uji daya hambat sari daun komba-komba chromolaena … uji daya hambat hil… · judul “uji daya...

i

UJI DAYA HAMBAT SARI DAUN KOMBA-KOMBA

(Chromolaena odorata)TERHADAP PERTUMBUHAN

BAKTERI Staphylococcus aureus

KARYA TULIS ILMIAH

Diajukan Sebagai Salah Satu Syarat Untuk menyelesaikan Pendidikan

Diploma III Analis Kesehatan Politeknik Kesehatan Kendari

OLEH :

MUH. HILMAN AL KASMIN

P00341015023

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA

POLITEKNIK KESEHATAN KENDARI

JURUSAN ANALIS KESEHATAN

2018

v

RIWAYAT HIDUP

A. Identitas Diri

Nama :Muh. Hilman Al Kasmin

NIM : P00341015023

Tempat, dan Tgl, Lahir : Lipu, 31 Oktober 1996

Suku / Bangsa : Buton / Indonesia

Jenis Kelamin : Laki-Laki

Agama : Islam

B. Pendidikan

1. SD Negeri 15 Kulisusu, tamat tahun 2009

2. SMP Negeri 6 Kulisusu, tamat tahun 2012

3. SMA Negeri 1 Kulisusu, tamat tahun 2015

4. Sejak tahun 2015 melanjutkan pendidikan di Politeknik Kesehatan

Kemenkes Kendari Jurusan Analis Kesehatan.

vi

MOTTO

Sukses itu gampang,

Tergantung kita ingin mencapainya dengan cara apa,

Tukang cukur bisa sukses dengan bermodalkan alat cukur,

Petinju bisa sukses dengan bermodalkan kekuatan,

Pemain bola bisa sukses dengan bermodalkan keahlian,

Sule bisa sukses dengan bermodalkan bicara

Jadi suskses itu gampang tergantung diri anda ingin mencapainya seperti apa,

Hidup itu simpel jangan di bawa susah,

Sekarang waktunya diri kamu untuk menunjukan kepada dunia kalau kamu bisa,

Salam sukses

Kupersembahkan untuk almamaterku

Ayah dan ibuku tercinta

Keluargaku tersayang

Doa dan Nasehat Untuk Kesuksesanku

vii

ABSTRAK

Muh. Hilman Al Kasmin Uji Daya Hambat Sari Daun Komba-Komba

(Chromolaena odorata) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus

aureus.Jurusan D III Analis Kesehatan Poltekkes Kemenkes Kendari. Yang

dibimbing oleh ibu Reni Yunus dan ibu Satya Darmayani. (xii + 72 halaman

+ 9 gambar + 1 tabel + 7 lampiran). Komba-komba (Chromolaena odorata)

adalah tanaman yang memiliki kandungan sebagai antibakteri karena mengandung

senyawa alkaloid, flavonoid, tannin, fenol, triterpenoid, saponin dan steroid dan

digunakan sebagai obat luka infeksi. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui

daya hambat sari daun komba – komba (Chromolaena odorata) terhadap

pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dan untuk mengetahui daya hambat

paling besar terdapat pada konsentrasi berapa. Jenis penelitian ini adalah

eksperimental laboratories. Metode yang digunakan adalah difusi agar dengan 5

perlakuan konsentrasi yaitu konsentrasi sari daun komba-komba (Chromolaena

odorata) 20%, 40%, 60%, 80% dan 100% dan kontrol positif (tetrasiklin) dan

kontrol negatif (aquadest) dengan pengujian dilakukan 2 kali pengulangan. Hasil

penelitian didapatkan zona hambat sari daun komba – komba (Chromolaena

odorata) terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus pada konsentrasi

20% sebesar 2 mm, konsentrasi 40% sebesar 3,7 mm, konsentrasi 60% sebesar 4,7

mm, konsentrasi 80% sebesar 6,2 mm dan konsentrasi 100% sebesar 8 mm.

Kesimpulan adalah sari daun komba-komba (Chromolaena odorata) dapat

menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus zona hambat yang

paling besar terdapat pada konsentrasi 100% namun besar daya hambat yang

terbentuk masih tergolong resisten atau lemah tetapi efektif dalam menghambat

pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus.. Disarankan untuk dapat melakukan

penelitian lanjutan tentang uji daya hambat dengan menggunakan variasi

konsentrasi yang lebih tinggi untuk mendapatkan hasil uji daya hambat yang besar

atau efektif.

Kata Kunci : Chromolaena odorata, S. aureus, aktivitas antibakteri

Daftar Pustaka : 37 buah (1986-2017)

viii

KATA PENGANTAR

Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT, yang telah melimpahkan

rahmat dan hidayah-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dengan

judul “Uji Daya Hambat Sari Daun Komba – Komba (Chromolaena odorata)

Terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus aureus”. Penelitian ini disusun

dalam rangka melengkapi salah satu syarat untuk menyelesaikan pendidikan

program diploma III (DIII) pada Politeknik Kesehatan Kemenkes Kendari Jurusan

Analis Kesehatan.

Rasa hormat, terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Ayahanda Alwi dan

ibunda tercinta Hasmin atas semua bantuan moral maupun material, motivasi,

dukungan dan cinta kasih yang tulus serta doanya demi kesuksesan studi yang

penulis jalani selama menuntut ilmu sampai selesainya karya tulis ini.

Proses penulisan karya tulis ilmiah ini melewati perjalanan panjang dan

penulis banyak mendapat petunjuk dan bimbingan dari berbagai pihak. Oleh

karena itu pada kesempatan kali ini penulis menghanturkan rasa terima kasih

kepada ibu Reni Yunus, S.Si.,M.Sc selaku pembimbing I dan ibu Satya

Darmayani, S.Si., M.Eng selaku pembimbing II yang telah meluangkan waktu

dan pikirannya dengan penuh kesabaran dan tanggung jawab guna memberikan

bimbingan serta petunjuk kepada penulis dalam proses penyusunan karya tulis

ilmiah hingga dapat terselesaikan. Ucapan terima kasih penulis juga tunjukan

kepada:

1. Askrening, SKM.,M.Kes, Selaku Direktur Poltekkes Kemenkes Kendari

2. Kepala Badan Penelitian dan Pengembangan Provinsi (BALITBANG) yang

telah memberikan izin penelitian kepada penulis dalam penelitian ini.

3. Anita Rosanty, SST.,M.Kes, Selaku Ketua Jurusan Analis Kesehatan

Poltekkes Kemenkes Kendari dan Penguji I dan Supiati, STP.,MPH.,

Penguji II yang telah membimbing dan mengarahkan saya dalam penyusunan

KTI ini.

ix

4. Dosen Poltekkes Kemenkes Kendari Jurusan Analis Kesehatan atas segala

fasilitas dan pelayanan akademik yang diberikan selama penulis menuntut

ilmu.

5. Seluruh rekan-rekan mahasiswa Politeknik Kesehatan Kendari khususnya

Jurusan Anlis Kesehatan 2015 penulis yang tak bisa sebutkan satu persatu

atas motivasinya masukan, dukungan selama mengikuti pendidikan di

Politeknik Kesehatan Kendari Jurusan Analis Kesehatan.

Ahir kata, penulis berharap kepada Tuhan Yang Maha Esa agar berkenan

membalas segala kebaikan semua pihak yang telah membantu penulis. Semoga

Karya Tulis Ilmiah ini membawa manfaat bagi pengembangan ilmu.

Kendari, 04 Juli 2018

Penulis

x

DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL ............................................................................................. i

HALAMAN PERNYATAAN ORISINALITAS ................................................. ii

HALAMAN PERSETUJUAN ............................................................................ iii

HALAMAN PENGESAHAN ............................................................................. iv

RIWAYAT HIDUP .............................................................................................. v

MOTTO .............................................................................................................. vi

ABSTRAK .......................................................................................................... vii

KATA PENGANTAR ....................................................................................... viii

DAFTAR ISI ........................................................................................................ x

DAFTAR GAMBAR .......................................................................................... xii

DAFTAR TABEL ............................................................................................. xiii

DAFTAR LAMPIRAN ..................................................................................... xiv

BAB I PENDAHULUAN

A. Latar Belakang ........................................................................................... 1 B. Rumusan Masalah ....................................................................................... 3 C. Tujuan Penelitan .......................................................................................... 3 D. Manfaat Penelitian ....................................................................................... 3

BAB II TINJAUAN PUSTAKA

A. Tinjauan Umum Tentang Daun Komba-Komba .......................................... 4 B. Tinjauan Umum Tentang Staphylococcus aureus ......................................... 8 C. Tinjauan Umum Tentang Aktifitas Antibakteri .......................................... 10 D. Tinjauan Umum Tentang Pemeriksaan Uji Daya Hambat .......................... 12 E. Tinjauan Umum Tentang Uji Daya Hambat Antibakteri ............................ 16

BAB III KERANGKA KONSEP

A. Dasar Pemikiran ........................................................................................ 19 B. Bagan Kerangka Pikir ............................................................................... 20 C. Variabel Penelitian .................................................................................... 21 D. Definisi Operasional dan Kriteria Objektif ................................................. 21

BAB IV METODE PENELITIAN

A. Jenis Penelitian .......................................................................................... 22 B. Waktu dan Tempat Penelitian .................................................................... 22 C. Subjek Penelitian ....................................................................................... 22 D. Bahan Uji .................................................................................................. 22 E. Prosedur Kerja ........................................................................................... 23 F. Analisis Data ............................................................................................. 28 G. Pengolahan Data ........................................................................................ 28 H. Penyajian Data........................................................................................... 28

xi

BAB V HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN

A. Gambaran Umum Lokasi Penelitian .......................................................... 29 B. Hasil Penelitian ......................................................................................... 29 C. Pembahasan .............................................................................................. 31

BAB VI KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan .............................................................................................. 35 B. Saran ........................................................................................................ 35

DAFTAR PUSTAKA

LAMPIRAN - LAMPIRAN

xii

DAFTAR GAMBAR

Gambar 1.1 Komba-komba (Chromolaena odorata) ............................................. 4

Gambar 1.2 Morfologi tumbuhan Komba-komba (Chromolaena

odorata) ............................................................................................ 5

Gambar 1.3 Staphylococcus aureus ...................................................................... 8

Gambar 1.4 Rumus dan penentuan zona hambat ................................................. 18

Gambar 1.5 Kontrol positif dan negatif zona hambat .......................................... 30

Gambar 1.6 Konsentrasi 20%, 40% dan 60% daya hambat pada P1 .................... 30

Gambar 1.7 Konsentrasi 80% dan 100% daya hambat pada P1 ........................... 30

Gambar 1.8 Konsentrasi 20% dan 40% daya hambat pada P2 ............................. 31

Gambar 1.9 Konsentrasi 60%, 80% dan 100% pada P2 ....................................... 31

xiii

DAFTAR TABEL

Tabel 5.1 Hasil Pengukuran zona hambat sari daun komba-komba

(Chromolaena odorata) terhadap pertumbuhan bakteri

Staphylococcus aureus ................................................................. 29

xiv

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1 Surat Izin Penelitian dari Poltekkes Kemenkes Kendari

Lampiran 2 Surat Izin dari Badan Penelitian dan Pengembangan Daerah

Provinsi Sulawesi Tenggara

Lampiran 3 Surat Keterangan Bebas Pustaka

Lampiran 4 Surat Keterangan Telah Melakukan Penelitian

Lampiran 5 Lembar Tabel Hasil Penelitian

Lampiran 6 Lembar Tabulasi Data

Lampiran 7 PerhitunganPembuatanKonsentrasi

Lampiran 8 Dokumentasi Penelitian

1

BAB I

PENDAHULUAN

A. Latar Belakang

Indonesia merupakan negara tropis yang memiliki keanekaragaman

hayati yang tinggi sehingga menjadikan Indonesia memiliki banyak tanaman

yang digunakan oleh masyarakat sebagai obat tradisional. Di Indonesia

terdapat sekitar 30.000 jenis tanaman dan 7000 diantaranya memiliki khasiat

sebagai obat. Keanekaragaman sumberdaya hayati Indonesia menempati

urutan kedua setelah Brasil (Jumiarni, 2017).

