testing of synthetic blood group antigens mut/mur kodecytes with anti-mia in blood donors

6
วารสารโลหิตวิทยาและเวชศาสตรบริการโลหิต ปที่ 21 ฉบับที่ 4 ตุลาคม-ธันวาคม 2554 229 แอนติเจน MUT และ Mur เปนแอนติเจนที่มีความสำาคัญ ใน หมูเลือดระบบ MNS โดยเฉพาะอยางยิ่งใน variant MNS หรือใน อดีตเรียกวา Miltenberger series เพราะสามารถพบแอนติบอดีตอ แอนติเจนเหลานี้ไดบอยทั้งชนิดที่เกิดขึ้นเอง (natural occurring) และถูกกระตุน (immune response) อีกทั้งมีรายงานวาเปนสาเหตุ ของปฏิกริยาไมพึงประสงคจากการรับเลือด (hemolytic transfusion reactions) และภาวะตัวเหลืองของทารกในครรภและทารกแรกเกิด (hemolytic disease of the fetus and newborn) แอนติเจนที่สำาคัญใน variant MNS มีดังนี้ Verweyst (Vw), Miltenberger (Mi a ), Murrell (Mur), Hill (Hil), Hut, Hop, Nob, DANE, MUT, TSEN และ MINY ปจจุบันพบวาแอนติเจนใน variant MNS มีทั้งหมด 11 classes 3 ในคนไทยสวนใหญพบเปน class Mi III 1,2 ซึ่งมีแอนติเจน Mur, Hill, MUT และ MINY แอนติเจนตาง ๆ variant MNS เกิดจากการจัดเรียงตัวใหม (gene recombination) ของยีน glycosphorin A และ glycosphorin B ในระยะ meiosis I ของตัวออนโดยเกิดการเปลี่ยนแปลงของ ยีน (gene conversion) ในขณะ crossing over ของโครโมโซม ที่เปนคูกัน ทำาใหไดโครโมโซมลูกผสม (hybrid) ซึ่งมีบางสวนเปน glycosphorin A และบางสวนเปน glycosphorin B เม็ดเลือดแดง ที่มีลักษณะทางพันธุกรรม (phenotype) เชนนี้จะทำาปฏิกิริยากับ แอนติบอดีที่เรียกวา anti-Mi a (MNS7) ซึ่งมิใชแอนติบอดีตัวเดียว (single antibody) แตเกิดจากการรวมกันของแอนติบอดีหลาย ชนิด (multiple antibodies) ในอดีตจัดอยูในกลุม Miltenberger series ในปจจุบันเรียกวา variant MNS ประชากรในแถบเอเชียกลางและตะวันออกเฉียงใตพบยีน ลูกผสม (hybrid) glycosphorin MUR ซึ่งเดิมเรียกวา Mi.III นิพนธตนฉบับ การทดสอบแอนติเจนสังเคราะห MUT/Mur Kodecytes กับ Anti-Mi a ในผูบริจาคโลหิต กัลยา เกิดแกวงาม, จินตนา ทับรอด, อุดม ติ่งตอย, วัฒนา เติมชัยโรจน * และ สิณีนาฏ อุทา * ฝายผลิตน้ำายาแอนติซีรัมและผลิตภัณฑเซลล *ฝายคัดกรองจายโลหิตและผลิตภัณฑ ศูนยบริการโลหิตแหงชาติ สภากาชาดไทย บทคัดยอ : ปจจุบันมีเทคโนโลยีใหมในระดับชีวโมเลกุลสำาหรับสรางแอนติเจนสังเคราะหบนผิวเม็ดเลือดแดงคือ KODE TM Biosurface Engineering Technology หรือ KODE TM Peptide Antigen (PA) Technology ใชสำาหรับผลิตเซลลมาตรฐาน (standard red cell reagents) วัตถุประสงค : เพื่อทดสอบผลิตภัณฑ 3% Abtectcell TM III antibody screening cells และ 3% Phenocell TM antibody identification cells ของบริษัท CSL Limited ซึ่งเปนผลิตภัณฑเซลลเม็ดเลือดแดงที่มีแอนติเจนสังเคราะห (MUT/ Mur kodecytes) วัสดุและวิธีการ : ตัวอยางน้ำาเหลืองจากผูบริจาคโลหิตที่ตรวจพบ anti-Mi a ชนิดเดียวจำานวน 157 ตัวอยาง นำามา ทดสอบกับผลิตภัณฑ 3% Abtectcell TM III antibody screening cells และ 3% Phenocell TM antibody identification cells เพื่อตรวจกรองและตรวจแยกชนิดแอนติบอดี โดยใชเทคนิค Saline-IAT และ ID LISS/Coombs card ผลการศึกษา : พบ 34 ตัวอยางใหผลบวกกับเซลลเม็ดเลือดแดงสังเคราะห (MUT/Mur kodecytes) คิดเปนรอยละ 21.7 โดย 21 ตัวอยางใหผลบวกดวย วิธี Saline-IAT วิธีเดียว คิดเปนรอยละ 13.4 และ 4 ตัวอยางใหผลบวกดวยวิธี ID LISS/Coombs card วิธีเดียว คิดเปนรอยละ 2.5 ตัวอยางที่ใหผลบวกทั้งสองวิธี 9 ตัวอยาง คิดเปนรอยละ 5.7 ผลการตรวจแยกแอนติบอดีพบเปน anti-MUT 33 ตัวอยาง และ anti-Mur 1 ตัวอยาง สรุป : ผลการทดสอบ 3% Abtectcell TM III antibody screening cell และ 3% Phenocell TM antibody identification cell ซึ่งเปนผลิตภัณฑเซลลที่มีแอนติเจนสังเคราะห (MUT/Mur kodecytes) ยังไมเหมาะสมที่จะนำามาใชแทนเซลลเม็ด เลือดแดงที่มีแอนติเจน variant MNS ในงานการตรวจกรองแอนติบอดี ในกลุมประชากรชาวไทยที่พบแอนติบอดีในระบบ variant MNS เปนจำานวนมาก Key Words : l Kodecytes l MUT l Mur l Variant MNS l Anti-Mi a วารสารโลหิตวิทยาและเวชศาสตรบริการโลหิต 2554;21:229-33. ไดรับตนฉบับ 25 กันยายน 2554 ใหลงตีพิมพ 3 ตุลาคม 2554 ตองการสำาเนาตนฉบับติดตอ คุณกัลยา เกิดแกวงาม ฝายผลิตน้ำายาแอนติซีรัม และผลิตภัณฑเซลล ศูนยบริการโลหิตแหงชาติ สภากาชาดไทย ถนนอังรีดูนังต เขตปทุมวัน กรุงเทพมหานคร 10330

