EGY VEMHESSÉG-SPECIFIKUS FEHÉRJE EGY VEMHESSÉG-SPECIFIKUS FEHÉRJE (PSPB) KIMUTATÁSÁN ALAPULÓ ELISA (PSPB) KIMUTATÁSÁN ALAPULÓ ELISA

TESZT ALKALMAZHATÓSÁGA A KORAI (29-TESZT ALKALMAZHATÓSÁGA A KORAI (29-30 NAPOS) VEMHESSÉG ÉS AZ EMBRIÓ 30 NAPOS) VEMHESSÉG ÉS AZ EMBRIÓ

VESZTÉS KIMUTATÁSÁRA VESZTÉS KIMUTATÁSÁRA SZARVASMARHÁBANSZARVASMARHÁBAN

Tóth Fruzsina, Gábor György, az áo. tud. kandidátusa Tóth Fruzsina, Gábor György, az áo. tud. kandidátusa

PlacentaPlacenta mikrobolyhok mikrobolyhok

Caruncle

Cotyledon

A kétmagvú sejtek vándorlásaA kétmagvú sejtek vándorlása

pplacentalacenta

méhméh

kétmagvú kétmagvú óriás sejtekóriás sejtek

PSPB PSPB az anyai az anyai keringésbenkeringésben

A PSPB festődése a placentómábanA PSPB festődése a placentómában

Méh (Caruncula)

Placenta (Cotyledon)

A PSPB első kimutatása a szérumban (nap) a A PSPB első kimutatása a szérumban (nap) a termékenyítés utántermékenyítés után

TehenekTehenek

számaszáma

Termékenyítés utáni napokTermékenyítés utáni napok

PS

PB

ng/

mL

PS

PB

ng/

mL

EllEllésés

900

700

500

300

100

80

A PSPB szérum koncentráció változásaA PSPB szérum koncentráció változása

BioPRYNBioPRYN Pregnant Ruminant Yes/No Pregnant Ruminant Yes/No

ELISAELISA Vemhességi TesztVemhességi Teszt

LEMEZLEMEZ PROTO PROTOKKOLOLLLBioTracking LLC

SAMPLES LOG(S)_____________________________

DATE ______________ ELISA PROTOCOL PLATE#________________ Signature_____________________

Write sample numbers OD and pregnancy status in respective wells:

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

A Buffer

B VHS

C VHS

D PCS

E 0.039

F 0.039

G 0.0195

H 0.0195

8 8 KONTROLLKONTROLL

88 88 MINTAMINTA

0

0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

0.6

1 6

11

16

21

26

31

36

41

46

51

56

61

66

71

Series1

A minták A minták OptiOptikkaaii Den Denzzititásánakásának (OD) (OD) megoszlása egy lemez leolvasásakormegoszlása egy lemez leolvasásakor

O DO D

Cutoff OD: (OD standard1-OD standard2)*multiplier + OD standard2

OD OD értékekértékek az elsőaz első PSPB PSPB kísérletbenkísérletben (n=69)(n=69)

100%-os egyezést találtunk a PSPB és az ultrahang diagnózis között

Átlag Minimum MaximumAI utáni napok üres vemhes üres vemhes üres vemhes

29 - 35 0.22 0.91 0.17 0.626 0.31 1.41n = 20 n = 19

36 - 55 0.20 0.92 0.16 0.704 0.26 1.17n = 17 n = 13

Total 0.21 0.92 0.16 0.63 0.31 1.41n = 37 n = 32

Cutoff: 0.325

OD értékek

Üzemi kísérletÜzemi kísérlet

termékenyítésektermékenyítések számaszáma 17421742

korrektkorrekt pozitívpozitív 772772

korrektkorrekt negatívnegatív 638638

falsfals pozitívpozitív 292292

falsfals negatívnegatív 4040

érzékenységérzékenység 95.195.1

Üzemi kísérletek visszaellenőrzéseÜzemi kísérletek visszaellenőrzése ultrahanggal ultrahanggal

ttermékenyítésermékenyítések számaek száma 336336

korrektkorrekt pozitívpozitív 316316

korrektkorrekt negatívnegatív 164164

falsfals pozitívpozitív 2020

falsfals negatívnegatív 00

érzékenységérzékenység 100100

0

0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

0.61 6

11

16

21

26

31

36

41

46

51

56

61

66

71

Series1

A minták A minták OptiOptikkaaii Den Denzzititásánakásának (OD) (OD) megoszlása egy lemez leolvasásakormegoszlása egy lemez leolvasásakor

O DO D

Embrionális veszteségekEmbrionális veszteségek

25-36 nap 36-60 nap Összes Összes 25-36 nap 36-60 napVemhes közötti közötti 25-60 nap veszteség Tej kg / Korreláció

ÖSSZESEN: 777 22 97 119 14.8 2.9 11.9 8000

közötti veszteség

ÜZEMEK tehenek veszteség veszteség veszteség % % tehén/év

I. 190 8 21 29 15.3 4.2 11.1 8000

II. 251 5 44 49 19.5 2 17.5 9500 tej / korai -0.36

III. 175 2 15 17 9.7 1.1 8.6 7500 tej / implantáció 0.91

IV. 161 7 17 700024 14.9 4.3 10.6

Köszönöm a figyelmet!Köszönöm a figyelmet!

A PSPB teszt működési elveA PSPB teszt működési elve

2424 hh

SSzézérumrum

Lem

ez f

al

** AAtt ------PSPB------PSPB

mosásmosás

24 h h

AAtt-Enz-Enz

--------A--------Att*HRP*HRP

mosásmosás

20 min20 min

SSzzubsubszztrtráátt

--------------- Színreakció- Színreakció