section cytologie (membranes) automne 2009 professeur: marc pouliot
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Biologie Cellulaire (BIO-1900). Section CYTOLOGIE (membranes) Automne 2009 Professeur: Marc Pouliot. Biologie Cellulaire. 1. Les membranes 2. La surface cellulaire 3. Les mitochondries 4. Le réticulum endoplasmique 5. L’appareil de Golgi-exocytose 6. Les lysosomes-endocytose. - PowerPoint PPT PresentationTRANSCRIPT
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Section CYTOLOGIE (membranes)
Automne 2009
Professeur: Marc Pouliot
Biologie Cellulaire (BIO-1900)
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1. Les membranes2. La surface cellulaire3. Les mitochondries4. Le réticulum endoplasmique5. L’appareil de Golgi-exocytose6. Les lysosomes-endocytose
Biologie Cellulaire
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Marc PouliotCentre de recherche en
Rhumatologie etImmunologie du CHUL
Bureau T1-49tel: 525-4444 poste 46105
Courriel: [email protected]
Powerpoints: http://www.marcpouliot.crchul.ulaval.ca/enseignement/index.html
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Volumes recommandés:
-GANONG, Review of Medical Physiology, Lange, 20th ed,
2001.
-GANONG, Traduction française disponible (2002) de la
19ième édition.
-GUYTON, Textbook of Medical Physiology, W.B. Saunders,
10th edition, 2000.
-GUYTON, Traduction française disponible de la 8e éd.
-LODISH, BERK, MATSUDAIRA, KAISER, KRIEGER,
SCOTT, ZIPURSKY, DARNELL, Molecular Cell Biology, H.H.
Freeman and Company, 5th edition, 2003.
http://www.whfreeman.com/lodish/
(La 3e éd. (1995) est disponible en français)
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Autres volumes de référence:-ALBERTS, JOHNSON, LEWIS, RAFF, ROBERTS, WALTER, Molecular Biology of the Cell, Garland Science, 4e éd, 2002. -KARP, Cell and molecular biology. Concepts and experiments. John Wiley & Sons, Inc., New York, 3e éd. Update 2003-LEWIN, Genes VIII. Pearson Prentice Hall. Upper Saddle River, 2004-WATSON, BAKER, BELL, GANN, LEVINE, LOSICK, Molecular Biology of the Gene. Pearson Benjamin Cummings-Cold Spring Harbor Laboratory Press, San Francisco, 5e éd., 2004
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Objectifs généraux du cours:
1. Décrire la composition, la structure de chaque organite.
2. Mettre en évidence les relations entre la composition,la structure et les fonctions de ces organites.
3. Analyser les relations métaboliques entre les organites.
4. Montrer comment la connaissance de la structure, composition et fonctionnement de la cellule peut aider la recherche contre les pathologies.
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Objectifs particuliers:
Chapitre 1 Les membranes
1. Décrire la composition et la structure des membranes de eucaryotes,en particulier celle de la membrane plasmique.
2. Préciser les principales fonctions physiologiques de la membrane plasmique.
3. Décrire le mode d’isolation de la membrane plasmique.
4. Décrire la structure moléculaire des principaux composants de lamembrane plasmique (phospholipides, cholestérol, protéines) et leurspropriétés de solubilité dans l’eau.
5. Décrire l’agencement des composants dans le modèle de la mosaïque fluide, la nature des interactions et leur rôle dans la fluidité des membranes.
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Objectifs particuliers (suite):
6. Saisir la notion d’asymétrie des membranes et de décrire la composition des surfaces externes et internes de la membrane
7. Décrire la structure générale d’un récepteur hormonal particulièrementbien caractérisé, le récepteur b2-adrénergique;d’expliquer comment ce récepteur (comme bien d’autres) est solidement lié à la bicouche lipidique;d’expliquer comment les agonistes et antagonistes agissent sur ce récepteur.
8. De décrire le métabolisme de l’acide arachidonique et son importance dans l’inflammation
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Procaryotes
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Eucaryotes
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Fonctions de la membrane plasmique
•La compartimentation (séparation de l’extérieur et l’intérieurde la cellule).
•Les échanges d’information avec d’autres cellules(récepteurs hormonaux, jonctions gap).
•La régulation du transport des ions, protéines, sucres graisses, etc..
•Les mouvements cellulaires (pseudopodes, endocytose-exocytose).
