tesis - digilib.uns.ac.id fileperpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id commit to user v kata...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

i

PENGARUH VASCULAR ENDOTHELIAL GROWTH FACTOR 121

REKOMBINAN TERHADAP EKSPRESI HEAT SHOCK PROTEIN 70

PADA MENCIT (Musmusculus) MODEL PREEKLAMPSIA

TESIS Untuk Memenuhi Sebagian Persyaratan Mencapai Derajat Magister

Program Studi Kedokteran Keluarga

Minat Ilmu Biomedik

Disusun Oleh :

Lungguk Helen Alfian Tanjung

NIM : S501208018

PROGRAM PASCASARJANA

UNIVERSITAS SEBELAS MARET

SURAKARTA

201


commit to user

ii


commit to user

iii


commit to user

iv

PERNYATAAN

Saya yang bertanda tangan dibawah ini

Nama : Lungguk Helen Alfian Tanjung

NIM : S501208018

Menyatakan dengan sesungguhnya bahwa tesis yang berjudul Pengaruh Vascular

Endothelial Growth Factor 121 Rekombinan Terhadap Ekspresi Heat Shock Protein

70 Pada Mencit (Musmusculus) Model Preeklampsia adalah betul-betul karya saya

sendiri. Hal-hal yang bukan karya saya, dalam tesis ini diberi tanda citasi dan

ditunjukan dalam daftar pustaka. Apabila dikemudian hari terbukti pernyataan saya

tidak benar, maka saya bersedia menerima sanksi akademik berupa pencabutan tesis

dan gelar yang saya peroleh dari tesis tersebut.

Surakarta, 13 Mei 2016

g Yang Membuat Pernyataan

Lungguk H. A. TanjungNIM S501208018


commit to user

v

KATA PENGANTAR

Segala puji dan syukur saya panjatkan kepada Tuhan Yang Maha Esa atas

berkat dan limpahan rahmat-Nya, saya dapat menyelesaikan tesis ini, yang disusun

untuk memenuhi persyaratan dalam mengikuti Program Pendidikan Dokter

Spesialis I Obstetri dan Ginekologi di Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas

Maret Surakarta, serta untuk memenuhi persyaratan mencapai derajat Magister

Kesehatan di Program Studi Magister Kesehatan Universitas Sebelas Maret

Surakarta dengan judul “PENGARUH VASCULAR ENDOTHELIAL

GROWTH FACTOR 121 REKOMBINAN TERHADAP EKSPRESI HEAT

SHOCK PROTEIN 70 PADA MENCIT (Musmusculus) MODEL

PREEKLAMPSIA“

Terima kasih yang tak terhingga dan penghargaan yang sebesar-besarnya

saya sampaikan kepada Dr. Sri Sulistyowati, dr., SpOG(K) sebagai pembimbing

I yang dengan penuh perhatian dan kesabaran telah memberikan dorongan,

bimbingan, dan saran dalam proses penyelesaian tesis ini.


juga saya sampaikan kepada Dr. Supriyadi Hari R, dr., SpOG(K) sebagai

pembimbing II yang dengan penuh perhatian dan kesabaran telah memberikan

dorongan, bimbingan, dan saran dalam proses penyelesaian tesis ini.


juga saya sampaikan kepada tim penguji yang telah berkenan memberikan waktu

dan tenaga dalam proses penyelesaian tesis ini.


commit to user

vi

Dengan selesainya tesis ini, perkenankanlah pada kesempatan ini saya

mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya dan rasa hormat yang setinggi-

tingginya kepada :

1. Prof. Dr. Ravik Karsidi, M.Si, sebagai Rektor Universitas Sebelas

Maret Surakarta.

2. Prof. Dr. M. Furqon Hidayatullah, M.Pd sebagai Direktur

Pascasarjana Universitas Sebelas Maret Surakarta.

3. Prof. Dr. Ahmad Arman Subiyanto, dr., M.S. sebagai Ketua Program

Studi Magister Kedokteran Keluarga Universitas Sebelas Maret

Surakarta.

