tecnicas de biologia molecular en celulas - sesion 2
DESCRIPTION
Biologo Manuel Fasabi Biologia Celular y MolecularTRANSCRIPT
Técnicas deBiología Molecular
en Células
Biología Celular y MolecularBiólogo Manuel Fasabi Espinar
1
2
INVESTIGACIÓN DE LAS CÉLULAS Y SUS PARTES
3
MICROSCOPÍA
Aumento total = Objetivo x Ocular
Las células y tejidos vivos carecen de componentes que absorben la luz (invisibles) Es necesario fijar y teñir la muestra
4
MICROSCOPÍA
Microscopia de campo
claro
Microscopia de contraste
de fase
Microscopia de contraste de interferencia
diferencial
5
MICROSCOPÍA DE FLUORESCENCIA (Inmunofluorescencia)
Tinción fluorescente: un químico es fluorescente si absorbe la luz de determinada longitud de onda y emite luz fluorescente
6
7
GFP: Green Fluorescent Protein (proteína verde fluorescente)(medusa: Aequorea victoria)
8
MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA
Resolución 0.1nm
9
FRACCIONAMIENTO CELULAR
Extracción del contenido celular y separación de los componentes según las dife-rencias de sus propiedades físicas y químicas
10
FRACCIONAMIENTO CELULAR
Extracción del contenido celular y separación de los componentes según las dife-rencias de sus propiedades físicas y químicas
11
1) Centrifugación
12
2) Electroforesis en gel de poliacrilamida (SDS)
13
3) Electroforesis bidimensional
14
A. Cromatografía por filtración en gel
4) Cromatografía
15
B. Cromatografía de intercambio iónico
4) Cromatografía
16
C. Cromatografía de afinidad con anticuerpos
4) Cromatografía
17
5) Inmunoblot
18
PREGUNTAS
1. Radioisótopos2. Espectrometría de masas3. Espectrometría por resonancia magnética nuclear4. Cristalografía de rayos X