Semua jenis tanaman telah lama menjadi sasaran sebagai pencarian obat

baru. Perkembangan penggunaan obat khususnya dari tumbuh-tumbuhan

untuk membantu meningkatkan derajat kesehatan masyarakat. Salah satu

manfaat penggunaan obat dari tanaman-tanaman tersebut adalah tanaman

komba-komba atau kirinyuh (Chromolaena odorata) yang digunakan sebagai

antibakteri (Awoyinka, 2007).

Komba - komba (Chromolaena odorata) atau biasa disebut dengan

kirinyuh atau tekelan adalah gulma berbentuk semak berkayu yang dapat

berkembang cepat atau pertumbuhannya yang cepat sehingga sulit

dikendalikan. Tumbuhan ini berfungsi sebagai bahan insektisida nabati untuk

mengendalikan beberapa jenis mikroorganisme karena mengandung

Pryrrolizidine alkaloids yang bersifat racun terhadap serangga dan tumbuhan

ini sering digunakan diberbagai masyarakat sebagai obat luka infeksi

(Thamrin, 2013).

Indonesia merupakan negara tropis sehingga prevalensi penyakit infeksi

yang disebabkan oleh bakteri sampai saat ini masih tetap tinggi. Salah satu

bakteri yang menginfeksi luka pada kulit adalah bakteri Staphylococcus

aureus. Bakteri Staphylococcus aureus menginfeksi luka, jerawat, bisul dan

lain-lain. Luka tersebut biasanya diobati dengan antibiotik yang dapat

menghambat inflamasi dan membunuh bakteri, contohnya tetrasiklin,

eritromisin, cloromfenicol, doksisiklin dan klindamisin. Namun obat-obat ini

2

memiliki efek samping yaitu membuat iritasi kulit pada luka atau pada

jerawat, sementara penggunaan antibiotik jangka panjang selain dapat

menimbulkan resistensi juga dapat menimbulkan kerusakan organ dan imuno

hipersensitivitas (Djajadisastra, 2009).

Prevalensi kejadian infeksi penyakit kulit semakin meningkat.

Berdasarkan hasil penelitian Nindya Nugerahdita 2009 tentang prevalensi

penyakit kulit dan pengobatan pada daerah Petamburan Jakarta pusat

didapatkan hasil penelitian menunjukan prevalensi penyakit kulit sebesar

(47,57%) dari 103 keluarga yang diamati di kelurahan Petamburan Jakarta

pusat dengan penyakit kulit terbanyak disebabkan oleh jamur sebesar

(71,43%) dan sisanya disebabkan oleh bakteri sebesar (28,57%).

Di era sekarang ini banyak tanaman yang dapat digunakan sebagai obat

tradisional untuk mengatasi berbagai penyakit termasuk infeksi, karena

banyak orang beranggapan bahwa penggunaan obat tradisional relatif lebih

aman dibandingkan dengan obat yang berasal dari bahan kimia. Salah satu

diantara tanaman yang dapat digunakan sebagai obat adalah tanaman komba-

komba atau kirinyuh. Daun komba-komba atau kirinyuh (Chromolaena

odorata) mengandung senyawa alkaloid, flavonoid, tanin, fenol, triterpenoid,

saponin dan steroid yang memiliki fungsi masing-masing dalam menghambat

pertumbuhan mikroorganisme atau antibakteri (Dalimartha, 2000).

Penelitian sebelumnya menunjukan bahwa salep ekstrak daun komba-

komba atau kirinyuh pada konsentrasi 20% memiliki efek dalam

mempercepat penyembuhan luka sayat ayam petelur (Rahman, 2017).

Berdasarkan kandungan antibiotik yang terdapat pada sari daun komba-

komba (Choromolaena odorata) yang mempunyai khasiat sebagai

antibakteri, peneliti tertarik untuk melakukan penelitian tentang “uji daya

hambat sari daun komba-komba (Choromolaena odorata) terhadap

pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus”.

3

B. Rumusan Masalah

Adapun rumusan masalah dalam penelitian ini adalah apakah sari daun

komba - komba (Chromolaena odorata) efektif dalam menghambat

pertumbuhan Staphylococcus aureus?

C. Tujuan Penelitian

1. Tujuan Umum

Untuk mengetahui daya hambat sari daun komba-komba

(Chromolaena odorata) terhadap pertumbuhan Staphylococcus aureus.

2. Tujuan Khusus

a. Untuk mengetahui daya hambat sari daun komba - komba


Staphylococcus aureus pada konsentrasi 20%, 40%, 60%, 80% dan

100%.

b. Untuk mengetahui konsentrasi yang efektif dari sari daun komba-

komba (Chromolaena odorata) terhadap pertumbuhan bakteri

Staphylococcus aureus.

D. Manfaat Penelitian

1. Manfaat Teoritis Penelitian

Manfaat Teoritis Penelitian yaitu menambah informasi bagi ilmu

pengetahuan, khususnya dalam bidang Analis Kesehatan dan Farmasi

mengenai kandungan sari daun komba-komba (Chromolaena odorata)

yang bisa menghambat pertumbuhan Staphylococcus aureus.

2. Manfaat Praktis Penelitian

a. Penelitian ini dapat meningkatkan kualitas ilmu dalam bidang

mikrobiologi dan pengembangan profesi Analis Kesehatan.

b. Dapat digunakan sebagai landasan dalam pembuatan antibiotik

c. Dapat digunakan sebagai landasan riset penelitian selanjutnya

d. Dapat digunakan sebagai obat tradisional untuk penyembuhan luka.

4

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

A. Tinjauan Umum Tentang Tanaman Komba-Komba

1. Pengertian

Komba-komba (Chromolaena odorata) atau biasa disebut dengan

Kirinyuh atau Tekelan adalah gulma berbentuk semak berkayu yang

dapat berkembang cepat atau pertumbuhannya yang cepat sehingga sulit

dikendalikan. Tumbuhan ini dapat digunakan sebagai obat luka tanpa

menimbulkan bengkak, tumbuhan ini berfungsi juga sebagai bahan

insektisida nabati untuk mengendalikan beberapa jenis mikroorganisme

karena mengandung Pryrrolizidine alkaloids yang bersifat racun terhadap

serangga (Thamrin, 2013).

Gambar1.1 Komba-Komba (Chromolaena odorata) Medicinal

Plants (Koehler, 1887)

2. Klasifikasi Tumbuhan Komba-Komba (Chromolaena odorata)

Kingdom : Plantae

Super Divisi : Spermatophyta

Divisi : Magnoliophyta

Kelas : Magnoliopsida

Sub Kelas : Asteridae

Ordo : Asterales

Famili : Asteraceae

Genus : Chromolaena

Spesies : Chromolaena odorata (L.) King & H. E. Robins.

5

3. Morfologi

Gambar 1.2 Morfologi Tumbuhan Komba-Komba (Chromolaena

odorata)Medicinal-Plants (Koehler, 1887)

Komba-Komba (Chromolaena odorata) atau Tekelan atau

Kirinyuh merupakan tumbuhan obat luka dan daunnya juga mempunyai

khasiat sebagai peluruh air seni. Tumbuhan tersebut merupakan jenis

eksotik yang berasal dari Meksiko. Jenis ini mempunyai kemampuan

beradaptasi yang baik terhadap kondisi lingkungannya karena tidak

memerlukan syarat kesuburan tanah yang tinggi. Penyebarannya dengan

bantuan angin karena bijinya ringan dan banyak (Thamrin, 2013).

Tumbuhan komba-komba atau kirinyuh (Chromolaena odorata)

bersinonim dengan Eupatorium odoratum di Buton Utara tanaman ini

dikenal sebagai komba-komba, di Sunda tanaman ini dikenal sebagai

kirinyuh, di Bugis tanaman ini dikenal sebagai lahuna dan di Jawa

tanaman ini dikenal sebagai tekelan tetapi tanaman ini lebih familiar

dengan nama kirinyuh (Choromolaena odorata) (Sagala, 2009).

Tumbuhan komba-komba atau kirinyuh (Chromolaena odorata)

memiliki bentuk daun oval dan bagian bawahnya lebar makin keujung

makin runcing seperti bangun segitiga. Panjang daun 6-10 cm dan

lebarnya 3-6 cm, tepi daun bergerigi menghadap ke pangkal dan warna

daun hijau tua dan memiliki permukaan daun yang berbulu halus dan

rapat. Jenis daun majemuk menyirip genap, dimana terdapat dua anak

helaian daun yang berpasang – pasangan di kanan-kiri ibu tangkai,

6

namun daun tumbuhan ini juga merupakan majemuk gasal ganda tidak

sempurna (Apriani, 2012).

4. Kandungan Daun Komba-Komba (Choromolaena odorata)

Bagian tumbuhan komba-komba atau kirinyuh (Chromolaena

adorata) yang bagus dalam pengujian daya hambat adalah daun yang

masih muda dn berwarna hijau karena mengandung senyawa kimia

seperti tannin, flavonoid, saponin, alkaloid¸ triterpenoid, steroid, fenol,

dan essential oil dari daun komba-komba atau kirinyuh memiliki

kandungan α-pinene, cadine, camphora, limonene, β-caryophyllene dan

candinol isomer (Dalimartha, 2000).

