teste biochimice

8/19/2019 Teste Biochimice

http://slidepdf.com/reader/full/teste-biochimice 1/34

PRINCIPALELEPRINCIPALELETESTE BIOCHIMICE UTILIZATE INTESTE BIOCHIMICE UTILIZATE IN

DETERMINAREA STARII DE IGIENADETERMINAREA STARII DE IGIENA

SI A SALUBRITATII PRODUSELORSI A SALUBRITATII PRODUSELORALIMENTAREALIMENTARE

- (BACTERIOLOGIA ALIMENTARA)- (BACTERIOLOGIA ALIMENTARA)



TESTUL HEMOLIZEI

• Capacitatea unor bacterii de a elabora enzime

care pot produce hemoliza globulelor rosii

ale dieritelor specii de animale!• Speciile cele mai utilizate iind" oaia# calul#

iepurele# s!a!

• Mediul utilizat cel mai rec$ent este gelozasange %agar sange&# cu o proportie de '()*+

sange inglobat in mediu!



TESTUL ,E HEMOLIZ- .

TEST ,E /-TO0E1IT-TE

• /2EZE1T- HEMOLIZEI ( denota

capacitatea patogena a bacteriilor testate3

• Bacterii importante pentru microbiologiaalimentara –testate pt. hemoliza: E. coli,

Bacillus cereus, Clostridium perfringens,

Streptococcus# etc!• LI/S- HEMOLZEI ( denota lipsa de

patogenitate a bacteriilor cercetate!



TI/U2I ,E HEMOLIZ-

• HEMOLIZ- -L4- ( producerea in 5urul

coloniei a unei decolorari mai putin intinsa#

insotita de o in$erzire a mediului (

E4ECTUL 6I2I,-1S . datoritatransormarii hemoglobinei in

methemoglobina sub actiunea apei o7igenate

produsa de bacterie!• Hemolizinele streptococice sunt acti$e ata

de globulele rosii de iepure!



• HEMOLIZ- 8ET- . decolorarea intensa a

mediului agar sange in 5urul coloniei#

datorita unui proces intens de hemoliza!

• Hemolizinele streptococice sunt acti$e ata

de globulele rosii de oaie!

• HEMOLIZ- 0-MM- . hemolizinele

streptococice sunt intense ata de globulele

rosii de iepure si oarte putin acti$e ata de

cele de oaie!



TESTUL I1,OLULUI

o ,ezintegrarea triptoanului sub actiunea

unor enzime elaborate de microorganisme3

o Indolul se pune in e$identa cu a5utorul unorreacti$i# cel mai utilizat iind reacti$ul

9o$acs sau

o cu a5utorul benzilor de hartie impregnate cuindicatori3



Testul indolului cu reacti$

9o$acs• presupune punerea in contact a culturilor de

bacterii insamantate pe medii lichide .

preerabil apa triptonata# cu reacti$ul 9o$acs#reacti$ pe baza de iod 3

• TEST /OZITI6( aparitia unui inel de culoare

rosie la supraata mediului3

• TEST 1E0-TI6 . nu apare inelul de culoare

rosie sau prezinta alta coloratie!



• 8enzile de indol sunt benzi de hartie cu o

lungime de )*():cm# *#'cm latime si care au

impregnat );< din lungimea benzii cuindicator!

• TEST /OZITI6 ( innegrirea benzii dupa :=(

=> ore de incubare# benzi care contin indicator

pentru indol3

• TEST 1E0-TI6 . nu se constata innegrirea

benzii!

TESTUL 8E1ZILO2

,E I1,OL



• 8acterii indol poziti$e ( Escherichia#

/asteurella# etc!3• 8acterii indol negati$e . Salmonella#

Enterobacter# /roteus# Hania#etc!



TESTUL HI,2O0E1ULUI

SUL4U2-T• Capacitatea unor enzime bacteriene de a

dezintegra aminoacizii care contin sul"

cistina# cisteina# etc!3

• Se pune in e$identa cu a5utorul benzilor sau

a mediilor care contin acetat de plumb"

• Medodele pe medii de cultura si cu a5utorul

benzilor!



• TEST /OZITI6 ( innegrirea centrului colonieiculti$a de mediile care contin )()*+ acetat de

plumb sau innegrirea mediului din 5urul

coloniei daca se produce sulura de plumbrezultata din combinarea hidrogenului sulurat

si a acetatului de plumb!

• TEST 1E0-TI6 . nu se constata colonii cucentrul negru sau innegrirea mediului in 5urul

coloniei!

