solution phase synthesis of β-peptides using micro reactors

13
Solution phase synthesis of b-peptides using micro reactors Paul Watts, a Charlotte Wiles, a Stephen J. Haswell a,p and Esteban Pombo-Villar b a Department of Chemistry, Faculty of Science and the Environment, University of Hull, Cottingham Road, Hull HU6 7RX, UK b Nervous System Research, WSJ-386.07.15, Novartis Pharma Ltd, CH4002 Basel, Switzerland Received 19 March 2002; revised 22 April 2002; accepted 16 May 2002 Abstract ÐThe synthesis of b-peptides has been successfully performed using a borosilicate glass micro reactor, in which a network of channels has been produced using a photolithographic and wet etching method. The reagents were mobilised by electroosmotic ¯ow (EOF). The micro reactor was initially evaluated using a carbodiimide coupling reaction to form a dipeptide. The methodology has been extended such that the peptides may also be produced via the penta¯uorophenyl ester derivatives of amino acids. It was found that performing the penta¯uorophenyl ester reactions in the micro reactor resulted in an increase in the reaction ef®ciency over the traditional batch method. We postulate that the enhancement in rate of reaction is an electrochemical phenomenon, due to the reaction being performed in an electric ®eld, which is unique to micro reactor systems. It has also been demonstrated that selective deprotection of the resultant dipeptides can be achieved. This approach has been used in the synthesis of a tripeptide. q 2002 Elsevier Science Ltd. All rights reserved. 1. Introduction A micro reactor is generally de®ned as a series of inter- connecting channels (10±300 mm in diameter), formed in a planar surface, in which small quantities of reagents are manipulated. Thus reagents can be brought together in a speci®c sequence, mixed and allowed to react for a speci®ed time in a controlled region of the reactor. During the past 10 years, there has been a rapid growth in the development of micro-Total Analytical Systems (mTAS) 1±8 which exploit electroosmotic ¯ow (EOF). 9±12 The development of micro reactor devices for chemical synthesis based on complimen- tary technology is less common. However, recent research has shown that Suzuki, 13 Wittig, 14,15 diazo coupling reac- tions 16 and enamines 17 may be performed using micro chemical systems. In addition, we have demonstrated that peptide bonds may be prepared using such technology. 18 The reactions performed in micro reactors have recently been reviewed by Haswell and co-workers. 19 Micro reactors are advantageous because they allow the rapid optimisation of reactions and reduce exposure to hazardous chemicals. They also have the ability to generate reagents in situ, allowing the preparation and subsequent reaction of highly reactive or toxic intermediates. The ability to scale out the synthesis allows large quantities of chemicals to be prepared and it has been calculated that 1 kg of material could be produced in 24 h using 1000 micro reactors in parallel. 20 In addition, because EOF may be used to mobilise the solvents and reagents around the micro reactor manifold, electrophoretic separation would enable isolation of pure products. 21 To illustrate the principles of EOF, one can consider a micro channel fabricated from a material having negatively charged functional groups on the surface. If a liquid, displaying some degree of dissociation, is brought into contact with the surface, positive counter ions will form a double layer such that the positively charged ions are attracted to the negatively charged surface. Application of an electric ®eld causes this layer to move towards the negative electrode, thus causing the bulk liquid to move within the channel (Fig. 1). Electroosmotic ¯ow is not just restricted to aqueous systems and a range of organic solvents can be mobilised using the technique. A major advantage of EOF is that it gives a high degree of spacial and temporal control to reactants mixing under a diffusive regime. This high level of ¯uidic control and mixing has been attributed to the reactions 13±19 reported in the litera- ture. Electroosmotic ¯ow also has the advantage that the direction and magnitude of the ¯ow may be readily changed by altering the applied voltage, where the ¯ow rates increase Tetrahedron 58 (2002) 5427±5439 Pergamon TETRAHEDRON 0040±4020/02/$ - see front matter q 2002 Elsevier Science Ltd. All rights reserved. PII: S0040-4020(02)00513-6 Keywords: b-peptides; electroosmotic ¯ow; dipeptides. p Corresponding author. Tel.: 144-1482-465469; fax: 144-1482-466416; e-mail: [email protected] Figure 1. Principle of electroosmotic ¯ow.

Upload: paul-watts

Post on 02-Jul-2016

216 views

Category:

Documents


3 download

TRANSCRIPT

Page 1: Solution phase synthesis of β-peptides using micro reactors

�������� ��� � ������ �� ���������� ����� ����� �������

���� ������� ������ ��� ��� �� � � �� ���� ����� ��� ��� ��� �������������

����������� ���� ����� ������� �� ���� ��� ��� ��� ������� �� ���� �� ����� ��� ����� ���� ���� ��� ���� � �!����� ������ ��������� "�#$%&�'(�')*� !���� � +����� ,��� ��-((. /����� �0 �1������

� � �� � � !��� "##"$ � ��� � "" %���� "##"$ ��� �� � �& !�' "##"

�������() �'�� ��� �* ��� ���� � �� � � ���� ��*���' � �*��� � ����+ � ����������� +���� ����� � ������ �� ��� � � ����, �*���� �� �� � � ������ � ����+ � ��������+����� ��� � � ����+ � ���� ) � �+ ��� � � ������� � �' � ����������� -�� .�/01�) ����� � ����� ��� ��������' ������ � ����+ � ����������� �������+ � ������ �� *��� � ��� ���� � ) � ������+' �� � � 2� �� ���� ��� � � ���� � ��' ���� � ������ � ��� � � ���-����� �'� �� � � ������� � �* ����� ������ 3� ��� *���� ��� � �*�����+ � � ���-����� �'� �� � � ������� �� � ����� � ����� � ���� � �� �� ���� �� �� � � ������ *4�� ��' �� � � ����������� ���� � ���� � �������� ��� � ���� � �� �� ��� �* � ������ �� �� � ����� ����� � ��� ���� �� �� � � ������ � ��+ � �*��� � �� �� � ����� 4 ������ �� ���5� �� ����� � ����� �'�� ��� 3� �� ���� � � � �������� � ��� � � ���� � ���� ����� �* � � ������� ��� ���� � ��� � ��� � �� )�� ������� �� � � �� � �� � �'�� ��� �* � ���� ���� � � "##" ��� �� � ��� �� 6��� %�� ��+�� � � �� ��

�� ������������

% ����� � ����� �� + � ����' � 4� � �� � � �� � �* ��� ������ ����+ ���� �� .�#78## �� �� ���� � �1� *��� � ��� ������ ���*�� � �� ��� ����� 5������� � �* � �+ ��� �� ��������� �� )�� � �+ ��� ��� � ����+� ��+ � � �� ��� ��4� � 5� �� � ��2 � ��� ����� � �� � ��� *�� � �� ��4 ���� �� � �������� � � +��� �* � � ������ 9����+ � ���� �#' ���� � � �� � � � ����� +���� �� � � � ���� �� �*������)���� %���'����� �'�� �� .�)%�1�7: ��� 2����� � ����������� -�� .�/01� 7�" ) � � ���� �� �* ������ ����� � ��� � *�� � ����� �'�� ��� ��� � �� ������� �����' � �����+' �� � �� ������� ��� � �� � � �� � � ����� ���� ��� ��;�,���8 �����+��<��= ���;� �������+ � ���������& ��� ����� ��> ��' � � �*��� � ����+ ������ ����� �'�� ��� 3� ��������� � �� � �������� � ���� ���� ����� ��' � �� ��� � ����+ ��� � �����+'��:

) � ������� � �*��� � �� ����� � ������ �� � � ���'� � � �� � � �' ���� �� ��� ������, ����

!���� � ������ �� �������+ ��� � ���� � ' ����� � ����� ������������ �* � ������� ��� � ��� 2����� ���;������ � ������� ) ' ���� �� � ������' �� + � ��� � �+ ��� �� ����� �������+ � �� �������� ��� ���� 5� ��� ������ �* �+�' � ����� �� ��2�� ��� �� ���� �� ) ������' �� ���� ��� � �'�� ��� ������ ���+ 5������� � �*� ������ �� � �� ��� � ��� �� �� � � �������� � ��� � ,+�* ��� ���� ����� � ������ � �� "< ����+ �### ������ ������ �� ������ ��"# 3� ��������� � ���� �/0 ��' � �� � �� ������� � ���� ��� ��� � �+ ��� ������ �

����� � ����� ����*���� � ������� ��� � �������� ����� ���� ��������� �* ��� ���������"�

)� ��������� � �������� � �* �/0� �� ��� ������ � � ��������� � *������� � *��� � ��� ���� ����+ � +���� �'���+ � *��������� +����� �� � ���*�� � 3* � ��5����������'��+ ��� � +� �* ������������� �� ����+� ����������� ��� � ���*�� � ������� ����� � ���� ���� *��� ������ ��' � ��� ��� � ������� �' ���+ � ���� �� ������� � �� � � +���� �' ���+ � ���*�� � %���������� �*�� � ����� 4 �� ���� � ��� ��' � �� ��� ������� � � +���� � ����� � ��� ������+ � ���, ��5��� �� ��� ����� � ���� � .0�+� �1� �� ����������� -�� �� ��� ?���� ������ � �� �5� ��� �'�� �� ��� � ���+ �* ��+�������� ��� ��� � ������� � ����+ � � ���5� � % ��?���������+ �* �/0 �� ��� �� +�� � � �+ � +� �* ���������� � ������ ������� �� � ������� ��2��+ ��� � � ��**���� � +�� � )�� �+ � � � �* -����� ������� ��� ��2��+ ��� � �������� � �� � � ��������87� � ���� � �� � ��� ������ � �� ����������� -�� ���� �� � �������+ ��� � ��� ����� ��� ��+����� �* � -�� ��' � � ����' ���+ ��' ��� ���+ � ����� � �����+ � � � � -�� ��� � ���� ��

) ��� ���� =: ."##"1 =<">7=<8 � �+����

)�)�%��9�/@

##<#7<#"#A#"AB � � *���� ���� � � "##" ��� �� � ��� �� 6��� %�� ��+�� � � �� ���33C �##<#�<#"#.#"1##=�8�&

��0���C ��� ���� �$ � ����������� -��$ ��� ���� ��� ��� �������+ ������ ) ��C �<<��<:"�<&=<& $ *�2C �<<��<:"�<&&<�&$ �����C ��?���� ��D��������, ������ �� �������� �* � ����������� -���

Page 2: Solution phase synthesis of β-peptides using micro reactors

+' "���� �� ��' 2 3��������� *& 4.((.5 *-.�6*-%7=<":

��� �����+ � ) -�� ��� �� ��� �� �� � ��� ��* �� ������ �� � ��������� ����+ �/0� 3� ��������� � ������+ � ���5� �� �� � ������� �� �����+ ������ �� �� �� �+�' ������� *�� �� ������ �� ���������� ��'�� ��� %� ������� � ��� � �����' ��� ������� � ������ � ��� ������� � � ��� ������+ ���� ��� 3���������'�� � ����+ �/0� ���+� �* -��� �� ��������� � ��������+��4���� '����'����� ���� ������

0�������+ � ������ �' �' ! ���4 �� �� � &8�"" � ���� ��� � � �������' �� ��� � ��� ����� ������� �� ���5� �� ����� ��� � ���� �'�� ��� .����1 �� ��� ��� � �������� �* � ���� �� � ����� ���� � ���� �� ���������� ���'� ��� �������� ) ���������� E�� +����"8

��� ��� ������ 0��� +����"< �� � � �������' �� �*�� !����� ������ %*� � � ����� �* � ���� ����+ +����� � 2� ���� �� � ����� ���� ��' � ��� � ����+ �� � ��������+ � �+ �� �� � �� �������� � ����� ���� � ������� � 3*��� ��� ���� �� � � ��� � �������� �� ��' � �� �� � *���� ���'� � ��������"=�"& 3* � ���+ � � ���� �� � 5��� ����������� ����� ����� ��� � ��� � �' � � ����+ *��� ��������+ � �������� ����� ��� � ���� �'�� ��� ���������+ ��� � ���� �* � �� �* ������� ����4�������3� �������� � ���� �� �� � ����' ������� � ��� �� � ��� ������ �� � ������������� �'�� ��� �* � ���� �� �����

��� � ���� �'�� ��� �� � �� �� � ����������+ ����� 2� ���� ���'� � ������� �� � 5��� �� �2��� �� �� �� ���� ��� � �� � �'�� ��� �� � � ���� �* ��������' ���,��+ � ����� ���� �� � ������� ��� 4����' ����+ �� � ��� � � ���� *��� � ���'� �� 3� ��� ��� �� � ����� � ������� � � �� � �� �� ��� � ���� � ����+ �������� ��� � �����' ��� � � ����� �� ������ � ��� ���������������� ��� ���� ��� ��

�� ��������� �� ��� �� �� ����� �������

% ���� � �* ��� ����� ��� �� �������� 5����;� +����� � ������� ���'� �� �� � � �� � �� ��������� ����� � �������F���� ��� � ����� ���'� �� �� � � �����������' �� *��� ���� �* � �� �'����� ���� ��� � ��� � ����� �� ��� ���) � �������� � ����� � ������������ �* ��+���� ���� ������ � �+ ��� ����+ � ���� � �* ������+ � ������� ����� '����'����� ������+ ��� � ����������� -��� % ���+ �* *���������� � ���� ��� �� ��������+���'� �� �������+� ���� � �������+� ��? ����� �������+ ��� ��� ������ *�����+ ���� � �� �� ������������ �� � � � ���� ��� � ��� ����� �� �">�":

) ����� � ����� � ��� � �� � �� ��� ���, � � �� ��� �����+ � ������� � ���5� �* ��������+���' ��� � � ����+ �� ������ ���� �� �� � +���� ����� � ����� .0�+�"1�" 0�����'� � ��� ��' � �* � ���� ��� �� �������� ��� ����� � ���� � ���*�� �* � ����������� +���� ���� �)�� �������� � � +� �* ��� �������+ �����+ � � � ����+ ���� ��� % ��' � �* ������� ����� ���� �� � ����� ���� � �� ��� �* � ������� �� � � �� �*#�=7"�# ��� ) ���� �� �* � � 5��� � � ����, �* ��� ������ ����+ ���� �� �� ���� 5� ���' �����* �� � �� � ����� ���� ��' � ����+ ��������+���'� %*� � 2����� �� ����� ���� �� � � ��� � ��� � ��� �� ��+ � � ���� ������� ��' �� �� � � �� � �� �� �* +���� �� � �� ��) ���� �� � � �� � �� ����� � ������� � �� ������� �� *�� � �*�����+ � � ����� ��� ) ���� �� �� �� � ����+ � ��2��� �* �G �0 ��� =G @�<0 �� ��� ��� &=�� � ������+ �� �� �� ��� �* #�87#�= �� ������ %+���� ��� ����,� ��� �� ������ � �� � ��� ��� �� � � ������*�� � �+ ���� �� � � ���+� � ��� � ���� � + �� ��' ���� �����' ���� � �� � ��� ���� � ��������+ �� ��� +����� ��� .0�+� 81� !���������� ������ *����8# � � ���� � �� � ���� �� �� �� � �� '����'����� -�� ��������+�

�� ������� �� ����������

� � � �� � �� � �������� � �������� � �'�� ��� �*� ���� � � ��� � *��� ������� ����� *�� ��� � ������0�����'� � ����� �� ������� ����� ���, ����� � ��� �� �� � ����� ��� ����� ����� �� ��� ��� �������� ���� + � ������ �* ����� � �� ��� ��2��� �� ��� �������������� � ����'��� �* � �������� �� ��� ������� ����� ��3� ��������� ��� ���� � �� ������� � ��� ��� � �� �� ��� �� ����������8��8" ��� �����+���� ���� ��� ��88 3� ������������ �� ��������' �� � +�������� �' � ������ �8<�8= ��, � � ���� ������' ��� ���� �� � ���+� � ��� � *��� ������������� E�� �������� ��� ����� ��� �'�� ��� � ���� *��� � �� � � � � ��� � ��� ����� � �� �� � �����,� ����� � ����� �'�� ����8&�8>

������ �� � 5� �� �* ���� �� � �� ��������+����� *�����������

������ �� % ����������� +���� ����� � ������

Page 3: Solution phase synthesis of β-peptides using micro reactors

+' "���� �� ��' 2 3��������� *& 4.((.5 *-.�6*-%7 =<"

3� � 4��� ������� � � �� ��� � � ������ ��� ������ � � ����� �� !����� �� � ������� ���� ��� � ��� � ��� ��8����� �� � ������� ����� �� �� ��� � ���� �� � ����� ����� � )� ���� � � ������+' �� � ��������� �� � �'�� ��� �* ��� ����� 2 � ���� �� � �� �* ����+�������� ����+ +����� ��� �� ���' � 5��� �� %� �� ����� � ��� ������ 0��� ���� ����+ +����"< ��� � � �� � *��!����� ����� ��� � 9��� �� �8: ��� ��� � *�� ���� ������ �* � �����2'��� ����� 3���������'� ��� ���� ����++����� ��' � � ��� � ��� � ���� ����������� ���� � ����������� -�� �� � ���� � �* � �� �* � � ������ ��� �� ��� 8� 7�" � �� ��� ��' � ���� � � ����������� �*����� � ������ �� � *�������� �* � ���� �������: ��� � � +�� *��� 2� ��� ���� � ����� *�� ��� ���� ��� � ��� ���� 2 ����*' ��� ����� 2 2���� ��

��� ������' �������� E����������� � ��� ���� �� � ��� 9��� �� � ����+ ��.8���� �'����������'�1�8� �'������������� '��������� .�931 ��� <���� �'�������'����� .9!%�1� �� +�� � �� � � �� "G '� �� .�� � �1� )� ��� �� �* � ��� ���-������ ��� ���� *����� � � � ��� � ���� � �� "G '� ��� ��� ��� ���� 5� ���'� ��� � ��� 0������������ � ��� � ����������� �������+� ������� �� +�� � �'�� ��� ����� �* � ���+ � ��� ���� ��� =#G '� ��� %������� �* � �����'��� ������ �* 9!%�� ���� � �� ���� ����� 5������� � �* 0��� � ���� ������ �� 9!%� ��� ����� � �� ���� 5� �� �������+ � �������� � � 0��� ���� ����+ +���� ��� �� � ���

�����+ �� ��� � ��� ���� �� �� � �� � �� � � �'�� ������+ � *�� �� �������� ����� � ����� � ������ ����� ���'�� ���� � ����� � ����� ���� �� � � ���� � �����'����� !�!���� �'�*������� .9!01 �� � ��� ��'��� ��� ������� *��� � ���� �� ��� � ����������������� *����� % �������� �������� �* 0������������ �.=# ��� #�� !1 �� ��'����� 9!0 ��� ��� � �� � � �����%� � �������� �* �93 .=# ��� #�� !1 �� 9!0 ��� ���� � ��

� � ����� E ��� � �������� �* ���� � .=# ��� #�� !1 �� 9!0��� ���� � �� � � ����� .0�+� <1� %�'����� 9!0 .<# ��1��� ���� � �� � � ����� 9� ��� ��� �� � �� ���� �� � �������� �* � � ������� �������� � ����� � � � ���� � �� �� �* � � � ������ .%� E ��� ������� � 9 +�����1 ����� 2� ���� �����+ ��� ����� � �� � ���� �� �������+ � ����������� -�� �* � � �+ ���� ) � ������� � � ������� � �� ���� � �� ����� *�� � � ���� �* "# ���� ����� � �� ��5��� ��*4�� �� ����� �* ������� �� � � ���� � ���� ����� �* � � ������ �' ��6� ������� ����� ������ � � ��� � �� � ������ �* �����2'��� ���� �� ������+ �� � ����� �

� � �������� ���� 5������� � �* � � �+ ��� � � �� ����' ��� �#G ���� ����� �� ��� ���� ���� ��� � � � � ������+ �* >## � ��� ����� � �� �� �* � � �+ ��� .%� E��� 1� E' ��� ���+ � ����� � �����+ � �� =## �� �� � �����+ � -�� ��� � ��� ���� ����+ � � ��� �� ��� �*� � ������� �� ��+��4���� ���� �� �� ���� ����� ������ �� �� ��� � �� �' ����+ " 5���� �* �93 .#�" !��������1 �� ���� �� �� ���� ����� �� ��� "#G ������ �� �� E' ����'��+ � ����� � -�� � ���5� ."�= � ��? ������ � �+� ��� ����� � -�� *�� = �1 ��� *��� � ���� ����+� � ��� �� ��� �* � � ������� � ���� ����� ���*��� � ���� �� � �� �����2���� �' =#G� ���� � *4�� ��'�* � � ������ ��� �� � �� � +� ���' � � �� �� �� � ���� � �* 5����� ��� �* �93 �� �� � ��� � �� *��� ���� ���+�� � ** �� �* ����������� ���� �������� �� � � ������� �� � � � *���� ��� �93 ��� �������� ��9!0 ���� #�" ! ���� ���������� 3� *��� � 2� ��� ������'��� 2'������������ .91 ��� �� � �� � �������+� �+ �� �� �� ��� ������ ����' ��� ������ �� 9!0� H���+= 5���� �* 9 .#�= ! �������� �� � � ����� E1 � ����� ����� �* 8G �� ��� ���� � ��� ������ �� ����+ � ����� � -�� � +�� � ����� � ���� � )�� � �� � �� � ��'����� '� �� *�� � ������� ����������� �������+ � �������� �����

� ��� � �� � �������� ��� ��� ������ � ���� �� � ��� ���� �'�� ���� ����� ���� � ����� � �� � �'�� �������� � ����� � ������� %��� � ������ � ��� ������ ��� � ���� ���� *�������� ������ � � � ������ �* � �� �������� � ����� ���� � ������� � ��� �� � � ���-����� �'� �� �� ��� �� ���� �8 �<# 0������������ � ��� ������� � ��� ���-����� �'� �� � ��� �� �93 �������+ � ������� ��+�� � ������� �� #G '� �� .�� � "1� ���� 5� �� �� ���� �� �* �� � ��� ���� � �**��� � ��� ���� � �� <&G'� �� �� � ���, � ������� ����+ 9!0 �� ���� ��� ) '� �� ������ ���� �� � � � � ������+ � � ������ ��� � � � ����' ��

����� �� �'�� ��� �* � �������� ��� ���� � ������� �

������ �� �� ����� �* � ����� � ����� �� � �� ����������� �������+ � ��������

Page 4: Solution phase synthesis of β-peptides using micro reactors

+' "���� �� ��' 2 3��������� *& 4.((.5 *-.�6*-%7=<8#

�����+ �� ��� � ��� ���� � ��� � ��� ������ �� ��������� � ����� +'� � ��� � �� ��� ���+�� �* � � ����������� � � �*��� � ����� � ����� � ������ % �������� ��������� �* � � ���-����� �'� �� � �* 0������������ .=# ��� #�� !1 �� ��'����� 9!0 ��� ��� � �� � � �����% ��� � �������� �* ���� � .=# ��� #�� !1 ��� ���� � ��� � ����� E� %�'����� 9!0 .<# ��1 ��� ���� � �� � � ������ 9� ��� ��� �� � �� ���� �� � �������� �* � � �������� 3� ��� *���� ��� ����+ ���������� -�� �* ���� �+ ���� � � � �� � ��� �������� � �� >## � ���� ���� � ��� �������� � �� &## �� ��� ���� � ��������� � 5���������� �' �� "# ���� ������� ���� ������� � ��� � �� � ������ �* � ���-����� �'� �� � � ������+ �� � ����� � )�� � �� � �� � � ��+��4�������� �� �� '� �� ������ � ��� �������� ��� �'�� ����� � � �+�' � ������ ��� � �� ���� � 5��� ��

� � � ���� ��� � �� � �� � � ���� � ** �� �* � ���� ����+ +���� �� � � ������� )��� E����������� !��� ������� � �� � ���-����� �'� �� � " ��� �� �93�������+ � ������� �� +�� � ������� �� > G '� ��� ) � ���-����� �'� �� � " ��� � ��� � ��� ���� � ��9!0 �� ���� �� �� +�� � ��� ���� # �� =>G '� ��.�� � 81� ���� 5� ���'� � � ������ � �� � � � ����-����� �'� �� � " �* E����������� ��� ���� � ��� ������� ���+�� � �� � ����� � ������ 3� ��� ��� � � � � � �+ ��� � � ��2 � ����+ ���������� -��� ��� ���� �+ ��� �������� � �� >## �� �+��� 5���������� ���� ������� ��� ���� #��� ��� �� �� ) *��� ��� � ���-����� �'� �� � " � � � �� � �������� � �� � �+ � ��� ������ ����� � �� ������ � 5���������� ���� ������ � �������� ���� � ��** � �� � ���-����� �'� �� �� ��� " ��

��** � �� � ����������� �������� � ����� � ����� � ��������� ���

3� ��� � �� � �������� � + � �����' �* � � ���5� � ��� � �� � �������� ��� � � � ����� �* � ���� � ����� � �� ��� �� )��� ���� ������' �������� 0������������� �'������� �$ ��� ���� �� � ���� � ���-����� �'� �� � �� �� :&G '� ��� ��� � �������� ����������� )�� ���� ��� � ��� ���� � �� �� ��� � �'�� ��� ����� �*��� ���� �� �� 8=G '� �� .�� � <1�

) � ������ ��� ���� 5� ���' ��� ���+�� � �� � ������ ������ % �������� �* � � ���-����� �'� �� � �� ����'����� 9!0 ��� ��� � �� � � ����� %� � �������� �*���� � ��� ���� � �� � � ����� E ��� ��'����� 9!0��� ���� � �� � � ����� 9� 3� ��� *���� ��� ����+ ����������� -�� �* ��� � �+ ���� � � � �� � �� ��� ��������� � �� ## � ��� � ���� � ��� �������� � �� &## ����� ���� �� ��� ������ � 5���������� �' �� "# ���� %�� *�� ��� � �� � �� � � ��+��4���� ���� �� �� '� �������� � ��� ���, � �������

��������' ���������������� �'������� �� ��� � ��� ���� �-��� �'�� �'� �����*����� <� �� ** �� !����� ������ �**�����+ �����2'��� ���� ��� *����� � �' �� �93�������+ � ������ ��� � ���-����� ��� �� +�� � ���� ��������+ � ���-����� �'� �� � ��� ) �� � �� ���� ��� � ��� ���� � �� 9!0� �� �� ��� � �'�� ��� ����� �* ��� ���� � �� 8&G '� �� .�� � =1�

����� �� �� �������� ��� � ������ �* � ���-����� �'� �� �� �* 0������� �� � ����� ������

����� �� � ������ �* � ���-����� �'� �� � �* E����������� �

����� �� � ������ �* �0� �� � �* 0������������ �'������� �

����� �� � ������ �* � ���-����� �'� �� � �* 0�������������������� �'������� �

Page 5: Solution phase synthesis of β-peptides using micro reactors

+' "���� �� ��' 2 3��������� *& 4.((.5 *-.�6*-%7 =<8�

) � ������ ��� � � �����* �� � �� � ����� � ������ %� ��� �� ����� 2���� � �� ��� *���� ��� ����+ ����������-�� �* ��� � �+ ���� � � � �� � �� ��� �������� � �� ## � ��� � ���� � ��� �������� � �� &## �� ��� ���� � ��� ������ � 5���������� �' �� "# ����

�����+ � �������� � � ���� �� �* � � ���5� ����+����� ������� ������ � ��� � �� � �*��� � �'�� ����* ��� ����� 2 � ���� �� � � � �� � �� �� ��� � ���� ����������+ �'��� � ��� �������� ��� ���� *������������ ����� � 5��� ����+���� ���� ������ )��� ���� ������'�������� !��E������'��� �! ��� ���� �� � ���� � ����-����� �'� �� � �#� ��� � �������� ���������� .�� � &1� )�� ��� � ��� � ��� ���� � �� �� ��� � �'�� �������� �* ��� ���� �$ �� � ������������+ G ������ � '� ���

) � ������ ��� *��� � ��� ���+�� � �� � ����� � ������ %�������� �* � � ���-����� �'� �� � �# �� ��'�����9!0 ��� ��� � �� � � ����� %� � �������� �* ���� � ������� � �� � � ����� E ��� ��'����� 9!0 ��� ���� � ��� � ����� 9� 3� ��� *���� ��� ����+ ���������� -�� �* ���� �+ ���� � � � �� � �# ��� �������� � �� �### � ���� ���� � ��� �������� � �� &## �� ��� ���� �$ ��������� � 5���������� �' �� "# ����

��������' !��E������'��� �� ��� ���� �� � ���� � ����-����� �'� �� � ��� �� = G '� �� .�� � >1� )�� ���� ��� � ��� ���� � �� �� ��� � �'�� ��� ����� �* ��� ����� �� �� =#G '� ��� ) � ������ ��� � � �����* �� � ��� ����� � ������ %� �� � �� ����� 2���� � �� ��� *������� ����+ ���������� -�� �* � � �+ ���� � � � �� � ����� �������� � �� �### � ��� � ���� � ��� �������� ��� &## �� ��� ���� �� ��� ������ � 5���������� �'� %� 2� �� �� ��� � ���� � �������� � ��� ��� � ���-������ �'� �� �� �* �'��� �# ��� �� �� � ��� � �������� ��� �������' ����� � ���� �� �* � ������ ������ 0��� � ���� ����� �* � � ���� � �$ ��� ������� �� ��� ��** � �� ���� �� ��� ����� � �� � ��*��� � � ��������

� � � ��� � �� � �� ��� �� ��� ��� � ������� � �� �� ���-����� �'� �� �� ��� ���� � ��� �� � �� � *��� ��� � ����� � ����� ��� � � � �*��� � �� � ���, � ���������� � �� ���, � ������� � � + � ����' � �*��� � �� ����+ � ���� ��������� ��� ����� � �������� 3� ��� � �� ��, ���������� � �� � ��� � � ������� � � ���� ����� �*� ���-����� �'� �� � �� ���� � ���� �� �� #�#= !���� ��������� � ��� �� �� � �� � ����� � ������ ����� �.�� � :1� 0�+� = ���� �� ���� ����� ���� �� � ������ � � +��� ���� ��� �*� � "# ���� � � �+� �* ������ � ������� ���' ����� =G ���� ����� �� ��� ���� ��� ��� �� � �� � ���, � ������� �� � �*� � <## .����& ��'�1 ���' >#G ���� ����� ��� ������ �� )�� � ������ ���' ���� ��� � ��� �* � ������� �� ������ ����' ���� � � � � � ������� �� ������� � �� � ������ ������ � �������� ��� � ���� � �� �� ��� �*� ������ �� �� � ����� ����� � ��� ���� �� �� � � ������ � ��+ � �*��� � �� �� � ����� 4 ���

�����+ �� ��� � ��� ���� 2���� � �* � ���� � �� ��� �*��� � 9��� �� � �* �������� �� � ��� � �� � ��������� ��� �� � ���� � ��' � �� � �� � �'�� ��� �*� ���� �� )��� ���� ������' �������� E���+�'��� ����� ���� �� � �� � 9��� �� � ��� �� �93A9!%��������+ � ������ �� +�� � �� � �� �� �##G '� �� �� ����, � ������ .�� � :1� )� ��� �� �* �� ��� ���-������� ��� ���� *����� � � � ��� � ���� � �� >:G '� ���)�� ��� ���� 5� ���' � ��� � ��� � ���-����� �'� �� � �� +�� � �'�� ��� ����� �* � ��� ���� �! ��8=G '� ���

) � ������ ��� ���� 5� ���' ��� ���+�� � �� � ������ ������ % �������� �* � � ���-����� �'� �� � ����'����� 9!0 ��� ��� � �� � � ����� %� � �������� �*���� � ��� ���� � �� � � ����� E ��� ��'����� 9!0��� ���� � �� � � ����� 9� ��� ��� �� � �� ���� �� �

����� � �'�� ��� �* � ���� � ���������+ �'��� �

����� !� �'�� ��� �* � ���� � ���������+ �'��� �

����� "� �� �������� �* � ���� � ���������+ +�'��� �

������ �� ��� ����� �* � ���-����� �'� �� � �� �� ��� ���� �� �� ����, � �������

Page 6: Solution phase synthesis of β-peptides using micro reactors

+' "���� �� ��' 2 3��������� *& 4.((.5 *-.�6*-%7=<8"

�������� �* � � ������� 3� ��� *���� ��� ����+ ����������-�� �* � �+ ���� � � ��� � � �������� � �� :## ����� ���� �! ��� ������ � 5���������� �' �� "# ����

�����+ 2� ���� �' � �������� � ��� � ���� ����� ������ ���� ��*���' *��� � � � ����+ � ����� � ������ � ��� � �� ��� ��� � ����� 2� �� � � ������+' ��� �� �������� �* ���+ � ���� � ���� �� ��� 5� ���'� � � � � �� � ��� �� ������� � ���� ����� � ������� ������� 5� ���' � �*��� *��� � � ���� ���� *�����+ � ��������� 0������������ � ��� ���� �� � ���� � 9��� �� � �"� �� � ���, � ������� ����+ �������� ����������.�� � 1� 3� ��� ������ � �� ���� �� �� � �" �������� � �' � ���� ����� �* � 0��� +���� ��� ���� �5� ���' � ��� � ���� I�� ����J ����� � ����� � �������� � ���-����� �'� �� � "� �� +�� � ��� ���� #�

� � ��� � ���� *�� � � ���� ����� �* � 0��� +���� �� � ���� � �� � ��� ����� � � ���� ������ � ��� � ��+�� ��� �� ��� "#G ��� ����� �� 9!0�<"�<8 ) �������+ �* ����+ ��� ����� �� � � ������� �� ��� � ��� ����� ���� 5� ���' � ���� ��� � ��� �;�*��� � � �� *��� � 9!0 ������ ��� ����� ������� )�� �� �������+ ���� ���� ���������� �� ���'� �������� �* � ��� �;�*��� � ������ ����� � ����� ����� ���� ����,�+ �* � ���� ����� �������' 2� ��� ��� � � �� � ��� �� ��� �� �* �"���� �# 5���� �* ��� ����� �� 9!0 ����+ ����������-�� ����� � ����� � ������ � ���� � �� &#7>#G � ���� ������ �� � � "# ��� � ����� �� +�� ���� ��

���� 5� ���'� � �������� �������� �* � 9��� �� � �*0������������ �" .=# ��� #�� !1 �� ��'����� 9!0 ������ � �� � � ����� %� � �������� �* ��� ����� .=# ��� ��# !1��� ���� � �� � � ����� E ��� � �������� �* � ���-������ �'� �� � " .=# ��� #�� !1 ��� ���� � �� � � ����� � ���� ��� ��� �� �� ��� ��� ���� # ����+ ��� �������� ��������� %�'����� 9!0 .<# ��1 ��� ���� � �� � � �����9� �� ���� �� � �������� �* � � ������� ) ��6 �* � � ������ ��2��� ��� � ��� 0��� � ���� ����� �������� �� �� � � �� ��� ���� # ��� ��� ���

3� ��� �������� � ��� � 2� �� ��� ����� ��� � �����+

��� � � ���-����� �'� �� �� )�� ��� ���4�� � *���� ���� � ������� �� ��� ��� ����� ��� � ��� � ��� � � ���-����� �'� �� � �* E����������� " .�� � �#1�) ���' ������� ������ � *��� � � ������ ��� ���� �#�� ������+ *��� � ���� ������ �����, �* ��� ����� �� � �� ��

%� � � ����� �� ��� ������ � ��� �* 0��� � ���� ����� ���� 5��� � ��� ����� ��� ���� � �*�� � ����� � ����� ��H���+ � ����� � ������ � 9��� �� � �* 0������������ �" ��� � ��� � ��� � 5���� �* ��:����;����'���K=�<�#L���� ��>� � .9EH1<<�<= �� +�� � *� ���� � ������ � � � ��� � ��� � � ���-����� �'� �� � �*E����������� "� �� �� ��� ��� �� *��� � ��� ���� #�

3� ��� ��� � � � � � �+ ��� � � ��2 � ����+ ����������-��� ��� � � �+ ��� �������� � �� >## �� ������� # ������ �� � �� �'������' "=G '� ��� ���������+�'� � � � � �+ ��� � � ������� � ����+ � ����� � -�� � ���5� �� '� �� �* ������� ��� �������' � ��� �� E' ��������+� -��� �* �� � �+ �� �� ��� ���+ � � � ��� ��������� � � ������� ) 9��� �� � �* 0������������ �" ��� �������� � �� >=# � ��� � ��� � ��� 9EH ��:## �� ) � ���� �� � ���� ��� *��� � � ��� �� ����+���������� -��� ��� � � ���-����� �'� �� � �* E����������� "� �������� � �� >## �� �� +�� � ���� ����� �* &G� ��� � �� � ������ �* 9��� �� � �" �� � �� �� � �� �* � � ������� 3���������' � �� ���� ��� � ����� ����� ��' � ��� � � �� ����� � ������� ����+ ?���� 5���� �* 9EH� ������ � ��� "G 9EH �� � �������<<�<=

�����+ ���� ��� ��� ����� 2 � ���� � ����� � ������ � �' � ����� �* � !����� ����+ +���� � ��� ��� � � ���� �* � ����� � ��� � 9��� ���� ����+ +��������+ '���;�� �8: � �� � � �������� �* � 9��� �� � �*0������������ �" .=# ��� #�� !1 �� ��'����� 9!0 ������ � �� � � ����� %� � �������� �* '���;�� .=# ��� #�� !1��� ���� � �� � � ����� E ��� ��'����� 9!0 .<# ��1 ������� � �� � � ����� 9� H���+ ���������� -�� �* ���� �+ ��� �������� � �� >## �� 5���������� � ���� �������� ��� �� � �� +�� �����2'��� ���� � .�� � ��1�%+��� � ���� ����� ��� ��� � � �� � ����� � �����������+ ?��� � 5���� �* '���;�� � ������ � ��� "G ���������� �� � �� �����8: )�� ��++ ��� ��� � ������� ������� ������ ����� � ������ �� ��� ��� ��� *4�� ���

�����+ ���� ��*���' � �������� � ��� � ���� ����� ������ *��� � ��� ��� � ���� ����+ +����� ����� � � � ����� �' � ��� �� � ��� � �� ��� ��� � ����� �� � � ������+' �� � �� �������� �* ���� ���� � ����� ������ ����� � ��� �� /�� ������� ���+ � ��� � ���� ���� �*�������� ��� � � � �� � �� ��������' ��� ���+�� � �'��� ��� �* ��� ���� # *����� � �' � � � ���� � ���� ������* � 0��� +���� ��� ���� 5� �� � ������ �* ���� �$������� � 5����� �� �* � ���-����� �'� �� � .�� � �"1�

����� #� !������� � � ���� �'�� ����

����� �$� � ������ �* ��� ����� ��� � ���-����� �'� �� ���

����� ��� � ����� �* � 9��� ���� ����+ +�����

Page 7: Solution phase synthesis of β-peptides using micro reactors

+' "���� �� ��' 2 3��������� *& 4.((.5 *-.�6*-%7 =<88

% �������� �������� �* � � ���-����� �'� �� � �* 0������������ .=# ��� #�� !1 �� ��'����� 9!0 ��� ��� � ��� � ����� % ��� � �������� �* ���� � .=# ��� #�� !1 ������� � �� � � ����� E� ��� ��� ��� ���� # ����� � �� ��� � �� � ���� � �* � ����� � ����� .0�+� &1� %�������� �* 9EH .=# ��� #�� !1 ��� ���� � �� � � ����� �� ** �� 0��� � ���� ����� ��� � � ���� 5����� ���* � ���-����� �'� �� � ��� ��� � �� � � ����� 9�%�'����� 9!0 .<# ��1 ��� ���� � �� � � ����� �� ������ �� � �� ���� �� � �������� �* � � ������� H���+���������� -�� �* ��� � �+ ��� � � � � ����� % ����������� � �� �### �� � � ����� E ��� �� �### �� � � ����� ��� �� <## � ��� � � ����� 9 ��� �� >## �� ���� ���� ����� �� ��� � �� 8#G �� ���� ���� ������ *�� � �� �� ��'�� ���� 0��� � ���, �� ���� ���' ��� ���' �� ����*' � ���� ���� �' � ������� ��� � ���������

�� %���������

� �� � �������� � � ����������� �* ����� � ������ ��� �*��� �������� � �'�� ���� ��� ������' �������+ � �+����+��� �'�� ��� �* � ���� �� 3� �� � � � �������� ���� � ���� ����� ��' � �� ��� � �� �+ '� �� �' �� �� ����������� �������+ � ������ �� *��� �� �������� �� ������� � ��� �� � ���-����� �'� �� ��� 3� ��� *������� � �*�����+ � � � ������� �� � ����� � ����� � ���� ��� �� ���� �� �� � � ������ *4�� ��' �� � � ��������������� � ���� � ������ ��� ��� ���� � �� �� ��� ���� � ����� ����� � ��� ���� �� �� � � ������ � ��+

� �*��� � �� �� � ����� 4 ��� 3� �� ���� � � � �������� ���� � � ���� � ���� ����� �* � � ������� ��� ���� � ��� � ��� � �� ) 0��� +���� ��� ���� ��*���' � ���� �� �����+ � 5���� �* 9EH ��� � 9��� �� � ��� � ��� ��' �� ��� �� ��� � 5���� �* '���;�� � %*� � � ���� �����*��� � � ���� ���� *�����+ � ������� � � � �*��� ��� ������+ �� � �'�� ��� �* ���+ � ���� � ���� �� � �� ���� ��*���' �� � ��� ������� �� � �'�� ��� �*���� ���� ��� 0��� � ����� � �� ���� ���' ��� ���' ����� ���������� � �� ���� �� � �� ���� ���� ����� �* � �������� � � ������� ��� �� ����*' � � ���� � �' � �������� ��� � ���������

�� &'���������

���� (���� ��������

�������� � ����� � � � ���� � �� �� �* � � � ������ �*� ����� � ����� ��� �� 2� ���� �����+ ��� ����� � �� � ���� �� �������+ � ����������� -�� �* � � �+ ���� ) ��� � �����' ��� ����*����� � �' M��+4 �� �� ��������.� *4 ��� HM1 ��� ��� �������� � ����+ 6���3�����*���� ����� � �' 9� N� O��+ .H��� ����' �* ����1�

) � ������� � � ������� � �� ���� � �� ����� *�� �� ���� �* "# ���� �� ��� � �� ��5��� ��*4�� �� ����� �*������� �� � � ���� � ���� ����� �* � � ������� � ������� �������� � � � � ���� � �' ��6 ��� ������������� � � ����� ��� � ��� �� ���� ��� ��� ������ � *����'�� ��� ���������� %���'��� ��� ��� � � �' �+ � ��*������ ��5��� �������+���' .����� � �: �# ���<�&�"=# ��� ����� ��� �����������C #��G ���-������� ��� ���� �� ��� � ��� #��G ���-������ ��� ���� �� �� ��������� � ����+ � +���� �� �'�� � �* 8#G �5� ��� �� >#G�5� ��� �� � "# ���� ��� � -�� ��� �* "�= �� ����� ������ � �� ����� 1� ������� ���� ������ � � ��� � ��� ������ �* �����2'��� ���� �� � ���-����� �'� �� �� ������+ �� � ����� �

���� )��* ��������

%�� ���� ��� � � ������ � �� ��'����� ��������� �� ���� ����� �� � � *��� 0��,�� � �+ ��� � � ������ �*��� %����� ��� �� � �� ������ �� %���� ����� � � ������ � *��� E�� � .HM1 ��� � �� �� ����� ��������+���' ��� ����� � ��� ����+ 0��,� ������ + � &# �� � ����� �������� �������� � � ��� � ����+ ���������2��� � �* �'� �� ��� � 2�� ��� � ������ )����' � �������+���' ��� � �*��� � ����+ ! ��, M� � ��+ � &# �0"=< ��������� ���, � )6 ���� � ��� ���������2��� � �* �'� �� ��� ��� 2�� �� � �� ��� �������������� �* � ���� � ��� ����� � ��� �' �� � 2����� ������ ��� ����� ���� � ��+� �� �' � � ���� �� �� �5� ������������ � ����+���� .#�=G1 ��� ������ '���+ ��������� ."�=G1 ��������� *����� � �' ����+ ��� � ����� +���

@��� �� ��+� ��� � ������ .@!�1 �� ���� � � � ���� ��� ��������� �� � �� ��������*���� ��� �� �� ���� ���� ������+ � ���� �'������ .)!�1 �� ��� ���� ��������� ) �� ���� � � � ���� � �� � �� FN"># �� FN<## �� ������ � ��� ) � ����� ��*� ���� � *�� ��� �� ���� �� +�� � ��

����� ��� )��� ���� �'�� ����

������ � �� ����� �* � ����� � ����� �� � �� �� ��� ���� ���� �

Page 8: Solution phase synthesis of β-peptides using micro reactors

+' "���� �� ��' 2 3��������� *& 4.((.5 *-.�6*-%7=<8<

����� � � ������� ��� �������+ ��������� �� � ��;� !����� ���� � � � ���� � �� � ) ����0����+�� 6P� ����+ � ��������' ����������� 3�*��� � �� ���� � � � ���� � ��� ���+ <###7&## ���� ����+ � � �,�� ��� � ����+���### 0)�3� �� ����� � � ��� � �,� �� � ���� � .���21 ����� ���� �� .����1� 6�5��� ����� � � � ������ � �� ���4��� ��� ����� ����� � � � ������� � �� �����*���� �������� ������ ������ ! ����+ ������ � � � ���� � �� �F��� �,��� � ����+ ����� ��������� ����+ �� � ��������'��� � ��� �� ������ �� �� �� � ���� ���������� ����'� �� � � ���� � ����+ � 0����� ���� ���� �%��#: ����'� ��

������ )�����������+,�� �� % �������� �* �93.��"> +� &�&" ����1 ��� 9!%� .>" �+� #�= ����1 ��9! .�## ��1 ��� ��� � �� � ����� � �������� �* E����������� � .���# +� =�:� ����1 ��� 9���/� .�� " +�=�:8 ����1 �� 9! .�## ��1 �� ���� � �� ����� ��� ������+ �� %*� � "< � � ���� �� ��� ��� � ��� ����� '��������� ���� .=# ��1 ��� � �5� ��� ��' � ��� *��� � 2����� � ��� 9! ."�=# ��1� ) ������ � ��+���� 2������ � � ��� � �� � ��+� ���� ������ ��� ���� ������ � �� ����� �� +�� � ������ ��� ��� ����4 � �' �������������+���'� ������� ��� "#G �'� �� ��� �� 2�� +�� /�$� $���� ��$8���9 � ."�&> +� "G1 �� � ��� �����$ �� >:7:#� .*��� 9!A 2�� 1$ .0���� � &>�#8$�� >�> $ @� =�8&� ":�<#@"/& � 5��� � � &>�"#$ �� :�##$ @�=�&#G1$ ���2 .��

��1 8<=8� 88&#� " <#� �>8<� �>#:� �&<���<=< ��� >=<$ �� .8 �& !�;1 #�>: .&�� �� #�&�& �;��.�81"1� ��#: .&�� �� .�81"1� ��<8 . �� �� .�8181���:< .��� �� �.�81"1� "�<# ."�� �� �".�81"1� "�< ."�� �� �".�81"1� "�&� ."�� �� #�&�� �;� �"/"1� 8�#�."�� �� �� #�&�� �;� �"�.�81"1� 8�<8 ."�� ��� #�&����� &�� �;� @��"1� =�#� .��� �� @��"1� =��> ."�� ��/"�"1� >��< ."�� �� #�:�< �;� %��1� >�<� ."�� �� #�:�< �;� %��1 ��� �=�8# .��� �� %�@�1$ � .�##�< !�;1""�&� ":�8� " �=� 8#�#� 8<�&� 8&��� 8:�8� ="�8� =8�:� &=�=�> �<� �##�=� �#>�:� �"&�>� �" �#� �8=�8� �8&� � �==�>��>"�"� �>&�<� � &�8 ��� "##�"$ �A1 =#� .!���1�

������ ���������+,�� �� )��-������ ��� ���� ."# ��1��� ��� � �� � �������� �* E����������� �/9��� �.��": +� "�=& ����1 �� 9! .= ��1� %*� � �������+ *��8# ���� � � ������ ��2��� ��� ���� ����� � �� ����� ��� ��� � 2� �� ���-������ ��� ����� ) � ���� ���������� � �� 9! .=# ��1 ��� ��� � ��� ������� ������� '���+ � �������� �������� .=# ��1� ) �5� ����������� ��� *��� � 2����� � ��� 9! ."�=# ��1 ��� � ������ � ��+���� 2������ � � ��� � �� � ��+� ���������� ��� ���� ����� � �� ����� �� +�� � ����� ������ � ��'������� � ����+ 9!A��"/A 2�� �� +�� � $���� ��$8���9 .�� � )0% ����1 � .��"� +� "G1 �� ���� ' ���� �����$ �� �&"7�&<�$ .0���� � =:�8 $ �� &�=#$@� =�" � "=�88@"/&08 � 5��� � � =:�8>$ �� &�<"$ @�=�<=G1$ ���2 .��

��1 8<=�� 8"=�� " &#� �>8#� �&>"� �&<:��<=#� �� = ��� >==$ �� .8 �& !�;1 #�>> .&�� ��#�&�& �;� �.�81"1� ��#: .&�� �� .�81"1� ��:< .����� �.�81"1� "�<# ."�� �� �".�81"1� "�< ."�� ���".�81"1� "�:& ."�� �� #� &�< �;� �"/"1� 8�## ."���� �� #�=�� �;� �"�.�81"1� 8�"& ."�� �� #�&�& �;�@�"�"1� =�#� .��� �� @��"1� =��> ."�� �� /"�"1�>��< ."�� �� #�:�< �;� %��1� >�<� ."�� �� #�:�< �;�%��1� :�<" ."�� �� �� @�"1 ��� �=�8� .��� �� %�@�1$ �

.�##�< !�;1 ""�&� ":�"� " �=� 8#�#� 8��8� 8=�8� 8:�8� ="�8�

=8�:� &&��� �#>�:� �"&�>� �" �"� �8<�:� �8>�#� �>��#� �>&�<�� &�8 ��� "##�"$ �A1 <#� .!���1�

������ ���������������������+,�� �� % �������� �*�93 . � �+� #�<> ����1 �� 9! .�# ��1 ��� ��� � �� ������ � �������� �* 0������������ � . < �+� #�8# ����1��� ���� � .�8# �+� #�88 ����1 �� 9! .�# ��1 ������ � �� ����� ��� � �����+ �� %*� � "< � � ���� ����� ��� � ��� ����� '��������� ���� ."# ��1 ��� � �5� ��� ��' � ��� *��� � 2����� � ��� 9! ."�=# ��1�) ������ � ��+���� 2������ � � ��� � �� � ��+� ���������� ��� ���� ����� � �� ����� �� +�� �� ��� ��� �������4 � �' ������ �������+���'� ������� ��� �'��� ��� +�� ���$�$���� ��$� $���� ��$8���9 � .�#=�+� =#G1 �� � ������� �� +��$ �� .8 �& !�;1 #�>> .&���� #�&�: �;� �.�81"1� ��#: .&�� �� .�81"1� ��:< .����� �.�81"1� "�8 ."�� �� �"/"1� "�<# ."�� ���".�81"1� "�< ."�� �� �".�81"1� "�&� ."�� �� #�&�< �;� �"/1� 8�## ."�� �� �"�.�81"1� 8�<: ."�� ��@��"1� 8�=& ."�� �� @��"1� <�"# .��� �� #�&�: �;���"/1� <�8> ."�� �� #�&�: �;� ��"/1� =�8# ."�� ��/"�"1� =�=" .��� �� @�1� &��> .��� �� �� @�1� >��" ."���� #�:�# �;� %��1� >�8# ."�� �� #�>�& �;� %��1� >�8 ."�� ��#�>�� �;� %��1� >�<# ."�� �� #�:�# �;� %��1� >�= ."�� ��#�>�: �;� %��1� >�>& ."�� �� #�>�: �;� %��1 ��� �=�" .��� �� %�@�1$ � .�##�< !�;1 ""�&� ":�"� " �&� 8#�#�8�� � 8<�#� 8<� � 8:�<� <>�"� ="�8� =8�>� &<�=� &=�:� &&�>��#>�:� �"#�#� �"=��� �"&�>� �">��� �">�>� �" ��� �8=����8>�#� �<��8� �<8� � �==� � �>"��� �>"�8� �>&�=� � &�= ���"##�8$ �A1 & < .!���1�

������ �������������+-�- � % �������� �* �93.��8" +� &�:: ����1 �� 9! .=# ��1 ��� ��� � �� � ����� ��������� �* 0������������ � ."�#& +� &�&" ����1 ���� ���-����� ��� .��"" +� &�&8 ����1 �� 9! .�## ��1�� ���� � �� ����� ��� � �����+ �� %*� � "< � � ���� ����� ��� � ��� ����� '��������� ���� .=# ��1 ��� � �5� ��� ��' � ��� *��� � 2����� � ��� 9! ."�=# ��1�) ������ � ��+���� 2������ � � ��� � �� � ��+� ���������� ��� ���� ����� � �� ����� �� +�� � ����� ������ ��� ��� ����4 � �' ������ �������+���'� ���������� "#G �'� �� ��� �� +�� ���$� $���� ��$8+�+ ."�:= +� #G1 �� � ��� �����$ �� ��"7��<� .*�����/%�A 2�� 1$ .0���� � &#�#&$ �� 8�# $ @� "�&>�"<��&@/<0= � 5��� � � &#�8:$ �� 8�8=$ @� "� <G1$ ���2

.����1 8<""� �>:>� �& &� �=�:� �##" ��� >=:$ ��

.8 �& !�;1 "� < ."�� �� #�&�� �;� �"/"1� 8�&# ."����� #�=�: ��� &�� �;� @��"1� <�"" .��� �� #�&�: �;���"/1� <�<" ."�� �� #�&�: �;� ��"/1� =�"" .����� @�1� >�8� ."�� �� #�>�8 �;� %��1� >�<# ."�� �� #�>�8 �;� %��1� >�=: ."�� �� #�&�: �;� %��1 ��� >�>& ."���� #�>�= �;� %��1$ � .�##�< !�;1 88�:� 8&�<� <>�"� &&� ��"#�#� �"=�#� �">�#� �">�>� �8&�& .�� 01� �8:�< .�� 01��8 �� .�� 01� �8 �: .�� 01� �<#�: .�� 01� �<��8� �<"�".�� 01� �<8�>� �=&�8 ��� �&:�8$ �A1 <>: .!���1�

������ ���������������������+,�� �� % �������� �*� ���-����� �'� �� � .�:� �+� #�8: ����1 ��� ���� �.�&� �+� #�<# ����1 �� 9!0 ." ��1 ��� ����� � *�� "< �) 9!0 ��� � ��� � �� ������ � � ���� ��� ������� ��� 9! .=# ��1 ��� ��� � ��� ����� '��������� ����."# ��1� ) �5� ��� ��' � ��� *��� � 2����� � ��� 9!."�=# ��1 ��� � ������ � ��+���� 2������ � � ��� �

Page 9: Solution phase synthesis of β-peptides using micro reactors

+' "���� �� ��' 2 3��������� *& 4.((.5 *-.�6*-%7 =<8=

�� � ��+� ���� ������ ��� ���� ����� � �� ����� �� +�� � ' ���� ��� ��� ��� ����4 � �' ������ �������+���'�������� ��� �'� �� ��� +�� ���$� $���� ��$� $���� ��$8���9 � .�"� �+� <&G1 �� � ������� �� ���� �� �������������� �� � ���� ��

���� � )�����������+-�- "� % �������� �* �93 ."�8= +��"�"& ����1 ��� 9!%� .&# �+� #�< ����1 �� 9!.�## ��1 ��� ��� � �� � ����� � �������� �* E����������� ! ."�": +� �"�#= ����1 ��� � ���-����� ��� ."�"= +��"�"" ����1 �� 9! .�## ��1 �� ���� � �� ����� ��� ������+ �� %*� � "< � � ���� �� ��� ��� � ��� ����� '��������� ���� .=# ��1 ��� � �5� ��� ��' � ��� *��� � 2����� � ��� 9! ."�=# ��1� ) ������ � ��+���� 2������ � � ��� � �� � ��+� ���� ������ ��� ���� ������ � �� ����� �� +�� � ����� ��� ��� � ��'������� � ����+9! ��� 2�� �� +�� /�$� $���� ��$8+�+ " .8�8> +�> G1 �� � ��� �����$ �� =&7=>�$ .0���� � <>�">$ ��8�:&$ @� 8�&�� �<��<@/<0= � 5��� � � <>�8"$ �� 8� <$ @�8� <G1$ ���2 .��

��1 88><� " : � �> >� �& �� �=�:� �# >� :: ��� >=&$ �� .8 �& !�;1 ��<= . �� �� .�818/1� "� 8."�� �� #�&�� �;� �"/"1� 8�=8 ."�� ��� #�&�� ��� &�� �;�@��"1 ��� <� : .��� �� @�1$ � .�##�< !�;1 ":�<� 8<�#�8&�#� > � � �8&�& .�� 01� �8:�8 .�� 01� �8 �" .�� 01��8 �: .�� 01� �<#�: .�� 01� �<"�8 .�� 01� �==�: ����&:�=$ �A1 8=& .!���1�

����!� )�������������������+,�� #� % �������� �*� ���-����� �'� �� � " .�<" �+� #�<# ����1 ��� ���� �.�>& �+� #�<< ����1 �� 9!0 ." ��1 ��� ����� � *�� <: �) 9!0 ��� � ��� � �� ������ � � ���� ��� ������� ��� 9! .=# ��1 ��� ��� � ��� ����� '��������� ����."# ��1� ) �5� ��� ��' � ��� *��� � 2����� � ��� 9!."�8# ��1 ��� � ������ � ��+���� 2������ � � ��� ��� � ��+� ���� ������ ��� ���� ����� � �� ����� ��+�� � ' ���� ��� ��� ��� ����4 � �' ������ ��������+���'� ������� ��� �'� �� ��� +�� /�$� $���� ��$� $���� ��$8���9 # .�" �+� =>G1 �� � ������� �� ���$ ��

.8 �& !�;1 #�>: .&�� �� #�&�: �;� �.�81"1� ��#:

.&�� �� .�81"1� ��<8 . �� �� .�8181� ��:= .��� ���.�81"1� "�8: ."�� �� #�&�� �;� �"/"1� "�<= .<�� ��"��".�81"1� "�&8 ."�� �� #�&�� �;� �"/1� 8�## ."���� �� #�&�� �;� �"�.�81"1� 8�8: ."�� �� @��"1� 8�=&."�� ��� #�&�� ��� &�� �;� @��"1� =�#� .��� �� @��"1�=��< .��� �� �� @�1� =��> ."�� �� /"�"1� &�"� .��� �� ��@�1� >��< ."�� �� #�:�8 �;� %��1� >�<� ."�� �� #�:�8 �;�%��1 ��� �=�8# .��� �� %�@�1$ � .�##�< !�;1 ""�&� ":�"�":�<� " �=� 8#�#� 8<�#� 8<�:� 8&�8� 8:�<� =8�#� =<� � &=�>�> �<� �#>�:� �"&�>� �" ��� �8=��� �8>�#� �=&�#� �>��<��>"�"� �>&�<� � &�8 ��� "##�"$ �A1 =>" .!���1�

����"� ���������������� �������+-�- ��� % ��������� �* �93 .#�8> +� �� & ����1 �� 9! .=# ��1 ������ � �� � ����� � �������� �* 0������������ �'������� �$ .#�<8 +� ��"< ����1 ��� � ���-����� ��� .#�8= +��� � ����1 �� 9! .=# ��1 �� ���� � �� ����� ��� ������+ �� %*� � "< � � ���� �� ��� ��� � ��� ����� '��������� ���� .=# ��1 ��� � �5� ��� ��' � ��� *��� � 2����� � ��� 9! ."�=# ��1� ) ������ � ��+���� 2������ � � ��� � �� � ��+� ���� ������ ��� ���� ������ � �� ����� �� +�� � ����� ��� ����4 � �' �������������+���'� ������� ��� "#G �'� �� �� �� 2�� +�� ���$�$� $������������ ��$8+�+ �� .#�== +�

:&G1 �� � ��� �����$ �� �<#7�<"� .9!A 2�� 1$���2 .����1 88"&� �>:"� �& �� �=�:� 8 ��� >=<$ ��

.8 �& !�;1 "�:878�#= .<�� �� �"/" ��� �"�1�<�"# .��� �� #�&�: �;� ��"/1� <�8&7<�<" .8�� ����"/ ��� �@�1� =��8 .��� �� #�:�: �;� @�1� >�� 7>�88 .>�� �� %��1� >�<# ."�� �� #�>�8 �;� %��1� >�== ."���� #�>�8 �;� %��1 ��� >�>& ."�� �� #�>�8 �;� %��1$ �

.�##�< !�;1 8&�:� 8 �>� <>��� < �"� &&�:� �"#�#� �"=�#��">�#� �">��� �">�>� �":�:� �" �8� �8&�& .�� 01� �8:�<.�� 01� �8&�:� �8 �� .�� 01� �8 �: .�� 01� �<#�: .��01� �<��8� �<"�" .�� 01� �<8�:� �==�= ��� �&>�=$ �A1 =&>.!���1�

����#� ���������������� ���������������+,����� % �������� �* � ���-����� �'� �� � �� .�>� �+�#�8# ����1 ��� ���� � .�"= �+� #�8� ����1 �� 9!0." ��1 ��� ����� � *�� "< � ) 9!0 ��� � ��� � �������� � � ���� ��� ������� � �� 9! .=# ��1 ������ � ��� ����� '��������� ���� ."# ��1� ) �5� �����' � ��� *��� � 2����� � ��� 9! ."�=# ��1 ��� � ������ � ��+���� 2������ � � ��� � �� � ��+� ���������� ��� ���� ����� � �� ����� �� +�� � ' ���� ������ ��� ����4 � �' ������ �������+���'� ���������� �'� �� ��� +�� ���$�$� $������������ ��$� $���� ��$8���9 �� .:8 �+� 8=G1 �� � �� �� �����$ ����&7��:� .9!A 2�� 1$ ���2 .����1 8<8"� 88�&�" =�� �>8<� �&:&� �==&� �<<=� ��&& ��� >=&$ �� .8 �&!�;1 #�>& .&�� �� #�&�: �;� �.�81"1� ��#: .&���� .�81"1� ��:8 .��� �� �.�81"1� "�<# ."�� ���".�81"1� "�< ."�� �� �".�81"1� "�&� ."�� �� ���"/"1� "�:>7"� .&�� �� �"�.�81"� �"/" ����"�1� 8�=< ."�� �� �"@�1� <��: .=�� �� #�>�# �;���"/1� <�":7<�8 ."�� �� ��"/ ��� �@�1� =��"."�� �� /"�"1� =�:< .��� �� �� #�:�< �;� @�1� &�": .����� @�1� >�# ."�� �� #�>�8 �;� %��1� >��:7>�=> .�8�� ��%��1� >�>& ."�� �� #�>�8 �;� %��1 ��� �=�": .��� ��%�@�1$ � .�##�< !�;1 ""�&� ":�"� " �=� 8#�#� 8<�#� 8<� �8&�=� 8:�8� <#�"� <>�"� ="�8� =8�>� &=�>� &&�>� �#>�:� �"#�#��"=��� �"&�>� �">��� �">�>� �":�&� �" ��� �" �8� �8=�#��8&�:� �8>�:� �<��8� �<8� � �==� � �&"�&� �>#� � �>"�"��>&�<� � &�< ��� "##�"$ �A1 >:< .!���1�

�����$� ������������������������ ������ ��� %�������� �* �-��� �'�� �'� �����*����� .#�8> +���<= ����1 �� ���2�� .8# ��1 ��� ��� � �� � ����� ��������� �* ���������������� �'������� �� .#�8# +���"" ����1 �� ������� � �5� ��� ������ '���+ � ��������� .=# ��1� %*� � �������+ *�� "< � ��2��� ��� ���� ������ � �� ����� ��� �����4 � ����+ ����� '��������� ����.=# ��1 ��� 2����� � ����+ �������� ��� .8�=# ��1�) ������ � ��+���� 2������ � � ��� � �� � ��+� ���������� ��� ���� ����� � �� ����� �� +�� � ����� ������ � ��'������� � *��� 9!A 2�� �� +�� ���$�$� $��$�$�������������� �� �� .#�8> +� >#G1 �� � ��� �����$ �� �>&7�>:�$ .0���� � &:� #$ �� =��&$ @� 8��<�"=�""@/<� � 5��� � � &:� >$ �� =�#&$ @� 8�""G1$ ���2