Upload: kallaya-kerdkaewngam

Post on 26-May-2015

98 views

Category:

Science


7 download

DESCRIPTION

Thai Red Cross

TRANSCRIPT

Page 1: Testing of Synthetic Blood Group Antigens MUT/Mur Kodecytes with Anti-Mia in Blood Donors

วารสารโลหิตวิทยาและเวชศาสตรบริการโลหิต ป ที่ 21 ฉบับ ที่ 4 ตุลาคม-ธันวาคม 2554

229

แอนติเจน MUT และ Mur เปนแอนติเจนที่มีความสำาคัญ ใน

หมูเลือดระบบ MNS โดยเฉพาะอยางยิ่งใน variant MNS หรือใน

อดีตเรียกวา Miltenberger series เพราะสามารถพบแอนติบอดีตอ

แอนติเจนเหลานี้ไดบอยทั้งชนิดที่เกิดขึ้นเอง (natural occurring)

และถูกกระตุน (immune response) อีกทั้งมีรายงานวาเปนสาเหตุ

ของปฏิกริยาไมพึงประสงคจากการรับเลือด (hemolytic transfusion

reactions) และภาวะตัวเหลืองของทารกในครรภและทารกแรกเกิด

(hemolytic disease of the fetus and newborn)

แอนติเจนที่สำาคัญใน variant MNS มีดังนี้ Verweyst (Vw),

Miltenberger (Mia), Murrell (Mur), Hill (Hil), Hut, Hop, Nob,

DANE, MUT, TSEN และ MINY ปจจุบันพบวาแอนติเจนใน

variant MNS มีทั้งหมด 11 classes3 ในคนไทยสวนใหญพบเปน

class Mi III1,2 ซึ่งมีแอนติเจน Mur, Hill, MUT และ MINY

แอนติเจนตาง ๆ variant MNS เกิดจากการจัดเรียงตัวใหม (gene

recombination) ของยีน glycosphorin A และ glycosphorin

B ในระยะ meiosis I ของตัวออนโดยเกิดการเปลี่ยนแปลงของ

ยีน (gene conversion) ในขณะ crossing over ของโครโมโซม

ที่เปนคูกัน ทำาใหไดโครโมโซมลูกผสม (hybrid) ซึ่งมีบางสวนเปน

glycosphorin A และบางสวนเปน glycosphorin B เม็ดเลือดแดง

ที่มีลักษณะทางพันธุกรรม (phenotype) เชนนี้จะทำาปฏิกิริยากับ

แอนติบอดีที่เรียกวา anti-Mia(MNS7) ซึ่งมิใชแอนติบอดีตัวเดียว

(single antibody) แตเกิดจากการรวมกันของแอนติบอดีหลาย

ชนิด (multiple antibodies) ในอดีตจัดอยูในกลุม Miltenberger

series ในปจจุบันเรียกวา variant MNS

ประชากรในแถบเอเชียกลางและตะวันออกเฉียงใตพบยีน

ลูกผสม (hybrid) glycosphorin MUR ซึ่งเดิมเรียกวา Mi.III

นิพนธตนฉบับ

การทดสอบแอนติเจนสังเคราะหMUT/MurKodecytesกับAnti-Mia

ในผูบริจาคโลหิต

กัลยาเกิดแกวงาม,จินตนาทับรอด,อุดมติ่งตอย,วัฒนาเติมชัยโรจน*และสิณีนาฏอุทา*

ฝายผลิตน้ำายาแอนติซีรัมและผลิตภัณฑเซลล *ฝายคัดกรองจายโลหิตและผลิตภัณฑ ศูนยบริการโลหิตแหงชาติ สภากาชาดไทย

บทคัดยอ : ปจจุบันมีเทคโนโลยีใหมในระดับชีวโมเลกุลสำาหรับสรางแอนติเจนสังเคราะหบนผิวเม็ดเลือดแดงคือ KODETM Biosurface

Engineering Technology หรือ KODETM Peptide Antigen (PA) Technology ใชสำาหรับผลิตเซลลมาตรฐาน (standard red

cell reagents) วัตถุประสงค : เพื่อทดสอบผลิตภัณฑ 3% AbtectcellTM III antibody screening cells และ 3% PhenocellTM

antibody identification cells ของบริษัท CSL Limited ซึ่งเปนผลิตภัณฑเซลลเม็ดเลือดแดงที่มีแอนติเจนสังเคราะห (MUT/

Mur kodecytes) วัสดุและวิธีการ : ตัวอยางน้ำาเหลืองจากผูบริจาคโลหิตที่ตรวจพบ anti-Mia ชนิดเดียวจำานวน 157 ตัวอยาง นำามา

ทดสอบกับผลิตภัณฑ 3% AbtectcellTM III antibody screening cells และ 3% PhenocellTM antibody identification cells

เพื่อตรวจกรองและตรวจแยกชนิดแอนติบอดี โดยใชเทคนิค Saline-IAT และ ID LISS/Coombs card ผลการศึกษา : พบ 34

ตัวอยางใหผลบวกกับเซลลเม็ดเลือดแดงสังเคราะห (MUT/Mur kodecytes) คิดเปนรอยละ 21.7 โดย 21 ตัวอยางใหผลบวกดวย

วิธี Saline-IAT วิธีเดียว คิดเปนรอยละ 13.4 และ 4 ตัวอยางใหผลบวกดวยวิธี ID LISS/Coombs card วิธีเดียว คิดเปนรอยละ

2.5 ตัวอยางที่ใหผลบวกทั้งสองวิธี 9 ตัวอยาง คิดเปนรอยละ 5.7 ผลการตรวจแยกแอนติบอดีพบเปน anti-MUT 33 ตัวอยาง และ

anti-Mur 1 ตัวอยาง สรุป : ผลการทดสอบ 3% AbtectcellTM III antibody screening cell และ 3% PhenocellTM antibody

identification cell ซึ่งเปนผลิตภัณฑเซลลที่มีแอนติเจนสังเคราะห (MUT/Mur kodecytes) ยังไมเหมาะสมที่จะนำามาใชแทนเซลลเม็ด

เลือดแดงที่มีแอนติเจน variant MNS ในงานการตรวจกรองแอนติบอดี ในกลุมประชากรชาวไทยที่พบแอนติบอดีในระบบ variant

MNS เปนจำานวนมาก

Key Words : l Kodecytes l MUT l Mur l Variant MNS l Anti-Mia

วา รสาร โลหิต วิทยา และ เวชศาสตร บริการ โลหิต 2554;21:229-33.