•Les phénomèmes de reconnaissance (antigène de surface)
•La régulation du métabolisme (transduction intracellulairedes signaux extracellulaires)
•Procure un site pour les réactions chimiques ne pouvantpas se produire dans un environnement aqueux
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• Lipides (phospholipides et cholestérol) (~43%)
• Protéines (récepteurs, transporteurs, enzymes) (~49%)
• Glucides (glycoprotéines ou glycophospholipides) (~8%)
Forment le squelette des membranesPas de cholestérol chez les procaryotes
Attachés plus ou moins fortement aux phospholipides (liaisons ioniques, hydrophobes, ponts hydrogène etc.)
Composition des membranes
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Phospholipides
CholestérolGlycophospho-lipide
Glycoprotéine
Protéines intégrées ou intrinsèques
Protéineextrinsèque
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Dû à leur nature amphipathique, les phospholipides s’assemblent spontanément pour former des bicouches fermées
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Structure de la bicouche lipidique
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Structure des phospholipides
Glycérol Acides gras Tête polaire
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Structure des phospholipides
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Structure des triglycérides
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- H2O
Groupes polairesou chargés
CH2 OH HOOC- (CH2 )n-CH3
CH2 OH HOOC- (CH2 )n-CH3
CH2 OH HOOC- (CH2 )n-CH3
Glycérol Acides gras
Les triglycérides sont insolubles dans l’eau
Les phospholipides sont solubles dans l’eau
O- CHOLINE- CHOLINE- ETHANOLAMINEETHANOLAMINE- INOSITOLINOSITOL- SERINE- SERINE
CH2 OH HOOC- (CH2 )n-CH3
CH2 OH HOOC- (CH2 )n-CH3
CH2 OH HO - P - O -
O
Structure des triglycérides(ou triacylglycérols) et des phospholipides
=
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Structure des phospholipides
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C
CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH3
CH2
O
CH CH
O
C
CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH
CH
CH2CH2
CH2CH2CH2
CH3
O
P
OO
O O
O
CH2CH2
N (CH)+
3
2
CH2CH2
Chaînenon saturée
Chaîne saturée
Aci
de
pal
mit
iqu
e (1
6 C
)
Acide oléique (18 C)
COOH COOH COOH
111º
123º 123ºCIS
TRANS
La chaîne continuedu même côtépar rapport à la double liaison
Double liaison cis
La phosphatidyl choline
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La phosphatidyl choline en 3D
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TABLEAU 16-2ACIDES GRAS INSATURÉS D’IMPORTANCE PHYSIOLOGIQUE ET NUTRITIONNELLE.
Nombre d’atomesde carbone, et
nombre et positiondes doubles
liaisons
Série Nom usuel Nom chimique Sources
Acides monoénoïques (une double liaison)
16 :1;9 ω7 Palmitoléique Cis-9-Hexadécénoïque Dans presque toute s les graisses
18 :1;9 ω9 Oléique Cis-9-Octadécénoïque Il est possible que ce soit le plus répandu dans toutesles graisses naturelles
18 :1;9 ω9 Élaïdique Trans-9-Octadécénoïque Dans le s graisse s hydrogénées e t che z le s ruminants
22 :1;13 ω9 Érucique Cis-13-Docosénoïque Huile s de s grain es d e colz a e tde moutarde
24 :1;15 ω9 Nervonique Cis-13-Tétracosénoïque Dans le s cérébrosides
Acides dioénoïques (deux doubles liaison )s
18 :2;9,12 ω6 Linoléique Toutes-cis-6,9,12-Octadécadiénoique Huiles de maïs, d’arachid ,e de graines de coton, de sojae tde nombreux végétaux
Acides triénoïques (troi s doubles liaisons)
18 :3;6,9,12 ω6 γ-Linoléique Toutes-cis-6,9,12-Octadécatriénoïque Quelques végétaux : huile d’onagre, par exemple; acidegra s secondaire che z l’animal
18 :3;9,12 ,15 ω3 α-Linoléique Toutes-cis-9,12,15-Octadécatriénoïque Fréquemment trouvé avec l’acide linoléique, enparticuli er dan s l’huile de lin
Acides tétraénoÏque s (quatre doubles liaisons)
20;4;5,8,11,14 ω6 Arachidonique Toutes-cis-5,8,11,14-Eicosatétraénoïque Trouvé avec ’l acide linoléique dans les graissesanimales et dans l’huile d’arachide; constituantimportant des phospholipid es che z l’animal
Acides pentaénoïques (c inq doubles liaisons)