.����1 88"&� �&:"� �&="� �=8> ��� >8>$ �� .9!�/�8 �& !�;1 "�<> ."�� �� #�&�� �;� �"/"1� "�:< ."���� #�&�& �;� �"�1� <��"7<�8& .<�� �� ��"/ ���@�1� <�<" ."�� �� #�=�& �;� ��"/1� &�&8 .��� �� #�:�# �;� @�1� >��= ."�� �� #�:�� �;� %��1� >�"� ."�� ��#�:�� �;� %��1� >�8� ."�� ��� #�>�8 ��� 8�> �;� %��1�>�<# ."�� �� #�>�8 �;� %��1� >�=: ."�� �� %��1 ��� >�>&

Page 10: Solution phase synthesis of β-peptides using micro reactors

+' "���� �� ��' 2 3��������� *& 4.((.5 *-.�6*-%7=<8&

."�� �� #�>�& �;� %��1$ � .�##�< !�;1 " �<� 8:�<�<>��� < �<� &=�:� �� �:� �"=��� �">�#� �">�&� �":�"� �8#�:��8��>� �8&� � �<��#� �<8�:� �==�& ��� �>8�#$ �A1 <8&.!���1�

������� ������������������������ �������+-�- ���% �������� �* �93 .#�"# +� ��#> ����1 �� 9! ."# ��1��� ��� � �� � ����� � �������� �* 0��������������������� �'������� �� .#�8� +� #�>� ����1 ��� � ���-������ ��� .#��< +� #�>= ����1 �� 9! ."# ��1 �� ����� �� ����� ��� � �����+ �� %*� � "< � � ���� �� ������ � ��� ����� '��������� ���� .=# ��1 ��� � �5� ��� ��' � ��� *��� � 2����� � ��� 9! ."�=# ��1�) ������ � ��+���� 2������ � � ��� � �� � ��+� ���������� ��� ���� ����� � �� ����� �� +�� � ����� ������ � ��'������� � ����+ 9! ��� 2�� �� +�� ���$�$� $��$�$�������������� ��$8+�+ �� .#�<# +� 8G1 ��� ��� �����$ �� �&#7�&"�$ ���2 .����1 88""� �>>>��&:>� �="#� �� >=: ��� ><�$ �� .8 �& !�;1 "�:&78�#�.<�� �� �"/" ��� �"�1� <�"# .��� �� #�=�& �;���"/1� <�8# .8�� �� �@�1� <�<" ."�� �� #�=�& �;���"/1� =�# .��� �� #� �# �;� @�1� >��" ."�� �� #�>�& �;� %��1� >�"&7>�8" .<�� �� %��1� >�<# ."�� �� #�>�8 �;� %��1� >�=< ."�� �� #�>�8 �;� %��1 ��� >�>& ."���� #�>�& �;� %��1$ � .�##�< !�;1 8&�:� 8 ��� <>�"� < �"�&&�:� �"#�#� �"=�#� �">��� �">�:� �" �#� �8#�&� �88�#� �8=�8��8&�& .�� 01� �8:�< .�� 01� �8 �� .�� 01� �8 �: .�� 01��<#�: .�� 01� �<��<� �<"�" .�� 01� �<8�:� �==�= ����&>�<$ �A1 &#" .!���1�

������� ������������������������ ����������������+,�� � � % �������� �* � ���-����� �'� �� � ��.�8# �+� #�"� ����1 ��� ���� � .�#" �+� #�"& ����1 ��9!0 ." ��1 ��� ����� � *�� "< � ) 9!0 ��� � ��� � �������� � � ���� ��� ������� � �� 9! .=# ��1 ������ � ��� ����� '��������� ���� ."# ��1� ) �5� �����' � ��� *��� � 2����� � ��� 9! ."�=# ��1 ��� � ������ � ��+���� 2������ � � ��� � �� � ��+� ���������� ��� ���� ����� � �� ����� �� +�� � ' ���� ������ ��� ����4 � �' ������ �������+���'� ���������� �'� �� ��� +�� ���$�$� $��$�$����������$���� ��$� $���� ��$8���9 � .&< �+� 8&G1 �� � ��� �����$ �� �="7�=&� .9!A 2�� 1$ ���2 .����1 8<=��8" >� " =�� �>8<� �&:� ��� >=8$ �� .8 �& !�;1 #�>&.&�� �� #�&�> �;� �.�81"1� ��#: .&�� �� .�81"1� ��:8.��� �� �.�81"1� "�<# ."�� �� �".�81"1� "�< ."�� ���".�81"1� "�&# ."�� �� �� �"/"1� "�>:78�## .&�� ���"�.�81"� �"/" ��� �"�1� 8�=< ."�� ���"@�1� <��: .=�� �� #�&�> �;� ��"/1� <�8#7<�8 ."�� �� ��"/ ��� �@�1� =��8 ."�� �� /"�"1�=�:# .��� �� �� #�:�" �;� @�1� &�"< .��� �� @�1� >���."�� �� #�>�& �;� %��1� >�""7>�=& .�"�� �� %��1� >�>&."�� �� #�>�& �;� %��1 ��� �=�" .��� �� %�@�1$ �

.�##�< !�;1 ""�&� ":�8� " �&� 8#�#� 8<�#� 8<� � 8&�=� 8:�<�8 �<� <>�"� ="�8� =8�:� &=�:� &&�&� �#>�:� �"#�#� �"=��� �"&�>��">��� �">�>� �":�>� �" ��� �8#�&� �8"�=� �8=�#� �8&�<��8>�#� �<��8� �<8� � �==� � �&"�&� �>#�>� �>"�"� �>&�<�� &�< ��� "##�8$ �A1 :�: .!���1�

������� ���)��������������� ���� �"� % �������� �* �-��� �'�� �'� �����*����� .#�=" +� "�#" ����1 �����2�� .=# ��1 ��� ��� � �� � ����� � �������� �* !��E������'��� �! .#�<= +� ��:8 ����1 �� ������� � �5� ���

������ '���+ � �������� .=# ��1� %*� � �������+ *�� "< � ��2��� ��� ���� ����� � �� ����� ��� �����4 � ����+����� '��������� ���� .�## ��1 ��� 2����� � ����+�������� ��� .8��## ��1� ) ������ � ��+���� 2������ � � ��� � �� � ��+� ���� ������ ��� ���� ������ � �� ����� �� +�� � ����� ��� ��� � ��'������� � *���9!A 2�� �� �**��� !�$/�$!� $���$�$��� �� �".#�:# +� 8G1 �� � ��� �����$ �� <<7<&� .*��� 9!A 2�� 1$ ���2 .��

��1 8<""� 888&� " >#� �>#=� �&<:� �=�&��� >=>$ �� .9!�/� 8 �& !�;1 ��"=7��<� .<�� ���"�"1� ��8& . �� �� .�818/1� ��=�7��&: ."�� ���"1� "�: ."�� �� �"@�1� 8�: .��� �� �/"�1�<�"� .��� �� #�&�� �;� ��"/1� <�"> .��� �� #�&�� �;���"/1� &�>> .��� �� #�=�& �;� @��"1� >�8� ."�� ��#�>�8 �;� %��1� >�<� ."�� �� #�>�8 �;� %��1� >�>" ."���� #�>�& �;� %��1� >�:: ."�� �� #�>�8 �;� %��1 ����"�=& .��� �� �� /"�1$ �A1 <&> .!���1�

������� ���)��������������� �����+-�- �#� % ���������* �93 .#�8" +� ��&: ����1 �� 9! .8# ��1 ��� ��� ��� � ����� � �������� �* !��E���!��0�������'��� �".#�>< +� ��=: ����1 ��� � ���-����� ��� .#�" +� ��&#����1 �� 9! .=# ��1 �� ���� � �� ����� ��� � �����+ ��%*� � "< � � ���� �� ��� ��� � ��� ����� '������������� .=# ��1 ��� � �5� ��� ��' � ��� *��� � 2����� ���� 9! ."�=# ��1� ) ������ � ��+���� 2������� � ��� � �� � ��+� ���� ������ ��� ���� ����� ��� ����� �� +�� � ������ ��� ��� ����4 � �' �������������+���'� ������� ��� "#G �'� �� ��� �� 2�� +�� !�$/�$!� $���$�$��� ��$8+�+ �# .#�=< +� =<G1 ��� ��� �����$ �� �##7�#"� .*��� 9!A 2�� 1$ .0����� &#�8#$ �� <�:�$ @� <�"=� 8"�8�@"/&0= � 5��� � � &#�=>$�� <�: $ @� <�<"G1$ ���2 .��

��1 8<8"� 88<=� " ##� �>:>��&:�� �=�:� 8 ��� >=8$ �� .8 �& !�;1 ��":7��= .<���� �"�"1� ��<< . �� �� .�818/1� �� �7"�# ."�� ���"1� 8��& ."�� �� �"@�1� <�"< .��� �� #�&�: �;���"/1� <�<#7<�>" .<�� �� ��"/� �/" ���@�1� =�=: .��� �� #�>�: �;� @�1� >�8� ."�� �� #�>�8 �;�%��1� >�<# ."�� �� #�>�8 �;� %��1� >�&� ."�� �� #�>�8 �;�%��1 ��� >�>> ."�� �� #�>�& �;� %��1$ � .�##�< !�;1""��� ":�<� " �>� 8��<� 8 �&� <>��� =8�>� &>�"� > �<��"#�#� �"=�#� �">��� �">�>� �8&�& .�� 01� �8:�< .��01� �8 �� .�� 01� �8 �> .�� 01� �<��# .�� 01� �<��8��<"�8 .�� 01� �<8�>� �==� � �=&�8 ��� �&:�:$ �A1 &8=.!���1�

������� ���)��������������� ��������������+,���$� % �������� �* �����2'��� ���� �" .�<" �+� #�8# ����1����� � .�8� �+� #�88 ����1 ��� �93 . = �+� #�=#����1 �� 9! ."# ��1 ��� ����� � ��� � �����+ �� %*� �"< � � ���� �� ��� ��� � ��� ����� '��������� ����.=# ��1 ��� � �5� ��� ��' � ��� *��� � 2����� � ���9! ."�=# ��1� ) ������ � ��+���� 2������ � � ��� � �� � ��+� ���� ������ ��� ���� ����� � �� ������� +�� �� ��� ��� ��� ����4 � �' ������ ��������+���'� ������� ��� �'� �� ��� �� +�� !� $/�$!� $���$�$��� ��$� $���� ��$8���9 �$ ."8 �+� G1 �� �������� �� +��$ ���2 .����1 8<8"� 888&� " =�� �&&>��==�� �<=#� ��&& ��� ><:$ �� .8 �& !�;1 #�>> .&�� ��#�&�< �;� �.�81"1� ��#: .&�� �� .�81"1� ��"<7��=<.&�� �� �"�"�"1� ��<8 . �� �� .�818/1� ��:8 .����� �.�81"1� "�<# ."�� �� �".�81"1� "�< ."�� ���".�81"1� "�&� ."�� �� #�=�& �;� �"/"1� "� ."��

Page 11: Solution phase synthesis of β-peptides using micro reactors

+' "���� �� ��' 2 3��������� *& 4.((.5 *-.�6*-%7 =<8>

�� �� #�=�8 �;� �"�.�81"1� 8��# ."�� �� �"@�1� 8�==."�� �� �"@�1� <�"� ."�� �� #�&�: �;� ��"/1� <�8 ."�� �� ��"/ ��� ��1� <�& .��� �� @�1� =�# ."���� /"�"1� =�=& .��� �� @�1� &�># .��� �� @�1� >�# ."���� #�:�< �;� %��1� >�8� ."�� ��� #�>�8 ��� ��� �;� %��1�>�88 ."�� �� #�:�< �;� %��1� >�<# ."�� �� #�>�8 �;� %��1�>�= ."�� �� #�>�8 �;� %��1� >�>& ."�� �� #�:�< �;� %��1��� �=�": .��� �� %�@�1$ � .�##�< !�;1 ""�&� ":�8� "<�<�" �&� " �>� 8#�#� 8"�#� 88� � 8=�#� 8:�<� 8 �:� <>�"� ="�8�=8�:� =<� � &#�<� &=�>� &>��� > �8� �#>�:� �"#�#� �"=����"&�>� �">��� �">�:� �" ��� �8=��� �8&� � �<��8� �<8�:��=&�8� �>��:� �>"��� �>&�=� � &�= ��� "##�"$�A1 :=� .!���1�

����� � ���)��������������� �����+-�- ��� % ���������* �-��� �'�� �'� �����*����� .#�&" +� "�<# ����1 �����2�� .8# ��1 ��� ��� � �� � ����� � �������� �* !��E������'��� �� .#�=# +� "�#= ����1 �� ������� � �5� ��������� '���+ � �������� .8# ��1� %*� � �������+ *�� "< � ��2��� ��� ���� ����� � �� ����� ��� �����4 � ����+����� '��������� ���� ��� 2����� � ����+ ��������� ��� .8�=# ��1� ) ������ � ��+���� 2������ � � ��� � �� � ��+� ���� ������ ��� ���� ����� � �� ������� +�� �� ��� ��� ��� � � � ��� � ��� �93 .#�== +�"�:& ����1 ��� � ���-����� ��� .#�<� +� "�"" ����1 ��9! .�## ��1� %*� � "< � � ���� �� ��� ��� � �������� '��������� ���� .=# ��1 ��� � �5� ��� ��' ���� *��� � 2����� � ��� 9! ."�=# ��1� ) ������ ���+���� 2������ � � ��� � �� � ��+� ���� ������ ������� ����� � �� ����� �� +�� � ������ ��� ��� ����4 � �'������ �������+���'� ������� ��� "#G �'� �� ��� �� 2�� +�� !� $/�$!� $���$�$��� ��$8+�+ �� .#�>& +�= G1 �� � ��� �����$ �� �<&7�<:� .*��� 9!A 2�� 1$.0���� � &#�:#$ �� =�� $ @� <�&"� 8"�8�@"/&0= � 5��� �� &#�=>$ �� <�: $ @� <�<"G1$ ���2 .��

��1 8<�8� 888&� �>:>��&:&� �=�:� : ��� >=:$ �� .8 �& !�;1 ��"=7��&= .<���� �"�"1� ��<< . �� �� .�818/1� ��:87"�## ."�� ���"1� 8�"" ."�� �� �"@�1� <�"# .��� �� #�&�: �;���"/1� <�8>7<�:8 .<�� �� ��"/� �/" ���@�1� =�=: .��� �� #�>�: �;� @�1� >�8# ."�� �� #�>�8 �;�%��1� >�8 ."�� �� #�>�8 �;� %��1� >�=: ."�� �� #�>�8 �;�%��1 ��� >�>& ."�� �� #�>�8 �;� %��1$ � .�##�< !�;1""�8� ":�8� " �&� 8��:� <#�<� <>�<� =8�<� &&�>� >>�<� �"#�#��"=��� �">��� �">�>� �8&�> .�� 01� �8:�< .�� 01� �8 �" .��01� �8 � .�� 01� �<��# .�� 01� �<��<� �<"�8 .�� 01��<<�#� �==�8� �=&�> ��� �& �"$ �A1 &8= .!���1�

�����!� ���)��������������� �������������+,�� ���% �������� �* � ���-����� �'� �� � �� .�:< �+�#�" 8 ����1 ��� ���� � .�8 �+� #�8= ����1 �� 9!0." ��1 ��� ����� � *�� "< � ) 9!0 ��� � ��� � �������� � � ���� ��� ������� � �� 9! .=# ��1 ������ � ��� ����� '��������� ���� ."# ��1� ) �5� �����' � ��� *��� � 2����� � ��� 9! ."�=# ��1 ��� � ������ � ��+���� 2������ � � ��� � �� � ��+� ���������� ��� ���� ����� � �� ����� �� +�� � ' ���� ������ ��� ����4 � �' ������ �������+���'� ���������� �'� �� ��� +�� !� $/�$!� $���$�$��� ��$� $���� ��$8���9 �� .�"= �+� =#G1 �� � ��� ' ���� ���$���2 .����1 88 8� " =�� �>�#� �&<:� �=<>� �"<8� ��&"��� >=>$ �� .8 �& !�;1 #�>> .&�� �� #�&�> �;��.�81"1� ��#> .&�� �� .�81"1� ��8<7��&8 .&�� ���"�"�"1� ��<" . �� �� .�818/1� ��:8 .��� ���.�81"1� "�<# ."�� �� �".�81"1� "�< ."�� ��

�".�81"1� "�&� ."�� �� #�=�& �;� �"/"1� 8�## ."���� �� #�=�8 �;� �"�.�81"1� 8��: ."�� �� �"@�1� 8�==."�� �� �"@�1� <�#" .��� �� @�1� <�"# .��� ����"/1� <�8 ."�� �� ��"/1� =�# .��� �� @�1�=��: .��� �� @�1� =�8# ."�� �� /"�"1� &�>= .��� ��@�1� >��" ."�� �� #�:�� �;� %��1� >�8# ."�� ��� #�>�8��� #� �;� %��1� >�8 .<�� �� #�:�< �;� %��1� >�= ."���� #�>�8 �;� %��1� >�>& ."�� �� #�:�� �;� %��1 ��� �=�" .��� �� %�@�1$ � .�##�< !�;1 ""�&� ":�"� "<�8� " �<� " �=�8#�#� 8�� � 88� � 8<� � 8:�8� <#�8� <>�"� ="�8� =8�<� =8�>�&#�<� &=�&� &&�&� :#��� �#>�:� �� � � �"=�#� �"&�>� �">�#��">�>� �" ��� �8=�"� �8&� � �<��8� �<8� � �=&�&� �>"�#��>"�"� �>&�<� � &�< ��� "##�"$ �A1 :=� .!���1�

�����"� )����� �����+,�� ��� % �������� �* �93.#� = +� <� & ����1 ��� 9!%� .&" �+� #�=� ����1 ��9! .=# ��1 ��� ��� � �� � ����� � �������� �* E���+�'��� �� .#�:" +� <�&: ����1 ��� 9���/� .��== +� <�># ����1�� 9! .�## ��1 �� ���� � �� ����� ��� � �����+ �� %*� �"< � � ���� �� ��� ��� � ��� ����� '��������� ����.=# ��1 ��� � �5� ��� ��' � ��� *��� � 2����� � ���9! ."�=# ��1� ) ������ � ��+���� 2������ � � ��� � �� � ��+� ���� ������ ��� ���� ����� � �� ������� +�� � ����� ��� ��� ����4 � �' ������ ��������+���'� ������� ��� "#G �'� �� ��� �� 2�� +�� /�$���� ��$8���9 �� ."�8# +� �##G1 �� � ��� �����$�� =#7="� .*��� 9!A 2�� 1$ .0���� � &&�="$ ��>� >$ @� =�< � ">�8:@"/& � 5��� � � &&�&>$ �� >�:"$ @�=�>&G1$ ���2 .��

��1 8<<�� 88&<� " =�� �>< � �>�#� �&88��==� ��� >=<$ �� .8 �& !�;1 #�>: .&�� �� #�&�& �;��.�81"1� ��#: .&�� �� .�81"1� ��<= . �� �� .�8181���:< .��� �� �.�81"1� "�<# ."�� �� �".�81"1�"�< ."�� �� �".�81"1� 8�## ."�� �� �� #�&�� �;��"�.�81"1� 8� ."�� �� #�=�& �;� @��"1� =�#>.��� �� @��"1� =�"� ."�� �� /"�"1� >��< ."�� �� #�:�8 �;� %��1� >�<� ."�� �� #�:�8 �;� %��1 ��� �=�8# .��� ��%�@�1$ � .�##�< !�;1 ""�=� ":�"� " �=� 8#�#� 8:�8� <"�<�="�"� =8�>� &&��� :#��� �#>�:� �"&�>� �" ��� �8<� � �8>�#��==�>� �>#�"� �>&�<� � &�8 ��� "##�"$ �A1 <:> .!���1�

�����#� .� �����+,�� � � )��-������ ��� ���� ."# ��1��� ��� � �� � �������� �* E���+�'��� �/9��� ��.#�<8 +� #�: ����1 �� 9! .�# ��1� %*� � �������+ *��8# ���� � � ������ ��2��� ��� ���� ����� � �� ����� ��� ��� � 2� �� ���-������ ��� ����� ) � ���� ���������� � �� 9! .=# ��1 ��� ��� � ��� ������� ������� '���+ � �������� �������� .=# ��1� ) �5� ����������� ��� *��� � 2����� � ��� 9! ."�=# ��1 ��� � ������ � ��+���� 2������ � � ��� � �� � ��+� ���������� ��� ���� ����� � �� ����� �� +�� � ����� ������ � ��'������� � ����+ 9! ��� 2�� �� +�� ���� ��$8���9 � .#�8= +� >:G1 �� � ��� ' ���� �����$ �� �8"7�8&�$ .0���� � =>�=�$ �� &�< $ @� =�=8� "<�8�@"/&08

� 5��� � � =>�&#$ �� &�"#$ @� =�&#G1$ ���2 .����1 8<8#�

" =:� �>==� �&& � �==: ��� >=<$ �� .9!�/� 8 �& !�;1#�&: .&�� �� #�&�: �;� �.�81"1� #� .&�� �� .�81"1���># .��� �� �.�81"1� "�8: .<�� �� "��".�81"1� "� &."�� �� �� #�&�� �;� �"�.�81"1� 8� " .<�� �� ��@�"�"1� =�": ."�� �� /"�"1� >�88 ."�� �� #�:�& �;�%��1� >�=� ."�� �� #�:�& �;� %��1 ��� �=�": .��� ��%�@�1$ � .�##�< !�;1 ""�8� ">�:� ":�:� " �>� 8>�8� &&����#>��� �"&�<� �" ��� �8<�>� �8&�=� �&>�&� �>=�#� � &�8 ���"##�"$ �A1 8:> .!���1�

Page 12: Solution phase synthesis of β-peptides using micro reactors

+' "���� �� ��' 2 3��������� *& 4.((.5 *-.�6*-%7=<8:

�����$� ��������������� �����+,�� �!� % �������� �*� ���-����� �'� �� � " .�<< �+� #�8# ����1 ��� ���� �.=# �+� #��# ����1 �� 9!0 .� ��1 ��� ����� � *�� <: � ) 9!0 ��� � ��� � �� ������ � � ���� ��� ������� � ��9! .=# ��1 ��� ��� � ��� ����� '��������� ����."# ��1� ) �5� ��� ��' � ��� *��� � 2����� � ���9! ."�8# ��1 ��� � ������ � ��+���� 2������ � � ��� � �� � ��+� ���� ������ ��� ���� ����� � �� ������� +�� � ' ���� ��� ��� ��� ����4 � �' ������ ��������+���'� ������� ��� �'� �� ��� +�� ���$� $���� ��$���� ��$8���9 �! ."< �+� 8=G1 �� � ������� �� ���$ ��

.8 �& !�;1 #�& .&�� �� #�&�= �;� �.�81"1� ��##

.&�� �� .�81"1� ��>& .��� �� �.�81"1� "�8" ."�� ���"/1� "�<� ."�� �� �".�81"1� "�=# ."�� ���".�81"1� "�<= ."�� �� �"/1� "�: ."�� �� #�=�: �;� �"�.�81"1� 8�<" ."�� �� @��"1� <��" .����� #�&�: �;� ��"/1� <�"> ."�� �� #�&�: �;� ��"/1�=�8# ."�� �� /"�"1� =�<> .��� �� @�1� =�># .��� �� ��@�1� >�#< ."�� �� #�:�< �;� %��1� >�8" ."�� �� #�>�8 �;�%��1� >�8� ."�� �� #�>�8 �;� %��1� >�=� ."�� �� #�>�8 �;�%��1� >�&> ."�� �� #�>�& �;� %��1� >� 8 ."�� �� %��1 ����=�"� .��� �� %�@�1$ � .�##�< !�;1 ""�&� ":�8� " �&� 8#���8"�#� 8<�8� 8=�<� 8:�<� <>�8� ="�8� =8�:� &&�8� &&�>� �#>�:��"#�#� �"=�"� �"&�:� �">��� �">�>� �" �8� �8<�:� �8>����<��8� �<<�#� �=&�&� �>��&� �>"��� �>&�=� � &�& ��� "##�8$�A1 &:# .!���1�

������� �������������+,�� �"� % �������� �* �93.#�<� +� "��= ����1 �� 9! ."# ��1 ��� ��� � �� � ����� ��������� �* 0������������ � .#�== +� ��>: ����1 ���9���/� .#�= +� ��:# ����1 �� 9! .�## ��1 �� ����� �� ����� ��� � �����+ �� %*� � "< � � ���� �� ������ � ��� ����� '��������� ���� .=# ��1 ��� � �5� ��� ��' � ��� *��� � 2����� � ��� 9! ."�=# ��1�) ������ � ��+���� 2������ � � ��� � �� � ��+� ���������� ��� ���� ����� � �� ����� �� +�� � ����� ������ ����4 � �' ������ �������+���'� ������� ��� "#G �'� �� ��� �� 2�� +�� ���$� $���� ��$8���9 �".��#= +� =G1 �� � ��� �����$ �� <<7<&� .*��� 9!A 2�� 1$ .0���� � >8�&�$ �� >�#<$ @� <�88� 8:�<"@"/&