Tannin bekerja dengan cara mengerutkan dinding sel, membran sel

bakteri dan denaturasiprotein dan faktor-faktor yang dapat menghambat

pertumbuhan bakteri meliputi temperatur, Ph, cahaya dan nutrisi yang

terdapat dalam media pertumbuhan bakteri. Tannin menurut Robinson

(1995) berfungsi sebagai adstringen yang dapat menyebabkan penciutan

pori-pori kulit, menghentikan eksudat dan pendarahan yang ringan,

sehingga mampu menutupi luka dan mencegah pendarahan yang biasa

timbul pada luka. Menurut Ajizah (2007) tannin diduga dapat

mengkerutkan dinding sel sehingga mengganggu permeabilitas sel.

Flavonoid berfungsi sebagai bakteriostatik dan mekanisme

kerjanya mendenaturasi protein sel bakteri dan dapat merusak membran

sitoplasma (Aulia, 2008). Aktifitas farmakologi dari flavonoid adalah

sebagai anti inflamasi, analgesi, anti oksidan. Mekanisme anti inflamasi

terjadi melalui efek penghambatan pada jalur metabolisme asam

arakhidona, pembentukan prostaglandin, pelepasan histamin pada radang

(Loggia dkk, 1986). Flavonoid berfungsi sebagai anti bakteri dengan cara

membentuk senyawa kompleks terhadap protein ekstraseluler yang

mengganggu integritas sel bakteri. Flavonoid merupakan senyawa fenol

sementara senyawa fenol dapat bersifat koagulator protein

(Dwidjoseputro D, 1994).

7

Saponin menurut Harbone (1987) bekerja sebagai antimikroba.

Saponin memiliki kemampuan sebagai pembersih dan antiseptik yang

berfungsi membunuh atau mencegah pertumbuhan mikroorganisme yang

biasa timbul pada luka sehingga luka tidak mengalami infeksi yang berat.

Senyawa saponin dapat bekerja sebagai bakteriostatik dengan cara

merusak membran sitoplasma (Aulia, 2008).

Alkaloid berfungsi sebagai antibakteri dengan mengganggu

komponen penyusun peptidoglikan pada sel bakteri sehingga lapisan

dinding sel tidak terbentuk secara utuh dan menyebabkan kematian sel

(Kurniawan 2015).

Triterpenoid berfungsi sebagai antibakteri dengan cara

menghambat pertumbuhan bakteri dengan membentuk ikatan polimer

yang kuat sehingga mengakibatkan rusaknya porin yang akan

menyebabkan bakteri kekurangan nutrisi (Dalimartha, 2000).

Steroid sebagai anti radang yang mampu mencegah kekakuan dan

nyeri. Walaupun senyawa steroid dan flavonoid ini sama-sama bersifat

anti inflamasi namun flavonoid lebih mempercepat penyembuhan luka

dibandingkan steroid. Hal ini disebabkan karena kemampuan flavonoid

mencegah oksidasi dan menghambat zat yang bersifat racun yang bisa

timbul pada luka (Simanjutak, 2008).

Fenol berfungsi sebagai anti oksidan yaitu mampu menghambat

dan mencegah proses pertumbuhan sel mikroba karena mempunyai

tingkat keasaman yang tinggi sehingga dapat mendenaturasi atau

merusak sruktur sel bakteri (Dwidjoseputro D, 1994). Menurut Hadi dkk

(2000), bahwa dalam ekstrak daun komba-komba atau kirinyuh terdapat

%66 senyawa monoterpene dan %28 sesquiterpene. Selain itu, kirinyuh

juga mengandung %1711 α-pinene, %8,245,12 cymene, dan %6,10

thymylacetate.

8

B. Tinjauan Umum Tentang Staphylococcus aureus

1. Pengertian

Staphylococcus aureus merupakan bakteri pathogen penting pada

manusia yang dapat menimbulkan berbagai kasus penyakit seperti infeksi

kulit, keracunan makanan, endokarditis, pneumonia, osteomiolitis, sepsis

arthritis dan encephalitis. Staphylococcus aureus dapat ditemukan

dilingkungan masyarakat seperti udara, debu, kotoran, air, susu,

makanan, tempat makan, manusia dan hewan. Manusia dan hewan

merupakan tempat berkumpulnya bakteri tersebut. Kebanyakan pada

individu yang sehat Staphylococcus aureus dapat ditemukan dalam

saluran pernafasan, rambut dan kulit (Brooks GF, 2005).

Gambar 1.3 Staphylococcua aureus (Apriyadi, 2018).

2. Klasifikasi Staphylococcus aureus

Klasifikasi Staphylococcus aureus adalah (Brooks dkk. 2005). :

Domain : Bacteria

Kingdom : Eubacteria

Phylum : Firmicutes

Class : Bacilli

Ordo : bacillales

Family : Staphylococcaceae

Genus : Staphylococcus

Spesies : Staphylococcus aureus

9

3. Morfologi

Staphylococcus aureus merupakan bakteri gram positif berbentuk

bulat (kokus) yang tersusun dalam bentuk tandan (kelompok-kelompok)

tidak teratur seperti buah anggur. Bentuk ini berkaitan dengan

kemampuannya untuk berkembang dalam beberapa media. Pada biakan

cair kadang berbentuk kokus tunggal, berpasangan, tetrad, atau rantai.

Staphylococcus aureus tidak membentuk spora, tidak bergerak, dan

beberapa strain memiliki kapsul. Habitat Staphylococcus aureus adalah

kulit manusia. Penularannya melalui udara dan debu, terutama pada

lingkungan rumah sakit sering menjadi karier (carrier) utama

Staphylococcus aureus. Selain itu, dapat bertransmisi melalui tangan dan

ujung-ujung jari (Samaranayake, 2012).

Staphylococcus aureus tumbuh dengan baik pada berbagai media

bakteri dalam suasana aerobik atau mikroaerofilik. Genus

Staphylococcus aureus tahan terhadap kondisi kering, panas (dapat tahan

pada temperatur 500c selama 30 menit), tumbuh dengan cepat pada

temperatur 370c. Namun pembentukan pigmen yang terbaik adalah pada

temperatur kamar (20-350c). Pada media padat, koloni berbentuk bulat,

lembut, dan mengilat. Staphylococcus sp aktif melakukan metabolisme,

melakukan fermentasi karbohidrat, menghasilkan asam laktat dan

menghasilkan bermacam-macam pigmen dari warna putih, abu-abu,

kuning gelap atau keemasan, serta tidak menghasilkan gas. Sebagian

Staphylococcus aureus merupakan flora normal kulit dan mukosa

manusia. Staphylococcus aureus yang patogen sering menghemolisis

darah, mengkoagulasi plasma dan menghasilkan berbagai enzim

ekstraseluler dan toksin. Akibat pengaruh obat seperti penisilin,

Staphylococcus mengalami lisis (Brooks, 2005).

Staphylococcus aureus biasanya tumbuh dalam bentuk koloni

warna abu-abu atau kuning atau keemasan. Berbagai macam tingkat

hemolisis dihasilkan oleh Staphylococcus aureus dan kadang oleh spesies

lain. Staphylococcus aureus menghasilkan katalase positif sehingga

10

membedakannya dengan Streptococcus sp yang menghasilkan katalase

negatif. Setelah itu, Staphylococcus aureus menghasilkan koagulasi

positif sehingga membedakannya dari spesies lain (Brooks GF dkk,

2005).

4. Patofisiologi

Prototipe lesi Staphylococcus aureus merupakan furunkel yang

terlokalisasi kelompok-kelompok Staphylococcus aureus menetap pada

folikel rambut yang ada pada permukaan kulit sehingga menimbulkan

nekrosis jaringan. Koagulase dihasilkan dan membekukan fibrin di

sekeliling lesi dan didalam limfatik, mengakibatkan pembentukan suatu

dinding yang membatasi proses dan diperkuat melalui akumulasi sel-sel

inflamasi, dan kemudian jaringan fibrosa. Didalam pusat lesi, terjadi

pencairan jaringan nekrotik dan abses menunjuk kearah area yang

resistensinya paling sedikit. Drainase pusat cairan jaringan nekrotik

diikuti oleh pengisian lambat kavitas dengan jaringan granulasi dan

penyembuhan akhirnya.

Abses merupakan khas infeksi Staphylococcus aureus. Dari setiap

fokus, organisme dapat menyebar melalui limfatik dan aliran darah

kebagian lain tubuh. Staphylococcus aureus dapat menyebabkan

pneumonia, meningitis, empiema, endokarditis, atau sepsis (Jawetz,

2010).

C. Tinjauan Umum Tentang Aktivitas Antibakteri

1. Pengertian

Aktivitas antibakteri adalah kadar terkecil yang dibutuhkan oleh agen

antibakteri untuk menghambat pertumbuhan mikroorganisme. Nilai dari

aktivitas tersebut disebut Kadar Hambat Minimum (KHM). Agen

antibakteri di klasifikasikan sebagai bakteriostatik, bakterisid, dan

bakteriolisis bergantung dari efek yang di timbulkan terhadap kultur

bakteri. Bakteriostatik biasanya menghambat sintesis protein dan berikatan

dengan ribosom bakteri. Banyak antibiotik bekerja dengan mekanisme

tersebut. Sedangkan agen bakteriosid akan berikatan kuat dengan target

11

dan tidak hilang bila diencerkan, membunuh bakteri tanpa merusak sel.

Agen bakteriosid biasanya juga merupakan bakteriolisis, membunuh

dengan melisiskan sel dan melepaskan komponen sitoplasma. Agen

bakteriolisis termasuk pula antibiotik yang menghambat sintesis dinding

sel seperti penisilin dan bahan kimia seperti detergen yang dapat memecah

membran sitoplasma bakteri. Pada umumnya bakteri gram positif dapat

dipengaruhi dan bakteri gram negatif mudah resisten. Hanya kurang dari

satu persen dari ribuan antibiotik digunakan secara klinis. Hal ini

disebabkan karena toksisitas atau kurangnya kemampuan Uptake host.

Namun antibiotik alami dapat digunakan dan dimodifikasi untuk

meningkatkan efikasi (Madigan, 2009).

Setiap jenis antibakteri memiliki mekanisme kerja tersendiri dalam

menghambat pertumbuhan mikroorganisme, mekanisme kerja antibakteri

adalah sebagai berikut :

a. Menghambat Sintesis Dinding Sel

Bakteri memiliki lapisan luar yang kaku, yaitu dinding sel. Dinding

sel menjaga bentuk dan ukuran mikroorganisme, yang memiliki

tekanan osmosis internal yang tinggi. Kerusakan pada dinding sel atau

inhibisi dari pembentukannya akan menyebabkan lisisnya sel. Contoh

antibakteri dengan mekanisme kerja ini adalah penisilin, sefalosporin,

vankomisin, basitrasin, sikloserin, dan ampisilin.

b. Menghambat Fungsi Membran Sel

Sitoplasma semua sel hidup dibatasi oleh membran sitoplasma

yang berfungsi sebagai sawar permeabilitas yang selektif, melakukan

transport aktif, sehingga mengontrol komposisi di dalam sel. Jika

integritas dari membran plasma terganggu, makromolekul dan ion

akan keluar dari sel, menyebabkan kerusakan atau kematian sel.

12

c. Menghambat Sintesis Protein

Untuk kelangsungan hidupnya bakteri membutuhkan protein.

Sintesis protein berlangsung didalam ribosom. Bakteri memiliki

ribosom 70S yang terdiri dari 2 sub unit, yaitu 30S dan 50S. Gangguan

pada sub unit ribosom tersebut dapat mengganggu proses protein.

d. Menghambat Sintesis Asam Nukleat

Contoh obat yang bekerja dengan mekanisme ini adalah kuinolon,

primetamin, rifampin, sulfonamid, trimethoprim, dan trimetrexate.

Rifampin menghambat pertumbuhan bakteri dengan berikatan kuat

dengan RNA bakteri. Golongan kuinolon dan fluorokuinolon

menghambat sintesis DNA bakteri dengan menghambat DNA girase.

Untuk banyak mikroorganisme, p-aminobenzoic acid (PABA)

merupakan metabolit yang esensial. PABA merupakan prekursor untuk

sintesis asam nukleat. Sulfonamid merupakan struktur analog dari

PABA dan menghambat dihydropteroate synthetase (Jawetz, 2007).

2. Pengukuran Zona Hambat

Aktivitas antibakteri dinyatakan positif apabila terbentuk zona

hambat bening disekeliling kertas cakram. Bagian yang dihitung dengan

mistar adalah diameter dari zona hambat yang terbentuk (Pratiwi, 2008).

Berdasarkan zona hambat yang terbentuk maka aktivitas antibakteri

dapat digolongkan menjadi beberapa golongan yaitu antibakteri yang

tergolong resisten (zona hambat ≤ 12 mm), intermediate (zona hambat

antara 13-17 mm), sensitifitas (zona hambat antara ≥ 18 mm) (Bachtiar,

2012).

D. Tinjauan Umum Tentang Pemeriksaan Uji Daya Hambat

1. Media Pertumbuhan

Media adalah bahan yang terdiri dari campuran zat-zat makanan

(nutrisi) baik bahan alami atau pun buatan yang diperlukan

mikroorganisme untuk perkembangbiakan di Laboratorium secara

invitro. Mikroorganisme dapat memanfaatkan nutrisi media berupa

molekul-molekul kecil yang dirakit untuk menyusun komponen sel.

13

Syarat media yang baik harus berupa molekul-molekul rendah dan

mudah larut dalam air, nutrient dalam media harus memenuhi kebutuhan

dasar mikroorganisme yang meliputi air, karbon, energi, mineral dan

faktor tumbuh, tidak mengandung zat-zat penghambat dan media harus

steril (Yuniarti, 2012).

Tujuan menggunakan media yaitu dengan media pertumbuhan

dapat dilakukan isolasi mikroorganisme menjadi kultur murni, dapat

menginokulasikan mikroorganisme dari sampel pemeriksaan dan

digunakan sebagai tempat untuk menyimpan stok mikroorganisme.

Mikroorganisme untuk kehidupannya membutuhkan bahan-bahan

organik dan anorganik dari lingkungannya. Bahan-bahan disebut

nutrient (zat gizi) sedangkan proses penyerapanya disebut proses nutria.

Peran utama nutrient adalah :

a. Sumber energi

b. Bahan pembangun sel

c. Sebagai aseptor elektron dalam reaksi bioenergenetik (Yuniarti,

2012).

Medium harus mengandung nutrient yang memenuhi kebutuhan

dasar makhluk hidup yang meliputi air, karbon, energi, mineral dan

faktor tumbuh. Faktor tumbuh yang mendukung pertumbuhan

mikroorganisme, selain nutrient adalah tekanan osmosis, derajat

keasaman (pH), temperatur, serta sterilitas (Capucino, 2013).

2. Perkembangbiakan Bakteri atau Penanaman Bakteri (Kultur Bakteri)

Pembiakan bakteri diperlukan untuk mempelajari sifat bakteri

untuk dapat mengidentifikasi, determinasi atau diferensiasi jenis-jenis

yang ditemukan. Pertumbuhan ketahanan bakteri tergantung pada

pengaruh luar, seperti makanan (nutrisi), atmosfer, suhu, konsentrasi, ion

hydrogen, cahaya dan berbagai zat kimia yang dapat menghambat atau

membunuh.

Media kultur bakteri adalah suatu bahan yang terdiri atau

campuran nutrisi yang digunakan untuk menumbuhkan mikroorganisme

14

diatas atau didalamnya. Selain itu, media kultur mikroba dapat di

pergunakan pula untuk isolasi, perbanyakan, pengujian sifat-sifat

fisiologis dan perhitungan jumlah mikroorganisme.

Medium pembiakan yang digunakan untuk mengembangbiakan

bakteri di laboratorium dapat dibedakan dalam beberapa medium yaitu:

a. Medium Pembiakan Dasar

Medium pembiakan dasar adalah medium pembiakan

sederhana yang mengandungzat-zat umum yang diperlukan oleh

sebagian besar mikroorganisme dan dipakai juga sebagai komponen

dasar untuk membuat pembiakan lain seperti media Nutrient Agar

(NA) merupakan suatu media yang berbentuk padat, yang merupakan

perpaduan antara alamiah dan senyawa-senyawa kimia. Nutrient

Agar (NA) merupakan suatu media yang mengandung sumber

nitrogen dalam jumlah yang cukup yang dapat digunakan untuk

budidaya bakteri, untuk perhitungan mikroorganisme dalam air,

limbah, kotoran, dan bahan lainnya. Komposisi Nutrient Agar (NA)

terdiri ekstra daging sapi 3 gram, pepton 5 gram dan Agar 15 gram.

Pada Nutrient Agar (NA) ekstrak daging sapi dan pepton

digunakan sebagai bahan dasar karena merupakan sumber protein,

nitrogen, vitamin, serta karbohidrat yang sangat dibutuhkan oleh

mikroorganisme untuk tumbuh dan berkembang. Ekstrak daging sapi

mengandung senyawa-senyawa yang larut dalam air termasuk

karbohidrat, vitamin, nitrogen organik dan juga garam. Pepton

merupakan sumber utama dari nitrogen organik, yang sebagian

merupakan asam amino dan peptida rantai panjang. Dalam hal ini

agar digunakan sebaai bahan pemadat karena sifatnya yang mudah

membeku dan mengandung karbohidrat sehingga tidak mudah

diuraikan oleh mikroorganisme.

Nurient Agar (NA) merupakan suatu media berwarna kuning

muda yangmemiliki konsentrasi yang padat dimana media untuk

menumbuhkan bakteri. Di Indonesia sendiri Nutriet Agar (NA) sudah

15

banyak dipakai oleh industri produk susu dan juga di pengolahan air

limbah pabrik. Tidak semua bakteri dapat dibiakan pada media

karena ini hanya mengisolasi bakteri Antraks dan Staphylococcus

aureus.

Prosedur pembuatan Nutrient Agar (NA) adalah melarutkan

media sebanyak 3,36 gram Nutrient Agar (NA) dilarutkan dalam 120

mL air aquadest setelah itu dihomogenkan dengan cara dipanaskan

diatas hot plate dan diaduk menggunakan spatula hingga mendidih.

Selanjutnya media yang telah selesai dibuat kemudian disterilkan

dengan autoclave suhu 1210c selama 15 menit dengan tekanan 1 atm.

b. Media Pembiakan Penyubur

Media pembiakan penyubur dibuat dari medium pembiakan

dasar dengan penambahan zat-zat lain untuk mempersubur

pertumbuhan bakteri tertentu, yang pada medium pembiakan dasar

tidak dapat tumbuh dengan baik. Untuk keperluan ini medium

pembiakan dasar sering ditambahkan darah atau serum.Seperti media

BHIB (Braind Heart Infussion Broth) yaitu media pertumbuhan dari

bakteri Staphylococcus aureus karena mengandung nutrisi seperti

pepton, karbohidrat, protein, vitamin, mineral, air dan lain-lain.

c. Medium Pembiakan Selektif

Medium pembiakan selektif digunakan untuk menyeleksi

bakteri yang diperlukan dari campuran dengan bakteri-bakteri lain

yang terdapat dalam bahan pemeriksaan. Dengan penambahan zat-zat

tertentu bakteri yang dicari dapat dipisahkan dengan mudah. Seperti

media BAP (Blood Agar Plate) yaitu media selektif dari bakteri

Staphylococcus aureus karena hanya bakteri ini saja dapat tumbuh

pada media selektif BAP. Media ini mengandung nutrisi seperti

pepton, karbohidrat, protein, vitamin, mineral, air, dan lain-lain.

16

E. Tinjauan Umum Tentang Uji Daya Hambat Antibakteri

Uji daya hambat antibakteri adalah diperolehnya suatu sistem pengobatan

yang efektif dan efisien. Pengujian terhadap aktivitas antibakteri dapat

dilakukan dengan berbagai cara, yaitu :

1. Difusi Agar

Media yang dipakai adalah Agar Mueller Hinton. Pada metode difusi

ini ada beberapa cara, yaitu :

a. Cara Kirby Bauer

Beberapa koloni kuman dari pertumbuhan 24 jam diambil,

disuspensikan ke dalam 0,5 mL BHIB, diinkubasi 5-8 jam diambil

pada suhu 370c. Suspensi ditambah aquadest steril hingga kekeruhan

tertentu sesuai dengan standar konsentrasi bakteri 108 CFU/mL.

Kapas lidi steril dicelupkan ke dalam suspensi bakteri lalu di

tekan pada dinding tabung hingga kapasnya tidak terlalu basah,

kemudian dioleskan pada permukaan media agar hingga rata.

Kemudian diletakkan kertas samir (disc) yang mengandung

antibakteri diatasnya, diinkubasi pada 370c selama 1x24 jam.

Hasilnya dibaca :

1) Zona Radikal

Suatu daerah disekitar paper disc dimana sama sekali tidak

ditemukan adanya pertumbuhan bakteri. Potensi antibakteri

diukur dengan mengukur diameter dari zona radikal.