TESTUL H:S /E ME,II



• 8enzile pentru H:S sunt benzi de hartie cu o

lungime de )*():cm# cu o latime de *#'cm si

care au impregnat );< din lungimea benzii cuindicator# cel mai utilizat iind acetatul de

plumb!

TESTUL 8E1ZILO2 pt! H:S



• TEST H:S /OZITI6 ( innegrirea benzii

dupa :=(=> ore de incubare# benzi care

contin )*+ acetat de plumb3

• TEST H:S 1E0-TI6 . nu se constata

innegrirea benzii!

• 8acterii H:S poziti$e ( /roteus# Salmonella#

Citrobacter"

• 8acterii H:S negati$e . Escherichia#

Enterobacter# Staph?lococcus!



TESTUL ,E HI,2OLIZ- -

U2EEI• presupune punerea in e$identa a

proprietatilor unei bacterii de a hidroliza

ureea# realizata pe medii lichide sau solidecare contin uree )*(:*+3

• Medii de cultura utilizate" MIU#

Christensen# bulion uree# etc!



TESTUL CIT2-TULUI

• presupune punerea in e$identa a

proprietatilor unei bacterii de a utilizacitratul de amoniu sau de sodiu ca unica

sursa de carbon . pe mediul Simmons3

• Mediul contine )#'+ albastru de bromtimol



• TEST /OZITI6 ( $irarea culorii mediului

din albastru $erzui in albastru intens3• TEST 1E0-TI6 . nu se constata

modiicarea culorii mediului de cultura#

acesta ramane $erde( albastru!• 8acterii citrat poziti$e ( Salmonella#

Enterobacter# Citrobacter"

• 8acterii citrat negati$e . Escherichia#Shigella!



• Pentru testare bi!"i#i!$ se uti%i&ea&$'

• !n!#itent #eii%e aar TSI* MIU* MIO*

MIL* MIL+* !itrat Si##ns* RM-,P*

e%&$ nutriti$* et!* .i rea!tiii /entru

rea!0ia RM-,P* !itrat e 1ier* rea!tii

/entru in%* et!2* sau



• siste#e #u%titest stanari&ate* !are

uti%i&ea&$ un nu#$r #u%t #ai #are e

teste !are /t 1i e1e!tuate .i !are se /tinter/reta i&ua%* /rin rea!0ie e !u%are

sau aut#at* 1iin !$ s-au e&%tat e

!$tre une%e 1ir#e /rra#e s/e!ia%i&ate2



• siste#e #u%titest stanari&ate* !areuti%i&ea&$ un nu#$r #u%t #ai #are e

teste !are /t 1i e1e!tuate .i !are se /t

inter/reta i&ua%* /rin rea!0ie e !u%are

sau aut#at*

• a!estea s-au e&%tat e !$tre une%e

1ir#e /rra#e s/e!ia%i&ate2



ME,II ,E CULTU2-

MULTITEST



• E1e!tuarea teste%r bi!"i#i!e3E1e!tuarea teste%r bi!"i#i!e3

• Meiu% TSI 4 %u!&$* %a!t&$* &a"ar&$

• Inter/retarea rea!0ii%r bi!"i#i!e se 1a!e/rin i&ua%i&area !u%rii /e !%ana .i/anta #eiu%ui TSI'

• !%ana a%ben$ a #eiu%ui ent$1er#entarea %u!&ei (rea!0ie /&iti$)3

• !%ana r.ie sau nes!"i#bat$ ini!$

neuti%i&area %u!&ei (rea!0ie neati$)3• a/ari0ia !%ra0iei nere* ent$

/ru!erea e "iren su%1urat3



• a/ari0ia !%ra0iei nere* ent$ /ru!ereae "iren su%1urat3

• /ru!erea e a& in %u!&$ sei&ua%i&ea&$ /rin a/ari0ia bu%e%r e a& 5n#eiu sau !"iar /rin ru/erea #eiu%ui2

• /anta #eiu%ui e !u%are a%ben$ ent$1er#entarea %a!t&ei .i6sau &a"ar&ei(%a!t&$ .i6sau &a"ar&$ /&iti$)* iar

• !u%area r.ie sau nes!"i#bat$ ini!$neuti%i&area %a!t&ei .i6sau &a"ar&ei(%a!t&$ .i6sau &a"ar&$ neati$)3



• !u%turi%e ti/i!e e sa%#ne%e !res/un unei/ante e !u%are r.ie (#eiu a%!a%in)*

!%an$ a%ben$ (1er#entare a%!a%in$)* !u1r#area* 5n !e%e #ai #u%te !a&uri a"irenu%ui su%1urat .i !u 1r#are e a&3

