UNIVERSITA’ DI FIRENZEUNIVERSITA’ DI FIRENZECENTRO DI SPETTROMETRIA DI MASSACENTRO DI SPETTROMETRIA DI MASSA

FIORENZA

Università di Firenze

Centro InterdipartimentaleSpettrometria di Massa

V.le G. Pieraccini, 6 - 50139 - Florence - ItalyE-mail: cism@ds.unifi.it

Prof. Gloriano Moneti and Dr.Giuseppe Pieraccini

SPME SPME –– GCGC--MS/MS: ANALISI DI TRICLOROANISOLO (TCA) MS/MS: ANALISI DI TRICLOROANISOLO (TCA) NEL VINO E NEI TAPPINEL VINO E NEI TAPPI

Padova 4 Luglio 2001

Cl

Cl

Cl

OCH3

2,4,6 2,4,6 -- TRICLOROANISOLOTRICLOROANISOLO

TRICLOROANISOLO (TCA): PICCOLO MA POTENTE TRICLOROANISOLO (TCA): PICCOLO MA POTENTE

1 grammo di TCA può1 grammo di TCA puòinquinare circa 10 milioniinquinare circa 10 milioni

di litri di vinodi litri di vino

OH

OH

Cl

Cl

Cl

Cl

Cl

OH

Cl

Cl

Cl

Da dove proviene il TCA ?Da dove proviene il TCA ?

Fenoli naturali

Sughero

Fungicidi, Insetticidi

PCF

degr

adaz

ione

disinfettanti(OCl -)

? TCPTCPMicrorganismi

(penicillum, aspergillum)

Vino Cl

Cl

Cl

OCH3

TCATCA

TricloroanisoloTricloroanisolo

Libreria NIST

STD 2,4,6-TCA

CONFRONTO CON LA LIBRERIACONFRONTO CON LA LIBRERIA

AMD METHODAMD METHOD

130 140 150 160 170 180 190 200 210

100%

175

195

210

100%

147

167

175

195

210m/z

10.8 10.9 11.0 11.1 11.2 11.3 11.4 11.5 minutes

10.0

kCou

nts

12.5

kCou

nts

CID Resonant

CID Non-Resonant

SCELTA TIPO DI COLLISIONESCELTA TIPO DI COLLISIONE

130 140 150 160 170 180 190 200 210 m/z

100%

147

169

175

195

210

SCELTA: CID NONSCELTA: CID NON--RESONANT W5RESONANT W5

3800 Saturn

Metodo SPMEMetodo SPME• 10ml Vino Bianco o Rosso + 2g NaCl agitare in vortex x 15 sec • SPME (100µm PDMS) in spazio di testa per 20 min a 30°C• Iniezione splitless 3 min su Chrompak CP-Sil8-MS • CID su m/z 211.9 in Non-resonant 70 Volt Window 5

