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REVISTA COLOMBIANA DE QUÍMICA, VOLUMEN 40, nro. 2 DE 2011

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Rev. Colomb. Quím., 2011, 40(2): 185-200

1 DepartamentodeQuímica,FacultaddeCiencias.UniversidadNacionaldeColombia,sedeBogotá,carrera3045-03,BogotáD.C.,Colombia.

2 Grupo Frutales Promisorios de la Amazonia. Instituto Amazónico de Investigaciones Científicas Sinchi. Cl. 20 5-44 Bogotá.

3 [email protected]

DETERMINACIÓN DE ALGUNOS METABOLITOS SECUNDARIOS EN TRES MORFOTIPOS DE COCONA (Solanum sessiliflorum Dunal)

DETERMINATION OF SOME SECONDARY METABOLITES IN THREE ETHNOVARIETIES OF COCONA (Solanum sessiliflorum Dunal)

DETERMINAÇÃO DE ALGUNS METABOLITOS SECUNDÁRIOS EM TRÊS MORFOTIPOS DE CUBIU (Solanum sessiliflorum Dunal)

Juliana E. C. Cardona J.1, 2, Luis E. Cuca S.1,3, Jaime A. Barrera G.2

Recibido: 03/06/11 – Aceptado: 22/06/11

AbstRAct

Presence and structure (by using spec-troscopicandchromatographic)ofsomesecondary metabolites in three coconamorphotypes (Solanum sessiliflorumDunal, Solanaceae) grown in the Gua-viaredepartmentwereestablished.Theycontainp-coumaricacid,p-hydroxidihi-drocumaricacid,naringenin,methylsa-licylate,fattyacidsandtheirmethylandethyl esters. Some of these compoundsare accumulated only in the fruit exo-carp.Comparisonofvolatilemetabolitesallowedtoestablishchemicaldifferencesbetweenthethreefruitmorphotypes.

Key words: Solanum sessiliforum,Solanaceae,amazonianfruits.

Resumen

Sedeterminólapresenciaylaestructura(medianteelusodetécnicasespectroscó-picas y cromatográficas) de algunos me-tabolitossecundariosen tresmorfotiposdel frutodecocona (Solanum sessiliflo-rumDunal;Solanaceae)cultivadoseneldepartamento del Guaviare. Se destacólapresenciadeácidop-cumárico,ácidop-hidroxidihidrocumárico, naringenina,salicilato de metilo, hidrocarburos decadena larga, ácidos grasos y sus éste-resmetílicosyetílicos.Algunosdeestoscompuestosseacumulanúnicamenteenelepicarpiodelafruta.Lacomparaciónde metabolitos volátiles permitió esta-blecerdiferenciasquímicasentrelostresmorfotiposdelafruta.

Palabras clave: Solanum sessilifo-rum,Solanaceae,frutosamazónicos.


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Resumo

Determinou-se a presença e a estrutura(usando espectroscópicos e cromatográfi-cos)dealgunsmetabolitossecundáriosemtrêsmorfotiposdecocona(Solanum sessi-liflorumDunal,Solanaceae)cultivadosnodepartamento de Guaviare. Eles contémácidop-cumárico,ácidop-hidroxidihidro-cumárico,naringenina,salicilatodemeti-la,ácidosgraxoseseusésteresmetílicose etílicos.Alguns desses compostos sãoacumuladosapenasnoexocarpodofruto.Comparação de metabolitos voláteis nospermitiu estabelecer diferenças químicasentreostrêsmorfotiposdafruta.

Palavras-chave: Solanum sessiliforum Dunal,Solanaceae,frutasamazônicas.

IntRoDuccIÓn

Lacocona(Solanum sessiliflorumDunal;Solanaceae) es una especie nativa deltrapecioamazónico.Sus frutos,al igualque otros del género Solanum, exhibenuna diversidad morfológica que guardacorrespondencia con la variabilidad enlos cambios de hábitat y ecología, asícomo con el proceso de domesticaciónde la especie (1); sin embargo, poco seconocesobresucomposiciónquímicaylasimplicacionesquesobreestatienelamorfologíadelfruto.

