the paracellular shunt of proximal tubule

5
The Paracellular Shunt of Proximal Tubule A.M. Weinstein, E.E. Windhager Department of Physiology and Biophysics, Weill Medical College of Cornell University, 1300 York Ave., New York, NY, USA Received: 15 August 2001 The Paracellular Shunt of Proximal Tubule Hans Ussing's conceptual contributions form the basis of our current understanding of epithelial ion and water transport. It was he who introduced the concept of a polarized epithelial cell in which the topographic arrangement of speci®c ion permeabili- ties and pumps leads to the net transport of ions and water Koefoed-Johnson & Ussing, 1958). He pio- neered in the application of radioisotopes to studies of ion ¯uxes across epithelia, and introduced the concept of exchange diusion Ussing, 1947). Ussing established ®rm criteria for the de®nition of active transport Ussing & Zerahn, 1951). He was the ®rst to speak about solvent drag Anderson & Ussing, 1957), and to demonstrate an intercellular or para- cellular shunt path for transepithelial ion movement Ussing & Windhager, 1964). He had come to the conclusion that ion movement between neighboring cells could contribute signi®cantly to transepithelial net transport from measurements of ion ¯uxes in frog skins treated on the apical side with hyperosmotic solutions, and microelectrode studies essentially con®rmed this view Ussing & Windhager, 1964). Subsequently, numerous authors, working on a multitude of mammalian and non-mammalian epi- thelia, have explored the quantitative signi®cance of intercellular movement of ions and of water. Whereas studies of paracellular ion movement are relatively easy to assess by the combination of isotope ¯uxes and electrophysiological measurements, the quanti- tative signi®cance and putative control of the para- cellular shunt of water remains to be established. The tight junction of the proximal tubule was securely established as a low-resistance pathway be- tween the luminal ¯uid and the lateral intercellular space Windhager, Boulpaep & Giebisch, 1967, FroÈmter, Muller & Wick, 1971). In comparison with other epithelia, the high solute permeability of these junctions correlated with the relatively sparse ®brillar structure seen on freeze fracture Claude & Goo- denough, 1973), and with the permeation of lantha- num Whittembury & Rawlins, 1972; Martinez- Palomo & Erlij, 1973; Tisher & Yarger, 1973). These junctional properties quali®ed the proximal tubule as a typical ``leaky'' epithelium, and encouraged specu- lation as to the function of the tight junction in iso- tonic water transport. A number of mathematical models of proximal tubule, incorporating a perme- able tight junction, were fashioned to try to reveal some role for the paracellular pathway in solute-sol- vent coupling Spring, 1973; Huss & Marsh, 1975; Sackin & Boulpaep, 1975), but these and subsequent models could not provide a rationalization as to why electrical leakiness should correlate with the ability to transport isotonically. The fraction of reabsorptive water ¯ow that ac- tually traverses the proximal tubule tight junction is unknown. Arguments in favor of transjunctional water ¯ow have included: substantial solvent drag of ionic species FroÈmter, Rumrich & Ullrich, 1973; Schafer, Patlak & Andreoli, 1975; Hierholzer et al., 1980), the appearance of streaming potentials with the application of an impermeant osmotic agent FroÈ mter & Gessner, 1974; Tripathi and Boulpaep, 1988); and ionic permeabilities roughly in proportion to their mobility in free solution Kottra & FroÈmter, 1983). None of these ®ndings, however, were direct proof of tight-junctional water ¯ow, and concerns were dif- ®cult to dispel that solute polarization within the lateral interspace could be responsible for these observations. This particular question, whether one could construct a model of proximal tubule with just the right solute polarization to yield realistic re¯ection coecients as well as a proper water per- meability L p ) was addressed in model calculations Weinstein, 1987). With respect to analysis of rat data from FroÈmter et al. 1973), all of the acceptable in- J. Membrane Biol. 184, 241±245 2001) DOI: 10.1007/s00232-001-0099-9 Correspondence to: E.E. Windhager; email: ewindhag@med. cornell.edu

Upload: am-weinstein

Post on 14-Jul-2016

214 views

Category:

Documents


2 download

TRANSCRIPT

��� ����������� ��� � �� ����� ����

���� ���������� ���� ������������������� �� ���� ��� ���� ����� ����� ������� ������ ������ ��������� � ���� ��� ��!� "�# ���� "�� �$