� 5��� � � >8�8�$ �� &�>=$ @� <�=#G1$ ���2 .����1 8<=��

88&=� " =�� �>"#� �&8:� �<=# ��� >=&$ �� .8 �& !�;1#�>> .&�� �� #�&�� �;� �.�81"1� ��#: .&�� �� .�81"1���:< .��� �� �.�81"1� "�<# ."�� �� �".�81"1� "�< ."�� �� �".�81"1� "�&< ."�� �� #�&�� �;� �"/"1� 8�##."�� �� �� #�=� �;� �"�.�81"1� 8�=� ."�� ��� #�&����� =�& �;� @��"1� <�"# .��� �� #�>�� �;� ��"/1�<�<# ."�� �� #�>�� �;� ��"/1� =��> ."�� �� /"�"1�=�" .��� �� @�1� >��" ."�� �� #�:�� �;� %��1� >�8# ."����� #�>�& ��� ��# �;� %��1� >�8 ."�� �� #�>�� �;� %��1�>�<# ."�� �� #�:�� �;� %��1� >�= ."�� �� #�>�& �;� %��1�>�>& ."�� �� #�>�& �;� %��1 ��� �=�8# .��� �� %�@�1$ �

.�##�< !�;1 ""�&� ":�8� " �&� 8#�"� 8<�<� 8&�=� 8:�8� <>�"�="�8� =8�:� &=�>� &&�>� �#>�:� �"#�#� �"=�#� �"&�>� �">�#��">�>� �" �#� �8=�"� �8>�#� �<��8� �<8� � �=&�8� �>"����>&�<� � &�< ��� "##�"$ �A1 &"8 .!���1�

������� )��������������������� �#� ��� ����� ."# ���#�"# ����1 ��� ��� � �� � ����� � �������� �* E����������� �/�0� " .88 �+� #�# ����1 �� 9!0 .#�= ��1��� � �����+ �� %*� � �# ��� � � ������ ��� ���� ����� ��� ����� ��� � � ���� ��� ����� � ��� 9! .=# ��1 ������ � ��� ����� ������ '���2�� ."# ��1 ��� �����

'��������� ���� ."# ��1� ) 9! ��� ��� � �� � ��+�� ���� ������ ��� ���� ����� � �� ����� �� +�� /�$�$���� ��$� ��� � �� �# ."# �+� :8G1 �� � ' ���� ���$ ��

.8 �& !�;1 ��<" . �� �� .�818/1� ��=�7��&> .&�� ���".�"181� "�< ."�� �� #�=�& �;� �"/1� 8�8& ."�� ��#�=�& �;� �"@1� 8�<" ."�� ��� #�=�: ��� =�& �;� @��"1�8�== ."�� �� #�=�& �;� �"@1 ��� =�8= .��� �� @�1$ �

.�##�< !�;1 "<�=� "=�&� "&�<� ":�<� 88�8� 8&�<� <"�&� <&�<�> �#� �=&�� ��� �& �:$ �A1 "=> .!���1�

������� �����������������������������+,�� ���% �������� �* �-��� �'�� �'� �����*����� .#�8 +��� " ����1 �� ���2�� .�# ��1 ��� ��� � �� � ����� � ��������� �* ��%6%���%6% .�>= �+� ��# ����1 �� ������� ��5� ��� ������ '���+ � �������� .�# ��1� %*� � �������+*�� "< � ��2��� ��� ���� ����� � �� ����� ��� �����4 �����+ ����� '��������� ���� ��� 2����� � ����+ ��������� ��� .8�=# ��1� ) ������ � ��+���� 2������ � � ��� � �� � ��+� ���� ������ ��� ���� ����� � �� ������� +�� �� ��� ��� ��� � � � ��� � ��� �93 .#�<� +�"��8 ����1 ��� � ���-����� ��� .#�<" +� "�" ����1 ��9! .=# ��1� %*� � "< � � ���� �� ��� ��� � �������� '��������� ���� .=# ��1 ��� � �5� ��� ��' ���� *��� � 2����� � ��� 9! ."�=# ��1� ) ������ ���+���� 2������ � � ��� � �� � ��+� ���� ������ ������� ����� � �� ����� �� +�� � ������ ��� ��� �� � ������� *��� � ����4������� ) � ���-����� �'� �� � ���� � ��� � �� ���� � .<: �+� #��" ����1 �� 9!0 .� ��1��� � � ������ ��� ����� � *�� <: � ) 9!0 ���� ��� � �� ������ � � ���� ��� ������� � �� 9!.=# ��1 ��� ��� � ��� ����� '��������� ���� ."# ��1�) �5� ��� ��' � ��� *��� � 2����� � ��� 9!."�8# ��1 ��� � ������ � ��+���� 2������ � � ��� ��� � ��+� ���� ������ ��� ���� ����� � �� ����� ��+�� � ' ���� ��� ��� ��� ����4 � �' ������ ��������+���'� ������� ��� =G � ����� �� �'� �� ��� +�� ���$� $���� ��$� $���� ��$� $���� ��$8���9 �� ."� �+�8G �� � �� �� � �'�� ���1 �� � ��� ' ���� +��$ ��

.8 �& !�;1 #�>& .&�� �� #�&�> �;� �.�81"1� ��#>

.&�� �� .�81"1� ��:8 .��� �� �.�81"1� "�8 ."�� ��#�=� �;� �"/1� "�8 ."�� �� �".�81"1� "�< .<���� �� �".�81" ��� �"/1� "�=& ."�� �� #�=� �;��"/1� "� ."�� �� #�<�= �;� �"�.�81"1� 8�<878�=" .&�� �� 8�@��"1� <�� .��� �� #�>�# �;���"/1� <�8= ."�� �� #�>�# �;� ��"/1� =��� ."�� ��/"�"1� =�>" .��� �� �� #�=�& �;� @�1� &�=# .��� �� @�1�&�># .��� �� �� @�1� >��� ."�� �� #�:�" �;� %��1� >�" 7>�<#.&�� �� %��1� >�=: ."�� �� #�>�& �;� %��1� >�>= ."�� ��#�>�& �;� %��1 ��� �=�"> .��� �� %�@�1$ � .�##�< !�;1""�&� ":�"� " �&� 8#�#� 8<�#� 8=�#� 8=�=� 8&��� 8>�"� 8:�<�<>�"� ="�8� =8�>� &#�<� &=�:� &&�:� �#>�:� �"#�#� �"=����"&�>� �">��� �">�>� �" ��� �8=��� �8>�#� �<��8� �<8� ��=&�>� �>��:� �>"�<� �>&�=� � &�= ��� "##�8$ �A1 >&=.!���1�

��*��/����������

� ��� �� ���, @������� ������ ������� .�� �� ��� ���1 *�� 4������� �������� � �� +��� *�� �� 9� )��!�� �' .H��� ����' �* ����1 *�� �� �� *���������+ � ����� � ����� � ��� ��

Page 13: Solution phase synthesis of β-peptides using micro reactors

+' "���� �� ��' 2 3��������� *& 4.((.5 *-.�6*-%7 =<8

����������

�� ���� ��� �� �� :������ �##!� )).� ���

"� !��;� %�$ ��������� 9� ��$ � ������ � ��$ 0 ����+ �� �� �$ 6����

��$ ���� �� �� !� �� � � �##�� -*� �#8�

8� !��;� %�$ ��������� 9� ��$ � ������ � ��$ ���� �� �� !� :��'

��������' �##�� %%� ��

<� !��;� %�$ �** ���� �� � ��$ E��++��*� @�$ � ������ � ��$

��'����� 9� ��$ ���� �� �� !� :���' ;��' �##�� ..� !"=�

=� +����� ��� ��� ; �� 3��� :����� ��� ������� 7&< "�=$

���$ ��������� 9� ��� ��� � � E �+� %�� ����$ M��� �

%��� ���C 9���� ��� � :�

&� ��� � � E �+� %�$ 6��� ���,� )� �� �� 3�' ����' ����' �##"�

)7-� "��

>� ��������� 9� ��$ 0����� M�$ � �� �� M�$ 0��� O� ��$ �** ���� ��

� ��$ !��;� %� �� ���� �##�� .�)� : =�

:� ��������� �� �$ � �+ ���� �� ��$ M����'� 6� E�$ ���� '� �� !�

:���' ����' �##�� ��� ���<�

� �� �� � 9� !�$ ����� �� �� :���' ����' �##"� %*&� =�

�#� ������ E� ��$ � ��� � �� ��$ E �+� %� :���' ;���' >������'

�##�� )� 8:�

��� 9�� F����� �� M�$ 6��� �� :���' ����' �##�� ��� �> "�

�"� 0� �� �� �� 9� 3�$ ���� ��� �� ��$ ������� �� @� :������ �###�

).-� �">87�":"�

�8� F� ���'� F� !�$ ���� ��� �� ��$ !��+��� 9� /�$ �, ����� ��$

��'���+� �� ����' :�������� / �$$$� �%� �=8�

�<� �, ����� ��$ F� ���'� F� !�$ ���� ��� �� ��$ ��'���+� ��$

!��+��� 9� /�$ ������+���� E�$ ���+� �� Q� 0� :������

�$$�� ).�� >�

�=� �, ����� ��$ F� ���'� F� !�$ ���� ��� �� ��$ ��'���+� ��$

!��+��� 9� /�$ ������+���� E�$ ���+� �� Q� 0� :������

�$$�� ).�� ���

�&� �������!������� ��$ )��+� )�$ ��������� 9� �� #' :�' ����'

��' �##!� ))7� :>�&�

�>� ������ !�$ ���� ��� �� ��$ M ��'� �� !�$ �, ����� ��$ !��+���

9� /�$ ��'���+� ��$ ������+���� E� �� ,�9 � � �� � �$$�� )�

&<�

�:� ������ ��$ ��� �� �$ ���� ��� �� ��$ ������������� ��$ ��'���+�

�� ����' �����' �$$�� #�

� � ���� ��� �� ��$ !���� ���� �� ��$ /J��������� E�$ �, ����� ��$

������ ��$ ��'���+� �� ����' �����' �$$�� 8 ��

"#� 0� �� �� �� 9� 3�$ ���� ��� �� �� ����' /�' �###� %*� 8:�

"�� ��������� �� �$ � �+ ���� �� ��$ M����'� 6� E�$ ���� '� �� !�

:���' ����' �##�� ��� ���<�

""� ! ���4 ��� �� E� #' :�' ����' ��' �# �� &*� "�< �

"8� !���� �� ��$ �� +���� �� ������� � �#"!� ""8�

"<� � �, � E�$ ���� �� �� #' 8��' ����' �#"!� *.� �� >�

"=� ���� '� 9� E�$ )��� �� ��$ ! ���4 ��� �� E� 3���������

�#"�� -(� <"8>�

"&� ��� �� �$ ��� � �� 9� ��� �� � +���� +��� ��

������� �$ /2*��� H��� ����' �� ��C @ � Q��,� "###�

">� !�� �'� )� 3�:� �$$$� )7� 8 &�

":� ; �� 3��� :����� � ������� .(()$ ���� '� �� !�� ��� � �

E �+� %�� ����$ M��� � %��� ���C 9���� ��� "##��

" � !�� �'� )� :���' �� �' :��� �$$�� -.�� 8 �

8#� ���� �� �� �� 9�$ ������� �� �� ��$ !�� �'� )�$ �, �����

��$ ������� @� F� :���' �����' �##"� %*� 8<��

8�� 9����� N�$ F�� ����� M�$ ��� * �� ��$ ����� E�$ � ���� 9�$

��� F���� � �� �� 0� #' :�' ����' ��' �$$�� ).%� "8 8�

8"� � ���� 9�$ ��� �� �� �� ��$ %� � � ��$ 9����� N�$ ���

F���� � �� �� 0� ����' �� �' :��� �$$$� &%� 8<�

88� 9���� F� ��$ F ������ �� �� #' :�' ����' ��' �##�� ))��

�#=<�

8<� F�� ����� M�$ ������ !�$ � ���� 9�$ ��' �� 9� ����' �� �'

:��� �$$$� &%� �&�

8=� � �� �� !�$ ���� �� ��$ %� � � ��$ � ���� 9� ����' �� �'

:��� �###� &.� �>><�

8&� %��������� �� 3�$ �� ���+� !�$ � ���� 9� ����' �����'

�$$�� &< �

8>� ��� �� �� �� ��$ � ���� 9�����' �� �' :��� �$$$� &%� 8�8 �

8:� ��� �� �$ E'���*�� E� ��$ ������ 9� ��$ ��� � �� 9� ����'

�����' �##�� ""# �

8 � M��*����'� 6�$ ����� 3� ������� � �#"�� 8"=�

<#� %� ����� ��$ �� ���� 6� ��$ � ������ �� � 3���������

�#""� --� :<8�

<�� ������� )�$ P��� ��� !�$ /� �� 9�$ � ������ �� � ����'

�����' �##�� 8& �

<"� ������� 6� %�$ ���� F� Q� #' 8��' ����' �#!�� %�� 8<#<�

<8� ������� 6� %�$ � �� E� ��$ �� � ��� M� ��$ ������%��� �

�� ��$ )� �� �����$ 6��+���+ � 9� �� #' 8��' ����' �#" � *)�

8>8"�

<<� ��� � �� 9�$ E �*���� ��$ � ������ �$ )� + ��� F� �� +���'

���' �##�� -� � <�

<=� M�� �� �� %�$ @����� %�$ ��� � !�$ E ' ������ !�$ E����'� F�$

%�� ������ 0� +���' ���' �## � 7� �#&