+++) +++ +++ 0 6 1 1 0 6 0 1 7 8
5 Muestra 2 200gr (+/+++) ++ ++ 2 25 0 3 0 24 1 0 28 8
63
Anexo 02: Evidencia de la ejecución:
64
65
66
67
68
69
70
71
72
73
74
75
76
77
78
Anexo 03: Resolución que aprueba el proyecto de investigación
79
Anexo 04: Constancia de la Institución u organización donde se ha desarrollado
la propuesta de investigación
80
Anexo 05: Constancia del asesor(a)
81
Anexo 06: Resolución del comité de ética