%�������& �' (�(�� )���

��� ����������� ��� � �� ����� ����

*��� ������+� ������(�� �����,(���� �� ���,���� (� �(����� (������������ ���������� ����� #���� ��������! -� #�� �� #� �����(��� ��������� � �����.�� ���������� ���� �� #���� ������������ ����������� �����/� �� ������,���0���� ��� �(��� ����� � ��� ��� �������� ��� ���#���� 12���03���� 4 ������� �5'67! *� ��0������ �� ��� ���������� ���������� � ��(���� �� 8(9�� ����� ���������� ��� �����(��� ��������� �9������ ��:(��� 1������� �5;<7! ����������,������ /�� �������� � ��� ��/����� �������������� 1������ 4 =������ �5'�7! *� #�� ��� /���� ����� �,(� ������ ���� 1 ������ 4 ��������5'<7� ��� � ���������� �� ���������(��� � ����0����(��� ��(�� ���� � ��������������� �� �������1������ 4 ���������� �5>;7! *� ��� ��� � �������(��� ���� �� ������� ,��#��� �����,��������� �(�� �����,(�� �����/����� � ������������������ �������� �� ����(������� �� 8(9�� �� ������� ������� � ��� ������ ���� #��� � ����������(����� ��� ������������ ��(���� ���������� ��/���� ���� ���# 1������ 4 ���������� �5>;7!$(,��?(���� � �(���(� �(����� #����� � ��(����(�� ��������� ��� ��0��������� ���0������� ���� �9����� ��� ?(���������� �����/����� ���������(��� ������� ��� ��� #����! ���������(���� ��������(��� �� ������� ��� ��������� ��� � ������ , ��� ��,������ ����� 8(9����� �������� �������� ����(�������� ��� ?(����0������ �����/����� ��� �(������ ����� ��� ����0����(��� ��(�� #���� ������� � ,� ����,������!

@�� ����� A(����� ��� ��9���� �(,(�� #�����(��� ����,������ �� � �#0���������� ����#� ,�0�#��� ��� �(����� 8(�� ��� ��� ������� ���������(�������� 1���������� �(����� 4 B��,����� �5><�

C�D ����� �(���� 4 ����� �5<�7! -� �������� #������� ���������� ��� ���� ��(�� ������,���� �����A(������ ��������� #��� ��� ��������� ������ /,���������(��(�� ���� � ���.� ����(�� 1���(�� 4 B0���(��� �5<�7� ��� #��� ��� ��������� ������0�(� 1�������,(� 4 %�#����� �5<)E �������.0���� 4 F���A� �5<�E @����� 4 ������� �5<�7! @����A(������� ��������� ?(���/�� ��� ��9���� �(,(�� ��� � ����� GG���� ++ ��������(�� ��� ���(����� ����(0����� �� � ��� (����� ��� ����� A(����� �� ��0���� #���� ��������! �(�,�� ����������������� ��9���� �(,(��� ����������� � �����0�,�� ����� A(������ #��� ������� � �� � ��������� ��� � ��� ��������(��� ����#� �� ��(��0��0���� �(����� 1$������ �5<�E *(�� 4 ������ �5<'E$����� 4 �(������ �5<'7� ,(� ����� ��� �(,��?(�������� �(�� �� ������ � ��������.���� �� � #� ���������� ��������� ��(�� �������� #��� ��� �,���� ��������� ��������� !

@�� ������ ���,������� #���� 8# ���� ��0�(��� ��������� ��� ��9���� �(,(�� ����� A(����� ��(���#�! ��(����� �� ��� �����A(�������#���� 8# ���� ����(���& �(,�������� ������ ���� ���� ������� 1C�D ����� %(����� 4 �������� �5<�E$������ ������ 4 ������� �5<'E *�����.�� �� ��!��56�7� ��� ���������� ��������� ��������� #��� ������������� �� ���������� ����� ����� 1C�D ����4 B������� �5<;E @������� ��� �(������ �5667E ������� ������,������� �(��� �� ������� � ������,���� �� ��� ��(��� 12���� 4 C�D ����� �56�7!"�� ����� /������� �#����� #��� ������ �� �����0A(������� #���� 8#� ��� ������� #��� ��0/�(�� � ������ ���� ��(�� �����.���� #����� ���������� ���������� �(�� ,� �������,�� � �����,���������! @��� ������(��� ?(������ #������ ���(�� �����(�� � ���� ��9���� �(,(�� #���A(�� ��� ����� ��(�� �����.���� � ���� �����������8����� ��H������ �� #��� �� � ����� #���� ���0���,���� 1��7 #�� ��������� �� ���� ����(������1���������� �56<7! ���� ������� � ���� ��� ��� ������ C�D ���� �� ��! 1�5<�7� ��� ��� �������,�� ��0

3! ���,���� ���! �6;� );�I);' 1)���7

�J-& ��!���<K���)�)0���0��5505

������������ ��� F!F! ���������E �����& �#������L���!

