Transfus Clm Biol2000,7 Suppl 1 : 51-4 0 2000 Edltlons sclentlflques et mkdlcales Elsevler SAS Tous drolts rbservks

lmmunohkmatologie

Mise au point

Validation anulytique en immunohCmutologie

CrythrocytuireL. Mannessier , F. Roubinet 2, M. Delamaire 3, J. Chiaroni 4, A. Lejealle EFS Nerd-de-France, 2 I, rue Camille-G&in, 590 I2 L//e cedex ; EFS f)hCes-Mkdrterranbe, stie de Toulouse ; 3 EFS Bretagne, site de Rennes ; EFS Alpes-Mkdrterronke , EFS he-de-France, srte de Le Chesnoy, France

hkmolyse logie

immunologique

/ imcompatibilitk

Crythrocytaire

/ rkactifs dimmunohCmato-

Summa y Analytical validation in erythrocyte immunohematology In a transfusional or f&o-maternal context, hemolysis by incompatibility due to anti-eythrocyte antibodies (regular or irregular) remains the most frequent and most serious immunological risk in the receiver. In order to prevent this risk, a number of actions must be taken, such as the realization of the immunohematologic analyses for which the methodological practices have been legislated because of their serious clinical consequences. Several elements play a role in the reliability of the analyses and thezr results: the selection of the reagents and thezr validation in the routine technique used; the validation of reception; the controls involved in secondary preparations (e.g., blood cells reagent); and the daily internal controls. All this requires the choice of adapted controls and the management of possible anomalies. 0 2000 kditions scientifiques et mtfdicales Elsevier SAS erythrocyte incompatibility / immunohematology reagents / immunological hemolysis

Quil sagisse dlun contexte transfusionnel ou fcetomaternel, le risque dhhmolyse immunologique par incompatlbilitk par anticorps anti-krythrocytaires (irrkguliers et rkguliers) prksents chez le receveur reste le plus frequent et le plus grave. La prkvention de ce risque repose sur un certain nombre dactions comme la rkalisation des analyses immunohkmatologiques dont les modalit& pratiques sont lkgifkrees [l-51 en raison des leurs consbquences cliniques graves. Plusieurs Uments interviennent dans la fiabilit6 des analyses et de leurs rksultats. Ce sont la selection des rkactifs et leur validation dans la technique utiliske en routine, les validations A rkception,

les contrales des res (hematies-test tidiens internes tkmoins adapt& malies. Principes

bventuelles prhparations secondaipar exemple) et les contr8les quo(CQI). Ceci nkcessite le choix de et la gestion des kventuelles ano-

g6nkraux

Les rkactifs utilisks doivent @tre conformes aux caractkristiques et normes dhfinies par la rkglementation en vigueur 16, 71. Jusquen 2003 coexisteront deux rkglementations recevables : une reglementation nationale dkoulant du d&ret davril 1996

52s

L Mannessler

et al

imposant lenregistrement par lAgence franqaise de securite sanitaire des produits de Sante (Afssaps) et le contrble de conformite effect& par le Centre national de reference pour les groupes sangums (CNRGS) qui, en cas de conformite, delivrera un certificat comportant un numero ; et une reglementation europeenne emanant de la directive 98/79. Les reactifs doivent etre conserves et utilises selon les conditions precomsees par le producteur (dans le cas contraire, un dossier de validation dolt @treconstitue) et ne jamais @treutilises au-dela de leur date de peremption. A chaque reception et quotidiennement, lactivite des reactifs doit etre contrblee a laide dune gamme dechantillons temoins connus, testes dans les conditions techniques de routme. La realisation des analyses peut @tre manuelle mais lautomation avec identification positive de lechantillon, lecture et transfert automatise des resultats dans le module informatique du laboratone est vivement recommandee. Cela necessite la qualification, la validation et la maintenance de lautomate (et du logiciel informatique) ainsi que la vahdation du couple automate-reactifs.

consignee dans un document qui est archive avec le resultat du controle correspondant. Le biologiste dolt pouvoir justifier que les resultats obtenus grace a lutilisation des reactifs ainsi prepares sont de m@me qualm? que ceux fournis par les reactifs de fabrication mdustrielle quand 11sexistent. B - cf Dans le cas dautomates permettant deffectuer des analyses autres que celles prevues par le fabricant ou utihsant des reactifs non fournis par celui-ci, toute extension dutilisation non validee par le fournisseur engage la responsabihte du biologiste j)S&urns-testet antiglobuline dons des supports de &action

(liquide ou incorporh : cartes de filtration

et

microplaque)

La validation interne comporte, conformement a la legislation en vigueur 161, letude des parametres obligatoires que sont lintensite, le titre et le score. En cas dutilisation differente de celle mentionnee sur la notice du fabricant, une etude de la specificite est a realiser. Une etude complementaire de la stabilite doit par ailleurs @trepratiquee en cas de dilution du reactif.Hkmaties-test

Les contrbles a reception ont pour but de verifier leur performance par rapport aux normes officielles en vigueur [6] et au certificat de conformite du CNRGS. 11spermettent ainsi de detecter des anomalies eventuellement likes a un erreur de fabrication ou de repartition, de mauvaises conditions de transport ou de stockage, etc. Par ailleurs, Iarrete du 26 novembre 1999 relatif a la bonne execution des analyses de biologic medicale [B] mentionne que : -