4. Prof.Dr. Muchsin Doewes dr.,SU,AIFO,MARS sebagai penguji tesis

5. Prof. Dr. J. Priyambodo, dr, SpMK, MS sebagai penguji tesis

6. Prof. Dr. Hartono dr.,M.Si., sebagai Dekan Fakultas Kedokteran

Universitas Sebelas Maret Surakarta.

7. Endang Agustinar, dr., M.Kes, sebagai direktur RSUD Dr. Moewardi

Surakarta

8. Dr. Supriyadi Hari Respati, dr., SpOG(K), sebagai Kepala Bagian

SMF Obgin Fakultas Kedoktern Sebelas Maret Surakarta.

9. Dr. Sri Sulistyowati, dr., SpOG(K), sebagai KPS SMF Obgin Fakultas

Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta.

10. Adrianes Bachnas, dr., SpOG(K), sebagai SPS SMF Obgin Fakultas

Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta.


commit to user

vii

11. Seluruh Staff PPDS I Bagian Obgin Fakultas Kedokteran Universitas

Sebelas Maret Surakarta. Prof. Dr. KRMT. Tedja D.O, dr., Sp.OG

(K)., Dr. Supriyadi Hari R, dr., Sp.OG (K)., Dr. Sri Sulistyowati,

dr., Sp.OG (K)., Dr. Soetrisno, dr., Sp.OG (K)., Dr. Abkar Raden,

dr., Sp.OG (K)., Rustam Sunaryo, dr., Sp.OG (K)., Wuryatno, dr.,

Sp.OG (K)., Glondong Suprapto, dr., Sp.OG (K)., Dr. A. Laqief, dr.,

Sp.OG (K)., Eriana Melinawati, dr., Sp.OG (K)., Heru Priyanto,

dr., Sp.OG (K)., Hermawan U, dr., Sp.OG (K)., Teguh Prakosa, dr.,

Sp.OG (K)., Muh. Adrianes Bachnas, dr., Sp.OG (K)., Dr. Uki

Retno B, dr. Sp.OG (K)., Darto, dr., Sp.OG (K)., Wisnu Prabowo,

dr., Sp.OG (K)., Affi Angelia R, dr., Sp.OG (K)., Eric Edwin, dr.,

Sp.OG (K)., Asih Anggraeni, dr., SpOG., Nutria WPA, dr. Sp.OG.,

MKes.

12. Semua rekan residen PPDS I Obgin Fakultas Kedokteran Universitas

Sebelas Maret Surakarta, teman dan sahabat terbaik yang banyak

membantu dan memberi dorongan pada proses penyelesaian tesis ini.

13. Istri tercinta, dr. Erta Novrain Tilova Sinaga yang dapat memahami dan

menerima kesibukan saya selama mengikuti PPDS I Obgin, tetap

mendorong, mendoakan, dan memberikan semangat sampai saya dapat

menyelesaikan tesis ini.

14. Putri tersayang Euaggelion Sacharissa Narwastu Tanjung yang selalu

memberikan senyum dan keceriaan sehingga membuat segala tekanan,

beban, dan rintangan serasa mudah untuk dilalui.


commit to user

viii

15. Ayahanda tercinta D. Tanjung dan ibunda tercinta R. Pane, atas

kesabaran, cinta dan kasih sayangnya yang tulus membesarkan saya,

mengasuh dan membimbing saya dengan doa, dorongan dan semangat

dalam penyelesaian tesis ini.

16. Ayah mertua, W. Sinaga dan ibu mertua R. Garingging yang telah

membantu dan mendorong semangat saya sehingga saya dapat

menyelesaikan pendidikan PPDS I dan tesis ini.

17. Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Negeri Airlangga Surabaya

yang membantu dalam pengerjaan penelitian ini.

18. Semua pihak yang dan tidak dapat saya sebutkan satu persatu yang telah

banyak membantu saya dalam penyelesaian tesis ini.

Akhir kata semoga tesis ini bermanfaat bagi kemajuan ilmu pengetahuan,

dan semoga Tuhan Yang Maha Esa melimpahkan rahmat dan karuniaNya kepada

kita semua.