������!��(

�������� ����� ��?(���� �(,�������� ����� A(�������������� ������� 8(9!

��� ������ �������� � ����� A(������� #����8(9 �� ��,,�� �(,(��� ���� �� �������,(� ������ ��������� 1B�.���.� �����0������ 4 �������0,(� � �56)E �����0������� B�.���. 4 �������0,(� � �56�E �������,(� �� ��!� �56'7� #��� �������� ��� #���� ������,���� ��� �����(,(��� �������,���� ��������� � ���������(��� #���� �����0�,���� ���� ���� ��� ������ ���������� ��! -� ��� ��������� �������� � ����� A(����� #���� 8# #�� ���,�������� ��������� ����������� �(������������ ��������� ����� ��:(����� 8(9 1�������,(� �� ��!� �5667! "������������ %���� ��� ���� ��� ��0������ �����,��� �(,�������� #���� 8(9 � ��� �����A(����� ,���� (�� ���0�������� ����(�������#���� ��������� ���� ��� A(������ #��� �� �������(�� � ���# �� ����� ,(� � ����� ������ ��������������� #���� 8# 1%���� 4 ���� � �56)E���� � �56�,) 7! ������� ��� ���� 1�56'7 ����(��� ������������ �(���� ��� ������� ����� ��� �����9���� �(,(��! ��� ��� ��� %����� �?(����� ������ ����� ��� ���(��� ��� ��������� ���GG�(���� ���++� ��� ��������� ���� �� �(�� ,� ��0�����,�� � �� ��� )� ��� �(,(�� #���� �����0�,���� ! � �������� �����,(��� � ���� ����(�������� #��� ��� �(������� C����� ��� ������ 1�5657���� ��� ����� A(����� ����� ,� ��� ������������ ����������� �� � /,�� �����9� ������ ���� �� � ��0������ ����! @�� �������� ���(�� ��� /,�� ��0���9 �?(����� �� ����� � � ����� ��(�� ������,���� ���� #���� ������,���� ��� ,� �(,��������� ����������� ���� ��������� �� ��� %����� �?(�����! @�����(����� #�� ������,�� #��� ��� ������,������� ��� ��9���� �(,(��� ����(�� �� �� � �������0���� �?(���� ��� �� ,���� (�� ��� /�� ���(��(�� A(������� �������!

J��� ��� ����� A(����� ��� ,��� ����,������ �� ��(�� � ���,������� ��(�� 8(9� �� � ������� #���������� ���� ��� A(����� ����� ,� �� �������� ����� ��� ���(����� ��9���� ���(� ���,������!M�# ��� ��������� (�� ���� �� ����� ,�� #������ #���(� ��(��� �������� ����� ���(� �����(�������� #�� � ������ ��������� ,��#��� ������0������/������� ������ ��� ��9���� �(,(�� ���(� ���,0������ 1M�# 4 ���������� �5>67! B���� �����#�� /������� ������� #(�� ���(�� �� ���(��������� ����� �����(�� #����� ��� �����(,(��� ���0��������� ��� �(������ ���� ���� #(�� ���� � ���(����������� (����� 8(�� �� ��� ����� ����������(���� ������� ���������(��� ������ ���� ������ ������������������ �����(��! @���� �� �(��� #(�� ���(�� ��,���8(9 ��� ���(� ������ ���������� ��� �������������� ���� ��� ,���8(9 ����� ��� ����� A(�������� ��� �(���! ���� � ���� ������� ������ ����0���� 4 �������� 1�5>'7 ��� ��#� ���� ��9���� �(0,(�� ���(� ���,������ #�� ��������� �(�����9�������(��� ��(�� �9������! -� ��� ������ ��� ���

�,���� � ������� �����(����� #��� ��(��� � ���0����� ��,(��� ��������� ���� �����(,(��� ����������(�� �(�� ��8(���� ���(� ���,������ ���F���� ��� ��� ��������� 1F���� � ������ 4 C���0����� �5>>E ������ 4 F���� � �5><7 ��� ���������� ����� ������������ �����(�� ����� ,� �� �������0����� �����,��! $(,��?(��� �����(���(�� �9����0����� �� ��� ��� ����������� ���� ��� ��������� ��9���� �(,(�� ���(� ���,������� #���� ��(��#��� ������ ��(���� �(�� ,� �������� , ���(��� ��� �:����� �������� #��� � ��(��� #��� ����������������� �� ������,�� � ���� ����� ��0������ 1$���.�� 4 ���������� �5<�E �������� @� 4��(����� � �5<�7! -� ������� ��� ���������� �����(,(��� ����� ��(��� ���(� ���,������ ���� , ;�� 1B��������� 4 �(������ �5<;7! @�����(���� �� ��������� #��� � >�� �������� �� ������������� ���(������ ��� ��������(� ,(� � ���0�����,�� ������ �� ��� ���� ���,���� ���(��������!�!� �� �:��� � ��� ����� A(�����!

-� �� � ����� ��� ,���8(9 � ������� ���� �������� �����(,(��� ������ �� �������� ���(�� ���:��� � ����� ������������ �����(�� ���� ������ ����0�(��� #����� ��� ������� ���������(��� ������! ��0������ �9�������� ��� ��9���� �(,(�� ������ 1����.��� �5<)E ��(��,��� 4 �(�������56�7 ��� ��� ��� 1��(�/��� 4 @�(��� �5>)E������� 4 F���� �5<'7 ��� ��#� ���������� ����0��� ��� ������� ���������(��� ������ �� #��� �������� ��� ���������� �� ��� �(,(�� ,����������,����� #��� ���������� ������ ��(�� �9���0���! -������ ��� #������� ��� ����� A(�����1����.��� �5<)7 � ����(���� A(������� �������1*(�,��� �� ��!� �5<>7 ��� ,��� ������� �� ��9�����(,(��� ������ (�������� ������ �9������� ��0��(�� � ��������,�� ������� ��(���� �� ��� ���1F���� ����� 4 �������� �5<>7! @�� ������� �����0���� ��� GG,���8(9++ ���(� ����� ��� �����A(����� �� (��������! J�� ����,���� �� ���� #��� ��0������� ������������ �����(�� ����� �� A(������� #��0����� ��� ,���0��:(��� ���(� �� ����������� �(���! F������� �� ������� �(���� ��� ��(0������ ��������� A(������� ������,���� #��� ��0(�� �9������� ,�� �� ������ 1�(������ �5<)7���� �� ��� ��� 1$��� � �5<�7! ������� ��� ��������,A����� � ��� ���# ���� ����� �� ��� ,���8(9 ���(� ����� #������ A(������ �� ����� �� ����� �� �����9���� �(,(��� �(� � � �(���0������� ������������������ ��:������� ��� ��������:(���� ��� � �0��(� �� ����� � ,� �� ��� ���,������� ��������! ����� ����,���� �� ���� ,���8(9 ���(� �������� ����� A(����� ��(�� , ��������� 8#! @�� �����A(������ ��� ���� ��������� ��� ��� ��������� �� �������� �����(��� ������� �� ��� ������(���������! -� ������ ��9���� �(,(�� 1*� ������ �5<�EB��������� 4 �(������ �5<;7� ������(����������(��� ����� �(,��������� ������� ��(�� 8#����� ��� ��������(� ���� �� �?(�� �(����� �����(���

);) *��� ������ ������� -��(�

��� ��(�� �9������ #�� (�� � �������� �����9���� �(,(�� "��� ��8����� ��H����� 1����.�� 4%��.��� �5<67! -� ����� �9���������� �� �� ����� ������� A(������� ���(��(�� #�� ��������� ����� ����0����� ����� ���� #��� �������,�� ������� ��(��� ��,�� ���� ��� #���� ���(�� � ��� �(���! ���������,���8(9 ����� ��� ����� A(����� ��� ��9�����(,(�� ��� ,��� ������ , %���� � ������ 4 2�91�5567 � �9����� ����� ,�������� ���� ��� �(��������������� �������(� �������� #����� ��� ���������������(� �� �������� �(���� ������ ��(�� �90������!

