seminario degradación de colorantes listo
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BIOTECNOLOGÍA
BIODEGRADACIÓN DE Red 5BDirect, UN COLORANTE TEXTIL
POR EL RECIENTEMENTE
AISLADOComamonas sp. UVS
LORAYME MARÍA BOÓR!UE"RODRÍGUE"
BARRAN!UILLAD.E.I.P, #.$%&
1
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CONTENIDO
2
%. INTRODUCCIÓN
#. MATERIALES Y M'TODOS2.1 Colorantes y productos químicos2.2 Aclimatación, la detección de microorganismos y las condiciones de cultivo2.3. Secuenciación de 16S rDA2.! "#perimento de decoloración2.$ %reparación del e#tracto li&re de c'lulas
2.6. An(lisis de la en)ima2.* "studios de decoloración y de &iodegradación2.. "-ecto del ini&idor so&re la actividad de la decoloración y la en)ima de lasc'lulas2./ "studio de 0toto#icidad2.1 An(lisis estadístico
(. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 3.1. "l aislamiento y la detección de &acterias de tinte decolorante3.2. "-ecto de la temperatura y el p so&re la decoloración del tinte3.3. "l rendimiento de decoloración de Comamonas sp. 4S en condicionesest(ticas y tem&lorosas y la eliminación de la D5
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CONTENIDO
3.!. "-ecto de la concentración de colorante en la decoloración y sucin'tica3.$. 7a decoloración de la adición repetida de partes alícuotas decolorantes y diversos colorantes3.6. 7as actividades en)im(ticas
3.*. "-ecto del ini&idor so&re la producción de en)imas ydecoloración3.. "studio de 0toto#icidad3./. An(lisis de producto de degradación
). CONCLUSIÓN
5. RE*ERENCIAS
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%. INTRODUCCIÓN
!
1 a 1$8 colorante sepierde directamente a lasaguas residuales
7a 9oculación,coagulación, adsorción,0ltración de mem&rana,
precipitación,o)oni)ación irradiación.
Alta D:, D5,
color, p, y tam&i'ncontiene ionesmet(licos
compuestos recalcitrantescomo colorantes
Amplia gama demicroorganismos es capa)de decolorar una variedadde tintes incluyen algunas&acterias, ongos, levadurasy a
lgas
E+ i-+ie/t0 de ce1-2cteri/- c1ce- dedec0+0rr 3/ ti/te 0
c0+0r/te de 3/ 1+/tte4ti+ 3ti+i/d0 di6er--
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#.MATERIALES Y M'TODOS
$
2 .1 .C
ol o
r a nt e
s y
p r o d u
c t o s q u í m i c o s
2 . 2 . A
c l i m a t a c i ó n ,
l a
d
e t e c c i ó n
d e
m i c r o
o r g a n i s m o s
y
c o n d i c i o n e s
d e
c u l t i v o
2 . 3 . s
e c u e n c i a c i ó n
d e 1 6
S r D A
2 . ! . e
" p e r i m e n t o d e
d e c o l o r a c i ó n
2 . # . $
r e p a r a c i ó n d e l
e " t r a c t o l i % r e d e c & l u l a s
2 . 6 . a
n ' l i s i s d e l a
e n ( i m
a
2 . ) . e
s t u d i o s d e
d e c o l o r a c i ó n y d e
% i o d e
g r a d a c i ó n
2 . * . +
e c t o d e l i n - i % i d
o r
s o % r e
l a a c t i v i d a d d e
l a
d e c o l o r a c i ó n y l a e n ( i m a
d e l a s c & l u l a s
2 . .
e s t u d i o d e
i t o t o
" i c i d a d
2 . 1
/ .
a n ' l i s i s
e s t a d
í s t i c o
2.1. Colorantes y productos químicos
;ndustria te#til de<anpasand.;canl=ran>i,;ndia
2,2?A)ino?:is@3?etil&en)otia)ol?6?(cidosin-ónico @A:SBB ,
Compaía de químicaSigma
:D @:i&lioteca DigitalispanaB
Catecol . 7a&oratoriode ;nvestigación deSisco,;ndia
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#.MATERIALES Y M'TODOS
Detección del colorante
decolorante cepas %acterianas
1 ml de caldonutriente quecontiene D$:@$ mg E lB
1 g
se incu%aron a 3/ 0 C con
agitación 12/ rpm
Comamonas sp.
y se utili(a para el
estudio adicional
decoloración
2.2. Aclimatación, la detección de microorganismos y condiciones de cultivo
condición est'tica
Aclimatación
Colorante resco , aumento
de la concentración de @$a $ mg E l
5ranserencia de # m de varias alícuotas
$lacas de agar con colorante se
7noculan con /,1 m de
6 a s c
o l o n i a
s a i s l a
d a s s
o n
t r a n s
, e r i d a
s a l c
a l d o d
e
n u t r
i e n t e s
$eptona # g8l ,aCl #g8l , +"tracto de
carne 3 g8l , 9unto con
dierentes tintes
$or otro lado
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*
2.3. secuenciación de 16S rDA
"l (r&ol 0logen'tico
ecnologías Feneom&io 7td., ;ndia
Secuencia de nucleótidos en C:; @Centronacional para la in-orm(tica &iotecnológicaB y"<:7 @la&oratorio "uropeo de la &iologíamolecularB
#.MATERIALES Y M'TODOS
'
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#.MATERIALES Y M'TODOS
cultivo micro&iano deo,1 densidad óptica
!/ 0 C durante 13 - %a9ouna condición est'tica
colorante
#/ mg 8 l.