20;5;5,8,11,14,17 ω3 Timnodonique Toutes-cis-5,8,11,14,17-Eicosapentaénoïque Constituant important des huiles de poissons, comme’l huile d e foi e de morue, de maquerau, d e saumon
22;5;7,10,13,16,19 ω3 Clupanodonique Toutes-cis-7,10,13,16,19-Docosapentaénoïque Huile s de poissons, phospholipides cérébraux
Acides hexaénoïques (six doubles liaison )s
22;6;4,7,10,13,16,19 ω3 Cervonique Toutes-cis-4,7,10,13,16,19 -Docosahexaénoïque Huile s de poissons, phosholipide s cérébraux
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Polaire
Apolaire
OH
CH3
CH3
CHCH
3
CH2CH
2CH
2CH
CH3
CH3
Le cholestérol stabilise
les membranesLiaisons
hydrophobes
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Le cholestérol peut être synthétisé à partir de l’acétyl-CoA ou de l’acide mévalonique
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Les protéines sont faites d’acides aminés reliés entre eux par
des liaisons peptidiques CO-NH. Leur solubilité dépend de leur composition en acides aminés
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Acides aminés hydrophiles
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Acides aminés hydrophobes et “spéciaux”
Figure 3-2
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Les liens peptidiques relient les acides aminés en une chaîne linéaire
Figure 3-3
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NH3+- CH-COOH HNH - CH - CO - NH - CH - CO - NH - CH - CO ---- NH - CH - COO -
Rl
Rl
Rl
Rl
Rl
Charge + Charge -Possibilité de groupes chargés
ou polaires
• AA Nonchargés mais polaires (hydrophiles)
• AA Basiques (hydrophiles)
• AA Non polaires (hydrophobes)Gly-Val-Leu-Ileu-Pro-Phe-Met-Try-Cys
Asp-Glu (-COOH)
Asn-Gln (amides)-Ser-Thr-Tyr (-OH)
Lys-Arg (NH2)- Hist (-NH)
• AA Acides (hydrophiles)
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Les deux côtés d’une membrane sont asymétriques en termes de leur composition en lipides et en protéines
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Mosaïque et fluidité
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MP190802 43
Fluorescence recovery after photobleaching (FRAP)
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La méthode de fracture par congélation
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Récepteurs Adrénergiques
α1a α1b α1d
α1 α2
α2a α2b α2c 1 2 3
Gq/11 Gi Gs
Stimule l’adenylate cyclaseInhibe l’adenylate cyclaseAugmente [Ca2+]i
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MP190802 47
En rouge, le acides aminés communs au récepteurB2-adrénergique humain
Le récepteur B1 adrénergique humain
M G A G V L V L G A S E P G N L S S A
AP S A P V L L R A A T A A G D P L PE S A P P L L S A P
S
P
E
PL
S
Q
Q
W
TA
G M GL M AL
L I VL I VL
A G NL V IV
V A I
V V IA G FT
P V VL G ML
V L DS A LA
S M I
E L WS V DT
V L CT A SV
I E TC V IL
A L D
WG
RW
E Y GS
FF
C
H2N —
Extracellular side
AK
TP
R L Q TL
T
NL
F R
V
L
A
I
T
SP
F R VQ
SLL
T
RA
AR
W W HL I PM
L F SL A SV
I A WT C VV
L G R
R A YI A SA
S V VF Y VS
P I CM A FI
V Y L
F A KV N AV
L F FL W CP
L T IG M IV
I G L
R L FF F FV
W L GA N SY
A F NI I YP
C R S
Membrane
HR
E L VP
DNT
VF
D
C
C
KP
DNY
IR
RA
ED
SE
A
K
Cytoplasmic side
PD
F R K A FQ
G
L
L
C
C
AR
R
A
A
RRRHATHGDRPRASGCLARPGPPPS
P G A A S D D D D D D V V G A T P P A R L LE
PWAGCNGGAAADSDSSLDEPCRPG
F A S E S K V — COOH
TK
LA
KQ
ER
LA
V
L
R
S
P
RRKGARGNALPATAA
AA A P R P P G P P P A P
APVPSPSPSPPRA
PG G L F R R E C S D I
K
KVQKQ
AE
RF
VR
CHO
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i2
i4
i1
Désensibilisation si phosphorylationde certains AA (seulement B1 et B2)
Noradr.
Le récepteur B2-adrénergique humain est une glycoprotéine formée de 7 domaines transmembranaires (tm1-tm7)
tm1tm2
tm3 tm4
Noradr.
La noradrénaline, l’adrénaline,les agonistes et/ou les antagonistes se lient dans une cavité formée par tm3-tm6
e1
e4e3
Liaison S-S(e2- e3)
Sites de glycosylation
Couplage avec Gs [i3(tm5-tm6)-i4]
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Le site de liaison pour l’adrénaline (et la noradrénaline) dans le récepteurb2-adrénergique se trouve dans la membrane, dans une cavité
formée par les régions transmembranaires III, IV, V and VI.
NH2
S
S
SSCOOH
HO
HO
OH
+NH2
II
III
I
VIIVI
V
IV
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