-� ���# ����� ������������� � ���������������� ��� ��������(��� ����#� ��� ��9�����(,(�� #�� ��������� #���� ����(��� � ������������� A(����� 1���������� �55�7! -� ���� �����GG���������++ �����/�� ���� ,�� ����� A(������� ������� #���� ������,���� �������� ��� ��� ���� ��8��0��� ��H����� ��������� �� ������� � ����� ����0�(�� ��:������� �� ������� ���������� � �(,(���(���! ���(�� ����� ��������� ��������� #������������� ��� ������� � ���� �� #���� � ��0������ �� �����(,(��� ������ ����������� 1#������������� ���������� � �������� �����(��7 �(����� ��� ����� A(������ ��� ���(�� � ������� ����8(9! @��� ,���8(9 #�� � ��,������ ,�� ��0(���� ��� ��������� ����� ��� ��� �� �����/���� ��?(��� ������ ������� � �������! -� ���� ���� ��� ����� A(������ ��� ��� ���������� �����(������ ,��# ���� ��� �(���� ��� A(����� �� �������� A(������� ��������� ��� /9��! @�� ����?(���� A(����� ���(�� �� ���� ,� �� � ������� ���(� �����(,(��� ������� �� �� �9���� ������ ��8(���� �����(,(��� $������� ���� � ��(�� ���,���0���! ��������� #��� ���� ���# ��� ��� ,���������, J�� �� ��! 1�5<'7 ���� �� ��� ��� � ����������,(��� ��(��� ��������� ��9���� ���,�������� �� ��� �����(�� ��(��0�9������ ��(�! -���� �������(�� �(,(�� �� ���� � �(�,�� �������0����� (�� � �����/���� ��8(���� �����(,(��������� � ��9���� ���,������ 1*�.����� 4$������� �5<'E ������ ������ 4 F���� � �5<>E ����4 ���A���� �56;7� ��� �� ��� ������� ���(�����9���� �(,(�� ��� ��,,��� ������� ������ ������������� � ���� �:��� �����(,(��� ,��� ������� ��������(��� ������,���� 1���� 4 %����� �5<6E���� � �56��E� M������� M������ 4 ��������� �56;7!����� ��� ���� 1�56�7 �9����� ��� ��8(���� �����(�� ��������� �� ���� ����������! @�� (������ ��������� �� ������(����� � �������� �����(����,������ ��� �:��� �����(,(��� ������ � ��0����� ���(� ���,������! -� ���# ����� /��0����� �� �� �������� � ����(���� ���� #��� �������(����� �����(���� ��� ����� A(����� ��#� � ��� �������!

-� �(�� ��� ��������� ���� ��� ����� A(������(�� ,� � �(�� � ��(�� 8(9 ��� �������� ���(� �������� ���� ��� ����� ������ ��?(�� ��� ��9�0

��� �(,(�� �������� �� ���� ! ���(�� ������0��:(���� ��(�� ��������� ��� ,��� #��� ��/���� �����A� ��������� ���� ��?(�� ��� ,��� ��� ���� �� ���(���� ����� � ����������� �����A(�������#���� 8#! F��� ��� ��� ,���� ?(����� #����������� �� �� �(,�������� #���� 8# ������� ����0�������! - �(�� #���� 8# #��� ��/����� �� #��� �����,� �������� � ������ ��� ���������� ����� ���������.� ���� 8# #��� ��� ��#� /��0���(��(�� ��� A(�����! -� ������(���� ���� ����� �� ���(����������������� A(������� �������� ���� #��� �� ��� ����� ���� #���� 8# ���(�� ,�������� ,��#��� ��� �������! �� �� ���� ������ ����(�� ��� A(������ ����� ������� ��� ���� ����������.������ ���(����� �����A(������� 8(9��! @��� ����(�����(����� ��� ��������� ����#� , ��,������ ����� ������ �� #��� �� , � ����� ������� ��0� ��� ��� ���(��(��� ��������! C����� � �����A(������� ������ ��� ,��� � ������.�� � �����9����� ��� �������� �������� ��� �������� ���0�� ! -� ���� ������� �� �� ��� � � ?(��������������������.���� ����� A(������ �� �������� �� �����(�� � ��(����� � �������(��� ����!