ได รับ ตนฉบับ 25 กันยายน 2554 ให ลงตี พิมพ 3 ตุลาคม 2554

ตองการ สำาเนา ตนฉบับ ติดตอ คุณกัลยา เกิดแกวงาม ฝายผลิตน้ำายาแอนติซีรัม

และผลิตภัณฑเซลล ศูนยบริการโลหิตแหงชาติ สภากาชาดไทย ถนนอังรีดูนังต

เขตปทุมวัน กรุงเทพมหานคร 10330

Page 2: Testing of Synthetic Blood Group Antigens MUT/Mur Kodecytes with Anti-Mia in Blood Donors

กัลยา เกิดแกวงาม และ คณะ

JournalofHematologyandTransfusionMedicine Vol. 21 No. 4 October-December 2011

230

เปนจำานวนมากแตในคนผิวขาวและผิวดำานั้น พบ Mur แอนติเจน

ไดนอยมาก โดยพบแอนติเจน Mur ประมาณรอยละ 7 ในชาวจีน

และรอยละ 10 ในชาวไทย ในฮองกงและใตหวัน anti-Mur เปน

แอนติบอดีที่พบไดบอยและมีความสำาคัญรองจาก anti-A และ

anti-B ในเอเชียตะวันออกเฉียงใตการจัดชุดเซลลตรวจกรอง

แอนติบอดี (antibody screening cells) จำาเปนอยางยิ่งที่ตอง

มีเม็ดเลือดแดงที่มีแอนติเจน Mur รวมดวย3,4 ดวยเหตุนี้บริษัท

CSL Limited ออสเตรเลียจึงไดพยายามสรางแอนติเจน MUT/Mur

บนผิวเม็ดเลือดแดง โดยใช KODETM Biosurface Engineering

Technology ซึ่งเปนเทคโนโลยีในระดับชีวโมเลกุล ในกรณีที่สราง

แอนติเจนสังเคราะหนั้นจะเรียกเทคโนโลยีนี้วา KODETM Peptide

Antigen (PA) Technology เพื่อใหผลิตภัณฑสามารถหาตรวจ

แอนติบอดีในกลุมนี้ได5

ฝายผลิตน้ำายาแอนติซีรัมและผลิตภัณฑเซลล ศูนยบริการโลหิต

แหงชาติ สภากาชาดไทย ไดรับผลิตภัณฑ 3% AbtectcellTM III

antibody screening cells และ 3% PhenocellTM antibody

identification cells ของบริษัท CSL Limited เปนผลิตภัณฑที่

เซลลเม็ดเลือดแดงที่มีแอนติเจนสังเคราะห MUT/Mur kodecytes

จึงมีความสนใจนำาผลิตภัณฑดังกลาวมาทดสอบกับ anti-Mia ที่พบ

ในผูบริจาคโลหิตเพื่อจะศึกษาวาผลิตภัณฑดังกลาวสามารถใชตรวจ

กรองและตรวจแยกชนิดของแอนติบอดี variant MNS ไดผลเชน

เดียวกับใชเม็ดเลือดแดงที่มีแอนติเจนเหลานี้ตามธรรมชาติหรือไม

วัสดุและวิธีการ

1. ตัวอยางน้ำาเหลืองจากผูบริจาคโลหิตที่ตรวจแลววามี anti-Mia

จากฝายคัดกรองจายโลหิตและผลิตภัณฑ จำานวน 157 ตัวอยาง

2. วัสดุอุปกรณ

2.1 ผลิตภัณฑ 3% AbtectcellTM III antibody

screening cells (MUT/Mur kodecytes) Batch no. 8242034,

8242038, 8242039, 8242040, 8242041 ของบริษัท CSL Limited

ผลิตภัณฑดังกลาวถูกสงมาจาก CSL Limited ในอุณหภูมิที่เหมาะ

สม คือ 2-8 ำซ โดยมีเครื่องมือวัดอุณหภูมิใสมาดวย สามารถเช็ค

อุณหภูมิไดเมื่อผลิตภัณฑถึงผูรับ โดยเมื่อฝายผลิตน้ำายาแอนติซีรัม

และผลิตภัณฑเซลลไดรับผลิตภัณฑดังกลาวไดตรวจสอบแลววา

ผลิตภัณฑยังอยูในอุณหภูมิที่เหมาะสม

2.2 3% PhenocellTM antibody identification cells (MUT

kodecytes และ Mur kodecytes) Batch no. 8664012, 8664201,

8664018, 8664017, 8664016 ของบริษัท CSL Limited ผลิตภัณฑดัง

กลาวถูกสงมาจาก CSL Limited ในอุณหภูมิที่เหมาะสม คือ 2-8 ำซ

โดยมีเครื่องมือวัดอุณหภูมิใสมาดวย สามารถเช็คอุณหภูมิไดเมื่อ

ผลิตภัณฑถึงผูรับ โดยเมื่อฝายผลิตน้ำายาแอนติซีรัมและผลิตภัณฑเซลล

ไดรับดังกลาวไดตรวจสอบแลววาผลิตภัณฑยังอยูในอุณหภูมิที่

เหมาะสม

2.3 ID LISS/Coombs card ของบริษัท DiaMed,

Switzerland

2.4 น้ำายา polyspecific AHG ของศูนยบริการโลหิต

แหงชาติ สภากาชาดไทย

วิธีการศึกษา

1. นำาตัวอยางน้ำาเหลืองจากผูบริจาคโลหิตจำานวนทั้งหมด 157