2) Zona Iradikal

Suatu daerah disekitar paper disc dimana pertumbuhan

bakteri dihambat oleh antibakteri, tetapi tidak dimatikan.

b. Cara Sumuran

Beberapa koloni kuman dari pertumbuhan 24 jam pada media

Agar diambil disuspensikan ke dalam 0,5 mL BHIB, diinkubasi 5-8

jam pada 370c. Suspensi ditambah aquadest steril hingga kekeruhan

tertentu sesuai dengan standar konsentrasi bakteri 108 CFU/mL.

Kapas lidi steril dicelupkan kedalam suspensi bakteri lalu ditekan-

17

tekan pada dinding tabung hingga kapasnya tidak terlalu basah,

kemudian dioleskan pada permukaan media Agar hingga rata. Media

Agar dibuat sumuran diteteskan larutan antibakteri, inkubasi suhu

370c selama 1x24 jam. Hasil bacanya seperti cara Kirby Bauer.

c. Cara Pour Plate

Kultur murni bakteri disuspensi 0,5 mL ke dalam BHIB inkubasi 5-

8 jam suhu 370c. Suspensi ditambah aquadest steril hingga kekeruhan

tertentu sesuai dengan standart konsentrasi bakteri 108 CFU/mL.

Suspensi bakteri diambil satu mata ose dan dimasukan ke dalam 4 mL

Agar Base 1,5% suhu 500c. Suspensi kuman tersebut homogen,

dituang pada media Agar Mueller Hinton, ditunggu sebentar sampai

memadat, letakkan disc diatas media selama 15-20 jam suhu 370c

hasil bacanya sesuai standar masing-masing antibakteri.

Nilai zona hambat diukur dengan rumus :

𝐃𝐕−𝐃𝐂 + (𝐃𝐇−𝐃𝐂)

𝟐

Keterangan :

DV : Diameter Vertikal

DH : Diameter Horizontal

DC : Diameter Cakram

Gambar 1.4 Gambar dan rumus penentuan zona hambat (Torar, 2015)

2. Dilusi Cair

Pada prinsipnya antibakteri diencerkan sampai diperoleh beberapa

konsentrasi. Pada dilusi cair masing-masing konsetrasi obat ditambah

suspensi kuman dalam media. Sedangkan pada dilusi padat tiap

konsentrasi obat dicampur dengan media agar, kemudian ditanam bakteri.

Metode dilusi cair adalah metode untuk menentukan konsentrasi

minimal dari suatu antibakteri yang dapat menghambat atau dapat

membunuh mikroorganisme. Konsentrasi terendah yang dapat

18

menghambat pertumbuhan bakteri ditunjukan dengan tidak adanya

kekeruhan disebut Kadar Hambat Minimal (KHM) atau Minimal

Inhibitory Concentration (MIC) (Tedy, 2005).

Kadar Hambat Minimal (KHM) adalah konsentrasi minimal dari

suatu antimikroba yang ditentukan dengan terbentuknya zona bening

disekitar daerah Papper disc dalam konsentrasi rendah dan sedangkan

KBM (Kadar Bunuh Minimal) adalah konsentrasi minimal yang dapat

membunuh mikroorganisme dari pengulangan hasil KHM (Kadar Hambat

Minimal) yang di inokulasi untuk diujikan seagai KBM (Kadar Bunuh

Minimal) (Aisyah, 2015).

19

BAB III

KERANGKA KONSEP

A. Dasar Pemikiran

Tumbuhan komba-komba atau kirinyuh (Chromolaena odorata) adalah

salah satu tanaman liar yang sifatnya parasit atau merugikan terhadap

tumbuhan lain.Tumbuhan ini sangat berkhasiat dalam penyembuhkan luka

karena daun komba-komba (Chromolaenaodorata) mengandung senyawa

kimia seperti flavonoid, triterpenoid, alkaloid, fenol, saponin, steroid dan

tanin.

Untuk memperoleh sari daun komba-komba (Chromolaena odorata)

yaitu dengan memilih daun yang masih muda lalu di petik dan dicuci bersih

lalu di keringkan dan ditimbang sebanyak 500 gram dengan timbangan digital

lalu diblender, diperas dan disaring dengan kertas saring dan masukan dalam

erlenmeyer yang diharapkan sari yang keluar sebanyak 150 mL untuk dibuat

konsentrasi 20%,40%, 60%, 80% dan 100% dalam 50 mL lalu dilakukan

pengujian daya hambat sari daun komba-komba (Chromolaena odorata)

terhadap pertumbuhan Staphylococcus aureus dengan metode Difusi Agar

(Disc Diffusion Method) atau kyrbi-Bauer. Dilakukan suspensi bakteri dengan

ose bulat untuk disebar dimedia Nutrient Agar (NA) lalu dimasukan paper

disc yang telah dicelupkan didalam larutan sari daun komba-komba

(Chromolaena odorata) kemudiansimpan di permukaan media Nutrient Agar

(NA) lalu ditutup dan inkubasi selama 1 x 24 jam suhu 370c di dalam

inkubator.

Hasil akan dibandingkan dengan kontrol positif (Tetrasiklin).Untuk

daerah zona hambat di kelompokan menjadi tiga kategori yaitu zona hambat

resisten (zona hambat ≤ 12 mm), intermediate (zona hambat antara 13-17

mm), sensitifitas (zona hambat antara ≥ 18 mm), sehingga dapat disimpulkan

apakah daun komba-komba (Chromolaena odorata) efektif dalam

menghambat pertumbuhan Staphylococcus aureus atau tidak.

20

B. Bagan Kerangka Pikir

Keterangan : Variabel diteliti :

Variabel tidak diteliti :

Daun komba-komba

(Choromolaena odorata)

Memiliki kandungan kimia

yaitu tanin, alkaloid,

triterpenoid, flavonoid, fenol

5000 gram daun komba-komba dihaluskan

dengan blender untuk memperoleh sari yang

pekat

Sari daun komba-komba dibuat

konsentrasi 20%, 40%, 60%,

80%, 100%

Menghambat pertumbuhan

Staphylococcus aureus

Temperatur

pH

Media

Nutrisi

Cahaya

Di uji dengan metode

Kirby Bauer

Diinkubasi selama 1x24 jam

Pengukuran zona hambat

Negatif (-) Tidak

terbentuk zona hambat

Positif (+) Terbantuk

zona hambat

Sensitif ≥18 mm Intermediate 13-17 mm Resisten ≤ 12 mm

21

C. Variabel Penelitian

1. Variabel bebas (independen) adalah sari daun komba-komba

(Chromolaena odorata)

2. Variabel terikat (dependen) adalah zonahambat terhadap pertumbuhan


D. Definisi Operasional dan Kriteria Objektif

1. Definisi Operasional

a. Sari daun komba-komba (Chromolaena odorata) adalah sari yang

diperoleh dari daun komba-komba (Chromolaena odorata) yang telah

dihaluskan menggunakan blender pada penelitian sari daun komba-

komba (Choromolaena odorata) terhadap pertumbuhan bakteri


b. Staphylococcus aureus yang digunakan merupakan biakan murni yang

diperoleh dari Laboratorium Analis Kesehatan Poltekkes Kendari.

c. Zona hambat adalah diameter zona dimana bakteri tidak tumbuh,

ditandai dengan zona bening yang diukur dengan mistar dengan

satuan milimeter (mm).

d. Media pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus adalah Nutrient

Agar (NA) diinkubasi suhu 370c selama 1x24 jam

2. Kriteria Objektif

a. Positif (+) apabila menunjukan daerah zona bening atau zona hambat,

besarnya zona hambat terdiri dari tiga kategori yaitu:

1) Zona hambat dalam batas resisten : ≤ 12 mm

2) Zona hambat dalam batas intermediate : 13-17 mm

3) Zona hambat dalam batas sensitif : ≥ 18 mm

b. Negatif (-) apabila tidak menunjukan daerah zona hambat.

22

BAB IV

METODEOLOGI PENELITIAN

A. Jenis Penelitian

Jenis penelitian ini adalah eksperimental laboratories, dengan

menggunakan desain One-shot Case Study yaitu desain penelitian dengan

perlakuan terhadap variabel independen (Sugiyono, 2011).

B. Waktu dan Tempat Penelitian

1. Waktu Penelitian

Penelitian ini dilaksanakan mulai tanggal 6 Maret s/d 25 Juni 2018

2. Tempat Penelitian

Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Jurusan Analis Kesehatan

Poltekkes Kemenkes Kendari

C. Subjek Penelitian

Subjek penelitian adalah daun komba-komba (Choromolaena odorata).

Sedangkan obyek penelitian ini adalah bakteri Staphylococcus aureus.

D. Bahan Uji

Bahan uji dari penelitian ini adalah tumbuhan komba-komba

(Chromolaena odorata), daun komba-komba (Chromolaena odorata) yang

digunakan adalah daun muda, daun dipetik secara manual dan dicuci lalu

dikeringkan dan ditimbang sebanyak 500 gram dengan timbangan digital

kemudian dipotong-potong lalu kemudian diblender dan disaring dengan

kertas saring. Sehingga diharapkan mendapatkan air perasan daun komba-

komba (Choromolaena odorata) yang pekat sebanyak 150 mL dan dimasukan

dalam erlenmeyer kemudian sari daun komba-komba (Choromolaena

odorata) dibuat dalam 5 variasi konsentrasi yaitu pada konsentrasi 20%,40%,

60%, 80% dan 100% yang akan di uji terhadap pertumbuhan Staphylococcus

aureus.