@��� #�� #�� �(������ �� ���� , �(,��� *����� $������ B�����

%J�0�2)56'< 1 ��7 ��� %J�0�2��;65 1FF�7 �� ��� "�0

����� -�����(�� ��������� ���,����� ��� ��������� ��� 2����

�������!

����������

������� �!� ������� *!*! �5'<! $����� ���� � ��0������� ���

�(���� ����� 8# ���(�� ������� ��� ���� ��� ��� �������

� ������(����� �����! ��� �������� ���� ���))6I)�5

����� "!� ���A���� *!$! �56;! C���(�� ������� �� ����������0

��� �����(��� � ����� ��9���� 8(�� ���,������! ����� ����

!�)<'I)6)

�������� *!*!� F���� !�! �5<'! @�� �:���� %�����0M��� �

,�� ��(���� � ��� ������� ���������(��� ������ ��� ���

��9���� �(,(��! ����� ��� "# �)��I)�;

����.��� �!3! �5<)! ��9���� �(,(�� ���(��(��0(����� ������������

�(���� ��(�� �9������ �� ������! ����� ���� ��);I��'

����.��� �!3!� %��.��� �!%! �5<6! ������,���� ������� �� ������

��9���� �(,(�� �(���� ��(�� �9������! ��� �� ��������

�$�C))'IC)�;

���� � �! ! �56��! M��� �:��� �����(,(��� ������ � �������

"��� �������� �� ��� ��,,�� ��9���� �(,(��! �� ����� �������

%"�)>6I)6�

���� � �! ! �56�,! ����� ������,���� ��� ����#� � �� ���

��9���� �(,(��! ��� �� �������� $&�C)<5IC)5;

���� � �! !� %����� C!�!� 3�! �5<6! %������� ���(�0�0�������

������,���� �� ��� ��9���� ����(��� �(,(��! ��� �� ��������

�&�C'5)IC>�;

�(������ F!M! �5<)! ������,���� ������� ��� ��9���� �(,(��

������ �(���� ������ ������! ��� �� �������! �'�<I

'��

�������� �!�!� @� � 3!M� ��(����� � @!�! �5<�! J� ��� ����0

����� ����,���� �� 8(�� ���,������ , ��� ����� ��9����

�(,(�� ��� ��(��0�9������ ���! �� ����� ������� &'��'5>I

�>�)

!�! ��������� ��� F!F! ���������& @�� ��������(��� $�(�� ��9���� @(,(�� );�

�����0������� �!� B�.���.� F!� �������,(� � B! �56�! ���� �0

���� #���� ������,���� ������� ��,,�� ��9���� ���0

�(��� �(,(���! ��� �� �������! $$�C'';IC'>�

��(�/���� 3!�!� @�(��� �!C! �5>)! ��������� (�������(��(��

#��� (����� �� ��� ��� ����� ! ��� �� ������� $'��55I)�6

���(��� �!� B���(��� �! ! �5<�! C����(�� ���� .�(���

���(������ �� GG�����++ ��� GG���� ++ ���������! �� ���� �����

&#��5�I;��

������ 3!�!� ������� F!� F���� � M!F! �5<>! ��(� �� ���

�����(,(��� ����� �����(�� ��� ��9���� �(,(��� ���,������

�� ��� ���! ����� ��� ���� ��� &"��<5I�5)

������ 3!*!� ��������� �!3!� ��������� %!�! �5>'! @�� �:���

������ ��(��� � ���(� ���,������ , ��� ��9���� �(,(��

��� ��! �� ����� ������� $$���>�I��<�

F���� � M!F!� ������� 3! !� C�������� %!�! �5>>! C����� �:������

���(� ���,������ , ��� ��9���� �(,(�� �� ����������

�(���� ,������ ������ ���(� ���,������! �� ����� ������!