ตัวอยาง มาตรวจกรองแอนติบอดีดวย MUT+Mur kodecytes ซึ่ง

เปนเซลลที่อยูในชุด 3% AbtectcellTM III antibody screening

cells ของบริษัท CSL Limited โดยใชวิธี Indirect Antiglobulin

Test (IAT) ดวย วิธี Saline-IAT และ ID LISS/Coombs card

2. นำาตัวอยางน้ำาเหลืองที่ตรวจจากขอ 1 แลวใหผลบวก มา

ตรวจแยกชนิดแอนติบอดีดวย 3% PhenocellTM antibody

identification cells (MUT kodecytes และ Mur kodecytes)

ของบริษัท CSL Limited โดยถาการตรวจกรองแอนติบอดีใหผล

บวกกับวิธีใดจะใชวิธีนั้นในการตรวจแยกชนิดแอนติบอดีตอไป

3. วิธีการทำา Indirect Antiglobulin Test ดวยหลอดทดลอง

และ Indirect Antiglobulin Test ดวย ID LISS/Coombs card

3.1 Indirect Antiglobulin Test (Saline IAT) ดวย

หลอดทดลองใชน้ำาเหลือง 2 หยด และเซลลตรวจกรองแอนติบอดี

1 หยด ผสมใหเขากันตั้งไวที่อุณหภูมิหองนาน 15 นาที ปนอานผล

ดูปฏิกิริยาการแตกและการจับกลุมของเม็ดเลือดแดง (hemolysis

and agglutination) ดวยตาเปลาและกลองจุลทรรศนแลว

จึง incubate ที่ 37 ำซ นาน 15 นาที ปนอานผลและลางเซล

ลดวยน้ำาเกลือปกติ 3 ครั้ง ครั้งสุดทายซับน้ำาเกลือใหแหง หยด

antiglobulin serum 2 หยด ปนอานการจับกลุมของเม็ดเลือด

แดงดวยตาเปลาและกลองจุลทรรศน ถาไดผลลบเติม Coombs

Control Cells 1 หยด ปนอานผลซ้ำา6

3.2 ID LISS/Coombs card Indirect Antiglobulin

Test หยด 1% เซลลตรวจกรองแอนติบอดีที่อยูในน้ำายา LISS 50

mL และหยดน้ำาเหลือง 25 mL นำาไป incubate ที่ 37 ำซ นาน

15 นาที ปนอานผลปฏิกิริยาจับกลุม7,8

4. ผลการทดสอบที่ยอมรับได คือ ผลิตภัณฑ 3% AbtectcellTM

III antibody screening cells (MUT/Mur kodecytes) และ 3%

PhenocellTM antibody identification cells (MUT kodecytes

และ Mur kodecytes) ใหผลตรวจตรงกับเม็ดเลือดแดงของผูบริจาค

Page 3: Testing of Synthetic Blood Group Antigens MUT/Mur Kodecytes with Anti-Mia in Blood Donors

การทดสอบแอนติเจนสังเคราะห MUT/Mur Kodecytes กับ anti-Mia ในผูบริจาคโลหิต

วารสารโลหิตวิทยาและเวชศาสตรบริการโลหิต ป ที่ 21 ฉบับ ที่ 4 ตุลาคม-ธันวาคม 2554

231

โลหิต (natural cells) ทุกตัวอยางที่ทำาการทดสอบ

ผลการศึกษา

Table 1 แสดงผลการตรวจกรองแอนติบอดีในน้ำาเหลือง

ผูบริจาคโลหิตที่มี anti-Mia ชนิดเดียว จากฝายคัดกรองจายโลหิต

และผลิตภัณฑจำานวน 157 ตัวอยาง ดวย 3% AbtectcellTM III

antibody screening cells ที่เปน MUT+Mur kodecytes พบวา

มีตัวอยางใหผลบวกจำานวน 34 ตัวอยาง คิดเปนรอยละ 21.7 โดย

ใหผลบวกกับวิธี Saline-IAT วิธีเดียวจำานวน 21 ตัวอยาง คิด

เปนรอยละ 13.4 วิธี ID LISS/Coombs card วิธีเดียวจำานวน 4

ตัวอยาง คิดเปนรอยละ 2.5 และใหผลบวกทั้งสองวิธี 9 ตัวอยาง

คิดเปนรอยละ 5.7

Table 2 แสดงผลการตรวจเพื่อบอกชนิดของแอนติบอดี

ดวย 3% PhenocellTM antibody Identification cells (MUT

kodecytes และ Mur kodecytes) พบวา มีตัวอยางที่ใหผลเปน

anti-MUT 33 ตัวอยาง anti-Mur 1 ตัวอยาง จากตัวอยางทั้งหมด

157 ตัวอยาง

วิจารณและสรุป

Anti-Mia เปนแอนติบอดีตอแอนติเจนที่พบนอย (low frequency

antigens) ในระบบ MNS พบไดนอยในคนผิวขาวแตพบไดมาก

ในคนผิวเหลือง แอนติบอดีนี้สวนใหญเปน IgM มีคุณสมบัติเกิด

ปฏิกริยาไดในชวงอุณหภูมิที่กวาง (multiple phase antibody)