Elnombrevulgardellafrutaescoco-na,topiroocubiu.Sereconocecomounaespecieendémicacultivadapornativosycolonos en los arreglos agroforestales ychagrasensussitiosdeasentamiento(2-3), lo cual la constituyó en un alimentotradicionaldeestazona.Esreconocidaporsurefrescantesaboryporlaspropiedades

medicinales que etnobotánicamente seleatribuyen, lascualesvandesdesuusotópicopara sanarquemadurasy eliminaralgunosparásitoshastasuingestiónparaelcontroldelosnivelesdeglucosa,coleste-rol y ácido úrico en la sangre (3-6).

Losestudiosrealizadossobrelaquí-micadelaespecieselimitanalreportedemetabolitosvolátilesynodiferencianlasvariaciones en la composición químicaentrelosdiferentesmorfotiposdelafruta(7),locualseconvierteenunobstáculoparalaadopcióndedescicionestécnicasen su aprovechamiento integral. Esteproblema podría resolverse estudiandolacomplejidaddelpatróndemetabolitossecundariosenlostresmorfotiposdelafruta,yaqueestossonconsideradosca-racteresadaptativosquedependendirec-tamentedediversosfactoresbiológicosyse han ido diversificando durante la evo-luciónylaselecciónnatural(8-10).

En este contexto el presente estudiopretendió fundamentalmente diferenciartresvariedadesdecocona(Solanum ses-siliflorum Dunal)cultivadasenelmuni-cipiodeSanJosédelGuaviare(Guaviare–Colombia), denominadas morfotiposovalado, redondo pequeño y redondogrande, mediante la determinación dealgunos de los metabolitos secundariospresentesen frutosmadurosde laespe-cie en cuestión. La finalidad es contribuir al estudio fitoquímico de la especie para promoverenfruticultoresyprocesadoresdefrutasdelaregiónamazónicacolom-biana laadopcióndeestrategiasparaelaprovechamiento sostenible de las pro-piedades intrínsecas de la cocona en elsectoragroindustrial.


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MATERIALES Y MÉTODOS

Instrumentos

Los espectros ultravioleta fueron ob-tenidos en un espectrofotómetro Bec-kman® Coulter DU-640. Los análisis de cromatografía de gases acoplada aespectrometría de masas fueron reali-zadosenuncromatógrafodegases(HP7890A), equipado con un detector demasas selectivo (MSD HP 5975C), in-yector split/splitless (relación 1:30) ylibrería de espectros de masas NIST®0,8.Losespectrosdemasas(EI,70eV)yloscromatogramasreconstruidosfue-ron obtenidos por escaneo automáticoenel rangodemasasm/z40-350a3,5scans s-1.Paraelcasode losmetaboli-tos fijos aislados, la separación se lle-vóacaboenunacolumnacapilarDB-1MS (60 m x 250 µm x 0,25 µm), usando comogasdearrastreHeconunacabezade presión de 6,64 psi y una velocidad de flujo lineal de 0,7 mL min-1.Latem-peratura en el horno del cromatógrafodegases fue105 ºC (1min).Las tem-peraturasde la cámarade ionizaciónyla línea de transferencia fueron 150 y230 ºC respectivamente. Los espectrosdeinfrarrojodelasmezclasycompues-tosaisladosfuerontomadosenpelículasobreunaceldadeKBr,usandounes-pectrómetroShimadzu®Prestige21.Lacomparacióndelosextractosetanólicosdecadamorfotipoyladeterminacióndela presencia de los metabolitos fijos ais-ladosencadaunodeellosserealizóenuninstrumentoCLAE-DADMerck-Hi-tachi® D-7000, equipado con detectordearreglodediodosL-4500,unabom-ba inteligente L-6200A y una interfase L-6000A.

