seminario biologia molecular
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Blood stream infections due toOXA-48- like carbapenemase-
producing Enterobacteriaceae: treatment and survival
Ioka Dela Peña Lozano Sara Cardona HenaoIII Semester2014
Introduction
• Resistance to extend spectrum cephalosporins is a well recognized problem among
enterobacteriaceae. Carbapenems have served as an important antimicrobial class for the
treatment of these organisms and, until recently resistence to carbapenems has benn
uncommon among enterobacteriaceae in turkey.
• In 2008 was reported the firts case of
carbapenem-resistant
And a subsequent spread of it in that coutry.
• CRE are often resistent to all beta-lactam
antibiotics and frequently co- resistant to most
other antibiotics, presenting a tremendous
challenge to the clinician
Enterobacteriaceae
Its a big and heterogeneous group of
grammnegative bacterias.
Their are named like that because of its habitual
localization as saprophytes in the digestive tract, but
it is about ubiquitous germs that may be found in
the ground, water and vegetation.
Microbiological characteristics of enterobacterias
• Are aerobic non-spore that can grow anaerobically
(facultative anaerobes) • Reduce nitrate to nitrite (with some
exceptions) • No liquified alginate • To ferment glucose with or without acid
gas production • They are oxidase-negative, except
Plesiomonas• produce catalase • No growth are favored by the presence of
NaCl• Most are motile (peritrichous flagella) • No spore-forming
Carbapenemase
• Are enzymes of the beta lactamase family that due they are produced by
bacteria, they give a very significative clinical resistance to carbapenem
antibiotics like (Imipenem,Meropenem, Doripenem,Ertapenem)
Carbapenem-resistantenterobacteria
• CRE, which stands for carbapenem-resistant Enterobacteriaceae, are
a family of germs that are difficult to treat because they have high
levels of resistance to antibiotics. Klebsiella species and E. coli are
examples of Enterobacteriaceae, a normal part of the human gut
bacteria, that can become carbapenem-resistant
Healthy people usually do not get CRE infections – they
usually happen to patients in hospitals, nursing homes, and
other healthcare settings. Patients whose care requires
devices like ventilators (breathing machines), urinary
(bladder) catheters, or intravenous (vein) catheters, and
patients who are taking long courses of certain antibiotics
are most at risk for CRE infections.
CRE are sometimes known as KPC (Klebsiella pneumoniae
carbapenemase) and NDM (New Delhi Metallo-beta-lactamase).
KPC and NDM are enzymes that break down carbapenems and
make them ineffective.
Some CRE bacteria havebecome resistant to mostavailable antibiotics.Infections with these germsare very difficult to treat,and can be deadly—onereport cites they cancontribute to death in up to50% of patients whobecome infected
Main Objective
• Investigate the clinical characteristics and treatment
outcomes of blood stream infections due to
carbapenem-resistant enterobacteriaceae that are
associated with high hospital mortality and present a
tremendous challenge to clinicians
Diseño y Recolección de datos
• Revisión de 36 pacientes diagnosticados con BSls
debidas a CRE en el hospital universitario de
Cerrahpasa entre febrero de 2011 y marzo de
2013.
• Con un estudio retrospectivo de control de
sobrevivencia de 28 días, o de 14 días y respuesta
al tratamiento en el día 7.
Materiales y métodos
• Mueller hinton II agar: es un medio para
realizar pruebas de suceptibilidad
antimicrobiana mediante el metodo de
difusion en disco, su composicion permite el
crecimiento de bacterias no exigentes
como(enterobacterias bacilos gram
negativosno fermentadores, estafilococos y
enterococos
• Incubación de muestras a 35-37º por 16-18 horas
• Resistencia de bacterias por el método E-test
• Evaluación de resultados a través de EUCAST
• HiCrome UTI Agar es un medio diferencial utilizado para la determinación de microorganismos causantes de infecciones del tracto urinario
Composición• Ingredientes Gms / Litre• Peptic digest of animal tissue 15.000• Chromogenic mixture 26.800• Agar 15.000• Final pH ( at 25°C) 6.8±0.2
API ( analytical profile index system)
• El Índice de Perfil Analítico (API) es un panel en miniatura de las pruebas bioquímicas
compilados para la identificación de los grupos de bacterias estrechamente
relacionadas. Diferentes paneles de ensayo se preparan en formas deshidratadas que
se reconstituyen en el uso mediante la adición de suspensiones bacterianas.
• Después de la incubación, los resultados positivos se puntúan como un número de
siete dígitos (perfil).
• La Identidad de la bacteria es entonces fácilmente derivada de la base de datos con el
libro de códigos perfil acumulativo pertinente o software.