23

E. Prosedur Kerja

Prosedur kerja pada uji daya hambat sari daun komba-komba

(Choromolaena odorata) terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus

aureus pada penelitian ini, yaitu :

1. Pra Analitik

a. Persiapan Alat dan Bahan

1) Alat

a. Neraca Digital

b. Sendok Tanduk

c. Erlenmeyer

d. Batang Pengaduk

e. Pipet Ukur

f. Ball Filler

g. Gelas Ukur

h. Lampu Spiritus

i. Kaki Tiga

j. Kawat Kasa

k. Inkubator

l. Autoclave

m. Cawan Porselin

n. Tabung Reaksi

o. Rak Tabung

p. Kawat Ose

q. Pinset

r. Botol Semprot

s. Blender

t. Kertas Saring

u. Pipet Tetes

v. Mistar/Penggaris

w. Corong

x. Gelas Kimia

2) Bahan

a. Daun komba-komba (Chromolaena odorata)

b. Antibiotik Tetrasiklin

c. Paper disc Blank

d. Media Nutrien Agar (NA)

e. Aquadest

f. Kertas Saring

g. Kertas label

h. Aluminium Foil

i. Biakan murni Staphylococcus aureus

24

b. Sterilisasi Alat Penelitian

Alat yang terbuat dari bahan gelas atau kaca sebelum digunakan

harus dicuci terlebih dahulu, kemudian dikeringkan setelah itu di

bungkus dengan kertas HVS lalu dimasukan ke dalam Autoclave suhu

1210c selama 15 menit pada tekanan 1 atm setelah selesai di dinginkan

dan disimpan ditempat yang telah disiapkan.

c. Pembuatan Media Nutrient Agar (NA)

Sebanyak 3,36 gram Nutrien Agar (NA) dilarutkan dalam 120

mLaquadest lalu di homogenkan dengan cara dipanaskan diatas lampu

spiritus hingga bubuk media larut dalam aquadest setelah homogen

kemudian di ukur pH media yaitu pH 7 lalu di autoclave suhu 1210c

selama 15 menit kemudian di dinginkan simpan didalam kulkas.

d. Pembuatan Stok Bakteri

Media Nutrient Agar (NA) yang telah dibuat dan telah disterilkan

dari autoclave segera dimasukan kedalam tabung reaksi sebanyak 5ml

lalu dimiringkan hingga memadat. Bakteri uji yang digunakan atau

bakteri yang akan dimurnikan adalah Staphylococcus aureus. Pembuatan

stok bakteri dilakukan dengan menggunakan ose dan pengerjaanya harus

di belakang lampu spiritus caranya dengan mengambil bakteri dengan

menggunakan ose kemudian ditanam atau diinokulasikan dengan

menggoreskan pada media NA yang sudah dimiringkan tadi lalu

diinkubasi didalam inkubator suhu 370c selama 1 x 24 jam.

e. Pembuatan Suspensi Bakteri Uji.

Pembuatan suspensi bakteri diambil bakteri uji dengan menggunakan

kawat ose steril kemudian disuspensikan dalam 2 mL NaCl 0,9% dalam

tabung reaksi steril dan dihomogenkan sesuai standar Mc. Farland 0,5

yang ditandai dengan terbentuknya kekeruhan setelah disuspensikan.

25

f. Pembuatan Antibiotik Tetrasiklin (Control Positif).

Tetrasiklin 250 mg dibuat konsentrasi 5% dengan menimbang 0,5

gram tetrasiklin kemudian dilarutkan dengan aquadest steril sebanyak 5

mL sehingga diperoleh konsentrasi 5%.

g. Pembuatan Sari Daun Komba-Komba (Chromolaena odorata)

Ditimbang 500 gram daun komba-komba (Chromolaena odorata)

dengan menggunakan timbangan digital kemudian diblender dan diperas

dan disaring, sehingga diharapkan mendapatkan sari daun komba-komba

(Choromolaena odorata) sebanyak 150 mL.

Langkah berikutnya sari daun komba-komba (Chromolaena

odorata) dibuat dalam 5 variasi konsentrasi yaitu pada variasi konsentrasi

20%, 40%, 60%, 80%, dan 100%. Volume sari daun komba-komba

(Choromolaena odorata) yang diambil dihitung dengan rumus

pengenceran sebagai berikut :

Rumus Pengenceran :

(Purwiyanto, 2013)

Keterangan :

V1 ..: Volume Larutan Stok

M1 : Konsentrasi Larutan Stok

V2 : Volume Larutan Perlakuan

M2 : Konsentrasi Larutan yang Diinginkan

V1 . M1 = V2 . M2

26

Berdasarkan rumus pengenceran, maka cara pembuatan sari dibagi

menjadi 5 macam konsentrasi dengan tiap-tiap konsentrasi berjumlah

50mL yaitu pada konsentrasi 20%, 40%,60%, 80% dan 100% adalah

sebagai berikut :

1) Konsentrasi 20% yaitu 10mL sari dan ditambahkan 40 mL aquadest

kemudian dihomogenkan.

2) Konsentrasi 40% yaitu 20mL sari dan ditambahkan 30 mL aquadest


3) Konsentrasi 60% yaitu 30 mL sari dan ditambahkan 20 mL aquadest


4) Konsentrasi 80% yaitu 40 mL sari dan ditambahkan 10 mL aquadest


5) Konsentrasi 100% yaitu memipet 50 mL sari kemudian

dihomogenkan. }}

2. Analitik

1. Uji Daya Hambat Sari Daun Komba-Komba (Chromolaena odorata)

Terhadap Bakteri Uji

Tujuan : Untuk mengetahui aktivitas antibakteri dari sari daun komba-

komba (Chromolaena odorata) diujikan terhadap bakteri


Metode : Metode Difusi Agar (Disk Diffusion Method) dari Kirby-

Bauer.

Cawan petri yang sudah disterilkan di simpan diatas meja, media

Nutrient Agar (NA) yang sudah memadat dipanaskan terlebih dahulu

dengan lampu spiritus sampai media Nutrient Agar (NA) mencair lalu

media Nutrient Agar (NA) dituang didalam cawan petri yang sudah

disiapkan di sterilkan lalu tunggu sampai memadat kemudian dilakukan

suspensi bakteri Staphylococcus aureus dengan NaCl. Setelah media

Nutrient Agar (NA) memadat maka ambil suspensi bakteri sebanyak 0,1

mL lalu di sebar dipermukaan media Nutrient Agar (NA) dengan

27

menggunakan drigel ski kemudian ambil paper disc dan dicelupkan di

dalam sari daun komba-komba (Chromolaena odorata) pada masing-

masing konsentrasi 20%, 40%, 60, 80% dan 100% dengan menggunakan

pinset disimpan diatas permukaan media Nutrient Agar (NA) lalu dilabeli

dengan menggunakan kertas label. Kemudian dibuat kontrol positif

dengan menggunakan tetrasiklin paper disc dicelupkan di dalam

tetrasiklin untuk kontrol positif dan di tanam di atas permukaan media

Nutrient Agar (NA) lalu diinkubasi selama 1x24 jam suhu 370c. Jika

terbentuk daerah bening di sekitar paper disc itu menunjukan daerah

zona hambat.

3. Pasca Analitik

a. Pencatatan Hasil Penelitian

Pencatatan hasil penelitian merupakan hasil penelitian yang

dilakukan dengan pencatatan suatu aktifitas dalam bentuk tulisan baik di

ketik maupun di tulis tangan atau dalam bentuk grafik atau gambar dari

hasil pengukuran atau pengamatan yang telah dilakukan.

Pencatatan hasil penelitian ditentukan dengan rumus :

DV−DC + (DH−DC )

2

Keterangan :




b. Dokumentasi Hasil Penelitian

Kegiatan pengambilan hasil dalam bentuk foto atau gambar dar hasil

pengukuran, pengamatan, pengambilan sampel dan lain lain yang

berhubungan dengan hasil penelitian mulai dari pra analitik, analitik

sampai pasca analitik.

28

c. Pelaporan Hasil Penelitian.

Pelaporan hasil penelitian adalah kegiatan melaporkan hasil

penelitian setelah dilakukan pengukuran dan pengamatan, hasil penelitian

itu dilaporkan berdasarkan hasil pengukuran yang dijadikan sebagai hasil

penelitian.

F. Analisis Data

Analisis data dari penentuan hasil penelitian dengan menggunakan rumus

zona hambat. Adapun rumus zona hambat adalah sebagai berikut:

DV − DC + (DH − DC)

2

Keterangan :




G. Pengolahan Data

Pengolahan data yang telah diperoleh dari hasil penelitian dikerjakan

melalui beberapa proses dengan tahapan sebagai berikut :

1. Pemeriksaan data (editing) bertujuan untuk meneliti data yang telah

diperoleh dari pengukuran dengan cara memeriksa kelengkapan dan

konsistensi data yang ada.

2. Pengkodean data (coding) betujuan untuk memudahkan dalam menganalisa

data dengan cara memberikan kode atau atribut pada data.

3. Mentabulasi (tabulating) tabulasi merupakan lanjutan langkah coding untuk

mengelompokan data kedalam suatu data tertentu menurut sifat-sifat yang

dimiliki sesuai dengan tujuan penelitian.

H. Penyajian Data

Data yang telah dianalisis disajikan dalam bentuk tabel dan kemudian

dijelaskan dalam bentuk narasi.

29

BAB V

HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN

A. Gambaran Umum Lokasi Penelitian

Penelitian uji daya hambat sari daun komba-komba (chromolaena

odorata) terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dilakukan dengan

menggunakan metode difusi agar atau metode sebar yang dilakukan di

Laboratorium Jurusan Analis Kesehatan Poltekkes Kemenkes Kendari

penelitian uji daya hambat di mulai tanggal 6 Maret s/d 25 Juni 2018.

B. Hasil Penelitian

Hasil penelitian berbagai konsentrasi sari daun komba-komba

(Chromolaena odorata) terhadap daya hambat pertumbuhan bakteri

Staphylococcus aureus dengan menggunakan metode difusi agar secara invitro

di Laboratorium Jurusan Analis Kesehatan Poltekkes Kendari diperoleh zona

hambat yang disajikan dalam bentuk tabel sebagai berikut.

Tabel 5.1 Hasil Pengukuran zona hambat sari daun komba-komba


Staphylococcus aureus

No Konsentrasi Waktu

Pengamatan

Diameter Hona

Hambat (mm) Rata-rata Interpretasi

P1 P2

1 20% 24 jam 1,5 mm 2,5 mm 2 mm Resisten

2 40% 24 jam 4,5 mm 3 mm 3,7 mm Resisten




6 Kontrol (+) 24 jam 19 mm 19 mm Sensitif

7 Kontrol (-) 24 jam - - - -

Keterangan:

Resisten : ≤12 mm P1 : Pengulangan Pertama (1)

Intermediate : 13-17 mm P2 : Pengulangan Kedua (2)

Sensitifitas : ≥18 mm

30

Pengamatan hasil penelitian dilakukan dengan melihat daerah bening yang

dikelilingi paper disc yang menunjukan daerah daya hambat pertumbuhan bakteri

Staphylococcus aureus dapat dilihat pada gambar dibawah ini:

a.

b.

Keterangan :

a. Kontrol positif (+) b. Kontrol negatif (-)

Gambar 1.5 Kontrol (+) tetrasiklin dan kontrol (-) aquadest

b.

P1 c.

a.

Keterangan :

a. Konsentrasi sari daun komba-komba 20% b. Konsentrasi sari daun komba-komba 40% c. Konsentrasi sari daun komba-komba 60% P1 Pengulangan pertama

Gambar 1.6 Hasil uji daya hambat sari daun komba-komba (Chromolaena odorata)

konsentrasi 20%, 40% dan 60%

P1 a.

b.

Keterangan :

a. Konsentrasi sari daun komba-komba 100% b. Konsentrasi sari daun komba-komba 80% P1 Pengulangan pertama


konsentrasi 80%dan 100%

31

a.