Reactivos

Seusaronenlaseparacióncromatográ-fica acetato de etilo (AcOEt), éter de petróleo (EdP), cloroformo (CHCl3),metanol (MeOH), acetona (Me2CO),ácido acético (CH3COOH)y ácido fór-mico(CHOOH)gradoanalítico.Eleta-nol (EtOH) usado en la extracción pormaceración fue grado analítico al 96%. El MeOH usado en cromatografía ins-trumental fue grado CLAE. Se empleómetanoldeuterado(CD3OD)paraladi-solucióndelamuestrapararegistrarlosespectrosRMN1H,RMN13C.

La cromatografía en capa delgada(CCD)fuellevadaacaboencromatofo-lios de gel de sílice 60 F254 de 0,3 mmde espesor. La cromatografía líquidaal vacío (CLV) se realizó usando comosoporte gel de sílice 60 HF254(5-40µm)para CCD. Las separaciones cromato-gráficas en columna (CC) se realizaron empleando gel de sílice 60 (70 - 230 mesh),Sephadex®LH-20ygeldesílice60 (230 - 400mesh)paracromatografíaen columna flash. El control de pureza se efectuóenCCD,revelandoconluzUV,vainillinaenácidofosfóricoyvaporesdeyodo(11-12).

material vegetal

Elestudiosellevóacaboenfrutospro-venientesdecultivosubicadosenlavegadelríoGuaviareenelmunicipiodeSanJosédelGuaviare(Colombia).Unejem-plar reposa en el Herbario AmazónicoColombiano con el número COAH66223. Eláreasecaracterizaporunaaltitudde214msobreelniveldelmar,una tem-peratura promedio anual de 26,0 °C, una temperatura mínima de 19,5 °C y unamáximade33,4°C.Lahumedadrelativa


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del sitio oscila entre 60 y 98% de acuerdo conlaépocadelaño,debidoalacercaníadelsitiodecultivoalrío.Lapluviosidadpromedio anual oscila de 2600 a 3100 mm.Esimportantedestacarquelaferti-lidaddelaszonasdenominadasvegasderíode la regiónamazónicay,por tanto,la cantidad de minerales disponibles enelsuelosevenafectadasporeltranspor-te de sedimentos, debido a los cambiosen el caudal del río. Fueron colectadosaproximadamente4kgde frutosmadu-ros de los morfotipos ovalado, redondopequeñoyredondogrande,a loscualesselesseparóelepicarpioyelmesocarpiocon el fin de establecer una correlación químicaentre laspartesdecadaunodelosmorfotipos.Antes de la preparacióndelosextractos,ambosorganelosfueronliofilizados y molidos.

extracción y aislamiento

Aproximadamente1kgdecadamaterialvegetalfuesometidoaextracciónporma-ceraciónusandocomodisolventeetanolal 96%. Se escogió el extracto del epicar-piodelmorfotipoovaladocomopuntodepartida para la purificación de metaboli-tos fijos usando como criterio de selec-ción el perfil cromatográfico en capa fina y el peso de cada uno de los extractos.Mediante CLV, 15 g de extracto etanó-licodelepicarpiodelmorfotipoovaladofueronsometidosa fraccionamiento.Lamuestrafueeluidacondisolventesenor-dencrecientedepolaridad:EdP,CHCl3,AcOEtyMeOH.Seobtuvieron21frac-ciones,reunidasen12deellas(F1aF12)segúnelcontrolporCCD.

Se continuó con la separación de lafracciónF4(134mg)medianteCC,usan-dounsistemadeelucióndepolaridadcre-

ciente,iniciandoconunamezclaCHCl3:MeOH:CHOOHenrelación9:1:0,03;ob-teniendo20fracciones(F4,1aF4,20),delas cuales se seleccionaron para purifica-ción las fracciones F4,6 (27 mg) y F4,9 (8 mg) según su perfil en CCD. La fracción F4,6 se separó por CC con gel de sílice 60 usando una mezcla de CHCl3:MeOH:CHOOHenrelación8:2:0,03comosiste-ma de elución; posteriormente, se purifi-cóporCCusandocomofaseestacionariaSephadexLH-20®yMeOHcomosiste-ma de elución. Así se logró purificar el compuestoC1 (3mg).La fracciónF4,9se llevó a purificación mediante CC con sílica gel 60 usando como sistema de elu-ciónunamezclaCHCl3:MeOH:CHOOHenrelación8:2:0,03;asíselogróaislarlamezcla C2 (7 mg). Se determinó la es-tructuradeloscomponentesdeC1yC2medianteelusodetécnicasespetroscópi-castalescomoRMN1H,RMN13C,CG-EM,IR,UV-Vis.