• No se evaluó a través del APACHE II porque los puntajes no se
encontraban en la mayoría de los casos, entonces se utilizo el
índice de severidad de PITT
Índice de severidad
APACHE (II)utiliza 12 parametros de los 34 del Acute PhysiologyScore con la finalidad de obtener un índice que refleje el
nivel de los servicios recibidos. Asipues, para calcular el score se suman a las 12 variables fisiologicas, la puntuacion obtenida por edad y aquella obtenida por enfermedad
Respuesta
Una respuesta clínica en el día 7 se definió como parcial o total
la recuperación de los síntomas, signos y hallazgos de laboratorio
de la infección.
• Mejoria en la fiebre y conteo de glóbulos blancos en
pacientes no neutropénicos. significativo
• disminuciones en los niveles de proteína C reactiva y de
procalcitonina fueron utilizados como marcadores de la
recuperación de la sepsis.
Una respuesta microbiológica en el día 7
se definió como un negativo
Se obtuvieron resultado hemocultivo en el
día 7 (cultivos de sangre de control dentro de
las primeras 48-72 h de tratamiento).
• Esta técnica sirve para amplificar un fragmento de ADN; su utilidad es
que tras la amplificación resulta mucho más fácil identificar con una
muy alta probabilidad, virus o bacterias causantes de una
enfermedad, identificar personas (cadáveres) o hacer investigación
científica sobre el ADN amplificado.
PCR
PFGE
Es una técnica utilizada para la separación
de grandes moléculas de DNA, aplicando
una matriz en gel y electricidad que
periódicamente cambia de dirección.
RESULTADOS
No se observaron diferencias significativas entresobrevivientes y no sobrevivientes
características basales,condiciones etiologías, y fuentes de bacteriemia
La mediana de la muerte era 8 días después del primer cultivo positivo
RESULTADOS
Neoplasias hematológicas y la neutropenia prolongada fueron más frecuentes en los no sobrevivientes
la duración de la estancia en la UCI fue mayor para los sobrevivientes, pero no era estadísticamente significativo
La respuesta microbiológica y clínica en el dia 7 son dos variables independientes que determinan en un 85% la mortalidad a los 28 dias , la falta de respuesta en el dia 7 fue correlacionada con un fracaso de supervivencia
3 ptes
X en el dia 15 = sepsis
X 1inmundeprimido por anemia aplasica
Ptes sobrevivieron fueron
tratados con ≠ combinaciones
aminoglucosidos
colistina
carbapenm
tigeciclina
cefalosporinas
Dosis combinada > supervivencia triples75% vs Dobles38%
PFGE CKP
Los primeros 4 casos fueron iguales, o sea todos provenientes de la misma cepa
Se aislaron 15 diferentes tipos de CKP y se evaluaron en los criterios de indistinguibles, muy relacionado, posiblemente relacionado o diferente
Los nueve restantes no se relacionaban con los primeros 6, sin embargo todos contenían las carbapenemasas tipo OXA-48
El perfil de DNA para los primeros 6 tipos de CKP aislada= recolectados entre febrero de 2011 y marzo de 2013
DISCUSSION
AUTHORS PHRASE YES NO
Nguyen et al “microbiological eradication and clinical improvement on day 7 were found to be two major indicators of 28-day survival”consistent with the study.
X
Qureshi et al “reported that the most common successful combination for treating Klebsiellapneumoniae carbapenemase (KPC) infections is colistin with either tigecycline or a carbapenem.”
X
Tumbarello et al. “demonstrated that a triple-drug regimenincluding tigecycline, colistin, plus a carbapenem, was independently associatedwith improved sur-vival in KPC infections.
X
Borer et al. “In a series of CRKp BSIs (n = 32) reported crude and attributable mortality rates The overall hospital mortality of 71.9% and 28-day attributable mortality of 50% .”
X
Personal conclusions
The ICU stay was not related to a higher probability of
survival although in the study coincide
the use of colistin doses combined (double or triple) increases
survival.
Personal conclusions
It is a topic which must delve deeper to get clear dose and the drugs we
use to this infection.
knowing the clinical and molecular features of bacterial infections is very
important to development of an appropriate treatment, because these
microorganisms are constantly mutating and becoming resistant to
different antibiotics
Bibliografía
• http://www.meiga.info/escalas/apacheii.pdf• http://www.microbelibrary.org/library/laboratory-test/2878-bacterial-
identification-by-the-analytical-profile-indexsystem-analytical-profile-index-e20-for-enterobacteriaceae
• http://www.eucast.org/resistance_mechanisms/• http://proantibioticos.com/uso-de-antibioticos-2/tratamiento-
empirico/evaluacion-de-la-gravedad-de-las-infecciones/• http://www.biomerieux-culturemedia.com/product/42-mueller-hinton-e-agar-
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