Lungguk H. A. Tanjung


commit to user

ix

Lungguk Helen Alfian Tanjung. 2016. Pengaruh Vascular Endothelial Growth Factor 121 Rekombinan Terhadap Ekspresi Heat Shock Protein 70 Pada Mencit (Musmusculus) Model Preeklampsia. Pembimbing I : Dr. Sri Sulistyowati, dr. SpOG(K). Pembimbing II : Supriyadi Hari Respati, dr. SpOG(K). Program Studi Kedokteran Keluarga. Program Pasca Sarjana. Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta

ABSTRAK

Latar Belakang : Prevalensi kejadian preeklampsia sekitar 5%-15% darikeseluruhan kehamilan di dunia dan cenderung meningkat. Pada preeklampsia, salah satu jenis HSP (protein yang dikeluarkan sel untuk mempertahankan keadaan homeostasis yang baik selama stress oksidatif) yaitu HSP70 (HSP dengan berat molekul 70 kDa) biasanya akan meningkat sangat signifikan yang merefleksikan adanya inflamasi sistemik, stress oksidatif dan juga cedera hepatoseluler.

Tujuan : Mengetahui efek VEGF 121 rekombinan dalam menurunkan kadar HSP 70 pada mencit dengan model preeklampsia.

Metode : Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental analitik (ekspanatorik)dengan rancang bangun Randomized Control Trial (RCT), dilakukan pada tiga puluh mencit betina Mus musculus bunting pada usia kebuntingan enam belas hari, untuk mengetahui perbedaan kadar HSP70 pada trofoblas mencit bunting normal, mencit bunting model preeklampsia tanpa terapi VEGF 121 rekombinan, danmencit bunting model preeclampsia dan mendapat terapi VEGF 121 rekombinan.Kadar HSP70 diukur dan dianalisis menggunakan uji Kruskall-Wallis program SPSS versi 19 for windows.

Hasil :Terdapat perbedaan yang bermakna nilai rata-rata HSP 70 pada kelompok negatif dengan kelompok positif perlakuan ( p=0,000<0.05) dan juga pada kelompok positif dengan kelompok perlakuan (p=0,008<0.05). Namun tidak terdapat perbedaan yang bermakna nilai rata-rata HSP 70 pada kelompok negatif dengan kelompok perlakuan (p=0,165>0.05).

Kesimpulan : Terdapat efek VEGF 121 rekombinan dalam menurunkan kadar HSP 70 pada mencit dengan model preeclampsia.

Kata Kunci : Preeklampsia, Kadar HSP70, VEGF 121 Rekombinan, Mus musculus


commit to user

x

Lungguk Helen Alfian Tanjung. 2016. The Effect of Vascular Endothelial Growth Factor 121 Recombinant Against Expression of Heat Shock Protein 70 in Mice (Mus musculus) Model Preeclampsia. Preceptor I : Dr. Sri Sulistyowati, dr. SpOG(K). Preceptor II : Dr. Supriyadi Hari Respati, dr. SpOG(K). Magister Program of Family Medicine. Sebelas Maret University Surakarta.

ABSTRACT

Background : The prevalence of preeclampsia are about 5% -15% of all pregnancies in the world and is likely to increase every years. In preeclampsia, one of HSP types (proteins that released by cells to maintain a good homeostasis condition during oxidative stress) is HSP70 (heat shock proteins with a molecular weight of 70 kDa) will usually increase significantly which reflects the systemic inflammation, oxidative stress and hepatocellular injury.

Aims : This study aims to know the effect of VEGF 121 recombinant in lowering levels of HSP70 in preeclampsia mice model.

Methods : This study is an analytical experimental research (explanatory) with Randomized Control Trial (RCT) design, conducted in thirty pregnant Mus musculus mice at the age of gestation sixteen days, to determine the differences levels of HSP70 in trophoblast of normal pregnant mice, pregnant mice model ofpreeclampsia without VEGF 121 recombinant therapy, and pregnant mice model of preeclampsia with VEGF 121 recombinant therapy. HSP70 levels were measured and analyzed using Kruskal-Wallis test of 19th version SPSS for Windows.

Results : There is a significant difference in the average value of HSP 70 in the negative group with positive treatment group (p = 0.000 <0.05), and also in the positive group with treatment group (p = 0.008 <0.05). However, there is no significant difference in the average value of HSP 70 in the negative group with treatment group (p = 0.165> 0.05).