แตอาจจะเปน IgG หรือมี IgG รวมดวย พบมากเปนอันดับ

สองในคนไทย9 และเปนแอนติบอดีที่มีความสำาคัญทางคลินิก

เพราะเปนสาเหตุทำาใหเกิดปฏิกิริยาไมพึงประสงคจากการรับเลือด

(hemolytic transfusion reaction) และภาวะตัวเหลืองของทารก

ในครรภและทารกแรกเกิด (hemolytic disease of the fetus

and newborn) เคยมีรายงานพบเด็กตัวเหลืองแรกเกิดเนื่องจาก

มารดามี anti-MUT (MNS35) แตการตรวจกรองแอนติบอดีใน

น้ำาเหลืองของมารดาใหผลลบเพราะใชเซลลตรวจกรองแอนติบอดี

(antibody screening cells) และเซลลตรวจแยกชนิดแอนติบอดี

(antibody identification cells) ที่ไมมีแอนติเจน variant MNS

ซึ่งเปนขอจำากัดในการเตรียมผลิตภัณฑเซลล (red blood cell

reagents)10 อยางไรก็ตามไดมีความพยายามที่จะสรางแอนติเจน

สังเคราะหขึ้นเพื่อเตรียมเซลลตรวจกรองแอนติบอดี (antibody

screening cells) และเซลลตรวจแยกชนิดแอนติบอดี (antibody

identification cells) เพื่อใชในกลุมประชากรคนผิวเหลือง จาก

การศึกษาผลิตภัณฑ 3% AbtectcellTM III antibody screening

cells และ 3% PhenocellTM antibody identification cells กับ

น้ำาเหลืองผูบริจาคโลหิตที่ตรวจพบ anti-Mia จำานวน 157 ราย โดย

นำามาตรวจกรองแอนติบอดีดวย screening cells (MUT+Mur

kodecytes) ดวยวิธี Saline-IAT และ ID LISS/Coombs card

ดัง Table 1 พบวาใหผลบวกจำานวน 34 ตัวอยาง คิดเปนรอยละ

21.7 โดยใหผลบวกวิธี Saline-IAT มากที่สุด จำานวน 21 ตัวอยาง

คิดเปนรอยละ 13.4 ซึ่งสอดคลองกับคุณสมบัติของแอนติบอดีใน

variant MNS (anti-Mia) คือสวนใหญเปน IgM ซึ่งการทดสอบ

ดวยวิธี Saline-IAT จะไดผลดีกวา ID LISS/Coombs card

ซึ่งใหผลบวก เพียง 4 ตัวอยาง คิดเปนรอยละ 2.5 การที่ตรวจ

ไดผลบวกเพียง 34 ตัวอยางนั้น อาจจะเนื่องมาจากเซลลตรวจ

กรอง (antibody screening cells) ของ CSL Limited เปน

แอนติเจนสังเคราะหมีปริมาณแอนติเจนนอย5 จึงแตกตางจากเซลล

เม็ดเลือดแดงที่มีแอนติเจน MNS ของคนไทย (natural cells)

ซึ่งสวนใหญเปน Mi III ปจจุบันเรียกวา GP. Mur เปนแอนติเจน

เชิงซอน (antigen complex) หลายชนิด เชน MUT Mur Hill

และ MINY เปนตน เมื่อนำามาตรวจแยกชนิดของแอนติบอดี โดย

ทดสอบกับ 3% PhenocellTM antibody identification cells

Table1 Result of antibody screening.

Totalsamples

Tested

(N)

Totalpositive

N(%)

MethodsN(%)

SalineIATonly IDLISS/Coombs

cardonly

Bothmethods

157 34 (21.7) 21 (13.4) 4 (2.5) 9 (5.7)

Table2 Results of antibody identification.