P2 b.

Keterangan :

a. Konsentrasi sari daun komba-komba 20% b. Konsentrasi sari daun komba-komba 40% P2 Pengulangan kedua


konsentrasi 20%dan 40%.

a.

b.

P2 c.

Keterangan :

a. Konsentrasi sari daun komba-komba 60% b. Konsentrasi sari daun komba-komba 80% c. Konsentrasi sari daun komba-komba 100% P2 Pengulangan kedua


konsentrasi 60%, 80%dan 100%.

C. Pembahasan

Pada penelitian uji daya hambat sari daun komba-komba (Chromolaena

odorata) yang akan diujikan pada bakteri Staphylococcus aureus dengan

menggunakan metode difusi agar atau metode sebar dengan pengujian sari daun

komba-komba (Chromolaena odorata) dibuat dalam 5 variasi konsentrasi yaitu

konsentrasi 20%, 40%, 60%, 80% dan 100% yang dilakukan di Laboratorium

Jurusan Analis Kesehatan Poltekkes Kendari.

32

Pengujian daya hambat sari daun komba-komba (Chromolaena odorata)

terhadap petumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dilakukan beberapa tahap

yaitu mulai dari tahap pemilihan daun sampai dengan pengujian daya hambat

bakteri. Tahap pemilihan daun dilakukan dengan cara memilih daun yang masih

muda dan di ambil dengan cara manual kemudian dilakukan sampai tahap

pembuatan konsentrasi untuk pengujian daya hambat.

Pengujian daya hambat terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus

aureus dengan menggunakan metode difusi agar di inkubasi selama 1 x 24 jam

di dalam inkubator dengan zona hambat ditandai dengan terbentuknya daerah

bening disekitar paper discpengujian dilakukan dengan 2 kali pengulangan

dengan menggunakan obat tetrasiklin sebagai kontrol positif dan aquadest

sebagai kontrol negatif.

Daya hambat sari daun komba-komba (Chromolaena odorata) pada

konsentrasi 20% zona hambat yang terbentuk pada pengulangan pertama (P1)

sebesar 1,5 mm dan pada pengulangan kedua (P2) sebesar 2,5 mm dengan` rata-

rata 2 mm. Konsentrasi 40% zona hambat yang terbentuk pada pengulangan

pertama (P1) sebesar 4,5 mm dan pada pengulangan kedua (P2) sebesar 3 mm

dengan rata-rata 3,7 mm. Konsentrasi 60% zona hambat yang terbentuk pada

pengulangan pertama (P1) sebesar 5,5 mm dan pada pengulangan kedua (P2)

sebesar 4 mm dengan rata-rata 4,7 mm. Konsentrasi 80% zona hambat yang

terbentuk pada pengulangan pertama (P1) sebesar 7,5 mm dan pada pengulangan

kedua (P2) sebesar 5 mm dengan rata-rata 6,2 mm. Konsentrasi 100% zona

hambat yang terbentuk pada pengulangan pertama (P1) sebesar 10,5 mm dan

pada pengulangan kedua (P2) sebesar 5,5 mm dengan rata-rata 8 mm. Sehingga

dari ke 5 konsentrasi terbentuk daerah bening disekitar paper disc yang di sebut

sebagai zona hambat. Zona hambat yang terbentuk masih dikategorikan resisten

(lemah) karna besarnya zona hambat yang terbentuk kurang dari 12 mm tetapi

pada konsentrasi 100% dalam pengujian ini walaupun termasuk dalam kategori

resisten tetapi efektif dalam menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus

aureus karna memiliki daya hambat paling besar pada pengujian daya hambat

ini.

33

Pada pengulangan pertama (P1) dan kedua (P2) baik pada konsentrasi 20%

sampai pada konsentrasi 100% pengulangan pertama (P1) dan kedua (P2) terjadi

perbedaan besarnya daya hambat yaitu sebesar 1 – 5 mm. Hal ini disebabkan

karna penyaringan sari daun komba-komba (Chromolaena odorata) belum baik

sehingga masih ada sisa-sisa penyaringan berupa endapan serbuk-serbuk dari

daun komba-komba (Chromolaena odorata) yang belum tersaring dengan

sempurna sehingga menyebabkan kandungan sari daun komba-komba

(Chromolaena odorata) tidak berfungsi dengan baik dalam mendenaturasi

membran sel bakteri sehingga dalam menghambat pertumbuhan bakteri

Staphylococcus aures menjadi kurang efektif dengan demikian ukuran daya

hambat pada setiap konsentrasi pengulangan pertama (P1) dan kedua (P2) terjadi

perbedaan.

Hal ini sejalan dengan penelitian Purwati dan Undri Rastuti (2009)

menerangkan Ekstrak etil asetat daun Euphatorium odoratum berdasarkan

skrining senyawa metabolit sekunder mengandung senyawa flavonoid, dengan

senyawa metabolit sekunder dalam ekstrak etil asetat daun Euphatorium

odoratum memiliki aktivitas antioksidan dengan urutan aktivitas penghambat

sebesar 0,15% (b/v). Flavonoid mendenaturasi protein sel bakteri dan dapat

merusak membran sitoplasma bakteri sehingga dapat menghambat pertumbuhan

bakteri Staphylococcus aureus pada pengujian daya hambat.

Dalam penelitian lain (Rahman, 2017) juga menggunakan ekstrak daun

komba-komba (Chromolaena odorata) untuk penyembuhan luka sayat pada

ayam petelur yang mana dalam penelitiannya menunjukan bahwa konsentrasi

yang efektif dalam penyembuhan luka sayat pada ayam petelur adalah pada

konsentrasi 20%.

Adapun penelitian terdahulu oleh Vital dan Rivera (2009) dalam

penelitiannya dilakukan pengujian terhadap aktivitas antimikroba ekstrak daun

kirnyuh, hasilnya menunjukkan positif terhadap bakteri Bacillus subtillis,

Staphyloccus aureus dan Salmonella typhimurium. Serta dalam penelitian

sebelumnya juga telah dilakukan pengujian terhadap ekstrak etanol daun

kirinyuh untuk pengobatan luka pada mencit jantan dengan konsentrasi 2,5%,

34

5%, 10%, kontrol dan pembanding, hasilnya menunjukkan bahwa ekstrak etanol

daun kirnyuh konsetrasi10% memberikan efek penyembuhan luka lebih cepat

dibandingkan dengan dosis lain (Afrianti, 2010).

Berdasarkan hal ini setelah dibandingkan dengan penelitian sebelumnya

ternyata konsentrasi yang efektif dalam menghambat petumbuhan bakteri

Staphylococcus aureus adalah dengan menggunakan ekstrak daun komba –

komba (Chromolaena odorata).

35

BAB VI

PENUTUP

A. Kesimpulan

Dari hasil penelitian uji daya hambat yang saya lakukan, dari dua kali

pengulangan uji daya hambat sari daun komba-komba (Chromolaena odorata)

terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dapat disimpulkan bahwa :

1. Pada konsentrasi 20% daya hambat yang terbentuk sebesar 2 mm,

konsentrasi 40% daya hambat yang terbentuk sebesar 3,7 mm, konsentrasi

60% daya hambat yang terbentuk sebesar 4,7 mm, konsentrasi 80% daya

hambat yang terbentuk sebesar 6,2 mm dan konsentrasi 100% daya hambat

yang terbentuk sebesar 8 mm.

2. Dari konsentrasi 20% sampai konsentrasi 100% dapat menghambat

pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus tetapi masih tergolong resisten

(lemah). Daya hambat yang efektif atau daya hambat yang paling besar

tebentuk terdapat pada konsentrasi 100% hasilnya dapat menghambat

pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus.

B. Saran

1. Bagi institusi dapat digunakan sebagai referensi, ilmu pengetahuan, sebagai

acuan atau panduan untuk mahasiswa dalam praktiukm tentang uji daya

hambat di Laboratorium Analis Kesehatan.

2. Bagi peneliti dapat digunakan sebagai riset penelitian lanjutan tentang uji

daya hambat khususnya dalam bidang mikrobiologi dengan menggunakan

konsentrasi sari yang lebih besar lagi untuk mendapatkan hasil daya hambat

yang efektif.

36

DAFTAR PUSTAKA

Afrianti, R, R. Yenti, dan L. Afriani, 2010., Studi pendahuluan etanol daun kirinyuh

terhadap penyembuhan luka, Laporan Penelitian STIFL, Padang.

Aisyah. 2015. Daya Hambat Ekstrak Pandan Wangi (Pandanus amaryllifolius

Roxb.) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus aureus. Fakultas

Kedokteran Gigi UNHAS makassar. Hal. 23

Ajizah, Aulia; Thihana; Mirhanuddin. 2007. Potensi Ekstrak Kayu Ulin

(Eusideroxylonzwageri) Dalam Menghambat Pertumbuhan Bakteri

Staphylococcus aureus Secara In Vitro.On_line. Tersedia

di:http://bioscientiae.unlam.ac.id/v4n1/v4n1_ajizah.pdf.Skripsi (Diakses,

5 januari 2018).

Apriani. 2012. Tinjauan Pustaka Tumbuhan Komba-Komba (Chromolaena odorata).

Diakses pdf tanggal 2 Agustus 2017.

Apriyadi Tri Erza. 2010. Risiko Staphylococcus aureus Pada Pangan Tradisional

Siap Santap dan Evaluasi Keberadaannya Dalam Nasi Uduk. Fakultas

Teknologi Pertanian Institut Pertanian Bogor hal. 6.

Aulia, Ismi Arsyi. 2008. Uji aktivitas Antibakteri Fraksi Etil Asetat Ekstrak Etanolik

Daun Arbenan (duchesnea indica (andr.) Focke) Terhadap

Staphylococcus aureus danPseudomonas aeruginosa Multiresisten

Antibiotik Beserta Profil Kromatografi LapisTipisnya. On_line. Tersedia

di:http://etd.eprints.ums.ac.id/1517/1/K100040115.pdf. Skripsi (Diakses,

5 januari 2018)

Awoyinka. 2007. Tanaman Tradisional Sebagai Antibakteri Untuk Pengobatan.

Penebar Swadaya : Jakarta.

Bachtiar Subhchan Yusuf, Tjahjaningsih, Nanik Sianita. 2012. Pengaruh Ekstrak

Alga Coklat (Sargasus sp) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Escherichia

coli. Fakultas Perikanan dan Kelautan Universitas Airlangga. Journal of

Marine and Coastal Science, 1 (1) hal 53-60.