Conclusion : There is an effect of VEGF 121 recombinant in lowering levels of HSP70 in preeclampsia mice model.

Keywords : Preeclampsia, HSP70 Levels, VEGF 121 Recombinant, Mus musculus


commit to user

xi

DAFTAR ISI

Hal

HALAMAN JUDUL .............................................................................. i HALAMAN PENGESAHAN ................................................................ iiLEMBAR PANITIA PENGUJI .............................................................. iiiPERNYATAAN ..................................................................................... ivKATA PENGANTAR ............................................................................ vABSTRAK .............................................................................................. ixABSTRACT .............................................................................................. xDAFTAR ISI ........................................................................................... xiDAFTAR GAMBAR .............................................................................. xiiiDAFTAR TABEL ................................................................................... xivDAFTAR LAMPIRAN ........................................................................... xvDAFTAR SINGKATAN ........................................................................ xvi

BAB I PENDAHULUAN .................................................................. 11.1 Latar Belakang ................................................................ 11.2 Masalah Penelitian .......................................................... 61.3 Tujuan Penelitian ............................................................. 71.4 Manfaat Penelitian ........................................................... 7

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ......................................................... 92.1. Pre Eklampsia .................................................................. 9

2.1.1. Definisi ................................................................ 92.1.2. Patogenesis .......................................................... 10

2.2. Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF) ................. 152.3. Stres Oksidatif pada Preeklampsia dan Heat Shock Protein ............................................................................. 202.4. Terapi VEGF 121 Rekombinan ....................................... 242.5. Preeklampsia pada Musmuscullus................................... 252.6. Imunohistokimia.............................................................. 272.7. Penelitian Yang Relevan ................................................. 302.8. Kerangka Pikir ................................................................ 312.9. Hipotesis ......................................................................... 33

BAB III METODE PENELITIAN ....................................................... 343.1. Jenis Penelitian ............................................................. 343.2. Waktu Penelitian .......................................................... 343.3. Tempat Penelitian ........................................................ 343.4. Populasi, Besar Sampel, dan Teknik Pengambilan Sampel .......................................................................... 353.5. Variabel Penelitian ....................................................... 373.6. Definisi Operasional .................................................... 373.7. Kriteria Subjek Penelitian ............................................ 37


commit to user

xii

3.8. Instrumen Penelitian .................................................... 383.9. Tahapan Penelitian ....................................................... 393.10. Pengolahan Data .......................................................... 413.11. Anggaran ...................................................................... 423.12. Kelayakan Etik ............................................................. 423.13. Alur Penelitian ............................................................. 43

BAB IV HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN ...................... 434.1. Deskripsi Data Penelitian ............................................. 444.2. Ekspresi HSP 70 pada Kelompok Preeklamsia dan Kelompok Normal ....................................................... 464.3. Ekspresi HSP 70 pada Kelompok Preeklamsia

Tanpa Perlakuan dan Kelompok Perlakuan VEGF 121 Rekombinan .......................................................... 484.4. Ekspresi HSP 70 pada Kelompok Preeklamsia Dengan Perlakuan VEGF 121 Rekombinan dan Kelompok Normal ....................................................... 514.5. Pembahasan .................................................................. 54

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN .............................................. 585.1. Kesimpulan .................................................................. 585.2. Saran ............................................................................ 58

DAFTAR PUSTAKA ............................................................................. 59LAMPIRAN


commit to user

xiii

DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1 Bagan patofisiologi preeclampsia ........................................ 12Gambar 2.2 Proses Plasentasi Abnormal ................................................. 14Gambar 2.3 Progresifitas kenaikan kadar sFlt-1 menurut waktu............. 18Gambar 2.4 Penghambatan VEGF dan TGF-β oleh sFLT-1 dan sEng ... 20Gambar 2.5 Skema representasi dari mekanisme transduksi sinyal

dalam pre-eklampsia sel endotel .......................................... 23Gambar 2.6 IHC langsung dan tidak langsung ........................................ 27Gambar 2.7 Proses deteksi pada pewarnaan IHC .................................... 29Gambar 4.1 Grafik Nilai Rerata HSP 70 ................................................. 45Gambar 4.2 Ekspresi HSP 70 dengan metode imunohistokimia pada

kehamilan normal dan kehamilan preeklamsia.................... 46Gambar 4.3 Distribusi Rerata HSP 70 Pada Kelompok Normal dan