# ml de la muestra ue
retirada en dierentes
intervalos de tiempo
#/// rpm durante 1# min
+l so%renadante se utili(ó para medir la
decoloración en los m'"imos de a%sor%ancia
de los colorantes
2.!. e"perimento de decoloración
Despu's de 13
1 m7 de caldode nutrientes
Comamonas sp. 4S en condiciones est(ticas yagitadas @12 rpmB, y a diversa temperaturasG@2?$ 0 C a p: 2;1!
asta 13 ciclos
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#.MATERIALES Y M'TODOS
/
)/// rpm durante 2/ min y
se suspenden )# mg 8 ml
en tampón de #/ m< de
osato de potasio
2.#. $reparación del e"tracto li%re de c&lulas
H C durante 13
2.6. an'lisis de la en(ima
Actividades de lignina pero"idasa 7$, lacasa y tirosinasa se
anali(aron por espectrootometría en so%renadante de cultivo.
=ormación de
propanalde-ído en
3// nm
<edición de lao#idación deA:S a !2nm
Se determinó en una
me(cla de reacción de2 ml> que contiene
/,/1? de catecol en
tampón osato /,1 <
p: ),! mediante la
medición de quinona
catecol li%erada a !1/
nm
Am&iente
#/// rpm durante 1# min
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#.MATERIALES Y M'TODOS
Decoloración
@iodegradación7dentiicación de los meta%olitos
2.). estudios de decoloración y de %iodegradación
#/// rpm durante 1# min
Despu&s de la decoloracióncompleta de D#@, el medio
decolorado
So%renadante, se utili(a
con un volumen igual de
acetato de etilo.
Se secaron en
Sulato sódico an-ídrido
os cristales se
disuelven en metanol
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#.MATERIALES Y M'TODOS
Durante el crecimiento
de Comamonas sp. 4S.
2.*. +ecto del in-i%idor so%re
la actividad de la decoloración
y la en(ima de las c&lulas
Actividades delignina pero#idasa@7;%B, lacasa ytirosinasa
2.. estudio de itoto"icidad
1/ semillas
D$: D$: I Comamonas sp. 4S.
2.1/. an'lisis estadístico
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(. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 3.1. "l aislamiento y la detección de &acterias de
tinte decoloranteJptimos rendimientos G! H C y p 6,$
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(. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
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(. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
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(.#. E8ect0 de + te1ert3r 9 e+ 1 -02re + dec0+0rci:/ de+ ti/te
1$
(. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
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(.(. E+ re/diie/t0 de dec0+0rci:/
de Comamonas -1. UVS e/ c0/dici0/e- e-t;tic- 9te2+0r0-- 9 + e+ii/ci:/ de + D!O.
16
(. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
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1*
(. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
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3.4. Efecto de la concentración de colorante en la decoloración y su
cinética
(. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
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1/
(. RESULTADOS Y DISCUSIÓN (.5. L dec0+0rci:/ de + dici:/ re1etid de 1rte-
+<c30t- de c0+0r/te- 9 di6er-0- c0+0r/te-.
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(. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
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(.&. L- cti6idde- e/i;tic-, ie/tr- =3e +dec0+0rci:/ e/ c3+ti60 di-c0/ti/32.
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(.>. E8ect0 de+ i/?i2id0r -02re + 1r0d3cci:/ de e/i- 9 dec0+0rci:/
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(. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
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(.@. E-t3di0 det0t04iciddB iesgos am&ientales y de
salud graves.B 7a germinación de las
semillas -ue completamenteini&ida, cuando las semillasse trataron con $ ppm de
concentración de D$:.
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(. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
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(. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
.. A/;+i-i- de 1r0d3ct0 de derdci:/
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(. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Ó
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(. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Ó
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(. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
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B n microorganismo aislado Comamonas sp. 4S tiene lacapacidad para decolorar y degradar D$: en meta&olitos notó#icos.
B ;ni&ición signi0cativa en las actividades lignina pero#idasa ylacasa en presencia de a)ida de sodio >unto con la disminución
signi0cativa de la decoloración del tinte indica principal -unción deestas en)imas en el proceso de decoloración del colorante.
B Capacidad de este organismo para decolorar diversos colorantes
te#tiles indica su aplica&ilidad comercial.
B 7as condiciones optimas de las Comamonas sp. 4S para reali)arla decoloración y la &iodegradación es de ! HC y p 6,$.
2/
). CONCLUSIÓN
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FAC;ASK..
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