Methods SamplesTested

(N)

anti-MUT

(N)

anti-Mur

(N)

Saline-IAT 21 21 0ID LISS/Coombs card 4 3 1Both methods 9 9 0

Page 4: Testing of Synthetic Blood Group Antigens MUT/Mur Kodecytes with Anti-Mia in Blood Donors

กัลยา เกิดแกวงาม และ คณะ

JournalofHematologyandTransfusionMedicine Vol. 21 No. 4 October-December 2011

232

(MUT kodecyte และ Mur kodecytes) ดัง Table 2 พบวาเปน

anti-MUT 33 ตัวอยาง anti-Mur เพียง 1 ตัวอยาง ซึ่ง anti-MUT

นั้นเปน anti-Mur+anti-Hut ไมสามารถแยกออกจากกันไดจึง

พบไดมากกวา11 ทั้ง anti-MUT และ anti-Mur เปนแอนติบอดี

ที่พบไดบอยใน variant MNS

สรุปจากผลการทดสอบ 3% AbtectcellTM III antibody

screening cells และ 3% PhenocellTM antibody identification

cells ซึ่งเปนผลิตภัณฑเซลลที่มีแอนติเจนสังเคราะห (MUT/Mur

kodecytes) ยังมีคุณภาพไมดีพอในดานที่เปนเซลลตรวจกรอง

แอนติบอดี (antibody screening cells) เนื่องจากมีผลการ

ทดสอบที่เปนบวกเพียงรอยละ 21.7 ไมตรงกับการใชเซลลเม็ด

เลือดแดงจากผูบริจาคโลหิต (natural cells) แสดงวาผลิตภัณฑยัง

ไมเหมาะสมที่จะนำามาใชแทนเซลลเม็ดเลือดแดงที่มีแอนติเจน

variant MNS ในงานดานซีโรโลยีในกลุมประชากรที่พบแอนติบอดี

ใน variant MNS เปนจำานวนมากโดยเฉพาะอยางยิ่งในประเทศไทย

และยังไมเคยมีรายงานการใชผลิตภัณฑนี้ของ CSL Limited ใน

ประเทศที่มีประชากรซึ่งพบแอนติบอดีใน variant MNS เปนจำานวน

มาก นอกจากนี้การสรางแอนติเจนสังเคราะหนั้นเปนเทคโนโลยีที่ใน

ปจจุบันมีราคาแพง เซลลเม็ดเลือดแดงที่มีแอนติเจน variant MNS

จากผูบริจาคโลหิตมีตนทุนที่ถูกกวาเนื่องจากสามารถหาแอนติเจน

ใน variant MNS ไดไมยากในคนไทย

กิตติกรรมประกาศ

ขอขอบคุณ บริษัท CSL Limited ประเทศออสเตรเลียสำาหรับ

ผลิตภัณฑ 3% AbtectcellTM III antibody screening cells

และ 3% PhenocellTM antibody identification cells ที่ใชใน

งานศึกษาวิจัยนี้

เอกสารอางอิง1. Chandanyingyong D. The Miltenberger complex. Thai J Hematol

Transf Med 1996;4:285-7.

2. Chandanyingyong D, Bejrachandra S. Studies on the Miltenberger

complex frequency in Thailand and family studies. Vox sang

1975;28:152-5.

3. Daniels G. Human Blood Groups. 1st ed. Cambridge: Great

Britain 1995;3:160-78.

4. Daniels G. Other Blood Groups. In: Roback JD, Combs MR,

Grossman BJ, Hillyer CD, eds. Technical Manual. 16th ed. Bethesda,

MD. AABB 2008:416-7.

5. Heathcote D, Carroll T, Wang J, et.al. Novel antibody screening

cell, MUT+MUR kodecytes, created by attaching peptides onto

red blood cells. Transfusion 2010;50:635-41.

6. Combs MR. Method 3-2. Detecting Antibodies to Red Cell

Antigens-Indirect Antiglobulin Tests. In: Roback JD, Combs

MR, Grossman BJ, Hillyer CD, eds. Technical Manual. 16th ed.

Bethesda, MD. AABB 2008:900.

7. DiaMed-ID Microtyping System, Direction for use, Diamed AG,

Switzerland 1991.

8. Nathalang O, O.Charoen R, Sandondu N, Meesoontorn R. Application

of the Gel test for antibody screening and identification. Thai J

Hematol Tranf Med 1993;4:299-306.

9. Chiewsilp P, Wiratkasem Y, Sae-huan C. Delayed hemolytic

transfusion reaction due to anti-Mia. Thai J Hematol Transf

Med 1996;4:289-90.

10. Van den Bos AG, Steiner K. Haemolytic disease of the newborn

caused by anti-MUT (MNS35). Vox Sang 2004;87:208-9.

11. Mak KH, Banks JA, Lubenko A, et.al. A survey of the incidence

of Miltenberger antibodies among Hong Kong Chinese blood

donors. Transfusion 1994;34:238-41.