Kelompok Preeklamsia ........................................................ 47Gambar 4.4 Ekspresi HSP 70 dengan metode imunohistokimia pada

kehamilan preeklamsia tanpa perlakuan dan kehamilanpreeklamsia dengan perlakuan VEGF 121 rekombinan ...... 49

Gambar 4.5 Distribusi Rerata HSP 70 Pada Kelompok Preeklamsiatanpa Perlakuan Dan Kelompok Preeklamsia Dengan Perlakuan VEGF 121 Rekombinan...................................... 50

Gambar 4.6 Ekspresi HSP 70 dengan metode imunohistokimia padakehamilan normal dan kehamilan preeklamsia dengan perlakuan VEGF 121 rekombinan ....................................... 52

Gambar 4.7 Distribusi Rerata HSP 70 Pada Kelompok Normal dan Kelompok Preeklamsia perlakuan VEGF 121 rekombinan. 53


commit to user

xiiii

DAFTAR TABEL

Tabel 3.1 Skala semikuantitatif IRS .................................................... 41Tabel 4.1 Deskripsi Nilai HSP 70 ....................................................... 44Tabel 4.2 Distribusi Rerata ekspresi HSP 70 pada Jaringan Trofoblas Kelompok Preeklamsia dan Kelompok Normal ................................................................................. 47Tabel 4.3 Uji Beda Rerata (Uji Bivariate) HSP 70 pada Jaringan Trofoblas Kelompok Preeklamsia dan Kelompok Normal ................................................................................. 48Tabel 4.4 Distribusi Rerata ekspresi HSP 70 pada Jaringan Trofoblas Kelompok Preeklamsia Tanpa Perlakuan dan Kelompok Preeklamsia dengan Perlakuan VEGF 121 Rekombinan......................................................................... 49Tabel 4.5 Uji Beda Rerata (Uji Bivariate) HSP 70 pada Jaringan Trofoblas Kelompok Preeklamsia Dengan Perlakuan VEGF 121 Rekombinan dan Kelompok Preeklamsia Tanpa Perlakuan.............................................. 50Tabel 4.6 Distribusi Rerata ekspresi HSP 70 pada Jaringan Trofoblas Kelompok Preeklamsia Dengan Perlakuan VEGF 121 Rekombinan dan Kelompok Normal ................ 52Tabel 4.7 Uji Beda Rerata (Uji Bivariate) HSP 70 pada Jaringan Trofoblas Kelompok Preeklamsia Dengan Perlakuan VEGF 121 Rekombinan dan Kelompok Normal ................ 53


commit to user

xv

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Ethical Clearance........................................................... 61Lampiran 2. Hasil SPSS..................................................................... 62Lampiran 3. Penelitian lain yang terkait dengan judul penelitian...... 67


commit to user

xvi

DAFTAR SINGKATAN

DIC : Dissemihnated Intra CoagulantERK : Extracellular-signal-Regulated KinasehCG : Human Chorionic GonadotropinHELLP : Hemolytic- Elevated Liver enzim and Low PlateletHLA-G : Human Leucocyte Antigen-GHSP : Heat Shock ProteinIGF1 : Insulin-like Growth Factor 1IUGR : Intra Uterine Growth RetardationJNK1 : Jun amino-terminal kinases-1JNK2 : Jun amino-terminal kinases-2LGL : Large Granular LymphocyticMHC : Major Histocompatibility ComplexNK : Natural KillerPed : preeimplantasi embryonic developmentPIGF : Placenta Growth FactorPMNs : Poly Morphonuclear NeutrophilPMSG : Pregnant More Serum GonadotropinPE : PreeklampsiaRCT : Randomized Control TrialROS : Reactive Oxygen SpeciessEng : soluble EndoglinsFlt-1 : Solube Fms-Liketyrosinekinase1TGF-β : Tumor Growth Factor –βVEGF : Vascular Endothelial Growth FactorVEGFR-1 : Vascular Endothelial Growth Factor Rceptore-1

tesis - digilib.uns.ac.id fileperpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id commit to user v kata...

Documents