$&��>>6I�>6;

F���� !�!� ������ 3!@!� �������� *!*! �5<>! ������ ��������

��� ��� ������ (���� �������� �9���������� �9������

,�� ���K� 8(�� ��(��! ����� ���� "#!���5I�'�

C������ �!�!� ������� !�! �565! ��������� � /,��0�����9

���� � �������� �� ����� �(,(���! �� !��� �������� �$�6>�I

6<5

C�D ����� F!� B������� 2! �5<;! ����� �������� ���������� ���0

,���� ��:(��� ��������� ��� ��������� ��������� ����� ���

����� ��9���� �(,(��! �"��#��� ���� �&"�6'I56

C�D ����� F!� �(����� �!�!� ����� @! �5<�! ������,���� ���������

��� ��9���� �(,(��� ��������(� ��� ��� ����� ��(����

#��� �������� �������� ������� ��� F������� ����

F��������� ������ B! B��,����� ������ ��! ��5I�;6! C!2! $����0

��(�� N������ $�(������

C�D ����� F!� %(������ B!� �������� 2!3! �5<�! �����������

���������� "�O� ��� ��� *�J�� �,������ �� ��9����

�(,(���! �"��#��� ���� �$���65I))�

B�.���.� F!� �����0������� �!� �������,(� � B! �56)! ���� �0

���� #���� ������,���� ������� ��,,�� ��9���� ��������

�(,(���! ��� �� �������� $ �C�)�IC���

B���������� !� �(������ F!M! �5<;! �����(�� ����� ���(�

���,������ ��� ���������(��� ,���8(9 ����� ��9���� �����

�(,(��! �� ����� ������� &$�>5I6)

*� ������ 3!�! �5<�! F:��� ������� �� � �������� �����(�� ��

�����(,(��� ����������� � ��� ������,���� ��� ��9���� �(0

,(��! �� ����� ������� & ����;I���5

*�����.��� 2!� 2�#��(��� $!� $������ �!�!� 2��� 3!�!� 3��,0

��� *!%! �56�! %�8����� ��H������ ����(� �(,�������

����� �(���/���� ��� A(9�����(���� ��9���� ����(���

�������� ��,,�� �������!������� $��������� ����%� ���<)I

�6�

*�.������ *!� $������� %!�! �5<'! N������� ��9���� �(,(���

���,������� ������� , ��(�� �9������ ��� �����

���������� �(���� ������� �����(,(��� �������� ��0

���� ����������� �� ��� ����� ! �"��#��� ���� �&!�<�I

6>

*(�,���� C!� B���������� !� ������� �!� ��������� !� J���� M!

�5<>! ���������� ������� �� ����� A(������ ������

�������� ��9���� �(,(��� (�������� ������ ��(�����! �� ����

����� !��5�I5>

*(��� %!F!� ������ �!3! �5<'! ���� "��� ��� #���� 8#

���(�� ��������(��� ����#� � ����� ��9���� �(,(���!

�� ���%���� ����� ����'I�;<

2���03���� N!� *� *! ������! �5'6! @�� ���(�� ��� ��

���� ��������! ��� �������� ���� $ �)56I��6

2����� B!� C�D ����� F! �56�! C(������� ��������� ��� ����0

����(��� ����#� �� ��� ���� ���������! �� $&�� ����� "'!�)�<I

))5

M������� 3!0�!� M������� %!� ��������� 3! �56;! @�������������� ���

���� ���,���� ���������� ����������� ��� ��,,�� ��9����

����(��� �(,(��! ��� �� �������� $%�C>�<IC>;5

M�# � 3!F!� ���������� F!F! �5>6! �����(,(��� ����� ��9����

�(,(��� 8(�� ���,������ �� ��� ��� ����� ! ��� �� ��������

"$&5;�I5';

�������.0����� !� F���A� �! �5<�! @�� ������,(��� ������0

�(� �� ����� A(������ ��� ����� �(,(��! �"��#��� ����

�$�&)><I)<)

������� 3! !� F���� � M!F! �5><! ����������� � ���

�� ����� ����� �� ������������ ��� �����(����� ������� �

��(�� �9������! �� ����� ������� $!��5>�I�5<6

��(��,���� !�� �(������ F!M! �56�! * �������� �����(��

������� ������� � ��������(��� ��(�� (�������(��(�� �� ��9����

�(,(��! ����� ���� "%�<�)I<;6

J��� �!F!� *���� 3! !� �(���� 3!0M� 2�9� C!B! �5<'! F:���

��������� �����(,(�� ������ ����������� � ��9���� �(,(��

������ ����������� � ��9���� �(,(�� ���,������ �� ���

�������� ��� �,����� �9�������(��� ��(�� �9������!