10.0 10.5 11.0 11.5 12.0 minutes

75

Cou

nts

200

Cou

nts

1.00

kCou

nts

1.5

kCou

ntsCURVA DI TARATURA 1CURVA DI TARATURA 1--100 100 pptppt

1 ppt

10 ppt

50 ppt

100 ppt

Ioni m/z 167+169S/N = 12

CURVA DI CALIBRAZIONECURVA DI CALIBRAZIONE11--100ppt100ppt

r2: 0,996834

y = 23,2 x +105,1

2,4,6-TCA

Peak

Size

Amount (ppt)25 50 75 100

0

500

1000

1500

2000

2500

10.0 10.5 11.0 11.5 12.0 minutes

5

15

25

Cou

nts

10

30

50

Cou

nts

50

100

Cou

nts

100

200

Cou

nts

Ions: 167+169Chianti supermercato

Carmignano rosso

San Felice rosso

Pomino bianco

Circa 5 ppt

Circa 10 ppt

RISULTATI SUL VINORISULTATI SUL VINO

10.0 10.5 11.0 11.5 12.0 minutes

70

Cou

nts

125

Cou

nts

150

Cou

nts

300

Cou

nts

CURVA DI TARATURA 1CURVA DI TARATURA 1--20 20 pptppt

1 ppt

5 ppt

10 ppt

20 ppt

Ioni m/z 167+169S/N = 10

2,4,6-TCA

r2: 0,995376y = 19,9 x + 54,52

Peak

Size

Amount (ppt)5 10 15 20

0

100

200

300

400

CURVA DI CALIBRAZIONECURVA DI CALIBRAZIONE11--20ppt20ppt

10.0 10.5 11.0 11.5 12.0 minutes

5

15

25

Cou

nts

10

30

50

Cou

nts

50

100

Cou

nts

100

200

Cou

nts

Ions: 167+169Chianti supermercato

Carmignano rosso

San Felice rosso

Pomino bianco

4.7 ppt

11.1 ppt

RISULTATI ACCURATI SUL VINORISULTATI ACCURATI SUL VINO

10.0 10.5 11.0 11.5 12.0 minutes

5

15

25

Cou

nts

10

30

50

Cou

nts

15

25

Cou

nts

5

15

25

Cou

nts

50

100

Cou

nts

100

200

Cou

nts

Ions: 167+169

Ions: 167+169

Ions: 167+169_2_bottiglia_9000

Ions: 167+169_3_bottiglia_9056

Ions: 167+169_8_sanfelice

Ions: 167+169_9_pomino

Chianti Putto

Piaggia bott. 1945

Piaggia bott. 9000

Piaggia bott. 9056

San Felice rosso

Pomino bianco

4.7 ppt

11.1 ppt

Risultati della misura del TCA nei campioni di vino

Tappo A

Tappo B12 ml Chianti

12 ml Chianti

X 24 h

ANALISI SUL TAPPO ANALISI SUL TAPPO

10 mL + 2g NaCl

10 mL + 2g NaCl

SPME-GC-MS/MS

++ TCA nel tappo A problemi nel vino

++ TCA nel tappo B inquinamento dall’ambiente

+- TCA nel tappo A e B problemi nel tappo

10.0 10.5 11.0 11.5 12.0 minutes

05

101520

Counts

010203040

Counts

05

10152025

Counts

0102030

Counts

05

101520

Counts

05

10152025

Counts

Ions: 167+169

RISULTATI SUI “1/2”TAPPIRISULTATI SUI “1/2”TAPPITappo A bott. 1945

Tappo A bott. 9000

Tappo A bott. 9056

Tappo B bott. 1945

Tappo B bott. 9000

Tappo B bott. 9056

10.0 10.5 11.0 11.5 12.0 minutes

0

25

50

75

Counts

0

100

200

300

Counts

0255075

100125

Counts

0

10

20

30

40Counts

Ions: 167+169

RISULTATI SUI “1/2”TAPPI DI VINO POSITIVORISULTATI SUI “1/2”TAPPI DI VINO POSITIVO

San Felice Tappo A

San Felice Tappo B

Pomino Tappo A

Pomino Tappo B

3.2 ppt

19.7 ppt

5.5 ppt

N.D.

RISULTATI SUL VINO ED I “1/2”TAPPIRISULTATI SUL VINO ED I “1/2”TAPPI

N.D5.511.1POMINOBIANCO

(problemi nel vino)

19.73.24.7SAN FELICE

ROSSO(problemi nel tappo)

N.D.N.D.N.D.CARMIGNANOROSSO

TAPPO B (esterno)

(ppt)TAPPO A (interno)

(ppt)NEL VINO

(ppt)TIPO

PRECISIONEPRECISIONE

1. CHIANTI + 5ppt TCA 4.1 ppt

2. CHIANTI + 5ppt TCA 3.8 ppt 3.8 pp 0.35 9.3%3. CHIANTI + 5ppt TCA 3.4 ppt

CAMPIONE TROVATI MEDIA SD RSD

10.0 10.5 11.0 11.5 12.0 minutes

0

100

250

Cou

nts

150

250

Cou

nts

Ions: 167+169

Ions: 167+169

ACCURATEZZAACCURATEZZASan Felice

San Felice + 10ppt

4.7 ppt

14.6 ppt

CONTROLLO DI QUALITA’CONTROLLO DI QUALITA’TCA NEI TAPPI DI SUGHERO METODO UFFICIALETCA NEI TAPPI DI SUGHERO METODO UFFICIALE

Estrazionecon EsanoAnalisi GC/MS

1 g di sugherograttato1 sughero

circa 4g

CONTROLLO DI QUALITA’CONTROLLO DI QUALITA’TCA NEI TAPPI DI SUGHEROTCA NEI TAPPI DI SUGHERO

Barattolo da 500 mL16 tappi + 350 mL vino

X 24 h 10 mL + 2g NaCl

SPME-GC-MS/MS

10.0 10.5 11.0 11.5 12.0 minutes

50

100

150

Cou

nts

3.36 ppt

3.36/16 tappi = 0.21 ppt/tappo

RINGRAZIAMENTIRINGRAZIAMENTI

•• Dr. Dr. Urban Frey Urban Frey -- Haute Haute Ecole Valaisanne Ecole Valaisanne (Sion(Sion--CH)CH)

•• Dr.Dr.ssa ssa Francesca Francesca BoscaroBoscaro

•• Gianni GuidaGianni Guida Varian Varian