uji ha (hemaglutinationassay)vlm.ub.ac.id/pluginfile.php/45254/mod_resource/content/1... · 2020....
TRANSCRIPT
![Page 1: UJI HA (HemaglutinationAssay)vlm.ub.ac.id/pluginfile.php/45254/mod_resource/content/1... · 2020. 4. 27. · Hasil Mikroplate dimiringkan, dan dibaca dari bawah plate. Jika dimiringkan](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022060811/60900c1baf60a01fbe550672/html5/thumbnails/1.jpg)
UJI HA(Hemaglutination Assay)
Laboratorium Mikrobiologi dan ImunologiVeteriner
Fakultas kedokteran hewanUniversitas brawijaya
![Page 2: UJI HA (HemaglutinationAssay)vlm.ub.ac.id/pluginfile.php/45254/mod_resource/content/1... · 2020. 4. 27. · Hasil Mikroplate dimiringkan, dan dibaca dari bawah plate. Jika dimiringkan](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022060811/60900c1baf60a01fbe550672/html5/thumbnails/2.jpg)
Pengertian
Uji serologis untuk mendeteksi mikrooganisme yang memiliki glikoprotein permukaan hemaglutinin dan sertauntuk mengukur titer mikroorganisme tersebut.
Ag bentuk partikel direaksikan dengan Ab spesifikmembentuk Aglutinasi
Faktor yang mempengaruhi: Muatan listrikprotein,molaritas medium,vaksositas media,danfenomena prozone
![Page 3: UJI HA (HemaglutinationAssay)vlm.ub.ac.id/pluginfile.php/45254/mod_resource/content/1... · 2020. 4. 27. · Hasil Mikroplate dimiringkan, dan dibaca dari bawah plate. Jika dimiringkan](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022060811/60900c1baf60a01fbe550672/html5/thumbnails/3.jpg)
TujuanUntuk mengukur titer mikroorganisme (ag) yaitu
kemampuan m.o untuk menginfeksi yang ditandaidengan adanya hemaglutinasi eritrosit
Mengetahui keberadaan virus yang mampumenghemaglutinasi RBC.
![Page 4: UJI HA (HemaglutinationAssay)vlm.ub.ac.id/pluginfile.php/45254/mod_resource/content/1... · 2020. 4. 27. · Hasil Mikroplate dimiringkan, dan dibaca dari bawah plate. Jika dimiringkan](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022060811/60900c1baf60a01fbe550672/html5/thumbnails/4.jpg)
Prinsip kerjaMikroorganisme yang memiliki glikoprotein
permukaan hemaglutinin dapat dideteksi melaluiadanya reaksi eritrosit yang mengalamihemaglutinasi setelah diberi antigen.
![Page 5: UJI HA (HemaglutinationAssay)vlm.ub.ac.id/pluginfile.php/45254/mod_resource/content/1... · 2020. 4. 27. · Hasil Mikroplate dimiringkan, dan dibaca dari bawah plate. Jika dimiringkan](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022060811/60900c1baf60a01fbe550672/html5/thumbnails/5.jpg)
![Page 6: UJI HA (HemaglutinationAssay)vlm.ub.ac.id/pluginfile.php/45254/mod_resource/content/1... · 2020. 4. 27. · Hasil Mikroplate dimiringkan, dan dibaca dari bawah plate. Jika dimiringkan](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022060811/60900c1baf60a01fbe550672/html5/thumbnails/6.jpg)
Alat danBahan
ALAT
Mikropipet berbentukU
Mikropipet
Yellow dan Blue Tip
Plastic Wrap
Mechanical Vibrator
BAHAN
PBS Steril
Antigen : ND
Eritrosit Ayam 0.5%
![Page 7: UJI HA (HemaglutinationAssay)vlm.ub.ac.id/pluginfile.php/45254/mod_resource/content/1... · 2020. 4. 27. · Hasil Mikroplate dimiringkan, dan dibaca dari bawah plate. Jika dimiringkan](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022060811/60900c1baf60a01fbe550672/html5/thumbnails/7.jpg)
LangkahKerja
→Diisi sumuran pada mikroplet berbentuk u (A1-A12) dengan PBS sebanyak 25μl
→Dimasukan antigen sebanyak 25μl ke sumuranA1
→Dilakukan pengenceran berseri dengan caramengambil 25μl antigen dari sumuran pertama(A1) yang dilanjutkan ke sumuran berikutnya(A2) sampai sumuran akhir (A11), Lalu sisa 25μl dibuang.
→Ditambah semua sumuran dengan eritrosisayam 0.5% sebanyak 25 μl.
→Dicampur eritrosit dan antigen menggunakanmechanical vibrator, lalu diinkubasi pada suhuruangan 30 menit. (Sumuran A12 berfungsisebagai kontrol negatif yang hanya berisi PBS dan eritrosis sehingga tidak terjadi aglutinasi)
→Dibaca titer antigen setelah 30 menit
![Page 8: UJI HA (HemaglutinationAssay)vlm.ub.ac.id/pluginfile.php/45254/mod_resource/content/1... · 2020. 4. 27. · Hasil Mikroplate dimiringkan, dan dibaca dari bawah plate. Jika dimiringkan](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022060811/60900c1baf60a01fbe550672/html5/thumbnails/8.jpg)
Hasil
Mikroplate dimiringkan, dan dibaca dari bawah plate. Jika dimiringkan ada aliran sel darah merah (tilt and flow)
![Page 9: UJI HA (HemaglutinationAssay)vlm.ub.ac.id/pluginfile.php/45254/mod_resource/content/1... · 2020. 4. 27. · Hasil Mikroplate dimiringkan, dan dibaca dari bawah plate. Jika dimiringkan](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022060811/60900c1baf60a01fbe550672/html5/thumbnails/9.jpg)
Hemaglutinasi terlihat sebagai aglutinat, berupa lapisaneritrosit secara merata pada dasar sumuran denganpenjernihan dari cairan bagian atas, dan tidak terjadipengendapan eritrosit (berbentuk titik) di tengah dasarsumuran.
InterpretasiHasil
![Page 10: UJI HA (HemaglutinationAssay)vlm.ub.ac.id/pluginfile.php/45254/mod_resource/content/1... · 2020. 4. 27. · Hasil Mikroplate dimiringkan, dan dibaca dari bawah plate. Jika dimiringkan](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022060811/60900c1baf60a01fbe550672/html5/thumbnails/10.jpg)
- Sumuran 1 sampai 6 menunjukan hasil positif (terjadiaglutinasi
- Sumuran 7 sampai 12 menunjukan hasil negatif
tilt and flow
InterpretasiHasil
![Page 11: UJI HA (HemaglutinationAssay)vlm.ub.ac.id/pluginfile.php/45254/mod_resource/content/1... · 2020. 4. 27. · Hasil Mikroplate dimiringkan, dan dibaca dari bawah plate. Jika dimiringkan](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022060811/60900c1baf60a01fbe550672/html5/thumbnails/11.jpg)
InterpretasiHasil
![Page 12: UJI HA (HemaglutinationAssay)vlm.ub.ac.id/pluginfile.php/45254/mod_resource/content/1... · 2020. 4. 27. · Hasil Mikroplate dimiringkan, dan dibaca dari bawah plate. Jika dimiringkan](https://reader033.vdocuments.site/reader033/viewer/2022060811/60900c1baf60a01fbe550672/html5/thumbnails/12.jpg)