12. Frame T, Carroll T, Korchagina E, et.al. Synthetic glycolipid

modification of red blood cell membranes. Transfusion 2007;47:876-82.

13. Flower R, Lin P-H, Heathcote D, et al. Insertion of KODETM peptide

constructs into red cell membranes: Creating artificial variant

MNS blood group antigens. Vox Sang 2008;95(Suppl 1):203-4.

14. Heathcoate D, Flower R, Henry S. Development of novel alloantibody

screening cells - the first example of the addition of peptide

antigens to human red cells using KODETM technology. Vox

Sang 2008;95(Suppl 1):174.

15. Frame T, Henry S, Mobley D, et al. Attachment of synthetic

carbohydrate antigens to red blood cells using KODE technology.

Transfusion 2006;46(suppl 9S):32A.

16. Henry S, Bovin N. The development of synthetic peptidolipids,

glycolipids and other lipid-linked structures to create designer

red cells. Transfusion 2008;48(suppl 2S):194A.

17. Henry S. Water soluble synthetic glycolipids. Glycobiology

2007;17:1267.

18. Henry SM. KODETM CAE: creating the world’s first ABO analytical

control system. Annual Scientific Meeting. Transfusion Med

2006;16:217.

19. Heathcoate D, Henry S, Flower R. Development and Validation of

antibody screening cells specifically designed for Asia populations-

The first example of the addition of peptide antigens to human

red cells using KODE Technology. Vox Sang 2008;95(Suppl 1):174.

20. Henry S. Modification of red blood cells for laboratory quality

control use. Current Opinion in Hematology 2009;16:467-72.

21. Henry SM. Engineering the surface of red cells with synthetic

glycolipids (KODETM CAE) to create ABO analytical sensitivity

controls and xeno-modified cells. Xenotransplantation 2005;12:356.

22. Fongsarun J, Nuchprayoon I, Yod-in S, Kupatawintu P, Kidprasirt

C. Blood Groups in Thai Blood Donors. Thai J Hematol Transf

Med 2002;4:277-86.

Page 5: Testing of Synthetic Blood Group Antigens MUT/Mur Kodecytes with Anti-Mia in Blood Donors

การทดสอบแอนติเจนสังเคราะห MUT/Mur Kodecytes กับ anti-Mia ในผูบริจาคโลหิต

วารสารโลหิตวิทยาและเวชศาสตรบริการโลหิต ป ที่ 21 ฉบับ ที่ 4 ตุลาคม-ธันวาคม 2554

233

Abstract : Nowadays, there is new molecular technology for synthetic blood group antigen on red blood cell

membrane that is KODETM Biosurface Engineering Technology or KODETM Peptide Antigen (PA) Technology

which can be used for red cell reagents production. Objectives : To evaluate the 3% AbtectcellTM III antibody

screening cells and 3% PhenocellTM antibody identification cells which have the synthetic blood group antigens

MUT/Mur kodecytes of CSL Limited, Australia. Material and Methods :One hundred and fifty seven plasma

samples from blood donors who had anti-Mia were tested with 3% AbtectcellTM III antibody screening cells and

3% PhenocellTM antibody identification cells using Saline-IAT method and ID LISS/Coombs card. Results : Thirty

four samples were positive with synthetic blood group MUT/Mur kodecytes (21.7%). Twenty one samples were

detected by Saline-IAT method only (13.4%). Four samples were detected by ID LISS/Coombs card only (2.5%)

and nine samples were detected by both methods (5.7%). Antibody identification indicated that 33 samples

were anti-MUT and the other was anti-Mur. Conclusion : 3% AbtectcellTM III antibody screening cells and 3%

PhenocellTM antibody identification cells which are synthetic blood group MUT/Mur kodecytes were not suitable

to replace the red blood cells with variant MNS antigens for antibodies screening of high incidence variant MNS

antibodies as Thai population.

Key Words : l Kodecytes l MUT l Mur l Variant MNS l Anti-Mia

J Hematol Transfus Med 2011;21:229-33.

TestingofSyntheticBloodGroupAntigensMUT/MurKodecyteswith

Anti-MiainBloodDonors

KallayaKerdkaewngam,JintanaTubrod,UdomTingtoy,WattanaTermchairoj*andSineenartOota*Antiserum and Standard cell Preparation Section; *Blood Screening and Distribution Section National Blood Centre, Thai Red Cross Society

Page 6: Testing of Synthetic Blood Group Antigens MUT/Mur Kodecytes with Anti-Mia in Blood Donors

JournalofHematologyandTransfusionMedicine Vol. 21 No. 4 October-December 2011

234