Análisis comparativo

Aproximadamente5mgdelosextractosetanólicos del epicarpio y del mesocar-pio de los morfotipos ovalado, redondopequeño y redondo grande fueron di-sueltos en 1 mL de MeOH y filtrados a través de una membrana PTFE de 0,45µmdediámetrodeporo,antesdesuaná-lisisporCLAE–DAD.LaseparaciónsellevóacaboenunacolumnaBioRad®RPX-318(4,5x250mm,5µm)medianteuna modificación del método propuesto por Gómez-Romero et al. (10), para locualseusócomosistemadeeluciónunamezcladeMeOH(A)yunasolucióndeCH3COOH al 1% (B) en agua MilliQ,conungradientedeeluciónde(B)desde100% hasta 60% (0 a 70 min) a un flujo de1mLmin-1.Ladetecciónserealizóen


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el rango entre 210 y 700 nm. Con el fin de determinareltiempoderetención,fueronanalizados1mgdeC1yC2enlasmis-mas condiciones cromatográficas; de esta manera se logró establecer su presenciaencadaunodelosextractosevaluados.

Ladeterminacióndelapresenciadeotroscompuestosenlostresmorfotiposdecoconaserealizómediantemicroex-tracciónenfasesólida(MEFS)enmodo“headspace” según lametodologíapro-puesta por Fajardo-Oliveros (13). Ladetecciónde los compuestos se llevó acabo en el equipo de CG-EM, usandoparacaracterizarloslacomparaciónconbases de datos especializadas (14) delÍndicedeKovatsyelespectrodemasasobtenido.Laseparacióndeloscompues-tosextraídos seprodujoenunacolum-na capilar RTX-5MS (60 m x 250 µm x 0,25µm),usandocomogasdearrastreHe, con una cabeza de presión de 6,88 psi y una velocidad de flujo lineal de 0,5 mLmin-1.Latemperaturafueprograma-dadesde50ºC(1min)hasta220ºC(0min) a una velocidad de calentamientode 4 ºC min-1, seguido por un calenta-mientohasta 280 ºC (4min) a unave-locidaddecalentamientode8ºCmin-1.Para el análisis estadísticode losdatosobtenidosseutilizóelsoftwareSPSS®,versión19deIBM®.

ResuLtADos Y DIscusIÓn

La sustancia C1 fue determinada como4´,5,7-trihidroxiflavanona, comúnmente conocidacomonaringenina(Figura1).

Ladeterminaciónestructuralsehizoporcomparacióndelosdatosespectros-cópicos obtenidos (RMN 1H, RMN 13C(Tabla 1), DEPT 135, COSY, HMBC,HMQC, CG-EM, IR, UV-Vis) con losreportados en la literatura (15-16). Este compuesto fenólico ha sido aislado dediversasespeciesdeangioespermas(17),particularmentedelepicarpiodediversasfrutas,entreestaseltomate(Solanaceae)(18-19)yeltamarindo(Fabaceae)(20).

O

O H

O H O

OH

Figura 1. C1 –naringenina (configuración re-lativa).

Teniendo en cuenta las integracio-nesobtenidasenRMN1H,laduplicidadde señales en el espectro de RMN 13Cy el perfil cromatográfico en CG-EM y CLAE-DADdeC2sedeterminóqueesuna mezcla compuesta principalmentepordosderivadosdelácidocinámicopro-venientesdelarutametabólicadelácidoshikímico:ácidop-cumárico(a)yácidop-hidroxidihidrocumárico(b)(Figura2),en una relación 48:52, respectivamente(calculadocomolarelaciónentrelainte-gracióndelasseñalesδ7,40yδ7,05).