Brooks GF, Butel JS, Morse SA. Mikrobiologi kedokteran buku 1. Alih bahasa:

Mudihardi E, dkk, editor. Jakarta: Salemba medika; 2005, hal. 317-22

Brooks GF, Carroll C, Butel JS, Morse SA, Mietzner A. Melnick & adelberg’s

medical microbiology 25th

ed. USA: Mc Graw Hill; 2010, pp. 617

http://etd.eprints.ums.ac.id/1517/1/K100040115.pdf

37

Cappuccino, J.G & Natalie, S. 2013. Manual Laboratorium biologi; alih bahasa, Nur

Miftahurrahmah. Jakarta: EGC.

Dalimartha, S., 2000. Atlas Tumbuhan Obat Indonesia Edisi 2. Jakarta: Trubus

Agiwidya.

Djajadisastra, Joshita, dkk., 2009.Formulasi Gel Tropika Dari Ekstrak Nerii Folium

Dalam Sediaan Anti Jerawat. Jurnal Farmasi Indonesia Vol.4 No.4 Juli

2009 : 210-216. Universitas Indonesia Fakultas MIPA.

Dwidjoseputro D. 1994. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Djambatan, Jakarta.

Hadi, M., J.W. Hidayat, K. Baskoro. 2000. Uji Potensi Ekstrak Daun Eupatorium

odoratum sebagai Bahan Insektisida Alternatif: Toksisitas dan

EfekAntimakan Terhadap Larva Heliothis armigera. Hubner. Jurnal

Sainsdan Matematika. Fakultas MIPA Undip. Semarang

Harbone, J.B, 1987., Metode Fitokimia Penentuan Cara Modern Menganalisa

Tumbuhan, Diterjemahkan oleh Kosasih, Padmawinata,Terbitan ITB,

Bandung.

Jawetz, dkk., 2010. Mikrobiologi Kedokteran. diterjemahkan Mudihardi, E.,

Kuntaman, Wasito, E.B., Mertaniasih, N.M., Harsono., S., Alim

sardjono, L., Edisi XXV, 198, Penerbit Salemba Medika, Jakarta.

Jumiarni Wa Ode, Oom Komalasari. 2017. “Esploitasi Jenis dan Pemanfaatan

Tumbuhan Obat Pada Masyarakat Suku Muna di Pemukiman Kota

Muna” Traditional Medicine Journal, 22 (1) 2017 hal. 45

Kurniawan, B., Aryana, W.F., 2015. Binahong (Cassia alata L)as Inhibitor of

Escherichia coli Growth. Majority, 4(4), 100-104.

Kusuma, I.W., Kuspradini, H., Arung, E.T., Aryani, F., Min, Y.H., Kim, J.S.,Kim,

Y.U., 2011. Biological Activity and Phytochemical Analysis of

ThreeIndonesian Medicinal Plants, Murraya koenigii, Syzygium

polyanthum andZingiber purpurea. Journal of Acupuncture and

Meridian Studies, 4(1), 7579.

Loggia, R. D., Tubaro A., Dri P., Zilli C., and Del Negro P. 1986. The role of

flavonoids in the antiinflammatory activity of Chamoliarecutita. Plant

flavonoids in biology and medicine: biochemical, pharmaceutical and

structure-activity relationships. Alan R. Liss, Inc. p. 481-4.

38

Madigan, M. T., J.M., et al. 2009.Brock Biology of Microorganisms, Pearsons

enjamin Cummings, San Fransisco, pp. 779

Nugerahdita Nindya. 2009. Prevalensi Penyakit Kulit dan Pengobatannya Pada

Beberapa RW di Kelurahan Petamburan Jakarta Pusat. Universitas

Indonesia Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Departemen

Farmasi Depok 2009.

Pratiwi ST. Mikrobiologi farmasi. Jakarta: Erlangga; 2008, hal. 42-3, 188-91

Purwati dan Undri R. 2009. Skrining Senyawa Metabolit Sekunder dan Uji Aktivitas

Antioksidan Ekstrak Etilasetat Daun Wedusan (Euphatorium odoratum)

Molekul, program studi kimia, jurusan MIPA, Fakultas Sains dan Teknik

UNSOED vol. 4.No. 2. November, 2009:94-104.

Purwiyanto Anna I.S. M.Si. 2013. Modul Praktikum Oseanografi Kimia. Fakultas

Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sriwijaya.

Rahman Aminul. 2017. Efek Salep Ekstrak Daun Kirinyuh (Euphatorium odaratum)

Terhadap Penyembuhan Luka Sayat Pada Ayam Petelur (Gallus

leghorn). Program Studi Kedokteran Hewan Fakultas Kedokteran

Universitas Hasanuddin Makassar 2017.

Robinson, T, 1995., Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi, Edisi VI, ITB, Bandung.

Sagala, N.S. 2009. Pemanfaatan Semak Bunag Putih (Chromolena odarata)

Terhadap Pertumbuhan dan IOFC Dalam Ramsun Burung Puyuh

(Cortunix-cortunix japonica) Umur 1 sampai 42 Hari. USU, Medan.

Samaranayake. 2012. Essential Microbiology For Dentistry 4th ed. China : Elsevier ;

2012, pp. 125

Simanjuntak, M.R. 2008. Ekstraksi dan Fraksinasi Komponen Ekstrak Daun

Tumbuhan Senduduk (melastoma malabathricum. L) Serta Pengujian

Efek Sediaan Krim terhadap Penyembuhan Luka Bakar.

Skripsi.Universitas Sumatera Utara. Medan. 85 hlm.

Sugiyono. 2011. Metode Penelitian Kuantitatif dan Kualitatif (Cetakan No. 14).

Bandung : Alfabeta

Tedy Nurwalidin Aka. 2005. Efektifitas Antibakteri Ekstrak Etanol dan Etil Asetat

Daun Ketapang (Terminalia catappa l.) Terhadap Salmonella Typhy dan

Staphylococcus epidermidis. Skripsi Fakultas SAINS dan Teknologi

Sunan Kalijaga.

39

Thamrin, M., S. Asiklin and M. Willis. 2013.“Tumbuhan Kirinyuh (Chromolaena

odorata) Sebagai Insektisida Nabati Untuk Mengendalikan Ulat Grayak

(Spodoptera litura)”. Jurnal insektisida nabati, 22 (7) 2013 hal. 113

Toy Torar S.S., Benedictus S. Lampus, Bernat S.P. Hutagalung. 2015. Uji Daya

Hambat Ekstrak Rumput Laut Gracilaria sp Terhadap Pertumbuhan

Bakteri Staphylococcus aureus. Jurnal e-GiGi (eG). Volume 3 Nomor 1

Januari – Juni 2015. Hal. 156.

Vital, P. G., and W. L, Rivera, 2009.Antimicrobacterial activity and citoxicity of

chromolaena odorator (L.F) King and Robinson and Uncaria perrottetii

(A. Rich) merr. Extracts, Available online at

http;//www.academicjournal.org/JMPR Journal of Medicial Plant

Research vol. 3 (7), pp. 5511-518.

Yuniarti Tuty. 2012. Media dan Reagensia Bahan Ajar Jurusan Analis Kesehatan

Poltekkes Kementerian Keshatan Kendari.

40

LAMPIRAN

46

TABULASI DATA

Proses Penelitian Uji Daya Hambat Sari Daun Komba-Komba (Chromolaena

odorata) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus aureus

Kesensitifitas sari daun komba-komba (Chromolaena odorata) di tentukan

pada ukuran zona hambat yang terbentuk. Interpretasi hasil dalam pengukuran zona

hambat terbagi atas 3 kategori yaitu:

1. Resisten : ≤ 12 mm

2. Intermediate : 13-17 mm

3. Sensitifitas : ≥18 mm (Bachtiar 2012)

No Konsentrasi Waktu

Pengamatan

Diameter Hona

Hambat (mm) Rata-rata Interpretasi

P1 P2






6 Kontrol (+) 24 jam 19 mm 19 mm Sensitif

7 Kontrol (-) 24 jam - - - -

47

Perhitungan Pembuatan Konsentrasi

1. Pembuatan konsentrasi 20% dalam 50 mL pada konsentrasi 100%.

Dik : M1 = 100%, M2 = 20%, V2 = 50 mL : V1 = ...

V1 . M1 = V2 . M2

V1 . 100% = 50 mL . 20%

V1 . 100% = 1000 mL%

V1 = 1000 𝑚𝐿%

100%

V1 = 10 mL

2. Pembuatan konsentrasi 40% dalam 50 mL pada konsentrasi 100%

Dik : M1 = 100%, M2 = 40%, V2 = 50 mL : V1 = ...

V1 . M1 = V2 . M2

V1 . 100% = 50 mL . 40%

V1 . 100% = 2000 mL%

V1 = 2000 𝑚𝐿%

100%

V1 = 20 mL


Dik : M1 = 100%, M2 = 60%, V2 = 50 mL: V1 = ...

V1 . M1 = V2 . M2

V1 . 100% = 50 mL . 60%

V1 . 100% = 3000 mL%

V1 = 3000 𝑚𝐿%

100%

V1 = 30 mL


Dik : M1 = 100%, M2 = 80%, V2 = 50 mL: V1 = ...?

V1 . M1 = V2 . M2

V1 . 100% = 50 mL . 80%

V1 . 100% = 4000 mL%

V1 = 4000 𝑚𝐿%

100% = 40 mL

48


Dik : M1 = 100%, M2 = 100%, V2 = 50 mL: V1 = ...?

V1 . M1 = V2 . M2

V1 . 100% = 50 mL . 100%

V1 . 100% = 5000 mL%

V1 = 5000 𝑚𝐿%

100%

V1 = 50 mL

49

DOKUMENTASI HASIL PENELITIAN

Penimbangan Media Nutrient Agar (NA)

Pemanasan, Strilisasi dan Penuangan Media NA (Nutrient Agar) Kedalam Cawan

Petri

50

Pembuatan Bacl2 dan H2SO4

Pembuatan Larutan Strandart Mac Farland dengan Larutan H2SO4 dan BaCl2

Larutan Standart Mac Farland

51

Pencucian Daun Komba-Komba (Chromolaena odorata)

Penimbangan Daun Komba-Komba (Chromolaena odorata)

52

Pemerasan Sari Daun Komba-Komba (Chromolaena odorata) Dengan

Menggunakan Kain Halus dan Tipis

Hasil Perasan Sari Komba-Komba (Chromolaena odorata)

Pembuatan Konsentrasi Sari Daun Komba-Komba (Chromolaena odorata) 20%

40% 60% 80% dan 100%

53

Kontrol Positif Tetrasiklin dan Kontrol Negatif Aquadest

Pengulangan Pertama (P1)

v

Pengulangan Kedua (P2)

uji daya hambat sari daun komba-komba chromolaena … uji daya hambat hil… · judul “uji daya...

Documents