�� ����� ������� &&�>�)I>)�

������ $!�!� ����� �!3! �56�! @�� �:��� �����(,(��� ������ (��

8(�� ���,������ �� ��,,�� ��9���� ����(��� �(,(��� ���0

(��� �� ����! �� �������� ��%�;)5I;;�

�������� �! !� ���� � �! ! �56'! F������� � ���������(��� �����

#���� 8# �� ��� ��9���� �(,(���! ��� �� �������� $��C�);I

C���

%���� � �!%!� ������� @!� 2�9� C!B! �556! F:��� ��(�� �90

������ � ��� ��������(��� 8(9 �������(� �� ��� ��9����

�(,(��! �� ��� ��� ������� ����;<I��')

%����� C!�! 3�!� ���� � �! ! �56)! %�� ��� ��������(��� ����0

#� �� ���,������ ��(��� ��� #���� , ��9���� ���0

�(��� �(,(�� ��� ��������� ����� ! ��� @�� ��������(���

����#� � $!F! ������ � F!C! �(������ ������� ��! ��'I�'<!

3���� ��� 3�! C(������� "�# ���

$������ *!� �(������ F!M! �5<'! ����� � �(����� ���� ���

#���� ��������! �� !��� �������� !!�><�I<��

$������ 3! !� ������� �!$!� ������� @!F! �5<'! �������

8(�� �,������ ������ � ������� �� 8#� �� ��� �(���/����

���� �����! �� !��� �������� !!�;;'I;<�

$��� � 3!C! �5<�! F:���� �����(,(��� ����� �����(�� � ���

��9���� �(,(�� ���������� ����������! ����� ���� $�)6I�'

$���.��� ! ���������� F!F! �5<�! F:��� �����(,(��� �����

�����(�� ������� � ��9���� �(,(��� 8(�� ���,������! ��� ��

�������� "#���66I��5�

$������ 2!%! �5<�! �������� ���� ���� � ������ ��9����

�(,(��! �� ���%���� ����� "���)�I�')

@������ �!�!� ������� �!F! �5<�! M������(� ������,���� ���

����� 3(����� .�(�� ���(���� �� ��� ����� �(,(�� ��� ���!

����� ���� ��)�6I)'�

@�������� $!� �(������ F!M! �566! ���� ���,���� #���� �����0

�,������� ��� ��������� �(������ �� ��%������ ��9���� �(,(��!

��� �� �������� &&�C�66I)��

������� *!*! �5;<! -������������� ��� �9������ ����0���0

(� �� ������� �(����! ����� "!'�)>)I)>�

������� *!*!� ��������� F!F! �5>;! "��(�� ��(�� ���� ���

������ ���(� �������� ���� ���(�� �� ���� ��������(�!

��� �������� ���� !"�;6;I'�;

������� *!*!� =������ 2! �5'�! ����� �������� ���(� �� ���

�(��� �������� �(����� �� ��� ����0����(���� ������� ��

����! ��� �������� ���� �����I�)<

���������� !�! �56<! ��������� ��������(��� ��(�� 8(9&

�(��� ��0�� ���������� �� ��� ���������� �������� �?(�0

����! �� !��� �������! #��'��I'�6

���������� !�! �55�! B����(��(,(��� ,������ �� � ��������0

���� ���� ��� ��9���� ������! ��� �� �������! &#�C>�)I

C>)>

);; *��� ������ ������� -��(�

�������,(� � B!� ������� B!� ����0 ����� �!� ������ �! �566!

$����� ���� �(���� �(���� �,������ ��������� ��������(���

#���� 8# �� ��� ��� ����� ��9���� �(,(��! �"��#��� ����

$" �';�I';<

�������,(� � B!� ����0 ������ !� ������ !� �����0������� �!�

B�.���.� F!� M������� *! �56'! ����#� � � ��(�� 8# ���

��(�� ���(����� �� ���� ���������!�"��#������� $'&�$�<I$))

�������,(� � B!� %�#����� C! ! �5<)! N��(���.���� �(,(���

����������� �� ��� ����� #��� ��� ��� �������(�! '��� ��

����� ��� $&�;;>I;'�

���������� F!F!� �(������ F!M� B��,����� B! �5><! F������� �0

������� ��(���� � ������ ;�������! ��& ���������� ��� -�0

���������� ������� "������ � ���������� 3! *�������

�����! ��! �'I;<! 2������ �����

!�! ��������� ��� F!F! ���������& @�� ��������(��� $�(�� ��9���� @(,(�� );'