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tabla 1. DatosespectroscópicosdeRMN(400MHzCD3OD)deC1aisladadelepicarpiodelmorfotipoovaladodecocona

c δH δc DePt 135 Hmbc δH* δc

*

2 5,34(ddJ2,8Hz12,8Hz) 79.5 CH 7,32;3,12 5,42 80,5

3 Ha3,12(ddJ 12,8Hz17,1Hz) 44,1 CH2 3,17 44,0

3 Hb2,70(ddJ 2,9Hz17,1Hz) 44,1 CH2 2,71 44,0

4 197,0 C 2,69;3,12 197,8

5 165,3 C 165,8

6 5,89(dJ2,0Hz) 97,1 CH 5,95 97,4

7 168,4 C 167,9

8 5,87(dJ2,0Hz) 96,2 CH 5,95 96,4

9 164,9 C 164,9

10 103,3 C 5,89;5,87 103,7

1´ 131,4 C 6,82 131,3

2´ y 6´ 7,32(d2HJ8,5Hz) 129,1 CH 5,34 7,38 129,6

3´ y 5´ 6,82 (d 2H J 8,5Hz) 116,4 CH 6,89 116,7

4´ 159,1 C 7,32; 6,82 159,2

*Reportadosenlaliteratura(15)

Figura 2.C2a)ácidop-cumárico;b)ácidop-hidroxidihidrocumárico.

O

OH

OH

O

OH

OH(a) (b)

Sudeterminaciónestructuralselogrópor comparación con la literatura (21,22) de los datos espectroscópicos obte-nidos(Tabla2)yelanálisisdelamezclapor CG-EM, lo que permitió establecersu peso molecular (164 uma para el ácido p-cumárico y 166 uma para el ácido p-hi-

droxidihidrocumárico).Losácidosp-cu-márico y p-hidroxidihidrocumárico hansidoaisladospreviamenteapartirdedi-versasespeciesvegetalesnosoloenfor-ma libre, sino también esterificados con otroscompuestos;porejemplo,azúcares(glicosidados)(17,23).


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Figura 3. CompuestosfenólicosdeterminadosmedianteMEFS:salicilatodemetilod),cis-metilisoeugenole),vainillinaf),trans-metilisoeugenolg)y2-hidroxi-benzoatodebenciloh).

O

OO HO

O

O

O

O

O H

O

O

OOH

(d) (e) (f)

(h)(g)

tabla 2.DatosespectroscópicosdeRMN(400MHzCD3OD)delamezclaC2aisladadelepicar-piodelmorfotipoovaladodecocona

compuesto c δH δc DePt 135

Hmbc δH* δc

*

c2(a) 1 127,4 C 6,77; 6,38

2 y 6 7,40(d2HJ=8.5) 130,6 CH 7,44 7,42

3y5 6,77 (d 2H J=8.5) 116,8 CH 6,77 6,834 160,3 C 7,40

7 7,44(d1H.J=15.8)

141,8 CH 7,40 7,62

8 6,38(d 1H J=15.7) 118,4 CH 6,30

9 169,2 C 6,38; 7,44

c2(b) 1 131,2 C 7,05; 6,72; 3,45

133,6

2 y 6 7,05(d2HJ=8,4) 130,8 CH 2,75;3,45 7,03 130,1

3y5 6,72 (d 2H J=8,4) 116,2 CH 6,72; 7,05 6,70 116,24 157,0 C 7,05 156,1

7 3,45(t2HJ=7,4) 31,2 CH2 2,79 31,7

8 2,75(t2HJ=7,4) 35,9 CH2 2,48 38,6

9 170,1 C 3,45 179,1

*Reportadosenlaliteratura(21.22)


