Título: Elución con gradiente

Estudiante: Tidiam K. Santamaría

Profesor: Víctor López Profesor: Víctor López

Febrero, 2015Febrero, 2015

COLUMBUS UNIVERSITYCOLUMBUS UNIVERSITYFACULTAD DE CIENCIAS DE LA EDUCACIÓNFACULTAD DE CIENCIAS DE LA EDUCACIÓN

POSTGRADO EN DOCENCIA SUPERIORPOSTGRADO EN DOCENCIA SUPERIORMÓDULO: COMUNICACIÓN Y TECNOLOGÍAMÓDULO: COMUNICACIÓN Y TECNOLOGÍA

Elución en Gradiente

Ventajas de la Elución en Ventajas de la Elución en GradienteGradiente

Es una de las formas más efectivas para separar varios analitos que tienen tiempos relativos de retención similares.

Muestras que contienen interferencias que eluyen retrasadas.

Elución en Gradiente

Desventajas de la Elución en Gradiente Reequilibrado de la columna Línea base Solventes Combinaciones de FM no recomendables Incompatibilidad con detectores Más rutinas de análisis

Aplicaciones de la Elución en Aplicaciones de la Elución en GradienteGradiente

Analitos muy retenidosO

OOH OH

RR

R = OH, Me, COOH, CHO, CH2OH

Elución en Gradiente

Maximización de la detección

Rango de retención

0.5 < k < 20

Aplicaciones de la Elución en GradienteAplicaciones de la Elución en Gradiente

OR

OR

O

O

R = (1-9 Carbonos)

PASOS PARA EL PASOS PARA EL MÉTODO DE ELUCIÓN MÉTODO DE ELUCIÓN CON GRADIENTECON GRADIENTE

La separación inicial será optimizada por k*

Selección de condiciones iniciales

Columna

Composición de la fase móvil

Flujo

Temperatura

Ajuste de rango de gradiente

Ajuste de selectividad (α)

Condiciones de la columna

Protocolo de re-equilibración

Elución en Gradiente

Utiliza dos o más solventes de polaridad distinta cuya Utiliza dos o más solventes de polaridad distinta cuya relación cambia a lo largo de la elución relación cambia a lo largo de la elución cromatográfica.cromatográfica.

Elución en Gradiente

DESARROLLO DE LA SEPARACIÓN CON GRADIENTEDESARROLLO DE LA SEPARACIÓN CON GRADIENTE

Sistema de bombeo

Elución en Gradiente

Condiciones experimentalesEfecto del equipo en las separaciones

Elución en Gradiente

Referencias…

1.Lloyd R. Snyder, Joseph J. Kirkland, Joseph L. Glajch. Practical HPLC Method Development. 2nd ed.1997. pp 350-399

2.Gary D. Christian. Química Analítica. 6º Edición. McGraw-Hill, México (2009). pp. 555-618

3.D.A. Skoog, J.J. Leary, “Análisis Instrumental”, McGraw-Hill, Madrid (1996)

Elución en Gradiente