• Salmonella nu /ru!e in%* rea!0ieneati$ /e bana e "7rtie i#/renat$ !u/ara-i#eti%a#in-ben&a%e"i$2 Cue8!e/0ia serti/uri%r Gallinarum .i Pullorum tate !%e%e%a%te serti/uri sunt#bi%e2



• Meiu% MIL+ 4 #bi%itate* in%* %i&in$*

1eni%a%anin$

• a/ari0ia unei !%ra0ii i%ete u/$ in!ubare ini!$

rea!0ie /&iti$* e!i /ru!erea

%i&ine!arb8i%a&ei* sa%#ne%e%e 1iin e reu%$

%i&ine!arb8i%a&$ /&itie3• eri1i!area /ru!erii e 1enina%anine!arb8i%a&$

se eri1i!$ /rin a$uarea !%rurii 1eri!e %a

su/ra1a0a #eiu%ui* sa%#ne%e%e 1iin

1enina%anine!arb8i%a&$ neatie nu se /ru!eirarea !u%rii 5n ere (rea!0ie neati$)3



• #bi%itatea tu%/ini%r 5ns$#7n0ate

eter#in$ #i1i!area turbiit$0ii #eiu%ui*

ini1erent e #i1i!$ri%e e !u%.are !are/t a/$rea3

• Rea!0ia in%u%ui este neati$2

• Meiu% MIL - este un #eiu se#is%i* !arese tarn$ re/t* 5n tuburi !u ia#etru% #i!* 5n !are se 5ns$#7ntea&$ /rin 5n0e/are /etat$ !%ana* in !u%tura e !er!etat2 Este

uti%i&at /entru eri1i!area e!arb8i%$rii%i&inei u/$ in!ubare e 9: e re %a ;<=Csau ;>=C2



• A/ari0ia unei !%ra0ii i%ete 5n #eiu

re1%e!t$ rea!0ie /&iti$* Salmonella e!arb8i%ea&$ %i&ina* e!i eter#in$

a/ari0ia !u%rii i%ete2 Rea!0ia neati$

este at$ e !%ra0ia a%ben$ a !%anei#eiu%ui2 A!est #eiu eri1i!$ .i

e8isten0a #bi%it$0ii* !are se trau!e /rin

tu%burarea #eiu%ui e-a %unu% %iniei e 5ns$#7n0are2



• Meiu% CS 4 Citrat Si##ns

• ba!terii%e in enu% Salmonella uti%i&e&$

!itratu% e siu

• rea!0ie /&iti$* a/ari0ia !%ra0iei

a%bastre a #eiu%ui* e!i irarea in

ere 5n a%bastru* u/$ in!ubare3

• rea!0ie neati$ nu se #i1i!$ !u%area

ini0ia%$ a #eiu%ui2



• Meiu% MIU .i C"ristensen - este uti%i&at/entru eri1i!area uti%i&$rii ureeii /rin

"ir%i&$

• er#enii in ru/u% Salmonella nu 1%ses!urea- rea!0ie neati$*

• !%ra0ia #eiu%ui (#arnie /entru MIU .ia%ben es!"is %a #eiu% Cristensen) nu este#i1i!at$3

• rea!0ia /&iti$ 4 se /ru!e 5n$%benire a#eiu%ui2

•



TESTUL O@I,-ZEI

• presupune punerea in contact a unei

colonii# ragment de colonie sau a unei

culturi de cercetat obtinuta la : zile# ma7im= zile pe un mediu solid si care se combina

cu reacti$ pentru o7idaza# solutie apoasa de

)+ concentratie . tetrametil(paraenil(endiamin(hidroclorid!



• TEST /OZITI6 . aparitia unei coloratii

$iolacee# negricioasa sau negricosa(

maronie# in unctie de producator 3• TEST 1E0-TI6 . lipsa aparitiei unei

coloratii# hartia de iltru ramane alba# alb(

galbuie!



• Combinarea culturilor de testat obtinute pe medii

solide ( se recolteaza o colonie sau un ragment de

colonie si se pune in contact cu o picatura de apa

o7igenata pe o lama de microscop sau sticla de

ceas!

• Combinarea culturilor de testat obtinute pe medii

lichide cu 'ml de bulion triptic de := ore a$and <ml H:O: in concentratie <+!

TESTUL C-T-L-ZEI

teste biochimice

Documents