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El estudio fitoquímico comparativo llevado a cabo mediante CLAE-DAD(Figuras4y5),realizadoparaestablecerlapresenciaoausenciadelosmetabolitosaisladosenelepicarpioyelmesocarpiodecadaunodelosmorfotiposevaluados,revelólaexistenciadeácidop –cumárico(tr=33.8min),ácidop-hidroxidihidrocu-márico (tr=35.4min)ynaringenina (tr= 44.2 min) en el epicarpio de los tresmorfotipos evaluados. El área de picodecadaunodeloscompuestosaisladosdifiere entre los extractos etanólicos del epicarpiodecadaunodetresmorfotipos,locualseconsideraríaunindiciodequela concentración de estos compuestosenel frutopuedeserunseruncarácterdiferenciador entre los tres morfotipos.Ninguno de los metabolitos aislados seencuentraenlosextractosobtenidosdelmesocarpio.Diversosestudioshancoin-cididoenquelacantidaddecompuestosfenólicos, entre estos los flavonoides, se encuentraenmayorconcentraciónenelepicarpiodelafruta(19).

La comparación química realiza-da mediante CG-EM permitió concluirque el salicilato de metilo (Figura 6) es elcompuestomásabundanteenlostresmorfotiposalusarcomométododeex-tracciónMEFS.Supresenciasedestacajuntoaladetolueno,benzoatodeetilo,octanoato de etilo, butirato de (E)-2-hexeniloybutiratodehexilo,reportadospreviamenteenfrutosdelafamiliaSola-naceae(7,13,24-27).

Es de notar que mientras en el perfil cromatográfico obtenido para morfotipo redondopequeñosoloselogródetermi-nar la presencia de salicilato de metilo(Figura 3d) como compuesto fenólico,el morfotipo redondo grande mostróunavariedadmásampliadeestetipodecompuestos,entre loscualessecuentanvainillina(Figura3f),cis-metilisoeuge-nol (Figura 3e), trans-metil isoeugenol(Figura3g)y2-hidroxi-benzoatodeben-cilo(Figura3h).Esteúltimocompuestotambiénfueencontradoenelmorfotipoovalado.

Encuantoalapresenciadehidrocar-buros de cadena larga y sus derivadosoxigenadosesposibledestacarqueseen-cuentranprincipalmenteenelmorfotipoovalado,comosepuedeobservarenlosperfiles cromatográficos (Figura 6, que exhiben tiempos de retención mayoresde30min).Supresenciaestáasociadaala cutina en el fruto, cuya composiciónestádirectamenterelacionadaporfacto-rescomolaespecie,elórganoyelam-biente(28).

Así, la presencia de mayor cantidadde compuestos fenólicos volátiles en elmorfotiporedondograndeydecompues-toshidrocarbonadosde cadena larga enel morfotipo ovalado (Tabla 3) podríanconsiderarse indicios de diferenciaciónquímica entre ellos, a pesar de que laabundancia relativa de estos compues-tosnoseatanrelevantecomoladeotroscompuestosvolátilesdetectados.


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tabla 3.ConcentraciónrelativadelosmetabolitossecundariosdeterminadosporCG-EMenlosmorfotiposovalado,redondopequeñoyredondograndedecocona.

Asignación probable IK* IK LIt**concentración relativa (%)

ovalado Redondopequeño

Redondogrande

propionatodeetilo 717 714 2,8tolueno 761 762 1,0 3,3 1,6p-cimeno 1019 1026 1,2 6,0silvestreno 1024 1026 0,7 2,8eucaliptol 1029 1030 1,8χterpineno 1058 1059 0,5(Z)-3-Hexenilpropionato 1095 1100 0,4 1,8linalool 1098 1098 1,2benzoatodeetilo 1183 1174 0,4 1,5 5,2butiratode(E)-2-hexenilo 1191 1193 1,6 3,8 4,0butiratodehexilo 1196 1194 1,8 3,0 8,3octanoatodeetilo 1201 1202 1,0 2,7 11,0salicilatodemetilo 1212 1206 12,0 10,8 36,7tridecano 1291 1291 3,3decanoatodeetilo 1403 1397 1,2 3,3cis-metil-isoegenol 1418 1420 0,3vainillina 1421 1420 0,33-metiltetradecano 1462 1462 0,72-metiltetradecano 1469 1467 0,4pentadecano 1499 1500 0,4trans-metil-isoeugenol 1505 1500 0,64-metil-pentadecano 1552 1557 0,4dodecanoatodeetilo 1584 1593 0,13-metilhexadecano 1673 1973 2,18-heptadecano 1681 1679 0,6(E)-2-heptdadeceno 1710 1708 2,2(Z)-2-heptadeceno 1717 1721 0,47-metilheptadecano 1746 1745 4,56-metil heptadecano 1750 1747 1,02-hidroxibenzoatodebencilo 1824 1821 0,3 0,33,17-dimetilheptadecano 1827 1829 0,2octodecanoatodeisopentilo 1842 1846 1,73,4-dimetilheptadecano 1847 1851 0,22-metiloctadecano 1869 1864 2,0ácidopentadecanoico 1873 1878 0,53-metiloctadecano 1878 1873 0,54-metilnonadecano 1961 1964 0,92-metilnonadecano 1964 1966 0,3eicosano 1994 2000 0,22-metileicosano 2067 2064 4,73-metileicosano 2070 2065 0,4*ÍndicedeKovatscalculado.**ÍndicedeKovatsreportadoparaDB5(14)


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Finalmente,paracorrelacionarlapre-sencia/ausencia de los metabolitos vo-látiles determinados por MEFS con losdiferentes morfotipos objeto de estudio,se realizó un análisis estadístico multi-variadode losdatosobtenidosmedianteelmétododeconglomeradosjerárquicos,utilizando como parámetro la distanciaeuclidiana al cuadrado. El dendogramaobtenido(Figura7)muestraque losvo-

látilesextraídosporlatécnicadeMEFSde los morfotipos redondo pequeño yredondo grande exhiben gran similitud,mientrasqueelmorfotipoovaladosedi-ferencia significativamente de los demás grupos. Este comportamiento se debe aqueelmorfotipoovaladoexpresamayorcontenidodemetabolitosy,portanto,ma-yorcomplejidadquímicaencomparaciónconlosotrosdosmorfotipos.

Figura 7.Dendogramaobtenidoparaelanálisisdeconglomeradosjerárquicos.Elejexmuestraladistanciaeuclidianaalcuadradoyelejeylosmorfotiposovalado(1),redondopequeño(2)yredondogrande(3).

0 5 10 15 20 25

Combinación de conglomerados de distancia re-escalados

2

3

1

concLusIones

Se lograron aislar dos ácidos cinámicos(ácidop-cumáricoyácidop-hidroxidihi-drocumárico) y una flavanona (naringeni-na)del epicarpiodelmorfotipoovalado,determinados mediante técnicas espec-troscópicas de IR, RMN uni y bidimen-sional, UV-Vis y EM. Se determinó lapresencia de los compuestos aislados enel epicarpio de los morfotipos redondopequeñoyredondograndemediantecom-paración por CLAE-DAD, confirmando que la acumulación de flavonoides ocurre principalmenteenelepicarpiodelafruta.

Mediante la técnicadeMEFSse lo-gródeterminarlapresenciadesalicilatodemetiloytoluenoenfrutosdelostresmorfotipos,loscualesposiblementesoncaracterísticosdesuaroma.Seencontrómayor diversidad de metabolitos fenó-licos volátiles en el morfotipo redondogrande (salicilato de metilo, cis-metilisoeugenol,vainillina,trans-metilisoeu-genol y 2-hidroxi-benzoato de bencilo)y de hidrocarburos alifáticos de cadenalargaenelovalado,locualseconsideraun indicio claro de diferenciación quí-mica entre morfotipos. La comparaciónde los perfiles cromatográficos obtenidos


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para los tres morfotipos muestra que elmorfotipo ovalado exhibe mayor com-plejidadquímicaencuantoametabolitosfijos y volátiles.

AGRADecImIentos

Al grupo de Productos NaturalesVege-tales del Departamento de Química dela Universidad Nacional de Colombia(sede Bogotá). Al Instituto Amazónicode Investigaciones Científicas Sinchi por la financiación del proyecto. Especial-menteaWillmanDelgado,M.Sc.,DorisGutiérrez, M.Sc., Mónica Ávila, M.Sc.,MarcelaCarrillo,M.Sc.yMaríaSoledadHernández,Ph.D.

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